Introdução: Um dos principais obstáculos para compreensão dos eventos biológicos envolvidos no câncer é a falta de modelos adequados para o estudo in vitro em especial em relação ao câncer de próstata (CaP) e ao câncer de bexiga (CaB). Há um número limitado de linhagens celulares de CaP e de CaB sendo a maioria proveniente de tumores invasivos e metastáticos. Sabe-se ainda, que existem diferenças étnicas entre as populações quanto ao comportamento de neoplasias. Desta forma, a pesquisa baseada em linhagens de uma população homogênea seria fonte de resultados limitados, não contemplando a diversidade que sabidamente ocorre entre os diferentes grupos. Além desse aspecto, as linhagens celulares comerciais são na sua maioria adquiridas na Coleção Americana de Culturas de Tecido (ATCC, do inglês American Tissue Cell Culture) que apesar de serem bem padronizadas, requerem processos de importação com aumento do custo e demandas burocráticas que dificultam a pesquisa. Portanto, consideramos vital para a compreensão dos fenômenos relacionados à carcinogênese, assim como estudos de resistência a drogas, quimioprevenção e novas estratégias terapêuticas, o desenvolvimento de linhagens tumorais derivadas de tumores primários que acometem a nossa população, peculiarmente miscigenada. No presente trabalho, fragmentos de carcinoma urotelial da bexiga e de adenocarcinoma da próstata foram obtidos durante cirurgia para remoção de tumores primários de pacientes tratados e acompanhados na Divisão de Urologia da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (FMUSP) e no Hospital Sírio Libanês. As linhagens estabelecidas a partir destes fragmentos foram caracterizadas através da análise da cinética de crescimento, análises imunocitoquímicas e anormalidades cromossômicas incluindo cariótipo e hibridização in situ por fluorescência (FISH). Além disso, as linhagens obtidas foram submetidas a estudos de quimiossensibilidade com o uso dos compostos curcumin e Prima-1. Avaliamos ainda, a tumorigenicidade de nossas linhagens em camundongos atímicos. Os resultados deste trabalho demonstram o desenvolvimento de três linhagens de CaB e três linhagens de CaP sendo as mesmas não tumorigênicas em camundongos atímicos. Além disso, demonstramos que o curcumin na concentração de 50 M induziu morte celular em todas as linhagens estudadas, sendo seu efeito mais evidente nas linhagens de CaP. Por fim, Prima-1 reduziu a viabilidade celular independente do status de p53 nas linhagens de CaB / Introduction: One of the main obstacles for understanding biological events involved in cancer is the lack of appropriated models for in vitro studies especially for prostate cancer (PC) and bladder cancer (BC). There are a limited number of PC and BC cell lines being the majority originated from metastatic and invasive tumors. Also it is well known that there are ethnic differences between populations concerning the behavior of tumors. In such a way, the research based on cell lines derived from a homogenous population should be source of limited results, not contemplating the diversity known to occur among different groups. In addition the commercial cell lines are generally acquired at American Tissue Cell Culture (ATCC) that although wellestablished requires importation processes with cost increase and bureaucratic demands that difficult the research. Therefore we consider vital to the comprehension of the carcinogenesis phenomena, as well as drug resistance studies, chemoprevention and new therapeutic strategies, the development of tumor lineages derived from primary tumors that assail our miscigenated population. At the present work, fragments of bladder urothelial carcinoma and prostate adenocarcinoma were obtained by surgical resection of primary tumors from patients treated and followed in the Division of Urology of the Clinical Hospital of the São Paulo University (FMUSP) and Syrian Lebanese Hospital. The cell lines established from these fragments were characterized through growth kinetic, immunocytochemistry and chromosome abnormalities including karyotyping and Fluorescence in situ hybridization (FISH). Moreover, the cell lines were submitted to chemosensitivity studies using curcumin and Prima-1 and analyzed regarding their tumorigenicity in athymic mice. The results of this work show the development of three BC and three PC cell lines that were not tumorigenic in athymic mice. Curcumin at 50 M concentration induced cell death in all studied lineages, being more effective in PC cell lines. Finally, PRIMA-1 reduced the cellular viability independent of the p53 status in BC cell lines

Introdução: O câncer de bexiga é a segunda neoplasia maligna mais frequente do trato urinário, com 386.000 casos estimados e 150.000 mortes para 2011 no mundo. Noventa e cinco por cento são carcinomas uroteliais (CUB) papilíferos não músculo-invasivos de baixo grau, que apresentam altas taxas de recidiva, mas raramente progridem. Tumores invasivos de alto grau representam 10-20% dos diagnósticos, são altamente agressivos levando à mortalidade elevada. O conhecimento das vias moleculares envolvidas na carcinogênese dessa neoplasia é importante para a identificação de novos marcadores para diagnóstico, acompanhamento, prognóstico e desenvolvimento de novas terapias alvo. Micro RNA (miRNA) são pequenas sequências não codificantes de RNA que regulam a expressão dos genes inibindo a tradução da proteína ou promovendo a degradação do RNA mensageiro, estando atualmente envolvidos em vários processos celulares fisiológicos e patológicos, incluindo o câncer. Objetivos: Caracterizar o perfil de expressão de miRNA no CUB, relacionando-o com os parâmetros prognósticos clássicos para a doença: grau histológico e estadiamento. Além disso, relacionar esse padrão de comportamento dos miRNA com a recidiva tumoral e sobrevida câncer-específica em pacientes tratados cirurgicamente para CUB. Material e Métodos: Catorze miRNA (miR-100, miR-10a, miR-21, miR-205, miR-let7c, miR- 125b, miR-143, miR-145, miR-221, miR-223, miR-15a, miR-16-1, miR-199a e miR- 452) foram isolados de espécimes cirúrgicos de 60 pacientes divididos em 2 grupos: 30 pacientes com CUB não invasivo (pTa) de baixo grau submetidos à RTU de bexiga, 30 com CUB invasivo (pT2-3) de alto grau submetidos à cistectomia radical. O grupo controle é representado por cinco pacientes portadores de bexiga normal sem CUB que realizaram tratamento cirúrgico aberto para tratamento da hiperplasia prostática benigna (HPB). O processamento dos miRNA envolveu três fases: (1) extração do miRNA com kit específico, (2) geração do DNA complementar e (3) amplificação do miRNA por PCR quantitativo em tempo real (qRT-PCR). A expressão de cada miRNA foi obtida através do cálculo 2- CT e os RNU-43 e RNU-48 foram utilizados como controles endógenos. Testes estatísticos foram aplicados para estudar as variáveis envolvidas e curvas de Kaplan-Meyer foram usadas para avaliar a sobrevida livre de recidiva (SLR) e sobrevida câncer-específica (SCE). Resultados: Dos 14 miRNA estudados a maioria apresentou subexpressão nos dois grupos de tumor analisados, com exceção do miR-10a para o grupo pTa de baixo grau e do miR-100, 21 e 205 para os tumores pT2/pT3 de alto grau, onde demonstraram-se superexpressos. Essas diferenças de expressão de miRNA entre os dois grupos foram estatisticamente. Quando estudamos a relação entre expressão de miRNA e a evolução dos pacientes através de curvas de sobrevida, observamos que maiores níveis de expressão do miR-21 relacionou-se com menor SLR para tumores pTa. Ainda, maiores concentrações de miR-10a e miR-145 se associaram com menor SLR e maiores níveis de miR-10a com menor SCE para tumores pT2-3. Conclusões: Demonstramos um predomínio de subexpressão de miRNA em xv carcinomas de bexiga. Os miR-100, miR-10a, miR-21 e miR-205 demonstraram diferenças no perfil de expressão para grau e estadiamento dentro dos dois grupos de tumor, sendo capazes de diferenciá-los. Maiores níveis de miR-21 se relacionaram com menor SLR para tumores pTa de baixo grau, enquanto maiores concentrações de miR-10a estiveram associadas com menor SLR e SCE para tumores pT2/pT3 de alto grau / Introduction: Bladder cancer (BC) is the second most common malignancy of the urinary tract, with 386,000 cases estimated and 150,000 deaths in 2011. Urothelial carcinomas (UC) represent 95% of BC cases, and knowledge of the molecular pathways associated with BC carcinogenesis is crucial to identify new diagnostic and prognostic biomarkers, and development of new target molecular therapies. MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNA molecules that play important roles in the regulation of gene expression by acting directly on mRNAs, leading to either mRNA degradation or inhibition of translation, involved in many physiological and pathological processes, including cancer. Objectives: To characterize miRNAs expression profiles in UC, associating with classic prognostic factors: grade and stage. Moreover, correlate miRNA expression with tumor recurrence and survival. Material and Methods: Fourteen miRNAs (miR-100, miR-10a, miR-21, miR-205, miR-let7c, miR-125b, miR-143, miR-145, miR-221, miR-223, miR-15a, miR-16-1, miR- 199a e miR-452) were isolated from surgical specimens from 60 patients classified in two groups: 30 patients with low-grade non-invasive pTa UC that underwent TURB, 30 with high-grade invasive pT2/pT3 UC underwent radical cystectomy. The control group consists in five normal bladder tissue taken from patients that underwent retropubic prostatectomy to treat benign prostatic hyperplasia (BPH). miRNA processing involved three phases: (1) miRNA extraction by specific kits, (2) cDNA generation (3) miRNA amplification through qRT-PCR. Expression profiles were obtained by relative quantification determined by 2-ct method. Endogenous control were RNU-43 and RNU-48. Statistic tests were used to study the prognostic variables and Kaplan-Meyer curves were constructed to analyze disease-free (DFS) and disease-specific (DSS) survivals. Results: All miRNAs were underexpressed in both groups, except miR-10a in pTa and miR-100, 21 and 205 in pT2/pT3 tumors, that where over-expressed. miR-100, miR-21, miR-10a and miR-205 differentialy expressed in both groups and this differences were statistically significant. The Kaplan-Meyer survival curves showed that higher levels of miR-21 were related to shorter DFS for pTa group. Also, higher levels of miR-10a and miR-145 were associated with shorter DFS and higher levels of miR-10a were also related to shorter DSS in pT2/pT3 group. Conclusions: The majority of miRNA were shown to be underexpressed in bladder UC. miR-100, miR-10a, miR-21 and miR-205 were differentially expressed considering tumor grade and stage. The miRNA profile was able to distinguish pTa low grade and pT2-3 high grade tumors. Higher levels of miR- 21 were related to shorter DFS in pTa, while higher levels of miR-10a were associated with shorter DFS and DSS in pT2-3, high grade UC

Introdução: Ocupação foi identificada como o segundo fator de risco mais importante para o câncer de bexiga depois de fumar sendo responsável por até 20% de todos os cânceres de bexiga em países industrializados. Apesar dos esforços consideráveis para investigar ocupações em relação ao risco de câncer de bexiga, muitas não foram encontrados de forma consistente. Material e Métodos: Foram incluídos 200 pacientes com diagnóstico de câncer de bexiga entre os anos de 2009 e 2013. Foi aplicado um questionário para obter informações sobre a profissão, tempo de exposição e hábitos diários, sintomas, e também dados de doenças incluindo estágio, grau e número e tamanho de lesões. Os pacientes do Grupo 1 foram aqueles sem emprego previamente associados com o risco de câncer de bexiga. Grupo 2 representado pacientes em risco devido a profissões. Resultados: Os pacientes do Grupo 2 apresentaram uma proporção significativamente maior de pT2 CaB (P = 0,037), enquanto que os pacientes do grupo 1 apresentaram significativamente mais pTa (p = 0,002) da doença. Analisando preditores de pT2, a presença de ocupação aumento de alto risco por 2,80 vezes a chance de desenvolver uma doença invasiva. Ao analisar o grau do tumor descobriram que um tempo de exposição de 10 anos ou mais aumenta o risco de tumores de alto grau em 4,28 vezes (p = 0,001). Conclusão: Pacientes com história de exposição a agentes cancerígenos devido à sua atividade profissional podem estar em maior risco de desenvolvimento de tumores invasivos e aqueles que estão expostos a estes agentes para mais de 10 anos podem desenvolver doença de alto grau com mais freqüência. População em risco pode, portanto, beneficiar de rastreamento para o câncer de bexiga / Occupation was identified as the second most important risk factor for bladder cancer after smoking accounting for up to 20% of all bladder cancers in industrialized countries. Despite considerable efforts to investigate occupation against the risk of bladder cancer, many have not been found consistently. We included 200 patients diagnosed with bladder cancer between 2009 and 2013. A questionnaire was applied to obtain information about the profession, exposure time and daily habits, symptoms, and also diseases of data including stage, grade and number and lesion size. Patients in Group 1 were those without jobs previously associated with the risk of bladder cancer. Group 2 represented patients at risk because of professions. Group 2 patients had a significantly higher proportion of pT2 CaB (P = 0.037), whereas patients in group 1 had significantly more pTa (p = 0.002) of the disease. Analyzing predictors of pT2, the presence of high-risk occupation increases by 2.80 times the chance of developing invasive disease. In considering the degree of tumor found that a time of 10 or more years of exposure increases the risk of high-grade tumors in 4.28 times (p = 0.001). Patients with a history of exposure to carcinogens because of their duties may be at greater risk of developing invasive tumors and those who are exposed to these agents for more than 10 years can develop high-grade disease more often. Population at risk can therefore benefit from screening for bladder cancer

INTRODUÇÃO: A tuberculose urogenital é rara, tem diagnóstico tardio e é potencialmente destrutiva ao trato urogenital masculino. A bexiga contraída ocorre nas fases tardias de sua evolução e está associada à alta freqüência de exclusão renal unilateral, refluxo vésico-ureteral, estenose ureteral e insuficiência renal. A ampliação vesical é o tratamento padrão para estes casos. O presente trabalho avalia o seguimento tardio de 25 pacientes com bexiga contraída por tuberculose submetidos à ampliação vesical. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Vinte homens e cinco mulheres, com idade mediana de 40 (12 a 60) anos foram estudados. Antes da ampliação, três pacientes estavam em insuficiência renal crônica em programação para transplante renal. Os demais pacientes possuíam exclusão renal funcional unilateral. Em oito casos, a ampliação foi feita com segmento ileocecal não destubulizado, em quatro com sigmóide não destubulizado e em 13 com sigmóide destubulizado. Os pacientes foram submetidos à avaliação clínica, radiológica e urodinâmica pós-operatória. Foi considerado bom resultado, após a ampliação, a presença de intervalo miccional diurno maior que duas horas e a satisfação do paciente avaliada pela pergunta sobre qualidade de vida do questionário \"ICSmaleSF\". RESULTADOS: O seguimento pós-operatório médio foi de 11,1 ± 9,1 (1 a 36) anos com 68% dos pacientes com seguimento maior que cinco anos e 52% maior que 10 anos. Um paciente morreu por um adenocarcinoma na bexiga ampliada após 25 anos de ampliação e seis anos de transplante renal. Após a ampliação, houve manutenção da mesma função renal em todos os pacientes, com exceção de dois casos de evolução para insuficiência renal crônica. Em sete (28%) casos, houve alto resíduo pós miccional com resolução após desobstrução cirúrgica em três casos e autocateterismo nos demais. Bom resultado foi encontrado em 80% dos pacientes operados. O mau resultado foi associado estatisticamente com a utilização do sigmóide não destubulizado (p <= 0,05) e tendeu a se associar com a presença de prostatite por tuberculose (p = 0,09). A comparação dos pacientes de mau com os de bom resultado mostrou que estes apresentaram, ao exame urodinâmico, bexiga ampliada com maior capacidade (p < 0,01), maior complacência (p < 0,01) e sensibilidade normal (p = 0,03). Entretanto, não houve diferença na presença de contrações involuntárias (p = 0,27) entre os dois grupos. Nos pacientes com bom resultado, as contrações iniciaram-se com maior volume de enchimento vesical (p = 0,02). CONCLUSÕES: No seguimento tardio da ampliação da bexiga contraída por tuberculose, 80% dos pacientes atingem intervalo miccional maior que duas horas e a ampliação vesical não contribui para a piora da função renal. O cólon sigmóide deve ser destubulizado, mas o segmento ileocecal pode ser utilizado na sua forma original sem destubulização para a ampliação vesical. O bom resultado com intervalo miccional maior que duas horas necessita de bexiga ampliada com capacidade maior que 250 ml, complacência maior que 20 ml/cm H2O e sensibilidade normal, sem influência da presença de contrações involuntárias. / INTRODUCTION: Urogenital tuberculosis is a rare disease with delayed diagnosis and is potentially destructive for the male urogenital tract. Chronic tuberculous cystitis is a late event in the tuberculosis evolution and is associated with high frequency of unilateral nonfunctioning kidney, ureteral reflux or stenosis and renal failure. Bladder augmentation is the standard treatment in these cases. The present study analyzes the late results of 25 patients with chronic tuberculous cystitis submitted to bladder augmentation. PATIENTS AND METHODS: Twenty men and five women, with median age of 40 (12 to 60) years were evaluated. Prior to augmentation, three patients had chronic renal failure and were in kidney transplantation program. The remaining patients had unilateral nonfunctioning kidney. In eight cases the augmentation was performed with tubularized ileocecal segment, in four with tubularized sigmoid and in 13 with detubularized sigmoid. All patients were submitted to postoperative clinical, radiological and urodynamic evaluation. It was considered a good result the miccional diurnal frequency of more than two hours and the patient?s satisfaction evaluated by the quality of life question from the ICSmaleSF questionnaire. RESULTS: The median follow-up time was 11,1 ± 9,1 (1 a 36) years. In 68% of the patients this time was higher than five years and in 52% higher than ten years. One patient died due to an adenocarcinoma in the augmented bladder 25 years after bladder augmentation and six years after kidney transplantation. After augmentation, all but two patients had the renal function preserved. In seven (28%) cases there was high post-void residue treated by surgery for bladder outlet obstruction in three cases and by intermittent self-catheterisation in the others. Good results were achieved in 80% of the patients. Bad results were statistically associated to augmentation performed with tubularized sigmoid (p <= 0,05) and in patients with prostatitis as a tendency (p = 0,09). The good result patients showed augmented bladder with higher capacity (p < 0,01), higher compliance (p < 0,01) and normal bladder sensation (p = 0,03) in comparison to the bad result patients. However, there was no difference in the frequency of involuntary contractions (p = 0,27) between these two groups. In good result patients the contractions started with higher bladder filling volume (p = 0,02). CONCLUSIONS: At late follow-up of bladder augmentation 80% of the patients with chronic tuberculous cystitis achieve miccional diurnal frequency of more than two hours and the augmented bladder does not contribute to the worsening of the renal function. The sigmoid has to be always detubularized but the ileocecal segment can be used in the tubularized form to augment the bladder. Augmented bladder with capacity of more than 250 ml, compliance of more than 20 ml/cm H2O and normal sensation is necessary to achieve miccional diurnal frequency of more than two hours and there is no interference of the presence of involuntary contractions.

Orientador: Paulo Cesar Rodrigues Palma, Viviane Herrmann / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T10:39:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bellette_PatriciaOdila_M.pdf: 1141308 bytes, checksum: 2b1b008fc3d9ef462a5114d38968193e (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da eletroestimulação do nervo tibial posterior em mulheres com hipótese diagnóstica de Bexiga Hiperativa e suas repercussões na qualidade de vida. Sujeitos e métodos: para este ensaio clínico prospectivo, controlado e randomizado foram convidadas a participar do estudo 37 mulheres consultadas no ambulatório de uro-ginecologia do Hospital das Clínicas (HC) da UNICAMP, que cumpriram os critérios de inclusão e exclusão. Foram aleatoriamente alocadas em dois grupos. Grupo tratamento: as mulheres foram tratadas com o uso da eletroestimulação transcutânea do nervo tibial posterior (n = 21) e Grupo placebo: as mulheres tiveram os eletrodos alocados, mas sem passagem de corrente elétrica (n = 16). No primeiro contato com a paciente foi feito o convite para participar do estudo e realizada uma avaliação fisioterapêutica, incluindo preenchimento do diário miccional de três dias e dos questionários de qualidade de vida (ICIQ, KHQ e OABq). Na aplicação da técnica utilizou-se oito sessões de eletroestimulação transcutânea do nervo tibial posterior. Resultados: A noctúria apresentou melhora significativa no grupo tratamento (p=0,003) e uma tendência de maior melhora no grupo tratado (p=0,054). A frequência urinária diminuiu significativamente no grupo tratamento (p=0,003) e a urgência miccional diminuiu também em ambos os grupos (placebo:p=0,025 e tratamento:p=0,002). Com relação aos questionários utilizados, apenas o OABq foi responsivo, tanto no escore total (p=0,037), quanto no escore severidade (p=0,018). Conclusão: A eletroestimulação transcutânea do nervo tibial posterior é uma ferramenta eficaz no tratamento fisioterapêutico da Bexiga Hiperativa. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of the electrical stimulation of the posterior tibial nerve on the quality of life in women with overactiv bladder syndrome. Subjects and methods: thirty seven women from to Urogynecology Division of the Hospital das Clínicas de Campinas (HC/UNICAMP) were invited to participate in a prospective randomized trial. After screening inclusion and exclusion criteria, they were randomly placed in one of two groups: Treatment group: the women were submitted to tibial posterior nerve electrical stimulation (n = 21) and Sham group: the women had electrodes placed on the tibial posterior nerve, without stimulation (n = 16). At first, the patients were invited to participate in the study and submitted to a physiotherapeutic evaluation, including fulfilling a three days diary, quality of life questionnaires (ICIQ, KHQ an OABq). The approach of the treatment was eigth sessions of electrical stimulation on the posterior tibial nerve. Results: noctury was significantly improved in the treatment group (p=0,003). The urinary frequency was significantly improved in treatment group (p=0,003) and the urgency decreased significantly in both groups (sham:p=0,025 and treatment p=0,002). Comparing the questionnaires applied only the OABq was responsive in both scores, total score (p=0,037) and severity score (p=0,018). Conclusion: The posterior tibial nerve electrical stimulation is an effective physiotherapeutic treatment in overactive bladder. / Mestrado / Mestre em Cirurgia

Orientador: Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T08:00:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramos-Filho_AntonioCelsoSaragossa_D.pdf: 3024613 bytes, checksum: a03a80c65d863acd441249f461461216 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os receptores TRPV4 e TRPM8 são expressos no urotélio e em fibras aferentes sensitivas da bexiga. Fisiologicamente, a ativação mecânica do receptor TRPV4 na parede da bexiga participa do controle miccional. Em doenças de origem inflamatória, esses receptores adquirem funcionalidade importante. As disfunções da bexiga no diabetes podem estar associadas a alterações ao nível de detrusor, inervação e urotélio. A disfunção urotelial parece ser a responsável por desencadear as alterações neurais e musculares da bexiga. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar os mecanismos fisiopatológicos da ativação dos receptores TRPV4 e TRPM8 no estado diabético em camundongos. Para tanto, dividimos o estudo em duas etapas, sendo que na primeira avaliamos a participação dos receptores TRPV4 e TRPM8 nos mecanismos contráteis e relaxantes do detrusor isolado de animais controles e knockout para esses canais. Em uma segunda etapa estudamos a ativação desses canais em camundongos diabéticos pela injeção intraperitoneal de estreptozotocina (180 mg/Kg) por 4 semanas. Em fragmentos do detrusor isolados de camundongos mostramos que o agonista do receptor TRPV4, GSK1016790A, causou resposta contrátil dependente da concentração. Por outro lado, quando os tecidos foram contraídos com solução despolarizante de KCl, o GSK1016790A causou relaxamento da preparação. No detrusor isolado de animais TRPV4-/- verificamos hipercontratilidade ao carbacol (agonista muscarínico) e à estimulação elétrica, assim como redução no relaxamento ao agonista ?-adrenérgico não-seletivo, isoprenalina. Estes efeitos não foram obtidos com os antagonistas dos receptores TRPV4, RN1734 e HC067047. A indução do diabetes causou nocicepção mecânica e aumento da proporção entre bexiga e peso corpóreo após 4 semanas da injeção. A avaliação miccional dos animais diabéticos mostrou aumento da capacidade, frequência urinária e das contrações involuntárias da bexiga. Observamos ainda hipercontratilidade do detrusor ao carbacol, à estimulação elétrica e ao KCl. A indução do diabetes em animais TRPV4-/- não modificou as disfunções "in vivo" e "in vitro" observadas nos animais wyld type diabéticos, mostrando que a ausência crônica dos receptores TRPV4 desencadeia alterações miccionais que são anteriores as causadas pelo diabetes. Também verificamos que os animais TRPM8-/- não apresentam alteração na resposta contrátil ao carbacol e à estimulação elétrica. Por outro lado, o mentol, mas não a icilina, reduziu significativamente as respostas contráteis nestes animais. O mentol inibiu o influxo de cálcio extracelular em cultura de células da musculatura lisa da bexiga por mecanismo inibitório direto nos canais Cav1.2. O tratamento agudo com mentol, intraperitoneal e intravesical, atenuou as disfunções miccionais observadas nos camundongos diabéticos. "In vitro" o pré-tratamento com mentol reduziu a hipercontratilidade ao carbacol no grupo diabético, sem alterar a resposta no grupo controle. Concluímos que o mentol impede a resposta contrátil da bexiga por mecanismo independente do receptor TRPM8 bloqueando o influxo de cálcio extracelular nos canais Cav1,2, podendo ser utilizado como tratamento na hiperatividade de bexiga de origem miogênica / Abstract: The TRPV4 and TRPM8 receptors are expressed in bladder urothelium and sensitive afferent fibers. Physiologically, the mechanical activation of TRPV4 receptor in the bladder wall is involved in micturition control. In inflammatory diseases, these receptors may have important roles. The bladder dysfunction in diabetes may be associated with changes at the level of detrusor, innervation and urothelium. The urothelial dysfunction triggers neural changes, modifying consequently the smooth muscle contractility. Thus, the goal of the present study was to investigate the pathophysiological mechanisms of TRPV4 and TRPM8 receptor activation in physiological and diabetic conditions in mice. For this purpose we divided the study in two phases, the first of which we evaluated the participation of TRPV4 and TRPM8 receptors in detrusor contractile and relaxing mechanisms in control and knockout animals for these channels. In the second phase we studied the activation of these channels in diabetic mice induced by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ; 180 mg / kg, 4 weeks). The TRPV4 agonist GSK1016790A produced concentration-dependent detrusor contractions. On the other hand, in detrusor pré-contracted with KCl (80 mM), GSK1016790A caused relaxation responses. In TRPV4-/- animals, we verified hypercontractility to carbachol (muscarinic agonist) and electrical-field stimulation, as well as a decreased relaxation to isoprenaline (non-selective ?-adrenergic agonist). These effects were not obtained with the TRPV4 antagonists, RN1734 and HC067047. Induction of diabetes with STZ caused hyperglycemia, mechanical nocicepton, and increased ratio between bladder and body weight after 4 weeks. The miccturition evaluationin diabetic animals showed increased capacity, urinary frequency, and non-voiding contractions. Hypercontractility to carbachol, electrical-field stimulation and KCl in isolated detrusor were lso observed. The induction of diabetes in TRPV4-/- animals did not change the urinary dysfunctions. Our data are consistent with the proposal that TRPV4 receptor has a physiological function in micturition control by decreasing muscarinic-induced contractions and increasing ?-adrenergic-mediated relaxations. Moreover, the bladder contractions to carbachol and EFS in TRPM8-/- did not significantly change compared to TRPM8+/+. However, menthol (300 ?M), but not icilin (1 ?M), significantly inhibited these contractile responses. The menthol (300 ?M) inhibited extracellular calcium influx in bladder smooth muscle cell culture by direct mechanism though Cav1.2 channels. In addition the acute treatment with menthol, intraperitoneal and intravesical, atenuated the micturition dysfunctions observed in diabetic mice. Also, detrusor preparations pre-treated with menthol decreased carbachol hypercontractility, without changing the responses in normoglycemic group. Menthol reduces bladder contractions by mechanisms independent of TRPM8 receptor activation, inhibiting extracellular calcium influx through Cav1.2 channel, thus been considered as treatment for bladder overactivity of myogenic origin / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientador: Elizabeth Maria Aparecida Barasnevicius Quagliato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-22T20:16:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_RaimundoNonatoCampos_D.pdf: 2351873 bytes, checksum: aa05f2a60629deedfa05db1c8ace9d8b (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Objetivos: Avaliar em mulheres com doença de Parkinson e disfunções urinárias as correlações dos sintomas urinários com os sintomas motores e disfunções mentais. Verificar a prevalência de hiper-reflexia detrusora (HD), bem como analisar em longo prazo a gravidade do desempenho motor, estadiamento de Hoenh-Yahr, habilidades funcionais, funções neuropsicológicas e a magnitude da progressão desses aspectos clínicos e do declínio cognitivo em pacientes com HD. Sujeitos e Métodos: Estudamos uma coorte ambulatorial de sessenta e três (63) pacientes com DP cujos aspectos neurológicos foram avaliados com a utilização das escalas Unified Parkinson's Disease Rating Scale (UPDRS) e a escala de Hoehn-Yahr. As habilidades funcionais foram avaliadas pela escala Schwab & England e a função urológica foi quantificada pela International Prostatic Symptom Scale (IPSS) e qualificada pelo estudo urodinâmico. Foram então categorizados dois grupos: pacientes com e sem HD. Após sete anos os mesmos parâmetros foram reavaliados e a escala Montreal Cognitive Assessment (MoCA)-versão brasileira foi utilizada para o rastreamento neuropsicológico. Resultados: Na avaliação inicial foi constatada correlação positiva entre os sintomas urinários e a gravidade da doença, porém não havia correlação entre a sintomatologia urinária e os sintomas mentais. Sintomas motores, estágio de gravidade da doença e habilidades funcionais eram mais graves em pacientes com HD. Na reavaliação, os grupos não apresentavam diferença quanto à magnitude da progressão dos sintomas motores, do estadiamento da doença e das inabilidades funcionais. Foi observado no grupo com HD maior declínio cognitivo e uma nítida progressão dos escores mentais com risco aumentado para demência. Conclusão: Hiper-reflexia detrusora é um achado urodinâmico frequente em mulheres com DP e embora esteja associada à pior desempenho motor, estágios de maior gravidade da doença e inabilidades funcionais, não é um fator de maior progressão desses aspectos clínicos. Por outro lado as pacientes com HD tiveram, em longa duração, significante progressão da sintomatologia neuropsicológica.O perfil do declínio cognitivo e o risco para demência necessitam ser confirmados em estudos posteriores / Abstract: Objectives: This long-term study in women with Parkinson's disease (PD) and lower urinary tract dysfunctions aimed to verify the correlation of urinary symptoms with the severity of the disease and mental functions. Verify the prevalence of detrusor hiper-reflexia (DH) and analyze the severity of motor symptoms, Hoehn and Yahr stage, functional abilities and neuropsychological functions, as well as analyze the progression of these clinical aspects and cognitive decline in patients with DH. Subjects and Methods: We studied a cohort of sixty-three (63) PD patients whose neurological aspects were evaluated with the Unified Parkinson's Disease Rating Scale (UPDRS) and Hoehn-Yahr scale. Functional abilities were evaluated by Schwab and England scale and the urological function was quantified by International Prostatic Symptom Scale (IPSS) and qualified by urodynamic study. Two groups were then categorized: patients with and without HD. After seven years the same parameters were re-evaluated and the cognitive functions were assessed with the Montreal Cognitive Assessment (MoCA). Results: At baseline a correlation between urinary symptoms and motor dysfunction was verified but no correlation between urinary symptoms and mental symptoms was observed. The severity of motor symptoms, stage of the disease and functional disabilities were significant in patients with DH. In the follow up, the groups were similar in regards to progression of motor symptoms, Hoehn and Yahr stage and functional disabilities. On the other hand, decline in cognitive function and clear progression of mental scores and risk for dementia was observed in the group with DH. Conclusion: Urinary symptoms are correlated with the severity of the Parkinson's disease. Detrusor hyper-reflexia is a frequent urodynamic finding in women with DP and although it is associated with worse motor performance, stage of the disease and functional disabilities, it is not a factor of greater progression of these clinical aspects of the disease. On the other hand, patients with DH had a significant progression of the neuropsychological symptoms and risk of dementia. The profile of cognitive decline and dementia risk need to be confirmed in subsequent prospective studies / Doutorado / Neurologia / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Cássio Luis Zanettini Riccetto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T12:04:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Palma_ThaisFigueiredo_D.pdf: 5188121 bytes, checksum: 3443d8a70ab4644713a51d88beb4d20c (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: A Síndrome da Bexiga Hiperativa (BH) é definida pela ICS (International Continence Society) como urgência urinária, acompanhada ou não por incontinência e frequentemente associada ao aumento da frequência urinária e noctúria. Objetivo: O objetivo do estudo foi verificar a influência da idade, do índice de massa corporal (IMC) e de antecedentes gestacionais nos sintomas de bexiga hiperativa em mulheres no menacme. Pacientes e Métodos: No total foram avaliados os questionários preenchidos por 1052 mulheres com idade entre 20 e 45 anos na região de Campinas. Foi utilizado o questionário ICIQ-OAB, uma ferramenta específica para bexiga hiperativa, em sua versão validada em Português e uma ficha de avaliação para dados demográficos e história médica, incluindo: idade, peso, altura, paridade e via de parto. Resultados: De modo geral, mulheres com idade entre 35 e 45 anos apresentaram escore do ICIQ-OAB significativamente maior do que todos os outros grupos (20 a 22; 23 a 27 e 38 a 34) (p<0.0001). Mulheres multíparas e primíparas apresentaram escore significativamente maior do que as nulíparas (p<0,001); e os sintomas não diferiram de acordo com a via de parto - vaginal ou cesárea (p=0.0074). Não foram encontradas diferenças significativas no escore entre os grupos de IMC (<18,5; 18,8 a 24,9; 25 a 29,9 e ? 30) (p=0,0066). Também foram encontradas diferenças significativas com relação ao incômodo causado pelos sintomas. Mulheres de 35 a 45 anos se sentem mais incomodadas do que os outros grupos com relação á frequência (p<0.0001), noctúria (p=0.0011), urgência (p=0.0015) e incontinência por urgência (p<0.0001). O incômodo causado pelos sintomas não diferiu entre os grupos de mulheres nulíparas, primíparas e multíparas (p=0,9363). As mulheres com IMC entre 25 e 29,9 apresentaram incômodo maior do que aquelas com IMC entre 18,5 e 24,9, com relação à incontinência por urgência (p=0,002). Conclusões: Na população estudada de mulheres no menacme, os sintomas de bexiga hiperativa são encontrados mais frequentemente e causam mais incômodo em mulheres com idade mais avançada, índice de massa corporal mais elevado e com histórico de pelo menos uma gestação / Abstract: Introduction: Overactive Bladder Syndrome (OAB) is defined by the ICS (International Continence Society) as urinary urgency, with or without urgency incontinence and frequently associated with increase of frequency and nocturia. Objectives: The aim of the study was to verify the influence of age, body mass index (BMI) and obstetric history in the symptoms of overactive bladder in premenopausal women. Patients and Methods: We analyzed a total of 1052 questionnaires that were filled out by women aged 20-45 in the area of Campinas, SP. We chose the ICIQ-OAB questionnaire, a tool that is specific for overactive bladder, in its Portuguese validated version and na assessment form with demographics and medical history, that included: age, weight, height, parity and mode of delivery (vaginal or cesarean). Results: Overall, women aged 35-45 presented higher scores than all other age groups (20 - 22; 23 - 27 and 38 - 34) (p<0.0001). Multiparous and primiparous women presented higher scores than nulliparous ones (p<0,001); and the symptoms did not differ according to mode of delivery ¿ vaginal or cesarean (p=0.0074). No significant differences were found between the BMI groups - <18,5; 18,8 - 24,9; 25 - 29,9 and ? 30 - (p=0,0066). We also found differences regarding symptom bother. Women aged 35-45 were more bothered than all other groups regarding frequency (p<0.0001), nocturia (p=0.0011), urgency (p=0.0015) and urgency incontinence (p<0.0001). Symptom bother did not differ between nuliparous, primiparous and multiparous women (p=0,9363). Women with BMI 25 - 29,9 were more bothered by urgency incontinence than those with BMI 18,5 - 24,9 (p=0,002). Conclusions: In the premenopausal women population of this study, OAB symptoms were found more frequently and cause more bother in older women, with higher BMI and with history of at least one pregnancy / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutora em Ciências

OBJETIVO: Apresentar os resultados da técnica de derivação urinária continente descrita por Macedo, em relação à continência, achados operatórios e complicações cirúrgicas. MÉTODOS: De janeiro de 2006 a novembro de 2016, 29 pacientes foram submetidos à técnica de Macedo. Dados demográficos, tempo de hospitalização, tempo cirúrgico, tempo de seguimento, taxa de continência, capacidade do reservatório e complicações pós-operatórias foram avaliados. RESULTADOS: Sessenta e nove por cento eram masculinos e a mediana de idade foi de 16,9 anos. A etiologia principal foi meningomielocele (69,1%). A média do tempo cirúrgico foi 4,2 h (DP 0,9 2,9-6,3). A mediana do tempo de internação foi 10 dias (IIQ: 11,3; 5-51). A média de seguimento foi 3,3 anos (DP 2,2 0,3 – 9,8). Procedimento no colo vesical foi realizado em 12 pacientes (41,3%). A taxa de continência do conduto cateterizável foi de 82,8%. A capacidade do reservatório aumentou de 134,4 para 364,4 ml (p <0.0001). A taxa de continência melhorou significativamente (20 vs. 74%, p <0.0001). Não houve mudança na taxa de filtração glomerular a longo prazo (143.1 vs. 147 ml/min, p = 0.45). Taxa de morbidade foi 58% (25 complicações em 17 pacientes), 72% ocorreram nos primeiros 60 dias e 60% foram classificadas Clavien-Dindo I ou II. CONCLUSÃO: Nossos resultados em relação a taxas de continência, tempo cirúrgico e complicações demonstram que a enterocistoplastia de Macedo é viável, reprodutível e com bons resultados. / OBJECTIVE: To present the results of technique of continent urinary diversion, described by Macedo, in relation to continence, operative findings and postoperative complications. METHODS: From January 2006 to November 2016, 29 patients were underwent to urinary diversion by Macedo’s technique. Patients demographics, hospitalization time, surgical time, follow up, continence rate, reservoir capacity and postoperative complications were evaluated. RESULTS: Sixty nine percent were male and the median age was 16.9 years. The main etiology was meningomyelocele (69.1%). The mean surgical time was 4.2 hours (SD 0.9 range 2.9-6.3). The median length of hospital stay was 10 days (IQR: 11.3 range 5-51). The mean follow up was 3.3 years (SD 2.2 range 0.3 - 9.8). Procedure in the bladder neck was performed in 12 patients (41.3%). The continence rate of the catheterizable conduit was 82.8%. The reservoir capacity increased from 134.4 to 364.4 ml (p <0.0001). The continence rate improved significantly (20 vs. 74%, p <0.0001). There was no change in glomerular filtration rates in the long term (143.1 vs. 147 ml/min, p = 0.45). Morbidity rate was 58% (25 complications in 17 patients), 72% occurred within the first 60 days and 60% were classified as Clavien-Dindo I or II. CONCLUSION: Our results regarding continence rates, surgical time and complications demonstrated that Macedo’s enterocystoplasty is feasible, reproducible and with good result.

Trabalho prospectivo estudando a matriz extracelular da parede vesical em pacientes com extrofia vesical comparados ao grupo controle, pela microscopia óptica comum e luz polarizada com morfometria, quantificando-se as fibras colágenas e reticulínicas. Estudou-se 17 pacientes de ambos os sexos, biopsiando-se toda a parede vesical e empregando colorações HE, PS e Reticulina. Diferenças estatisticamente significantes foram notadas na análise quantitativa de fibras colágenas e reticulínicas o número de fibras colágenas foi significativamente maior e o número de fibras reticulínicas foi menor no grupo de pacientes com extrofia vesical quando comparado ao grupo controle. / A prospective study was done to evaluate the detrusor muscle\'s extracellular matrix in classical bladder exstrophy in comparison to a control group, by use of light microscopy and polarization method with morphometry, to quantify collagen and reticular fibers. Seventeen patients from both sexes were analysed and samples were obtained from the bladder and stained with Haematoxylin-eosin, Picrosirius red and the silver impregnation method. There were significant differences when comparing the quantity of collagen and reticular fibers. The collagen fibers were more abundant in the exstrophy bladders compared to controls, while the reticular fibers were present in smaller amounts.