A manutenção da estabilidade do material hereditário das células requer fidelidade na replicação do DNA, precisão na segregação dos cromossomos e a capacidade de evitar mutações herdáveis, causadas por injúrias espontâneas e induzidas no genoma. Para enfrentar estes desafios, as células possuem processos evolutivamente conservados, incluindo reparação do DNA e mecanismos de checkpoint. Falhas no cumprimento destes mecanismos podem resultar em morte celular, no acúmulo de mutações herdáveis e na indução de instabilidade genômica, a qual é uma característica predominante de células tumorais. Em Saccharomyces cerevisiae, a visão mais recente dos estágios iniciais da resposta de checkpoint indica que dois complexos de proteínas, Mec1-Ddc2 e Rad17- Mec3-Ddc1, são recrutados à região de lesão no DNA. Rad17p, Mec3p, e Ddc1p (os homólogos humanos são Rad1, Hus1, e Rad9, respectivamente) formam um complexo heterotrimérico estruturalmente relacionado ao antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), o fator de processividade das DNA polimerases δ e ε. Recentemente, identificamos um alelo mutante de MEC3 – pso9-1 – o qual é fortemente sensível a vários agentes indutores de danos no DNA e apresenta baixa mutabilidade induzida. Para prosseguir nas investigações dos efeitos da proteína mutante Pso9-1, a seqüência completa do alelo mutante foi determinada. A comparação das seqüências obtidas com a seqüência tipo-selvagem depositada nos bancos de dados revelou a deleção de um único nucleotídeo, na posição 802 (802delA), a qual leva a uma forma truncada de Pso9p. O alelo mutante pso9-1[802delA] codifica, um polipeptídeo de 276 aminoácidos, no qual os últimos nove aminoácidos estão fora da fase leitura apropriada e seu domínio carboxi-terminal, drasticamente diminuído. Esta mutação afetou as propriedades de ligação de Pso9-1p, impedindo as interações com seus parceiros de complexo Rad17p e Ddc1p. Ensaios adicionais de interação empregando construções de mec3 que não continham os últimos 25 e 75 aminoácidos do domínio carboxiterminal também não foram capazes de manter interações estáveis. Além disso, a linhagem mutante pso9-1 perdeu a capacidade de detectar danos no DNA, uma vez que dava continuidade no ciclo-celular, após tratamento com 8-metoxipsoraleno fotoativado. Uma vez analisada a reposta a danos no DNA de mutantes deficientes no componente de PCNA-like, Pso9p/Mec3p, em combinação à inativação de subunidades de DNA polimerases replicativas (Pols α, δ and ε), foi encontrada uma interação aditiva entre PSO9/MEC3 e POL32, o qual codifica a terceira subunidade da DNA polimerase δ. A hipersensibilidade de pol32Δ a 8-MOP fotoativado, revelada por estas análises genéticas, sugeriu fortemente a participação ainda não descrita de uma polimerase replicativa na reparação de pontes intercadeias. Esta hipótese foi confirmada, já que o mutante pol32Δ também se mostrou extremamente deficiente em ligar extremidades de DNA não-coesivas, particularmente em casos de extremidades protuberantes 5’, sugerindo um papel para a DNA polimerase δ em recombinação não-homóloga (NHEJ). A coleção de dados apresentada neste trabalho reafirma a importância de proteínas como Pso9p/Mec3p que iniciam a sinalização de anormalidades no DNA. Além disso, amplia a rede de proteínas que responde a danos do tipo pontes intercadeias, mostrando que uma proteína em particular, como visto para Pol32p, pode ter tarefas adicionais como mecanismo de segurança, a fim de garantir a estabilidade genômica. / Maintenance of stability of hereditary material of cells requires fidelity in DNA replication, precision in chromosome segregation, and the ability to avoid heritable mutations caused by spontaneous and induced genomic insults. To cope with these challenges cells have evolved evolutionarily conserved processes, including DNA repair and checkpoint mechanisms. Failure to enforce these mechanisms can result in cell death or in accumulation of heritable mutations and the induction of genome instability, which is a predominant characteristic of cancer cells. In Saccharomyces cerevisiae, it is the current understanding of the initial stages of the checkpoint response that two protein complexes, Mec1-Ddc2 and Rad17-Mec3- Ddc1, are recruited to sites near a DNA lesion. Rad17p, Mec3p, and Ddc1p (the human homologues are Rad1, Hus1, and Rad9, respectively) form a heterotrimeric complex structurally related to the proliferating cell nuclear antigen (PCNA), the processivity factor of DNA polymerases δ and ε. We have recently identified a yeast mutant allele of MEC3 – pso9-1 – which is strongly sensitive to DNA damaging agents and confers low induced mutability. To further investigate the effects of the Pso9-1 mutant protein, the complete sequence of the mutant allele was determined. The comparison of obtained sequences with the databank-deposited wild-type MEC3 sequence revealed a single deletion of nucleotide position 802 (802delA) that leads to a truncated Pso9p. The 802delA frameshift mutant allele thus encodes a 276 amino acid polypeptide in which the last nine amino acids are out of proper reading frame and that has its carboxyl terminus dramatically shortened. This mutation affected the binding properties of Pso9-1p, abolishing its interactions with both Rad17p and Ddc1p. Further interaction assays employing mec3 constructions lacking the last 25 and 75 amino acid carboxyl termini were also not able to maintain stable interactions. Moreover, the pso9-1 mutant strain could no longer sense DNA damage since it continued in the cell cycle after photoactivated 8-methoxypsoralen treatment. When analyzing the response to DNA damage of yeast mutants lacking the yeast PCNA-like component Pso9p/Mec3p in combination with defective subunits of three replicative DNA polymerases (Pols α, δ and ε), we found an additive interaction between PSO9/MEC3 and POL32, which codifies the third subunit of DNA polymerase δ. The hypersensitivity of pol32Δ to photoactivated 8-MOP revealed by these genetic analyses strongly suggested the hitherto unknown participation of a replicative polymerase in the repair of interstrand cross-links. This assumption was confirmed since we also found the pol32Δ mutant extremely deficient in joining non-cohesive DNA ends, particularly in cases of mismatched 5’ overhangs, suggesting a role for DNA polymerase δ in non-homologous end-joining (NHEJ). The collection of data presented in this work reasserts the relevance of sensor proteins as Pso9p/Mec3p in initiating the signaling of structural abnormalities in DNA. Moreover, it amplifies the network of interstrand cross-links responsive proteins, showing that a particular protein, as seen for Pol32p, may have additional tasks as a safety mechanism in ensuring genomic stability.

O objetivo geral deste trabalho foi caracterizar o perfil protéico da secreção uterina pura, através da eletroforese bi-dimensional, de éguas em diferentes fases do ciclo estral, com diferentes graus de alterações inflamatórias e degenerativas, e com diferente capacidade de resposta à cobertura. Para tanto se realizaram cinco experimentos. O primeiro objetivou caracterizar o perfil protéico da secreção endometrial de éguas e determinar se essas proteínas estão associadas ao ciclo estral. A hipótese a ser testada é que o perfil protéico das secreções endometriais varia entre o estro e o diestro. Conclui-se que a composição protéica da secreção uterina da égua em estro é diferente daquela de éguas em diestro, podendo as diferenças protéicas estarem associadas tanto ao processo de manutenção e desenvolvimento embrionário, como a uma necessidade de eventual resposta inflamatória. O segundo experimento objetivou comparar as taxas de prenhez e morte embrionária em éguas não lactantes cobertas no primeiro, ou em outros ciclos durante a temporada reprodutiva. Foi concluído que: (a) durante a temporada reprodutiva, a fertilidade de éguas solteiras é menor no 1° ciclo que nos ciclos subseqüentes; (b) que uma taxa de morte embrionária maior pode ser esperada em éguas falhadas cobertas no 1° ciclo do que nos demais e (c) que a menor fertilidade observada no 1° ciclo não está relacionada à incidência de endometrite persistente pós-cobertura. O terceiro experimento objetivou comparar o perfil protéico da secreção endometrial e a expressão de receptores para esteróides ovarianos no endométrio de éguas em diestro após a 1ª ovulação e após a 2ª ovulação da temporada. Conclui-se que o ambiente uterino é diferente no primeiro diestro da temporada reprodutiva, comparado aos ciclos subseqüentes. O quarto experimento objetivou comparar o perfil protéico da secreção endometrial de éguas resistentes e susceptíveis à endometrite persistente pós-cobertura, durante o estro.Ahipótese a ser testada é que o ambiente uterino da égua susceptível encontra-se alterado no estro prévio à cobertura. Conclui-se que a composição da secreção endometrial das éguas susceptíveis, antes da cobertura, é diferente daquela observada nas éguas resistentes, estando as proteinas observadas relacionadas ao processo inflamatório e à contratilidade uterina. O quinto experimento objetivou (a) comparar a composição protéica da secreção endometrial de éguas em estro com e sem fibrose e (b) avaliar o efeito da inflamação endometrial sobre o perfil protéico da secreção uterina de éguas em estro e em diestro. A hipótese é que a fibrose e a inflamação alteram a composição protéica do fluído uterino, podendo prejudicar o desempenho reprodutivo da égua. Conclui-se que nas éguas em estro a inflamação e a fibrose endometrial alteram apenas a quantidade de poucas proteínas no ambiente uterino. Durante o diestro, a presença da inflamação alterou o ambiente uterino, havendo maior quantidade de proteínas inflamatórias. Os resultados apresentados neste trabalho requerem a confirmação da identidade das proteínas, através de seqüeciamento ou imuno identificação. No entanto, várias informações puderam ser obtidas e muitas novas perguntas podem ser geradas, em especial a partir dos resultados com as éguas susceptíveis. / The main objective from this study was the characterization of the protein profile by SDS-PAGE, from mares during the estrous cycle and mares with uterine inflammation, fibrosis and susceptibility to persistent post-mating endometritis. Five experiments were performed. The first aimed to evaluate the protein profile of endometrial secretions of mares and to determine if any of these proteins was associated with estrous cycle. It was concluded that protein profile from estrous mares is different from the profile from diestrous mares. This difference can be explained by requirements to support and develop the embryo or to an eventually inflammatory response. The second experiment aimed to compare pregnancy and embryo loss rates in non-lactating mares bred either in the first, or in other estrus cycles during the breeding season. It was concluded that: (a) during the breeding the fertility of non-lactating mares is lower in the 1st than in other estrus cycles season; (b) that a higher embryo loss rate may be expected in barren mares bred in the 1st than in other estrus cycles of the breeding season and (c) that the lower fertility rate observed during the 1st estrus cycle is not related to the incidence of post-breeding endometritis. The third experiment aimed to compare the protein profile of endometrial secretions and the steroid hormone receptor expression of the uterus from diestrous mares in the first, or in other estrous cycles during the breeding season. It was concluded that the uterine environment in the first diestrus of the breeding season is different in relation of the other diestrus. The fourth experiment aimed to compare the protein profile of endometrial secretions from estrous mares resistant or susceptible to persistent post-mating endometritis (PPME). The tested hypothesis was that before the insemination in susceptible mares the uterine environment is disturbed. It was concluded that there is a difference in the uterine environmentbetween resistant and susceptible mares to PPME, probably resulting from the inflammatory response and affecting the uterine contractility. The fifth experiment aimed (a) to compare the protein profile of endometrial secretions from estrous mares with and without fibrosis and (b) to estimate the effect of inflammation in the protein profile of endometrial secretion from mares in estrous and in diestrous. The tested hypothesis was that fibrosis and inflammation disturb the uterine environment modifying the protein profile of the endometrial secretion impairing the reproductive performance. It was concluded that inflammation and fibrosis in estrous influenced the protein profile in a low number of spots. During diestrous, the inflammation affect uterine environment with an expressive number of inflammatory proteins. The protein profile observed in the experiments must be confirmed by sequencing or immunoidentification. However, much information could be obtained but many others must be investigated, principally by the susceptible mare.

Submitted by TEOFILO CORTIZO MOREIRA NETO (tcortizo@yahoo.com) on 2018-06-14T02:22:10Z No. of bitstreams: 1 APLICAÇÃO DA ANÁLISE DO CUSTO DO CICLO DE VIDA EM UMA INDÚSTRIA DE MINERAÇÃO COM BASE NA GESTÃO DE ATIVOS .pdf: 7048097 bytes, checksum: 39445afbdf14395830a2d806fdac2428 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Reis (vanessa.jamile@ufba.br) on 2018-06-15T15:58:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 APLICAÇÃO DA ANÁLISE DO CUSTO DO CICLO DE VIDA EM UMA INDÚSTRIA DE MINERAÇÃO COM BASE NA GESTÃO DE ATIVOS .pdf: 7048097 bytes, checksum: 39445afbdf14395830a2d806fdac2428 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T15:58:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 APLICAÇÃO DA ANÁLISE DO CUSTO DO CICLO DE VIDA EM UMA INDÚSTRIA DE MINERAÇÃO COM BASE NA GESTÃO DE ATIVOS .pdf: 7048097 bytes, checksum: 39445afbdf14395830a2d806fdac2428 (MD5) / O controle de custos se mostra um obstáculo dentro das grandes corporações. A aplicação de ferramentas no auxilio desse problema no setor operacional ainda possui pouca abrangência prática. A proposta desse trabalho é implementar a análise do custo do ciclo de vida ou Life-Cycle Cost Analysis (LCCA) na mineradora Salobo Metais (Grupo Vale) de forma a determinarmos uma metodologia prática aplicável ao setor industrial. O estudo de caso determinou a vida econômica de uma correia transportadora de minério de cobre. A estratégia mais usual, atualmente utilizada pela manutenção, não se mostra eficiente no gerenciamento econômico do ativo. O LCCA auxilia neste aspecto, tendo em vista que calculamos uma estimativa de eventos para se determinar o custo de manutenção, ao longo da sua vida operacional. Na metodologia proposta utilizamos para esse cálculo uma análise Reliability, Availability and Maintenability (RAM), que é apoiada em curvas estatísticas de confiabilidade quantitativa; ou seja, utilizam-se dados históricos para a realização de projeções futuras. O estudo de caso aconselhou um ciclo econômico de seis meses para a correia transportadora. Ao invés disto, a estratégia adotada, sem utilizar o estudo, levou a um ciclo operacional do ativo de sete meses, gerando custos desnecessários motivados principalmente pelo lucro cessante. A metodologia LCCA está embasada no conceito de ciclo de vida dos ativos promovido pela nova norma de Gestão de Ativos (GA) na ISO- 55000:2014. A falta de uma metodologia prática, a dificuldade de aquisição de dados históricos confiáveis e de projeções de vida operacional mais fidedignas são fatores que contribuem para a esta falta de cultura do uso desta ferramenta. Acreditamos que, a partir do momento em que a Gestão de Ativos se torne o modelo gerencial predominante nas indústrias, essa ferramenta comece a ser mais utilizada. / Cost control is an obstacle within large corporations. The application of tools to help this problem in the operational sector still has little practical scope. The purpose of this work is to implement Life Cycle Cost Analysis (LCCA) at Salobo Metais (Vale Group) in order to determine a practical methodology applicable to the industrial sector. The case study determined the economic life of a copper ore conveyor belt. The most usual strategy, currently used for maintenance, is not efficient in the economic management of the asset. The LCCA assists in this regard, since we calculate an estimate of events to determine the cost of maintenance, throughout its operational life. In the proposed methodology we use for this calculation a Reliability, Availability and Maintenability (RAM) analysis, which is supported on statistical curves of quantitative reliability; that is, historical data are used to make future projections. The case study advised a six-month economic cycle for the conveyor belt. Instead, the strategy adopted, without using the study, led to an operational cycle of the asset for seven months, generating unnecessary costs motivated mainly by the loss of profit. The LCCA methodology is based on the asset life cycle concept promoted by the new Asset Management (AM) standard in ISO-55000: 2014. The lack of a practical methodology, the difficulty of acquiring reliable historical data and more reliable operational life projections are factors that contribute to this lack of culture in the use of this tool. We believe that, once Asset Management becomes the predominant managerial model in industries, this tool will begin to be more used.

A teoria do ciclo político orçamentário tradicional sugere que os governantes são tentados a manipular os instrumentos de política fiscal aumentando o gasto público ao seguirem o calendário eleitoral. A percepção, por parte do eleitorado, de que o governante mais capaz corresponde àquele que provê o maior número de bens públicos através das funções governamentais, apresenta a evolução recente da teoria. O presente estudo objetiva testar a hipótese de ocorrência do ciclo político orçamentário tradicional nas variáveis representantes de bens públicos, identificando aquelas onde parece haver evidência de manipulação eleitoral, nos municípios brasileiros, entre os anos de 2002 e 2015. Foram utilizados métodos econométricos de regressão de dados em painel nos anos que precedem às eleições, nos anos eleitorais e nos pós-pleitos. Os resultados não descartam a hipótese de que o ciclo político orçamentário no gasto ocorreria e que se privilegiariam algumas funções, possivelmente, alterando a percepção do eleitorado sobre a competência dos prefeitos. / The theory of the traditional budgetary policy cycle suggests that rulers are tempted to manipulate fiscal policy instruments by increasing public spending by following the electoral calendar. The perception by the electorate that the most capable ruler corresponds to the one who provides the greatest number of public goods through governmental functions, presents the recent evolution of the theory. The present study aims to test the hypothesis of the occurrence of the traditional budget political cycle in the variables representing public goods, identifying those where there seems to be evidence of electoral manipulation in Brazilian municipalities between 2002 and 2015. Econometric regression Panel Data Models were used in the years leading up to the elections, electoral years and post-election. The results shows the hypothesis that the political budget cycle in spending would occur and that some functions would be privileged, possibly changing the perception of the electorate on the competence of mayors.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-01-21T12:31:26Z No. of bitstreams: 1 2015_GabrielAlvaresBorges.pdf: 2129782 bytes, checksum: f55a7d0acbab0d72aa21749cdfad222d (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2016-04-06T14:38:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_GabrielAlvaresBorges.pdf: 2129782 bytes, checksum: f55a7d0acbab0d72aa21749cdfad222d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-06T14:38:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_GabrielAlvaresBorges.pdf: 2129782 bytes, checksum: f55a7d0acbab0d72aa21749cdfad222d (MD5) / A via PI3K/AKT/mTOR apresenta-se superativada nos carcinomas escamosos de cabeça e pescoço (HNSCC). O estudo de substâncias que tenham por alvo as proteínas efetoras dessa via é de fundamental importância para o desenvolvimento de terapias para o câncer que sejam mais efetivas, mais específicas e menos deletérias aos pacientes. Com essa justificativa, objetivou-se com esse trabalho a avaliação dos efeitos biológicos dos inibidores de mTOR em linhagens celulares de HNSCC. O tratamento das linhagens SCC-9 (carcinoma de língua), FaDu (carcinoma de hipofaringe) e HaCaT (queratinócitos) com everolimus e temsirolimus, inibidores rapanálogos, e ainda com curcumina, resveratrol e EGCG, inibidores derivados da dieta, em diversas concentrações, possibilitou o estabelecimento de uma curva dose-resposta para cada substância em cada linhagem. A partir das curvas, foram calculados valores de IC50, com os quais os experimentos subsequentes foram realizados. O índice de seletividade tumoral foi calculado, e a curcumina e o everolimus mostraram-se seletivos para as linhagens SCC-9 e FaDu em relação à célula HaCaT. Em associação à radioterapia, os inibidores demonstraram efeito sinérgico significativo na linhagem FaDu (p<0,05), o que não foi observado na célula HaCaT, indicando também seletividade para a linhagem neoplásica. O everolimus causou inibição da migração celular das linhagens FaDu e HaCat a partir de 24h (p<0,05). O everolimus ainda induziu apoptose na célula SCC-9 (p<0,05) e interrompeu o ciclo celular das linhagens SCC-9 e FaDu na fase S (p<0,05). Um perfil de morte celular incerto de apoptose tardia ou necrose foi observado nas células SCC-9 e FaDu tratadas com temsirolimus (p<0,05). A curcumina causou interrupção do ciclo celular na fase G2/M nas linhagens SCC-9 e FaDu (p<0,05). Observou-se ainda a inibição da expressão da proteína p-mTOR pelo teste de western blot na linhagem FaDu tratada com curcumina. Tais resultados instigam novos estudos que aprofundem o conhecimento sobre a ação e mecanismos dos inibidores de mTOR, viabilizando sua aplicação clínica. / The PI3K/AKT/mTOR signalling pathway is overactivated in head and neck cancers, and the study of substances which target effector proteins of this pathway is important for the development of therapeutic options that are more effective and specific and less deleterious to the patient. With such justification, this study had as objective evaluating the effects of mTOR inhibitors in head and neck cancer cell lines. By treating SCC-9 (tongue carcinoma), FaDu (hypopharynx carcinoma) and HaCaT (oral keratinocytes) cell lines with Everolimus and Temsirolimus, both rapalogs, and Curcumin, Resveratrol and EGCG, diet-derived inhibitors, in different concentrations, it was possible to establish dose-response curves for each substance with each cell line. IC50 values were obtained and used for subsequent experiments. A tumour selectivity index was calculated, and curcumin and everolimus were found to be selective to SCC-9 and FaDu cell lines. When combined with radiotherapy, all inhibitors demonstrated a significant synergic effect on FaDu cell line (p<0.05), which was not observed on HaCaT and indicates the combination as selective to neoplastic cells. Everolimus cause cell migration inhibition in FaDu and HaCat from 24h of treatment on (p<0.05), resulted in apoptosis in SCC-9 (p<0.05) and arrested cell cycle in S-Phase in SCC-9 and FaDu cells (p<0.05). A doubtful cell death profile of late apoptosis or necrosis was observed in SCC-9 and FaDu cells treated with temsirolimus (p<0.05). Curcumin caused a cell cycle arrest in G2/M in both SCC-9 and FaDu cells (p<0.05) and inhibited p-mTOR expression, as observed in the western blot assay performed with FaDu cells. Such results instigate new studies that help construct the knowledge on the action and mechanisms of the mTOR inhibitors and make their clinical application feasible and more comprehensive.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T18:42:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 290080.pdf: 5606807 bytes, checksum: afc25d9417669f8ac0daf93e24bec9ca (MD5) / As chalconas (1,3-diaril-2-propen-1-onas), formam o núcleo de uma ampla variedade de compostos biológicos obtidos de vegetais, que têm espontado como potenciais agentes antitumorais. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo principal avaliar os efeitos antineoplásicos in vitro e in vivo do composto Chalcona N9, obtido sinteticamente. A Chalcona N9 demonstrou ser citotóxica nas linhagens celulares de carcinoma de pulmão humano A549, melanoma de camundongos B16-F10, glioma de rato C6, carcinoma de próstata humano DU 145, carcinoma de mama humano MCF-7 e glioblastoma humano U-87 MG e com citotoxicidade menor sobre a linhagem imortalizada de fibroblastos L929. Nos ensaios de citometria de fluxo para avaliação do ciclo celular foi demonstrado que a Chalcona N9 induziu o acúmulo de células U-87 MG na transição das fases G1-S. Ensaios por Western blotting demonstraram que a Chalcona N9 foi capaz de interferir na expressão de proteínas que participam do ciclo celular, reduzindo a expressão das ciclinas A, D1 e E, e quinases dependentes de ciclina CDK 2 e 6 nas células de glioma humano U-87 MG. Os ensaios de incorporação de Anexina V-FITC demonstraram que as duas concentrações utilizadas da Chalcona N9 induziram a morte por apoptose nas células U-87 MG ao final de 24 horas, e aumento no número de células apoptóticas ao final de 48 horas de tratamento com a Chalcona N9. A morte por apoptose foi também confirmada pelo ensaio de TUNEL. Através da utilização da sonda fluorescente JC-1, foi possível verificar que a Chalcona N9 alterou o potencial de membrana mitocondrial, num período de 2 até 24 horas, sugerindo um efeito sustentado sobre a permeabilidade mitocondrial. Alterações morfológicas da U-87 MG, como células arredondadas e fragmentação no núcleo, puderam ser visualizadas quando observadas por microscopia de fluorescência após o período de 24 horas de incubação com a Chalcona N9 na maior concentração utilizada. O tratamento com a Chalcona N9 reduziu significativamente o número de colônias das células U-87 MG, após 24 horas de incubação. O número de clones das células de glioblastoma multiforme após 48 horas de tratamento, foi significativamente reduzido, comparado com os clones das células do grupo controle. Nos modelos de tumor ascítico de Ehrlich em camundongos BALB/c, modelo de melanoma B16-F10 em camundongos C57Bl/6 e glioblastoma multiforme humano em camundongos nude, inoculados com as células U-87 MG, a Chalcona N9 foi capaz de reduzir a progressão tumoral. Em resumo, podemos concluir que a Chalcona N9 promove um atraso no ciclo celular, especialmente na fase de transição G1/S, além de promover o desencadeamento do processo apoptótico. O tratamento com a Chalcona N9 também altera o potencial de membrana mitocondrial e diminui o potencial proliferativo das células U-87 MG. Nossos resultados sugerem que a Chalcona N9 apresenta potencial atividade antitumoral sugerindo potenciais perspectivas com este composto em terapias contra o câncer. / The chalcones (1,3-diaryl-2-propen-1-ones), a group of aromatic enones, form the core of a wide variety of organic compounds obtained from plants, and in the past 15 years those compounds have emerged as potential antitumor agents. This study aimed at evaluating the in vitro and in vivo antineoplastic effects of the compound Chalcone N9, which was synthetically obtained. The Chalcone N9 was shown to be cytotoxic in cell lines of human lung carcinoma A549, mouse melanoma B16-F10, rat glioma C6, human prostate carcinoma DU 145, human breast carcinoma MCF-7 and human glioblastoma U-87 MG and with lower cytotoxicity in immortalized fibroblast line L929. In tests of flow cytometry used to assess the cell cycle of U-87 MG cells, it was demonstrated that Chalcone N9 induced accumulation of cells in transition from G1-S phase. Western blotting assays showed that Chalcone N9 was able to influence the expression of proteins involved in the cell cycle, reducing the expression of cyclins A, D1 and E and the cyclin dependent kinases CDK 2 and 6. The annexin V-Fitc assay, which detects the incorporation of annexin, demonstrated that both concentrations of Chalcone N9 induced apoptosis in U-87 MG cell after 24 hours and increased the number of apoptotic cells after 48 hours of incubation with Chalcone N9. Death by apoptosis was also confirmed by TUNEL assay. By using the fluorescent probe JC-1, we observed that halcone N9 altered the mitochondrial membrane potential in a period of 2 to 24 hours, suggesting a sustained effect on mitochondrial permeability. Morphological changes of U-87 MG as round cells and fragmentation in the nucleus could be visualized when observed by fluorescence microscopy after 24 hours incubation with Chalcone N9 at the highest concentration used. Treatment with Chalcone N9 significantly reduced the number of colonies of cells U-87 MG, 24 hours after incubation. The number of clones of cells of glioblastoma multiforme after 48 hours of treatment was significantly reduced compared with clones of cells of the control group. In the models of Ehrlich ascites tumor in BALB/c mice, melanoma B16-F10 in C57BL/6 mice and human glioblastoma multiforme in nude mice inoculated with U-87 MG cells, Chalcone N9 was able to reduce tumor progression. In summary, we conclude that the Chalcone N9 promotes a delay in cell cycle, especially during the transition G1 / S, besides promoting the activation of the apoptotic process. Treatment with Chalcone N9 also changes the mitochondrial membrane potential and decreases the proliferative potential of U-87 MG cells. Our results suggest that Chalcone N9 has a potential antitumor activity suggesting potential prospects with this compound in cancer therapies.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental. / Made available in DSpace on 2012-10-23T09:57:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 247983.pdf: 1486148 bytes, checksum: ac9b5a2edb6b8a9afc05b117c86900ff (MD5) / Este trabalho propõe um modelo sistemático e simplificado para avaliar as incertezas geradas na modelagem do Inventário do Ciclo de Vida (ICV). Trata da integração de alguns procedimentos isolados existentes em um único método. Para tanto, é utilizada a análise da sensibilidade dos parâmetros utilizados no ICV; a verificação da qualidade destes parâmetros; a determinação do seu grau de incerteza, e a modelagem estocástica dos mesmos. A validação do modelo proposto foi feita através de sua aplicação em um estudo de caso anteriormente publicado. Os resultados mostraram a redução da incerteza vinculada aos indicadores de qualidade de dados Completeza e Número de Amostras para praticamente zero, devido à grande quantidade de novos valores gerados. Porém, a incerteza relativa à Confiança na Fonte aumentou, devido à inclusão de dados gerados através de informações teóricas. Já os indicadores Correlação Temporal, Correlação Geográfica e Correlação Tecnológica mantiveram-se inalterados, isto porque a redução destas incertezas está diretamente ligada à coleta dos dados do Inventário do Ciclo de Vida, portanto não podem reduzidas através de simulações. Mesmo com o aumento da incerteza em um dos indicadores de qualidade de dados e a redução em apenas dois, dos cinco outros indicadores, através da aplicação do modelo proposto, os resultados obtidos foram significativos para os parâmetros avaliados do inventário. Ao final, foram obtidos novos valores, mais precisos, para o estudo de caso avaliado, devido ao menor grau de incerteza dos mesmos. This work proposes a systematic and simplified procedure to evaluate the uncertainties generated in a Life Cycle Inventory (LCI) modeling. It deals with the joint utilization of some existing isolated procedures in one only method. For that, sensitivity analysis of the LCI data is used; the verification of these data quality; the determination of the degree of data uncertainties, and the data random modeling. The validation of the considered model was carried out by means of its application in a previously published case study. The results showed an uncertainty reduction, related to the Completeness and Number of Samples data quality indicators, for almost zero, due to the great amount of new values generated through the simulation. However, the degree of uncertainty of the Reliability of the Source increased, due to the inclusion of data generated through theoretical information. Already the pointers Temporal Correlation, Geographical Correlation and Technological Correlation indicators remained unaltered, because the reduction of these uncertainties is directly related to the life cycle inventory data gathering, and therefore cannot be reduced by means of simulation. Even with the uncertainties reduction within only two of the six data quality indicators, through the application of the considered method, the obtained results were significant for the inventory assessed emissions. At the end, more precise new values were obtained for the life cycle inventory of the case study, due to their lower uncertainty degree.

Orientador: José Luz Silveira / Coorientador: Celso Eduardo Tuna / Banca: José Alexandre Matelli / Banca: Lúcia Bollini Braga Maciel / Resumo: Resíduos plásticos constituem um grave problema ambiental, pois sua degradação é muito difícil devido à baixa reatividade química. Como esses materiais são obtidos a partir de petróleo e gás natural, recursos não renováveis, a reciclagem é de grande interesse já que etapas iniciais da fabricação de matéria-prima virgem podem ser eliminadas, o que resulta em diminuição do uso desses recursos, redução do consumo de energia e, consequentemente na redução de emissões de poluentes associadas ao processo de obtenção da matéria-prima virgem. Esse trabalho avaliou dois processos de reciclagem de poliestireno expandido (EPS) com o objetivo de comprovar os benefícios de suas aplicações, no que se refere ao consumo de energia e emissões de gases do efeito estufa (GEE), utilizando técnicas de avaliação do ciclo de vida (ACV). O primeiro processo, denominado reciclagem por injeção de vapor, consiste na inserção de 30 a 40% de resíduos de EPS junto com a matéria-prima virgem na produção convencional de blocos de EPS. O segundo processo, denominado reciclagem termomecânica consiste na reciclagem mecânica através de moagem, aglomeração, homogeneização e moldagem para obtenção de poliestireno reciclado. Primeiramente, efetuou-se análise do consumo de energia primária dos processos de produção e reciclagem de EPS e então, o consumo acumulado de energia (CED) de todo o ciclo de vida do EPS foi avaliado. Em fase posterior, realizou-se análise de emissões de GEE dos processos de produção, reciclagem e de todo o ciclo de vida do EPS, para quantificar os níveis de emissões, considerando o potencial de aquecimento global para o horizonte temporal de 100 anos. Fez-se ambas análises, aplicando metodologia de ACV através da utilização de dados de relatórios técnicos de empresas, da literatura científica e do banco de dados Ecoinvent ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Plastic wastes are a serious environmental problem because degradation is difficult due to a low chemical reactivity. As these materials are obtained from oil and gas, a non-renewable resource, recycling is of major interest since early stages of virgin raw material manufacture can be eliminated, resulting in a decrease in energy expenditure and consequent reduction of pollutant emissions associated with the process of obtaining the virgin raw material. This study evaluated two processes of EPS recycling in order to prove the benefits of its application, as regards the reduction of energy consumption and greenhouse gases (GHG) emissions, using life cycle assessment techniques (LCA). The first process, called recycling by steam injection, consists of inserting from 30 to 40% of EPS residues together with virgin raw material in the conventional EPS production process to produce EPS blocks. The second process, called thermomecanical recycling consists of mechanical recycling through grinding, agglomeration, mixing and molding to obtain recycled polystyrene. Firstly an analysis of energy consumption of EPS production and recycling processes was performed and then the cumulative energy demand (CED) throughout EPS entire life cycle was evaluated. Subsequently is carried out GHG emissions analysis from EPS production, recycling processes and EPS entire life cycle to quantify the levels of emissions considering the global warming potential for the time horizon of 100 years. Both analyzes were made by applying LCA methodology through the use of technical reports, scientific literature and Ecoinvent database. The results showed that the EPS recycling processes studied promote the reduction of energy consumption and GHG emissions in the manufacture and EPS life cycle when compared to disposal of this material in landfills, also resulting in decreased use of natural resources (oil and gas) / Mestre

[pt] O professor iniciante e o início de sua carreira têm merecido pouca atenção por parte dos pesquisadores brasileiros, embora seja uma fase importante para a construção da identidade e desenvolvimento profissional do professor. O objetivo mais amplo desta pesquisa foi compreender como o professor iniciante constrói sua aprendizagem profissional no ciclo de alfabetização de modo a se desenvolver profissionalmente. Parti, para realizá-lo, das ideias de que o professor é um sujeito ativo no seu processo de aprendizagem, capaz de relacionar suas experiências formativas e práticas (MARCELO GARCIA, 2009) e de que, ao ser inserido na carreira, ele passa por um ciclo de aprendizagem profissional (HUBERMAN, 1992). A pesquisa foi realizada com 6 professores, com tempo de experiência profissional variando entre 2 e 4 anos, que atuavam ou tinham atuado no ciclo de alfabetização na fase de iniciação (HUBERMAN, 1992), em escolas públicas – municipais e federais – e privadas do município do Rio de Janeiro. Adotei o procedimento metodológico de entrevistas semiestruturadas, entendidas como espaços de produção de narrativas que, como texto que são, abrem-se a múltiplas interpretações (KRAMER, 2002). Compartilho com Emilia Freitas de Lima (2006) o pressuposto de que a formação de professores é um processo contínuo, sem um fim estabelecido a priori, do qual fazem parte a experiência acumulada durante a passagem pela escola enquanto estudante; a formação profissional específica – formação inicial –; a iniciação na carreira e a passagem de estudante a professor e a formação contínua. A primeira parte das análises se concentrou nas trajetórias dos professores na educação básica, passando pela formação – inicial e contínua – e chegando até suas atuais experiências e práticas como professores em início de carreira. As análises foram fundamentadas nos conceitos de campo, habitus, capital e estratégias da Sociologia de Pierre Bourdieu (2004, 2007, 2009, 2011, 2013). Destacam-se a opção pela docência marcada por uma não escolha (LELIS, 1996) e a presença da família incentivando, apoiando, influenciando ou rejeitando essa opção (NOGUEIRA, 1998). A segunda parte se estruturou a partir de dois eixos que emergiram das narrativas como significativos para a compreensão do problema de pesquisa: o início e os meios. Com relação ao primeiro, foi possível chegar à conclusão de que as dificuldades inerentes ao início da carreira, tais como mau comportamento dos alunos, competição entre os colegas e interferência dos pais são mais facilmente superadas com o apoio da equipe gestora da escola. No que diz respeito aos meios foram relatadas práticas pedagógicas de leitura e escrita, bem como autores de referência em torno da alfabetização, enfatizando a centralidade desse período do ensino fundamental, que demanda conhecimentos específicos tanto da parte de quem ensina, quanto da parte de quem aprende. Considerando o início da docência como uma fase diferenciada, com características e necessidades próprias, que demanda apoio e formação específicos (MARCELO, 1999, 2011; MARIANO, 2006; PAPI E MARTINS, 2010), a pesquisa destaca a necessidade de viabilizar um maior apoio institucional ao professor (alfabetizador) iniciante nas escolas, aliado a programas e políticas de iniciação/inserção e formação. / [en] Despite of being an important stage for the development of its professional identity, the early stages of professor s professional career seems to be yet underexplored by Brazilian researchers. From the perspective that professors have an active role on their learning process, able to connect their practical and theoretical experiences (MARCELO GARCIA, 2009), and once initiated on their careers they go through a professional learning cycle (HUBERMAN, 1992), the broader aim of this research is to understand how professors on their early stages build their professional learning at the literacy cycle, connecting its theoretical and practical experiences in order to obtain professional development. Present research was completed with six professors with professional experience between 2 and 5 years, that have currently or past experience at the literacy cycle on the initiation stage (HUBERMAN, 1992); at public schools – municipal and federal – and private schools within Rio de Janeiro city. Interviews were used as a methodological tool. Interviews, understood as narrative production spaces, give room for multiple interpretations (KRAMER, 2002). Based on Lima s (2006) assumption that professor s development is a continuous process, without a firm established end, in which takes part its own experience as a student; specific professor formation – undergraduate degree - ; career commencement and its passage from student to professor to continuous development, first phase of the analysis was concentrated on the professors paths at the basic education, passing through formation – initial and continuous – up to their current practices and experiences as early stage professors. Analysis were completed having Bourdieu (2004, 2007, 2009, 2011, 2013) concepts of habitus, strategy and capital as drivers. It should be highlighted the option for a professorial career as a nonoption (LELIS, 1996) and family s influence, either supporting or rejecting this option (NOGUEIRA, 1998). Second phase was structured based on three axis that arose from the narratives as important for the research problem understanding: early stages, learning and literacy cycle. Regarding the early stages it was possible to conclude that difficulties associated with early stages of the career, such as students behaviour; competition among colleagues and parents interference are easily overcome with support given by school managerial team. In connection to the learning process, professor were unanimous in point the insufficiency of their degree, highlighting their relationship with their pairs – either within the school and outside the school as a privileged element of its professional learning. Finally, regarding the literacy cycle, pedagogical practices such as reading and writing, together with prestigious authors and public policy associated with literacy, highlighting the key importance of such period of the fundamental cycle, which demands specific knowledge (TARDIF, 2007) have been described by professors interviewed. Considering the early stages of a professor career as a differential stage, with particular characteristics and needs, demanding specific support and education (MARCELO, 1999, 2011; MARIANO, 2006; PAPI E MARTINS, 2010) current research highlights the need for a major institutional support for the literacy professors in the early stages of their career, complemented by induction/ introduction policies together with continuous developing programs.

Orientadora: Plácida Leopoldina Ventura Amorim da Costa Santos / Banca: Gil Anderi da Silva / Banca: Marisa Brascher Basilio Medeiros / Banca: Ricardo Cesar Gonçalves Sant'Ana / Banca: Silvana Aparecida Borsetti Gregorio Vidotti / Resumo: A preocupação com o desenvolvimento de produtos que ofereçam um menor nível de degradação dos recursos naturais é um desafio que as empresas, de modo geral, estão buscando. A Avaliação de Ciclo de Vida (ACV) de produtos é uma metodologia que investiga os impactos ambientais no desenvolvimento, uso e reuso desses produtos. Elencam-se algumas tecnologias para a coleta, armazenamento e distribuição de informações de Inventário de Ciclo de Vida (ICV) e definições sobre ciclo de vida do dado que são consideradas fundamentais para o método de elaboração de uma matriz de tecnologia para fluxo de informação de ICV. A hipótese desta pesquisa é a de que uma matriz de tecnologia venha contribuir com a gestão de informação de inventários de ciclo de vida, apontando alternativas de tecnologias para a concepção de um sistema de informação de ICV. Esta pesquisa tem como objetivo propor uma matriz de tecnologia para fluxo de informação de inventários de ciclo de vida, a partir da análise dos elementos do ciclo de vida do dado e sua relação com as etapas do fluxo de informação para ICV. O método de concepção da matriz de tecnologia para fluxo de inventários está baseado na intersecção dos elementos do ciclo de vida do dado e sua relação com as etapas da gestão da informação para ICV. Para tanto, utiliza-se o framework de Zachman (2010) para clarificar cada tecnologia empregada. Essas tecnologias contribuem no processo de armazenamento e recuperação da informação de ICV até a disponibilização desse primordial recurso informacional, na perspectiva da consolidação do Sistema Brasileiro de Inventário de Ciclo de Vida (SICV-Brasil). / Abstract: The concern with the development of products that offer a lower level of degradation of natural resources is a challenge that companies, in general, are seeking. The Life Cycle Assessment (LCA) of products is a methodology that investigates the environmental impacts in the development, use and reuse of these products. We list are some technologies for the collection, storage and distribution of this information Life Cycle Inventory (LCI) and definitions of data life cycle that are considered essential to the production method of a technology matrix for information flow LCI. The hypothesis is that a technology matrix will contribute to the information management life cycle inventories, pointing alternative technologies for the design of an LCI information system. This research aims to propose a technology matrix for flow of information life cycle inventories from the analysis of the elements of the data life cycle and its relation to the steps of the flow of information to LCI. The method of design technology matrix for inventory flow is based on the intersection of the elements of the data life cycle and its relation to the steps of information management for LCI, using the Zachman (2010) framework to clarify each technology employed. Such technologies help in the storage and recovery process of LCI information to the provision of primary information resource with a view to consolidation of the Brazilian Inventory Lifecycle System (SICV-Brazil). / Doutor