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Anemia em pré-escolares e intervenção nutricional com snacks fonte de ferro / Anemia in preschoolers and nutritional intervention trial with snacks source of iron

Cardenas, Thais de Campos 14 September 2007 (has links)
Objetivos: Determinar a prevalência de anemia e investigar fatores associados a sua ocorrência em crianças de 2,5 a 6 anos de idade, em Itapetininga, São Paulo. Comparar, através de estudo de intervenção com snacks de pulmão bovino/milho/grão-de-bico ou pulmão bovino/milho, as mudanças nos parametros bioquímicos do estado nutricional em ferro. Métodos: Urn estudo transversal com amostragem por conglomerado foi conduzido em 9 creches públicas de Itapetininga. Após consentimento informado, mães/pais preencheram questionário a respeito de características demográficas e sócio-econômicas. A concentração de hemoglobina foi determinada em Hemocue através de sangue capilar. A relação entre a presença de anemia e variáveis independentes foi analisada por regressão. A dieta das crianças foi avaliada através do recordatário de 24 horas e do cardápio semanal da creche. A concentração de hemoglobina foi determinada em Hemocue e contador automático, para comparação entre métodos, em amostras de sangue de 20% da população. Durante a fase de rastreamento, crianças anêmicas, ferro deficientes e não anêmicas foram selecionadas para participar do estudo de intervenção com snacks fortificados com ferro. As crianças foram examinadas no início e ao final do estudo (cerca de 100 dias) por meio de coleta de sangue venoso. Sessenta e sete pré-escolares foram aleatorizados entre os grupos e receberam 3 pacotes com 30 g de snacks por semana. Para o diagnóstico da criança anêmica, ferro-deficiente e não anêmica foram considerados a concentração de hemoglobina, saturação da transferrina, volume corpuscular médio e ferritina sérica. Resultados: 0 estudo de prevalência somou 576 crianças. A prevalência de anemia foi de 13,02% (IC 95% 9,77 -- 16,33). Foi observada relação entre idade da criança e família numerosa e a anemia. Para crianças anêmicas não houve diferença na concentração de hemoglobina medida por sangue venoso ou capilar. Uma significativa melhora foi observada em alguns parâmetros bioquímicos: hemoglobina corpuscular média, hemácias e concentraçãdo de hemoglobina, independente do snack consumido e do diagnóstico inicial. A concentração de hemoglobina dessas crianças aumentou, em media, 0,44 g/dL. 0 consumo de ferro se manteve inalterado antes e após o ensaio e foi semelhante para ambos os grupos. Conclusão: Os achados deste estudo mostram uma baixa prevalência de anemia na população estudada. 0 consumo dos snacks proporcionou aumento na concentração de hemoglobina. As vantagens e limitações nos parâmetros bioquímicos devem ser consideradas para a escolha do método apropriado para cada situação ou objetivo. / Objectives: to determine the prevalence of anemia and to investigate factors associated with its occurrence in children from 2.5 to 6 years-old in Itapetininga, São Paulo, and to compare, through nutritional intervention trial with two types of snacks, with bovine lung and chickpea, changes in the biochemical parameters of nutritional iron status. Methods: A cross-sectional study with cluster sampling was conducted on nine public day care centers, in Itapetininga, being examined 576 children. After informed consent, mothers/fathers answered a questionnaire about demographic and socioeconomic characteristics. The relationship between the presence of anemia and independent variables were analyzed by regression. The diet intake of children was assessed through 24-hour recall and from the menu offered weekly in day cares. The hemoglobin concentration was determined by Hemocue (capillary blood) and automatic counter (venous blood) for comparison of methods. The observed anemic children were selected to participate in the intervention trial with iron fortified snacks. Sixty seven preschoolers were randomized between 2 groups and received 3 packages with 30 g of snacks a week. Children were examined at the beginning and at the end of trial (about 100 days) through venous blood. Hemoglobin concentration was used for diagnosis of anemia. Grade I and Grade II iron deficiency was diagnosed by transferrin saturation, mean corpuscular volume and serum ferritin. Results: The prevalence of anemia found in the population was 13.02%. It was observed relationship between age of the child and number of persons in family and the occurrence of anemia. There was no difference in the hemoglobin concentration measured by capillary or venous blood for the children anemic. A significant improvement after the trial was observed in some biochemical parameters: mean corpuscular hemoglobin concentration, red blood cells and hemoglobin concentration, regardless of the snack type consumed and the initial diagnosis. Hemoglobin concentration increased, on average, 0.44 g/dL. The iron consumption remained unchanged before and after the trial and was similar for both groups. Conclusion: The findings of this study show a low prevalence of anemia in the population studied. The consumption of snacks provided a significant increase in the hemoglobin concentration. The advantages and limitations for the use of biochemical parameters have to be considered for the choice of the appropriate method for each situation or goals.
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Emprego do extrato de raiz de Pothomorphe umbellata na prevenção das alterações precoces da fotocarcinogênese induzidas pela radiação ultravioleta B na pele de camundongos sem pêlo / Prevention of early alterations in UVB-induced photocarcinogenesis in hairless mice skin by Pothomorphe umbellata

Silva, Vanessa Vitoriano da 03 May 2007 (has links)
O uso de antioxidantes de origem natural apresenta uma perspectiva promissora na prevenção dos efeitos adversos causados pela radiação ultravioleta, incluindo o fotoenvelhecimento e a fotocarcinogênese. As atividades antioxidante, fotoprotetora e antienvelhecimento cutâneo foram demonstradas para o extrato de Pothomorphe umbellata. No entanto, seu potencial protetor da fotocarcinogênese ainda não foi estabelecido. O objetivo deste estudo é avaliar os efeitos da aplicação tópica do gel de extrato de raiz de P. umbelallta nas alterações promovidas pelas exposições aguda (dose única - 0,20 KJ/m2) e crônica (4 semanas, dose total de 8,6 KJ/m2, 5 semanas, 13,17KJ/m2, 15 semanas, 55,51 KJ/m2) à radiação ultravioleta B na pele de camundongos sem pelo. Para avaliação dos antioxidantes não enzimáticos, ácido ascórbico e α-tocoferol, foram utilizados métodos de cromatografia líquida de alta eficiência e para avaliação dos enzimáticos, catalase, superóxido dismutase, glutationa peroxidase e glutationa redutase, métodos espectrofotométricos. As modulações das proteínas p53 e PCNA foram avaliadas por imunohistoquímica. Os resultados demonstram que o tratamento com gel de extrato de raiz de P. umbellata é capaz de modular o sistema antioxidante na pele de camundongos sem pêlo, proporcionando maior proteção frente à exposição à radiação UVB. Além disso, os resultados sugerem que a aplicação tópica de extrato de P. umbellata protege contra os danos causados pela radiação modulando vias de reparo e/ou morte celular. Estes resultados contribuem para elucidação do mecanismo de ação do extrato de P.umbellata na pele exposta à radiação UVB, indicando sua capacidade em preservar a pele sadia após a irradiação. / Topical application of botanical antioxidants has been appreciated as a viable approach to reduce the occurrence of deleterious damage cased by sunlight exposure, such as photoaging and photocarcinogenesis. The plant Pothomorphe umbellata has been shown to exert a potent antioxidant activity on the skin and to delay the onset and reduce the incidence of UVB-induced skin damage and photoaging. The purpose of this study was to evaluate the effects of topical P. umbellata treatment on acute (single dose 0.20 KJ/m2) and chronic (4 weeks, total dose 8.6 KJ/m2, 5 weeks, 13.17KJ/m2, 15 weeks, 55.51 KJ/m2) UVB-induced damage hairless mouse epidermis. Nonenzymic antioxidants, ascorbic acid and α-tocopherol, were assayed by high performance liquid chromatography and enzymic antioxidants, catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase and glutathione reductase, spectrophotometrically. UVB-induced p53 and PCNA were deteted by immunohistochemical technique. The data collected here suggest that topical application of P. umbellata extract affords strong protection against UVB-induced damages in skin epidermis by either preventing DNA damage or enhancing repair and inhibiting UVB-caused apoptosis and sunburn cell formation. Moreover, the results also suggest that P. umbellata extract modulates the cutaneous antioxidant network resulting in reduced susceptibility to UVB-induced oxidative damage. Together these results contribute for the elucidation of the mechanism of action of P.umbellata on UVB exposed skin and indicate the capacity of this extract to preserve skin health after irradiation.
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Influência da infusão parenteral de aminoácidos sobre a expressão gênica de fatores de crescimento de timidina quinase no remanescente hepático de ratos desnutridos / -

Mazza, Rosangela Passos de Jesus 04 October 2004 (has links)
A Glutamina (Gln) melhora a regeneração hepática em ratos nutridos. Para avaliar o efeito molecular da Gln endovenosa no remanescente hepático, 52 ratos foram classificados em: 1. Nutridos com hepatectomia parcial (HP) e Gln (N-Gln=10) ou prolina (N-Pro=10); 2. Desnutridos com HP: (D-Gln=10) ou (D-Pro=10); 3. Nutridos e Desnutridos sem HP (N-Controle=6) e (D-Controle=6). Após 96 horas da HP os resultados foram: DNA = (D-Gln, D-Pro e D-Controle < N-Gln, N-Pro e N-controle), (N-Gln, N-Pro, D-Gln e D-Pro < N e D-Controle), (N-Gln > D-Gln); RNA= (N-Gln, N-Pro, D-Gln e D-Pro < N e D-Controle), (N-Gln > D-Gln e N-Pro). Não houve diferença nos genes transcritos (GT) para HGF, TGF-a e timidina kinase. Concluímos que: A desnutrição e HP reduzem DNA e RNA; A Gln não altera os GT estudados em ratos desnutridos 96 horas após HP / Glutamine dipeptide (Gln) improve hepatic regeneration of nourished rats. To evaluate molecular effect of Gln on liver remnant 52 rats was classified into: 1. Nourished with partial hepatectomy (PH) and Gln (N-Gln=10) or proline (N-Pro=10); 2. Malnourished (MN) with PH: (MN-Gln=10) or (MN-Pro=10); 3. Nourished and Malnourished rat without PH (N-Control=6) and (MN-Control=6). Results: DNA = (MN-Gln, MN-Pro and MN-Control < N-Gln, N-Pro and N-control), (N-Gln, N-Pro, MN-Gln and MN-Pro < N and MN-Control), (N-Gln > MN-Gln); RNA= (N-Gln, N-Pro, MN-Gln and MN-Pro < N and MN-Control), (N-Gln > MN-Gln and N-Pro). There was no difference on transcript genes (TG) for HGF, TGF-a and thymidine kinase. Conclusions: Malnutrition and PH decrease hepatic DNA and RNA; Gln does not modify TG studied 96 hours after PH in MN rats
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Correlação entre frequência e evolução terapêutica em fonoaudiologia nos distúrbios do espectro autístico / Correlation between frequency and evolution in speech therapy in autistic spectrum disorders

Nascimento, Leticia Alves do 15 October 2013 (has links)
Introdução: Os distúrbios do espectro do autismo são caracterizados como quadros complexos que abrangem dificuldades nas áreas de linguagem, cognição, comportamento e interação social. Diversos autores apontam o comprometimento de linguagem como principal alteração nestes quadros, já que se trata do processo que permite a comunicação intra e interpessoal. A aquisição e o uso da linguagem é foco principal da terapia fonoaudiológica nos distúrbios do espectro do autismo, principalmente no que diz respeito às habilidades pragmáticas. Objetivo: verificar se há correlação entre a frequência nas terapias e a porcentagem de faltas com o processo de evolução terapêutica e se há uma quantidade mínima de frequência em terapia em um semestre para que haja evolução do quadro. Método: Foram analisados os dados de frequência semestral, avaliação pragmática semestral e avaliação sócio-cognitiva semestral dos prontuários de 50 sujeitos com idades entre 2 e 17 anos durante quatro semestres de tratamento de cada um. Resultados: Após a correlação entre todas as variáveis das avaliações pragmática e sócio cognitiva e os grupos de frequências, foi possível observar que é necessário mais do que 60% de frequência nas terapias fonoaudiológicas previstas durante o semestre para que haja evolução terapêutica. Conclusão: O presente estudo é relevante para os serviços que oferecem este tipo de tratamento fonoaudiológico, indicando que há um mínimo de frequência necessária para que haja melhora do quadro, contribuindo para a delimitação de parâmetros mínimos de frequência à terapia / Introduction: The autism spectrum disorders are characterized as a complex condition involving impairments in the areas of language, cognition, behavior and social interaction. Several authors suggest that language impairment is the main disorder in these cases, since it is essential to intra and interpersonal communication. Language acquisition and functional use is the main focus of speech-language therapy in autism spectrum disorders, particularly regarding pragmatic abilities. Objective: Verify if there is a correlation between frequency and percentage of absence in therapy sessions and therapeutic evolution and if there is a minimal amount of frequency in therapy necessary to this evolution. Methods: Data about frequency, pragmatic and social-cognitive assessment regarding four semesters of speech-language of the records of 50 individuals aged 2 to 17 years were analyzed. Results: After the correlation of all variables of pragmatic and socio-cognitive assessments with the frequency in therapy, it was observed that more than 60% of frequency in speech-language therapies during the semester is needed to result in observable therapeutic evolution. Conclusion: The present study is relevant to the services that offer this type of speech therapy, indicating that there is a minimum frequency necessary for there to be improvement, contributing to the definition of minimum parameters of frequency therapy
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Itinerários terapêuticos de sujeitos com problemáticas decorrentes do uso de álcool em um centro de atenção psicossocial / Therapeutic Itineraries of individuals with problems in consequence of the use of alcohol in a psychosocial care center

Marques, Ana Lucia Marinho 05 April 2010 (has links)
Os problemas decorrentes do uso de álcool trazem impactos relevantes para o campo da saúde pública e levam ao desenvolvimento de políticas e propostas de tratamento baseadas em perspectivas e abordagens teórico-práticas que apresentam marcantes diferenças entre si, o que resulta na pluralidade de ofertas terapêuticas atuais. Tratase de questão complexa que envolve fatores de diversas ordens: socioculturais, econômicos, políticos, sócio-familiares e individuais. Tal complexidade deve ser considerada na construção das práticas de saúde e na compreensão dos processos de busca, escolha e adesão as propostas de tratamento, como interativos, relacionais e dotados de significados singulares. O presente estudo visou conhecer os itinerários terapêuticos de sujeitos com problemáticas decorrentes do uso prejudicial de álcool em um Centro de Atenção Psicossocial para usuários de álcool e outras drogas CAPSad. A pesquisa, de caráter qualitativo, foi orientada pela perspectiva etnometodológica, e empregou os procedimentos metodológicos de revisão bibliográfica, pesquisa documental, entrevistas semi-estruturadas, grupo focal, observação participante e construção de diário de campo. O trabalho de campo foi realizado no CAPSad Travessia, situado no município de Santana de Parnaíba/SP, no período de janeiro a março de 2009. Os resultados mostraram que os itinerários terapêuticos dos participantes foram compostos por um conjunto de ações sucessivas e muitas vezes sobrepostas. Os sujeitos tendem a recorrer simultaneamente a diversos lugares de tratamento e cuidado e chegam ao serviço de saúde sem a formulação clara do problema e nem tampouco com conhecimento sobre a proposta do serviço. Tal percurso não se configura como resultado de escolhas racionais prévias, mas da experiência construída no processo, que dota de significados as vivências e problemáticas relacionadas ao uso de álcool e a própria necessidade de busca de ajuda e enfrentamento do problema. Nesse processo, nota-se a importância das redes sócio relacionais, no contexto das quais são compartilhados os significados atribuídos às experiências e a orientação e sustentação dos processos de busca de ajuda. Concluímos que a preocupação em conhecer os saberes e práticas dos sujeitos na construção de seus itinerários terapêuticos deve compor as práticas de cuidado, desenvolvidas pelos profissionais nos serviços de saúde, comprometidas com o fortalecimento dos sujeitos individuais e coletivos, com a construção de direitos e cidadania e com a produção de saúde e de vida / Problems in consequence of the use of alcohol bring on relevant impacts to public health field and lead to the development of policies and treatment proposals based on perspectives and theoretical-practical approaches that present marked differences among them, resulting on the plurality of current therapeutic offers. This is a complex question that involves factors in several orders: sociocultural, economics, politics, socio-familiars and individuals. This complexity should be considered in the construction of health practices and understanding of the processes of search, choice and adherence to the treatment proposals, as interactive, relational and endowed of singular meanings. This study aimed to know the therapeutic itineraries of individuals with problems in consequence of harmful use of alcohol in a Psychosocial Care Center for users of alcohol and others substances CAPSad. The research used qualitative methods and was oriented by the ethnomethodological perspective. It employed the methodological procedures of bibliographical review, documental research, semi-structured interviews, focus group, participant observation and construction of field diary. The fieldwork was conducted in CAPSad Travessia, located in the city of Santana de Parnaíba/SP, from January to March of 2009. The results showed that the therapeutic itineraries of the participants were composed of a set of successive and often overlapping actions. The individuals tend to appeal simultaneously to several places of treatment and care and arrive to the health service without a clear formulation of the problem and neither informed about the proposal of the service. This pathway do not configure itself as a result of previous rational choices, but as the experience built during the process, which attributes meanings to the experiences and problems related to alcohol use and to the own necessity of help search and confrontation of the problem. In this process, it is possible to note the importance of social relational networks, in the context of which the meanings attributed to the experiences and the orientation and sustentation of process of help searching are shared. We conclude that the preoccupation in knowing the knowledge and practices of the individuals on the construction of their therapeutic itineraries must compose the care practices, developed by professionals in the health services, committed with the strengthening of individual and collective subjects, with the construction of rights and citizenship and with the production of health and life
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A proteína ligadora dos ácidos graxos Sm14 de Schistosoma mansoni: estrutura gênica, polimorfismo, expressão heteróloga em E. coli e significado estrutural e funcional das suas formas polimórficas e mutantes / The Sm14 Schistosoma mansoni fatty acid binding protein: gene structure, polymorphism, heterologus expression in E. coli and structure-functional study of her polymorphic and mutant forms

Ramos, Celso Raul Romero 26 March 2002 (has links)
A esquistossomose é a mais importante das doenças helmínticas humanas em termos de morbidez e mortalidade. A proteína Sm14 de Schistosoma mansoni, que pertence à família de proteínas ligadoras de ácidos graxos (fatty acid-binding proteins, FABPs) (Moser et al., 1991), mostrou um bom nível de proteção (65%) contra a esquistossomose em animais experimentais (Tendler et al., 1996). No presente trabalho foram desenvolvidos sistemas de expressão que possibilitará a produção da proteína Sm14 em larga escala em E.coli. Com o intuito de conhecer a estrutura do gene da proteína Sm14, foi clonado um fragmento de DNA genômico de S. mansoni que contém a seqüência codificante da proteína Sm14. Como os outros membros da família gênica das FABP, o gene para a proteína Sm14 contém quatro \"exons\" separados por três \"introns\" de 674, 585 e 42 bp. Esta é a primeira descrição da estrutura gênica de um membro das FABP correspondente a um helminto. A Sm14 é uma proteína que pode ser potencialmente usada como vacina. Estudamos a existência de polimorfismo em duas linhagens de S. mansoni endêmicas do Brasil: LE e BH. Para a análise de polimorfismo, a ORF correspondente à proteína Sm14 foi amplificada por RT-PCR do RNA total de vermes adultos de S. mansoni. Os produtos de amplificação independentes foram clonados no vetor pGEM-T e seqüenciados. As análises de seqüências mostraram duas isoformas principais para a proteína Sm14: Sm14-M20, com seqüência idêntica a proteína Sm14 previamente reportada para a linhagem de Puerto Rico de S. mansoni (Moser et AL., 1991), e Sm14-T20, onde o códon da Met20 (ATG) mudou para o códon de Thr (ACG) (polimorfismo M20T). Dois clones mostraram uma deleção de seqüência de aminoácidos correspondente ao \"exon\" 3 inteiro (clones &#916;Exon3), gerada por \"splicing\" alternativo. As outras trocas observadas acontecem em posições onde os aminoácidos são menos conservados e estão representados apenas por um único clone que podem ter sido obtidas por mutagênese na PCR. A metionina correspondente à posição 20 na Sm14 é altamente conservada nas FABP dos mais diversos organismos,e não se tem nenhuma outra proteína com treonina nesta posição. Para o estudo da estrutura e função destas isoformas, os cDNAs correspondentes foram subclonados no vetor pAE (desenvolvido no nosso laboratório), assim como o mutante M20A (Sm14-A20) construído para efeitos de comparação. A estabilidade e estrutura das proteínas recombinantes purificadas foram caracterizadas por dicroísmo circular (CD). A comparação da estrutura e termoestabilidade mostrou que as formas Sm14-T20 e Sm14-A20 são menos termoestáveis do que a Sm14-M20 (um &#916;Tm de aproximadamente 10°C). Porém, todas as formas de Sm14 foram capazes de ligar o DAUDA [ácido 11-(dansylamino) undecanoico] com a mesma afinidade. Para poder diferenciar as propriedades de ligação de ácidos graxos pelas isoformas, experiências de competição do deslocamento do DAUDA por ácidos graxos naturais, foram realizadas. A partir destes dados podemos assumir que a forma Sm14-M20 liga melhor todos os ácidos graxos naturais testados do que a forma Sm14-T20. Porém esta forma mantém a capacidade de ligar ácidos graxos, ao contrario do mutante Sm14-A20. Pode-se deduzir como resultado destas experiências que a proteína Sm14-M20 é mais estável e liga com maior afinidade os ácidos graxos naturais do que a forma Sm14-T20. Pelo visto, a proteína Sm14-T20 tem menos estrutura-&#946;, porém, mantém a capacidade de ligar moléculas hidrofóbicas. Ainda é desconhecido o papel funcional do polimorfismo da proteína Sm14 no metabolismo dos vermes de S. mansoni. Problemas de estabilidade da proteína Sm14 recombinante, durante seu transporte e armazenamento, comprometem sua viabilidade como vacina. Com o intuito de melhorar a estabilidade desta proteína, foi feita uma mutagênese no único resíduo de cisteína presente na Sm14 na posição 62. Este resíduo é responsável pela formação de dímeros, o que é relacionado a estabilização da perda de estrutura-&#946; e precipitação da proteína. Esta cisteína foi trocada por serina (C62S) e por valina (C62V) por mutagênese sítio dirigida, resultando nas proteínas Sm14-M20S62 e Sm14-M20V62. As formas mutantes não apresentaram maior termoestabilidade, mas a renaturação após o aquecimento a 80°C atingiu quase 100%, diferentemente das proteínas com Cys62. As proteínas com o resíduo de cisteina trocado foram as únicas formas que conservaram a estrutura de &#946;-barril após 3 meses de armazenamento a 4°C, como mostram as análises de dicroísmo circular, sendo a forma mais estável a proteína Sm14-M20V62. Após estes estudos, a isoforma Sm14-M20 com a mutação C62V (Sm14-M20V62) mostrou-se como a melhor alternativa ao antígeno Sm14-T20 usado até agora como modelo de vacina experimental para S. mansoni. Esta indicação deve ser confirmada em ensaios de imunização e posterior desafio com cercárias de S. mansoni. / The schistosomiasis is the most important human helmintic disease in terms of morbidity and mortality. The Sm14 protein of Schistosoma mansoni belongs to the family of fatty acid-binding proteins (FABPs) (Moser et aI. , 1991) and showed a good protection level as vaccine antigen against the schistosomiasis in experimental animals (Tendler et al., 1996). In the present work were developed systems for the expression of Sm14 protein that will facilitate its large scale production in E.coli.. In order to know the gene structure of the Sm14 protein, we amplified by PCR a genomic DNA fragment of S. mansoni that contains the coding sequence for the Sm14 protein. As the other members of the FABP family, the Sm14 gene contains four exons separated by three introns of 674,585 and 42 bp, respectively. This is the first detailed description of the genomic structure for a member of FABPs corresponding to a helmint. We also studied the existence of polymorphisms within two Brazilian endemic strains of S.mansoni: LE and BH. For the polymorphism analysis, the ORF corresponding to the Sm14 protein was amplified by RT-PCR from total RNA of S. mansoni adult worms. The independent amplified products were cloned into pGEM-T vector and sequenced. The sequence analyses showed two main isoforms: Sm14-M20, with identical sequence to that previously reported Sm14 protein from the Puerto Rican strain of S. mansoni (Moser et al., 1991), and Sm14-T20, where the codon for Met20 (ATG) was changed for the Thr codon (ACG) (M20T polymorphism). Two clones showed the same amino acid sequence deletion corresponding to the whole third exon (&#916;Exon3 clones), generated by alternative splicing. The other observed changes occurred in positions where the amino acids were less conserved and were just represented by only one clone that could be obtained by PCR mutagenesis. The methionine corresponding to the position 20 in Sm14 is highly conserved among FABPs and no other related protein has threonin in this position. To study the structure and function of these amino acid in the isoforms, the corresponding cDNAs were subcloned in to the pAE vector (developed in our laboratory), as well as the mutant M20A (Sm14-A20). The stability and structure of the purified recombinant proteins were characterized by circular dicroism (CD). The comparison of their structure and thermo stability showed that the forms Sm14-T20 and Sm14-A20 are less thermostable than Sm14-M20 (&#916;Tm around 10ºC). However, all of the Sm14 forms were capable to bind the DAUDA [11- (dansylamine) undecanoic acid] with similar affinities. To differentiate the fatty acid binding properties of Sm14 isoforms, displacement experiments of DAUDA with natural fatty acid were performed. From these data we can assume that the Sm14-M20 form binds better than the Sm14-T20 and Sm14-A20 forms of all natural fatty acid assayed. This suggests that the Sm14-20 protein is most stable and binds better the natural fatty acids than the Sm14-T20 form. Although the Sm14-T20 protein has less structure, it maintains the capacity to bind fatty acids. It is still unknown the functional role of this Sm14 protein polymorphism in the metabolism of S. mansoni worms. Stability problems of the recombinant Sm14 protein during its transport and storage, could hamper its use as vaccine. With the aim to improve the stability of this protein, it was made a mutagenese at the unique cysteine residue present in Sm14 at the position 62. This residue is responsible for the dimer formation and is related the loss of the terciary structure and precipitation of the protein. This cysteine was changed by serine (C62S) and for valine (C62V) by site directed mutagenesis, resulting in the proteins Sm14-M20S62 and Sm14-M20V62. The mutant forms did not present a higher thermal stability but the renaturation after heating at 80°C almost reached 100%, in contrast to Sm14 proteins with Cys62. These mutants conserved the &#946;-barrel structure after 3 months of storage at 4°C, in contrast to proteins with Cys62, as shown by circular dicroism analyses. After these studies, the Sm14-M20 isoform with the C62V mutation (Sm14-M20V62) was considered the best alternative to the antigen Sm14-T20 used up to now as the model for an experimental vaccine for S. mansoni. This indication should be confirmed by immunization and posterior challenge with S. mansoni cercaria.
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ESTUDOS ESTRUTURAIS DE PROTEÍNAS: INIBIDOR DE ALFA-AMILASE DE Secale cereale, GTPase YchF E ENOLASE DE Trypanosoma cruzi

Villalba, Cibeli May Arévalos 12 March 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-24T19:38:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cibeli May Villalba.pdf: 4939252 bytes, checksum: 5a6b5eaea0352844ad9868a7a9b79f0b (MD5) Previous issue date: 2012-03-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Proteins are the most abundant biomolecules in living organisms; they are present in all parts of a cell. They have different functions; their structural study is important because it brings greater insight into its functions and allows us to understand how they interact to each other and with the other molecules. Protein structures can be studied experimentally especially by the X-ray diffraction technique and computationally by homology modeling. Thus, in this work, structural studies were made with the alpha-amylase inhibitor from rye (Secale cereale), which inhibits the activity of amylase and then can be used in the treatment of Diabetes mellitus, obesity, pest control, amongst other applications. Through chromatographies, two different inhibitors could be separated, namely A2 and B2, which were crystallized, but did not show a minimum X-ray diffraction quality. Thus, a structural study was performed with data from a twinned crystal previously obtained, yet current refinement programs can now deal with such data. The structure was refined and compared with the alpha-amylase inhibitor 0.19 from wheat. Then, structural studies were also performed for the YchF GTPase and enolase from Trypanosoma cruzi; both have been studied with the possibility of being used as a target in the treatment of Chagas' disease. Initially, trials to express heterologously and to purify them for crystallization trials were performed; yet those were unsuccessful, a computational work was pursued, in which alignments and homology modelling for both proteins were made. The computational work was continued for Trypanosoma cruzi enolase,in which comparisons with the Homo sapiens enolase to seek and plan inhibitors for the former, through literature and data bank searches, were made; thus, docking of these was performed, which pointed more favorable binding energies for the substrates, phosphoenolpyruvate (PEP) and 2-phosphoglycerate (PG2), for the inhibitor phosphonacetohydroxamate (PAH) and for the compound coded ZINC25695689 from the ZINC (ZINC Is Not Commercial) data bank. Also, from the experimental position of the PAH inhibitor (deposited in the PDB, code 2PTZ), the interaction energies for these searched and planned molecules were estimated,through the AMBER molecular dynamics program, and, apparently, the presence of a chlorine atom conveniently bound to the inhibitor could promote an improvement of the interaction energy. / As proteínas são as biomoléculas mais abundantes nos seres vivos, estando presentes em todas as partes de uma célula. Elas possuem diferentes funções no organismo; seu estudo estrutural é importante, pois traz maior conhecimento sobre suas funções e possibilita entender como interagem entre elas e com outras moléculas. A estrutura de proteínas pode ser estudada experimentalmente principalmente por meio da técnica de difração de raios X e computacionalmente por meio da modelagem por homologia. Sendo assim, realizaram-se neste trabalho estudos estruturais com o inibidor de alfa-amilase do centeio (Secale cereale), que inibem a atividade amilásica e que podem ser utilizados em tratamento de Diabetes mellitus, obesidade, controle de pragas, entre outros usos. Por meio de cromatografias, puderam-se separar dois diferentes inibidores, denominados A2 e B2, que foram cristalizados, mas não apresentaram mínima qualidade de difração de raios X. Assim, realizou-se um estudo estrutural com dados de difração obtidos anteriormente para um cristal geminado, dada a possibilidade atual dos programas de refinamento de tratarem este problema. A estrutura foi refinada e comparada com o inibidor de alfa-amilase 0,19 do trigo. Em sequência, estudos estruturais também foram realizados para a proteína YchF da família das GTPases e para a enolase de Trypanosoma cruzi; ambas vêm sendo estudadas com a possibilidade de serem usadas como alvo no tratamento da doença de Chagas. Inicialmente tentou-se expressá-las de maneira heteróloga e purificá-las para a realização de ensaios de cristalização; com o insucesso disto, partiu-se para um trabalho computacional em que se fizeram alinhamentos e modelos por homologia para as duas proteínas. O trabalho computacional foi continuado para a enolase de Trypanosoma cruzi, comparando-a com a enolase de Homo sapiens para se buscar e planejar inibidores para a primeira, por meio de pesquisa na literatura e em bancos de dados; assim, fez-se a alocação ("docking") destes, obtendo-se energias de ligação mais favoráveis para os substratos, fosfoenolpiruvato (PEP) e 2-fosfoglicerato (PG2), para o inibidor fosfonacetohidroxamato (PAH) e para o composto codificado ZINC25695689 do banco de dados ZINC (ZINC Is Not Commercial). Também, a partir da posição experimental do inibidor PAH (depositada no PDB, código 2PTZ) estimaram-se as energias de interação para as moléculas pesquisadas e planejadas, através do programa de dinâmica molecular AMBER e, aparentemente, a presença de um átomo de cloro convenientemente ligado ao inibidor poderia promover melhoria da energia de interação.
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Desafios na atenção integral de usuários de crack e outras drogas nos CAPS AD

Xavier, Rosane Terezinha January 2012 (has links)
Submitted by Fabricia Fialho Reginato (fabriciar) on 2015-08-28T00:56:54Z No. of bitstreams: 2 RosaneXavier.pdf: 398206 bytes, checksum: c4ba9c2a04074696f1af91408ddf6414 (MD5) RosaneXavier.pdf: 398206 bytes, checksum: c4ba9c2a04074696f1af91408ddf6414 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-28T00:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 RosaneXavier.pdf: 398206 bytes, checksum: c4ba9c2a04074696f1af91408ddf6414 (MD5) RosaneXavier.pdf: 398206 bytes, checksum: c4ba9c2a04074696f1af91408ddf6414 (MD5) Previous issue date: 2012 / Nenhuma / O crescimento do consumo do crack e outras drogas no Brasil e os problemas relacionados ao seu uso é visto atualmente como um grande desafio para a Saúde Pública. Os Centros de Atenção Psicossociais Álcool e Drogas Álcool e Drogas (CAPS AD) são um dos serviços de atenção psicossocial da rede de atenção, no âmbito do Sistema Único de Saúde, especializados no atendimento de usuários de drogas. Para tratar dos desafios na atenção integral de usuários de crack e outras drogas esta dissertação de mestrado, foi dividida em dois artigos. O primeiro artigo, de cunho teórico, através da revisão de literatura e legislação brasileira, discorreu sobre a construção das Políticas Públicas sobre Drogas, implementada pela Secretaria Nacional de Políticas sobre Drogas (SENAD) e da Política de Atenção Integral ao Usuário de Álcool e outras Drogas do Ministério da Saúde (MS). Neste, também foi feito um recorte da pesquisa desenvolvida no segundo artigo onde são apresentados os resultados com relação ao Plano Integrado de Enfrentamento ao Crack e outras Drogas e o programa de Redução de Danos. O segundo artigo empírico teve como objetivo caracterizar as intervenções terapêuticas no tratamento de pacientes usuários de crack e outras drogas, levando em consideração as ações, as dificuldades, as abordagens terapêuticas e os desafios e sugestões para o enfrentamento das drogas, segundo psicólogos que desenvolvem suas atividades neste contexto. Trata-se de um estudo qualitativo, de caráter descritivo, com a participação de oito psicólogos, inseridos nos CAPS AD, nos municípios da região metropolitana de Porto Alegre/RS. Respeitando todos os procedimentos éticos para a realização da pesquisa com seres humanos, para a coleta de dados, utilizou-se entrevistas semiestruturadas, com roteiro previamente estabelecido. Os dados obtidos foram submetidos à técnica de Análise de Conteúdo, segundo Bardin. Dentre os resultados, destaca-se que não há ações específicas para o tratamento do crack nos CAPS AD estudados, os quais buscam a reinserção social dos pacientes, apesar de encontrarem várias dificuldades no tratamento da dependência, nos processos e condições de trabalho e na retaguarda de rede no âmbito do SUS. Os desafios e sugestões apresentados relacionam-se, sobretudo, a melhorias na gestão e ao trabalho de rede. Concluiu-se que os usuários de crack possuem peculiaridades em seu quadro, exigindo o desenvolvimento de um trabalho intersetorial, inclusive para alcançar os usuários em vulnerabilidade social que não chegam aos serviços de saúde, o número insuficiente de CAPS AD para atender a demanda, entre outros. Sugerem-se pesquisas com outros profissionais de saúde das equipes dos CAPS AD, inclusive dos CAPS que atendem usuários de drogas em municípios menores, a eficácia da rede de atenção e a aplicabilidade prática das ações imediatas e estruturantes do Plano de Enfrentamento ao crack e outras drogas. / Consumption growth of crack and other drugs in Brazil and problems related to its use is currently seen as a major challenge for public health. Psychosocial Attention Centers Alcohol and Drugs Alcohol and Drugs (CAPS AD) is one of the psychosocial care services network care under the National Health System, specializing in the care of drug users. To address the challenges in the undivided attention of users of crack and other drugs this dissertation was divided into two articles. The first article, the theoretical / empirical, through literature review and the Brazilian legislation, talked about the construction of Public Policies on Drugs, implemented by the National Drug Policy (SENAD) and Policy of Integral Attention to the User of Alcohol and Other Drugs of the Ministry of Health (MOH). This also was made part of a research developed in the second article where the results are presented in relation to the Comprehensive Plan to Combat Crack and Other Drugs and Harm Reduction program. The second empirical paper aimed to characterize the therapeutic interventions in the treatment of patients using crack and other drugs, taking into account the stock, the difficulties, therapeutic approaches and the challenges and suggestions for dealing drugs, according to psychologists who develop their activities in this context. This is a qualitative study of a descriptive nature, with the participation of eight psychologists, entered in CAPS AD, in the metropolitan region of Porto Alegre / RS. Respecting all ethical procedures for conducting the research with humans, for data collection, we used semi-structured interviews with previously established routine. The data were subjected to the technique of content analysis according to Bardin. Among the results, it is emphasized that no specific actions for the treatment of AD crack in the CAPS study, which seek to rehabilitate patients, despite various difficulties in finding addiction treatment, processes and working conditions and the rear network within the SUS. Challenges and suggestions made relate mainly to improvements in management and the work network. It was concluded that crack users have peculiarities in their framework, requiring the development of an intersectoral work, even to reach users on social vulnerability that does not come to health services, the insufficient number of CAPS AD to meet the demand, among other. We suggest research with other health teams AD CAPS, including CAPS that serve drug users in smaller municipalities, the effectiveness of the care network and the practical applicability of the immediate actions and structuring of the Plan to Combat crack and other drugs.
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A dependência de drogas como um problema de identidade: possibilidades de apresentação do 'eu' por meio da oficina terapêutica de teatro / The drugs dependency how an Identity problem: Possibilities of presentation of Self through Therapeutic workshop of Theater. Masters Dissertation. Pontíficia Universidade Católica de São Paulo.

Lima, Aluísio Ferreira de 07 November 2005 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-29T13:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dependencia de drogas como um problema de Identidade.pdf: 1099358 bytes, checksum: 72850e5e57fa7f7d526d4e8dbe020e27 (MD5) Previous issue date: 2005-11-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This dissertation aims to investigate the mean of the therapeutic workshop of theater to the person who has been treated by the ambulatory of drug dependency in the city of Diadema SP. To do so, we start from the Social Psychology and the concept of Identity as the central category of analysis, considering to understand not only the phenomenon in its instrumental aspect, but, all the context in which the individual that uses psychoactive substances is inserted, in the tradition vs. modernity conflicts, of the market of consumption, of the diagnostic and treatments; with the proposal to present a contribution in such a way theoretical as political. The research was carried through from the narrative of the participant life history, which was recorded and transcript with the consent of the interviewed. While analyzing the life history narrative, we focused on happenings immediately before, during and after the participation on the therapeutic workshop of theater, asking the participant to tell several aspects of his life and not only the one who made the person search for drug dependency treatment. What has changed in his family, social, professional and individual life, observing how has this process developed. The dissertation is divided in five chapters that approach several aspects in which the individuals who use psychoactive substances are inserted. In this way, this work weaves some reflections on the question of drug usage and the possibility of change through the therapeutic workshop of theater, as well as it offers subsidy to discuss the Post Conventional Identities (Habermas) and the possibilities of emancipation in Modernity. / Esta dissertação propõe investigar o sentido da oficina terapêutica de teatro para uma pessoa que passou por ambulatório de tratamento da dependência química do município de Diadema - SP. Para isso partimos da Psicologia Social e do conceito de Identidade como categoria central de análise, propondo entender o fenômeno não apenas no seu aspecto instrumental, mas sim, todo o contexto no qual o indivíduo que usa substâncias psicoativas está inserido, nos conflitos da tradição vs. modernidade, do mercado de consumo, dos diagnósticos e tratamentos; com a proposta de apresentar uma contribuição tanto teórica, quanto política. A pesquisa foi realizada a partir da narrativa da história de vida do participante, que foi gravada e transcrita com o consentimento do entrevistado. Ao analisar a narrativa da história de vida, procuramos focar os acontecimentos imediatamente antes, durante e após a participação na oficina terapêutica de teatro, pedindo que o participante nos contasse diversos aspectos de sua vida e não apenas aquele que levou o indivíduo a procurar tratamento da dependência de drogas. O que mudou na sua vida familiar, social, profissional e individual, observando como este processo se desenvolveu. A dissertação é dividida em cinco capítulos, que abordam os diversos aspectos no qual os indivíduos que utilizam substâncias psicoativas estão inseridos. Desse modo, o presente trabalho tece algumas reflexões sobre a questão das drogas e da possibilidade de mudança por meio da oficina terapêutica de teatro, assim como oferece subsídios para discutir as Identidades Pós-Convencionais (Habermas), e as possibilidades de emancipação na Modernidade.
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Prevenção do dano fotooxidativo à pele por tratamento tópico com extrato da raiz de Pothomorphe umbellata L. Miq / Prevention of photo-oxidative damage to the skin for topical treatment with root extract of Phothomorphe umbellata L. Miq

Cristina Dislich Ropke 29 May 2003 (has links)
Entre as estratégias de fotoproteção encontra-se a inibição da formação e/ou o seqüestro de radicais livres e espécies reativas de oxigênio geradas em conseqüência da exposição à radiação UV, mediante aplicação tópica de antioxidantes. No presente trabalho avaliou-se a permeação cutânea e o efeito da aplicação tópica de um extrato de Pothomorphe umbellata nos efeitos da exposição aguda e crônica à radiação ultravioleta, na pele de camundongos sem pêlo. No estudo de permeação cutânea foram testadas três formulações (gel, gel-creme e creme) contendo o princípio ativo do extrato (4-nerolidilcatecol) isolado. Também foram testadas duas formulações (gel, e gel-creme) contendo o extrato hidroalcoólico liofilizado de Pothomorphe umbellata, quanto à permeação do princípio ativo 4-nerolidilcatecol. A formulação gel tanto para o princípio ativo isolado, quanto para o princípio ativo presente no extrato, apresentou o melhor desempenho, sendo o gel o veículo escolhido para preparação da formulação utilizada nos ensaios de exposição crônica e aguda à radiação ultravioleta. Nos estudos de exposição aguda à radiação UVB não foram observadas alterações significativas nos níveis de ácido ascórbico e na atividade enzimática, mas sim uma redução de 40% (p<0,01) na concentração de &#945;-tocoferol na pele do grupo de. camundongos sem pêlo, controle irradiado. No grupo tratado com P. umbellata, o &#945;-tocoferol foi totalmente preservado, quando comparado aos níveis encontrados no grupo controle não irradiado (&#8776;100%, p>0,05). No estudo de exposição crônica dos camundongos sem pêlo à radiação ultravioleta, os grupos irradiados que não receberam tratamento com gel de P. umbellata apresentaram a pele fotoenvelhecida. O grupo irradiado e tratado com o gel de Pothomorphe umbellata não apresentou diferença significativa em relação ao grupo controle não irradiado, o que demostra que o extrato de Pothomorphe umbellata pode ser empregado com sucesso como agente foto protetor tópico no fotoenvelhecimento da pele. / Topical administration of antioxidants provides an efficient way to enrich the endogenous antioxidant system and thus may be a successful strategy for diminishing ultraviolet radiation-mediated oxidative damage in the skin. The Brazilian Flora is rich in medicinal plants with a high potential to provide these antioxidant substances. Crude dried root ethanolic extracts of Pothomorphe umbellata, from the piperaceae family, demonstrated a significant activity in the prevention of in vitro spontaneous brain lipid peroxidation. This activity was attributed to 4-nerolidylcathecol, a compound isolated from the hexane extracts of roots and leaves of P. umbellata. In this work we evaluated the influence of topical application of P. umbellata root extract gel, containing 0,1% of 4-nerolidylcathecol, on the antioxidant network in ultraviolet-induced oxidative damage in hairless mouse skin. In this study we evaluated the influence of three different formulations (gel, gel-emulsion and emulsion) on the percutaneous absorption of 4-nerolidylcathecol, an antioxidant compound isolated from Pothomorphe umbellata root extracts. Also the absorption of the isolated 4-nerolidylcathecol was compared with its absorption when dried Pothomorphe umbellata root ethanolic extract was incorporated in gel and gel-emulsion formulations. The 4-nerolidylcathecolgel formulation presented the higher rate of penetration, leading to higher dry drug levels in the tissue.4-nerolidylcathecol was also absorbed in biological conditions and was stable when exposed to UV-irradiation. The UV-irradiation had no influence on ascorbic acid levels, or on the antioxidant enzymes activities, but topical P. umbellata treatment protected &#945;-tocopherol from depletion after UV-irradiation. After UV-irradiation &#945;-tocopherol concentration decreased significantly (&#8776;40%, p<0.01) in irradiated control groups, while in the P. umbellata treated group, a-tocopherol was totally preserved (&#8776;100%, p>0.05). We also tested the extract activity on animals chronically exposed to UV-radiation. The extract was able to prevent photoaging of the irradiated animals skin. These data demonstrate that P. umbellata may successfully employed as a topical photoprotective agent.

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