A isquemia cerebral é uma enfermidade grave, de incidência e prevalência global, considerada uma das principais causas de morte e incapacidade no mundo. Ela é decorrente da hipoperfusão ou interrupção sanguínea em uma determinada região encefálica e a falta de oxigênio e glicose leva a falha no metabolismo energético de neurônios e células gliais. A morte destas células libera grande quantidade de glutamato, o principal neurotransmissor excitatório, o que desencadeia a cascata isquêmica, formada por estresse oxidativo, excitotoxicidade e processo inflamatório. Estes insultos causam danos teciduais graves que comprometem, principalmente, o sistema sensorimotor, memória, cognição e as emoções. A guanosina, um derivado da guanina, tem mostrado papel neuroprotetor ao sistema nervoso central, agindo no sistema glutamatérgico. Esses efeitos têm sido demonstrados em ratos machos, mas não em fêmeas, por isso, o objetivo desta tese foi investigar através de testes comportamentais, imunoistoquímico e histológico, a ação da guanosina em ratos Wistar machos e fêmeas induzidos cirurgicamente a um modelo de isquemia focal permanente do córtex cerebral parietal, levando em consideração o ciclo estral das fêmeas imediatamente antes da indução isquêmica. Este trabalho foi aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais da UFRGS (Nº 29396). Após a verificação do ciclo estral, fêmeas e machos foram anestesiados, posicionados em aparelho estereotáxico e a isquemia focal cortical foi induzida por termocoagulação dos vasos piais. Ao término da cirurgia, os animais foram tratados com solução salina 0,9% ou guanosina 60 mg/kg, ambos por via intraperitoneal, em 4 doses (0, 1, 3 e 6 horas após a indução isquêmica). No teste do cilindro, as fêmeas apresentaram significativamente melhor recuperação sensorimotora a longo prazo comparadas aos machos. No teste do campo aberto, memória de habituação a longo prazo e locomoção em fêmeas foram prejudicadas pela isquemia e os machos não apresentaram prejuízo. No teste do labirinto em cruz elevado não houve diferença significativa entre os grupos. No teste claro/escuro, as fêmeas isquêmicas demonstraram comportamento ansiolítico comparadas aos machos e às fêmeas naïves. A imunoistoquímica de astrócitos e a mensuração do volume de lesão não apresentaram diferença estatística entre os grupos. Com este trabalho demonstrou-se a importância da realização de pesquisas em ambos os gêneros, considerando o ciclo estral, principalmente para enfermidades complexas como a isquemia cerebral. O tratamento com a guanosina é promissor, principalmente na recuperação motora em fêmeas, entretanto, estudos futuros são necessários para melhor compreendimento dos mecanismos envolvidos. / Ischemic stroke is a serious disease of global incidence and prevalence, considered a leading cause of death and disability worldwide. It is due to hypoperfusion or blood disruption in a brain region and the lack of oxygen and glucose leads to failure in energetic metabolism of neurons and glial cells. The death of these cells releases large amount of glutamate, the main excitatory neurotransmitter, which triggers the ischemic cascade, formed by oxidative stress, excitotoxicity and inflammatory processes. These insults cause severe tissue damage that mainly compromise the sensorimotor system, memory, cognition and emotions. Guanosine, a guanine derivative, has shown a neuroprotective role in the central nervous system, acting on the glutamatergic system. These effects have been demonstrated in male rats, but not in females, so the aim of this thesis was to investigate through behavioral, immunohistochemical and histological tests, the action of guanosine in male and female Wistar rats surgically induced to a model of focal permanent cerebral ischemia in the motor cortex, considering the female estrous cycle immediately before the ischemic induction. This work was approved by the UFRGS Ethical Committee on the Use of Animals (No. 29396). After estrous cycle verification, females and males were anesthetized, positioned in a stereotaxic apparatus, and cortical focal ischemia was induced by thermocoagulation of the pial vessels. At the end of the surgery, the animals were treated with 0.9% saline or guanosine 60 mg/kg, both intraperitoneally, in 4 doses (0, 1, 3 and 6 hours after ischemic induction). In the cylinder test, females presented significant long-term sensorimotor recovery compared to males. In the open field test, long-term memory habituation and locomotion/exploratory activity in females were impaired by ischemia and males showed no impairment. In the elevated plus maze test, there was no significant difference between groups. In the light/dark test, the ischemic females showed anxiolytic-like behavior compared to naïve males and females. The immunohistochemistry of astrocytes and the measurement of lesion volume did not show any statistical difference between groups. With this work it was demonstrated the importance of conducting researches in both genders, considering the estrous cycle, mainly for complex diseases such as cerebral ischemia. The treatment with guanosine is promising, especially in motor recovery in females; however, future studies are necessary to better understand the mechanisms involved.

Os ratos-de-espinho são abundantes nas florestas úmidas Neotropicais. Trinomys yonenagae (ROCHA, 1995) constitui uma exceção entre as espécies do gênero por habitar o campo de dunas fixas da Caatinga, ser colonial e fossorial. Tanto o ambiente seco, como a socialidade e o hábito fossorial podem alterar o padrão reprodutivo das espécies. Diante do fato desses roedores serem coloniais, por exemplo, espera-se a influência de co-específicos (fêmeas ou machos) no ciclo estral. Estudos-piloto na natureza e em cativeiro mostraram que a fase de diestro pode ocorrer com a vagina aberta, um fato que merece ser mais investigado, já que se considera que a abertura vaginal ocorra somente durante a transição da fase proestro-estro. O objetivo deste trabalho é, portanto, o de estudar aspectos dos ritmos reprodutivos infradianos (ciclo estral e gestação) e circadiano (temperatura corporal) em rabos-de-facho, mantidos em cativeiro, alojados individualmente, e pareados com fêmeas e com machos. Nesses grupos são caracterizados os esfregaços e o estado de abertura da vagina, buscando conhecer aspectos da fisiologia reprodutiva, tais como, a idade de maturidade sexual (cap. 1), a relação entre a fase do ciclo estral e o estado vaginal (cap. 2), e as características da citologia esfoliativa durante a gravidez (cap. 3). Os dados da citologia são correlacionados com o padrão comportamental durante o acasalamento, caracterizando a existência de estro pós-parto (cap. 3). Analisa-se ainda a distribuição de todos os nascimentos ocorridos ao longo de dez anos. O ritmo de temperatura corporal das fêmeas é aferido a partir de acompanhamento da temperatura retal com uso de termômetro digital durante 72h (cap. 4). Embora de maneira geral Trinomys yonenagae siga os padrões reprodutivos de outros membros da família Echimyidae, tais como, gestação longa (90d), ninhadas pequenas (média de 2 filhotes) e maturidade sexual tardia (ao redor dos 90d) é possível identificar a influência de co-específicos (dominância entre fêmeas) no ciclo estral. Este ciclo parece ser espontâneo, do tipo poliéstrico, com fases muito curtas de proestro e estro (< 24h). A condição vaginal não é um bom indicativo de atividade reprodutiva (ocorre abertura no diestro e na gravidez); a presença do macho não garante fecundação; também se confirma a ocorrência de estro pós-parto, igualmente breve. O comportamento de acasalamento é elaborado, o que é esperado de espécies com estro curto ou de vida social e subterrânea. A distribuição dos nascimentos não é sazonal, confirmando dados de campo. Quanto ao ritmo de temperatura corporal, ele é circadiano com picos noturnos e com relação positiva de fase com o ritmo de atividade/repouso, o que segue o padrão geral de roedores / Spiny rats are among the most numerous group of mammals in Neotropical rainforests. Trinomys yonenagae (ROCHA, 1995) is an exception because it is colonial, fossorial and inhabits the semiarid Caatinga. The dry environment and the underground and colonial life styles are known to affect reproductive patterns. So it is expected, for example, that social life may influence the estrous cycle especially through the presence of conspecific (females and males). It is considered that vaginal opening occurs only during the estrus. Previous field studies or in captivity have shown the unexpected occurrence of vaginal opening and diestrus, a fact that deserves further investigation. The aim of this work is verify the reproductive infradian rhythms (estrous cycle and pregnancy) and the circadian body temperature rhythm, in T. yonenagae kept individually or in pairs (male-female and female-female) in captivity. In these groups vaginal smears and the presence of the vaginal membrane is studied aiming to characterize aspects of its reproductive life, such as, the age of sexual maturity (chapter 1), the relationship between the vaginal opening and the phase of the estrous cycle (chapter 2), and the smear cytology during pregnancy (chapter 3). The cytological data are correlated with the mating behavioral, characterizing the post-partum estrus (chapter 3). All birth that occurrence during 10 years are analyzed. The body temperature rhythm is measured during 72h by rectal temperature with a digital thermometer (chapter 4). Although Trinomys yonenagae follows the reproductive patterns of other members of Echimyidae, such as prolonged gestation( 90d), small sized litter (mean of 2) and delayed sexual maturity (around 90d), it is possible to identify the influence of conspecifics (female dominance) upon the estrous cycle. This cycle seems to be spontaneous, poliestric, having very short proestrus and estrus phases (< 24h). The vaginal condition is not a good indicative of the reproductive status (vaginal opening may occur during the diestrus phase and the pregnancy); the presence of males does not guarantee pregnancy. We also confirm the occurrence of post-partum estrus, which is also short-lived. The mating behavior is complex, which is expected in species were the duration of estrus is short, or in species of social and subterranean life. The birth distribution is non seasonal, which is in agreement with field data. The body temperature rhythmicity is circadian with peaks at night; and shows a positive phase relationship with the rest/activity rhythm, both cycles follow the pattern known for other nocturnal rodents

Avaliamos o efeito do treinamento físico intenso e da restrição alimentar no eixo reprodutor e na expressão do RNAm do MCH em ratas fêmeas. Utilizamos ratas fêmeas sedentárias alimentadas (SA), sedentárias com restrição alimentar, treinadas alimentadas (TA) e treinadas com restrição alimentar. O grupo TR entrou em anestro a partir da quarta semana de experimento. Os grupos restritos apresentaram redução de peso corporal, ovários, úteros e tecido adiposo branco, comparados aos alimentados. Houve redução sérica de leptina nos grupos SR e TR. Os grupos TA, SR e TR apresentaram cistos ovarianos. A expressão do RNAm do ppMCH na área incerto-hipotalâmica (IHy) foi menor nos animais TR, SR e nos animais alimentados em proestro, e na área hipotalâmica lateral (LHA) foi maior nos animais em restrição alimentar e nos animais alimentados em proestro. Conclui-se que a leptina exerce forte influencia no eixo reprodutor feminino, tal ação parece ter envolvimento do MCH, sobretudo o proveniente da IHy, uma vez que o MCH da LHA tem relação com o estímulo a busca de alimento. / We evaluated the effect of intense physical training and food restriction on the reproductive axis and MCH mRNA expression in female rats. We used female rats fed sedentary (SF), food-restricted sedentary, trained fed (TF) and trained with food restriction. The group entered anestrus TR from the fourth week of the experiment. The restricted groups had reduced body weight, ovary, uterus and white adipose tissue, compared to the fed. There was a reduction of serum leptin in the SR and TR groups. The TF groups, SR and TR had ovarian cysts. The expression of mRNA ppMCH incerto-hypothalamic area (IHy) was lower in TR animals, SR and animals fed on proestrus, and the lateral hypothalamic area (LHA) were higher in animals on restricted food and animal feeding in proestrus. It is concluded that leptin exerts a strong influence on female reproductive axis, such action appears to have involvement of MCH, especially from the IHy, since the MCH of the LHA is related to the motivational behavior associated to the search for food.

Avaliamos o efeito do treinamento físico intenso e da restrição alimentar no eixo reprodutor e na expressão do RNAm do MCH em ratas fêmeas. Utilizamos ratas fêmeas sedentárias alimentadas (SA), sedentárias com restrição alimentar, treinadas alimentadas (TA) e treinadas com restrição alimentar. O grupo TR entrou em anestro a partir da quarta semana de experimento. Os grupos restritos apresentaram redução de peso corporal, ovários, úteros e tecido adiposo branco, comparados aos alimentados. Houve redução sérica de leptina nos grupos SR e TR. Os grupos TA, SR e TR apresentaram cistos ovarianos. A expressão do RNAm do ppMCH na área incerto-hipotalâmica (IHy) foi menor nos animais TR, SR e nos animais alimentados em proestro, e na área hipotalâmica lateral (LHA) foi maior nos animais em restrição alimentar e nos animais alimentados em proestro. Conclui-se que a leptina exerce forte influencia no eixo reprodutor feminino, tal ação parece ter envolvimento do MCH, sobretudo o proveniente da IHy, uma vez que o MCH da LHA tem relação com o estímulo a busca de alimento. / We evaluated the effect of intense physical training and food restriction on the reproductive axis and MCH mRNA expression in female rats. We used female rats fed sedentary (SF), food-restricted sedentary, trained fed (TF) and trained with food restriction. The group entered anestrus TR from the fourth week of the experiment. The restricted groups had reduced body weight, ovary, uterus and white adipose tissue, compared to the fed. There was a reduction of serum leptin in the SR and TR groups. The TF groups, SR and TR had ovarian cysts. The expression of mRNA ppMCH incerto-hypothalamic area (IHy) was lower in TR animals, SR and animals fed on proestrus, and the lateral hypothalamic area (LHA) were higher in animals on restricted food and animal feeding in proestrus. It is concluded that leptin exerts a strong influence on female reproductive axis, such action appears to have involvement of MCH, especially from the IHy, since the MCH of the LHA is related to the motivational behavior associated to the search for food.

Foram realizados três experimentos visando avaliar o uso de aditivos químicos durante a ensilagem da cana-de-açúcar. No experimento I, objetivou-se verificar as alterações nas características fermentativas e aeróbias das silagens de cana-de-açúcar ensiladas com 1% de cal virgem ou 1% de calcário (com base na matéria original). As menores (P<0,01) perdas gasosas foram observadas nos tratamentos contendo fontes de cal virgem ou calcário. As silagens tratadas com esses aditivos apresentaram maior (P<0,01) teor de carboidratos solúveis residuais e de ácido acético e butírico, além de reduzida fermentação alcoólica. Na estabilidade aeróbia, o tratamento com cal virgem apresentou maior estabilidade aeróbia, evidenciado pelo maior (P<0,05) tempo para elevação de temperatura e menores (P<0,05) perdas de matéria seca. No experimento II avaliou-se a digestibilidade dos nutrientes e os parâmetros de fermentação ruminal de borregos alimentados com rações contendo essas silagens, bem como a silagem não tratada e a cana-de-açúcar in natura. Foram utilizados 16 borregos não castrados da raça Santa Inês, alocados em gaiolas para ensaio de metabolismo. Todas as rações experimentais foram compostas de 50% de volumoso na matéria seca. Foram utilizadas quatro rações como tratamentos, diferindo quanto ao tipo do volumoso utilizado: canade- açúcar in natura, silagem de cana-de-açúcar sem aditivo, silagem de cana-deaçúcar aditivada com cal virgem (1%) e silagem de cana-de-açúcar aditivada com calcário (1%). Houve diferença (P<0,05) entre os tratamentos nos coeficientes de digestibilidade da matéria seca e da matéria orgânica, onde observou-se maior digestibilidade aparente da ração contendo cana-de-açúcar in natura. A concentração de butirato foi maior (P<0,05) nos animais que consumiram a ração contendo silagem tratada com 1% de cal virgem, apresentando valor de 11,89 mM. Os valores de pH ruminal não sofreram alteração (P>0,05) entre os tratamentos, apresentado valor médio de 6,3. No experimento III, objetivou-se avaliar o desempenho, retorno da atividade ovariana pós-parto e comportamento ingestivo de ovelhas em lactação, alimentadas com os mesmos tratamentos apresentados no experimento II. Foram utilizadas 40 ovelhas da raça Santa Inês individualmente alojadas em baias cobertas. Não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos na produção de leite. O teor de gordura do leite foi maior nas ovelhas que consumiram as rações contendo as silagens. Não verificou-se diferença (P>0,05) entre os tratamentos no número de dias necessários para ocorrer a primeira ovulação. A concentração de ácidos graxos não-esterificados não foi alterada (P>0,05) entre os tratamentos. Não foi verificada diferença (P>0,05) entre os tratamentos nas avaliações do comportamento ingestivo dos animais. O uso de fontes de cálcio como aditivos na ensilagem da cana-de-açúcar proporcionou melhor padrão fermentativo, com redução das perdas gasosas e da produção de etanol. O desempenho animal não foi afetado com a utilização dessas silagens. / Three experiments were conducted to evaluate the effects of fresh sugarcane or sugarcane silages added during ensiling with calcium oxide and limestone (1% as-fed basis). The experiment I assessed the fermentative characteristics and aerobic stability of silages and fresh sugarcane. The lowest gas losses were observed for treatments containing calcium oxide and limestone. These two treatments also showed low ethanol production and higher concentrations of residual soluble carbohydrates, acetic and butyric acids when compared with non-treated silage. In the aerobic stability trial, silage treated with calcium oxide presented the highest aerobic stability, observed by the heating delay and the lowest dry matter losses. Nutrient digestibility and ruminal parameters were also evaluated in the experiment II using sixteen Santa Inês ram lambs kept in metabolism crates. All experimental diet contained 50% of roughage (DM basis) and treatments were defined according to roughage type: fresh sugarcane, sugarcane silage with no additive, sugarcane silage with calcium oxide (1% as-fed basis), and sugarcane silage with limestone (1% as-fed basis). It was observed difference (P<0.05) among treatments for dry matter and organic matter digestibility with values of 74.62 and 76.43% for the diet containing fresh sugarcane, respectively. Ruminal butyrate concentration (11.89 mM) was the highest (P<0.05) for the animals receiving the diet with calcium oxide silage. There was no treatment effect on ruminal pH (P>0.05), with mean value of 6.3. In the experiment III, milk production, ovarian activity resumption, and ingestive behavior were evaluated using forty Santa Inês ewes individually penned. The ewes were fed with the same diet used in the experiment II. No effect on milk production (P>0.05) was observed. Milk fat concentration was higher (P<0.05) for ewes fed silages when compared to ewes fed sugarcane fresh sugarcane. There was no difference (P>0.05) for days necessary to P4 >= 1 ng/mL. Non-esterified fatty acids concentration and ingestive behavior were not affected (P>0.05) by treatments. Using calcium sources as sugarcane silage additive provided better fermentative pattern with reduction of gas losses and ethanol production. The animal performance was not affected by feeding sugar cane silage.

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O manejo das fazendas era de tipo semi-intensivo, com a alimentação baseada principalmente em espécies forrageiras introduzidas em sistema de piquetes rotacionados a campo e suplementação dependendo das necessidades de cada sistema de produção. Na Fazenda 1, localizada no Sul do Lago de Maracaibo, estado Táchira, foram sincronizadas e submetidas a IATF, 22 novilhas bovinas mestiças leiteiras onde foram obtidas TC de 27,2%, igualmente foram submetidas a IATF 20 vacas bovinas mestiças leiteiras no período pós parto (PPP) com uma TC de 30%, enquanto que da mesma forma, 18 novilhas bubalinas mestiças leiteiras foram inseminadas resultando em nenhuma gestação; em 24 vacas bubalinas no (PPP) sincronizadas na época desfavorável (fevereiro, de 2011), foi obtida uma TC de 20,8%. Para na Fazenda 2, localizada na zona Sul do Estado Tachira foi praticada a IATF na época favorável (novembro de 2010) em 78 búfalas mestiças leiterias no PPP obtendo-se uma TC de 34,6%. No caso da Fazenda 3, localizada em Urama, no Estado Carabobo, foram submetidas a IATF 49 vacas bubalinas mestiças no PPP, obtendo-se uma TC de 42,8%; Na Fazenda 4, localizada em Santa Ana, estado Tachira, foi utilizada a IATF, 85 vacas bovinas mestiças leiteiras obtendo-se uma TC de 40%; Na Fazenda 5, localizada no Estado Portuguesa, foram submetidas a IATF 23 vacas bovinas mestiças de dupla aptidão no PPP, observando-se 47,8% de TC; a Fazenda 6 localizada no estado Portuguesa foram submetidas à IATF 20 novilhas mestiças de corte e 49 vacas bovinas mestiças de corte, resultando em uma TC de 55 e 48,8% respectivamente. Ademais na Fazenda 1, foram avaliadas variáveis como TC e número de partos, quando ficou demonstrado melhores TC em vacas bovinas pluriparas quando comparadas com primíparas (40,5 ≥ 4 partos, 28,5% de 2 a 3 partos e 0% para as primiparas), (P=0.4130); com relação a TC e o intervalo parto tratamento pode ser observado que as maiores TC são em vacas entre 60 e 200 dias pós–parto, sendo que vacas com intervalo entre o parto e tratamento superior a 200 dias, a TC foi muito baixa ( 9,0%), (P= 0.0241); com relação a ECC não houve diferença significativa importante pois todos os animais foram sincronizados com ECC maior ou igual a três e a variação entre os animais foi muito reduzida (P= 0.1632); no tocante a o grau de dificuldade para IA, animais com 0 grau de dificuldade para a IA, apresentaram os maiores índices de concepção (44,4 e 31,2%), respectivamente. A utilização do protocolo para IATF, como o “Pregna Heat-E”, pode ser recomendado tanto em bovinos como em bubalinos com resultados satisfatórios, sendo que as TC no caso de bovinos mestiços com maior sangue Bos taurus, em regiões úmidas quentes como o caso da Fazenda 1, observou-se uma queda na TC, o que se pode atribuir a fatores do meio ambiente interferindo de forma negativa nas TC. Da mesma maneira, é importante salientar que as fêmeas bubalinas devem de ser sincronizadas na época favorável, posto que na época desfavorável ocorreu uma queda nas TC nas fêmeas sincronizadas neste período, (20,8% vs 34,6 e 42,8%) respectivamente. No caso da utilização dos protocolos de sincronização pela IATF em novilhas bubalinas, mostrou-se inadequado, com taxas nulas de concepção, provavelmente, por razões anátomo-fisiológicas neste grupo de animais, neste sentido não devem ser incluídas novilhas bubalinas em programas de IATF, com técnicas convencionais. No tocante para o caso das novilhas bovinas o protocolo “Pregna Heat–E” apresenta se como uma alternativa viável, sendo mais eficientes as taxas de concepção em novilhas mestiças de corte quando comparadas com mestiças leiteiras, por ser mais rústicas e melhor adaptadas as condições tropicais do meio ambiente. Os custos do protocolo “Pregna Heat–E” são relativamente similares com outros protocolos com progestagenos, sendo os resultado aceitáveis, podendo este protocolo ser usado junto com outros protocolos de menor custo. O protocolo “Pregna Heat-E” pode ser usado como uma ferramenta viável na sincronização e IATF tanto em bovinos como em bubalinos, sendo que no caso dos bovinos as TC são maiores do que em bubalinos, (40,1 vs 31,9%), (Fisher = 0,9624; P= 0,0212, P<0,05). Portanto, a utilização do protocolo “Pregna Heat-E”, necessita ser melhor estudado em bubalinos para a obtenção de maiores taxas de concepção. Sendo a taxa de concepção geral tanto em bovinos como em bubalinos de 36,5%. / The use of intravaginal devices with progestin as protocol for synchronization of oestrus cycle for fixed time artificial insemination (FTAI) through “Pregna Heat - E'' protocol were used in 219 cows and 169 female buffaloes, belonging to six commercial farms located in the Tachira, Carabobo, and Portuguesa states, in the Bolivarian Republic of Venezuela with the aim to evaluate conception rates (CR) in beef cows and crossbred dairy cattle, milk buffalo and crossbred dairy cows, and crossbred beef and milk heifer as well as in milk buffalo heifers as well as, with the objective to evaluate several variables that can interfere with CR such as body condition score (BCS), number of births, birth interval treatment, degree of difficulty for AI in the farms in the Farm 1, whereas in other farms were evaluated only the CR. The farms adopted a semi-intensive management, with a diet based primarily on forage species introduced in a artificial pasture used in a rotational grazing system with supplementation on the field depending on the needs of each production system. On a Farm 1, located just south of Lake Maracaibo, Tachira State, were synchronized and subjected to FTAI, 22 crossbred dairy cattle heifers, 20 crossbred dairy cows in the postpartum period (PPP) and 18 crossbred buffalo dairy heifers inseminated when 27.2%, 30% and 0 (zero) CR were obtained; moreover in 24 buffalo cows in the PPP synchronized in the outbreeding season (February 2011), it was obtained a CR of 20.8%. For the Farm 2, located in the southern state Tachira, FTAI was performed in favorable season (November 2010) in 78 crossbred dairy buffalo cows in PPP it was obtaining a CR of 34.6%. In the case of Farm 3, located in Urama county in Carabobo State, 49 crossbred buffalo cows in the PPP, were subjected to FTAI when it was obtaining a CR of 42.8%; in Farm 4, located in Santa Ana county, Tachira state, 85 crossbred dairy cattle cows were used for FTAI with 40% CR obtained, whereas in Farm 5, located in Portuguesa state, 23 crossbred beef cows of dual purpose in PPP were subjected to FTAI and it was found47.8% CR; finally in the Farm 6 located in Portuguesa State 20 crossbred beef heifers and 49 crossbred beef cow, were subjected to FTAI were found a CR of 55 and 48.8%, respectively. Also on Farm 1 were compared variables such as CR and number of births, when it was clear demonstrated that CR in pluriparous beef cows with more than four parturitions the results obtained where quite higher when confronted with cows with 2-3 parturitions and primiparous (40.5 ≥ 4 births, 28.5% 2-3 births and 0% for primiparous), (P = 0.4130); when compared with CR and parturition interval and the use of FTAI protocol “Pregna Heat - E'', the CR is higher in cows between 60 and 200 days postpartum, than cows with the interval of more than 200 days, which showed a very low CR (9.0%) (P = 0.0241); regarding to ECC no significant statistical difference important were observed among females with BSC=3 submitted to FTAI when confronted to animals with higher BCS. In the case of Farm 3, located in Urama county in Carabobo State, 49 crossbred buffalo cows in the PPP, were subjected to FTAI obtaining a CR of 42.8%, whereas in Farm 4, located in Santa Ana county, Táchira state, 85 crossbred dairy cattle cows was used for FTAI, 40% CR obtained, and in Farm 5, located in Portuguesa state, where 23 crossbred beef cows of dual purpose in PPP subjected to FTAI, it was found 47.8% CR; finally in the Farm 6 located in Portuguesa State 20 crossbred beef heifers and 49 crossbred beef cow, were subjected to FTAI when was found a CR of 55 and 48.8%, respectively. Still in the Farm 1 were compared variables such as CR and number of births, when it was clear demonstrated that CR in pluriparous beef cows with more than four parturitions where quite higher when confronted with cows with 2-3 parturitions and primiparous (40.5 ≥ 4 births, 28.5% 2-3 births and 0% for primiparous), (P = 0.4130); when compared with CR and parturition interval and the use of FTAI protocol “Heat-pregna - E'' the CR is higher in cows between 60 and 200 days postpartum, than cows with the interval of more than 200 days, which showed a very low CR (9.0%) (P = 0.0241); regarding to ECC no significant statistical difference important were observed among females with BSC=3 submitted to FTAI when confronted to animals with higher BCS showing a very poor (P=0.1632). With reference to the degree of difficulty for AI, animals with 0 degree of difficulty for AI, presenting the highest conception rates compared to the animals of 1 degree (44.4 and 31.2%), respectively. The use of the protocol “Pregna Heat - E” for FTAI, can be recommended for both in cattle and buffaloes with satisfactory results, however the CR in the case of crossbred Bos taurus or crossed animals with more blood of this sub-species probably due the fact that are raised in hot and humid regions as in the case of Farm 1, it has been observed a decrease in CR, which can be attributed to environmental factors interfering negatively on this variable. Likewise it is important to note that female buffaloes must be synchronized at the favorable season, not in outbreeding season, since throughout this time there was a decrease in CR in buffaloes submitted to FTAI, 20.8 vs 34.6% and 42.8%, respectively. In the case of the use of synchronization protocols such as “Pregna Heat – E” for FTAI use in buffalo heifers in the present study showed to be inadequate, with zero of CR, probably due anatomical and physiological concerned to the reproductive tract (very small cervix), thus buffalo heifers should not be included in FTAI programs with conventional techniques. The protocol ''Pregna Heat - E” can be used as a viable tool for oestrus cycle synchronization and FTAI in both cattle and buffaloes, and in the present study with the bovine CR being higher than in buffaloes (40.1 vs 31, 9%) (Fisher = 0.9624, P = 0.0212, P <0.05). That being so the use of “Pregna Heat - E” protocol as was used in the present study needs to be further studied in buffalo to obtain higher conception rates.

A leptina é um hormônio peptídico multifuncional, produzido principalmente pelo tecido adiposo, possuindo receptores (Ob-Rs) nos órgãos reprodutivos, hipotálamo e hipófise. Os glicocorticóides, como o cortisol, também influenciam diretamente a produção de leptina. A importância desses dois hormônios na atividade reprodutiva tem sido descrita por diversos autores, que observaramo envolvimento de ambos, na melhoria dos índices reprodutivos, seja por sua influência direta no eixo hipotalâmico-hipofisário-gonadal, na maturação dos oócitos ou na preparação uterina para receber o concepto. No entanto, quando em excesso na circulação, podem influênciar negativamente o sistema reprodutivo. Marcadores como a leptina e seu receptor funcional de cadeia longa, estão sendo estudados no endométrio de espécies como humanos, bovinos e suínos, apresentando resultados que correlacionam a diminuição destes, com a infertilidade ou perda embrionária, porém até o momento não foi possível encontrar estudos que abordassem esse tema em equinos. Neste estudo foram avaliados: 1) a presença de leptina (Ob) e seu receptor (Ob-Rb) no endométrio de éguas, observando a influência da obesidade e do ciclo estral nesses marcadores e 2) em uma condição de manejo adverso e estressante, a influência do cortisol intrafolicular, nos níveis de leptina no fluido folicular (FF) e nos marcadores de Ob e Ob-Rb no endométrio durante as fases do ciclo estral. Os resultados demonstraram que existe a presença da leptina e seu receptor (Ob-Rb) no endométrio de equinos, com imunomarcação no epitélio luminal e glandular em todas as fases do ciclo estral avaliadas, apresentando, no entanto, uma marcação imunológica mais intensa nos Ob-Rb (142.68±4.97, P< 0,0001) no epitélio glandular durante o diestro em éguas de escore corporal moderado. Não foi possível observar a influência do aumento do cortisol intrafolicular (FF) nas variáveis avaliadas, pois o cortisol se manteve dentro dos valores fisiológicos para a espécie, no entanto pode-se verificar uma correlação positiva entre os níveis intrafoliculares de cortisol e leptina, estando o cortisol aumentado 8 (30.1±0.07ng/ml, P< 0,05) nos folículos mais próximos a ovulação. Pode-se perceber também, que a marcação imunológica do receptor de leptina no epitélio glandular foi mais intensa (144.52±3.17, P< 0,0001) nos animais que apresentavam folículos até 22 mm, estando a imunomarcação de ambos Ob e Ob-Rb correlacionado de forma negativa (r: -0.7836; P < 0.0001, r:- 0.7343; P < 0.0001), com os níveis de cortisol no FF. / Leptin is a multifunctional peptidic hormone, mainly produced by adipose tissue, having receptors (Ob-Rs) in the reproductive organs, hypothalamus and pituitary. Glucocorticoids, such as cortisol, also directly influence leptin production. The importance of these two hormones in reproductive activity has been described by several authors, who observed the involvement of both, in the improvement of reproductive indices, either by their direct influence on the hypothalamic-pituitary-gonadal axis, oocyte maturation or the uterine preparation to receive the concept. However, when in excess in circulation, they can negatively influence the reproductive system. Markers such as leptin and its long-chain functional receptor are being studied in the endometrium of species such as humans, cattle and pigs, presenting results that correlate the decrease of these with infertility or embryonic loss, but to date it has not been possible to find studies to address this issue in horses. In this study we evaluated: 1) the presence of leptin (Ob) and its receptor (Ob-Rb) in the endometrium of mares, observing the influence of obesity and estrous cycle on these markers and 2) in an adverse and stressful management condition, the influence of intrafollicular cortisol, leptin levels in the follicular fluid (FF), and the Ob and Ob-Rb markers in the endometrium during the estrous cycle phases. The results showed that leptin and its receptor (Ob-Rb) are present in the equine endometrium, with immunostaining in the luminal and glandular epithelium in all stages of the estrous cycle evaluated, however, showing a more intense immunological labeling in Ob -Rb (142.68 ± 4.97, P <0.0001) in the glandular epithelium during the diestrous in mares of moderate body score. It was not possible to observe the influence of intrafollicular cortisol (FF) on the variables evaluated, because cortisol remained within the physiological values for the species, however a positive correlation can be observed between intrafollicular cortisol and leptin levels, being the 10 cortisol increased (30.1 ± 0.07ng/ml, P <0.05) in the follicles closest to ovulation. It can also be noticed that the immunological labeling of the leptin receptor in the glandular epithelium was more intense (144.52 ± 3.17, P <0.0001) in the animals that presented follicles up to 22 mm, and the immunostaining of both Ob and Ob-Rb correlated negatively (r: -0.7836; P <0.0001, r: - 0.7343; P <0.0001), with cortisol levels in FF.

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-03T11:53:29Z No. of bitstreams: 1 GleidsonBO_TESE.pdf: 11466529 bytes, checksum: bbaaa583c7710c45dac218fe4cb14279 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-05-04T16:03:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 GleidsonBO_TESE.pdf: 11466529 bytes, checksum: bbaaa583c7710c45dac218fe4cb14279 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-05-04T16:04:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 GleidsonBO_TESE.pdf: 11466529 bytes, checksum: bbaaa583c7710c45dac218fe4cb14279 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-04T16:04:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GleidsonBO_TESE.pdf: 11466529 bytes, checksum: bbaaa583c7710c45dac218fe4cb14279 (MD5) Previous issue date: 2016-09-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The morphological knowledge and data about the composition of glycosaminoglycans (GAGs) in the female reproductive system and placental of agouti are essential to the understanding of reproductive events. In addition to these, the knowledge of embryonic and fetal development in the specie, provides as the basis for application of ultrasound examination and reproductive biotech, contributing directly to conservation of the specie and commercial exploitation. Therefore, the objective describe the anatomohistological characteristics of the reproductive tract of agoutis females, as well as identify the profile of glycosaminoglycans in reproductive organs and placenta during the pregnancy. Were utilized agoutis 25 adult females at different stages of the estrous cycle and pregnancy, obtained in Centre of Multiplication of Wild Animals of the Universidade Federal Rural do Semi-Árido. After eutanasiados, abdominal and pelvic cavities were opened, the reproductive organs and fetuses when gifts were photographed in situ and ex situ and analysed to morphometric. Each body fragments were fixed in 4% paraformaldehyde solution and 2.5% glutaraldehyde and submitted to histological technique of light and scanning electron microscopy. Fragments of organs were also placed in acetone to remove the lipids and then the sample subjected to agarose gel electrophoresis. Blades for light microscopy, were stained with hematoxylin-eosin, Gomori stain, Alcian-Mallory and Periodic Acid Schiff (PAS). It was observed that he ovary of the Dasyprocta leporina is coated by simple cubic to squamous epithelium that rests on the tunica albuginea, showing a cortical and medular zone. The uterine tube is organized in three layers, a mucous membrane (simple ciliated columnar epithelium), the lamina propria (loose connective) and serosa. The villus height and muscle layer thickness varying between the areas of infundibulum, isthmus and ampulla. In pregnancy this organ has profile variable, with predominance of dermatan sulfate (DS) and heparan sulfate (HS) in early gestation and DS and chondrotin sulfate (CS) in the middle and final thirds with sharp reduction at term. The uterus is classified as partial double, consisting of two horns and a cervix with two distinct ostia that communicate with the body and a single ostium that opens into the vagina. The uterine horn presented throughout pregnancy a predominance of CS and DS, with small amount of HS. The vagina has three layers, the outer adventitia (connective tissue), muscular and mucous membrane composed of epithelium that varies from little pavimentoso storied without keratinization (luteal phase) the storied pavimentoso keratinized and cornified (follicular phase) enough frilled and with leukocytes cells. In the vagina, the main GAG found was the DS, with small concentration of HS analyzed throughout of the pregnancy. The vulva is located between the anus (dorsal) and the ostium and the vestibule urethral absent in the species. The clitoris is external to vagina, in which in its peak protrude sideways two spicules corneas and the urethra centered, in the absence of a common part between the urinary and genital tracts. Embryos at 30 days after copulation had form of "C" with limb buds paddle-shaped, Crown-Rump (CR) of 10.75 ± 0.11 mm and weight of 0.17 ± 0.03 g; 40 days the skin was smooth and transparent and liver boss and curvature of reduced body, CR 19.5 ± 0,007 mm and weight 1.34 ± 0.01 g; after 65 days, the genital tubercle was already differentiated and CR was 83 ± 0.08 mm and weight of 29.22 ± 0.46 g; 85 days, presence of stubble throughout the body, eyes partly open, CR of 127.7 ±0.6 mm and weight of 96.56 ± 7.37 g; 100 days, mature fetus with long hair and the whole body, fully formed tooth and nail and open auditory meatus, CR was 164.3 ± 10.4 mm and weight of 166.5 ± 7.79 g; the infants had the open eyes and bristling at birth, with CR 179.1 ± 0.5 and weight of 201.88 ± 1.89 g. Concluded that the profile and concentration of GAGs varies as to the organ and gestation period and that the age of the embryo/fetus can be evaluated during pregnancy, allowing to estimate gestational age and the data can be used as parameters to ultrasound examinations, helping in the identification of diseases throughout development / O conhecimento morfológico e os dados sobre a composição dos glicosaminoglicanos (GAGs) no sistema reprodutor feminino e tecido placentário de cutia são essenciais para a compreensão dos eventos reprodutivos. Soma-se a estes, o conhecimento sobre o desenvolvimento embrionário/fetal na espécie, que serve como base para aplicação do exame ultrassonográfico e biotécnicas reprodutivas, contribuindo diretamente para conservação da espécie e exploração comercial. Portanto, objetivou-se descrever as características anatomohistológicas do sistema reprodutor de cutias fêmeas, bem como identificar o perfil dos GAGs presentes nos órgãos reprodutivos e placenta ao longo da gestação. Para tanto, foram utilizadas 25 cutias, adultas em diferentes fases do ciclo estral e gestação, obtidas no Centro de Multiplicação de Animais Silvestres da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (CEMAS/UFERSA). Após eutanasiados, as cavidades abdominal e pélvica foram abertas, os órgãos do sistema reprodutor e fetos quando presentes foram fotografados in situ e ex situ e realizado a análise morfométrica. Fragmentos de cada órgão foram fixados em solução de paraformaldeído 4% e glutaraldeído 2,5% e destinados à microscopia de luz e eletrônica de varredura. Fragmentos dos órgãos também foram colocados em acetona para realização do processo de delipidação e em seguida a amostra submetida à eletroforese em gel de agarose. Observou-se que o ovário da cutia é revestido por epitélio simples cúbico a pavimentoso que repousa sobre a túnica albugínea, evidenciando-se uma zona cortical e uma medular. A tuba uterina está organizada em três camadas, uma mucosa (epitélio colunar simples, ciliado e viloso), uma lâmina própria (conjuntivo frouxo) e uma camada serosa, estando o tamanho das vilosidades e a espessura da camada muscular variando entre as áreas de infundíbulo, ampola e istmo. Na gestação, este órgão teve perfil variável, com predomínio de DS e HS no início da gestação e DS e CS nos terços médio e final e redução acentuada a termo. O útero é classificado como duplo parcial, formado por dois cornos e uma cérvix com dois óstios distintos que se comunicam com o corpo e um único óstio que se abre na vagina. O corno uterino apresentou ao longo da gestação uma predominância de CS e DS, com pequena quantidade de HS. A vagina possui três camadas, adventícia externa (tecido conjuntivo), muscular e a mucosa composta por epitélio que varia de pavimentoso pouco estratificado sem queratinização (fase lútea) a estratificado pavimentoso queratinizado e cornificado (fase folicular) bastante pregueado e com presença de células leucocitárias. Na vagina, o principal GAG encontrado foi o DS, com pequena concentração de HS analisados ao longo da gestação. A vulva localiza-se entre o ânus (dorsal) e o óstio uretral, estando o vestíbulo ausente na espécie. O clitóris encontra-se externo a vagina, no qual em seu ápice projetam-se lateralmente duas espículas córneas e uma uretra centralizada, não existindo uma parte comum entre os tratos urinário e genital. Os embriões aos 30 dias pós cópula possuíam forma de “C”, com brotos dos membros em forma de remo, Crown-Rump de 10,75 ± 0,11 mm e peso de 0,17 ± 0,03; aos 40 dias a pele foi lisa e transparente e saliência hepática e curvatura do corpo reduzidas, CR de 19,5 ± 0,007 mm e peso 1,34 ± 0,01 g; aos 65 dias, o tubérculo genital já estava diferenciado e CR observado foi de 83 ± 0,08 mm e peso de 29,22 ± 0,46 g; aos 85 dias, presença de pelos curtos distribuídos pelo corpo, olhos parcialmente abertos, CR de 127,7 ± 0,6 mm e peso de 96,56 ± 7,37 g; aos 100 dias, feto maduro com pêlos longos e em todo o corpo, unhas e dentes completamente formados e conduto auditivo aberto, CR foi de 164,3 ± 10,4 mm e peso de 166,5 ± 7,79 g; os neonatos apresentaram pêlos eriçados e olhos abertos ao nascer, com CR de 179,1 ± 0,5 e peso de 201,88 ± 1,89 g. Conclui-se que o perfil e a concentração dos GAGs varia quanto ao órgão e período de gestação e que a idade do embrião/feto pode ser avaliada durante gestação, permitindo estimar idades gestacionais, e os dados podendo ser usados como parâmetros para exames ultrassonográficos, ajudando na identificação de patologias ao longo do desenvolvimento / 2017-04-25

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-03T13:11:41Z No. of bitstreams: 1 AndreMV_TESE.pdf: 15675614 bytes, checksum: fe55971bec8a35c1310c8ede4fbbf2f5 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-05-04T16:04:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AndreMV_TESE.pdf: 15675614 bytes, checksum: fe55971bec8a35c1310c8ede4fbbf2f5 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-05-04T16:04:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AndreMV_TESE.pdf: 15675614 bytes, checksum: fe55971bec8a35c1310c8ede4fbbf2f5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-04T16:05:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreMV_TESE.pdf: 15675614 bytes, checksum: fe55971bec8a35c1310c8ede4fbbf2f5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The gestation period, the characteristics of the reproductive cycle, including the selection of the influence of the male effect, the description of the female reproductive system, placentation, embryonic and fetal development – added of the morphometric analysis - and the expression of sulfated glycosaminoglycans (GAGs) in the reproductive and placental organs were the ways to contribute with the conservation of the species. For this, 45 non-pregnant females were used in the following experiments: 15 females were distributed in three experimental groups, followed by the addition of one male in each group, so that after the copulation and fertilization the females were separeted in accordance with the compatible dates of begining (days 5, 10 and 15), middle (days 20, 25, 30 and 35) and end (days 40, 45, 50 and 55) of gestation. This condition was obtained to obtain fragments of gestational sacs, placentas and organs of the female reproductive system, which were fixed in 4% paraformaldehyde and submitted to light microscopy techniques. The samples fixed in glutaraldehyde were performed in scanning and transmission electron microscopy techniques. In addition, prozima was used for GAG extraction, followed by agarose gel electrophoresis and subsequent quantification by densitometry. The second experiment consisted of the use of five females, housed in a room that contained a male to monitor the duration of gestation. The third experiment aimed to characterize the estrous cycle in a group containing five females plus one male, which was found trapped in a cage and another five, in a box exempt from the latter. The fourth experiment was performed by means of the morphometric analysis of embryos with 20, 25, 30 and 35 days plus fetuses on days 40, 45, 50, 55, 60 and newborns. The results revealed the presence of an incomplete double uterus, formed by two horns, a septate body and a cervix. The organs of the reproductive system presented macroscopic and histological characteristics similar to those reported for other rodents. The duration of gestation showed an average of 59 ± 2,7487 days and the sexual cycle was classified as continuous polystyric, with a mean period of 14.8 ± 0.73 days for females submitted to the male effect and 14.6 ± 0.75 days for those of the other group. In addition, the male presence significantly influenced (D <0.05) the duration of the diestrus, making it longer. The yolk sac inversion occurred on the 14th day of gestation and the visceral endoderm was placed in apposition to the uterine tissues. The chorioallantoic placenta presented a discoidal shape and had well defined regions of spongiotrophoblast, labyrinth and subplacenta from the intermediate gestation. Embryonic development was similar to that observed in histricognatis rodents, being the transition to the fetal phase, occurring at 40 days of gestation. Morphometric data allowed the establishment of correlations with gestational age. Dermatan sulfate was the predominant GAG in samples of uterine tubes, vaginas and placentas, whereas heparam expressed more in the body of the uterus at the beginning of gestation. There were also high concentrations of GAGs in the pregnant uterus and still in the reproductive system in the estrogenic phase when compared to the diestrus. It is concluded that the reproductive events presented characteristics of the species correlated with others of the order Rodentia, fact that indicates a set of evolutionary strategies related to its maintenance / O período de gestação, características do ciclo reprodutivo, incluindo verificação da influência do efeito macho, descrição do sistema reprodutor feminino, placentação, desenvolvimento embrionário e fetal – acrescido de análises morfométricas - e expressão dos glicosaminoglicanos (GAGs) sulfatados nos órgãos reprodutivos e placentários foram caracterizados em fêmeas de preás como forma de contribuir para a conservação da espécie. Para tanto, utilizaram-se 45 fêmeas não gestantes nos seguintes experimentos: 15 fêmeas foram distribuídas em três grupos experimentais, seguido da adição de um macho em cada grupo de modo que após a cópula e fecundação, as fêmeas eram separadas segundo datas compatíveis com início (dias cinco, 10 e 15), meio (dias 20, 25, 30 e 35) e fim (dias 40, 45, 50 e 55) da gestação. Tal condição visou à obtenção de fragmentos dos sacos gestacionais, placentas e órgãos do sistema reprodutor feminino, os quais foram fixados em paraformaldeído 4% e submetidos às técnicas de microscopia de luz. As amostras fixadas em glutaraldeído foram destinadas à realização de técnicas de microscopia eletrônica de varredura e transmissão. Além disto, usou-se a prozima para extração dos GAGs, seguida da eletroforese em gel de agarose e posterior quantificação por densitometria. O segundo experimento consistiu na utilização de cinco fêmeas, alocadas em recinto que continha um macho para o acompanhamento da duração da gestação. O terceiro experimento objetivou a caracterização do ciclo estral em um grupo contendo cinco fêmeas mais um macho, o qual encontrou-se preso em gaiola e outras cinco, em box isento deste último. O quarto experimento foi realizado por meio da análise morfométrica de embriões com 20, 25, 30 e 35 dias além de fetos nos dias 40, 45, 50, 55, 60 e recém-nascidos. Os resultados revelaram a presença de um útero duplo incompleto, formado por dois cornos, um corpo septado e uma cérvice. Os órgãos do sistema reprodutor apresentaram características macroscópicas e histológicas semelhantes as relatadas para outros roedores. A duração da gestação demonstrou média de 59 ± 2,7487 dias e o ciclo sexual foi classificado como poliéstrico contínuo, com período médio de 14,8 ± 0,73 dias para as fêmeas submetidas ao efeito macho e 14,6 ± 0,75 dias para aquelas do outro grupo. Além disto, a presença do macho influenciou significativamente (P<0,05) a duração do diestro, tornando-o mais longo. A inversão do saco vitelino ocorreu no décimo quarto dia de gestação e o endoderma visceral situou-se em aposição aos tecidos uterinos. A placenta corioalantoide apresentou forma discoidal e possuiu regiões bem definidas de espongiotrofoblasto, labirinto e subplacenta a partir da gestação intermediária. O desenvolvimento embrionário foi semelhante ao observado em roedores histricognatis, sendo a transição para a fase fetal, ocorrida aos 40 dias de gestação. Os dados morfométricos possibilitaram o estabelecimento de correlações com a idade gestacional. O dermatam sulfato foi o GAG predominante em amostras de tubas uterinas, vaginas e placentas, ao passo que o heparam expressou-se mais no corpo do útero, no início da gestação. Houve ainda elevadas concentrações de GAGs no útero gestante e no sistema reprodutor na fase estrogênica quando comparada ao diestro. Conclui-se que os eventos reprodutivos apresentaram características da espécie correlacionáveis com outras da ordem Rodentia, fato este que indica um conjunto de estratégias evolutivas relacionadas com a sua manutenção / 2017-05-03

Investigou-se o desempenho reprodutivo de novilhas e vacas de corte submetidas a protocolos de sincronização de estros para a inseminação artificial e a associação entre marcadores moleculares e desempenho reprodutivo. Exp.1 avaliou-se a antecipação da aplicação da PGF2a em programa de IATF com implante de progesterona em 306 vacas Angus, com cria ao pé. A antecipação da aplicação da PGF2a afetou a taxa de concepção à IATF e prenhez final (P<0,05), respectivamente de 60,9% e 89,1% quando comparados a PGF2a na retirada do dispositivo, respectivamente de 49,3% e 76,7%. Exp.2 avaliaram-se os efeitos do GnRH e da manifestação de estro sobre o desempenho reprodutivo em 197 vacas Angus submetidas à IATF. A manifestação de estro antes da IATF influenciou a taxa de prenhez à IATF (TxPIATF) e prenhez final, respectivamente de 46,6%, 78,6% (C/estro) e 33,0%, 60,6% (S/estro) (P<0,05). O GnRH no momento da IATF resultou em menor taxa de prenhez à IATF, 32,3%, comparado a ausência de GnRH 48,0% (P<0,05), mas não afetou a prenhez final, respectivamente de 69,7% e 70,4%. Houve interação entre estro e GnRH. Vacas C/estro-C/GnRH tiveram 31,4% de prenhez à IATF contra vacas C/estro- S/GnRH com 61,5% (P<0,05). Nas vacas sem estro, o GnRH não apresentou efeito (P>0,05) na TxPIATF (32,6% e 33,3%). O escore de condição corporal (ECC) afetou a taxa de manifestação de estro e a TxPIATF, com superioridade (P<0,05) para vacas > de 3,0. Exp.3 compararam-se os efeitos de diferentes protocolos para a IATF com o acasalamento por touros (Controle) sobre o desempenho reprodutivo de 249 vacas Angus. Formou-se 5 grupos: Controle; Crestar 2º uso; OvSynch; Primer 1ºuso e Primer 2ºuso. A IATF dos animais foi realizada 27 dias e 38 dias após o inicio da estação do grupo controle. Sete dias após a IATF iniciou o repasse com touros. A estação de acasalamento (EA) foi de 91 dias para o grupo controle e 64 e 53 dias para os grupos IATF. A taxa de prenhez ao final da EA não se diferenciou entre os grupos 83,9%. As perdas reprodutivas entre o diagnóstico de gestação e o nascimento foram de 10,5%, sem diferenças entre grupos. O ECC de fêmeas que emprenharam no grupo controle foi diferente do ECC de fêmeas vazias, mas não se diferenciou nos animais da IATF. Exp.4 avaliaram-se protocolos de inseminação sobre o índice reprodutivo em 249 novilhas Britânicas e cruzas, acasaladas aos 14 e 27 meses. Novilhas de 14 e 27 meses foram submetidas aos tratamentos Crestar ou inseminação artificial (IA) por 7 dias, seguida por mais 5 dias após PGF2a (grupo PGF2a) Novilhas de 27 meses também foram submetidas ao OvSynch. Foram avaliados o peso vivo, ECC, escore de trato reprodutivo (ETR) ao início da estação reprodutiva. Os tratamentos OvSynch e Crestar tiveram 100% dos animais inseminados (IATF), enquanto os grupos IA com PGF2a aos 14 e 27 meses tiveram, respectivamente 21,9% e 43,5%. Não houve diferença nas taxas de concepção entre tratamentos e idades (P>0,05), com valores respectivos de 46,5%, 56,3%, 64,7% para Crestar, OvSynch, PGF2a e de 44,4% e 57,1%, para 14 e 27 meses. A taxa de prenhez à IA(TF) foi de 46,5%, 56,3%, 23,4% para Crestar, OvSynch, PGF2a, com superioridade (P<0,05) a favor do Crestar e OvSynch. A taxa de prenhez à IA(TF) foi de 18,6% e 41,3% (P<0,01) para idades 14 e 27 meses. A taxa de prenhez final, após o repasse com touros, foi superior a 90% em todos os grupos (P<0,05). O ETR influenciou a taxa de prenhez após a inseminação. Exp.5 e 6 buscou-se uma associação entre a resposta reprodutiva e marcadores moleculares ligados aos genes do receptor para IGF-1, LH , Leptina, receptores do FSH e LH. Foram utilizados dados de 249 novilhas (Exp4.) e 249 vacas (Exp.3). Nas novilhas a prenhez à inseminação e a prenhez final foram de 41,0% e 91,6%. Nas novilhas não foram encontradas associações entre marcadores e reprodução. No rebanho das vacas a taxa de natalidade no ano subseqüente foi de 75,5%, sem diferenças entre tratamentos, idade e escore ovariano. O ECC influenciou a taxa de natalidade, respectivamente de 55,6%, 75,8% e 82,4% (P<0,05) para os animais com ECC menor que 2,5; 2,5 a 2,9; maior ou igual a 3,0 ao do inicio EA. Vacas homozigóticas no marcador AFZ-1 apresentaram 84,4% de natalidade em comparação as heterozigóticas com 71,5% (P<0,05). A presença do alelo*161 nomarcador HEL5 resultou em 33,3% de natalidade, contra 76,5% em vacas sem esse alelo (P<0,05). Os experimentos evidenciaram que a antecipação da aplicação da PGF2a resultou em aumento da taxa de prenhez à IATF. O ECC mostrou-se como importante preditor do desempenho reprodutivo em vacas de corte. O uso do GnRH concomitante à IATF em vacas com manifestação de estro induzido com benzoato resultou em menor resposta reprodutiva à IATF. A IATF proporcionou aumento nas taxas de inseminação em novilhas, especialmente nas submetidas ao acasalamento 14 meses. O escore de trato reprodutivo ao início da estação de acasalamento influenciou a precocidade de concepção das novilhas. O atraso da realização da IATF após o início da EA não afetou a taxa de prenhez final de vacas de cria quando comparado ao acasalamento por touros. Marcadores moleculares apresentaram associação com o desempenho reprodutivo de bovinos. / Were investigated the reproductive performance of beef heifers and cows submitted to different estrus synchronization protocols for artificial insemination and the association between molecular markers and reproductive performance. Trial.1 The anticipation of the application of PGF2a in TAI program with implantation of progesterone in 306 nursing Angus cows was evaluated. Anticipating the application of PGF2a affected (P <0.05) conception rate to TAI and final pregnancy, respectively 60.9% and 89.1% when compared to PGF2a in the removal of the device, respectively 49.3% and 76.7%. Trial.2 The effects of GnRH and oestrus on reproductive performance in 197 Angus cows subjected to TAI It were evaluated. The expression of oestrus before TAI influenced the pregnancy rate to TAI (TxPTAI) and final pregnancy (P<0.05), respectively 46.6%, 78.6% (oestrus) and 33.0%, 60.6% (No/oestrus). GnRH at the time of TAI resulted in lower pregnancy rate to TAI (32.3%) compared to the absence of GnRH (48.0%) (P<0.05) but did not affect the final pregnancy, respectively 69, 7% and 70.4%. There was interaction between GnRH and oestrus. Cows with oestrus and GnRH had 31.4% pregnancy for TAI cows against with oestrus without GnRH with 61.5% (P <0.05). In cows without oestrus, GnRH had no effect (P> 0.05) TxPTAI (32.6% and 33.3%). The body condition score (BCS) affected the rate of oestrus and TxPTAI, with higher (P <0.05) for cows > than 3.0. Trial.3 The effects of different protocols for TAI with mating by bulls (control) on the reproductive performance of 249 Angus cows were compared. It was formed five groups: Control; Crestar 2nd use; OvSynch; Primer new and Primer 2nd use. The TAI was performed 27 days and 38 days after the start breeding season in the control group. Seven days after TAI was realized the clean-up bulls. The mating season (MS) was 91 days for the control group and 64 and 53 days for TAI groups. Pregnancy rate at the end of MS did not differ between groups (83.9%). Reproductive failure between diagnosis of pregnancy and birth were 10.5%, without differences between groups. The BCS to pregnant cows in the control group differed from open cows, but it was not different in cows submitted to TAI. Trial.4 Different protocols to insemination on reproduction in 249 British and crossbred heifers, bred at 14 and 27 months were evaluated. Heifers to 14 and 27 months were treated Crestar or artificial insemination (AI) for 7 days, followed by more than 5 days after PGF2a (PGF2a group) Heifers 27 months were also submitted to OvSynch. We evaluated body weight, BCS, reproductive tract score (RTS) to the beginning of the breeding season. Treatments OvSynch and Crestar had 100% of the animals inseminated (TAI), while groups with PGF2a IA at 14 and 27 months were respectively 21.9% and 43.5%. There was no difference in conception rates between treatment and age (P>0.05), with respective values of 46.5%, 56.3%, 64.7% for Crestar, OvSynch, PGF2a, and 44.4% and 57.1% for 14 and 27 months. Pregnancy rate to AI (TAI) was 46.5%, 56.3%, 23.4% for Crestar, OvSynch, PGF2a, with higher (P <0.05) in favor of Crestar and OvSynch. Pregnancy rate to AI (TAI) was 18.6% and 41.3% (P <0.01) for ages 14 and 27 months. The final pregnancy rate after clean-up bulls was superior to 90% in all groups (P<0.05). The RTS influenced the pregnancy rate after insemination. Trial.5 and 6 we looking for an association between the reproductive response and molecular markers linked to genes for IGF-1 receptor, LH , Leptin, FSH and LH receptors. We used data from 249 heifers (Trial4.) and 249 cows (Trial.3). Pregnancy in heifers at insemination and final pregnancy were 41.0% and 91.6%. No associations were found between markers and reproduction in heifers. In the cow`s herd the birth rate in subsequent years was 75.5%, with no differences between treatments, age and ovarian score. The BCS has influenced the birth rate, respectively 55.6%, 75.8% and 82.4% (P <0.05) for animals with BCS less than 2.5, 2.5 to 2.9; greater than or equal to 3.0 to the beginning of the MS. Cows in homozygous marker AFZ-1 showed 84.4% of the birth rate compared with 71.5% (P <0.05) in heterozygous cows. The presence of allele*161 to HEL5 marker resulted in 33.3% of birth rate vs. 76.5% in cows without this allele (P<0.05). The experiments showed that the anticipation of the implementation of PGF2a resulted in increased pregnancy rate to TAI. BCS has proven to be an important predictor of reproductive performance in beef cows. The use of GnRH in cows with the oestrus induced with benzoate showed worse reproductive response to TAI. The TAI has provided increased rates of insemination in heifers, especially in heifers submitted to matting by 14 months. The reproductive tract score at the beginning of the breeding season influenced the speed of conception in heifers. The delay of the realization of TAI after the onset of MS did not affect the final pregnancy rate of beef cows when compared to breeding only by bulls. Molecular markers were associated with the reproductive performance of cattle.