Para se garantir a eficácia, a segurança e a qualidade de um produto farmacêutico é necessário o conhecimento das propriedades físicas e físico-químicas do fármaco e dos excipientes empregados nas formulações, bem como dos procedimentos relacionados aos processos de produção. Conhecer as propriedades do estado sólido é de fundamental importância e relevância na área farmacêutica uma vez que estas propriedades têm um impacto profundo sobre a solubilidade, biodisponibilidade e estabilidade química dos fármacos. Os dados de difração de raio-X, ressonância quadrupolar nuclear, espectroscopia de infravermelho, análise térmica e microscopia foram usados para a caracterização e identificação das diferentes amostras de diclofenaco de sódio, duas comercializadas no Brasil (DPB1 e DPB3) e uma na Argentina (DPA2). Foi observada a presença das formas anidro, pentahidrato e desconhecida nas formulações comerciais DPB3, DPA2 e DPB1, respectivamente. A análise quantitativa do diclofenaco de sódio para os estudos in vitro de dissolução foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência empregando uma coluna de fase reversa C-18 e acetonitrila:ácido acético 0,7 mol/L (1:1, v/v) como fase móvel. No meio de dissolução composto por tampão fosfato de sódio 0,2 mol/L, pH 6,8 foi observada uma dissolução de 100% para as três formulações de diclofenaco de sódio em 1 hora. Para o meio de dissolução composto por tampão fosfato de sódio 0,2 mol/L, pH 4,5 a porcentagem do fármaco dissolvido foi de apenas 4% nas formulações avaliadas. Entretanto, diferenças na solubilidade entre as formulações avaliadas foram observadas, o que pode ser devido às diferenças na estrutura cristalina do diclofenaco de sódio. Também foram realizados estudos de dissolução apenas nas amostras anidro e hidrato, sem a interferência de revestimentos ou excipientes, nos meios de dissolução descritos acima e em solução de HCl 0,1 mol/L pH 1,2. Foi observado que a amostra anidra apresentou uma diferença estatisticamente significativa no perfil in vitro de dissolução comparada a forma hidratada em solução de pH 6,8. Para os demais valores de pH não foram observadas diferenças estatisticamente significativas nos perfis de dissolução. Também foi desenvolvido e validado um método para análise do diclofenaco de sódio em plasma, empregando a coluna RP-18 (125x4,6 mm, partículas de 5 m) protegida por uma coluna de guarda RP-18 (4,0x4,0 mm) e fase móvel composta por acetonitrila:ácido acético 0,7 mol/L (1:1, v/v). Foi realizada a extração líquido-líquido como procedimento de preparação da amostra usando uma mistura de hexano:éter (1:1, v/v) como solvente extrator. O método foi validado avaliando os parâmetros linearidade, recuperação, precisão e exatidão, limite de quantificação e estabilidade. Todos os parâmetros avaliados apresentaram resultados adequados e aceitos pela literatura. Posteriormente, o método desenvolvido e validado foi aplicado em um estudo piloto para avaliar a concentração plasmática do diclofenaco de sódio em coelhos. Também foi avaliada a influência das diferentes formas cristalinas do diclofenaco de sódio na resposta febril induzida por LPS em coelhos. Neste estudo não foi observada nenhuma diferença estatisticamente significativa na redução da resposta febril para as diferentes amostras avaliadas. / To assure effectiveness, security and quality of pharmaceutical products, the knowledge of the physical and chemical-physical properties of the drugs and the excipients used in formulations are necessary, as well as the proceeding related to the production processes. To know the properties of the solid state is important and relevant in the pharmaceutical area because they have a deep impact on the solubility, bioavailability and chemical stability of the drugs. Data of X-ray diffraction, nuclear quadrupole resonance, infrared spectroscopy, thermal analysis and scanning electron microscopy have been used for the characterization and identification of the different samples of diclofenac sodium. The presence of anhydrous, pentahydrate and unknown forms were observed in commercial formulations DPB3, DPA2 and DPB1, respectively. Quantitative analysis of the diclofenac sodium for studies in vitro of dissolution was carried out by high performance liquid chromatography using the column reverse phase C-18 and acetonitrila:acetic acid 0,7 mol/L (1:1, v/v) as mobile phase. Release profiles in vitro of dissolution of commercial diclofenac sodium formulations were evaluated using different dissolution medium. In the phosphate buffer solution 0.2 mol/L pH 6.8, it was observed dissolution of 100% for the three formulations of diclofenac sodium in 1 hour while in the phosphate buffer solution 0.2 mol/L pH 4.5, the percentage of drug dissolved was only 4%. However, differences in the solubility between the formulations evaluated were observed, which can be due to the differences in the crystalline structure of diclofenac sodium. Dissolution studies in the samples anhydrous and hydrate were carried out, without the interference of coverings or excipients, in the dissolution medium described above and in the solution 0.1 HCl mol/L pH 1.2. It was observed that the anhydrous sample showed a significant statistical difference in the in vitro dissolution profile when compared with hydrate form (pH 6.8). For the others values of pH, significant statistical differences in the dissolution profiles were not observed. It was also developed and validated a method of analysis of diclofenac sodium in plasma using the column RP-18 (125x4.6mm, particle size 5 µm) protected by a column of guard RP-18 (4.0x4.0 mm) and acetonitrila:acetic acid 0,7 mol/L (1:1, v/v) as mobile phase. Sample preparation was performed by liquidliquid extraction using hexano:ether as extracting solvent after acidification with 2.0 mol/L hydrochloric acid. The method was validated by evaluation of parameters such as linearity, recovery, precision and accuracy, limit of quantification and stability. All the evaluated parameters had presented results adequate and accepted in the literature. Subsequently, the developed and validated method was applied in a pilot study to evaluate the plasmatic concentration of the diclofenac sodium in rabbits. It was also evaluated the influence of the different crystalline forms of the diclofenac sodium in the LPS induced fever in rabbits. In this study no significant statistical difference was observed in the reduction of the febrile response within the different samples evaluated.

Os acidentes com presença de material biológico são uma realidade na prática odontológica. A utilização de medidas preventivas como a adoção das Precauções Padrão (PP) é essencial. Na vivência profissional na área da saúde, verifica-se certa hesitação dos cirurgiões-dentistas (CD) no que diz respeito à adesão de práticas seguras. Diante desse quadro, surgiu a seguinte indagação: que fatores podem associar-se aos níveis de adesão às PP, a fim de prevenir a exposição desses profissionais a material biológico? Desse modo, este estudo constituiu-se de uma investigação metodológica quantitativa com o objetivo de adaptar e validar um instrumento para verificação de fatores associados à adesão às PP entre CD. O instrumento compôs-se de 49 itens distribuídos em 5 dimensões. O processo de validação do instrumento seguiu as seguintes etapas: adaptação do instrumento para as situações que envolvem riscos aos cirurgiões-dentistas por meio da análise semântica e análise de conteúdo, as quais foram realizadas por um comitê de juízes. O instrumento adaptado foi aplicado entre os meses de maio a dezembro de 2008 para 224 cirurgiões-dentistas que atuavam na Rede Básica de Saúde dos municípios de Apucarana, Arapongas, Cambé, Ibiporã, Londrina e Rolândia, na região Norte do Estado do Paraná. Para análise das propriedades psicométricas, realizou-se validação de construto por meio de análise fatorial exploratória e teste de confiabilidade. Resultados da análise fatorial confirmaram itens divididos em três domínios: obstáculo para seguir PP; conhecimento da transmissão ocupacional do HIV e clima de segurança. A consistência interna dos domínios estimada pelo alfa de Cronbach variou de 0,73 a 0,88. Estes resultados evidenciam que o instrumento poderá ser utilizado por pesquisadores para avaliar os fatores de influência na adesão às PP entre os CD, considerando-se sua validade e confiabilidade. Em relação a análise descritiva exploratória dos itens, a dimensão Clima de segurança foi a que obteve a menor pontuação média (3,43 ± 0,62), enquanto a dimensão Obstáculo para seguir PP tanto quanto a dimensão Conhecimento da transmissão ocupacional do HIV apresentou pontuações bastante próximas, de (4,10 ±0,76) e (4,05 ±0,70), respectivamente. Estes resultados possibilitaram concluir que o CD tem uma percepção média em relação aos fatores individuais e aos relativos ao trabalho e uma percepção baixa dos fatores organizacionais, situação que pode favorecer a exposição destes profissionais a riscos desnecessários. / Accidents with biologic materials are customary in dental practice. Preventive measures such as the adoption of Standard Precautions are essential. In professional experience in healthcare some hesitation of the dentists on the adoption of safe practices has been verified. Therefore, the following quest aroused: what factors can be associated to the Standard Precautions levels of adhesion, in order to prevent the exposure of these professionals to biologic materials? Thus, this study proposes a quantitative methodological investigation in order to adapt and validate an instrument for the verification of factors associated with the adhesion to the Standard Precautions among dentists. The instrument was composed of 49 items distributed in 5 dimensions. The process of validation of the instrument involved the following steps: instrument matching for the situations that involve risk to the dentists through semantic and subject analysis which were carried out by a committee of judges. The adapted instrument was applied from May to December, 2008 to 224 dentists who worked at the public health system in the North of Paraná State in the following cities: Apucarana, Arapongas, Cambé, Ibiporã, Londrina and Rolândia. To analyze the psychometrical properties, a construct validation was performed through exploratory factor analysis and reliability test. Factor analysis results confirmed items divided into three areas: objection in following the Standard Precautions, knowledge about occupational transmission of HIV and safety atmosphere. The internal consistency of the domains which were estimated by the Cronbach\'s alpha varied from 0,73 to 0,88. These results show that the instrument can be used by researchers to evaluate the factors that influence the adhesion to the Standard Precautions among dentists, considering its validity and reliability. Regarding descriptive exploratory analysis of the items, the dimension of security atmosphere was the one that had the lowest average score (3.43 ± 0.62), while the objection to follow standard precautions as far as the knowledge about occupational transmission of the HIV virus presented very close scores of (4.10 ± 0.76) and (4.05 ± 0.70), respectively. These results allow the conclusion that dentists has an average perception concerning to individual and work-related factors and a low perception of organizational factors, which might facilitate the exposure of these professionals to unnecessary risk. The exploratory descriptive analysis of the items made it possible to conclude that not only the individual and organizational factors but also the ones related to work had a simultaneous association with the adhesion to the Standard Precautions among the dentists.

Orientadores: Carla Beatriz Grespan Bottoli, Carol Hollingworth Collins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-12T11:07:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribani_Marcelo_D.pdf: 2298112 bytes, checksum: 0ec75ae8ab9c973ad70afa69a5098302 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O uso de padrões analíticos em análises cromatográficas é de fundamental importância para obter resultados analíticos confiáveis tanto em processos de validação de métodos quanto em análises rotineiras. Porém, o custo dos padrões de referência e sua disponibilidade para comercialização tornam o processo analítico muito caro e demorado. Neste trabalho foram obtidos padrões analíticos de isoflavonas de soja através da cromatografia líquida preparativa. Inicialmente foi desenvolvida uma método analítica por cromatografia líquida de alta eficiência, para separação e identificação de isoflavonas em extrato seco de soja. A seguir, foi realizada a transposição da escala analítica para a escala preparativa, iniciando pelo método da transposição direta. A caracterização e a pureza das isoflavonas obtidas foram verificadas a partir da pureza cromatográfica e pelos espectros na região do ultra violeta e visível, complementados pela espectrometria de massas e pela ressonância magnética nuclear. Os padrões obtidos por cromatografia preparativa apresentaram um teor de pureza de 93,1 % para daidzina, 99,8 % para daidzeína, 89,5 % para genisteína e 87,7 % para glicitina, permitindo, assim, o seu uso como padrões em análises rotineiras. Para demonstrar a aplicabilidade dos padrões obtidos, foi desenvolvido e validado um método para extração, hidrólise ácida e determinação das isoflavonas agliconas contidas em grãos de soja. Os resultados do conteúdo total de isoflavonas foram 283,5 ± 10,7 mg/100 g para soja não transgênica (BRS133) e 228,2 ± 13,8 mg/100 g para soja transgênica (BRS245RR), demonstrando diferenças significativas no conteúdo destas duas variedades de soja. / Abstract: The use of analytical standards in chromatographic analyses is very important to get trustworthy analytical results for validation of methodologies and for routine analyses. However, the cost of the available reference standards is high, prejudicing the overall analytical process. In this work, a transposition from analytical to preparative scale was carried out to obtain analytical standards of isoflavones from soybeans. An analytical methodology using high performance liquid chromatography (HPLC) was developed for separation and identification of isoflavones in dry soy extract. The transposition of the analytical parameters to the preparative scale was done initially through direct transposition. The characterization and purity of the isoflavones was determined by HPLC with spectra from a DAD detector, complemented by mass (MS+/-) and nuclear magnetic resonance spectrometries. The resulting isoflavone purities, after preparative separation and lyophilization, were 93.1 % for daidzin, 99.8 % for daidzein, 89.5 % for genistein and 87.7 % for glycitin, allowing their use as standards in routine analyses. To demonstrate the applicability of the standards obtained, an approach for extraction, acid hydrolysis and determination of the total amounts of isoflavone aglicones in soybeans was developed and validated. The results indicated total isoflavone contents of 283.5 ± 10.7 mg/100 g for non-transgenic (BRS133) and 228.2 ± 13.8 mg/100 g for transgenic (BRS245RR) soybeans, demonstrating significant differences in the isoflavone content of these two different soybeans. / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-05-19T11:53:13Z No. of bitstreams: 1 isabelamaddalenadias.pdf: 2794697 bytes, checksum: 4a09c94e68176ed0512c7722924091e3 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-19T14:42:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 isabelamaddalenadias.pdf: 2794697 bytes, checksum: 4a09c94e68176ed0512c7722924091e3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-19T14:42:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 isabelamaddalenadias.pdf: 2794697 bytes, checksum: 4a09c94e68176ed0512c7722924091e3 (MD5) Previous issue date: 2015-07-06 / O termo desordens temporomandibulares (DTM) refere-se a um conjunto de problemas clínicos dolorosos e/ou funcionais que pode acometer o sistema estomatognático, representando uma importante causa de dor crônica na região orofacial. Muitos pacientes com queixas constantes associadas ao distúrbio consideram a automedicação como meio mais rápido e prático para aliviar suas dores e não procuram ajuda de um profissional. Atualmente não há na literatura um instrumento específico para avaliar a prática de automedicação em pacientes com DTM, sendo objetivo do presente estudo construir e validar um questionário com essa finalidade. A primeira etapa para construção do instrumento foi a fase qualitativa, na qual, para que fossem gerados itens para construção do instrumento foram realizadas uma ampla revisão da literatura sobre os temas envolvidos no estudo, entrevistas semiestruturadas com pacientes com DTM e a dinâmica do grupo focal. Após essas etapas o material gerado foi criteriosamente lido e avaliado para que se iniciasse a construção do instrumento. Elaborou-se a primeira versão do questionário, sendo as perguntas desenvolvidas com base em escala de Likert, com cinco opções de resposta. A primeira versão do instrumento resultou em 62 questões divididas em 4 dimensões: DTM/Dor orofacial, medicamentos utilizados, opinião/atitudes com relação à automedicação, atendimento/tratamento das DTM. Após a validação de face realizada por um comitê de especialistas, alguns itens foram excluídos e outros criados, assim como a ordem dos mesmos foi alterada, para facilitar a leitura do pesquisador, porém sem permitir respostas semelhantes devido à sequência de perguntas muito parecidas. A versão para pré-teste apresentava 48 perguntas, e apesar de nenhuma das questões apresentar um grau de incompreensão maior que 20%, sete questões foram excluídas, por serem consideradas repetitivas e com pouca diferença do poder explicativo, quando comparadas a outras perguntas, após avaliação inicial dos dados. A versão para validação com 41 itens, foi aplicada em uma amostra de 110 pacientes com diagnóstico de DTM de acordo com os critérios do RDC/TMD (1992). De acordo com análise fatorial, 7 questões com carga abaixo de 0,30 foram retiradas, sendo sua versão final bifatorial, composta por 34 perguntas. A análise da consistência interna e estabilidade temporal resultou em valores de 0,844 do coeficiente de Alfa de Cronbach e 0,810 do coeficiente Kappa, respectivamente, indicando que o questionário apresenta confiabilidade e capacidade de reprodutibilidade, tendo propriedades satisfatórias para o objetivo que se propõe. Como objetivo final de classificar os pacientes de acordo com o grau/intensidade de automedicação, foi proposta uma classificação que permitiu discriminar em 3 grupos distintos quanto à exposição da automedicação: leve (34-81 pontos), moderado (82-103 pontos), severo (104-170 pontos) com base na pontuação do escore bruto de automedicação. Foi verificada maior prevalência (46,4%) de casos moderados de automedicação. Em síntese, espera-se que o instrumento construído possa contribuir para o desenvolvimento de mais estudos que avaliem a automedicação associada às DTM. A partir de uma maior discussão do assunto na literatura da área, será possível difundí-lo, esclarecendo importantes questões associadas à prática estudada, visando, principalmente, a sua redução. / The term temporomandibular disorders (TMD) refers to a set of clinical problems involving pain and/or dysfunction that can affect the stomatognathic system, representing a major cause of chronic pain in the orofacial region. Many patients with constant complaints associated with such disorders consider self-medication the fastest and most convenient way to ease their pain, and do not seek help from a professional. Currently there is no specific instrument found in the literature to assess the practice of self-medication in patients with TMD, thus the objective of this study was to construct and validate a questionnaire for this purpose. The first step in constructing the instrument was the qualitative phase, in which a comprehensive review of the literature on the subjects involved in the study, semi-structured interviews with TMD patients, and focus group dynamics were carried out in order to generate items for constructing the instrument. The generated material was then carefully read and evaluated in order to begin construction of the instrument. The first version of the questionnaire was developed, with questions based on five-point Likert scale response options. The first version of the instrument resulted in 62 questions divided into four dimensions: TMD / orofacial pain, medications used, opinions / attitudes regarding self-medication, care / treatment of TMD. Aftervalidation performed by a committee of experts, some items were excluded and others created, and their order was amended as well, to facilitate reading by the researcher, but without allowing similar responses due to the sequence of very similar questions. The pre-test version had 48 questions, and although none of the questions presented a misunderstanding rate greater than 20%, seven questions were excluded for being considered repetitive, and with little difference in the explanatory power compared to the other questions, after initial assessment of the data. The version for validation, with 41 items, was administered to a sample of 110 patients diagnosed with TMD according to the criteria of the RDC/TMD (1992). According to factor analysis, 7 questions with loadings below 0.30 were taken out, with the final version consisting of 34 questions. The analysis of internal consistency and temporal stability resulted in values of 0.844 for Cronbach's alpha coefficient and 0.810 for the Kappa coefficient, respectively, indicating that the questionnaire presents reliability and reproducibility, having satisfactory properties for its proposed objective. As to the ultimate goal of classifying patients according to the degree / intensity of self-medication, a classification was proposed that allowed discrimination into three distinct groups regarding self-medication exposure: mild (34-81 points), moderate (82-103 points), severe (104-170 points), based on the total for the self-medication raw score. Highest prevalence (46.4%) was observed for moderate cases of self-medication. In summary, it is hoped that the resulting instrument will contribute to the development of further studies assessing the self-medication associated with TMD. From further discussion of the subject in the literature, it will be possible to disseminate more information, clarifying important issues associated with the practice under study, aiming mainly at its reduction.

Os motivos que levavam as pessoas a procurar emprego no setor público, baseavam-se principalmente na busca pela segurança, tanto financeira quanto de carreira, além de outros benefícios. O contexto dos dias atuais está um pouco modificado, uma vez que reformas foram feitas no Estado a fim de promover mudanças na máquina administrativa do governo. Com esse novo modelo de gestão em pauta, o governo iniciou uma reforma do Estado, atuando, entre outras áreas importantes do governo, na área de Recursos Humanos. Assim, o presente estudo é relevante, também, para a literatura que trata do PSM - Public Service Motivation, uma vez que os principais estudos da área se concentram nos EUA, e alguns em desenvolvimento na Bélgica e na Coréia. O objetivo principal deste estudo, portanto, é cumprir as etapas da validação de constructo da escala de medida do PSM - Public Service Motivation para as secretarias pesquisadas no município de Ribeirão Preto. O presente estudo pode ser caracterizado como quantitativo e descritivo, uma vez que utilizará o método survey para a coleta dos dados e identificará e descreverá um fenômeno. A amostra é caracterizada como não-probabilística por acessibilidade e composta por servidores públicos que compõem os quadros funcionais das secretarias municipais pesquisadas. O instrumento de medida será um questionário formado pela escala do PSM - Public Service Motivation, pela escala de comprometimento organizacional de Meyer e Allen, além de dados demográficos. A conclusão foi de que a escala pode ser utilizada, porém necessita de ajustes para melhor adequação de seu uso. / The reasons that used to take people to seek job in the public sector were based, mainly, in the search for stability and financial security, plus the benefits. Nowadays, this context has been modified, once reforms were made in the State in order to promote changes in the government\'s administrative machine. With that new administration model on the agenda, the government began a State reform that took action, among other important areas of the government, in the area of Human Resources. The study is relevant for the PSM (Public Service Motivation) literature since the main studies are concentrated in the USA, with some few that are under development in Belgium and in Korea. The main objective of this study, therefore, it is to do the steps of the construct validation of the scale of measurement of PSM - Public Service Motivation for the municipals agencies researched in Ribeirão Preto. The present study can be characterized as quantitative, descriptive and exploratory, once it will use the survey method for data collection, it will identify and it will describe a phenomenon and will familiarize with this phenomenon, in order to obtain a new perception on the same. The sample is characterized as non-probabilistic for accessibility and it will be composed by public workers from the agencies researched. The measurement instrument will be a questionnaire formed by the Perry\'s scale of PSM - Public Service Motivation, by Meyer and Allen\'s scale of organizational commitment, and some demographic data. The conclusion is that the scale can be used, but it\'s necessary to improve it to use it with more adequacy.

Orientador: Roberta Cunha Matheus Rodrigues / Texto em português e inglês / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Enfermagem / Made available in DSpace on 2018-08-25T10:11:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SantosPedrosa_RafaelaBatistados_M.pdf: 1805803 bytes, checksum: 1c035d3233cb182bbb25a113e1cc2f2f (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Este estudo tem como objetivo disponibilizar uma versão da Self-efficacy for Appropriate Medication Adherence Scale ¿ SEAMS para a cultura brasileira e avaliar suas propriedades de medida quando aplicada em pacientes com doença arterial coronária (DAC) em seguimento ambulatorial.. O processo de adaptação cultural foi realizado de acordo com as etapas propostas na literatura - tradução, síntese, retrotradução, avaliação por comitê de especialistas e pré-teste, seguidos pela avaliação da praticabilidade, aceitabilidade, confiabilidade e validade. Fizeram parte deste estudo 147 pacientes com DAC em uso de medicamentos cardioprotetores e de alívio dos sintomas, em seguimento ambulatorial em hospital universitário do interior do estado de São Paulo. Os dados foram obtidos por meio de entrevista e aplicação de instrumento de caracterização sociodemográfica/clínica e das versões brasileiras da Morisky Self-Reported Measure of Medication Adherence Scale (MMAS-4), da General Perceived Self-Efficacy Scale (GSE) e da SEAMS. A praticabilidade foi avaliada pelo tempo despendido na entrevista e a aceitabilidade pela proporção de pacientes que responderam a todos os itens do instrumento. Foi estimada a confiabilidade no que se refere à consistência interna e estabilidade da medida. A validade de construto foi estimada pela evidência correlacional entre os escores da versão brasileira da SEAMS, da MMAS-4 e da GSE. A validade de grupos conhecidos foi testada entre aqueles classificados com "dose suficiente" e "dose insuficiente" ( medida da proporção de adesão) e entre aqueles "aderentes" e "não aderentes" (medida da avaliação global da adesão). Foi empregada a análise confirmatória de fatores por meio dos modelos de equações estruturais A validade convergente do modelo fatorial foi avaliada pelas medidas de Average Variance Extracted (AVE), magnitude das cargas fatorias, alfa de Cronbach e confiabilidade composta. A validade discriminante do modelo fatorial foi avaliada pelas análises das cargas fatoriais cruzadas, comparação entre as raízes quadradas das AVEs, pelos coeficientes de correlação entre os construtos e pela correlação desatenuada. Os dados foram submetidos às análises descritivas, com avaliação da praticabilidade, aceitabilidade e efeitos teto e chão; de confiabilidade por meio do coeficiente alfa de Cronbach (consistência interna) e do coeficiente de correlação intraclasse (estabilidade da medida). O coeficiente de correlação de Spearman foi utilizado para testar a correlação entre os escores das versões brasileiras da SEAMS, MMAS-4e GSE. O teste de Mann-Whitney foi utilizado para verificar a capacidade da versão brasileira da SEAMS em discriminar entre coronariopatas classificados em "dose suficiente" ou "insuficiente" e entre aqueles "aderentes" e "não aderentes" ao tratamento medicamentoso. A versão traduzida da SEAMS apresentou evidências de equivalências semântico-idiomática, conceitual e cultural, com elevada aceitabilidade e praticabilidade. Foi evidenciado efeito chão para o escore total e domínios da SEAMS. Os achados evidenciaram confiabilidade da medida - coeficiente de correlação intraclasse (0,99) e coeficiente alfa de Cronbach (entre 0,85-0,90). Foram constatadas correlações significativas negativas de moderada a forte magnitude com os escores da MMAS-4, porém não foram encontradas correlações com os ecores da medida geral de autoeficácia. A validade de grupos conhecidos foi apoiada, uma vez que a escala discriminou entre aderentes e não aderentes ao tratamento medicamentoso. A análise fatorial confirmatória confirmou a estrutura de fatores do instrumento original. Os resultados evidenciaram cargas fatoriais cruzadas ? 0,50 para todos os itens da escala nos domínios em que foram alocados no instrumento original, AVE=0,52 para o fator 1 e 0,69 para o fator 2 e confiabilidade composta de 088 e 0,99 para os fatores 1 e 2, respectivamente, apontando para a validade convergente do modelo. Foram constatadas valores superiores de cargas fatoriais cruzadas para todos os itens da escala nos domínios em que foram previamente designados no instrumento original, raízes quadradas de AVEs superiores às correlações entre os construtos e correlação desatenuada (r=0,83), sugerindo validade discriminante do modelo. A confiabilidade de ambos os fatores, estimada de acordo com a homogeneidade dos itens, apontou para confiabilidade e validade de construto convergente da versão brasileira da SEAMS. Os achados apontam para confiabilidade e validade de construto da versão brasileira da SEAMS entre coronariopatas em seguimento ambulatorial / Abstract: This study aims to provide a version of the Self-efficacy for Appropriate Medication Adherence Scale - SEAMS for Brazilian culture and evaluate its measurement properties when applied to patients with coronary artery disease (CAD). The process of cultural adaptation was performed according to the steps proposed in the literature - translation, synthesis, back translation, expert committee review and pretesting, followed by evaluation of the feasibility, acceptability, reliability and validity. This study included 147 patients with CAD in the use of cardioprotective medications and relief of symptoms in outpatients at a university hospital in the state of São Paulo. Data were obtained by interview and instrument sociodemographic / clinical characterization and Brazilian versions of Morisky Self-Reported Measure of Medication Adherence Scale (MMAS-4), the General Perceived Self-Efficacy Scale (GSE) and SEAMS. Practicality was assessed by time spent in the interview and the acceptability by the proportion of patients who responded to all items of the instrument. Reliability with respect to the internal consistency and stability of the measurement was estimated. Construct validity was estimated by correlational evidence between the scores of the Brazilian version of SEAMS, the MMAS-4 and GSE. Known groups validity was tested between those classified as "sufficient dose" and "insufficient dose" (measure of the proportion of membership) and among those "adherent" and "nonadherent" (measure of overall assessment of compliance). Was used confirmatory factor analysis through structural equation models Convergent validity of the factorial model was evaluated by measurements of Average Variance Extracted (AVE), magnitude of loads fatorias, Cronbach's alpha and composite reliability. The discriminant validity of the model was evaluated by factorial analysis of cross-factor loadings, comparing the square roots of AVEs, the correlation coefficients between the constructs and the correlation desatenuada. Data were subjected to descriptive analyzes, assessing the feasibility, acceptability and ceiling and floor effects; reliability through Cronbach alpha (internal consistency) and the intraclass correlation coefficient (measurement stability). The Spearman correlation coefficient was used to test the correlation between the scores of the Brazilian versions of SEAMS, MMAS-4e GSE. The Mann-Whitney test was used to verify the ability of the Brazilian version of the SEAMS in discriminating between coronary classified as "adequate dose" or "insufficient" and among those "adherent" and "nonadherent" to drug treatment. The translated version of SEAMS presented evidence of idiomatic semantic-conceptual and cultural equivalence, with high acceptability and feasibility. Floor effect was evidenced for the total score and domains of SEAMS. The findings indicate reliability of the measure - the intraclass correlation coefficient (0.99) and Cronbach's alpha coefficient (between 0.85-0.90). Significant negative correlations of moderate to strong magnitude with the scores of MMAS-4 were observed, but no correlations with ecores general measure of self-efficacy were found. Known groups validity was supported, since the scale discriminated between adherent and non-adherent to medication treatment. Confirmatory factor analysis confirmed the factor structure of the original instrument. Results showed cross-factor loadings ? 0.50 for all items of the scale in areas that were allocated in the original instrument, AVE = 0.52 for factor 1 and 0.69 for factor 2 and composite reliability of 0.88 and 0.99 for factors 1 and 2, respectively, indicating the convergent validity of the model. Higher values of cross-factor loadings for all scale items in domains that were previously designated in the original instrument, the square roots of higher than the correlations between constructs and desatenuada correlation (r = 0.83) strokes were observed, suggesting discriminant validity of model. The reliability of both factors, estimated according to the homogeneity of the items pointed to reliability and convergent validity of the Brazilian version of the SEAMS. The findings point to reliability and construct validity of the Brazilian version of SEAMS between coronary outpatients / Mestrado / Enfermagem e Trabalho / Mestra em Ciências da Saúde

Orientador: Flavio Luis Schmdit / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-26T04:59:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scucuglia_Marcio_M.pdf: 2766345 bytes, checksum: df718c4c465f3ea8e35d990cbd5ffbc6 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Tanques assépticos são equipamentos aplicados em linhas de processamento de produtos longa-vida, com o objetivo de estocar o produto previamente esterilizado até o envase asséptico, mantendo a condição de esterilidade comercial obtida nas etapas anteriores. Para evitar a recontaminação do produto, o equipamento deve ser levado a condição de esterilidade, sendo aplicado um procedimento de aquecimento, desaeração e esterilização. Por ser uma etapa crítica, o ciclo de esterilização é validado por protocolos específicos que visam garantir a integridade da operação. A demanda de equipamentos com capacidades cada vez maiores e as implicações desse aumento na eficiência da esterilização tornaram importante uma análise mais detalhada dos resultados obtidos nos protocolos atuais. Este trabalho teve por objetivo avaliar os ciclos de esterilização de um tanque asséptico, baseado na distribuição de temperatura e pressão em seu interior, e a partir dos resultados, aumentar a compreensão dos fenômenos envolvidos na esterilização e quantificar sua eficiência. A análise das variáveis revelou que o ciclo de desaeração do tanque asséptico não foi completa, com retenção de ar representando de 13 a 23% do volume total do equipamento. Como consequência o processo de esterilização ocorreu em condição de não saturação de vapor. Esta situação altera o mecanismo de destruição térmica de microrganismos da condição úmida para não-úmida, na qual a resistência térmica dos esporos é mais elevada, levantando a questão da real eficiência dos processos e protocolos de esterilização atuais. .A aparente garantia da esterilidade comercial dos processos atuais pode ser explicada pelo uso de temperaturas e tempos excessivos. A revisão de procedimentos, protocolos e critérios de sucesso dos projetos existentes pode resultar em maior segurança quanto à eficiência de esterilização e redução de custos. Um novo protocolo de validação é proposto em refletindo os novos critérios de sucesso estabelecidos neste trabalho / Abstract: Aseptic tank systems are applied to production lines for shelf-stable, long-life products in order to store sterile product until aseptic filling, maintaining the commercial sterility condition achieved from previous production steps. To avoid microbial recontamination of the product, a sterility condition must be achieved in the aseptic tank system through the application of a heating, venting, and sterilization cycle. This cycle must be submitted to specific validation protocols to ensure operational integrity. The demand for larger capacity systems and the implication of this volume increase on sterilization efficiency require a more detailed review of the results obtained from current validation protocols. The purpose of this work was to evaluate an aseptic tank¿s sterilization cycles, through study of temperature distribution and internal pressure, in order to better understand key phenomena in aseptic tank sterilization and to quantify its efficiency. The analysis showed that the venting cycle was insufficient, with remaining air on the order of 13%-23% of the total tank volume. Consequently, the subsequent sterilization process was not conducted at the saturation point for steam. This different condition changes the kinetics for thermal destruction of microorganisms from a wet state to a dry state in which thermal resistance of spores is higher. This finding raises a question regarding the true efficacy of the sterilization process and validation protocols currently applied. The apparent success of current sterilization processes could be explained by the usage of excessive temperature and time. The review of procedures, protocols, and success criteria of current projects could result in greater assurance of sterilization efficacy and in cost reduction. A new validation protocol is proposed to reflect the new success criteria developed in this work / Mestrado / Tecnologia de Alimentos / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Adriana Zerlotti Mercadante / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-21T07:45:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Xavier_AnaAugustaOdorissi_D.pdf: 4199257 bytes, checksum: b4a79d65bfa255c2e573658b211002e9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Apesar dos carotenoides estarem amplamente distribuídos nos alimentos de origem vegetal, a sua adição a produtos alimentícios de elevado consumo se torna cada vez mais frequente, visto as inúmeras evidências sobre os benefícios destes pigmentos para a saúde humana. Assim, esse trabalho teve por objetivo o desenvolvimento e a validação de métodos para extração e quantificação de carotenoides em iogurte desnatado e em queijo Prato, ambos adicionados de corante contendo luteína, a fim de verificar a estabilidade deste carotenoide durante o armazenamento refrigerado destes produtos na ausência e na presença de luz (1000 lux). Para o queijo Prato, também foi verificado o efeito do tipo de embalagem na estabilidade da luteína, empregando embalagens plásticas transparentes e pigmentadas de cor vermelha. Além disso, a bioacessibilidade in vitro da luteína adicionada ao leite e ao iogurte desnatado, semidesnatado e integral foi avaliada para estimar a fração de luteína adicionada que pode ser absorvida pelo organismo humano, após o consumo destes produtos. O método desenvolvido e validado para determinação da luteína em iogurte incluiu a extração dos carotenoides com tetraidrofurano em vortex, seguida de centrifugação, partição dos extratos para éter etílico/éter de petróleo (2:1) e quantificação espectrofotométrica dos carotenoides em etanol. O método apresentou linearidade na faixa estudada (1,41¿13,42 µg/g, coeficiente de determinação 0,9938),limites de detecção e quantificação de 0,42 µg/g e 1,28 µg/g, respectivamente, baixo desvio padrão relativo (3,4 %) e recuperação variando entre 95 e 103 %. Este método foi empregado para avaliar a estabilidade de luteína adicionada em iogurte desnatado, onde foi verificado que, na concentração adicionada (aproximadamente 10 µg luteína/g iogurte), o carotenoide manteve-se estável durante os 35 dias de armazenamento refrigerado, independentemente das condições de iluminação. O método validado para iogurte não foi eficiente para a extração de carotenoides de queijo Prato, e por isso, um novo método foi desenvolvido e validado. A extração dos carotenoides do queijo Prato foi realizada em almofariz, utilizando acetato de etila como solvente extrator e hyflosupercel como adjuvante de extração. O novo método desenvolvido para queijo Prato demonstrou linearidade na faixa de 0,05 a 1,15 mg/g, com coeficiente de determinação de 0,9984. Os limites de detecção e quantificação foram de 0,02 e 0,06 mg/g, respectivamente, o desvio padrão relativo de 2,85 % e os valores de recuperação variaram entre 93 e 98 %. Na aplicação deste método para monitorar a estabilidade de luteína durante o armazenamento do queijo Prato, constatou-se que não houve alteração dos níveis deste carotenoide durante 56 dias de armazenamento refrigerado. Os queijos armazenados na presença ou ausência de luz, embalados em embalagem transparente ou pigmentada, mantiveram seus níveis de luteína praticamente constantes e não apresentaram diferenças entre si. A análise da bioacessibilidade in vitro da luteína adicionada em leite e iogurte demonstrou que as amostras de leite semidesnatado e integral, assim como o iogurte integral, apresentaram índices de bioacessibilidade entre 19 e 21 %, semelhantes aos já relatados na literatura para alimentos naturais e formulados. Além disso, durante a digestão in vitro foi constatada a hidrólise de cerca de 85 % dos ésteres de luteína presentes na formulação do corante luteína, provavelmente devido à ação da lipase pancreática. Os resultados deste estudo mostram que os métodos desenvolvidos produziram resultados confiáveis na análise de luteína adicionada em iogurte desnatado e queijo Prato, e que os níveis de luteína se mantiveram constantes durante o armazenamento dos produtos, nas condições estudadas. Além disso, do ponto de vista de bioacessibilidade, entre o leite e iogurte adicionados de luteína, apenas aqueles com maiores teores de gordura (leite semidesnatado e integral e iogurte integral) mostraram-se bons veículos para adição de luteína.22:00 1/11/2012 / Abstract: Although carotenoids are widely found in foods from vegetable origin, their addition to food products of high consumption becomes increasingly common due to the abundant evidence about the benefits of these pigments to the human health. Thus, the aim of this work was to develop and validate methods for the extraction and quantification of carotenoids from skimmed yogurt and "Prato¿ cheese added lutein colorant in order to verify the stability of this carotenoid during refrigerated storage in the dark and in illuminated environment (1000 lux). The effect of packaging on the stability of lutein was also determined in the Prato cheese by using transparent and red pigmented plastic packaging. In addition, the in vitro bioaccessibility of lutein added to skimmed, semi-skimmed and whole milk and yogurt was evaluated to estimate the fraction of the added lutein that can be absorbed by the human body after the intake of these products. The method developed and validated for the determination of lutein in yogurt comprised the extraction of carotenoids with tetrahydrofuran by vortexing, followed by centrifugation, partition of the extract to diethyl ether/petroleum ether (2:1) and spectrophotometric quantification of the carotenoids in ethanol. The method was linear in the tested range (1.41 to 13.42 µg/g, coefficient of determination 0.9938), the limits of detection and quantification were 0.42 µg/g and 1.28 µg/g,respectively, the relative standard deviation (3.4 %) was low and the recovery ranged from 95 to 103 %. This method was employed to evaluate the stability of the yogurt with lutein colorant addition, and at the used concentration (ca. 10 mg lutein/g yogurt), the carotenoid was stable during the 35 days of refrigerated storage, regardless the illumination conditions. The method validated for yogurt was not efficient to extract the carotenoids from Prato cheese, and therefore a new method was developed and validated. The carotenoid extraction from Prato cheese was carried out in a mortar with ethyl acetate and hyflosupercel, as an extraction enhancer. The new method developed for Prato cheese was linear in the range from 0.05 to 1.15 mg/g, with a coefficient of determination of 0.9984. The limits of detection and quantification were 0.02 and 0.06 mg/g, respectively, the relative standard deviation was 2.85 % and recovery values ranged between 93 and 98 %.By applying this method to determine the stability of lutein during the storage of Prato cheese, no modifications were observed in the levels of carotenoids during the 56 days of storage. The lutein contents remained constant and no differences were observed regardless the illumination conditions or package type. The analysis of the in vitro bioaccessibility of lutein from milk and yogurt with addition of lutein colorant showed that semi-skimmed (21 %) and whole milk (19 %), and whole yogurt (21 %) had bioaccessibility values similar to those reported in the literature for natural and formulated foods. Furthermore, about 85% of the esters present in the lutein colorant were hydrolized during the in vitro digestion, probably due to the action of the pancreatic lipase. The results showed that the developed methods produce reliable results for the analysis of lutein added to skimmed yogurt and Prato cheese, and that lutein levels remained constant in these products during the storage, under the studied conditions. Moreover, regarding bioacessibility, only the milk and yogurt with lutein colorant samples with high fat content (whole and skimmed milk and whole yogurt) showed to be good vehicles for the addition of lutein / Doutorado / Doutora em Ciência de Alimentos

Orientador: Maria Helena Baena Moraes Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T01:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_MariaAndreiaSilva_D.pdf: 3382582 bytes, checksum: 48425d50f9e9c1e8e49cdc0b369eccd6 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Validade de um diagnóstico de enfermagem é o grau com que um grupo de características definidoras (CDs) ou fatores de risco (FRs) descreve uma realidade (resposta humana) que pode ser observada na interação cliente/ambiente. Entre os vários métodos de validação encontra-se o método de Validação de Conteúdo Diagnóstico (Diagnostic Content Validation - DCV), que é baseado na obtenção de opiniões de enfermeiros peritos acerca do grau em que determinadas CDs são indicativas de certo diagnóstico. Este estudo teve como objetivo estimar a validade de conteúdo dos diagnósticos de enfermagem Integridade da Pele Prejudicada, Risco de Integridade da Pele Prejudicada e Integridade Tissular Prejudicada, propostos pela NANDA-I. Tratou-se de uma pesquisa de validação de conteúdo baseada na proposta de Fehring. O estudo envolveu as seguintes fases: revisão da literatura para identificar outras CDs/FRs além das descritas pela NANDA-I, elaboração e avaliação das definições operacionais das CDs/FRs, seleção dos expertos, identificação por parte dos expertos de quais CDs/FRs representavam o diagnóstico estudado, cálculo dos escores (média ponderada - MP) para cada CD/FR e cálculo do escore total de validade do diagnóstico (DCV). Para a análise estatística foi utilizado o Statistical Package for Social Science (SPSS) versão 16.0. A amostra foi por conveniência e constituída por 56 enfermeiros expertos, das áreas de dermatologia, estomaterapia e diagnóstico de enfermagem. No diagnóstico de Integridade da Pele Prejudicada, das 38 CDs identificadas na literatura foram validadas seis como principais, e 30 como secundárias, e duas irrelevantes, o DCV foi de 0,73. No diagnóstico de Risco de Integridade da Pele Prejudicada, dos 71 FRs identificados na literatura, 23 foram validados como principais, 45 como secundários, e, quatro como irrelevantes, o DCV foi de 0,70. No diagnóstico de Integridade Tissular Prejudicada, das 24 CDs identificadas na literatura, dez foram validadas como principais, sendo duas da NANDA-I, inclusive as três fictícias, e 14 como secundárias, o DCV foi de 0,75. Os escores de validação total foram considerados adequados, pois o método preconiza que o mesmo seja maior que 0,60. Somente a variável atuar em dermatologia influenciou na pontuação atribuída às CDs dos diagnósticos Integridade da Pele Prejudicada e Integridade Tissular Prejudicada, e no diagnóstico de Risco de Integridade da Pele Prejudicada houve também a influência da variável atuar em estomaterapia. Recomenda-se que sejam realizados outros estudos para confirmar esses achados, inclusive estudos de validação clínica ou validação diferencial além da revisão das CDs/FRs atualmente descritas na taxionomia da NANDA-I, de forma a incorporar outras que são relevantes para a determinação destes diagnósticos / Abstract: Validity of a nursing diagnosis it is the degree of a group of defining characteristics (DCs) or risk factors (RFs) describes a reality (human response) that can be observed in the interaction client / environment. Among various methods of validation there is the method of Diagnostic Content Validation (Diagnostic Content Validation - DCV), which is based on obtaining the opinions of expert nurses about the degree in which certain DCs are indicative of a certain diagnosis. This study aimed to ate content validity of the diagnoses Impaired Skin Integrity, Risk for Impaired Skin Integrity and Impaired Tissue Integrity, proposed by NANDA-I. This was a research for validation of content based on a proposal of Fehring. The study involved the following stages: a literature review to identify others DCs /RFs than those described by NANDA-I, preparation and validation of operational definitions of DCs / RFs, was identified by the experts on what DCs /RFs were part of the diagnostic, the scores (weighted average -WA) for each DC / RF and the calculus of the total score validity of the diagnosis (CSV). We used the Statistical Package for Social Science (SPSS) version 16.0 for the statistical. The sample was chosen for convenience and was formed of 56 nurses and experts in areas of dermatology, enterostomal therapy, and nursing diagnosis. In the diagnosis of Impaired Skin Integrity from 38 DCs identified in the literature 6 were validated as main features, 30 as secondary, and two were irrelevant, the DCV was 0.73. In the diagnosis of Risk for Impaired Skin Integrity 71 RFs identified in the literature, 23 have been reported main features and from these, 45 as secondary, four were irrelevant, the DCV was 0.70. In the diagnosis of Impaired Tissue Integrity of 24 DCs identified in the literature, 10 were validated as main features, 14 as secondary, the DCV was 0.75. As recommended it has to be greater than 0.60. Only the dermatological variable influenced in the DC scores of diagnoses Impaired Skin Integrity and Impaired Tissue Integrity, risk in the diagnosis of Impaired Skin Integrity was also the influence of variable act in stomatherapy. It was considered that the validation method used was appropriate content and is recommend that further studies must be conducted to confirm these findings, including validation studies and clinical validation difference besides the revision of DCs / RFs currently described in the taxonomy of NANDA-I to incorporate other data which are relevant for the determination of these diagnoses / Doutorado / Enfermagem / Doutora em Enfermagem

A lipoproteína de baixa densidade eletronegativa (LDL-) é um importante antígeno envolvido na patogênese da aterosclerose. A LDL(-) provoca resposta inflamatória e imunológica, levando à produção de autoanticorpos anti-LDL(-) e a formação subsequente de imunocomplexos (IC-LDL-), os quais também contribuem com o processo aterosclerótico. Diante disso, este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e validação de imunoensaios para quantificação plasmática de LDL(-), anti-LDL(-) e IC-LDL(-), assim como o desenvolvimento de ferramentas aplicáveis em um biossensor para LDL(-). Após a padronização de cada ELISA, foram avaliadas as características de desempenho dos métodos: limites de detecção (LD) e quantificação (LQ), precisão intra e inter-ensaios, exatidão, linearidade de diluição e interferentes. Os LD e LQ do ELISA para LDL(-) foram 0,423 mg/L e 0,517 mg/L de LDL(-), respectivamente. As concentrações plasmáticas de LDL(-) apresentaram linearidade quando os plasmas foram diluídos 1:1000, 1:2000, 1:4000 e 1:8000. Os LD e LQ do ELISA para anti-LDL(-) foram 0,0028 mg/L e 0,0032 mg/L de anti-LDL(-), respectivamente. Os plasmas apresentaram linearidade na diluição quando diluídos 1:100, 1:200, 1:400 e 1:800. Os LD e LQ do ELISA para IC-LDL(-) foram 0,023 g/L e 0,034 g/L de IC-LDL(-), respectivamente. Os plasmas apresentaram linearidade quando diluídos 1:12,5, 1:25, 1:50 e 1:100. Os três ELISAs apresentaram precisão intra e inter-ensaios e recuperação dentro dos limites requeridos para imunoensaios. Para o desenvolvimento de um biossensor para LDL(-), uma proteína recombinante, denominada GFP5-scFv, foi expressa em bactérias Escherichia coli da linhagem BL21(DE3). Para obtenção dessa proteína foi realizada a inserção da sequência de DNA de um fragmento variável de cadeia única (scFv) anti-LDL(-) em um vetor bacteriano com a sequência de DNA da proteína verde fluorescente (GFP5). Dessa forma, a GFP5-scFv é fluorescente e tem afinidade pela LDL(-). Também foram sintetizadas nanopartículas de ouro, as quais podem ser eficientemente utilizadas na supressão da emissão da fluorescência de GFP5-scFv. Portanto, os imunoensaios validados e os aplicativos desenvolvidos para o biossensor são ferramentas que tem potencial para serem utilizadas na avaliação da patogênese da aterosclerose. / The electronegative low-density lipoprotein (LDL) is an important antigen involved in the pathogenesis of atherosclerosis. The LDL(-) causes inflammatory and immune response, leading to production of autoantibodies anti-LDL(-) and the subsequent formation of immune complexes (IC-LDL), which also contribute to the atherosclerotic process. Thus, this study aimed to develop and validate immunoassays for quantification of plasma LDL(-), anti-LDL(-) and LDL-IC(-) as well as developing tools applicable to a biosensor for LDL(-). After the standardization of each ELISA, were evaluated the performance characteristics of methods: limits of detection (LD) and quantification (LQ), intra- and inter-assays precision, accuracy, linearity of dilution and interferences. The LD and LQ of LDL(-) ELISA were 0.423 mg/L and 0.517 mg/L of LDL(-), respectively. Plasmas showed linearity when diluted 1:1000, 1:2000, 1:4000 and 1:8000. The LD and LQ of anti-LDL(-) ELISA were 0.0028 mg/L and 0.0032 mg/L of anti-LDL(-), respectively. Plasmas showed linearity when diluted 1:100, 1:200, 1:400 and 1:800. The LD and LQ of IC-LDL(-) ELISA were 0.023 g/L and 0.034 g/L of LDL-IC(-), respectively. Plasma showed linearity when diluted 1:12.5, 1:25, 1:50 and 1:100. The three ELISAs showed good intra- and inter-assays precision and recovery within the limits required for immunoassays. To develop a biosensor for LDL(-), a recombinant protein, called GFP5-scFv was expressed in Escherichia coli BL21(DE3) strain. The obtainment of this protein was performed inserting the DNA sequence of an anti-LDL(-) single chain variable fragment (scFv) in a bacterial vector with a DNA sequence of green fluorescent protein (GFP5). Thus, the scFv-GFP5 is fluorescent and has affinity for LDL(-). Were also synthesized gold nanoparticles, which can be efficiently used for quenching the fluorescence emission of GFP5-scFv. Therefore, immunoassays validated and developed applications for the biosensor are tools that have potential to be used in evaluating the pathogenesis of atherosclerosis.