Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-04-07T19:04:34Z No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_SharaReginadaSilva.pdf: 575472 bytes, checksum: 90fbdbc94aef7c2eb888b39541523483 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-04-07T19:08:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_SharaReginadaSilva.pdf: 575472 bytes, checksum: 90fbdbc94aef7c2eb888b39541523483 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-07T19:08:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_DIP_SharaReginadaSilva.pdf: 575472 bytes, checksum: 90fbdbc94aef7c2eb888b39541523483 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Rene Rachou / O presente trabalho avaliou a transmissibilidade de Leishmania spp. para Lutzomyia longipalpis em 136 cães nativos e beagles-sentinelas , vacinados ou não (placebo) com Leish- Tec ® (vacina anti-leishmaniose visceral canina), domiciliados em Porteirinha, município endêmico para leishmaniose visceral, em Minas Gerais. Esses animais foram selecionados a partir da amostra total de cães que compõem o ensaio clínico de fase III que determinou a eficácia da vacina Leish-Tec ® , conforme diretrizes estabelecida s pelo Ministério da Saúde do Brasil. Além da técnica de xenodiagnóstico, e sses cães também foram submetidos aos testes diagnósticos ELISA, RIFI, te ste rápido Kalazar Detect TM e exames de detecção do parasito. Uma tendência de redução da infectividade (p -valor 0,052) foi obser vada no grupo de cães vacinados com Leish-Tec ® que apresentaram resposta sorológi ca positiva ao antígeno vacinal A2. Os testes RIFI, Kalazar Detect TM e xenodiagnóstico apresentar am maior percentual de positividade entre os cães sintomáticos da amostra (p<0,05), quando comparados aos cães assintomáticos, na análise global. Na análise estr atificada e, para o grupo de cães que recebeu vacina, as diferenças se mantiveram para a RIFI e o teste rápido, mas não para o xenodiagnóstico; já para os cães que receberam pl acebo, as diferenças entre grupos clínicos se mantiveram para o xenodiagnóstico e teste rápido, mas não para a RIFI. Nossos resultados sugerem que a Leish-Tec ® possui potencial de redução da in fectividade em cães vacinados e desafiados em área endêmica e que a vacinação com Leish-Tec ® pode contribuir para a redução da transmissão da leishmaniose viscer al canina, desde que utilizada como medida protetiva individual e em conjunto com as dema is estratégias, individuais e coletivas, de prevenção e controle da doença. Com rel ação à diferença de desempenho dos testes diagnósticos entre grupos clínicos, nossos resultados apontam para a necessidade de desenvolvimento de testes mais eficazes no di agnóstico da infecção assintomática por Leishmania e demonstra que essas diferenças in terferem nos resultados e devem ser consideradas na avaliação de ensaios clínicos. / This study evaluated the transmission of Leishmania spp. to Lutzomyia longipalpis in 136 native and beagles sentinel dogs, vaccina ted or not (placebo) with Leish-Tec ® (canine visceral anti-leishmaniasis vaccine), domiciled in Port eirinha, visceral leishm aniasis endemic county in Minas Gerais, Brazil. These animals were sele cted from the total sample of dogs that make up the phase III clinical trial that determined the efficacy of Leish-Tec ® vaccine, according to guidelines established by Brazilia n Ministry of Health. Beside s the xenodiagnosis technique, these dogs were also subjected to the sorological tests ELI SA, IFAT, rapid test Kalazar Detect TM and parasite detection. A tendency of reduction of infectivity (p-value 0.052) was observed in the group of dogs vaccinated with Leish-Tec ® that presented positive serological response to the vaccine antig en A2. IFAT, Kalazar Detect TM and xenodiagnosis showed a higher percentage of positivity among symptomatic dogs (p <0.05) compared to asymptomatic dogs. In stratified analysis, and for the vaccine dogs group, differences remained for the IFAT and the rapid test, bu t not for xenodiagnosis; already for placebo dogs group, the differences between clinical groups re mained to xenodiagnosis and rapid test, but not for the IFAT. Our results suggest that the Leish-Tec ® has the potential to reduce the infectivity of vaccinated and challenged dogs in endemic areas and could contribute to the reduction of transmission of canine visceral le ishmaniasis, since used as an individual protective measure and together w ith other strategies, individual and collective, to prevent and control the disease. Regarding the performance difference of di agnostic tests between clinical groups, our results point to the need for developm ent of more effective tests in the diagnosis of asymptomatic Leishmania infection and shows that these di fferences affect the results and should be considered in ev aluating clinical trials.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde Coletiva, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-05-31T14:12:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 345984.pdf: 1577924 bytes, checksum: 5ad96cabec95e7350f5539d8023b8d8c (MD5) Previous issue date: 2016 / O objetivo desta tese é avaliar o impacto da vacina pneumocócica PCV10 (com os sorotipos 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F, 23F) na redução da taxa de internação e na taxa de mortalidade por pneumonia em crianças menores de cinco anos, em Santa Catarina, Brasil, considerando os quatro anos antes versus quatro anos após a introdução da vacina em 2010. Estudo ecológico, realizado com dados secundários dos Sistemas de Informações do SUS e do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística entre 2006-2014. Foram avaliadas as taxas de mortalidade e de internação hospitalar por pneumonia, relacionadas ao número de leitos, acesso a atenção básica, IDH e cobertura vacinal. Foi estimada a redução das internações e mortalidade em menores de 5 anos através da regressão multivariada de Poisson e o custo da vacina no estado. Os dados foram agrupados por município de residência e macrorregião. Esta pesquisa foi aprovada pelo comitê de ética em pesquisa da Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC) em março de 2014. No estado a taxa média de mortalidade por pneumonia em menores de cinco anos no período 2006-2009 versus 2011-2014 variou de 9,10 para 7,59 por cem mil habitantes, uma redução de 16,59%. Com relação às internações por pneumonia, na comparação entre o período anterior com o período posterior ao uso da vacina, a variação da taxa de internação por pneumonia em menores de um ano foi de 49,76%o para 38,19%o, uma redução de 23,25% e de 14,14%o para 12,96%o, uma redução de 8,35% em crianças de 1 a 4 anos em todo o estado. Sendo que a diferença percentual da taxa de internação por pneumonia em menores de 1 ano, variou de -44,10% na região Oeste a -1,35% no Planalto Serrano e entre as crianças de 1 a 4 anos de -37,05% no Planalto Norte a 16,88% no Planalto Serrano. A tendência temporal de redução da razão de taxas de internações por pneumonia ao longo dos nove anos é significativa nos menores de um ano para todas as regiões com exceção do Planalto Serrano. Com a introdução da vacina o custo médio avaliado com as internações por pneumonia e a PCV10 foi de R$ 151,89 por criança menor de cinco anos. As coberturas vacinais com a PCV10, apesar de heterogêneas entre os municípios, são de aproximadamente 95% nos anos de 2011 a 2014 e inferiores a 60% no ano da sua da implantação (2010), ano esse em que apenas 3,41% dos municípios alcançaram coberturas de 95% ou mais. Foi possível identificar também que um aumento de 10% nas coberturas vacinais permite uma redução de 3% na razão das taxas de internação por pneumonia. Portanto, observou-se uma redução significativa da taxa de mortalidade e internação por pneumonia em menores de um ano, sugerindo a efetividade da vacina, nos cinco anos após a inclusão da PCV10 no calendário vacinal do Programa Nacional de Imunização, em Santa Catarina, Brasil.<br> / Abstract : The objective of this study is evaluate the impact of pneumococcal vaccine PCV10 (serotypes 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F, 23F) in reducing hospitalization rates and mortalidade rate for pneumonia in children under five years in Santa Catarina, Brazil, considering the four years prior versus four years after the vaccine introduction in 2010. Ecological study with secondary data from information systems of SUS and the Brazilian Institute of Geography and Statistics in 2006 to 2014. This study evaluated mortality rates and hospitalization for pneumonia, related the number of beds, access to primary care, HDI and immunization coverage. Estimated the reduction in hospitalizations and mortality in children under 5 years by multivariate Poisson regression and cost of the vaccine; using data from Municipality of residence and macro-region. The Ethics Committee in Research of the Federal University of Santa Catarina (UFSC) approved this study in March 2014. The rate of mortality from pneumonia in children under five years in the period 2006-2009 versus 2011-2014 decreased from 9.10 to 7.59%ooo, reduction of 16.59%. With regard to hospitalizations for pneumonia, in the comparison between the previous period and the period after the vaccine use, the variation in hospitalization rate for pneumonia in children under one year was 49.76%o, to 38.19%o, one reduction of 23.25% and from 14.14%o to 12.96%o, a reduction of 8.35% in children of 1 to 4 years. The difference in hospitalization rate for pneumonia in children under 1 year of age ranged from -44.10% in the 0este to -1.35% in the Planalto Serrano, and among children aged 1 to 4 years -37, 05% in the Planalto Norte to 16.88% in the Planalto Serrano. Time trend of reduction rates ratio of hospitalizations for pneumonia over the nine years is significant under one year for all regions except the Planalto Serrano. With the introduction of the vaccine the average estimated cost of hospitalization for pneumonia and PCV10 was R$ 151.89 per child under five years. Vaccination coverage with PCV10, although heterogeneous among municipalities are approximately 95% in the years 2011-2014 and below 60% in the year of the implementation (2010), this year, only 3.41% municipalities reached 95% coverage or more. It was determined that an increase of 10% in vaccination coverage allows a 3% reduction in the rates ratio of pneumonia hospitalization. Therefore, there was a significant reduction in mortality and hospitalization for pneumonia in children under one year, suggesting the effectiveness of the vaccine in the five years after the inclusion of PCV10 in the immunization schedule of the National Immunization Program in Santa Catarina, Brazil.

Os papilomavírus constituem uma extensa família de vírus associados a lesões epiteliotrópicas, assim como acometem o tecido mucoso onde podem causar tumores benignos que podem evoluir para a malignização. A papilomatose bovina é uma doença economicamente relevante, já que há a desvalorização dos animais a serem comercializados devido à aparência e depreciação do couro. Em humanos, a identificação dos tipos de papilomavírus (HPV) envolvidos bem como o relato de co-infecções são bem estabelecidos. Já foram descritos na literatura mais de 200 tipos de HPVs, o que ainda é pouco explorado na área da Medicina Veterinária, em que somente 21 tipos de papilomavírus bovino (BPV) foram caracterizados até o momento. A presente dissertação visou investigar a diversidade de BPV presentes em um papiloma de um bovino oriundo do Estado de Rondônia. A partir do DNA extraído da lesão, foi realizada a rooling circle amplification (RCA) seguida do sequenciamento de última geração (Ilumina MiSeq). O emprego dessas metodologias culminou na identificação do BPV13, que atualmente é bem caracterizado, e de três prováveis novos tipos de BPVs que haviam sido descritos em um único estudo recente. Estes resultados confirmam a presença de co-infecção em lesões de papilomatose bovina e demonstram que estas técnicas possibilitaram a detecção de espécies que não são identificadas pelos métodos convencionais. Este conhecimento sobre a diversidade de BPV servirá de base para o melhor entendimento da biologia do vírus e para a geração de vacinas profiláticas ou terapêuticas eficazes. / Papillomaviruses are an extensive family of viruses associated with epitheliotropic lesions, as well as affecting mucosal tissue where they can cause benign tumors that may progress to malignancy. Bovine papillomatosis is an economically relevant disease, since there is a devaluation of the animals to be marketed due to the appearance and depreciation of the leather. In humans, the identification of the types of papillomavirus (HPV) involved as well as the reporting of co-infections is well established. More than 200 types of HPV have been described in the literature, which is still little explored in the area of Veterinary Medicine, in which only 21 types of bovine papillomavirus (BPV) have been characterized. This study aimed to investigate the diversity of BPV present in a papilloma of a bovine animal from the State of Rondônia. From the DNA extracted from the lesion, the rooling circle amplification (RCA) was performed followed by the last generation sequencing (Ilumina MiSeq). The use of these methodologies culminated in the identification of BPV13, which is currently well characterized, and of three putative new BPVs types that had been described in a single recent study. These results confirm the presence of co-infection in bovine papillomatosis lesions and demonstrate that these techniques enabled the detection of species that are not identified by conventional methods. This knowledge on BPV diversity will serve as a basis for a better understanding of the biology of the virus and for the generation of effective prophylactic or therapeutic vaccines.

Orientador: Angelo Berchieri Júnior / Coorientador: Rafael Antônio Casarin Penha Filho / Banca: Oliveiro Caetano de Freitas Neto / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Nilce Maria Soares / Banca: Ricardo de Albuquerque / Resumo: Salmonella constitui-se em um gênero de bactérias amplamente distribuídas na natureza que podem infectar seres humanos, aves, peixes, répteis e mamíferos, e causam doenças em animais e seres humanos. Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG) é o agente etiológico do tifo aviário (TA). Este biovar é hospedeiro-específico de aves e se diferencia de outros sorovares por ser imóvel, causando uma doença septicêmica aguda, com alta taxa de morbidade e mortalidade, que afeta animais adultos, mas é muito patogênico para aves de qualquer idade e também um motivo de preocupação para a avicultura industrial, causando mortalidade que pode chegar a 80%. Programas de monitoramento baseado em testes sorológicos e bacteriológicos para controlar a disseminação desta bactéria e medidas de biossegurança são importantes, para o controle do tifo aviário. A vacinação é uma importante medida que pode ser aplicada como parte de um programa de biossegurança. Neste trabalho, as aves para postura comercial dos grupos A, B e C foram vacinadas com duas doses da estirpe atenuada de Salmonella Gallinarum cobS-cbiA- (SGcobS-cbiA-) e desafiadas na 16ª semana de vida com uma estirpe patogênica de SG (SG287/91). As aves dos grupos E e F foram vacinadas com três doses da estirpe SGcobS-cbiA- e desafiadas na 20ª semana de vida com a estirpe patogênica SG287/91. A mortalidade das aves vacinadas e de aves não-vacinadas foi observada após o desafio. Notou-se redução significativa nas taxas de mortalidade em todos os grupos de aves vacinadas com duas ou três doses da vacina viva, em relação às aves não vacinadas. Foi demonstrado uma forte proteção vacinal contra o tifo aviário em um modelo experimental que pode ser aplicado em aves comerciais à campo, complementando estudos prévios com a estirpe vacinal SGcobS-cbiA- / Abstract: Salmonella is a genus of bacteria widely distributed in nature that can infect poultry, humans, fishes, reptiles and mammals in general and often causes diseases in animals and humans. Fowl typhoid (FT) is the etiologic agent of Salmonella enterica serovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG). This non-motile biovar is host-specific and highly adapted to infect birds, causing an acute septicemic disease with high morbidity and mortality, which is very pathogenic to birds of any age, including adult birds and also a cause of concern for the poultry industry, causing mortality that can reach 80%. Monitoring program based on serological and bacteriological tests to prevent infection or to control the spread of the agent and biosecurity measures are important for the control of fowl typhoid. Vaccination is an important measure, which can be used as part of a global biosecurity. In the present work, commercial brown layer-hens in groups A, B, C and D were vaccinated twice with strain Salmonella Gallinarum ΔcobSΔcbiA (SGcobS-cbiA-) and challenged at 16th week of life with a pathogenic strain of SG (SG297/91). Layers in groups E, F and G were vaccinated with three doses of SGcobS-cbiA- and challenged at 20th week of life with a pathogenic strain SG287/91. The mortality rate was observed after challenge in all groups. It was observed the significant reduction of the mortality rate in all groups of vaccinated layer-hens with two and three doses of SGcobS-cbiA-, complementing previous studies / Doutor

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2016-04-13T19:14:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Nataly Stegmiller.pdf: 969971 bytes, checksum: 56211b8da0204ded63a6d90ae86998e6 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-05-17T16:02:43Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Nataly Stegmiller.pdf: 969971 bytes, checksum: 56211b8da0204ded63a6d90ae86998e6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T16:02:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Nataly Stegmiller.pdf: 969971 bytes, checksum: 56211b8da0204ded63a6d90ae86998e6 (MD5) / CAPES / A mastite é uma enfermidade da glândula mamária que se caracteriza por um processo inflamatório, quase sempre decorrente da presença de microrganismos infecciosos. É considerada a principal causa de perdas econômicas relacionadas à prática leiteira, já que interfere diretamente na função do órgão, diminuindo de 15-20% a produção láctea/animal. Dentre os microrganismos identificados como causadores da mastite, bactérias da espécie Staphylococcus aureus são as mais comumente relacionadas, sendo responsáveis por mais de 91% dos casos. O surgimento de cepas droga-resistentes associado a grande toxicidade do tratamento, imprime a necessidade do desenvolvimento de uma vacina efetiva, segura e barata, que possa ser utilizada como medida preventiva contra a mastite. Por esse motivo, objetivamos o desenvolvimento de uma vacina composta por antígenos totais de S. aureus (SaAg), administrada por via intranasal ou intramuscular, contra a mastite experimental. O preparo da vacina foi realizado a partir da cultura de uma cepa de S. aureus isolada de glândula mamária bovina, caracterizada molecularmente e submetida a 15 ciclos de congelamento e descongelamento lento. Camundongos BALB/c, foram vacinados pelas vias intranasal ou intramuscular com SaAg (50 g/mL) em 2 doses intervaladas por 15 dias, para avaliação da biocompatibilidade e imunogenicidade. Os sinais clínicos foram monitorados por 72 horas após cada dose, onde se observou alterações comportamentais e físicas, com intensa resposta inflamatória nos animais vacinados por via intramuscular. Não foram observadas diferenças nos níveis de transaminases e creatinina entre os grupos vacinados por via nasal ou intramuscular em comparação com o controle. Além disso, foi verificado um aumento significativo das respostas linfoproliferativas dos animais vacinados em relação aos controles. Animais vacinados por via intranasal apresentaram maiores porcentagens de linfócitos TCD4+ e TCD8+ produtores de IFN-γ quando comparados aos demais grupos, o que não foi verificado na avaliação da produção de citocinas utilizando o sobrenadante das culuras estimuladas com SaAg in vitro. De forma diferente, animais vacinados por via intramuscular apresentaram maiores porcentagens de linfócitos TCD4+ e TCD8+ produtores de IL-10, quando comparados aos demais grupos, bem como produziram maiores níveis de IFN-γ nos sobrenadantes de cultura reestimulados, quando comparados aos grupos controle ou vacinados por via intranasal. Na avaliação da resposta imune humoral, significativos níveis de IgG2a foram relacionados à vacinação intranasal, quando comparados aos demais grupos. Além disso, animais vacinados por via intranasal ou intramuscular apresentaram semelhantes níveis de IgG1, porém, significativamente maiores que os animais controle. Dessa forma, nossos resultados demonstram a viabilidade do uso da vacina SaAg, administrada pelas vias intramuscular e intranasal, como um potencial agente profilático contra a mastite causada por S. aureus. / Mastitis is a disease of the mammary gland characterized by an inflammatory process, often due to the infectious microorganisms presence. It is considered the main cause of economic losses related to dairy practice, as it can act directly in the organ function, decreasing to 15-20% milk/animal production. Among the microorganisms identified as causing the mastitis, Staphylococcus aureus bacteria species are the most common, accounting for over 91% of mastitis cases. The emergence of drug-resistant strains associated with high toxicity of the treatment, prints the need to develop an effective, inexpensive and safe vaccine that could be used as a preventive measure against mastitis. In this work, we aimed to develop a vaccine produced with total antigen of S. aureus (SaAg) and intranasaly or intramuscularly given against experimental mastitis. The vaccine preparation was done using a S. aureus strain isolated from bovine mammary gland, followed of 15 slow freezing /thawing cycles. BALB/c mice were vaccinated by intranasal or intramuscular route with 2 doses of SaAg (50μg/animal) followed of biocompatibility and immunogenicity evaluation 72 hours after each dose. Intramuscular vaccinated mice showed behavioral and physical changes. No differences of transaminases and creatinine levels were observed in the vaccinated groups as compared to unvaccinated animals, different from observed in the lymphoproliferative responses. Intranasal vaccinated mice presented significant percentage increase of CD4+ and CD8+ IFN-γ producer’s when compared to intramuscular or unvaccinated groups. By the other hand, mice vaccinated by intramuscular route showed a increase of CD4+ and CD8+ T cells producers percentage also supernatant cytokine production (Il-10 and IFN- γ) after SaAg in vitro recall, when compared to intramuscular vaccinated animals or unvaccinated. The Intranasal vaccination induced a significant increase of IgG2a levels and decreased IgG1 production when compared to control or intramuscular vaccinated groups. Thus, our results demonstrate the feasibility of SaAg vaccine, given by intramuscular and intranasal routes, as a potential prophylactic agent against mastitis caused by S. aureus.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:10Z : No. of bitstreams: 1 000845404_20200101.pdf: 177356 bytes, checksum: 9ad739f545c33b71a2af66d49b9e0377 (MD5) / A preocupação da indústria avícola em manter altos índices de produtividade e de segurança dos alimentos fez com que surgissem ações preventivas a fim de evitar a introdução de patógenos no sistema avícola. O uso de gentamicina associada à vacinação in ovo tem sido amplamente utilizada com essa finalidade. Neste particular, são escassas as informações disponíveis na literatura acerca da segurança clínica e alimentar da gentamicina quando aplicada in ovo. Diante disto, dois experimentos foram conduzidos para avaliar o efeito da administração da gentamicina em ovos de reprodutoras pesadas nos parâmetros físicos, hematológicos e bioquímicos, e também a permanência desse antimicrobiano nos tecidos de frangos de corte. No primeiro estudo, foram utilizados 200 ovos de matrizes da linhagem Cobb e, aos 18 dias de incubação, 100 ovos receberam apenas a vacina contra a doença de Marek (GC) e os outros 100 receberam a vacina juntamente com 0,22mg/ovo de sulfato de gentamicina (GT). Após o nascimento (D0), foram realizados exames físicos nos momentos D+3, D+6, D+10, D+14 e D+21 (3, 6, 10, 14 e 21 dias após o nascimento, respectivamente), assim como exames complementares em D+6, D+10, D+14 e D+21. Os parâmetros físicos compreenderam pesagem, avaliação da condição corpórea, comportamento, postura/marcha, respiração, apetite, excretas, penas e pele, bem como sinais de intoxicação. Quanto aos parâmetros laboratoriais, foram determinados o hemograma completo e as provas bioquímicas séricas [ureia, ácido úrico, aspartato aminotransferase, alanina aminotransferase (ALT), gama glutamiltransferase (GGT), creatina quinase, albumina e proteínas plasmáticas totais]. Os resultados foram submetidos à análise estatística por meio do procedimento general Linear Models (GLM) do SAS com pós-teste de Tukey, considerando o nível de significância de 5%. Em ambos os grupos, todas as aves se apresentaram saudáveis... / The concern of the poultry industry to maintain high levels of productivity and food security has spurred preventive actions in order to prevent the introduction of pathogens in the poultry system. The use of gentamicin associated with in ovo vaccination has been widely used for this purpose. In particular, there is little information available in the literature about the clinical and food safety of gentamicin when applied in ovo. Given this, two experiments were conducted to evaluate the effect of the administration of gentamicin in eggs of breeders in physical, hematological and biochemical parameters, as well as the permanence of this antimicrobial in broiler tissues. In the first study, 200 eggs of Cobb arrays were used and, in the 18th day of incubation, 100 eggs received only vaccination against Marek's disease (CG) and the other 100 received the vaccine with 0.22mg/egg of gentamicin sulfate (GT). After the birth (D0), physical examinations were performed at times D+3, D+6, D+10, D+14 and D+21 (3, 6, 10, 14 and 21 days after birth, respectively), as well as additional tests on D+6, D+10, D+14 to D+21. The physical parameters covered weighing, evaluation of body condition, behavior, posture/gait, breathing, appetite, feces, feathers and skin, as well as signs of intoxication. As for the laboratory parameters, the complete blood count and serum biochemical tests [urea, uric acid, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT), creatine kinase, albumin and total plasma proteins] were determined. The results were statistically analyzed using the General Linear Models Procedure (GLM) of SAS with Tukey's test, with a significance level of 5%. In both groups, all birds showed healthy throughout the study and the average body weight was not significantly different between GC and GT. In the complete blood count, despite variations within the same treatment, no significant differences between ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-13Bitstream added on 2014-06-13T18:07:34Z : No. of bitstreams: 1 000749249.pdf: 1046785 bytes, checksum: 980862971c09d4a3a9559d7967701c51 (MD5) / Salmonella constitui-se em um gênero de bactérias amplamente distribuídas na natureza que podem infectar seres humanos, aves, peixes, répteis e mamíferos, e causam doenças em animais e seres humanos. Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG) é o agente etiológico do tifo aviário (TA). Este biovar é hospedeiro-específico de aves e se diferencia de outros sorovares por ser imóvel, causando uma doença septicêmica aguda, com alta taxa de morbidade e mortalidade, que afeta animais adultos, mas é muito patogênico para aves de qualquer idade e também um motivo de preocupação para a avicultura industrial, causando mortalidade que pode chegar a 80%. Programas de monitoramento baseado em testes sorológicos e bacteriológicos para controlar a disseminação desta bactéria e medidas de biossegurança são importantes, para o controle do tifo aviário. A vacinação é uma importante medida que pode ser aplicada como parte de um programa de biossegurança. Neste trabalho, as aves para postura comercial dos grupos A, B e C foram vacinadas com duas doses da estirpe atenuada de Salmonella Gallinarum cobS-cbiA- (SGcobS-cbiA-) e desafiadas na 16ª semana de vida com uma estirpe patogênica de SG (SG287/91). As aves dos grupos E e F foram vacinadas com três doses da estirpe SGcobS-cbiA- e desafiadas na 20ª semana de vida com a estirpe patogênica SG287/91. A mortalidade das aves vacinadas e de aves não-vacinadas foi observada após o desafio. Notou-se redução significativa nas taxas de mortalidade em todos os grupos de aves vacinadas com duas ou três doses da vacina viva, em relação às aves não vacinadas. Foi demonstrado uma forte proteção vacinal contra o tifo aviário em um modelo experimental que pode ser aplicado em aves comerciais à campo, complementando estudos prévios com a estirpe vacinal SGcobS-cbiA- / Salmonella is a genus of bacteria widely distributed in nature that can infect poultry, humans, fishes, reptiles and mammals in general and often causes diseases in animals and humans. Fowl typhoid (FT) is the etiologic agent of Salmonella enterica serovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG). This non-motile biovar is host-specific and highly adapted to infect birds, causing an acute septicemic disease with high morbidity and mortality, which is very pathogenic to birds of any age, including adult birds and also a cause of concern for the poultry industry, causing mortality that can reach 80%. Monitoring program based on serological and bacteriological tests to prevent infection or to control the spread of the agent and biosecurity measures are important for the control of fowl typhoid. Vaccination is an important measure, which can be used as part of a global biosecurity. In the present work, commercial brown layer-hens in groups A, B, C and D were vaccinated twice with strain Salmonella Gallinarum ΔcobSΔcbiA (SGcobS-cbiA-) and challenged at 16th week of life with a pathogenic strain of SG (SG297/91). Layers in groups E, F and G were vaccinated with three doses of SGcobS-cbiA- and challenged at 20th week of life with a pathogenic strain SG287/91. The mortality rate was observed after challenge in all groups. It was observed the significant reduction of the mortality rate in all groups of vaccinated layer-hens with two and three doses of SGcobS-cbiA-, complementing previous studies

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:25Z : No. of bitstreams: 1 000829940.pdf: 916653 bytes, checksum: 09926f007a66538b3dedd4cb298c6c6a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / We have recently observed that treatment of colon tumor cells with low concentration of paclitaxel increased the expression of several genes associated with antigen-presenting machinery. Since 5-fluoruracil (5-FU) is the main antineoplastic agent for colon cancer, in this study we aimed to evaluate immunomodulatory properties analyzing: a) if the DC transfection with drug-treated tumor cells RNA, enhances the effectiveness of DC-based vaccine; b) if the modulatory effects of vaccine can be observed in vivo, and c) if the combination of DC with low dose chemotherapy schedule improves the antitumor responsiveness. To achieve these goals s.c. MC-38 bearing C57/Bl-6 mice were treated with DC sensitized with RNA from tumor cells pre-treated with the minimum effective concentration (MEC) of 5-fluorouracil. Our results of studies show that vaccination with tumor RNA-transfected DC delays the tumor growth, increases the percentage of CD86+ (35%) CD40+ (63%) and MHC class II+ (47%) DC and significantly increases the in vitro production of IFN-ɣ. These results suggest that treatment of tumor cells with 5-FU induces transcriptional changes that can be transfered to DC by RNA transfection, enhancing their ability to stimulate the antitumor response / CNPq: 555857/2010-07 / FAPESP: 2009/18331-8

Resumo não disponível

Orientador: Alexandrina Sartori / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Virmondes Rodrigues / Resumo: A necessidade de uma vacina mais segura e eficaz para a profilaxia da tuberculose (TB) e consenso na comunidade cientifica. A vacina genica contendo o gene da proteina de choque termico de 65 KDa (hsp65) do Mycobacterium leprae, e denominada pVAXhsp65, vem sendo investigada no Brasil. Esta vacina induz imunidade protetora contra a TB experimental em camundongos e cobaias. Como o gene desta vacina codifica uma proteina altamente conservada, existe a preocupacao de que a mesma induza autoimunidade. O objetivo deste trabalho foi, portanto, investigar se esta vacina modula o desenvolvimento da encefalite autoimune experimental (EAE), que e um modelo para estudo de Esclerose Multipla. Esta investigacao foi feita em tres etapas: padronizacao da EAE em ratos Lewis, caracterizacao da resposta imune induzida pela vacina pVAXhsp65 nestes animais e, finalmente, avaliacao do efeito desta vacina nas caracteristicas clinicas e imunologicas da EAE induzida nestes animais. Ratos Lewis femeas imunizados no coxim plantar com 50 Êg de mielina, associada ao Adjuvante Completo de Freund, desenvolveram doenca tipica, caracterizada por perda acentuada de peso, escore clinico elevado e alta producao de IFN-Á e TNF-¿. A imunizacao dos animais com 3 doses de pVAXhsp65 por via intramuscular nao desencadeou resposta imune humoral, entretanto, induziu resposta imune celular, caracterizada pela producao de IFN-Á por celulas esplenicas. Animais previamente vacinados desenvolveram EAE com caracteristicas clinicas e imunologicas similares as observadas em animais nao vacinados. Portanto, este trabalho permitiu padronizar de forma satisfatoria a EAE em ratos Lewis o que permitira a utilizacao deste modelo em futuras investigacoes. Alem disso, constatamos que a imunizacao destes animais com DNAhsp65 nao alterou o desenvolvimento tipico da EAE, ou seja, esta doenca nao se manifestou de forma mais grave ou branda. / Abstract: The development of an effective tuberculosis (TB) vaccine is an urgent priority. A genetic vaccine containing the heat shock protein (hsp65) gene from Mycobacterium leprae (pVAXhsp65) showed prophylactic and therapeutic activity in experimental TB. As anti-hsp65 immune response is present in both, multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), it is important to evaluate if pVAXhsp65 immunization affects EAE development. To test this possibility we first optimized EAE development in female Lewis rats. The best procedure included immunization in the footpad with 50 ìg of myelin associated with Complete Freund Adjuvant. This triggered a typical disease, characterized by significant weight loss, high clinical scores and elevated IFN-ã and TNF-á production. Immunization with pVAXhsp65 induced immune response characterized by absence of anti-hsp65 antibodies but significant IFN-ã production by splenic cells stimulated with recombinant rhsp65. Animals previously immunized with pVAXhsp65 developed an EAE with weight loss, clinical score and immune response very similar to non-immunized rats. This investigation allowed the optimization of a very promising model of multiple sclerosis that will benefit other research projects in our laboratory. In addition, these results showed that immunization of Lewis rats with pVAXhsp65 did not exacerbate or delay EAE development. / Mestre