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Estudo da helicobacteriose em cães e gatos: determinação da frequência de ocorrência na mucosa gástrica de animais necropsiados e comparação entre métodos de diagnóstico / Study helicobacteriosis in dogs and cats: determining the frequency of occurrence in the gastric mucosa of animals necropsied and comparison of diagnostic methods

Romero, Débora Cristina 27 January 2014 (has links)
Helicobacter spp é uma bactéria espiralada gram negativa que pode fazer parte da microbiota gástrica de cães e gatos domésticos, e sua associação com as gastropatias ainda é amplamente discutida na Medicina Veterinária. O objetivo do estudo foi avaliar a frequência de ocorrência da helicobacteriose gástrica em cães e gatos necropsiados no HOVET-USP e comparar quatro métodos de diagnóstico para a identificação do agente. Fragmentos da mucosa gástrica foram destinados ao TRU, citologia, histopatologia por hematoxilina e eosina (HE) com coloração de Warthin Starry (WS) e imuno-histoquímica (IHQ). Para a análise comparativa, de concordância e de desempenho dos testes, entre os métodos de diagnóstico com o padrão ouro (HE), foram utilizados o teorema de Bayes, o índice Kappa e o índice Youden respectivamente. Nos cães a frequência de ocorrência da helicobacteriose gástrica ficou em 57%, com associação entre a infecção e a faixa etária dos animais. Nos gatos esta frequência de ocorrência foi de 87% pelo método padrão ouro (HE) de diagnóstico escolhido sem associação entre infecção, raça, gênero e idade dos animais. A imunohistoquímica obteve maiores índices de Youden e Kappa nos cães. Nos gatos, a coloração específica a base de prata, Warthin Starry, obteve maior índice Youden e Kappa do que os outros diagnósticos. A determinação da frequência de ocorrência do Helicobacter spp varia conforme o método de diagnóstico adotado. A escolha do método depende dos recursos financeiros disponíveis, das amostras que se pretende estudar, do tempo necessário, da praticidade do método e da sua performance. / Helicobacter spp are gram negative spiral bacterium that can be part of the gastric microbiota of domestic dogs and cats, and its association with gastropathies is still widely discussed in Veterinary Medicine. The aim of the study was to evaluate the frequency of occurrence of gastric helicobacteriose in dogs and cats necropsied at HOVET - USP and compare four diagnostic methods for the identification of the agent. Fragments of gastric mucosa were sent to the rapid urease test (RUT), cytology, histopathology by hematoxylin and eosin (HE) staining with Warthin Starry (WS) and immunohistochemistry (IHC). For comparative analysis, and concordance and performance between diagnostic methods with the gold standard (HE) were used respectively the Bayes\' theorem, the Kappa index and Youden index. In dogs the frequency of occurrence of gastric helicobacteriose stood at 57 %, with an association between infection and the age of the animals. In cats this frequency of occurrence was 87 % for the gold standard method (HE) and no association between infection, race, gender and age of the animals was found. Immunohistochemistry showed higher Youden index and Kappa in dogs. In cats, the specific staining based on silver, Warthin Starry, demonstrated the highest Youden and Kappa indexes among the other diagnostic methods. The determination of the frequency of occurrence of Helicobacter spp varies according to the diagnostic method adopted. The choice of method depends on the financial resources available, the samples under study, the time required, the practicality of the method and its performance.
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Indutores de maturação e a qualidade tecnológica da cana-de-açúcar / Ripeners and the technological quality of sugarcane

Bet, Jessica Angela 18 September 2015 (has links)
Tecnologias que permitam explorar o potencial genético das variedades de cana-de-açúcar nos diversos ambientes de produção e possibilitem o planejamento da colheita são fundamentais para aumentar a rentabilidade do setor sucroenergético. Dentre estas tecnologias, o emprego de indutores de maturação destaca-se por possibilitar o manejo da cultura em seu sistema de produção e proporcionar melhorias na qualidade da matéria-prima. A utilização conjunta de maturadores e nutrientes em pré-colheita pode fornecer a indústria matéria prima de melhor qualidade tecnológica. Entretanto, questões relacionadas a épocas de utilização e a associação de maturadores com nutrientes não estão totalmente esclarecidas. Neste sentido, o propósito deste trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de maturadores e nutrientes, em diferentes épocas de manejo, sobre parâmetros tecnológicos da cana-de-açúcar em início de safra. Foram conduzidos, em cana planta variedade RB 85 5453, dois experimentos compostos por 14 tratamentos: Controle, Orthosulfamuron, Etil-Trinexapac, Sulfometuron metil, Sulfometuron metil/ Boro 150 g/ha, Nitrato de Potássio, Boro 50 g/ha, Boro 150 g/ha, Boro 250 g/ha, Nitrato de Potássio + Boro 50 g/ha, Complexo de micronutrientes, Complexo de Micronutrientes + Biorregulador, Sulfometuron metil + Complexo de Micronutrientes, Sulfometuron metil + Complexo de Micronutrientes + Biorregulador; em delineamento de blocos casualizados, com 4 repetições. Foram realizadas 2 aplicações com intervalo de 33 dias entre aplicação. Os parâmetros Brix%, Fibra, Pol do caldo, Pol da cana), Pureza, Açúcares Redutores do Caldo, Açúcares Redutores da Cana e Açúcar Total Recuperável foram avaliados em intervalos quinzenais, aos 0, 15, 30, 45 e 60 dias após a aplicação dos produtos. Verificou-se que a utilização dos maturadores promoveu melhorias na qualidade da cana-de-açúcar e que a associação de nutrientes ao maturador não potencializou a ação dos maturadores. Diferentes épocas de aplicação dos produtos em pré-colheita resultaram em diferentes respostas da cana-de-açúcar. / Technologies to exploit the genetic potential of the varieties of sugarcane in different production environments and enable the planning of crop are essential to increase the profitability of the sugarcane industry. Among these technologies, the use of ripeners stands out by enabling the management of culture in its production system and provide improvements in the quality of the raw material. The joint use of ripeners and nutrients before the harvest can supply the raw material of better quality technology industry, however, issues related to the use of times and the ripeners of association with nutrients are not fully clarified. In this sense, the purpose of this study was to evaluate the effect of applying ripeners and nutrients at different times of management on technological parameters of sugarcane in early harvest. Were conducted, in sugarcane plant, variety RB 85 5453, two experiments consist of 14 treatments: Control, Orthosulfamuron, Ethyl-trinexapac, Sulfomethuron methyl, Sulfomethuron methyl + Boron 150 g/ha, Potassium Nitrate, Boron 50 g/ha, Boron 150 g/Ha, Boron 250 g/ha, Potassium Nitrate + Boro 50 g/ha, Complex micronutrients, Complex micronutrients + plant growth regulator, Sulfomethuron methyl + Complex micronutrients, Sulfomethuron methyl + Complex Micronutrients + Plant growth regulator; in a randomized block design with four replications. The applications were made on 28 March and 30 April. The parameters Brix%, fiber, Pol broth, Pol cane, Purity, reducing sugars, and recoverable total sugar were assessed at fortnightly intervals at 0, 15, 30, 45 and 60 days after application of the products. The use of ripeners promoted improvements in the quality of sugarcane and that the combination of nutrients to the ripeners didn\'t potentiate the action of ripeners. Different times of application of the products before the harvest resulted in different responses of sugarcane.
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Atributos diagnósticos da reação em cadeia pela polimerase com oligonucleotídeos iniciadores direcionados a genoma de cinetoplasto e nuclear de Leishmania spp / Diagnostic attributes of the polymerase chain reaction with primers targeted to the kinetoplast and nuclear genome of Leishmania spp.

Lopes, Estela Gallucci 08 October 2010 (has links)
A técnica de PCR pode ser empregada para a detecção e identificação de agentes patogênicos e, tem por isso grande aplicabilidade em estudos de epidemiologia molecular. Particularmente no que se refere às infecções por Leishmania spp., a detecção do seu agente é de suma importância em animais sorologicamente positivos, no caso de inquéritos para a detecção direta em vetores e em animais de vida livre, cujo anti-soro para provas sorodiagnósticas, não são disponíveis. A PCR ainda pode oferecer o recurso de identificação molecular do agente em pesquisa, quando marcadores filogeneticamente informativos são amplificados e seqüenciados. Neste sentido, foi realizado o presente trabalho, cujo objetivo foi avaliar o desempenho analítico e diagnóstico de PCRs baseadas em primers direcionados a marcadores universais para diagnosticar Leishmania spp. localizados em dois genomas da célula parasitária, a saber, kDNA (maxicírculo e minicírculo) e DNA nuclear. Foram avaliadas PCRs baseadas em primers direcionados ao (i) DNA de kinetoplasto (kDNA) minicirculo, ao gene codificador de Citocromo B e Citocromo C Oxidase subunidade II presentes no (ii) kDNA maxicírculo, e ao gene codificador Citicromo C, presente no (iii) DNA nuclear. Pelos resultados infere-se que a PCR direcionada ao kDNA de minicírculo apresentou uma sensibilidade analítica muito superior às PCRs direcionadas ao DNA maxicirculo e nuclear. Pelo menos uma combinação dos primers de cada marcador foi capaz de detectar DNA de todas as espécies da Coleção de Leishmania do Instituto Oswaldo Cruz (CLIOC), tornando-os uma ferramenta útil para identificação de espécies de Leishmania spp. A PCR direcionada ao kDNA de minicírculo apresentou uma sensibilidade diagnóstica também muito superior às PCRs direcionadas ao DNA maxicirculo e nuclear. Amostras de baço e medula óssea produzem informações complementares para diagnóstico post-mortem de Leishmania spp. em cães soropositivos. Finalmente, as amostras de aspirado de medula óssea demonstraram ser uma alternativa confirmatória para o diagnóstico laboratorial do agente em animais soropositivos assintomáticos. / The PCR technique can be employed for the detection and identification of pathogens, and therefore has wide application in molecular epidemiology studies. Particularly in relation to infection by Leishmania spp., the detection of its agent is important in seropositive animals, in the case of surveys for direct detection in vectors and in free-living animals, whose anti-serum for serodiagnosis test are not available. PCR can also offer the molecular identification of the agent, when phylogenetically informative markers are amplified and sequenced. In this sense, we performed the present study, whose aim was to evaluate the analytical and diagnostic performance of PCR based on universal primers that target markers to diagnose Leishmania spp located in two distinct genomes of the parasite cell, namely, kDNA (maxicírcle and minicircle) and nuclear DNA. PCRs were evaluated based on primers targeted to the kinetoplastids (i) DNA (kDNA) minicircles, the cytochrome B and cytochrome C oxidase subunit II genes present in the (ii) kDNA maxicircle and the gene encoding Citicromo C, present in (iii) nuclear DNA. Based on the results, the PCR directed to the kDNA minicircle showed an analytical sensitivity much higher than the PCR targeting the kDNA maxicircle and nuclear DNA. At least one combination of primers of each marker was able to detect DNA from all CLIOC - Leishmania collection of Oswald Cruz institute species, which qualifies a useful tool for species identification of Leishmania spp. The PCR targeted to minicircle kDNA also showed to have a diagnostic sensitivity much higher than PCRs directed to kDNA maxicircle and nuclear DNA. Spleen and bone marrow samples produces additional information post-mortem diagnosis of Leishmania spp. on seropositive dogs. Finally, samples of bone marrow aspirate are an alternative for confirmatory laboratory diagnosis of the agent in asymptomatic seropositive animals.
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Paralelos entre métodos fenotípicos, imunológicos e genotípicos para detecção rápida de Salmonella spp em matrizes alimentares sem contaminação experimental: avaliação em condições reais e simultâneas de uso / Parallels between phenotypic, genotypic and immunological methods for rapid detection of Salmonella spp in non-contaminated food matrices: evaluation in real conditions of use

Killner, Mario 20 June 2008 (has links)
Salmonella spp é um dos microrganismos patogênicos de relevância em alimentos. Sua detecção em alimentos por metodologia de cultura é trabalhosa e demorada, o que explica a grande variedade de sistemas automatizados e kits para detecção rápida desse patógeno existentes no mercado. Muitos desses métodos alternativos são validados por organizações internacionalmente reconhecidas, mas tais validações têm sido efetuadas em condições laboratoriais artificiais e com matrizes alimentares experimentalmente contaminadas, dificilmente refletindo a realidade de um laboratório de rotina de análises microbiológicas de alimentos. Nesse trabalho, avaliou-se o desempenho de sete métodos rápidos alternativos genotípicos e imunológicos, usados simultaneamente para detecção de Salmonella spp em 244 amostras de alimentos sem contaminação experimental, empregando o método de cultura ISO 6579:2002 como método de referência. Os métodos avaliados foram BAX Salmonella,VIDAS Salmonella (SLM),Transia Plate Salmonella Gold,VIP Salmonella,TECRA UNQUIQUE SALMONELLA,Singlepath Salmonella e 1-2 Test. O nível de detecção para cada método também foi determinado, trabalhando-se com três matrizes alimentares diferentes, experimentalmente contaminadas com cinco níveis de inóculo. O método de referência detectou 50 amostras (20,5%) positivas para Salmonella spp. Nas condições em que o trabalho foi realizado, a porcentagem de concordância dos resultados positivos obtidos pelos métodos alternativos avaliados em relação aos resultados positivos obtidos pelo método ISO 6579:2002 variou de 42,3% a 100% nas amostras sem contaminação experimental e de 75% a 100% nas amostras artificialmente contaminadas, dependendo do método avaliado e da matriz alimentar analisada. Todos os métodos rápidos avaliados apresentaram resultados falso-positivos e falso-negativos, em freqüências dependentes também do método avaliado e da matriz alimentar analisada. Os resultados obtidos evidenciaram que os métodos rápidos avaliados devem ser utilizados unicamente para fins de triagem, podendo haver um risco intrínseco na escolha de um método rápido para detectar Salmonella spp em determinada matriz alimentar. A seleção de um método rápido, em particular, só deve ser feita após a determinação do grau de risco que se queira assumir. / Salmonella spp is an important foodborne pathogen. The detection in foods by the cultural methodology takes at least five days to be completed and several automated systems and kits are available in the market for rapid detection of this pathogen. Most rapid methods are validated by internationally recognized organizations, but most validations have been conducted in artificial laboratory conditions, working with inoculated food samples, hardly reflecting the real conditions of a routine testing laboratory. In this study, seven immunological and genotypic rapid methods were used simultaneously for the detection of Salmonella spp in 244 non-inoculated food samples, and compared to the ISO 6754:2002 cultural method, used as reference. The rapid methods evaluated were BAX Salmonella, VIDAS Salmonella (SLM), Transia Plate Salmonella Gold, TECRA UNIQUE SALMONELLA, VIP Salmonella, Singlepath Salmonella and 1-2 Test. The lowest detection level for each method was also determined using three different food matrices experimentally contaminated with five levels of inoculum. Based on results obtained by the ISO 6754:2002 method, 50 (20.5%) samples were positive for Salmonella spp. In the conditions of the study, the agreement percentage of positive results obtained by each rapid method when compared to the positive results of the reference method varied between 42.3% and 100% in the non-inoculated food samples and between 75% and 100% in the experimentally contaminated samples, depending on the method and the tested food matrix. All rapid methods presented false-positive and false-negative results, and their frequency varied according to the method and the tested food matrix. Results confirmed that these rapids methods should be used for screening exclusively, and the selection of a rapid method for detection of Salmonella spp in foods may have an intrinsic risk. The degree of this risk needs to be determined before a particular method is selected.
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Revisão taxonômica das espécies do gênero Ornithonyssus (Acari: Macronyssidae) parasitos de pequenos mamíferos terrestres no Brasil e avaliação da infecção desses ácaros por Rickettsia spp / Taxonomic revision of species of the genus Ornithonyssus (Acari: Macronyssidae) on small wild mammals from Brazil and the rickettsial infection evaluation in these mites

Bastos, Fernanda Aparecida Nieri 31 January 2008 (has links)
Até a metade do século passado o gênero Ornithonyssus Sambon (Acari: Macronyssidae) no Brasil estava representado por 12 espécies, sendo 7 espécies de pequenos mamíferos terrestres, 1 espécie de morcego e 4 espécies de aves. Nos anos 80 as espécies brasileiras de Ornithonyssus de roedores e marsupiais foram sinonimizadas e reduzidas a quatro somente, O. bacoti (Hirst), O. matogrosso (Fonseca), O. pereirai (Fonseca) e O. wernecki (Fonseca). O presente estudo reuniu informações sobre a morfologia dessas espécies a partir de tipos e material depositados na Coleção Acarológica do Instituto Butantan, bem como, de espécimes recentemente coletado em pequenos mamíferos terrestres. Para dar suporte à morfologia, estudos de biologia molecular foram conduzidos a fim de esclarecer o status taxonômico desse gênero. Adicionalmente foi investigada a presença de bactérias do gênero Rickettsia no material coletado. Os caracteres morfológicos foram estudados através de microscopia óptica e eletrônica de varredura. Para a taxonomia molecular o DNA foi extraído e a região 16SrDNA do gene mitocondrial foi seqüenciada, incluindo espécimes dos Estados Unidos e Peru. Na pesquisa de Rickettsia foi utilizada a técnica da PCR para dois genes, citrato sintase (gltA) e proteína externa de membrana A (ompA), além de seqüências obtidas do gene gltA para análises de distância. Os estudos de morfologia e molecular sugerem a ausência de O. bacoti no Brasil, e a incerteza da validade de registros na América Latina. Das sinonímias previamente propostas, nenhuma delas é válida com exceção de O. lutzi (Fonseca) que é de fato sinonímia de O. monteiroi (Fonseca). As outras 6 espécies brasileiras de Ornithonyssus, O. brasiliensis, O. matogrosso, O. monteiroi, O. pereirai, O. vitzthumi (Fonseca) e O. wernecki, estão taxonomicamente confirmadas, e uma chave dicotômica ilustrada para a identificação dessas espécies, foi proposta. A presença de Rickettsia foi detectada em 45 (57%) e em 3 (3,8%) das 79 amostras de ácaros testadas para os genes gltA e ompA, respectivamente. A análise de distância das 17 seqüências obtidas para o gene gltA revelou similaridade da maioria das amostras com o Grupo da Febre Maculosa. A alta porcentagem de positividade encontrada para Rickettsia foi inesperada, uma vez que a taxa no vetor (carrapato) naturalmente infectado, é baixa. This fact suggest / Until meddle of last Century the Ornithonyssus Sambon genus (Acari: Macronyssidae) in Brazil was represented by 12 species, with 7 species from small wild land mammals, 1 species from bat, and 4 species from birds. Unfortunately in the 80\'s the Brazilian species of Ornithonyssus from rodents and marsupials were synonymyzed and reduced into four species only, O. bacoti (Hirst), O. matogrosso (Fonseca), O. pereirai (Fonseca), and O. wernecki (Fonseca). The present study joins information about their morphology from types and material deposited at the Coleção Acarológica do Instituto Butantan as well as from specimens recently collected on small wild land mammals. Molecular biology was conducted to clarify the taxonomic status of this genus in order to support the morphology studies. In addition, the presence of bacteria of the genus Rickettsia in the collected material was investigated. The morphologic characters were studied under optical and scanning electron microscopy. The DNA was extracted and the region of the mitochondrial gene 16SrDNA was sequenced for the molecular taxonomy, including specimens from North America and Peru. It was used the PCR technique for two genes, citrato sintase (gltA) and outer membrane protein A (ompA) in the rickettsial research, besides of the sequences from gltA gene to analyze the distance between them. The morphology and molecular studies suggest the absence of O. bacoti in Brazil, and the validity of the records from Latin America is uncertainness. From those synonymies, no one of them is valid, except for O. lutzi (Fonseca) that is in fact a synonym of O. monteiroi (Fonseca). The other six Brazilian species of Ornithonyssus, O. brasiliensis, O. matogrosso, O. monteiroi, O. pereirai, O. vitzthumi (Fonseca) and O. wernecki, are taxonomically confirmed, and a dichotomic key for these species is proposed. Among the 79 mite samples the rickettsial infection was detected in 45 (57%) and 3 (3.8%), to gltA and ompA genes, respectively. The distance between 17 analyzed sequences to gene gltA showed similarity to the Maculosa Fever Group for most of them. The high percentage of positiveness was not expected once the naturally infected vector rate (ticks) is low. This fact suggests new hypothesis about the enzootic cycle maintenance and rickettsial transmission.
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"Listeria monocytogenes e Salmonella spp. em leite cru produzido em quatro regiões leiteiras no Brasil: ocorrência e fatores que interferem na sua detecção" / Listeria monocytogenes and Salmonella spp. in raw milk produced in four milk-producing regions in Brazil: occurrence and factors that interfere in their detection

Nero, Luis Augusto 08 April 2005 (has links)
O Brasil tem uma grande produção leiteira, e, embora seu comércio seja ilegal, o leite cru é consumido por uma parcela da população, principalmente na zona rural. Visando avaliar o risco associado ao consumo de leite cru, esse trabalho estudou a ocorrência de Listeria monocytogenes e Salmonella spp. em leite cru produzido em quatro importantes regiões produtoras de leite do Brasil, fazendo uma correlação com os níveis de contaminação com outros microrganismos indicadores de qualidade do produto (bactérias aeróbias mesófilas totais, coliformes totais e Escherichia coli), bem como investigou a presença de substancias químicas empregadas no manejo do gado bovino (sanitizantes, antibióticos e defensivos agrícolas). Foi também avaliada a interferência de alguns fatores na detecção desses dois patógenos em leite cru, incluindo sensibilidade da metodologia analítica, possível ação inibitória dos resíduos químicos e o possível antagonismo microbiano da microbiota autóctone do leite sobre L. monocytogenes ou Salmonella spp. O estudo foi conduzido com amostras de leite cru obtidas em 210 fazendas leiteiras localizadas nos Estados do Paraná, São Paulo, Rio Grande do Sul e Minas Gerais, selecionadas de acordo com as diferentes práticas de ordenha e de equipamentos disponíveis. Os resultados indicaram ausência dos dois patógenos em todas as amostras estudadas, embora grande parte (48,6%) apresentasse contaminação microbiológica acima do especificado pela Instrução Normativa 51, do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, a vigorar a partir de julho de 2005. A presença de cloro não foi detectada em nenhuma das amostras, mas 11,4% foram positivas para antibióticos. A grande maioria das amostras (93,8%) foi positiva para organofosforados e/ou carbamatos. Quanto à sensibilidade das metodologias analíticas, verificou-se que sua capacidade de detectar os patógenos era dependente da contaminação microbiana presente. Os pesticidas não tiveram nenhuma ação inibitória sobre L. monocytogenes ou Salmonella spp. Das 360 colônias de bactérias isoladas das amostras de leite cru, 25,3% e 9,2% apresentaram antagonismo em relação à L .monocytogenes e Salmonella spp., respectivamente. A maioria dessas bactérias foi identificada como Lactococcus lactis subsp. lactis e Enterococcus faecium. Concluiu-se que L. monocytogenes e Salmonella spp. não devem ser considerados perigos de significância em leite cru produzido nas quatro regiões estudadas, mas resultados negativos devem ser interpretados com cuidado, pois há fatores que podem interferir no isolamento desses patógenos, especialmente em relação à L. monocytogenes, sendo a atividade antimicrobiana na microbiota autóctone o mais importante. / Brazil is a great milk-producing country, and despite illegal its commercialization, raw milk is consumed by certain groups of people, especially in rural areas. Aiming to evaluate the risk associated to consumption of raw milk, this study evaluated the occurrence of Listeria monocytogenes and Salmonella spp. in raw milk produced in four important milk producing regions in Brazil, correlating this result with the levels of hygiene indicator microorganisms (total aerobic counts, fecal coliforms and Escherichia coli) and the presence of chemical substances used in animal rearing (sanitizers, antibiotics and pesticides). The study also evaluated some factors that may interfere in the detection of both pathogens in raw milk, mainly sensitivity of the analytical method, potential inhibitory activity of chemical residues and antagonism of the autoctonous microbiota. The study was conducted with raw milk samples collected in milk farms located in four Brazilian States: Paraná, São Paulo, Rio Grande do Sul and Minas Gerais, selected according to milking procedures and machinery availability. Results indicated that both pathogens were absent in the samples, despite 48.6% of the samples were not in accordance to the standards of the Brazilian Ministry of Agriculture (Instrução Normativa 51), that will be in place next July 2005. Chlorine was not detected, but 11.4% of the samples were positive for antibiotics. The great majority (93.8%) was positive for organophosphorous and/or carbamate pesticides. Results conformed that the sensitivity of the analytical method is dependent on the level of microbial contamination of the samples. The pesticides presented no action over the tested pathogens. Among 360 bacterial colonies isolated from the milk samples, 25.3% and 9.2% were active against L. monocytogenes e Salmonella spp., respectively. Most of them were identified as Lactococcus lactis subsp. lactis and Enterococcus faecium. It was concluded that L. monocytogenes and Salmonella spp. should not be considered relevant pathogens in raw milk produced in the four tested regions in Brazil, but the negative results should be interpreted with care because there are factors that may interfere in the isolation of the pathogens, mainly L. monocytogenes, being the antagonism of components of the autoctonous microbiota the most important.
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Interação da adubação nitrogenada e Azospirillum brasiliense em soqueira de cana-de-açúcar / Interaction of nitrogen fertilization and Azospirillum brasiliense on sugar cane ratoon

Villela, Paulo Márcio Faria 04 October 2018 (has links)
A cana-de-açúcar é uma das principais culturas no cenário nacional e tem grande importância nos fatores econômicos, sociais e ambientais. O nitrogênio é um macronutriente essencial para a planta e a adubação nitrogenada é um manejo de muita importância, mas ao mesmo tempo difícil de se trabalhar devido a suas formas de perdas no solo e na planta. A inoculação com bactérias do gênero Azospirillum em cana-de-açúcar pode ser considerada uma alternativa capaz de contribuir para a sustentabilidade do manejo da adubação nitrogenada e do seu melhor aproveitamento. O objetivo do trabalho foi de verificar se há benefícios da bactéria Azospirillum no manejo da adubação nitrogenada em soqueira de cultura da cana-de- açúcar, minimizar a adubação nitrogenada com o uso de inoculação da bactéria Azospirillum. O experimento foi realizado em Porto Ferreira - SP, o delineamento foi em blocos casualizados com 7 tratamentos (0 kg N/ha, 120 kg N/ha, 60 kg N/ha, 60 kg N/ha + 200 ml Azospirillum, 60 kg N/ha + 400 ml Azospirillum, 60 kg N/ha + 600 ml Azospirillum e 60 kg N/ha + 800 ml Azospirillum). Observamos que não houve respostas para a adubação nitrogenada e nem para a aplicação foliar de Azospirillum em soqueira de CTC 20, somente para as doses de Azospirillum apresentou resposta quadrática com a máxima produção de colmos e açúcar por unidade de área para 400 mL do inoculante, para os parâmetros tecnológicos não houve efeito da adubação nitrogenada e nem da inoculação com Azospirillum, a inoculação com Azospirillum e a adubação nitrogenada não implicaram em respostas nos teores de macro e micronutrientes em soqueira de CTC 20, a adubação nitrogenada e a inoculação não afetaram nos teores de clorofila da folha da cana-de-açúcar. / Sugarcane is one of the main crops on the national scene and has great importance in social, social and environmental factors. Nitrogen is an essential macronutrient for a plant and nitrogen fertilization is a very important management, but at the same time difficult to work due to its loss of soil and plant. Inoculation with the genus Azospirillum cana-of-coal may be an alternative capable of contributing to the sustainability of nitrogen fertilization and its better utilization. The objective of this work was to verify the advantages of the Azospirillum bacterium in the nitrogen fertilization in a sugar cane crop soya, in a nitrogen fertilization with the inoculation of the Azospirillum bacterium. The experiment was carried out in Porto Ferreira - SP, Brazil, in a randomized block design with 7 sessions (0 kg N / ha, 120 kg N / ha, 60 kg N / ha, 60 kg N / ha + 200 ml Azospirillum, 60 kg N / ha + 400 ml Azospirillum, 60 kg N / ha + 600 ml Azospirillum and 60 kg N / ha + 800 ml Azospirillum). Observations that were not necessary for nitrogen fertilization or for the Azospirillum foliar application in CTC 20 ratoon, only for the doses of Azospirillum, which were added to the nutrient solution of 400 mL of the inoculant, Nitrogenated Nitrogenated Nitrogenated Nitrogenated Nitrogenated Nitrogenated nitrogenous nitrogen in the nitrogenium nitrogen and nitrogliceric acid nitrogen nitrogen in the soil of nitrogliceric acid nitrogen and the inoculation nitrogen nitrogen chlorophyll of the leaf of the sugarcane.
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EFEITO CLÍNICO DO USO TÓPICO DE UNCARIA TOMENTOSAWILLD D.C.EM PACIENTES COM ESTOMATITE PROTÉTICA

Tay Chu Jon, Lidia Yileng 30 July 2013 (has links)
Submitted by Angela Maria de Oliveira (amolivei@uepg.br) on 2018-09-11T12:20:53Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Lidia Yileng.pdf: 2407431 bytes, checksum: 8e4f36ecd67d4196231ab479788b77c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-11T12:20:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Lidia Yileng.pdf: 2407431 bytes, checksum: 8e4f36ecd67d4196231ab479788b77c2 (MD5) Previous issue date: 2013-07-30 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / A Estomatite protética (EP) é uma doença inflamatória crônica que afeta usuários de prótese removível, sendo a Candida spp. o principal agente etiológico. Uncaria tomentosa, conhecida como unha de gato, é utilizada usualmente na medicina alternativa para o tratamento de diversas doenças. O propósito deste estudo clínico randomizado duplo cego foi determinar a eficácia de um gel de Uncaria tomentosa Willd D.C. contra a EP. Cinquenta pacientes portadores de EP foram distribuídos aleatoriamente em três grupos para receber tratamento contra a doença: grupo M: gel de miconazol 2% como controle positivo; grupo P: gel de hydroxietilcelulose (natrosol) como placebo; e grupo UT: gel de Uncaria tomentosa 2% como o grupo experimental. Os pacientes receberam uma bisnaga contendo o medicamento de acordo com o grupo e foram instruídos para aplicar o gel na base da prótese três vezes ao dia durante uma semana. Além disso, instruções sobre a higiene bucal e das próteses foram prescritas a todos os pacientes. Os pacientes foram avaliados inicialmente (dia 0), após uma semana de tratamento (dia 7) e uma semana após terminado o tratamento (dia 14). A efetividade do tratamento foi avaliada clinicamente pela utilização dos critérios de Newton para grau de EP. Além disso, exame micológico foi realizado contando as unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL) de amostras tomadas da mucosa do palato e da superfície interna da prótese. AsCandida spp.foram identificadas com o HiCrome Candida Agar e submetidas ao teste bioquímico Api 20 C AUX. Não houve diferença significativa entre os três grupos (p>0,05) segundo o teste estatístico Kruskal-Wallis e o teste de comparação múltipla de Dunn. Pôde-se observar clinicamente uma diminuição no grau de EP e na análise microbiológica redução significativa da contagem de UFC/mL, após uma semana de tratamento (p<0,05) a qual permaneceu semelhante após 14 dias (p>0,05) nos três grupos avaliados. Foi possível reconhecer C. albicans, C. tropicalis, C. glabrata e C. krusei encontradas nas amostras dos pacientes com EP. Pode-se concluirque o gel de Uncaria tomentosa teve o mesmo efeito que o agente antifúngico miconazol 2%. / Denture stomatitis is a chronic oral disease that affects denture wearers. It presents as an inflammatory reaction in denture-bearing patients, under maxillary prosthesis. Candida spp. has been reported as the principal etiological agent. Despite the existence of a great number of antifungal agents, treatment failure is observed frequently. Uncaria tomentosaWilld D.C., known as cat’s claw, is habitually used in alternative medicine for the treatment of several diseases. The aim of this clinical study was to determine the efficacy of Uncaria tomentosa gel against denture stomatitis (DS). Fifty patients with DS were randomly assigned into three groups to receive either 2% miconazole gel as a positive control (Group M) or 1.5% hydroxyethylcellulose (natrosol) as a placebo group (Group P) or 2% Uncaria tomentosa gel as the experimental group (Group UT). All patients received their treatment on admission and were told to apply the gel on the base of the denture three times a day for a period of 1 week. In addition, instructions for oral and denture hygiene were prescribed to all patients. DS level was registered initial (day 0), after 1 one week of treatment (day 7) and 7 days after treatment (day 14). The effectiveness of treatment was assessed clinically using Newton’s criteria for severity degree of DS; mycological examination was performed counting colony-forming units per milliliter (CFU/mL) from samples of the palatal mucosa and from the tissue surface or the upper denture. Candida spp. were identified with HiCrome Candida and submitted to the biochemical test API 20 C AUX. Results were statistically evaluated using Kruskal-Wallis test and Dunn’s multiple comparsion test. Clinically it was observed decrease in the severity of DS in all groups (p<0.05). At the mycological examination, significant reduction in number of CFU/ml after one week of treatment (p<0.05) which remained after 14 days (p>0.05) were found in the three groups with no significant difference among the three groups (p < 0.05). It was possible to identifyC. albicans, C. tropicalis, C. glabrata and C. krusei found on the samples of DS patients. Furthermore, it was observed that Uncaria tomentosa gel has the same effect as the antifungal agent.
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Estudo do efeito de microrganismos probióticos sobre Eimeria acervulina (Tyzzer, 1929) em frangos de corte / Study of the effect of probiotic microorganisms on Eimeria acervulina (Tyzzer, 1929) in broilers

Wagner Luiz da Costa Freitas 19 August 2011 (has links)
No presente trabalho avaliou-se o efeito antiparasitário de uma preparação probiótica constituída por quatro espécies de lactobacilos, L. casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 e L. acidophillus ATCC 4536, no tratamento da eimeriose aviária causada por Eimeria acervulina. Para tanto, foram utilizados 120 animais, da espécie Gallus gallus, machos, com 14 dias de idade, distribuídos em seis grupos, sendo o Grupo 1 constituído por animais tratados apenas com água e ração (controle negativo); Grupo 2 constituído por animais que receberam diariamente uma dose da preparação probiótica contendo 1x108 UFC/mL; Grupo 3 constituído por animais infectados experimentalmente com 2x105 oocistos esporulados de Eimeria acervulina (controle positivo) e Grupo 4 onde os animais receberam diariamente uma dose da preparação probiótica contendo 1x108 UFC/mL durante o período do experimento e após 7 dias do início do tratamento, foram infectados com 2x105 oocistos esporulados de E. acervulina; no Grupo 5 os animais foram infectados com 2x105 oocistos esporulados de E. acervulina e paralelamente receberam uma dose diária da preparação probiótica em estudo contendo 1x108 UFC/mL; no Grupo 6 os animais foram infectados com 2x105 oocistos esporulados de E. acervulina e após o surgimento dos sinais clínicos da infecção passaram a receber diariamente uma dose da preparação probiótica contendo 1x108 UFC/mL, até o final do experimento. Durante 28 dias, semanalmente, amostras de sangue e fezes foram coletadas para determinação de OoPG, testes bioquímicos e parâmetros zootécnicos. Exames de fezes foram realizados diariamente para se determinar os períodos pré-patente e patente do parasita, bem como o efeito da preparação probiótica no combate a infecção. Os resultados demonstraram que a preparação probiótica em estudo reduziu a infecção intestinal causada por Eimeria acervulina, contribuindo para o bem estar animal. Referente aos parâmetros bioquímicos verificou-se efeito significativo sobre o perfil lipídico no 4º dia pós infecção, não sendo observado diferenças significativas para os demais parâmetros. No tocante ao desempenho zootécnico, verificou-se que a preparação probiótica não resultou em diferenças significativas em relação ao ganho de peso, eficiência e conversão alimentar dos animais avaliados. / This study evaluated the antiparasitic effect of a probiotic preparation which consisted of four species of lactobacilli (Lactobacillus casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 and L. acidophilus ATCC 4536) in the treatment of eimeriosis in broilers caused by Eimeria acervulina. Therefore, during 28 days, 120 animals of Gallus gallus species, males, 14 days old, were distributed in six groups, as follow: Group 1 the animals received only feed and water \"ad libidum\" (negative control); Group 2 consisted of animals that received a daily dose of probiotic preparation which contained 1x108 CFU/mL; Group 3 the animals were experimentally infected with 2x105 oocysts of Eimeria acervulina (positive control); Group 4 the birds received a daily dose of probiotic preparation containing 1x108 CFU / mL during the experiment and after 7 days of the treatment beginning, these animals were infected with 2x105 oocysts of E. acervulina; Group 5 was composed by animals that were infected with 2x105 oocysts of the parasite and simultaneously received a daily dose of probiotic preparation containing 1x108 CFU / ml, Group 6 the animals were infected with 2x105 oocysts of E. acervulina and after clinical signs of infection were noticed, the birds were treated daily with a dose of the probiotic preparation containing 1x108 CFU / mL until the end of the experiment. During 28 days six blood and feces samples were collected and parameters such as oocyst elimination, histopathological, and biochemical were evaluated. Stool examinations were performed daily to determine the parasite prepatent and patent periods, and the probiotic effect on the infection. The results showed that the probiotic preparation under study reduced the intestinal infection caused by Eimeria acervulina, contributing to animal welfare. Regarding the biochemical parameters there was a significant effect on the lipid profile on the 4th day after infection, and no significant differences were observed for the other parameters. With regard to zootechnical performance, it was found that the probiotic preparation resulted in no significant differences in weight gain, and in feed conversion efficiency.
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Caracterização molecular de isolados de Sarcocystis spp. obtidos de fezes de marsupiais do gênero Didelphis pela análise de fragmentos gênicos de sequências codificadoras de antígenos de superfície dos parasitos / Molecular characterization of isolates of Sarcocystis spp. obtained from feces of opossums of the genus Didelphis by analysis of genes coding for surface antigens

Monteiro, Renata Molina 20 October 2011 (has links)
O objetivo deste trabalho foi desenhar primers, amplificar fragmentos de três loci que codificam antígenos de superfície de protozoários do gênero Sarcocystis spp. isolados do intestino de marsupiais do gênero Didelphis spp., sequenciar os fragmentos gênicos de todos isolados e compará-los entre si e com fragmentos de sequências homólogas disponíveis no GenBank. Trinta e duas amostras de Sarcocystis spp. de gambás do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, tiveram o DNA extraído e amplificado utilizando marcadores moleculares em genes codificadores de antígeno de superfície (SAG-2, SAG-3, e SAG-4). Entre essas amostras, 28 tiveram pelo menos um dos fragmentos gênicos sequenciados. Foi possível sequenciar os 3 fragmentos gênicos de 20 amostras. As análises das sequências dos genes renderam os seguintes resultados: SAG-2: 275 nucleotídeos e sete alelos para 26 amostras; SAG-3: 353 nucleotídeos e seis alelos para 21 amostras; SAG-4: 278 nucleotídeos e onze alelos para 25 amostras. Para cada marcador, análises filogenéticas foram realizadas empregando métodos de distância. As reconstruções filogenéticas permitiram verificar as relações de ancestralidade entre os diferentes alelos, que foram nomeados de acordo com o critério de evolução inferido na topologia das árvores. Para os três loci, diferentes alelos foram agrupados em três grupos ou genótipos, que foram nomeados com caracteres em números romanos I, II, III e IV. Diferenças intra-genótipo (sub-genótipos) foram representados por letras minúsculas (Ia, Ib, Ic, etc.). Cada alelo foi nomeado com numeração arábica (Ia1, Ia2, Ia3, etc.). Nas analises filogenéticas concatenadas baseada em dados de aminoácidos foi possível dividir as amostras dentro de três grupos. A filogenia baseada nas sequências de aminoácidos indica que três grupos de organismos devem existir dentro do complexo de indivíduos da população estudada (Sarcocystis-RS, Falcatula-like e Neurona-like). Embora o grupo designado como Sarcocystis-RS tenha um único alelo para o locus gênico SAG-3 (configuração do tipo III), táxons deste grupo compartilham alelos com indivíduos do grupo Falcatula-like. Assim, seria plausível assumir que exista uma troca gênica entre as duas populações. No que diz respeito ao grupo Neurona-like, nenhum dos indivíduos deste grupo compartilham alelos com indivíduos de outros grupos. No entanto, esta observação precisa ser confirmada, pois as análises foram baseadas em poucas sequências Neurona-like (duas sequências). Este relato revela uma notável diversidade genética entre os isolados de Sarcocystis spp de gambás do Brasil. / The present work aimed to design primers and amplify fragments of three loci that code for surface antigens of the protozoan genus Sarcocystis spp. isolated from intestine of marsupials of the genus Didelphis spp and to sequence the gene fragments of all isolates and compare them with each other and with fragments of homologous sequences available in GenBank. Thirty two samples of Sarcocystis spp. from opossums from the State of Rio Grande do Sul, had the nuclear DNA extracted and amplified using the molecular markers targeted to genes encoding surface antigens (SAG-2, SAG-3, and SAG-4). Among these samples, 28 had at least one of the gene fragments sequenced. It was possible to sequence the three gene fragments from 20 samples. The analysis of gene sequences yielded the following results: SAG-2: 275 nucleotides and seven alleles for 26 samples; SAG-3: 353 nucleotides and six alleles for 21 samples; SAG-4: 278 nucleotides and eleven alleles for 25 samples. For each marker phylogenetic analysis was performed employing distance methods. The phylogenetic reconstructions allowed us to verify the ancestry relationships between different alleles, which were named according to the criteria of evolution inferred from the tree topology. For the three loci, different alleles were grouped into three groups or genotypes, which were named with characters in Roman numerals I, II, III and IV. Intra-genotype differences (sub-genotypes) were represented by lowercase letters (Ia, Ib, Ic, etc.). Each allele was named with Arabic numerals (Ia1, Ia2, Ia3, etc.). With concatenated phylogenetic analysis based on amino acid dataset it was possible to divide the samples into three groups. The amino acid based phylogeny indicates that three groups of organisms must exist within the complex of individuals in the population studied (Sarcocystis-RS, Falcatula-like, and Neurona-like). Although the group designated as Sarcocystis-RS has a unique allele for the genetic locus SAG-3 (configuration type III), the taxa of this group share alleles with individuals in the Falcatula-like. Thus, it is plausible to assume that gene exchange occurs between these two populations. Regarding the Neurona-like group, none of the individuals in this group share alleles with individuals of the other groups. However, this observation remains to be confirmed, because this analysis was based on very few Neurona-like sequences (two sequences). This report reveals a striking genetic diversity among Sarcocystis spp isolated from opossums from Brazil.

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