O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do ácido linoléico conjugado (CLA), especificamente do isômero trans-10, cis-12 em culturas de explante de tecido adiposo de suínos, em crescimento. / The objective of this study was to evaluate the effects of conjugated linoleic acid (CLA), specifically the tnas-10, cis-12 isomer on cultures of adipose tissue explants from growing pigs.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / A cicatrizaÃÃo de feridas à uma cascata de eventos celulares e moleculares que interagem para que ocorra a reconstituiÃÃo do tecido. Neste estudo avaliou-se o efeito de um composto de triglicerÃdeos de cadeia mÃdia, Ãcido linolÃico, lecitina de soja e vitaminas A e E (DersaniÂ), e tambÃm da Ãgua de coco liofilizada, nas formas aquosa e gel, no processo de cicatrizaÃÃo de Ãlceras cutÃneas experimentais. Utilizaram-se 105 ratos, machos, da linhagem Wistar, nos quais foi removido um segmento cutÃneo de espessura total com 4 cm2 de Ãrea. Os animais foram distribuÃdos aleatoriamente em grupos constituÃdos de 15 ratos compreendendo trÃs experimentos constituÃdos dos grupos Controle e ReferÃncia e dos grupos Amorfa-aquosa e Cristalina-aquosa (Experimento 1), Amorfa-gel e Cristalina-gel (Experimento 2) e TriglicerÃdeo (Experimento 3). Tais grupos foram tratados por via tÃpica, respectivamente, com soluÃÃo salina 0,9%, clostebol + sulfato de neomicina, Ãgua de coco amorfa e cristalina-aquosa, Ãgua de coco amorfa e cristalina-gel e DersaniÂ. As Ãreas das feridas foram mensuradas por planimetria digital nos dias zero, 3, 7 e 12 de pÃs-operatÃrio, a partir das quais foram calculados o grau e a taxa mÃdia de reparaÃÃo. AlÃm disso, o processo de cicatrizaÃÃo foi avaliado atravÃs dos critÃrios de Myers e da quantificaÃÃo de colÃgeno e angiogÃnese utilizando mÃtodo histoquÃmico. No 3o dia observou-se uma expansÃo da Ãrea da ferida no grupo referÃncia e uma leve contraÃÃo nos grupos controle e testes. Nos dias subseqÃentes o processo de reparaÃÃo, medido pela variÃvel grau de reparaÃÃo, evoluiu de forma linear, de modo que, no 12o dia, a Ãrea reparada alcanÃou 77,95% da regiÃo ulcerada inicial no grupo Controle, 78,40% no ReferÃncia, 82,24% no Amorfa-aquosa, 84,12% no Cristalina-aquosa 84,12% (experimento 1), 85,09% no grupo Amorfa-gel, 84,20% no Cristalina-gel (experimento 2) e 83,49% no TriglicerÃdeo (experimento 3), nÃo sendo constatadas diferenÃas estatisticamente significantes em nenhum dos experimentos. Igualmente semelhantes foram os valores da taxa mÃdia de reparaÃÃo referente aos 12 dias de tratamento: 25,79 mm2/dia no grupo Controle, 25,42 mm2/dia no ReferÃncia, 26,48 mm2/dia no Amorfa-aquosa, 27,89 mm2/dia no Cristalinaaquosa, 26,47 mm2/dia no Amorfa-gel, 27,04 mm2/dia no Cristalina-gel e 27,38 mm2/dia no TriglicerÃdeo. Entretanto, nos grupos Amorfa-aquosa (P<0,01), Amorfa-gel (P<0,05), Cristalina-gel (P<0,05) e TriglicerÃdeo (P<0,01) a densidade de colÃgeno foi significatemente maior do que a verificada no grupo Controle. Apenas no grupo TriglicerÃdeo a densidade vascular, a deposiÃÃo de colÃgeno e de tecido de granulaÃÃo foram significantemente maior que nos grupos Controle e ReferÃncia (P<0,01). Estes achados permitem concluir que o tratamento com o Dersani à um potencializador do processo de reparo tecidual / Healing of wounds is a cascade of cellular and molecular events which interact with one another ensuing tissue reconstruction. This study assessed the effect of a compound medium-chain triglycerides, linoleic acid, soy lecithins and vitamins A and E (Dersan) and also lyophilized coconut water in the aqueous and gel forms in the process of healing of experimental cutaneous ulcers. 105 male Wistar rats were employed in which a 4cm2 full thickness skin segment was removed. The animals were randomly distributed into groups constituted of 15 rats comprising three experiments consisting of Control and Reference groups, as well as Amorphous-Aqueous and Crystalline-Aqueous groups (Experiment 1), Amorphous-gel and Crystalline-gel groups (Experiment 2) and Triglycerides (Experiment 3). Such groups were treated via topic, respectively with 0.9% saline, clostebol+neomycin sulphate, amorphous and crystalline coconut water, amorphous and crystalline-gel coconut water and Dersani. The wound areas were measured by digital planimetry at post-operative days zero, 3, 7 and 12; from them the degree and average rate of repair were calculated. Moreover, the healing process was assessed through the criteria of Meyers and the amount of collagen and angiogenesis by means of histochemical methods. At day 3, an expansion of the wound area in the Reference Group and a slight contraction of Control Groups and tests were noted. On the subsequent days the process of repair, measured through the variable degree of healing evolved in a linear form, so that on the twelfth day, the repaired area achieved 77.95% of the initial ulcerated region in the Control Group, 78.40% in the Reference Group, 82.24%, in the Amorphous-Aqueous one, 84.12% in the Crystalline- Aqueous (Experiment 1), 85.09% in the Amorphus-gel Group, 84.20% in the Crystalline-gel Group (Experiment 2) and 83.49% in that of Triglyceride (Experiment 3); no statistically significant differences were found in the experiments. Equally similar were the values for the average rate of repair in regard to the 12 days of treatment: 25,79mm2/day in the Control Group, 25,42mm2/day in the Reference Group, 26.48mm2/day in the Amorphous-Aqueous one, 27.89mm2/day in the Crystalline-Aqueous Group, 26,47mm2/day in the Amorphous-gel Group, 27.04mm2/day in the Crystalline-gel and 27.38mm2/day in the Triglyceride Group. However, as to the Groups Amorphous-aqueous (P<0,01), Amorphous-gel (P<0.05), Crystalline Gel (P<0,05) and Triglycerides (P<0,01), the density of collagen was significantly higher than that observed in the Control Group. Only the Group of Triglycerides showed significantly higher vascular density, deposition of collagen and the granulation tissue than Control and Reference groups (P<0, 01). These findings allow the conclusion that Dersani have potential to the process of tissue repair

A manipulação da dieta constitui uma prática efetiva e rápida de alteração da composição do leite, especialmente do seu teor de gordura. Entretanto, os mecanismos envolvidos não são ainda completamente conhecidos, embora muito se tenha avançado na última década. Sabe-se hoje que certo tipo de ácido graxo (CLA trans-10 cis-12) formado no rúmen sob condições específicas de alimentação é capaz de inibir a síntese de gordura do leite. Entretanto, depressão da gordura do leite (DGL) tem sido observada em casos (e.g. dietas contendo óleo de peixe) onde não há formação deste inibidor. Embora o efeito do CLA sobre a secreção de gordura do leite já esteja bem caracterizado, estudo prévio conduzido pelo nosso grupo mostrou ainda um aumento do teor de proteína do leite em resposta a este tratamento. Dois experimentos foram conduzidos com os seguintes objetivos principais, respectivamente: 1) determinar se um maior suprimento de proteína através da dieta afeta a secreção de proteína do leite de vacas recebendo CLA e 2) Estudar os mecanismos envolvidos na DGL de vacas recebendo dietas contendo óleo de peixe (OP) e níveis distintos de fibra. No primeiro experimento, 48 vacas em lactação receberam os seguintes tratamentos: 1) Dieta controle (DC) + Lac100, 2) DC + CLA, 3) Dieta com alta proteína (DAP) + Lac100 e 4) DAP + CLA. O Lac100 (sais de cálcio de óleo de soja) foi utilizado como placebo. O CLA foi protegido por encapsulação e o produto utilizado continha ~16% de CLA. No segundo experimento, 12 vacas em lactação foram avaliadas em 3 períodos: a) Basal: os animais receberam uma dieta com alto teor de fibra sem OP (dieta basal) por 12 dias; b) Suplementação: 4 vacas/grupo receberam os seguintes tratamentos: 1) Dieta com alta fibra + OP (AF+OP), 2) Dieta com baixa fibra sem OP (BF) e 3) Dieta com baixa fibra + OP (BF+OP); c) Pós-suplementação: todos os animais passaram a receber novamente a dieta basal por 12 dias. Os resultados obtidos no primeiro experimento mostraram que o CLA não foi eficientemente protegido, de forma que a redução da secreção de gordura do leite foi de pequena magnitude em relação a outros trabalhos. Da mesma forma, a proteção dos sais de cálcio de óleo de soja foi pequena, resultando em maior concentração de CLA cis-9 trans-11 (P<0,05) e menor concentração de ácido linoléico (P<0,05) no leite dos animais. Apesar da concentração do CLA trans-10 cis-12 no leite ter aumentado igualmente em resposta ao CLA e ao Lac100, o teor de gordura do leite foi menor (P<0,05) no primeiro tratamento, sugerindo a presença de outros inibidores (ou precursores) no produto utilizado. A concentração de CLA trans-10 cis-12 no leite explicou ~50% da variação da DGL, sugerindo que outros fatores afetaram a síntese de gordura do leite. Os resultados do segundo experimento demostraram, de forma inédita, que o CLA trans-9 cis-11 e o C18:1 cis-11 estão estreitamente relacionados à DGL dos animais que receberam OP. A DGL foi causada por uma ampla redução (P<0,01) da secreção tanto dos ácidos graxos sintetizados de novo quanto dos pré-formados, sugerindo que o mecanismo da DGL pode envolver a inibição de diferentes enzimas lipogênicas. O menor (P<0,01) índice de atividade da enzima &#8710;-9 dessaturase em animais que receberam OP é consistente com a idéia acima. Diferentemente do observado em resposta ao OP, a secreção de gordura do leite não foi afetada pelo tratamento BF (P>0,1). Os teores de proteína e lactose aumentaram na dieta BF e nas dietas contendo OP, respectivamente. / Diet manipulation is an effective and rapid way to change milk composition, mainly for fat content. However, mechanisms are not fully undestood in despite of progress in the area over the last decade. Nowadays, it is known that a molecule of fatty acid (CLA trans-10 cis-12) which is formed in the rumen under specific feeding situations is capable of inhibiting milk fat synthesis. However, milk fat depression (MFD) has been observed even at conditions where there is no formation of trans-10 cis12 CLA (e.g. fish oil-supplemented diets). Although CLA effects on milk fat synthesis are well-established, previous study from our group also showed an increase on milk protein content in cows fed CLA. Two trials were conducted with two main objectives: 1) to determine if an additional supply of diet protein affects milk fat synthesis in cows fed CLA and 2) to study the mechanisms involved in MFD of cows fed diets with fish oil (FO) and different fiber levels. In the first trial, 48 lactating cows received the treatments as follow: 1) Control Diet (CD) + Lac100, 2) CD + CLA, 3) High Protein Diet (HPD) + Lac100 and 4) HPD + CLA. The Lac100 (calcium salts of soybean oil) was used as a placebo. CLA was protected by encapsulation (prills) and the product contained 16% CLA. In the second trial, 12 lactating dairy cows were evaluated in three periods: a) Basal: for 12 days, all cows received a baseline diet (High fiber without FO); b) Suplementation: 4 cows/group received the treatments for 21 days: 1) High fiber diet + FO (HF+FO); 2) Low fiber diet without FO (LF) and 3) Low fiber diet + FO (LF+FO); c) Post-supplementation: cows returned to baseline diet on 12 days. Results from the first trial showed that CLA protection method was innefficient. Thus, milk fat reduction was smaller than in other studies. Protection of calcium salts of soybean oil was also small which resulted in higher cis-9 trans-11 CLA and lower linoleic acid concentrations (P<0.05) in milk from cows fed Lac100. In despite of similar milk trans-10 cis-12 CLA increase in response to CLA and Lac100, milk fat content was lower (P<0.05) in cows fed CLA. It suggests the presence of other fat inhibitors (or precursors) in the product containing CLA isomers. Moreover, concentration of milk trans-10 cis-12 CLA explained ~50% of MFD suggesting others factors influencing milk fat synthesis. Results of the second trial were inedit in showing the close association of milk trans-9 cis-11 CLA and C18:1cis-11 concentrations and FO-induced MFD. MFD resulted from a lower (P<0,01) secretion of both de novo and preformed milk fatty acids. It suggests that mechanisms of FO-induced MFD must involve the inhibition of different lipogenic enzymes. The lower (P<0.01) dessaturase activity index in cows fed FO is consistent with this hypothesis. In contrast to FO, milk fat secretion was unchanged (P>0.1) by LF diet which is consistent with low CLA trans-10 cis-12 and C18:1trans-10 concentrations in milk from cows fed this diet. Contents of milk protein and milk lactose increased (P<0.05) in cows fed LF and FO diets, respectivelly.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-15T12:20:21Z No. of bitstreams: 1 victoreustaquiotosteszidirich.pdf: 1142000 bytes, checksum: 2b246de219ef265a66f3c21f0381b817 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-07-19T15:50:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 victoreustaquiotosteszidirich.pdf: 1142000 bytes, checksum: 2b246de219ef265a66f3c21f0381b817 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T15:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 victoreustaquiotosteszidirich.pdf: 1142000 bytes, checksum: 2b246de219ef265a66f3c21f0381b817 (MD5) Previous issue date: 2011-03-18 / O ácido linoléico conjugado, do inglês “Conjugated Linoleic Acid” (CLA) é uma mistura de isômeros de posição e geométricos do ácido linoléico (C18:2 n-6), comumente encontrado em maiores concentrações na carne bovina e em produtos lácteos de ruminantes. Numerosas atividades biológicas têm sido atribuídas aos isômeros C18:2 cis-9, trans-11(c9t11) e ao C18:2 trans-10, cis-12 (t10c12) dentre as quais destacam-se: propriedades anticarcinogênica, antiaterogênica, antiobesogênica, incluindo aumento da massa magra em animais, retardo do aparecimento de diabetes tipo II e também nas respostas imunes humoral e celular. O presente trabalho focou na utilização do c9t11 na dieta em camundongos da linhagem BALB/c, avaliando efeitos na resposta imune humoral como a produção anticorpos específicos para ovalbumina (OVA), bem como a síntese de citocinas e respostas à hipersensibilidade tardia (HTT). O trabalho mostrou que o CLA na dieta reduziu efeitos nas respostas de HTT em 24 horas nos animais e estes apresentaram altos níveis de Ac anti- IgG1 e supressão no perfil Th1 de citocinas como IFN-γ e TNF-α. Com base nesses resultados foi possível perceber que o CLA foi um importante fator no controle do processo inflamatório do modelo e que seu uso poderia ser considerado como uma importante intervenção profilática para muitas doenças de natureza inflamatória. / Conjugated Linoleic Acid (CLA) is a mixture of positional and geometrical isomers of linoleic acid (C18:2 n-6), commonly found in high concentrations in bovine meat and lacteous products from ruminants. Numerous biological activities have been attributed to C18:2 cis-9, trans-11(c9t11) and C18:2 trans-10, cis-12 (t10c12) isomers, among which anti-carcinogenic, anti-aterogenic, anti-obesity properties must be highlighted, including increase of thin mass in animals, delay in type II diabetes emergence and also in humoral and cellular immune responses. This work focused on the use of c9t11 in the diet of BALB/c mice, evaluating effects on humoral immune response by means of production of ovalbumin (OVA) specific antibodies, cytokine production and responses to delayed type hypersensitivity (DTH). The results showed that using CLA in the diet of BALB/c mice decreased effects on DTH responses in a 24h period after animals had been challenged. They exhibited high levels of Ab anti-IgG1 and suppression of Th1 profile cytokines such as IFN-γ and TNF-α. Based on these results, it was possible to say that CLA was an important factor of control in the inflammatory process of the model and that its use could be considered as an important prophylactic intervention for many diseases of inflammatory nature.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-05-09T13:54:13Z No. of bitstreams: 1 brendaleesimasporto.pdf: 2937738 bytes, checksum: 5bab0afa2d60b1556e96b14ca4858ece (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-17T14:14:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 brendaleesimasporto.pdf: 2937738 bytes, checksum: 5bab0afa2d60b1556e96b14ca4858ece (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-17T14:14:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 brendaleesimasporto.pdf: 2937738 bytes, checksum: 5bab0afa2d60b1556e96b14ca4858ece (MD5) Previous issue date: 2015-07-16 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Foi proposto um método alternativo para a determinação de ácidos graxos trans expressos em ácido elaídico por CZE com detecção direta no UV. A solução de eletrólito consistiu de 12,0 mmol L-1 de tetraborato de sódio, 12,0 mmol L-1 de brij 35 e MeOH/ACN na proporção de 33:17 v:v. Os ácidos graxos trans foram quantificados com sucesso em amostras de bala de caramelo, mistura para bolo, waffer recheado, chocolate e mistura para pão de queijo em 13 minutos de análise com a estatística baseada no cálculo de uma fator de resposta usando o ácido cis-nonadecaenóico como padrão interno. A comparação estatística entre CZE-UV e o método clássico de análise por GC-FID não apresentou diferenças significativas no intervalo de 95% de confiança. Também foi proposto um método alternativo para análise target de CLA por fast GC usando a coluna SLB-IL111 com 15 m de comprimento e 0,10 mm de diâmetro interno. A separação ocorreu em isoterma a 168 º C e os isômeros de CLA cis-9, trans-11 e trans-10, cis-12 eluiram em 4,6 e 4,7 minutos, respectivamente. Duas amostras de leite com diferentes teores de CLA em sua composição foram analisadas e quantificadas por adição de padrão. A comparação estatística entre o método proposto com a coluna SLB-IL11 e o método clássico de análise por GC-FID com a coluna CPSil-88 não apresentou diferenças significativas no intervalo de 95% de confiança. O terceiro foco deste trabalho envolve a busca de biomarcadores para aterosclerose instável, utilizando a abordagem de fingerprint em metabolomica. Foi selecionado um grupo de 38 pacientes, entre homens e mulheres, metade diagnosticada com aterosclerose instável e metade com aterosclerose estável. A partir da análise do plasma deses pacientes, por LC-MS e GC-MS, foi possível selecionar 25 metabólitos como candidatos a biomarcadores para a enfermidade. Destes, apenas 18 puderam ser identificados e classificados como ácidos graxos, aminoácidos e carnitinas. Sua variação entre as amostras testadas sugere que a alimentação humana pode estar relacionada com as diferenças no metabolismo de pacientes diagnosticados com aterosclerose estável e instável. / An alternative method for determination of trans fatty acids expressed as elaidic acid in CZE-UV with direct detection was proposed. The background electrolyte used consisted of 12,0 mmol L-1 of sodium tetraborate buffer, 12,0 mmol L-1 of brij 35 and MeOH/ACN in ratio 33:17 v:v. Trans fatty acids in different samples such as butter toffee, cake mix, stuffed wafers, chocolate and a mix for brazilian cheese bread were successfully quantified within an analysis time of 13 min, considering the statistical approach based on response factor calculation using cis-nonadecaenoic acid as internal standard. The statistical comparison between CZE-UV and the classical GC method for the analyzed samples did not present significant differences within the 95% confidence interval. Also was proposed an alternative method for the target analysis of CLA by fast GC using the SLB-IL111 column with 15 m length and 0.10 mm in internal diameter. The separation occurred with isotherm at 168 ° C and the CLA isomers cis-9, trans-11 and trans10, cis-12 eluting at 4.6 and 4.7 minutes, respectively. Two samples of milk with different CLA content in its composition was analyzed and quantified by standard addiction. The statistical comparison between the proposed method with the column SLB-IL111 and the classical GC method with the column CPSil-88 did not present significant differences within the 95% confidence interval. The third focus of this work involves the search of biomarkers for unstable atherosclerosis, using fingerprint approach in metabolomics. It selected a group of 38 patients, men and women, half diagnosed with unstable atherosclerosis and half with stable atherosclerosis. From the plasma analysis of these patients, by LC-MS and GC-MS, 25 metabolites as biomarkers candidate for this disease were selected. In which, only 18 could be identified and classified as fatty acids, amino acids, and carnitines. Its variation between samples suggests that human food may be related to the differences in the metabolism of patients diagnosed with stable and unstable atherosclerosis.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The effect of technological levels of production systems and seasons in the microbiological (somatic cell count and total bacterial count) and chemical quality of milk (fat, protein, nutraceutical potentiality in relation to the fatty acids profile and pesticides) was evaluated. Through multivariate statistical techniques, it was reduced dimensionality of 1,541 units producing milk (UPM) for the 15 municipalities in the Rio Grande do Sul, Brazil, 15 homogeneous groups and evaluated three UPL per quadrant of the Cartesian plane, in different seasons, which were characterized in four levels of specialization: highly specialized, specialized, partially specialized, and not specialized. After, milk samples from each farm were collected for analysis of microbiological quality and milk chemistry, including the fatty acid profile and index for evaluating the quality lipid fraction, especially the index proposed by the study, called nutraceutical index (NI); and also, the safety of the milk in respect of 93 pesticide residues and efficacy of degradation or elimination of these pesticides front of industrial heat treatments. The production systems and the seasons jointly interfere in the fatty acids profile, and singly interfere in chemical and microbiological quality of the milk. The lowest somatic cell count and the highest protein content were observed in summer, and the specialization level of production units had inverse relationship with total bacterial count. During winter, not specialized systems produced milk with the best nutraceutical index, with the highest values of polyunsaturated fatty acids, rumenic acid (CLA, 18:2n7 - c9, t11) and t10, c12 octadecadienoic acid (CLA, 18:2n6 t10, c12). In addition, with increasing levels of specialization of UPM and especially in the spring, summer and autumn were increased agrochemical residue levels in the milk. However, the industrial heat treatments were effective to degrade or eliminate the pesticides present in refrigerated raw milk, highlighting the importance of these different binomials of time and temperature for the safety of the milk consumed. / Foi avaliada a influência de níveis tecnológicos de sistemas de produção e estações do ano na qualidade microbiológica (contagem de células somáticas e contagem bacteriana total) e química do leite (gordura, proteína, potencialidade nutracêutica em relação ao perfil de ácidos graxos e agrotóxicos), além de avaliar a eficiência dos tratamentos térmicos industriais (pasteurização e ultrapasteurização) na degradação ou eliminação dos agroquímicos presentes no leite cru refrigerado. Através de técnicas estatísticas multivariadas, reduziu-se a dimensionalidade de 1.541 unidades produtoras de leite (UPL) referentes a 15 municípios do Rio Grande do Sul, Brasil, a 15 grupos homogêneos, sendo avaliadas três UPL por quadrante do plano cartesiano, nas distintas estações climáticas, as quais foram caracterizadas em quatro níveis de especialização: altamente especializado, especializado, semiespecializado e não especializado. Posteriormente foram coletadas amostras de leite de cada propriedade, para análise da qualidade microbiológica e química do leite, incluindo o perfil de ácidos graxos e índices de avaliação da fração lipídica, destacando-se o índice proposto pelo estudo, denominado índice nutracêutico (IN); e ainda, à inocuidade do leite em relação a 93 resíduos de agrotóxicos e a eficácia de degradação ou eliminação destes praguicidas frente aos tratamentos térmicos industriais. Através dos resultados deste estudo, observa-se que os sistemas de produção e as estações do ano interferem de forma conjunta no perfil de ácidos graxos, e de forma isolada na qualidade química e microbiológica do leite. As maiores contagens de células somáticas e os menores conteúdos de proteína foram observados no verão, e o grau de especialização das unidades produtivas esteve indiretamente relacionado com a contagem bacteriana total no leite. No inverno, sistemas não especializados produziram leite com melhor IN, com os maiores teores de ácidos graxos poli-insaturados, ácido rumênico (CLA, 18:2n7 - c9, t11) e ácido t10,c12-octadecadienoico (CLA, 18:2n6 t10, c12). Em adição, com a elevação dos níveis de especialização das UPL e principalmente na primavera, verão e outono aumentaram-se os valores de resíduos de agroquímicos no leite. No entanto, os tratamentos térmicos industriais mostraram-se eficientes para degradar ou eliminar os agrotóxicos presentes no leite cru refrigerado, evidenciando-se a importância destes distintos binômios de tempo e temperatura para a inocuidade do leite consumido.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dairy products form the major part of functional foods available on market place. Fresh cheeses are propitious to addition of probiotics due to their suitable pH, acidity and moisture. The objective of this study was evaluate the potential of cream cheese as a vehicle of probiotics, the physical-chemical, microbiological and sensory characteristics and the lipid profile of this product when additioned of prebiotic and probiotics. Treatments of cream cheeses were produced with addition of different levels of probiotics (Bifidobacterium animalis and Lactobacillus acidophilus) and prebiotic (inulin) in amounts according to Central Composite Design, totalizing 12 treatments, with 4 fatorials, 4 axial, 3 repetitions on central point and 1 control. The characteristics were evaluated in all treatments during storage for 45 days at 8°C. No significant changes were observed on physical-chemical characteristics of fat, protein and ash in comparison with control, while moisture was altered by prebiotic addition. The surface response was done to verify the influence of different levels of inulin and probiotic on pH and tritable acidity during storage; only linear and quadratic terms of probiotic level were significant (p<0,05). The pH and tritable acidity affect the viability of cultures; starter culture (S. termophilus) exhibited high viability during storage. Bifidobacterium animalis showed counts above 106 UFC g-1 during all period, assuring the probiotic potential in all treatments. The counts of Lactobacillus acidophilus reduced along storage, probably by competition with starter culture. Assessment of sensory attributes (global appearance, color, aroma, texture, acidity and taste) was evaluated using test with hedonic scale of 7 levels and ordering test. No significant difference was found by Tukey s test (p>0,05) on assessment using hedonic scale, neither on the ordering test. The linear, quadratic and interaction terms of multiple linear regression were not significant (p>0,05) for any sensory attribute; only the intercept of each equation was significant (p<0,01). Lipid profile was not significantly changed by the different levels of probiotic, with amounts of saturated fatty acids, monounsaturated, polyunsaturated and trans fatty acids similar to that of the milk used on cheese manufacture and control. The different levels of probiotic no altered the concentration of conjugated linoleic acid (CLA) in comparison with control, probably due to the low addition of probiotic, the reduced viability of Lactobacillus acidophilus during storage and the short shelf-life of cream cheese, with small time to produce CLA. In conclusion, cream cheese with addition of prebiotic and probiotic on levels of this study showed functional potential; nevertheless, the amount of probiotic used does not increase the concentration of CLA compared to the traditional product. / Derivados lácteos compõem a maior parte dos alimentos funcionais disponíveis no mercado. Queijos frescos são propícios à adição de probióticos por seu pH, acidez e umidade favoráveis. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial do cream cheese em atuar como condutor de probióticos, as características físico-químicas, microbiológicas e sensoriais e o perfil lipídico do produto quando adicionado de prebiótico e probióticos. As formulações de cream cheese foram elaboradas com adição de diferentes concentrações de probiótico (Bifidobacterium animalis e Lactobacillus acidophilus) e de prebiótico (inulina), em quantidades adotadas de acordo com o Delineamento Central Composto Rotacional, totalizando 12 ensaios, sendo 4 fatoriais, 4 axiais, 3 repetições no ponto central e 1 tratamento-controle. As características foram avaliadas durante o armazenamento do produto por 45 dias a 8°C. Não foi observada mudança significativa nas características físico-químicas quanto a gordura, proteína e cinzas em comparação à formulação-controle, enquanto o teor de umidade foi alterado pela adição do prebiótico. A superfície de resposta foi elaborada para verificar a influência das diferentes concentrações de inulina e probióticos sobre o pH e acidez (expressa em ácido láctico) das formulações durante o armazenamento, tendo somente os termos linear e quadrático da concentração de probióticos apresentado significância (p<0,05). O pH e acidez titulável das formulações influenciaram a viabilidade das culturas, tendo a cultura starter (S.termophilus) alta viabilidade durante todo o armazenamento. Bifidobacterium animalis apresentou contagens acima de 106 UFC/g durante todo o período, garantindo a potencialidade probiótica de todas as formulações. As contagens de Lactobacillus acidophilus declinaram ao longo do armazenamento, provavelmente por competição com a cultura starter. A avaliação dos atributos sensoriais (aparência global, cor, aroma, textura, acidez e sabor) foi realizada através de teste com escala hedônica de 7 níveis e teste de ordenação. Não foi encontrada diferença estatística pelo Teste de Tukey (p>0,05) na avaliação por escala hedônica, tampouco preferência significativa no teste de ordenação. Os termos linear, quadrático e de interação da regressão linear múltipla não foram significativos (p>0,05) para nenhum dos parâmetros sensoriais avaliados; somente o intercepto da equação de cada atributo apresentou significância estatística (p<0,01). O perfil lipídico das formulações não foi significativamente alterado pela adição de diferentes concentrações de probiótico, sendo as quantidades de ácidos graxos saturados, monoinsaturados, poliinsaturados e trans semelhantes aos do leite usado como matériaprima e à formulação-controle. As diferentes concentrações de probiótico igualmente não alteraram a concentração de ácido linoléico conjugado (CLA) em relação ao controle, provavelmente pela reduzida concentração de cultura usada, baixa viabilidade de Lactobacillus acidophilus durante ao armazenamento e ao fato de cream cheese ter vida-de-prateleira breve, com curto espaço de tempo para formação do CLA. Conclui-se que o cream cheese adicionado das concentrações estudadas de pre- e probiótico apresenta potencial funcional; entretanto, a quantidade de probióticos não aumentou o teor de CLA em relação às quantidades do produto tradicional.

La biohydrogénation (BH) ruminale des acides gras polyinsaturés (AGPI) est à l’origine de la production d’AG trans pouvant se retrouver dans les productions de ruminants, dont le lait. Parmi ceux-ci, les isomères t11 auraient des effets bénéfiques pour la santé des consommateurs alors que les isomères t10 sont potentiellement défavorables. En élevage, l’apport de graines oléagineuses dans la ration des vaches permet d’augmenter la teneur du lait en ces acides gras. Or ces graines sont souvent distribuées chauffées pour améliorer leur valeur nutritionnelle. Expérimentalement, les effets des graines chauffées sur les teneurs en isomères t11 dans le rumen ou le lait sont variables, mais généralement elles permettent une augmentation des isomères t11 et une protection des AGPI. Au contraire, des huiles très oxydées par chauffage diminuent fortement les isomères t11 et augmentent parfois les isomères t10. Les produits d’oxydation des lipides générés pendant le chauffage des graines ou des huiles pourraient être incriminés. Les objectifs de la présente étude étaient d’explorer les éventuels effets des produits d’oxydation du c9,c12-C18:2 sur sa BH ruminale. In vitro, la protection des AGPI dans des graines de soja chauffées a été liée aux aldéhydes et en particulier à l’hexanal. L’augmentation des isomères t11 a été observée avec un aldéhyde long et insaturé, le t2,t4-décadiénal, suite à une inhibition de la dernière étape de la BH. Cet effet était concomitant à une modification marquée de la communauté bactérienne du rumen induite par cet aldéhyde. Les hydroperoxydes issus du c9,c12-C18:2 sont le 13HPOD et le 9HPOD. L’augmentation des isomères t10 a systématiquement été reliée au 13HPOD dans nos différentes expérimentations. Aucun mécanisme d’action n’a pu être formellement démontré mais l’effet du 13HPOD s’exercerait plutôt sur le microbiote, car il ne module pas l’activité de la Δ9-isomérase. Quant à la diminution des isomères t11 observée avec les huiles chauffées, elle n’a pas pu être expliquée. Elle pourrait également être liée, au moins partiellement, aux 13HPOD et 9HPOD, capables d’inhiber la Δ12-isomérase. Des modifications des fermentations ruminales, sans altération mesurable de l’abondance, de la diversité ou de la structure de la communauté bactérienne, suggèrent aussi un effet des AGPI chauffés sur l’activité des bactéries. / Ruminal biohydrogenation (BH) of polyunsaturated fatty acids (PUFA) produces some trans FA which can be found in ruminant products. Among them, t11 isomers would be beneficial for human health while t10 isomers are potentially deleterious. In farms, addition of oilseeds to the diet of dairy cows increases these fatty acids in milk. Oilseeds are often heated before incorporation to cow’s diets, to enhance their nutritional value. Experiments investigating effects on t11 isomers content in rumen and milk of cows receiving heated oilseeds provided variable results, but they usually increased t11 isomers and protected PUFA from BH. On the contrary, highly oxidized oil decrease t11 isomers and sometimes increase t10 isomers. Lipid oxidation products generated during heating of oilseeds and oils could be incriminated. The objectives of the present study were to investigate the effects of c9,c12-C18:2 oxidation products on its BH. Protection of PUFA in heated soybeans was linked to aldehydes, mainly hexanal. An increase of t11 isomers was observed with a long and unsaturated aldehyde, the t2,t4-decadienal, due to an inhibition of the last BH step. This effect was concomitant with a modification of bacterial community by t2,t4-decadienal. Hydroperoxides formed during c9,c12-C18:2 heating are 13HPOD and 9HPOD. The increase of t10 isomers in all of our experimentations was systematically linked with 13HPOD. No definitive explanation about the mechanism of action could be proposed, but 13HPOD would most probably act on microbiote since it had no effect on Δ9-isomerase. Our experiments did not explain the decrease of t11 isomers observed with heated oils, which could, at least in part, be due to 13HPOD and 9HPOD, which were able to inhibit Δ12-isomerase Some modifications of ruminal fermentation without measurable alteration of bacterial community abundance, diversity or structure also suggest an action of heated PUFA on bacterial activity.

Les personnes en surcharge pondérale semblent préférer une alimentation riche en graisse. Face à l'épidémie d'obésité qui touche nos Sociétés tant urbaines que rurales, élucider les mécanismes de la détection des lipides alimentaires devient un enjeu majeur. Il avait précédemment été admis que la glycoprotéine CD36 exprimée dans les papilles caliciformes de souris, est impliquée dans la perception oro-gustative des lipides alimentaires. Dans ce travail, nous avons montré que l'acide linoléique (LA), en activant les phospholipases A2, sPLA2, cPLA2 et iPLA2 via CD36, produit de l'acide arachidonique (AA) et la lyso-phosphatidylcholine (lyso-PC). LA déclenche un influx calcique dans les cellules CD36-positives et induit la production du facteur CIF (Calcium Influx Factor). CIF, AA et lyso-PC exercent différentes actions sur l'ouverture des canaux SOC (Stored Operated Calcium Channel) constitués de protéines Orai et contrôlés par STIM1. Stim1 est un senseur calcique situé sur la membrane du réticulum endoplasmique activé par la déplétion du calcium intracellulaire. Nous avons utilisé la technologie siRNA et des modèles de souris transgéniques pour montrer que CIF et lyso-PC activent des canaux calciques homodimériques composés de protéines Orai1 tandis qu’AA active des canaux hétéro-pentamériques composés d’Orai1 et Orai3. Nous avons également montré que STIM1 régule la production de CIF dans les cellules stimulées par la thapsigargine et l’acide linoléique ainsi que l'ouverture de deux types de canaux calciques. Par ailleurs les souris au phénotype Stim1-/- perdent la préférence spontanée pour les lipides observé chez les animaux de type sauvage. D’un autre côté les cellules CD36-positive de souris Stim1-/- sont incapables de libérer la sérotonine dans l'environnement extracellulaire. Nos résultats suggèrent que des acides gras à longue chaine (AGLC) induisent la signalisation calcique régie par STIM1 via CD36. La perception oro-gustative des lipides alimentaires détermine la préférence spontanée pour les lipides observée chez les mammifères / The lipid-binding glycoprotein CD36, expressed by circumvallate papillae (CVP) of the mouse tongue, has been shown to be implicated in oro-gustatory perception of dietary lipids. We demonstrate that linoleic acid (LA) by activating sPLA2, cPLA2 and iPLA2 via CD36, produced arachidonic acid (AA) and lyso-phosphatidylcholine (Lyso-PC) which triggered Ca2+ influx in CD36-positive taste bud cells (TBC), purified from mouse CVP. LA induced the production of Ca2+ influx factor (CIF). CIF, AA and Lyso-PC exerted different actions on the opening of store-operated Ca2+ (SOC) channels, constituted of Orai proteins and regulated by STIM1, a sensor of Ca2+ depletion in the endoplasmic reticulum. We used siRNA technology and transgenic mice models and observed that CIF and Lyso-PC opened Orai1 channels whereas AA-opened Ca2+ channels were composed of Orai1/Orai3. STIM1 was found to regulate LA-induced CIF production and opening of both kinds of Ca2+ channels. Furthermore, Stim1–/– mice lost the spontaneous preference for fat, observed in wild-type animals. The CD36-positive TBC from Stim1–/– mice also failed to release serotonin into extracellular environment. Our results suggest that fatty acid-induced Ca2+ signaling, regulated by STIM1 via CD36, might be implicated in oro-gustatory perception of dietary lipids and the spontaneous preference for fat

Este trabalho investigou os efeitos do CLA sobre o metabolismo lipídico na caquexia. Grupos controle ou tumor foram suplementados com CLA, óleo de girassol ou salina, por gavagem, por 14 dias. O peso corporal, ração, glicose, colesterol, TAG, insulina e leptina plasmáticos, glicogênio, proteína, TAG, expressão gênica da CPT I and II, MTP, L-FABP, PPAR-&#945 e apoB, o conteúdo proteíco da apoB e a atividade máxima da CPT I e II no fígado, o conteúdo de gordura no TAE e TARP e a concentração proteíca e de IL-1&#946,IL-6,TNF-&#945 e IL-10 desses tecidos foram determinados. A atividade da CPT II mostrou-se reduzida em todos os grupos em relação a C. o mRNA da MTP, apoB e FABP foi inferior em todos os grupos TB, mas no TBCLA esta redução foi maior. Todos os grupos mostraram expressão diminuída de proteína apoB em relação a C. TBCLA aumentou o TAG hepático e plasmático, assim como colesterol e glicose quando comparado com os grupos TB. O TAG no TAE diminuiu em TBCLA em relação a C, TBSF e CCLA. Houve diminuição de IL-1&#946 no CCLA em relação a C, mas em TBCLA a IL-1&#946 foi superior em relação a C, TB e TBSF. TBCLA mostrou um aumento de IL-6 em relação a TB e CCLA. O TBCLA mostrou aumento de TNF-&#945 quando comparado com TB e CCLA. O CLA falhou em promover a recuperação do metabolismo lipídico em animais caquéticos. / We investigated the effects of CLA upon lipid metabolism in cachexia. Male Wistar rats were assigned to a control or cachetic rats, supplemented with CLA, sunflower oil or saline, for 14 days. Body weight, dietary intake, plasma glucose, cholesterol, insulin and leptin, and liver TAG, glycogen and protein, CPT I and II, MTP, L-FABP, PPAR-&#945, apoB gene expression, apoB protein content and the maximal activity of CPT I and II, were assessed. The fat content of EAT and RPAT, and adipose tissue IL-1&#946,IL-6,TNF-&#945 and IL-10 content were assessed. CPT II activity was reduced in all groups when compared with C. mRNA expression of MTP, apoB and FABP were reduced in all TB groups, but TBCLA showed the greatest reduction of apoB and MTP mRNA and apoB protein content. TBCLA increased liver and plasma TAG, cholesterol and glucose content, when compared with TB groups. TAG in EAT decreased in TBCLA group when compared with C, with TBSF, and with CCLA. Decreased IL-1&#946 in CCLA was found in relation to C, TBCLA enhanced IL-1&#946 in relation to C, TB and TBSF. TBCLA, increased IL-6 when compared with TB and CCLA. TBCLA showed higher TNF-&#945 in relation to TB and CCLA. We conclude that CLA fails promoting the re-establishment of lipid metabolism in cachexia.