O principal fator etiológico da neoplasia do colo do útero é a infecção por HPVs (papilomavírus humano) de alto risco oncogênico, principalmente HPVs 16 e 18. A variabilidade intra-típica de ambos tipos virais tem sido extensivamente estudada. A análise da diversidade genética de isolados oriundos de diferentes regiões dos cinco continentes permitiu traçar a origem e filogenia destes vírus, e sugeriu-se que a evolução destes reflete a relação dos mesmos com seu hospedeiro. Considera-se uma variante molecular de um tipo de HPV um genoma que possui 98% ou mais de identidade nos genes Ll , E6 e E7 com um genoma já descrito. Entretanto, variantes moleculares apresentam aproximadamente 5% de diferença na seqüência da LCR (long contral region). Alguns grupos de pesquisa de diferentes partes do mundo relataram a associação epidemiológica entre variantes específicas de HPVs 16 e 18 e o risco aumentado de infecção persistente e de desenvolvimento de lesão do colo uterino de alto grau. No Brasil foi observada a associação positiva entre variantes não-européias de HPVs 16 e 18 e o risco de lesão do colo uterino em um estudo epidemiológico prospectivo que vem sendo conduzido em São Paulo. Neste estudo foi analisada a atividade transcricional dos promotores P97 e P105 de variantes moleculares de HPVs 16 e 18, respectivamente. A variante asiático-americana de HPV-18, B18-3, apresentou a maior atividade transcricional entre todos os isolados testados. Entre as variantes moleculares de HPV-18, o isolado europeu B18-2 foi o menos ativo transcricionalmente. Entre as amostras de HPV-16, a variante européia B-12 foi a que apresentou a maior atividade transcricional. Foi observado, também, que o promotor P105 de HPV-18 é mais ativo transcricionalmente que o promotor P97. Adicionalmente, foi analisada a capacidade de imortalização de queratinócitos humanos primários por E6/E7 de variantes moleculares de HPV-16. Essas variantes não diferiram muito quanto a eficiência de formação de colônias de queratinócitos crescidos em baixa densidade. Entretanto, a variante asiático-americana gerou um maior número de colônias potencialmente imortalizadas. Esses resultados têm implicações importantes na determinação do risco de desenvolvimento de lesões de colo uterino associadas ao HPV. / Infection by high-risk HPV (human papillomavirus) types, especially HPVs 16 and 18, is the major etiological factor of cervical neoplasia. Intratypic nucleotide variability of both HPV types has been extensively studied. Genetic diversity analyses of isolates from different regions of the five continents permitted to reconstruct the origin and phylogeny of this virus, and suggested that viral evolution reflects the relation between the virus and their host. A molecular variant of HPV possess 98% or more identity in L1, E6 and E7 genes with another viral genome. However, molecular variants have approximately 5% differences within the LCR (long control region). Some research groups from different parts of the world have described the epidemiologic association between specific variants of HPVs 16 and 18 and increased risk of persistent infection and development of squamous intraepithelial lesions. In Brazil, we observed a positive association between non-European variants of HPVs 16 and 18 and risk of cervical lesion in a prospective epidemiologic study that is being conducted in São Paulo. In this study we analyzed P97 and P105 transcriptional activity of molecular variants of HPVs 16 and 18, respectively. The Asian-American variant of HPV-18, B18-3, exhibited the highest transcriptional activity among all isolates tested. Among HPV-18 molecular variants, the B 18-2 European isolate was the less transcriptionally active. Among HPV-16 samples, the B-12 European variant exhibited the highest transcriptional activity. We also observed that the HPV-18 P105 promoter was more active than the HPV-16 P97 promoter. Furthermore, we analyzed the capacity of immortalization of primary human keratinocytes by E6/E7 molecular variants of HPV-16. These variants did not differ much in the efficiency of colony formation by low density keratinocyte plating. However, the Asian-American variant yielded a higher number of colonies potentially immortalized. These results have important implications in the determination of risk for development of HPV -associated cervical lesions.

O Câncer Cervical é um importante problema de saúde pública, causando aproximadamente 270 milhões de mortes anuais. Atualmente, esse câncer é o segundo mais comum em mulheres no mundo, com os maiores índices de incidência ocorrendo nos países em desenvolvimento. O Câncer cervical tem como agente etiológico o Papilomavírus Humano (HPV). O vírus possui DNA circular duplo com genes que codificam oito proteínas, E1, E2, E4, E5, E6, E7 (não estruturais), e L1 e L2 (estruturais) que formam o capsídio viral. A proteína L1 quando produzida em sistema heterólgo de expressão tem a capacidade de auto-arranjo em partículas semelhantes ao vírus chamadas de VLPs (\"Vírus like Particles\"), que são a base das vacinas profiláticas disponíveis, Gardasil® e Cervarix®. Neste trabalho, foram produzidas VLPs da proteína L1 do HPV-16 na levedura metilotrófica Pichia pastoris utilizando dois tipos de vetores de expressão para leveduras, um epissomal e outro integrativo, para os trabalhos de purificação. Inicialmente as amostras obtidas ao final da purificação apresentaram degradação e agregação da proteína L1, além de contaminantes. O protocolo de purificação foi modificado e as amostras obtidas no final do processo de purificação não apresentaram degradação e nem agregação da proteína L1, embora ainda tenha sido detectada a presença de contaminantes e, portanto, as amostras obtidas estavam semi-purificadas. Uma segunda abordagem para o desenvolvimento de uma vacina alternativa foi realizada, na qual foram produzidos candidatos vacinais baseados na proteína L2 do Papilomavírus Humano (L2 do HPV-16, L2 do HPV-18 e L2 Multimérica), e também foram expressas proteínas fusionadas ao domínio ZZ de Staphylococcus aureus, utilizado neste caso como adjuvante. Em geral as proteínas de fusão, ainda que apresentando a fusão em sua forma funcional, geraram uma fraca indução de anticorpos IgG e de anticorpos neutralizantes. Pode-se observar uma produção de anticorpos neutralizantes contra pseudovírus homólogos e heterólogos que dependeu da combinação com os adjuvantes utilizados. Numa tentativa de maximizar a eficiência imunológica dos antígenos utilizados, um novo ensaio de imunização foi realizado com uma formulação conjunta contendo três proteínas (L2 do HPV-16, L2 do HPV-18 e L2 Multimérica), sendo também avaliadas as propriedades de três adjuvantes. A combinação da formulação vacinal com os adjuvantes gerou altos níveis de anticorpos L2-específicos, destacando-se as formulações com o hidróxido de alumínio/MPLA e com a vacina celular Pertussis low. Com a utilização desses adjuvantes, os níveis de anticorpos permaneceram elevados a longo termo. Pode-se observar a imunogenicidade de cada um dos antígenos dependeu de sua formulação com os adjuvantes testados. / Cervical cancer is one of the most important problems of public health, causing nearly 270 million deaths annually. Currently, cervical cancer is the second more common type in women worldwide and the highest incidences occuring in developing countries. Human papillomavirus (HPV) are the ethiologic agents of cervical cancer. HPV have a double-stranded circular DNA genome encoding eight viral proteins, E1, E2, E4, E5, E6, E7 (non-structural), and L1, L2 (structural), the last ones forming the viral capsid. L1 protein expressed in heterologous systems self-assembles into VLPs (\"Virus like Particles\"), the base of prophylactic vaccines available commercially, Gardasil and Cervarix. In this work, we produced VLPs of HPV-16 L1 protein in the methylotrophic yeast Pichia pastoris for purification assays. Initially, samples obtained from purification presented degradation and aggregation of L1 protein and also contaminants. The purification protocol was modified and samples obtained in the new process did not present degradation nor aggregation but the presence of some contaminants could still be detected. Therefore, samples obtained were semi-purified. A second approach to the development of an alternative vaccine was performed with the production of vaccine candidates based on the HPV L2 protein (HPV-16 L2, HPV-18 L2 and Multimeric L2) and we also expressed the same proteins fused to Staphyloccocus aureus ZZ domain, using it as an adjuvant. In general, the fused proteins induced low antibodies titer and low neutralizing antibodies titer when compared to other formulations. Neutralizing antibodies elicited against homologous and heterologous pseudovirus depended on the adjuvant used. In another approach, trying to enhance immunologic antigen efficiencies, an immunization assay was performed with a formulation containing L2 HPV- 16, L2 HPV-18 and Multimeric L2 and the properties of three adjuvants were assessed. The vaccine formulations adjuvanted with alum/MPLA and cellular Pertussis low vaccine induced the highest levels of L2-specific antibodies. In addition, the usage of adjuvants maintained the antibody levels in the long term. The immunogenicity of each antigen depends on the adjuvant combination used.

Background: A maioria dos métodos de rastreamento do câncer de colo de útero depende da colposcopia para a confirmação do diagnóstico. A colposcopia sofre com a falta de disponibilidade, a necessidade de longos deslocamentos por parte das pacientes e longas filas de espera. Objetivo: Avaliar o desempenho da Fotografia Cervical Digital como um método alternativo à colposcopia. Método: Foram realizadas colposcopies e Fotografias Digitais Cervicais em 228 pacientes. As Fotografias Digitais Cervicais foram avaliadas através da internet por três colposcopistas experientes. A concordância entre os métodos foi calculada através de Kappa e as porcentagens de concordância. Sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo e acuracia diagnóstica foram calculados para a colposcopia e a Fotografia Cervical Digital. A histologia foi utilizada como padrão-ouro. Resultados: A Fotografia Cervical Digital e a colposcopia concordaram em 89,9% dos casos (K=0,588). A Fotografia Cervical Digital e a colposcopia apresentaram desempenhos comparáveis, a sensibilidade foi de 52,5% e 35,0%, a especificidade de 91,86% e 91,28%, o valor preditivo positivo de 60,0% e 48,3%, valor preditivo negativo de 89,3% e 85,8%, e a acurácia diagnóstica de 84,4% e 80,7%, respectivamente. Conclusão: A Fotografia Cervical Digital é um método alternativo promissor à colposcopia. / Background: Most cervical cancer screening methods relies on colposcopy to confirm the diagnosis. Colposcopy suffers from the lack of availability, long patients’ displacement and waiting times. Objective: Evaluate the performance of the Cervical Digital Photography as an alternative method to colposcopy. Methods: Colposcopy and Cervical Digital Photography were performed in 228 women. The Cervical Digital Photographs were evaluated through internet by 3 colposcopy experts. The agreement between methods was calculated with kappa and percentages of agreement. Sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and diagnostic accuracy were calculated for colposcopy and Cervical Digital Photography. Histology was the gold standard. Results: Cervical Digital Photography and colposcopy agreed in 89.9% of the cases (K=0.588). Cervical Digital Photography and colposcopy had comparable performances, sensitivity was 52.5% and 35.0%, specificity was 91.86% and 91.28%, positive predictive value was 60.0% and 48.3%, negative predictive value was 89.3% and 85.8%, and diagnostic accuracy was 84.4% and 80.7%, respectively. Conclusion: Cervical Digital Photography is a promising alternative method to colposcopy.

Foi realizada uma análise quantitativa sistemática da literatura para verificar a acurácia do biomarcador ProEx C em pacientes com ASC-US, ASCH e SIL. Metodologia: A pesquisa foi realizada no MEDLINE (PubMed e OVID), EMBASE, LILACS, IBECS, BIOSIS, Web of Science, SCOPUS, desde 1966 até Novembro de 2011. Esta revisão esteve centrada em estudos que cumpriram as três condições para a seleção do estudo, que incluem teste de Papanicolaou, teste de triagem ProEx C e histopatologia como o teste de referência. Resultados: Cinco estudos, incluindo 713 mulheres, foram analisados. Das biopsias positivas, 83% (355/429) foram positivas para ProEx C, enquanto 14% (41/284) das biópsias negativas foram positivas para ProEx C. A sensibilidade combinada foi de 83% (95% IC, 79-87) e especificidade foi de 85% (95% IC, 80-89) usando o soaftware Meta-Disc. Para lesão cervical vs biópsia positiva ou negativa, a área sob a curva (AUC) foi de 0,90 com valor do ponto Q * de 0,84. Conclusão: nossos dados concordam com a hipótese de que ProEx C representa um evento precoce na carcinogênese cervical e que poderiam estar associados com a iniciação e progressão de lesões cervicais e, se expressados nos exames estudados podem revelar maior acurácia diagnóstica destes exames. / Undertook a quantitative systematic review of the literature to ascertain the accuracy of the biomarker ProEx C in patients with ASC-US, ASC-H and SIL. Methods: A comprehensive search of the MEDLINE (PubMed and OVID interface), EMBASE, LILACS, IBECS, BIOSIS, Web of Science, SCOPUS, index from 1966 to November 2011. This review focused on studies that fulfill the three mandatory conditions for study selection that include Pap Test, triage testing ProEx C and histopathology like the reference test. Results: Five studies, including 713 women, were analyzed. 83% (355/429) of positive biopsy were positive for ProEx C activity, while 14% (41/284) of the negative biopsy were positive for ProEx C activity. Pooled sensitivity was 83% (95% IC, 79 to 87) and specificity was 85% (95% IC, 80-89) using software Meta-Disc. For cervical lesion vs positive or negative biopsy, the area under the curve (AUC) was 0.90 with Q* point value of 0.84. Conclusion: our data agree with the hypothesis that ProEx C represents an early event in cervical carcinogenesis that could be associated with the initiation and progression of cervical lesions and is expressed in the studied tests may reveal greater diagnostic accuracy of these tests.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Ludmila_Goncalves_Entiauspe.pdf: 1808464 bytes, checksum: 8834f78745c1e2d7f757d36d4797ef5c (MD5) Previous issue date: 2013-03-08 / Estimates show that approximately 80% of sexually active women will be infected by the Human Papillomavirus (HPV) in some point of their life course, and HPV DNA has been found in 99,7% of cervical cancer (CC) cases. Thus, several factors may contribute to CC development, including co-infections with Human Immunodeficiency Virus (HIV), as well as genetic factors, including TP53 and MDM2 polymorphisms. Some authors have associated CC development risk, among women infected with oncogenic HPV strains, with the Arg72Pro TP53 SNP. The MDM2 protein plays an important role in p53 protein regulation and, thus, a MDM2 SNP referred as SNP309 may also be implicated in CC risk in association with high-risk HPV genotypes. The present work aimed at determining the frequencies of HPV infection and identification of its genotypes, as well as the frequencies of the SNPs Arg72Pro and SNP309 and their associations with CC risk in female HIV-positive and negative populations in the city of Pelotas. It has been observed a prevalence of HPV infection of 30% among HIV-negative women, and 68% in the positive group. The HPV-16 genotype was the most prevalent in the HIV-negative group, and HPV-6 in the positive group. Among HPV-positive women, the TP53 Arg/Arg genotype was the most prevalent in both HIV groups, and the SNP309 TT genotype was the most prevalent in the HIV negative group, and the TG genotype in the positive group. These findings suggest that future investigations in larger populations are necessary and of interest to better understand the potential roles of these SNPs in HPV infected women. / Estimativas mostram que cerca de 80% das mulheres sexualmente ativas estarão infectadas pelo Vírus do Papiloma Humano (HPV) em algum momento de suas vidas, o que DNA-HPV tem sido encontrado em 99,7% dos casos de câncer cervical (CC). Assim, vários fatores podem contribuir para o desenvolvimento do CC, incluindo coinfecções como o vírus da Imunodeficiência Humana (HIV), bem como fatores genéticos, incluindo os polimorfismos nas proteínas p53 e MDM2. Alguns autores relacionam um maior risco ao desenvolvimento de CC em mulheres infectadas com genótipos oncogênicos do HPV e que apresentam polimorfismo do gene supressor de tumor TP53 (SNP Arg72Pro). A proteína MDM2 apresenta um papel importante na regulação da p53, e assim como o SNP Arg72Pro da p53, o SNP309 da MDM2 (substituição de T por G) também pode favorecer o desenvolvimento de CC quando associado a genótipos de HPV de alto risco. O presente trabalho objetivou conhecer o grau da extensão de infecção pelo HPV e identificação de seus genótipos, frequência do SNP Arg72Pro e MDM2 SNP309 e associação ao risco de CC, na população feminina HIV positiva e negativa residente em Pelotas. Foi observada uma prevalência de infecção por HPV em 30% no grupo HIV negativo e 68% no grupo HIV positivo. O genótipo de HPV mais prevalente no grupo HIV negativo foi o HPV-16, e HPV-6 no grupo HIV positivo. Nas HPV positivas, o genótipo Arg72Arg foi o mais prevalente em ambos os grupos, e o SNP309 TT para o grupo HIV negativo e TG para HIV positivo. Os resultados encontrados mostram que futuros estudos em populações maiores são necessários para um melhor entendimento destes SNPs em mulheres infectadas por HPV.

Orientador: Antonio Carlos de Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Física / Made available in DSpace on 2018-08-16T13:36:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moura_MelissaLuiza_M.pdf: 5391341 bytes, checksum: 1aaa11b5c3366a4040a0fe7a901723f9 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A síndrome tensional cervical (STC) é a tensão no músculo trapézio decorrente de atividades repetitivas e aumento da carga muscular estática associados à postura inadequada da cintura escapular. O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia da bandagem funcional (BF) e da corrente interferencial (CI) no alívio da dor da STC através da escala visual analógica da dor (EVA) e, confrontar as respostas dos sinais eletromiográficos do músculo trapézio descendente antes e após cada intervenção. 30 voluntárias do sexo feminino, com hipótese diagnóstica de STC foram avaliadas, com média de idade, estatura e massa corpórea de 28,2 anos, 1,61 m e 59,2 kg, respectivamente. Foram divididas em três grupos, com 10 indivíduos cada: Grupo Bandagem Funcional (GBF) - intervenção de 24 horas com bandagem funcional no músculo trapézio superior; Grupo Corrente Interferencial (GCI) - três dias consecutivos (GCI dia 1, 2 e 3) com intervenção de eletroterapia de 30 minutos cada dia; Grupo Controle (GC) - 30 minutos em repouso. Antes e após as intervenções foram mensuradas as respostas subjetivas da dor através da EVA e, as respostas da atividade elétrica da musculatura. Utilizou-se estatística descritiva para caracterização da amostra, apresentando valores referentes às variáveis selecionadas no estudo. Para os valores expressos em RMS e FM foi utilizado o teste de normalidade Shapiro-Wilk. Utilizou-se a análise de variância (ANOVA) one way, para análise entre os tratamentos no momento após. O teste t foi utilizado para análise intragrupos, comparando antes e após de cada grupo, e antes do GCI dia 1 com o após do GCI dia 3. Para a análise da EVA foi utilizado o teste de normalidade Shapiro-Wilk. Para a comparação das variações da EVA (antes e após as intervenções) utilizou-se o teste não paramétrico de Mann Whitney e quando normal, teste t. O nível de significância adotado foi de 5%. Os valores subjetivos da dor indicados pelas voluntárias através da EVA antes de iniciar o teste, com ou sem intervenção, foram maiores do que após o mesmo, indicando um quadro álgico doloroso. A variação percentual entre antes e após a intervenção da dor foi significativamente maior em GBF (70,75%) e GCI dia 3 (81,45%), em relação ao GC (5,83%) (p<0,05), representando diminuição significativa da dor com a intervenção. Já quanto à variação eletromiográfica em RMS e em FM não apresentou diferença estatisticamente significativa em nenhuma intervenção. Os resultados demonstram que a utilização de intervenções como BF e/ou CI em procedimentos fisioterapêuticos são alternativas igualmente eficazes para diminuição da percepção subjetiva da dor. Já através da EMG há aumento no recrutamento muscular para exercer contração isométrica voluntária máxima após intervenção de ambos os recursos avaliados. / Abstract: Cervical tension syndrome (CTS) is the tension in the trapezius muscle due to repetitive activities and increased static muscle load associated with bad posture of the shoulder girdle. The aim of this study was to compare the effectiveness of taping (BF) and interferential current (IC) in relieving the pain of CTS by the visual analogue scale (VAS), and compare the electromyographic responses (EMG) of the upper trapezius muscle before and after each intervention. 30 female volunteers with the diagnosis of CTS were evaluated, mean age, height and body mass index of 28.2 years, 1.61 m and 59.2 kg, respectively. Were divided into three groups, with 10 subjects each: Group Taping (GBF) - 24-hours of taping intervention on upper trapezius muscle, Group Interferential Current (GCI) - three consecutive days (GCI days 1, 2 and 3) with 30 minutes each day of electrotherapy intervention; Control Group (GC) - 30 minutes lying. Before and after the interventions were measured the subjective responses of pain by VAS, and the responses of the electrical activity of muscles. We used descriptive statistics to characterize the sample, with values on the variables selected in this study. The values expressed in EMG was used the normality test Shapiro-Wilk. We used analysis of variance (ANOVA) one way for analysis between treatments at the time after it. The t test was used for intragroup analysis, comparing before and after each group, and before the first day with the GCI with the GCI after the third day. For the analysis of VAS was used the normality test Shapiro-Wilk. For comparison of changes in VAS (before and after the interventions) used the Mann Whitney non parametric test and when normal, t test. The level of significance was 5%. Subjective values of pain indicated by the volunteers through the VAS before starting the test, with or without intervention, were higher than after the same, indicating painful. The percentage change between before and after the intervention of pain was significantly higher in the GBF (70.75%) and GCI day 3 (81.45%) compared to CG (5.83%) (p <0.05), representing a significant decrease in pain with the intervention. For the EMG variation in RMS and FM the statistics were not significant in any intervention. The results demonstrate that the use of interventions such as BF and/or IC in physical therapy procedures are equals effective alternative to reduce the subjective perception of pain. Already there is an increase over the EMG of muscle recruitment to exert maximal voluntary isometric contraction. / Mestrado / Ciencia do Desporto / Mestre em Educação Física

Orientadores: Sophie Françoise Mauricette Derchain, Cecilia Maria Roteli Martins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T07:54:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gontijo_RenataClementino_D.pdf: 141945 bytes, checksum: 2c58c2feab74004e7047e409bad433a0 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Introdução: Mulheres com resultado de citologia negativa e sem infecção pelo papilomavírus humano (HPV) têm teoricamente um risco quase nulo de terem uma lesão intra-epitelial escamosa cervical de alto grau ou câncer invasor. Porém, muitas mulheres com citologia negativa e colo uterino morfologicamente normal são infectadas pelo HPV, e o significado clínico desta infecção em relação ao risco de vir a apresentar anormalidades citológicas ou histológicas futuras ainda não está totalmente esclarecido. Objetivo: Investigar a incidência em 24 meses de alterações citológicas e histológicas cervicais segundo a detecção do HPV, em mulheres com citologia inicial normal, incluídas na coorte Latin American Screening study (LAMS). Material e métodos: Um grupo de 365 mulheres com resultado de citologia normal e resultado de Captura Híbrida II (CH II) para HPV de alto risco oncogênico positivo e negativo, foram seguidas por 24 meses em Campinas e São Paulo. Todas as mulheres responderam a um questionário referente aos fatores sociodemográficos e reprodutivos, e foram submetidas à coleta de material para citologia oncológica e CH II. As mulheres com pelo menos um exame positivo e uma amostra aleatória de 10% de mulheres com ambos os testes negativos foram convocadas para colposcopia com biópsia, se necessário, e seguimento semestral com citologia e colposcopia. Foram comparadas as mulheres com infecção pelo HPV com aquelas não infectadas, segundo as características sociodemográficas e reprodutivas, utilizando-se o cálculo do risco relativo (RR) e a análise de regressão logística em stepwise com intervalo de confiança (IC) de 95%. Foram calculados também a taxa de incidência e o RR com IC de 95% de desenvolver anormalidades citológicas ou histológicas durante o seguimento. Tomou-se como padrão-ouro a colposcopia. Quando a colposcopia foi normal ou quando a biópsia apresentou cervicite, as mulheres foram consideradas como diagnóstico negativo. As mulheres cuja biópsia foi compatível com neoplasia intra-epitelial cervical (NIC) grau 1 ou mais foram consideradas como diagnóstico positivo. Resultados: A incidência de lesões de baixo e alto graus na citologia foi maior entre as mulheres com resultado de CH II positivo, tanto aos 12 quanto aos 24 meses de seguimento. Até 12 meses de seguimento, mulheres com CH II de rastreamento positivo apresentaram um RR significativamente maior de lesões de baixo (1,4; IC 95% 1,1-1,7) e alto (1,5; IC 95% 1,4-1,7) graus na citologia. O RR para lesão de alto grau aumentou para 1,7 (IC 95% 1,5-1,9) naquelas acompanhadas por 24 meses. Em relação aos resultados histológicos, a incidência de NIC 1, 2 e 3 também foi maior entre as mulheres com resultado de CH II positivo, tanto aos 12 quanto aos 24 meses de seguimento. As mulheres com CH II positivo apresentaram um RR de 1,5 (IC 95% 1,4-1,6) para NIC 2 e 3 durante o seguimento até 12 meses e este RR aumentou para 1,7 (IC 95% 1,5-1,9) naquelas seguidas até 24 meses. Conclusão: O teste para detecção do HPV associado à citologia pode selecionar entre as mulheres com citologia normal aquelas com maior risco de lesão cervical subseqüente / Abstract: Introduction: Women with normal baseline cytology and non-infected by Human papillomavirus (HPV) have, in theory, no risk to develop a high-grade cervical intraepithelial lesion or cancer. However, many women with normal cytology and with morphologically normal uterine cervix are HPV infected, and, the clinical significance of this infection regarding to the risk of devoloping cytological or histological abnormalities in the future are not totally clear yet. Purpose: To investigate the incidence of cytological and histological cervical lesions in a 24 months follow-up, according to HPV detection among women with baseline normal cytology result, in a subgroup of women included in the Latin American Screening study (LAMS). Study design: A group of 365 women with normal Pap smear whatever the Hybrid Capture (HC) II test result were followed for 24 months at Campinas e São Paulo (Brazil). They answered a questionnaire regarding sociodemographic and reproductive factors and were submitted to a clinical exam, including Pap smear and HC II. Women with at least one positive result and a 10% random sample of women with both tests negative were referred to colposcopy and followed with cytology and colposcopy in a six-month interval. Women with positive and negative HPV test were compared regarding sociodemographic and reproductive factors using relative risk (RR) and stepwise logistic regression analysis calculated with 95% confidence interval (CI). Also the incidence rate and RR of developing any cytological or histological abnormality during the follow-up were calculated within 95% confidence limits. Colposcopy was considered as the gold standard. When colposcopy result was normal or biopsy result was cervicitis it was considered as negative diagnosis. Women with histologic diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) 1 or higher were considered as positive diagnosis. Results: Incidence of low and high-grade cytological lesion was higher in women with positive HPV testing than in women with negative HPV testing after 12 and 24 months of follow-up. In up to 12 months of follow-up, women with baseline positive HPV test had a significantly higher proportion of low-grade (1.4; 95% CI 1.1-1.7) and high -grade (1.5; 95%CI 1.4-1.7) cytological lesion. The RR for high-grade lesion increased to 1.7 (95%CI 1.5-1.9) for those followed-up in up to 24 months. For histological outcomes, the incidence of CIN 1, 2 or 3 was also higher in women with positive HPV testing than in women with negative HPV testing after 12 and 24 months of follow-up. Women with positive HPV test had a higher RR of CIN 2 and 3 (1.5; 95%CI 1.4-1.6) during the follow-up in up to 12 months and the RR increased to 1.7 (95%CI 1.5-1.9) for those followed-up in up to 24 months. Conclusions: HPV test is useful in addition to cytology to select from women with normal cytology those who are at highest risk for underlying cervical lesion / Doutorado / Tocoginecologia / Doutor em Tocoginecologia

A proposta deste trabalho foi analisar qualitativa e semiquantitativamente, em M.E.V. - Técnica Convencional, por Retroespalhamento de Elétrons (BSE) e por Espectroscopia de Dispersão de Raios-X (E.D.S.) - a microestrutura dentinária de dentes em diferentes condições clínicas. Formaram-se 7 grupos, com 5 dentes cada grupo: I- inclusos jovens (IJ); II- hígidos jovens (HJ); III- hígidos adultos (HA); IV- com lesão cariosa oclusal (LCO); V- com lesão cariosa cervical (LCC); VI- com exposição radicular (ER) e VII- com lesão cervical não cariosa (LCNC). Após as extrações, os dentes foram imediatamente fixados em Karnovsky. As porções radiculares e o esmalte coronário foram seccionados, preservando-se o terço cervical dos dentes. Os espécimes dentários foram divididos em duas metades, ambas contendo as superfícies vestibulares quanto as linguais, totalizando 70 espécimes. Cuidado especial foi tomado nos grupos com LCO, LCC e LCNC, garantindo que as lesões fizessem parte de suas duas secções. A análise morfológica foi realizada sobre área de dentina fraturada, em três regiões: próximo à superfície externa, no terço médio e próximo à polpa. Os espécimes foram desidratados em concentração ascendente de etanol e secados em ponto crítico. Metade dos espécimes foi metalizada com ouro, para análise em M.E.V., e a metade homóloga com carbono, para observação em E.D.S. e BSE. Os grupos IJ e HJ não mostraram alterações morfológicas, tanto na lingual quanto na vestibular. As dentinas peritubular e intertubular e os prolongamentos odontoblásticos (POs) estavam evidentes por toda a extensão dentinária, assim como fibrilas de colágeno margeando toda a superfície interna dos túbulos dentinários (TDs), muitas vezes lembrando a lâmina limitans (LL). Os grupos LCC e LCO mostraram grande quantidade de cristais e estruturas tubuliformes (ETfs) na dentina abaixo das lesões, além das demais estruturas vistas no grupos anteriores. A face lingual das LCCs mostrou-se ausência de estruturas intratubulares (EITs). O grupo ER não apresentou EITs. Entretanto, nesse mesmo grupo, os TDs próximos à superfície mostraram-se mais atrésicos quando comparados aos grupos IJ e HJ e a LL era visível por toda a extensão dentinária. Os grupos HA e LCNC mostraram-se muito semelhantes entre si, com cristais obstruindo parcial ou totalmente os TDs. Próximo à região pulpar, os TDs mostravam cristais ao redor dos POs. O grupo LCNC, particularmente, apresentou ETfs com características distintas dos grupos LCC e LCO, pois estas apresentaram-se nos três terços dentinários em menor quantidade. As imagens em BSE mostraram a DI menos mineralizada que a DP, e cristais e as ETfs com características reflexivas semelhantes à DP, identificando-se como es-truturas mineralizadas. No grupo LCNC, notou-se POs e as membranas, ambos com certa reflexão, revestindo os TDs, sugerindo um processo de mineralização. A análise estatística, após obtenção dos valores semiquantitativos em E.D.S., mostrou que todos os grupos continham, na dentina e nas EITs, Ca, P, Mg e S, com exceção da dentina peritubular do grupo LCC que não detectou Mg em sua composição. As estruturas que mostraram maior concentração de Mg foram as ETfs do grupo LCNC. Não houve diferença estatística na razão Ca/P entre as dentinas e EITs / The purpose of this study was to analyze, qualitatively and semiquantitavely, with SEM, BSE and EDS, the dentin microstructure in teeth with different clinical conditions. The teeth were divided in 7 groups (n=5 each one): I- Young non erupted teeth (YNET), II- Young sound teeth (YST), III- Old sound teeth (OST), IV- Occlusal carious lesion (OCL), V- Cervical carious lesion (CCL), VI- Root exposure (RE) and VII- Non carious cervical lesion (NCCL). After extraction the teeth were immediately fixed in Karnovsky. Crows and root were cut off in such a way to preserve the cervical third for the purposes of this investigation. The cervical specimens were fractured in two halves, both containing the lingual and buccal cervical surfaces, totaling 70 specimens. Special care was taken with OCL, CCL and NCCL groups during the fracture to ensure that both fragments enclosed part of their respective lesions. The morphological analysis was performed on the fractured dentin surfaces of both fragments, in three regions: near the external surface, on the middle third and near the pulp chamber. The specimens were dehydrated in ascending series of ethanol concentrations and critical point dried. Half of the specimens were gold sputtered for SEM analysis and the homologous half carbon coated for BSE and EDS observation. The YNET and YST groups showed no morphological changes in both buccal and lingual surfaces. The PD and ID and the OPs were evident throughout the dentin extension. The collagen fibrils were observed layering the walls of dentin tubules in their entire length, resembling the LL. The CCL and OCL groups showed a great amount of Crs and TSs, together with the other same features seen in the previous groups. The lingual surface of the CCL was distinct from the buccal surface and the OPs were limited to the third near the pulp on both surfaces. The RE group did not reveal intratubular structures (ITS). However, on the same group, the diameter of the dentin tubules near the surface was smaller compared to YNET and YST groups and the LL was visible throughout the dentin extension. The OST and NCCL groups were very similar, with Crs partially or totally obstructing the DTs. Near the pulp, the DTs showed Crs around the OPs. The TSs seen in NCCL group were distinct from that of CCL and OCL groups, because these structures were presented in all dentin extension and in a smaller number. The BSE images showed that the intertubular dentin is less mineralized than peritubular dentin. However, TSs and Crs showed the same reflective characteristics of the PD, looking like mineralized structures. In NCCL group, the OPs and the membranes-like structure surrounding the tubules presented some reflection, suggesting a mineralization process of these structures. Statistical analysis after EDS data showed that dentin surface and TSs of all groups contained Ca, P, Mg and S, except the PD of the CCL group, where the Mg was not detected. The tubular structures presented in the NCCL group showed increasing in Mg concentration. There was no statistical difference in the Ca/P ratio between the dentin and the TSs from all groups.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:28:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zair Tese de Doutorado.pdf: 879027 bytes, checksum: d3922b341c9f21810668b448ea6e2a9c (MD5) Previous issue date: 2011-08-17 / OBJECTIVE: To investigate whether women with altered cervical cytopathological outcomes have been referred to Medium Complexity Units (MCU) as in accordance with the Brazilian Ministry of Health guidelines, as well analyze the perception of these womens about the attention received and the psychologic aspects that involved the diagnosis and treatment. METHODS: Descriptive, exploratory, quantitative and qualitative study based on the cytopathological outcomes of the BHS users carried out in Basic Health Assistance Units (BHAU) referred to Medium Complex Units (MCU) in the municipality of Goiânia, State of Goiás, 2005/2006. We assessed 1.109 records regarding the Brazilian Ministry of Health/the National Institute of Cancer guidelines as established by the Brazilian Nomenclature for Cervical Outcomes and Preconized Clinical Practice. Data was analyzed and processed by using Epi-info 3.3.2, 2006 and Microsoft Excel 2007. Variables were assessed descriptively, through calculus of relative and absolute frequency. For qualitative analysis, the interview method were used containing the subject caracterization and two guiding questions: one with negative polarity and other with positive polarity. RESULTS: From the total number of referrals, 79% were not in accordance with the Brazilian Ministry of Health guidelines which originated a great number of unnecessary procedures. The qualitive analysis explicitated fails on the professional attendance and in this attendance flow regarding to comunication about the actions relatives to treatment, services humanization and no observations of the established flow. The psycosocial aspects demonstrated that women didn t receive the necessary psicological attention to minorate the feelings of pain, despair, shame and, most of all, fear of death and mutilations. CONCLUSIONS: We observed inadequate referrals to the MCUs, which demanded a big number of unnecessary procedures. In women s perception, the attendence was permeated by fails in the reception, in communication, professional assistence, lack of knowledge about the attendence flow. The psycosocial aspects demand treatment integrality with multiprofessional teams working according to a biopsycosocial model. / OBJETIVOS: Investigar os encaminhamentos de mulheres com resultados de exames citopatológicos com atipias de significado indeterminado e lesões precursoras ou invasivas do colo do útero para a Unidade de Média Complexidade (UMC) segundo as recomendações do Ministério da Saúde (MS); analisar a percepção dessas mulheres sobre a atenção recebida e os aspectos psicossociais que envolveram o diagnóstico e tratamento das mesmas. METODOLOGIA: Estudo descritivo, exploratório, quantitativo e qualitativo com base nos resultados dos exames citopatológicos de mulheres encaminhadas das Unidades de Atenção Básica de Saúde (UABS) para a Unidade de Média Complexidade (UMC) do Município de Goiânia-GO, no período de 2005 e 2006. Foram analisados 1.109 prontuários de acordo com as recomendações da Nomenclatura Brasileira para Laudos Cervicais e Condutas Clínicas Preconizadas. Para o processamento e análise dos dados quantitativos foram utilizados os programas Epi-info 3.3.2. 2006 e Excel 2007. As variáveis foram estudadas de maneira descritiva, através do cálculo de frequências absolutas e relativas. Para análise qualitativa utilizou-se o método de entrevista contendo a caracterização dos sujeitos e duas questões norteadoras: uma com polaridade negativa e outra com polaridade positiva. RESULTADOS: Observou-se que 79% dos encaminhamentos para a UMC não estavam em conformidade com as recomendações do MS. A análise qualitativa explicitou falhas no atendimento profissional quanto à comunicação sobre as ações relativas ao tratamento, à humanização dos serviços e a não observação do fluxo estabelecido. A análise dos aspectos psicossociais demonstrou que as mulheres não receberam a atenção psicológica necessária para minorar os sentimentos de dor, desespero, vergonha e, principalmente, do medo da morte e das mutilações. CONCLUSÕES: Verificou-se elevada frequência de encaminhamentos inadequados para a UMC, o que demandou um alto percentual de procedimentos desnecessários. Na percepção das mulheres, o atendimento foi permeado por falhas no acolhimento, na comunicação, na assistência profissional e no desconhecimento do próprio fluxo de atendimento. Os aspectos psicossociais demonstraram a necessidade da integralidade do tratamento com equipes multiprofissionais trabalhando em um contexto biopsicossocial.

Orientadores: Luiz Carlos Zeferino, Silvia Helena Rabelo dos Santos / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T06:30:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Westin_MariaCristinadoAmaral_D.pdf: 3122088 bytes, checksum: 3d2afed3690cd3566bbb3fe26bb492a3 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Introdução: O carcinoma escamoso do colo uterino é precedido pela neoplasia intraepitelial cervical grau 3 (NIC 3). A invasão tumoral envolve a degradação da matriz extracelular e membrana basal do epitélio por enzimas proteolíticas denominadas metaloproteinases (MMPs). Os inibidores teciduais das metaloproteinases (TIMPs) também interferem no processo de invasão. Angiogênese é condição indispensável para a progressão tumoral. Objetivo: Analisar a expressão de MMP-2, MMP-9, MMP-14, TIMP-1, TIMP-2 e VEGF-A na NIC 3 e carcinoma do colo uterino. Sujeito e Métodos: Estudo do tipo comparativo observacional constituído de três grupos:- Grupo 1: 55 casos com diagnóstico de NIC 3, Grupo 2: 30 casos com NIC 3 e carcinoma associados e Grupo 3: 46 casos com carcinoma. A expressão protéica foi pesquisada separadamente nas células tumorais e estromais por reação imunoistoquímica. Para estabelecer a porcentagem de células imunopositivas utilizou-se software morfométrico. Análise Estatística: Aplicou-se o Teste T-pareado ou de Mann-Whitney ou Wilcoxon Signed Rank. Resultados: Em todos os grupos, a expressão tumoral de MMP-14 foi maior que a estromal. Inversamente, a expressão de TIMP-2 foi maior nas células estromais que nas tumorais, em cada grupo diagnóstico. A expressão de MMP-9 foi maior nas células estromais que nas tumorais, com exceção do componente invasor do Grupo 2. A expressão estromal de TIMP-1 foi maior que a tumoral no carcinoma e, ao contrário, sua expressão foi maior nas células tumorais da NIC 3. A expressão de VEGF-A foi maior apenas nas células tumorais da NIC 3. Comparando a expressão dos marcadores entre os grupos, foram encontradas as maiores diferenças entre grupos extremos, ou seja, entre NIC 3 e carcinoma. A expressão de MMP-2 nas células estromais foi maior no componente NIC 3 do Grupo 2 que no NIC 3 do Grupo 1. A expressão de VEGF-A nas células estromais do carcinoma foi maior que nas células estromais da NIC 3. Conclusões: Os resultados deste estudo sugerem que a expressão de TIMP-1 aumenta nas células do estroma e diminui nas células tumorais quando a NIC 3 progride para carcinoma invasor. MMP-9 e TIMP-2 tiveram expressão similar na NIC 3 e no carcinoma, o que limita inferências sobre seu papel na progressão neoplásica. O padrão imunoistoquímico da expressão das MMPs, TIMPs e VEGF-A na NIC 3 e no carcinoma invasivo, quando estas lesões estavam associadas, foi semelhante. A expressão do VEGF-A foi maior nas células tumorais do que nas estromais da NIC 3, porém quando esta lesão progride para carcinoma invasivo sua expressão aumenta nas células do estroma e não se altera nas tumorais. A expressão de MMP-14, MMP-2, TIMP-1 e VEGF-A aumentou com a gravidade da neoplasia / Abstract: Introduction: Squamous cell carcinoma of the cervix is preceded by cervical intraepithelial neoplasia grade 3 (CIN 3). Tumor invasion involves degradation of extracellular matrix and epithelium basement membrane by proteolytic enzymes called metalloproteinases (MMPs). Tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) are also involved in the invasion process. Angiogenesis is a prerequisite for tumor progression. Objective: To analyze the expression of MMP-2, MMP-9 and MMP-14, TIMP-1, TIMP-2 and VEGF-A in CIN 3 and invasive carcinoma. Subject and Methods: This comparative observational study was consists of three groups: Group 1: 55 cases diagnosed with CIN 3, Group 2: 30 cases with CIN 3 associated with invasive carcinoma and Group 3: 46 cases with invasive carcinoma. Protein expression was investigated separately in tumor and stromal cells by immunohistochemistry and evaluated by the percentage of cells positive for immunostaining using morphometric software. Statistical Analysis: Was performed applying paired t-test or Mann-Whitney or Wilcoxon Signed Rank. Results: In each diagnostic group, expression markers were significantly higher: MMP-14 in tumor cells, and TIMP-2 in stromal cells; also MMP-9 expression was significantly higher in stromal cells, except in invasive component of group 2, and TIMP-1 had significantly higher expression in stromal cells of invasive carcinoma and in tumor cells of CIN 3. VEGF-A expression was significantly higher only in tumor cells CIN 3. Comparing the expression of markers between groups, two by two, we find the greatest differences between the extreme groups, i.e. between invasive carcinoma and CIN 3. The expression of MMP-2 was significantly greater in the stromal component CIN 3 in group 2 than in CIN 3 only. The expression of VEGF-A was significantly higher in the group stromal cell carcinoma when compared to stromal cells CIN 3. Conclusions: The results of this study suggest that the expression of TIMP-1 increases in the stromal cells and decreases in tumor cells when CIN 3 progresses to invasive carcinoma. MMP-9 and TIMP-2 had similar expression in CIN 3 and invasive carcinoma, which limits inferences about its role in neoplastic progression. The immunohistochemical pattern of expression of MMPs, TIMPs and VEGF-A in CIN 3 and invasive carcinoma, as these lesions were associated, was similar. The expression of VEGF-A was higher in tumor cells than in stromal cells in CIN 3, but when the lesion progresses to invasive carcinoma its expression increases in the stromal cells and the tumor cells does not change. The expression of MMP-14, MMP-2, TIMP-1 and VEGF-A was increased with the severity of the neoplasia / Doutorado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Doutora em Ciências da Saúde