Patógenos necrotróficos matam as células por meio de suas agressivas moléculas toxicas e enzimas líticas não específicas. Jasmonato (JA) é um importante hormônio produzido, para entre outras funções, regular positivamente genes envolvidos na defesa a necrotróficos. Um passo importante nesta rota é a produção do ácido linolênico, um ácido graxo de (18:3) que é dessaturado de (18:2) pelas enzimas FAD3, FAD7 e FAD8. Uma ferramenta muito utilizada hoje é o silenciamento gênico induzido por vírus (VIGS) que se utiliza de um mecanismo natural de defesa das plantas a vírus, para a descoberta da função gênica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a interação entre A. thaliana e isolados do gênero Pythium sp., com os genes FAD3, FAD7 e FAD8 silenciados. Para alcançar tal objetivo um fragmento de 325 pb do gene FAD7 de A. thaliana foi isolado e clonado no vetor viral TRV2b. As plantas foram agro-infiltradas com o vetor TRV1 e TRV2b-GFP (controle) ou TRV2b-FAD7 (silenciada), após foi realizada a inoculação dos isolados de Pythium sp. e atribuídas notas de severidade, referente ao fenótipo e medido o comprimento das raízes. A agro-infiltração do vetor viral TRV2b-FAD7 ocasionou uma redução significativa na quantidade de mRNA dos genes FAD3 e FAD7, não interferindo na quantidade de mRNA do FAD8. Esta redução na expressão interferiu negativamente na resistência de A. thaliana a P. deliense, causando sintomas mais severos na parte aérea, sintomas que estão correlacionados significativamente com o comprimento de raiz. O silenciamento destes genes ocasionou a redução na expressão da defensina PDF1.2, induzida na infecção por patógenos necrotróficos. A resistência a P. deliense foi restituída pela adição de metil-jasmonato, pois a aplicação exógena deste, ocasionou a indução de PDF1.2, evidenciando a importância da produção de JA na indução desta defensina e na resistência a P. deliense. / Necrotrophic pathogens kill plant cells through its aggressive and nonspecific lytic enzymes and toxic molecules. Jasmonate (JA) is an important hormone that positively regulates genes involved in necrotrophic defense, among other functions. An important step in this pathway is the production of linolenic acid, a fatty acid (18:3) that is desaturated to (18:2) by FAD3, FAD7, and FAD8 enzymes. Virus induced gene silencing (VIGS) is a widely used tool today, which takes advantage of a natural defense mechanism of plants against viruses, for the discovery of gene function. The aim of this study was to evaluate the interaction between A. thaliana and isolates of the genus Pythium sp., after gene silencing of FAD3, FAD7, and FAD8. For this purpose, a 325 bp fragment of FAD7 from A. thaliana was isolated and cloned into a viral vector TRV2b. Plants were agro-infiltrated with the vector and TRV1 TRV2b-GFP (control) or TRV2b-FAD7 (silenced). Then, plants were inoculated with Pythium sp. isolates and disease severity was evaluated, based on phenotype and measures of root length. Agroinfiltration of TRV2b-FAD7 caused a significant reduction in the amount of mRNA from FAD3 and FAD7 but did not interfere in the amount of mRNA from FAD8. This down regulation had a negative influence on the resistance of A. thaliana to P. deliense, causing more severe symptoms in the shoot, symptoms that are significantly correlated with root length. Gene silencing led to a reduction in the expression of PDF1.2 defensin, which is induced in infections caused by necrotrophic pathogens. Resistance to P. deliense was restored by adding exogenous methyl jasmonate, which induced PDF1.2 expression. These results indicate the importance of JA in the induction of this defensin leading to resistance against P. deliense in A. thaliana.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-09-01T13:39:59Z No. of bitstreams: 1 Renata de Souza Leao Araujo.pdf: 1930421 bytes, checksum: 1db6f0205f100a4ec76a46ecdb9718b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T13:39:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata de Souza Leao Araujo.pdf: 1930421 bytes, checksum: 1db6f0205f100a4ec76a46ecdb9718b6 (MD5) Previous issue date: 2012-09-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The arbuscular mycorrhizal fungi – AMF, Gigaspora margarita Becker & Hall has the ability to colonize roots and stimulate plant growth. The P biofertilizers (BP) and K biofertilizers (BK) aim to increase the nutrient content of minerals contained in rock and promote nutrients availability for plant growth. The research aimed to determine the effect of interaction by BP, BK and AMF on initial growth of seedlings of Mimosa caesalpiniaefolia Benth (Sabiá), compared to mineral fertilizers (SSP and KCl). The experiment was conducted in the greenhouse of the Department of Agronomy, Campus of UFRPE. The P fertilization was performed with addition of two levels of BP (215 mg.kg-1 soil - BP1 and 430 mg.kg-1 soil - BP2), and mineral fertilizer in recommended doses of 215 mg.kg-1 soil (SFS). Fertilization with K was carried out with addition of two levels of BK (136 mg.kg-1 soil - BK1 and 272 mg.kg-1 soil - BK2, and mineral fertilizer in recommended doses of 68 mg.kg-1 soil (KCl). At the control treatment, was not applied fertilizer (biofertilizer and mineral fertilizers) or inoculant. The isolated fungus (Gigaspora margarita) was from the CNPAB (Centro Nacional de Pesquisa EMBRAPA - Agrobiologia). The experimental design was completely randomized in factorial scheme 4 x 4 x 2, four doses of P fertilizers, four doses of K fertilizer and two levels of mycorrhiza (presence or absence), with four replications. The height (cm) and diameter (mm) of the stem of the plant were observed at 30, 60, 90 and 120 days after transplanting and inoculation. At 30 days after inoculation, no significant effect was found for any of the treatments. At 60 and 90 days, treatment with mycorrhiza and different sources of phosphate, had similar means for height, while in the absence of AMF was the best performance when using the addition of SSP. At 120 days, it was found that plants inoculated with AMF grew faster than plants without AMF. Different sources and levels of phosphorus promoted significant effect on the variables dry matter and biomass allocation (leaf, stem and root). The accumulation of nutrients (Ca, Mg, K and P) in promoted significant effect on the initial growth, until 120 days, dependent on the inoculation. Inoculation with AMF Gigaspora margarita was as effective for growth of leguminous Sabiá, and chemical fertilizers (SSP and KCl) / O fungo micorrízico arbuscular – FMA, Gigaspora margarita Becker & Hall, tem a capacidade de colonizar as raízes e estimular o crescimento da planta. Os biofertilizantes de rochas fosfatadas (BP) e potássicas (BK) visam aumentar o teor de nutrientes contidos nos minerais de rochas e sua aplicação no solo para suprir os nutrientes essenciais para o crescimento da planta. A pesquisa objetivou verificar o efeito de biofertilizantes fosfatados (BP) e potássicos (BK) aplicados em solo de Zona da Mata de Pernambuco, em interação com fungo micorrízico arbuscular - FMA (Gigaspora margarita Becker & Hall), no crescimento inicial de mudas de Mimosa caesalpiniaefolia Benth (Sabiá), comparado a fertilizantes químicos convencionais. O experimento foi realizado em casa de vegetação do Departamento de Agronomia, no Campus da UFRPE. A adubação com P foi realizada com adição de biofertilizante fosfatado nas doses de 215 mg.kg-1 de solo (BP1), 430 mg.kg-1 de solo (BP2), e superfosfato simples – SFS na dose de 215 mg.kg-1 de solo. A adubação com K foi realizada com adição de biofertilizante potássico na dose de 136 mg.kg-1 de solo (BK1), 272 mg.kg-1 de solo (BK2), e fertilizante químico (KCl) na dose 68 mg.kg-1 de solo. No tratamento controle, não foi aplicado fertilizante (biofertilizantes e fertilizantes químicos) nem inoculante. O isolado fungo micorrízico (Gigaspora margarita) foi cedido pelo CNPAB (Centro Nacional de Pesquisa em Agrobiologia) da EMBRAPA. O delineamento experimental foi O inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4 x 4 x 2, sendo quatro fontes e/ou doses de fertilizantes fosfatados, quatro fontes/doses de fertilizantes potássicos e duas condições micorrízicas (presença ou ausência), com quatro repetições. A altura (cm) e o diâmetro (mm) do caule das plantas foram observados aos 30, 60, 90 e 120 dias após transplantio e inoculação. Aos 30 dias após inoculação, não se constatou efeito significativo de qualquer dos tratamentos testados. Aos 60 e 90 dias, tratamentos com micorriza e diferentes fontes fosfatadas, obtiveram médias semelhantes para altura, enquanto na ausência do FMA o melhor desempenho ocorreu quando se utilizou a adição de SFS. Aos 120 dias, constatou-se que plantas inoculadas com FMA cresceram mais rápido do que plantas sem FMA. Diferentes fontes e doses de fósforo também promoveram efeito significativo nas variáveis, matéria seca e alocação de biomassa (folha, caule e raiz). A presença da simbiose micorrízica promoveu acúmulo de macronutrientes (Ca, Mg, P e K) na parte aérea, proporcionando efeito significativo no crescimento inicial de sabiá, até os 120 dias, dependente da inoculação. O efeito isolado da inoculação com o FMA Gigaspora margarita foi tão eficiente para crescimento da leguminosa arbórea Sabiá, quanto os fertilizantes químicos solúveis superfosfato simples e cloreto de potássio(SFS e KCl), utilizados neste experimento.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-22T14:54:30Z No. of bitstreams: 1 Cinthia Conceicao Matias da Silva.pdf: 488523 bytes, checksum: c5dda84c0f0e740ac372b3ea31d926ba (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-22T14:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cinthia Conceicao Matias da Silva.pdf: 488523 bytes, checksum: c5dda84c0f0e740ac372b3ea31d926ba (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Sugarcane Saccharum officinarum (L.) is a crop of great economic importance in Brazil by food production for man and animals, production of ethanol fuel for automotive, and energy cogeneration. One factor that limits the sugarcane productivity is the pests’ infestation that causes losses in agricultural production and in industrial yield due to the sugar decrease per cane ton. The moth borers complex belonging to the Diatraea genus is one of the main problems for the cultivation of sugarcane in all growing regions. In northeastern Brazil, there are the Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) species. It is known that the main method of controlling moth borers of Diatraea genus is through Cotesia flavipes (Cam.) larval endoparasitoid, which was introduced in Brazil in 1974 and until today is effective in controlling this pest. However, more recently, the D. flavipennella controlling by C. flavipes has been questioned due to the increasing dominance of this species in the region. Thus, this work aims to assess the interaction of C. flavipes parasitoid in association with the Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok and Beauveria bassiana (Bals.) Vuill fungi for controlling D. flavipennella, the effect of entomopathogenic fungi on the parasitoid, and the predominance quantify of D. flavipennella species in the sugar plantations of Pernambuco State, Brazil. Based on results found in this work, it is expected to clarify the situation, offering subsidy to optimize D. flavipennella control. The experiments were carried out in laboratory and surveys in sugarcane plantations in different regions of Pernambuco. / A cana-de-açúcar Saccharum officinarum (L.) é uma cultura de grande importância econômica no Brasil pela produção de alimentos para o homem e animais, produção de álcool combustível para a indústria automobilística e co-geração de energia. Um dos fatores que limita a sua produtividade é a infestação de pragas que ocasionam perdas tanto na produção agrícola, como no rendimento industrial, pela diminuição de açúcar por tonelada de cana. O complexo de brocas pertencente ao gênero Diatraea constitui um dos principais problemas para a cultura da cana-de-açúcar em todas as regiões de cultivo. No Nordeste do Brasil ocorrem as espécies Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box). Sabe-se que o principal método de controle das brocas do gênero Diatraea é através do endoparasitoide larval Cotesia flavipes (Cam.), que foi introduzido no Brasil em 1974 e até os dias atuais é eficiente no controle dessa praga. No entanto, mais recentemente, o controle de D. flavipennella por C. flavipes tem sido questionado em virtude da crescente dominância dessa espécie na região. Assim, o presente trabalho tem como objetivos avaliar a interação do parasitoide C. flavipes em associação com os fungos Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok e Beauveria bassiana (Bals.) Vuill no controle de D. flavipennella, o efeito dos fungos entomopatogênicos sobre o parasitoide e quantificar a predominância da espécie D. flavipennella nos canaviais de Pernambuco. A partir dos resultados, espera-se esclarecer a hipótese, oferecendo subsídio para otimizar o controle de D. flavipennella. Os experimentos foram desenvolvidos em laboratório e os levantamentos nas diferentes regiões canavieiras de Pernambuco.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-10-31T12:53:46Z No. of bitstreams: 1 Jessica de Oliveira Souza.pdf: 1861955 bytes, checksum: e627e866a520acc029a6fc86493af85f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-31T12:53:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jessica de Oliveira Souza.pdf: 1861955 bytes, checksum: e627e866a520acc029a6fc86493af85f (MD5) Previous issue date: 2018-08-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Arbuscular Mycorrhizal Fungi (AMF) are present in the soil of the most different environments, forming associations with higher plants that in response to this association show an improvement in the nutritional state of the plant and consequently a greater growth. Associations of plants with AMF allows plants to establish themselves even in locations with unfavorable conditions for plants, increasing their survival, as well as helping to restore degraded ecosystems, whose benefits can be even greater when native AMF are used. However there are need knowing the diversity of associations and the ecological role that each species plays in order to elaborate management plans and to improve the techniques of recovery of degraded areas. In this sense, the objective of this study was to analyze the occurrence and diversity of AMF, in different forest typologies of the state of Pernambuco, and to compare the occurrence and diversity of these fungi in Eucalyptus spp. variations between dry and rainy seasons in these environments. Eighty samples of rhizospheric soil were collected, and 20 samples were collected at Eucalyptus spp. and 20 in the native forest of the Experimental Station of Itapirema, IPA in Goiana, 20 soil samples in Eucalyptus spp. of the Petribu Factory, and 20 in the native forest fragment of EECAC of the municipality of Carpina. AMF spore extraction was carried out following the methodology proposed by Gerdemann and Nicolson (1963), followed by centrifugation and suspension in 50% sucrose (JENKINS, 1964.). Diversity, density and frequency analyzes were performed, as well as analysis of variance (ANOVA) and comparison test of means were also analyzed for richness and similarity. Twenty six morphospecies belonging to seven genera of AMF, Glomus, Gigaspora, Acaulospora, Racocetra, Rhizoglomus, Rhizophagus and Dentiscutata were found. with the highest absolute densities (except for the Eucalyptus spp. planting area of the Petribú Factory, during the rainy season). The areas differed in relation to the period climatic and vegetation type, finding a higher index of diversity in areas of native forest and a greater index of dominance in planting areas. Generally, larger amounts of spores were found in the dry period than in the rainy season. / Os Fungos Micorrízicos Arbusculares (FMAs) estão presentes no solo dos mais diferentes ambientes, formando associações com plantas superiores que, em resposta a essa associação, apresentam uma melhoria no estado nutricional da planta e consequentemente um maior crescimento. A associação de plantas com FMAs permite aos vegetais se estabelecerem até mesmo em locais com condições desfavoráveis para as plantas, aumentando sua sobrevivência o que pode ajudar na restauração de ecossistemas degradados, cujos benefícios podem ser ainda maiores quando com FMAs nativos, havendo, portanto, necessidade de se conhecer a diversidade de associações e o papel ecológico que cada espécie desempenha para elaborar planos de manejo e aperfeiçoar as técnicas de recuperação de áreas degradadas. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi analisar a ocorrência e diversidade de FMA, em diferentes tipologias florestais do estado de Pernambuco, e comparar com a ocorrência e diversidade desses fungos existentes em plantios de Eucalyptus spp., nas proximidades da floresta nativa, observando as variações entre estação seca e chuvosa nesses ambientes. Foram coletadas 80 amostras de solo rizosférico, sendo 20 amostras no plantio de Eucalyptus spp. e 20 na mata nativa da estação Experimental de Itapirema, do IPA em Goiana, 20 amostras de solo no plantio de Eucalyptus spp. da Usina Petribu, e 20 no fragmento de mata nativa da EECAC do município de Carpina. A extração de esporos de FMA foi feita seguindo a metodologia proposta por Gerdemann e Nicolson (1963), com posterior centrifugação e suspensão em sacarose a 50% (JENKINS, 1964). Foram feitas análises de diversidade, densidade e frequência, além de análise de variância (ANOVA) e teste de comparação de médias, ainda foram realizadas análises de riqueza e de similaridade. Foram encontradas 26 morfoespécies pertencentes a sete gêneros de FMA, Glomus, Gigaspora, Acaulospora, Racocetra, Rhizoglomus, Rhizophagus e Dentiscutata, sendo o gênero Glomus o de maior riqueza (oito espécies) em comparação aos demais, ocorrendo em todas as áreas analisadas, apresentando as maiores densidades absolutas, com exceção da área de plantio de Eucalyptus spp. da Usina Petribú, no período chuvoso. As áreas diferiram entre si quanto ao período climático e ao tipo de vegetação, sendo encontrado um maior índice de diversidade em áreas de mata nativa e um maior índice de dominância nas áreas de plantios, além de serem encontrados, de modo geral, maiores quantidades de esporos no período seco do que no período chuvoso.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-09T19:24:37Z No. of bitstreams: 1 Tese - Cristiane Suely Melo de Carvalho.pdf: 1370893 bytes, checksum: 46bf755ee5dee8613480145e68e439ce (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-09T19:33:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Cristiane Suely Melo de Carvalho.pdf: 1370893 bytes, checksum: 46bf755ee5dee8613480145e68e439ce (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-09T19:38:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Cristiane Suely Melo de Carvalho.pdf: 1370893 bytes, checksum: 46bf755ee5dee8613480145e68e439ce (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-09T19:38:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Cristiane Suely Melo de Carvalho.pdf: 1370893 bytes, checksum: 46bf755ee5dee8613480145e68e439ce (MD5) Previous issue date: 2014-07-17 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ganoderma lucidum it is a fungus that arouses considerable interest worldwide because on their numerous properties, it is reported mainly for their medicinal power, and it may be used in the prevention and treatment of various diseases including cancer and AIDS. It is a mushroom that has the ability to thrive in a multitude of lignocellulosic wastes, since they produce lignocellulolytic enzymes, specialized to degrade this type of raw material. The G. lucidum species has several distinct lineages, and also nutritional requirements that vary in relation to the collection site and the type of substrate. Therefore, it is necessary to know the substrates, and the situation of the most suitable growing to the different strains of G. lucidum. The aim of this study was to evaluate the production of two strains of Ganoderma lucidum on agricultural waste as well as to perform chemical analyzes of basidiomata obtained in cultivation. The experiment was conducted at the premises of the module Mushrooms FCA / UNESP-Botucatu, SP, in which two strains were used: GLM-09/01 GLM and 10/02 both grown in waste, oat straw, bean straw, straw brachiaria grass Tifton straw and sawdust in two situations: with (20%) and without supplementation (0%) of wheat bran. All the waste came from dumps of agricultural activity resulting from Botucatu-SP. Both treatments were performed in 10 replications, totaling 200 packages. The cultivation of mushrooms totaled 95 days, later we assessed the biological efficiency of the treatments and it was performed and their chemical analysis of initial and residual substrates and basidiomata obtained. EB values (%) ranging from 0.0% to 6.7%. In the chemical analysis of the mushrooms, in the parameters, total protein, ether extract, crude fiber and ash, the results ranged from 8.7% to 13.7%, from 2.0% to 6.7%, 0.83% 1.79% to 38.8% and 54.5% respectively. Thus, it is concluded that from the substrates analyzed, those with the highest income were the base of straw brachiaria 20% in both strains tested (GLM 10/02 and GLM 09/01 and bean straw to 20% GLM on 10/02 line. The mushrooms showed high levels of ether extract, ash and fiber and low protein content. / Ganoderma lucidum trata-se de um fungo que desperta bastante interesse mundial devido suas inúmeras propriedades medicinais, são relatados principalmente pelo seu poder medicinal, podendo ser utilizados na prevenção e tratamento de diversas doenças incluindo o câncer e AIDS. É um cogumelo que apresenta a capacidade de desenvolver-se em diversos resíduos lignocelulósicos, pelo fato de produzirem enzimas lignocelulolíticas, especializadas em degradar esse tipo de matéria-prima. A espécie G. lucidum, apresenta diversas linhagens distintas, cujas exigências nutricionais que variam em relação ao local de coleta e ao tipo de substrato. Assim, torna-se necessário conhecer os substratos e a situação de cultivo mais adequados as diferentes linhagens de G. lucidum. O objetivo deste estudo foi avaliar a produção de duas linhagens de Ganoderma lucidum em resíduos agrícolas, bem como realizar a caracterização físico-química dos basidiomas obtidos no cultivo. O experimento foi conduzido nas instalações do Módulo de Cogumelos da FCA/UNESP-Botucatu, SP. As linhagens utilizadas foram GLM-09/01 e GLM 10/02. Os resíduos utilizados na cultura foram palha de aveia, palha de feijão, palha de capim braquiária, palha de capim tifton e serragem de eucalipto, todos em duas situações: com (20%) e sem suplementação (0%) de farelo de trigo. Todos os resíduos foram provenientes de despejos da atividade agrícola decorrente do município de Botucatu-SP. Os tratamentos foram realizados em 10 repetições, totalizando 200 pacotes. O cultivo totalizou 95 dias. Avaliou-se a eficiência biológica dos tratamentos e realizou-se a caracterização físico-química dos substratos inicial e residual e também dos basidiomas obtidos. Os valores de EB (%) variaram de 0,0% a 6,7%. Nas analises da composição centesimal dos cogumelos, os parâmetros, proteína bruta, extrato etéreo, cinzas e fibra bruta, os resultados variaram de 8,7% a 13,7%, de 2,0% a 6,7%, de 0,83% a 1,79% e de 38,8% a 54,5% respectivamente. Dos substratos analisados, os que apresentaram maior rendimento foram os formulados à base de palha de braquiária (20%) em ambas as linhagens testadas (GLM-09/01 e GLM 10/02) e palha de feijão (20%) na linhagem GLM 10/02. Os cogumelos apresentaram teores elevados de lipídios, fibras e cinzas e baixo teor de proteínas.

Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-10-23T15:45:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertaçao - Ana Francisca Tibúrcia Amorim Ferreira e Ferreira.pdf: 1305242 bytes, checksum: 1127ee4c263f9ff4d20ed1b5e301cccb (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-10-26T20:05:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertaçao - Ana Francisca Tibúrcia Amorim Ferreira e Ferreira.pdf: 1305242 bytes, checksum: 1127ee4c263f9ff4d20ed1b5e301cccb (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-10-26T20:10:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertaçao - Ana Francisca Tibúrcia Amorim Ferreira e Ferreira.pdf: 1305242 bytes, checksum: 1127ee4c263f9ff4d20ed1b5e301cccb (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-26T20:10:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertaçao - Ana Francisca Tibúrcia Amorim Ferreira e Ferreira.pdf: 1305242 bytes, checksum: 1127ee4c263f9ff4d20ed1b5e301cccb (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fungus Corynespora cassiicola is a plant pathogen that has worldwide distribution and has been reported causing disease on leaves, fruits, branches, nematode eggs, and even human skin. In Brazil, this pathogen has already caused serious damage to soybeans, papaya, acerola, and the northern region of the country, this pathogen has great importance in papaya, cucumber and tomato crops. Develop control strategies for a disease depends, among other factors, an understanding of the genetic variability and structure of the pathogen population, these being the goals of this work. We collected 169 isolates from papaya, tomato and cucumber, coming from the cities of Manaus, Iranduba and Presidente Figueiredo, Amazonas state, Brazil, 9 populations totaling.The genetic diversity was analyzed with 8 ISSR primers, 191 polymorphic locus getting, and the polymorphism rate was 100%. The genetic diversity was high in all populations, where the highest genetic diversity index was found in MA2 population (M= 0.43), and the smallest in population of Presidente Figueiredo: PE3 (H = 0.13) and MA3 (H = 0.15). All genotypes showed similar frequencies in the population (E5 = 1.0). Genotypic diversity (G0) ranged from 0.7 to 2.2, and in general was low in all populations, thus proving the absence of recombination. Random association tests detected high levels of linkage disequilibrium, eliminating the null hypothesis (IA> 0), being significant at 1% probability, the highest rates were found in MA1 populations (IA= 6.08) and MA2 (IA= 5:24). Bayesian analysis detected four genetic groups with mixture of genotypes in groups 2 and 3, suggesting gene flow and structure in a host in group 1 (papaya) and 4 (tomato). The population is structured with great distinction between them. MA3 and TO1 populations had higher (θ = 0.27), and the lowest value was found in TO3; TO2 and PE3, PE2 (θ= 0.05). Analysis of AMOVA, the biggest change is occurring within populations (84.3%), while 15.70% is occurring among populations. / O fungo ascomyceto Corynespora cassiicola é um fitopatógeno de ampla distribuição mundial, e já foi relatado causando doenças em folhas, frutos, ramos, ovos de nematóide, e inclusive na pele humana. No Brasil, C. cassiicola já causou sérios danos à soja, mamão e acerola, e na região norte do país, este patógeno tem grande importância nas culturas do mamão, pepino e tomate. Desenvolver estratégias de controle para uma doença, depende, entre outros fatores, de uma compreensão acerca da variabilidade e da estrutura genética de população do patógeno, sendo esses os objetivos desse trabalho. Foram coletados 169 isolados obtidos de mamão, tomate e pepino, oriundos dos municípios de Manaus, Iranduba e Presidente Figueiredo, do estado do Amazonas, Brasil, totalizando 9 populações. A diversidade genética de C. cassiicola foi analisada com 8 primers ISSR, obtendo 191 locus polimórficos, e o percentual de polimorfismo foi 100%. A diversidade gênica foi alta em todas as populações, onde o maior índice de diversidade gênica foi encontrado na população MA2 (H=0,43), e os menores em populações do município de Presidente Figueiredo: PE3 (H=0,13) e MA3 (H=0,15). Todos os genótipos tiveram frequências idênticas na população (E5= 1,0). Diversidade genotípica (G0) variou de 0.7 a 2.2, e em geral foi baixa em todas as populações, provando assim ausência de recombinação nas populações. Os testes de associação aleatória detectaram altos níveis de desequilíbrio de ligação, dispensando a hipótese nula (IA>0), sendo significativo a 1% de probabilidade, os índices mais altos foram encontrados nas populações MA1 (IA= 6.08) e MA2 (IA=5.24). Pela análise bayesiana detectou-se 4 grupos genéticos com mistura de genótipos nos grupos 2 e 3, sugerindo fluxo gênico e com estruturação por hospedeiro no grupo 1(mamão) e 4(tomate). A população está estruturada, com grande diferenciação entre elas. Populações MA3 e TO1 apresentaram maior valor (θ= 0,27), e o menor valor de foi encontrado em TO3;TO2 e PE3;PE2 (θ=0,05). A análise da AMOVA mostrou que a maior variação esta ocorrendo dentro das populações (84,3%), enquanto que 15.70% esta ocorrendo entre as populações.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-08-19T20:28:16Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lucas Prado Barreto - 2014.pdf: 3040237 bytes, checksum: 9b5b111ad7079b39159b4f2f8968b129 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-22T12:55:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lucas Prado Barreto - 2014.pdf: 3040237 bytes, checksum: 9b5b111ad7079b39159b4f2f8968b129 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-22T12:55:39Z (GMT). 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Then, the results obtained with tests in vivo were compared to the results obtained with tests conducted in vitro, and finally, experiments were conducted to verify the virulence of M. anisopliae IP 119 for R. sanguineus engorged females. Conidial suspensions of M. anisopliae in water or oil, adjusted to 108 conidia ml-1, were exposed to 0 (control) or 4 h to 45 ± 0.5 °C in a water bath, and then, individually inoculated onto the dorsal surface of R. sanguineus engorged females. The samples were incubated at 27 ± 1 °C and RH > 80% for 0, 12, 18, 24, 36, 48 or 72 h. In parallel, aliquots of the aqueous conidial suspensions (control or 45 °C) were inoculated onto PDAY medium in Petri plates. The samples were incubated at the same temperature and for the same time periods described above. After each incubation time, ticks were fixed and dissected, i.e., a fragment of the dorsal cuticle was removed. Cuticles that received conidia suspended in water, exposed or not to heat, were processed for fluorescence microscopy for evaluation of conidial germination. Cuticles that received conidia suspended in water or oil, exposed or not to heat, were processed for scanning electron microscopy for evaluation of conidial germination. Conidial germination on PDAY plates was assessed using a phasecontrast microscope. A minimum of 300 conidia per cuticle or plate was evaluated for calculation of percent germination. When conidia were exposed to heat, a high percentage of germination was observed in PDAY medium (61.5%) in comparison to the tick cuticle (13%), 72 h after inoculation. Appressoria were observed 36 h after inoculation, only in conidia that were not exposed to heat. On tick cuticle, the percentage of germination of conidia suspended in mineral oil and exposed to heat was high in comparison to the percentage of germination of conidia suspended in water, at all incubation times investigated. At 36 h of incubation, the mean percentage of germination of conidia suspended in oil reached 16.3%, whereas conidia suspended in water reached only 2.2%. Conversely, in the control groups (ticks treated with conidia not exposed to heat), the percentage of germination of conidia suspended in water or oil differed at 48 and 72 h of incubation, where germination was also high for conidia suspended in oil and inoculated on the tick cuticle. M. anisopliae conidia suspended in oil exposed or not to heat showed control percentage greater than the observed with aqueous suspensions. Thus, the results showed a significant delay in germination for conidia suspended in water and exposed to 45 °C in comparison to conidia suspended in mineral oil; in this sense, the oil formulation of conidia when exposed or not to heat proved to be more effective for controlling R. sanguineus engorged females. Moreover, conidia suspended in water germinated faster when inoculated in PDAY than when they were applied to the tick cuticle. Therefore, the results indicated that the negative effect of heat on conidial germination was more expressive when conidia were suspended in water and applied to the arthropod cuticle than it would be predicted by the in vitro thermotolerance tests. Also, conidia suffered less interference from heat exposures when suspended in oil. In conclusion, mineral oil protects conidia against the heat effects and enhances the fungal germination on the cuticle of R. sanguineus. / Relatos da resistência do carrapato Rhipicephalus sanguineus a bases químicas utilizadas para controle tem sido comuns. Neste contexto, os fungos entomopatogênicos surgem como uma alternativa ao uso exclusivo do controle químico; entretanto, calor e outros fatores ambientais podem limitar a eficácia dos fungos. Sendo assim, o presente estudo avaliou o efeito do calor sobre a germinação de conídios de Metarhizium anisopliae IP 119 quando suspensos em puro óleo mineral (Impex®) ou em água (Tween 80, 0,01%) e aplicados sobre a cutícula de R. sanguineus (in vivo) ou em meio de cultivo BDAY (in vitro). Em seguida, a resposta dos testes in vivo foi comparada a dos testes in vitro, e bioensaios foram realizados para verificar a virulência do isolado IP 119 para fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus. Suspensões conidiais de M. anisopliae em água ou óleo, ajustadas a 108 conídios ml-1, foram expostas a 0 h (controle) ou 4 h a 45 ± 0,5 ºC em banho-maria e, em seguida, inoculadas individualmente na superfície dorsal de fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus. Os indivíduos foram incubados a 27 ± 1°C e UR > 80% por 0, 12, 18, 24, 36, 48 ou 72 h. Em paralelo, alíquotas das suspensões conidiais aquosas (controle ou 45ºC) foram inoculadas em placas de Petri contendo meio BDAY. As amostras foram incubadas na mesma temperatura e pelos mesmos períodos de tempo descritos acima. Após cada período de incubação, os carrapatos correspondentes foram fixados e dissecados, retirando-se um fragmento da cutícula dorsal. Cutículas que receberam conídios suspensos em água, e expostos ou não ao calor, foram processadas para microscopia de fluorescência para avaliação da germinação. Cutículas que receberam conídios suspensos em água ou óleo, e expostos ou não ao calor, foram processadas para microscopia eletrônica de varredura para avaliação da germinação. A germinação de conídios em BDAY foi avaliada por microscopia de contraste de fase. Um mínimo de 300 conídios por cutícula ou por placa foi avaliado para calcular o percentual de germinação. Verificou-se que quando conídios foram expostos ao calor, um maior percentual de germinação foi observado em BDAY (61,5%) em comparação com a cutícula do carrapato (13%), 72 h após a inoculação. Apressórios foram observados 36 h após a inoculação, apenas em conídios que não foram expostos ao calor. Na cutícula de R. sanguineus, o percentual de germinação de conídios suspensos em óleo mineral e expostos ao calor foi maior em comparação ao percentual de germinação de conídios suspensos em água, em todos os tempos de incubação investigados. Com 36 h de incubação, a germinação média de conídios suspensos em óleo chegou a 16,3%, enquanto conídios suspensos em água apresentavam 2,2% de germinação. Em contrapartida, nos controles, o percentual de germinação de conídios suspensos em água ou óleo diferiu nos tempos de 48 e 72 h de incubação, onde a germinação sobre a cutícula também foi maior em conídios suspensos em óleo. M. anisopliae quando suspenso em óleo e exposto ou não ao calor apresentou percentual de controle de fêmeas maior que o observado nas suspensões aquosas. Sendo assim, os resultados demonstraram: marcante atraso na germinação dos conídios suspensos em água e expostos a 45 ºC em comparação aos conídios suspensos em óleo mineral; a formulação oleosa de conídios quando exposta ou não ao calor mostrou-se mais efetiva para controle de R. sanguineus. Ainda, conídios suspensos em água germinaram mais rapidamente quando inoculados em BDAY do que quando foram aplicados sobre a cutícula do carrapato. Neste sentido, permite-se inferir que o efeito negativo do calor sobre a germinação de conídios suspensos em água foi maior quando os conídios foram aplicados sobre a cutícula do artrópode do que seria previsto nos testes in vitro, e os conídios sofreram menor interferência do calor quando suspensos em óleo. Portanto, conclui-se que o óleo mineral protege os conídios contra a ação do calor e potencializa a germinação do fungo na cutícula de R. sanguineus.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-12-21T15:53:06Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Igor Godinho Portis - 2015.pdf: 1381751 bytes, checksum: 82c1841407115b20ec4e6f5d2f786b17 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-12-26T14:18:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Igor Godinho Portis - 2015.pdf: 1381751 bytes, checksum: 82c1841407115b20ec4e6f5d2f786b17 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-26T14:18:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Igor Godinho Portis - 2015.pdf: 1381751 bytes, checksum: 82c1841407115b20ec4e6f5d2f786b17 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Paracoccidioidomycosis is the most prevalent systemic mycosis in Latin America, caused by fungi of the genus Paracoccidioides. The fungus grows as mycelium in the saprophytic environment, with the infection caused mycelium propagules and/or conidia, that will differentiate into the yeast form. Copper is an essential micronutrient for eukaryotes and bacteria, is extremely important to various proteins, and cofactor of many enzymes and used in many biochemical processes. However, excessive, copper can cause damage to proteins, lipids and nucleic acids, inferring the importance of this metal homeostasis. The objective of this study was to evaluate the fungus Paracoccidioides sp behavior in the presence of copper excess, through proteomics analysis. In the presence of copper excess, the yeast colonies of Paracoccidioides sp. depicted brown color. Expression of transcripts encoding CTR3, a copper transporter and the copper chaperone ATX1 showed inhibition and induction, respectively in the presence of excess copper, as verified by qRT-PCR. Proteins related to stress responses, with melanin production and pathways for energy, are regulated, suggesting that Paracoccidioides sp. responds to copper excess with detoxification strategies, protection and induction of various pathways of obtaining energy. / Paracoccidioidomicose é a micose sistêmica mais prevalente da América Latina, causada por fungos do gênero Paracoccidioides spp. O fungo cresce como micélio no ambiente saprofítico, sendo a infecção causada por propágulos de micélio e ou conídios, que se diferenciam na forma leveduriforme no hospedeiro. O cobre é um micronutriente essencial para eucariotos e bactérias, de extrema importância a várias proteínas, sendo cofator de muitas enzimas e utilizado em diversos processos bioquímicos. Entretanto em excesso, o cobre pode provocar danos a proteínas, lipídeos e ácidos nucléicos, por isso a importância da homeostase desse metal. O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento do fungo Paracoccidioides sp. em presença de excesso de cobre, através de análise proteômica. Na presença de excesso de cobre, as colônias leveduriformes de Paracoccidioides sp. apresentaram coloração marrom. A expressão dos transcritos codificantes do transportador de cobre Ctr3 e da chaperona Atx1, apresentaram inibição e indução, respectivamente na presença de excesso de cobre, como verificado através de qRT-PCR. Proteínas relacionadas a respostas ao estresse, com produção de melanina e com vias para obtenção de energia, foram reguladas, o que sugere que Paracoccidioides sp. responde ao estresse de excesso de cobre com estratégias de desintoxicação celular, proteção e indução de várias vias de obtenção de energia.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-09T14:01:40Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thainá Rodrigues Santos - 2016.pdf: 1805548 bytes, checksum: d6bfd668c93a575d44e681ffbde761c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-09T14:01:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thainá Rodrigues Santos - 2016.pdf: 1805548 bytes, checksum: d6bfd668c93a575d44e681ffbde761c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-09T14:01:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thainá Rodrigues Santos - 2016.pdf: 1805548 bytes, checksum: d6bfd668c93a575d44e681ffbde761c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-09-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Introduction and objective: Metarhizium anisopliae is one of the most studied fungi for biological control, since it is found naturally associated with ticks and has showed high virulence in laboratory conditions. M. anisopliae can form in vitro an overwintering structure called microesclerotia (MS). The microsclerotia have been shown to be more effective than products based on conidia when applied directly to the soil for control of some pests. Thus, the objective of this study was to develop and characterize inorganic pelletized formulations containing microsclerotia of M. anisopliae IP119, assess its stability under storage at 4°C and 40°C and determine its tolerance to UV-B radiation. Methods: Six pellets formulations composed of diatomaceous earth, vermiculite, aluminum magnesium silicate or colloidal silicon dioxide, alone or in combination, were developed and evaluated. The pellets were obtained using the extrusion-spheronization technique and were dried in a fluid-bed dryer with an outlet air temperature kept at 40°C or 50°C. During drying, at pre-determined time intervals, samples were collected for evaluation of the residual moisture content, conidia production and viability. The pellets were also evaluated for their storage stability at 4°C and 40°C. Conidia production and viability were evaluated after storage periods of 7 to 21 days. In addition, UV-B tolerance of the conidia and pellets containing MS was evaluated by exposing them to the artificial light for 4h (irradiance of 541,54 mW/m2) and 12h (irradiance of 1239,23 mW/m2), respectively. Results and Discussion: Inorganic pellets were obtained and the selected formulation was composed by vermiculite, diatomaceous earth and colloidal silicon dioxide (78:20:2), since it showed the best yield (48%), size distribution (from 431.5 to 758.5 μm), average size (584.90 μm ± 122.40) and sphericity (0.75 ± 0.07). There was a considerable reduction of the residual moisture between time 0 (~29%) and 5 minutes (~6%), which remained stable until the end of drying operation. Thus, pellet drying for a 5 minutes period at 40ºC or 50°C resulted in a proper moisture content. Fluid-bed dried pellets presented conidia production always above 1.7x109 conidia/g pellets, with viability > 93%, at all times and for both temperatures. In the pellet storage at 40°C, a contamination was observed after the 7th storage day, without differences in conidia production (~1.3x109 conidia/g of pellets) and viability (> 94%). At 4°C, the conidia production and viability remained stable until the 21th storage day. Regarding the tolerance to UV-B radiation test, the calculated LD50 of M. anisopliae conidia was 5.545 (kJ/m2) ± 0.059. In the exposed pellets containing microsclerotia germination was >98%, and it was observed high conidia production (>1,6x109 conidia/g of pellets). Conclusion: It can be concluded that the inorganic formulation allow to obtain pellets containing fungal material by extrusion-spheronisation technique with maintenance of fungal viability after drying, resulting in a formulation with high UV-B tolerance. This solid platform has a great potential for use in pest biological control. / Introdução e objetivo: Metarhizum anisopliae é uma das espécies de fungos entomopatogênicos mais estudadas em controle biológico por estar naturalmente associada a carrapatos e por apresentar alta virulência em condições laboratoriais. M. anisopliae é capaz de, sob condições in vitro, formar uma estrutura de resistência denominada microescleródio (ME). Os microescleródios têm-se mostrado mais eficazes do que produtos à base de conídios, quando aplicados diretamente ao solo para o controle de algumas pragas. Assim, o objetivo do presente trabalho consistiu em desenvolver e caracterizar formulação inorgânica peletizada contendo microescleródios de M. anisopliae IP119, avaliar sua estabilidade sob armazenamento a 4ºC e a 40ºC, e determinar sua tolerância à radiação UV-B. Métodos: Foram desenvolvidas e avaliadas seis formulações de pellets compostas por terra diatomácea, vermiculita, silicato de alumínio e magnésio ou dióxido de silício coloidal, de forma isolada ou em combinação. Os pellets foram obtidos pela técnica de extrusão-esferonização e a secagem foi realizada em leito fluidizado com temperatura do ar de saída mantida a 40ºC ou 50ºC. Durante a secagem, em intervalos pré-determinados de tempo, amostras foram coletadas para avaliação da umidade residual, produção e viabilidade de conídios. Além disso, avaliou-se a produção e a viabilidade de conídios após armazenamento dos pellets por 7 a 21 dias. Para a avaliação da tolerância de conídios e pellets contendo ME frente a radiação UV-B, os materiais foram expostos por até 4 horas (irradiância de 541,54 mW/m2) ou 12 horas (irradiância de 1239,23 mW/m2), respectivamente. Resultados e Discussão: Pellets com constituintes totalmente inorgânicos foram obtidos e a formulação selecionada foi àquela composta por vermiculita, terra diatomácea e dióxido de silício coloidal (78:20:2), que apresentou características de rendimento (48%), distribuição de tamanho (431,5 a 758,5 μm), tamanho médio (584,90 μm ± 122,40) e esfericidade (0,75 ± 0,07) adequados. Houve redução considerável da umidade residual entre o tempo 0 (~29%) e 5 minutos de secagem (~6%), e a umidade residual permaneceu estável até o final da operação. Dessa forma, a secagem dos pellets pelo período de 5 minutos a 40ºC ou a 50ºC se mostrou satisfatória. Além disso, os pellets selecionados e secos por leito fluidizado apresentaram produção de conídios sempre superior a 1,7x109 conídios/g de pellets, e a viabilidade dos mesmos foi maior do que 93%, em todos os tempos analisados e para ambas as temperaturas. Houve contaminação dos pellets sob armazenamento a 40ºC após o 7º dia de ensaio, sem diferença de produção (~1,3x109 conídios/g de pellets) e de viabilidade (>94%) dos conídios. Já na temperatura de 4ºC, a produção e a viabilidade dos conídios permaneceram estáveis até o 21º dia de armazenamento. No ensaio de tolerância à radiação UV-B, a DL50 estimada para os conídios de M. anisopliae foi de 5,545 ± 0,059 (kJ/m2), ao passo que para os pellets contendo microescleródios foi observada a manutenção da germinação (>98%) e uma elevada produção de conídios (>1,6x109 conídios/g de pellets). Conclusão: No presente trabalho, foi possível obter, pela técnica de extrusão-esferonização, pellets inorgânicos contendo material fúngico, com manutenção da viabilidade fúngica após secagem e alta tolerância à radiação UV-B, representando grande potencial para uso no controle biológico de artrópodes-praga.

O interesse na obtenção de novos fármacos a partir de micro-organismos endofíticos vem crescendo, uma vez que esta é uma fonte ainda pouco explorada. Além disso, o estudo das interações entre plantas e micro-organismos tem sido amplamente discutido ao longo dos últimos anos. No presente trabalho, o fungo endofítico Drechslera ravenelii (SS33), isolado das folhas de Smallanthus sonchifolius (yacon), foi cultivado sob diferentes condições fermentativas, objetivando a determinação das melhores condições para produzir metabólitos secundários com atividades antimicrobiana e/ou citotóxica. Para tal avaliaram-se dois parâmetros: meio fermentativo e tempo de incubação. Os meios fermentativos líquidos utilizados foram Czapek e caldo de batata (PDB), sob agitação (120 RPM), cultivados por 216 e 480 horas. Também foi desenvolvida cultura por fermentação em substrato sólido, meio de arroz-aveia, durante 720 horas. Todos os cultivos foram realizados em temperatura de 30 ºC e precedidos por pré-fermentação. Dos cultivos em meio líquido foram obtidas frações em diclorometano e em acetato de etila. Já dos cultivos provenientes do meio fermentativo sólido foram obtidas frações em n-hexano, diclorometano, acetato de etila e n-butanol. Dessa forma, obtiveram-se 12 frações que foram concentradas em rotaevaporador até a secura, pesadas e identificadas. As frações tiveram sua atividade antimicrobiana avaliada através de duas técnicas: técnica da bioautografia e técnica da microdiluição em microplaca (determinação da Concentração Inibitória Mínima), utilizando-se como indicadores biológicos as cepas Kocuria rhizophila, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. A avaliação da atividade citotóxica foi realizada pela técnica do MTT, utilizando-se três linhagens de células tumorais MB435 (melanoma humano), HCT-8 (cólon humano) e SF-295 (glioblastoma humano). As frações tiveram também seus perfis químicos avaliados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Após observação dos resultados obtidos, concluiu-se que a fração diclorometânica, proveniente do meio fermentativo sólido, foi a que apresentou maior rendimento, manejo mais simples e perfil cromatográfico mais interessante, quando comparada às outras frações obtidas dos meios sólido e líquido. Desse modo, foi realizada ampliação da escala fermentativa em meio sólido e a fração diclorometânica obtida foi submetida a processos cromatográficos visando o isolamento das substâncias majoritárias. Assim, foram isoladas a substância 1 (não identificada) e a substância 2, identificada como terpestacina, um sesterpeno incomum com conhecida atividade na inibição da formação de sincícios pelo vírus HIV. A terpestacina foi isolada pela primeira vez do fungo Drechslera ravenelii no presente estudo. A substância 2 não apresentou atividade antimicrobiana quando submetida ao ensaio da microdiluição em microplaca e apresentou atividade citotóxica discreta, frente a três linhagens de células cancerígenas humanas. / The interest in obtaining new drugs from endophytic microorganisms is growing, since this is a source still little exploited. In addition, the study of the interactions between plants and microorganisms has been widely discussed over the past few years. In this work, the endophytic fungus Drechslera ravenelii (SS33), isolated from the leaves of Smallanthus sonchifolius (yacon), was grown under different conditions, targeting the determination of the best conditions to produce secondary metabolites with antimicrobial and/or cytotoxic activities. For that, two parameters were evaluated: culture medium type and incubation time. The liquid media used were Czapek and Potato Dextrose Broth (PDB), swirling (120 RPM), cultivated for 216 and 480 hours, respectively. The fungus has also been culture by fermentation in solid substrate, rice-oats medium, during 720 hours. All crops were conducted in temperature of 30 °C and preceded by pre-fermentation. The obtained liquid mediums were submitted to liquid partition to furnish dichloromethane and ethyl acetate fractions. The solid medium was submitted to extraction to furnish the fractions in n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate and n-butanol, in sequence. |Then, the 12 fractions obtained were dried, cumbersome and identified. The antimicrobial activity of the fractions was evaluated through two techniques: bioautography and Microdiluition method (Minimum Inhibitory Concentration-MIC), and for that, the biological indicators used were Kocuria rhizophila, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The cytotoxic activity evaluation was performed by MTT test, using three tumor cell lines: MB435 (human melanoma), HCT-8 (human colon) and SF-295 (human glioblastoma). The chromatographic profiles of the fractions were evaluated by High Performance Liquid Chromatography. Analysis of the results allowed to conclude that the dichloromethane fraction from the solid medium gave greater yield, was easier to manager and more displayed an interesting chromatographic profile when compared to other fractions obtained from both solid and liquid media. Thus, the fungus was cultivated in a larger scale in solid medium and the dichloromethane fraction obtained was subjected to chromatographic processes aiming the isolation of the major compounds. Thus, two compounds were isolated the substance 1 (unidentified) and the substance 2, witch was identified as terpestacin, an uncommon sesterpene, which inhibits the formation of syncytia in the course of HIV infection. The terpestacin was isolated for the first time from the fungus Drechslera ravenelii in this study. The compound 2 did not presented antimicrobial activity when subjected to the microdilution test and it displayed discreet cytotoxic activity in three human cancer cell lines.