Um total de 8.961 amostras fecais coletadas de pacientes com diarréia aguda, no período de 1996 a 2006, no Estado de São Paulo foi testado para rotavírus por EIE. Destas, 20,0% foram positivas e posteriormente realizadas a caracterização dos rotavírus em genótipos G e P por nested RT-PCR. O genótipo G1 de rotavírus foi o mais freqüente, detectado em 35,2% das amostras, seguidos dos tipos G9, G2, G3, G4, infecção mista e G12. A associação mais freqüente foi a P[8]G1 e P[8]G9. Foi realizada a sequencia nucleotídica do gene 9 (VP7) de 38 rotavirus genótipo G1. Duas cepas foram analisadas dos anos de 1997, 1998, 2001 e 2002, três cepas dos anos 1996, 1999 e 2003, quatro cepas em 2000, sete cepas em 2004 e 2005, e cinco em 2006. Os 38 rotavírus G1 foram classificados em duas linhagens distintas, linhagem G1-I e linhagem G1-II. A linhagem G1-I foi detectada durante seis anos, 1996-1997, 2001-2002 e 2004-2006, e a linhagem G1-II foi detectada durante os anos de 1998-2001, e 2003-2005. Análises preliminares mostraram que Rotarix ® foi eficiente contra estas linhagens G1. / Rotavirus (RV) infections are recognized as a major cause of severe gastroenteritis in children worldwide. In March 2006, a monovalente P[8]G1, human RV vaccine (Rotarix® GlaxoSmithKline Biologicals) was introduced in Brazil into the routine childhood immunization schedule. Therefore, the study of genetic diversity among rotavirus strains before and after the introduction of this vaccine may be important for the development of vaccination strategies. A total of 8,961 fecal samples collected from patients with acute diarrhea, during the 11-year period surveillance in São Paulo State (1996 to 2006) were tested for rotavirus by ELISA. One thousand seven hundred eighty- four (1,784, 20.0%) were positive, and the characterization of the G and P genotypes was performed on 1,300 rotavirus samples by nested RT-PCR. The G1 type was the most prevalent rotavirus strain (35.2%). The second most prevalente was the G9 type (31.2%), followed by G2 (4.0%), G3 (3.5%), G4 (2.2%), mix infection (1.8%) and G12 (0.5%). The more frequent association was P[8]G1 and P[8]G9. We performed a sequence analysis of 38 P[8]G1 rotavirus strains, selected from a total of 341 P[8]G1.Two strains from 1997, 1998, 2001, and 2002 were analyzed; three strains from 1996, 1999, and 2003; four strains from 2000; seven strains from 2004, and 2005; and five strains from 2006. All 38 rotavirus G1 sequence in this study were found to be classified into two distinct lineages, lineage I with 44.7% (17/38) and lineage II with 55.3% (21/38). The G1I lineages were detected during six rotavirus seasons 1996-1997, 2001- 2002, and 2004-2006 whereas and lineage G1- II was detected during 1998-2001, and 2003-2005. Preliminary analyses 4 demonstrated that Rotarix® has been efficacious against these G1 lineages.

O objetivo deste trabalho foi a construção de linhagens geneticamente modificadas de B. subtilis capazes de expressar porções de intimina, principal componente envolvido na capacidade de colonização de linhagens enteropatogênicas de Escherichia coli (EPEC), como estratégia vacinal de administração oral contra diarréias infecciosas. As vacinas desenvolvidas empregaram cinco regiões da intimina de EPEC e linhagens de B. subtilis capazes de expressar e acumular proteínas recombinantes no citoplasma. Além disso, avaliamos o uso de esporos e células vegetativas como veículos vacinais para a entrega de antígenos recombinantes a partir de sistema de expressão epissomal. A eficácia do modelo vacinal foi demonstrada pela: (i) produção de anticorpos sistêmicos (IgG) e secretados (sIgA) contra intimina, (ii) capacidade de neutralização das intiminas expressas por diferentes linhagens de EPEC pelos anticorpos específicos gerados nos animais imunizados; e (iii) proteção a desafio com linhagens de EPEC a partir de modelo experimental que emprega camundongos recém-nascidos. Os resultados representam uma etapa importante na validação de uma nova estratégia vacinal para o controle de patógenos entéricos. Além disto, propomos a utilização de um modelo animal como uma nova ferramenta para se avaliar o potencial protetor de vacinas contra EPEC. / The objective of this work was the construction of genetically modified strains of B. subtilis able to express portions of intimin, the main component involved in colonization by enteropathogenic Escherichia coli strains (EPEC) as a strategy of oral vaccination against infectious diarrhea. The vaccines employed five regions of EPEC intimin and B. subtilis strains expressing recombinant proteins in the cytoplasm. Furthermore, we evaluated the use of spores and vegetative cells as vaccine vehicles for the delivery of recombinant antigens based on an epissomal expression system. The efficacy of the vaccines was demonstrated by: (i) production of systemic (IgG) and mucosal (sIgA) antibody responses to intimin, (ii) neutralizing of intimin expressed by different strains of EPEC by the antibodies generated in immunized animals, and (iii) protection to lethal challenges carried out with EPEC strains using an experimental model based in newborn mice. The results represent an important step in the validation of a new vaccine strategy for the control of enteric pathogens. Moreover, we propose the use of an animal model as a new tool to evaluate the protective potential of vaccines against EPEC.

Made available in DSpace on 2015-05-08T14:47:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArquivoTotalIvna.pdf: 1194394 bytes, checksum: c16dde04067bb292fafdf46496f5ea31 (MD5) Previous issue date: 2013-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Immunization is a strategy of excellence in decreasing infant morbidity and mortality for immunopreventable diseases. The National Immunization Program is responsible for the standardization of the procedures to be adopted in the cold chain which aims to ensure the quality of immunobiological, keeping them at a temperature between +2 ° and +8 ° C. This study aimed to evaluate of local cold network of Family Health Units from Sanitary District III of the public health network in the city of João Pessoa - PB. This is a descriptive study with a quantitative approach, of normative-evaluative type, the items applied were: general aspects of vaccination room and cold network from the Supervision s Instrument of Immunization Rooms (PAISSV version 2.0, 2004) in 23 May and June 2012. Data were tabulated and analyzed using descriptive statistics. As a parameter for quality evaluation, 51 items were selected, where the positive responses obtained weight "1" and the negative "0", with subsequent summation of points and ranked according to a given score. The quality of cold network was evaluated between good and regular. It was found that 95,7% nursing technicians have training in vaccine, but 73.9% did not receive training in cold chain. In regards to the vaccination rooms: 30.4% were not exclusive to vaccination, 78.3% did not have adequate size and there was no protection against direct sunlight in 47.8% of the rooms, moreover, 95.7% had no air conditioning system. So, there is need on structural improvement in the local cold chain in intent to achieve the regulations established by the Health Ministry as well as systematic implementation of permanent education for professionals who work in the vaccination rooms. / O Programa Nacional de Imunização é o responsável pela normatização dos procedimentos a serem adotados na Rede de Frio, a qual tem como objetivo assegurar que todos os imunobiológicos oferecidos à população mantenham suas características iniciais, a fim de conferir imunidade, de forma segura para a população. Este estudo avaliou o serviço da Rede de Frio local do Distrito Sanitário III da rede pública de saúde do município João Pessoa PB. Trata-se de um estudo com abordagem quantitativa, descritivo, do tipo avaliativo-normativo; para avaliação da rede de frio, utilizou-se o instrumento do Programa de Avaliação do Instrumento de Supervisão de Salas de Vacinação (PAISSV versão 2.0, 2004). Participaram da pesquisa 23 salas de vacina das Unidades Isoladas de Saúde da Família do Distrito Sanitário III do município de João Pessoa. A coleta foi realizada, após aprovação pelo Comitê de Ética e Pesquisa do Centro de Ciências da Saúde da Universidade Federal da Paraíba entre maio e junho de 2012, utilizando os itens aspectos gerais da sala de vacina e rede de frio do questionário do PAISSV. Os dados foram tabulados e analisados no Programa Statistical Package Social Science 18.0 e analisados de forma quantitativa, utilizando estatística descritiva. Nas salas de vacina existem técnicos de enfermagem trabalhando sem capacitação específica; a estrutura física carece de manutenção e adequações para atender às normas; a temperatura do ambiente é inadequada; os refrigeradores mantêm boa manutenção, organização e registro da temperatura interna. Há necessidade implantação sistematizada da educação permanente e contínua para capacitar e atualizar os profissionais, assim como na melhoria estrutural da Rede de Frio Local a fim de atender às normativas preconizadas pelo Ministério da Saúde.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:10:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreaDM_DISSERT.pdf: 1136289 bytes, checksum: 4971fd9b2aab3f08935061c736892689 (MD5) Previous issue date: 2010-03-31 / Toxoplasmosis is one zoonosis caused by Toxoplasma gondii protozoan. Goats, amongst the production animals, are one of the species most susceptible to this parasite, being one them main involved agents in ovine and goat abortions, determining great economic losses and implications for public health, since the presence it parasite in the products of goat origin, consist in one of the main sources of infection for the man. In this study 244 blood samples in 8 farms situated in 4 cities from the Sert?o do Cabugi region, Rio Grande do Norte State, northeast of Brazil and, tested by ELISA assay. The results had shown a prevalence of 47.13% for anti- T. gondii antibodies and a significant association between positivity and variable evaluated as age, locality and property. The IgG avidity assay evaluated in 115 positive samples was carried to discriminate acute and chronic infection. Twelve samples (10.4%) had presented antibodies of low avidity while 103 (89.6%) presented high avidity antibodies; indicating that most of the animals was precocious exposure to the parasite. Significant difference was verified only for the variable sex. We also evaluate the capacity of recombinant adenoviruses codifying SAG1, SAG2, SAG3 and CMV in inducing activation of specific immune response in goat. These 109 animals received 109 pfu of the AdSAG1, AdSAG2, AdSAG3, AdCMV or PBS in vaccine protocol with 3 immunizations. Serum samples of the each animal, before and after mmunization, had been submitted to the ELISA. The results demonstrate that the immunizations had induced the production of IgG antibodies specific against T. gondii proteins / A toxoplasmose ? uma zoonose causada pelo protozo?rio Toxoplasma gondii. Os caprinos, dentre os animais de produ??o, s?o uma das esp?cies mais suscet?veis a este parasito, sendo um dos principais agentes envolvidos no abortamento de ovinos e caprinos, determinando grandes perdas econ?micas e tendo implica??es para sa?de p?blica, j? que a presen?a do parasita nos produtos de origem caprina, constituem-se em uma das principais fontes de infec??o para o homem. Neste estudo foram coletadas 244 amostras de sangue em 8 fazendas situadas em 4 munic?pios da regi?o do Sert?o do Cabugi, Estado do Rio Grande do Norte, regi?o Nordeste do Brasil e testadas atrav?s do Ensaio Imunoenzim?tico (ELISA). Os resultados obtidos mostraram uma preval?ncia de 47,13% para anticorpos anti-T. gondii e uma associa??o significativa entre positividade e as vari?veis avaliadas tais como idade, localidade e propriedade. Foi realizado o ensaio IgG de avidez em 115 amostras positivas com o intuito de discriminar infec??o aguda e cr?nica. Doze amostras (10,4%) apresentaram anticorpos de baixa avidez enquanto 103 (89,6%) anticorpos de alta avidez; indicando que a maior parte dos animais foi exposto ao parasita precocemente. Foi verificada diferen?a estat?stica significativa apenas para a vari?vel sexo. Avaliamos tamb?m a capacidade de adenov?rus recombinantes codificando SAG1, SAG2, SAG3 e CMV em induzir ativa??o de resposta imune em caprinos. Estes animais receberam 109 pfu de AdSAG1, AdSAG2, AdSAG3, AdCMV ou PBS em protocolo vacinal com 3 imuniza??es. Amostras de soro obtidas dos animais, antes e ap?s cada imuniza??o, foram submetidas ao ELISA. Os resultados demonstram que as imuniza??es induziram a produ??o anticorpos IgG espec?ficos contra as prote?nas de T. gondii

O polissacarídeo capsular (PS) é o principal fator de virulência do S. pneumoniae e é a base para sua classificação em sorotipos. O objetivo deste trabalho foi estudar o metabolismo de S. pneumoniae sorotipo 14 em cultivo contínuo e, para tanto, foi desenvolvido um ELISA de captura para quantificação do PS produzido (PS14) e a melhor cepa produtora foi escolhida. Em cultivos descontínuos em biorreator foram observados rendimentos semelhantes para crescimento e PS14 entre meio complexo e meio quimicamente definido. No entanto, diferenças no requerimento de vitaminas foram verificadas entre cultivos em frasco e biorreator, relacionadas à disponibilidade de O2. Em cultivos contínuos observou-se que: a produção de PS14 foi associada ao crescimento celular, a glicose foi o substrato com maior impacto sobre a produção de PS14 e os fatores de conversão sobre glicose e biomassa foram maiores sob limitação de glicose/colina/glutamina; o que permite concluir que estratégias de produção de PS14 devem focar na alta densidade celular e na condição de limitação de nutrientes. / The capsular polysaccharide (PS) is the most important virulence factor of S. pneumoniae and is also the basis for its classification in serotypes. This study aimed to evaluate the metabolism of S. pneumoniae serotype 14 in continuous cultivation. In order to do this, a Sandwich ELISA was developed to quantify the PS (PS14) produced and the best producer strain was selected. Similar growth and PS14 yields were observed in batch cultures conducted with complex and chemically defined media. Differences in vitamin requirements were verified in flask and batch cultivation, associated to O2 availability. In continuous cultivation, the PS14 production was associated to cell growth, the glucose was the substrate with more impact on PS14 production and in limitation of glucose/choline/glutamine the yield factors per glucose consumed and per biomass produced increased. These results showed that to improve PS14 production is necessary to adopt strategies that focuses in high cell density in addition to conditions of substrate limitation.

O controle da infecção por Salmonella sp. na cadeia de produção de suínos é necessário, tendo-se em vista as altas prevalências encontradas em rebanhos brasileiros de diversas regiões do país. Estas altas prevalências refletem um maior risco de contaminação, portanto um maior risco para o consumidor e para o mercado exportador. Estudos tem sido conduzidos para elucidar questões relevantes para o comportamento e o controle deste agente. Este trabalho pretende sugerir ferramentas de controle, bem com elucidar algumas questões relativas à epidemiologia de Salmonella sp. em rebanhos suínos tecnificados. Foi estudada a soroprevalência de Salmonella sp. em rebanhos brasileiros com diferentes níveis de acometimento de Síndrome Multissistêmica de Definhamento do Leitão Desmamado (SMDLD) e concluído que a frequência elevada de portadores de Salmonella sp. pode ser um problema adicional em granjas afetadas de forma mais severa pelo SMDLD. Além disso, foi avaliada a imunização como medida para o controle de Salmonella com uma vacina viva comercial (Enterisol SC 54®). O estudo foi conduzido em sistema de produção com isolamento prévio de S. enterica em suínos ao abate. Entre os 13 lotes do Grupo Vacinado e doControle amostrados ao abate, 11 apresentaram freqüência de isolamento de Salmonella superior a 70%, enquanto nenhum lote de GV apresentou esse índice de isolamento. Estes resultados demonstram que a vacinação com Enterisol SC-54® pode ser considerada uma medida eficaz que pode ser incluída em programas de controle de Salmonella em suínos. Outro estudo realizado foi a avaliação de fatores de risco, no qual foram escolhidos 5 diferentes sistemas de produção de suínos no Brasil e avaliadas as prevalências para Salmonella e realizado um questionário nas granjas amostradas. A análise comparativa das prevalências médias de Salmonella entre empresas demonstrou a existência de diferenças entre os sistemas de produção (P<0,05). A Razão de Chance (OR) para altas prevalências de Salmonella foram: produção intensiva de frango de corte (OR=2,4), animais provenientes de mais de uma origem (OR=2,0), presença de outros animais na granja (OR=1,7), canaletas sujas (OR=1,5), acúmulo de dejetos na fossa (OR=1,4), piso compacto (OR=1,3), instalações sem forro (OR=1,2) A presença de outros animais na granja e a pré-fossa suja foram os fatores mais freqüentes na análise conduzida individualmente nas agroindústrias. O maior número de dias com a granja fechada teve efeito de proteção (OR=0,9). / The control of infection with Salmonella sp. in the swine production chain is necessary, considering the high prevalence found in Brazilian flocks of several regions of the country. These high prevalence rates reflect a higher risk of contamination of pork meat, and therefore a greater risk to the consumer and to the Brazilian pork export market. Several studies have been conducted to elucidate relevant issues to the conduct and control of this agent. This tesis intends to suggest control tools, as well as clarify some issues concerning the epidemiology of Salmonella sp. in technified swine herds. We studied the prevalence of Salmonella sp. in Brazilian herds with different levels of involvement of Post-Weaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS) and concluded that the high frequency of carriers of Salmonella sp. may be an additional problem in farms more severely affected by SMDLD. Furthermore, we evaluated the immunization as a measure to control Salmonella with a commercial live vaccine (Enterisol ® SC 54). The study was conducted in a production system with prior isolation of S. enterica in swines at slaughter. Among the 13 batches of GV and GC sampled at slaughter, 11 showed frequency of isolation of Salmonella superior to 70%, while no GV batch had this level of isolation. These results demonstrate that vaccination with Enterisol SC-54 ® can be considered an effective measure that can be included in control programs for Salmonella in swines. Another carried out study was the assessment of risk factors, in which 5 different swine production systems in Brazil were chosen and evaluated the prevalence for Salmonella, and an epidemiological investigation in the sampled farms was inferred. The comparative analysis of average prevalences of Salmonella between companies demonstrated the existence of differences between the production systems (P <0.05). The Odds Ratio (OR) for high prevalence of Salmonella were: intensive production of broilers (OR = 2.4), animals from more than one source (OR = 2.0), presence of other animals on the farm ( OR = 1.7), dirty grooves (OR = 1.5), the accumulation of waste in the gully (OR = 1.4), compressed floor (OR = 1.3). The presence of other animals on the farm and the dirty pre-gully were the most frequent factors in the analysis conducted individually in agricultural industry. The greatest number of days with the farm closed had a protective effect (OR = 0.9).

O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um ectoparasito hematófago que infesta os rebanhos bovinos de regiões tropicais e subtropicais, e é um dos principais causadores de prejuízos econômicos à pecuária. O principal método de controle baseia-se no uso de acaricidas. No entanto, devido à crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do meio ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, métodos alternativos para o controle do R. microplus devem ser encontrados. Um dos métodos alternativos estudados é o uso de vacinas. As glutationa S-transferases (GST) são enzimas que estão presentes em organismos animais e vegetais e entre suas funções podem-se destacar transporte intracelular, participação em processos digestivos, síntese de prostaglandinas, e detoxificação de substâncias tóxicas e proteção contra estresse oxidativo. Neste estudo foi analisada a resposta imunológica comparativa de camundongos para a GST de R. microplus (GST-Bm) e para a GST de Haemaphysalis longicornis (GST-Hl). Ambas as proteínas foram expressas em Escherichia coli linhagem AD494, e purificadas por cromatografia de afinidade por glutationa utilizando a coluna GSTrap FF. Para verificar a imunogenicidade das proteínas, foram utilizados 25 camundongos Balb/c divididos em 12 grupos. As condições testadas foram as inoculações das proteínas GST-Bm e GST-Hl com os adjuvantes Montanide, saponina ou sem adjuvantes. Camundongos controle foram inoculados com extrato de E. coli ou somente com os adjuvantes. Foi coletado sangue de todos os animais com intervalos de sete dias durante 70 dias. Os soros foram analisados por ELISA para acompanhar a cinética da produção de anticorpos de todos os animais imunizados. Os camundongos inoculados com GST-Hl emulsificada com Montanide mostraram aumento dos níveis de anticorpos a partir do dia 21. O nível máximo de anticorpos foi detectado no dia 42, e diminuiu após o dia 56. Todos os outros animais não apresentaram aumento nos níveis de anticorpos. / Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick is a hematophagous ectoparasite that infests cattle in tropical and subtropical regions and is one of the principal causes of economic losses in the cattle farm. The principal method of control is the use of acaricides. However, due to increased worry about environmental chemical pollution, high costs and drugs toxicity and the selection of ticks resistant to acaricides, alternative methods for R. microplus control should be developed. One of these methods is vaccination. Glutathione S-transferases (GSTs) enzymes are present in animal and vegetal organisms and the functions are intracellular transport, participation in digestive process, synthesis of prostaglandins and detoxification of toxic substances and protection against oxidative stress. In this study the immunological response of mice inoculated with R. microplus GST (GST-Bm) and with Haemaphysalis longicornis GST (GST-Hl) was analysed. Both proteins were expressed in Escherichia coli strain AD494 and were purified by affinity chromatography using GSTrap FF columm. To verify the protein immunogenicity, 25 Balb/c mice divided into 12 groups were used. The tested conditions were inoculation of GST-Bm, GST-Hl proteins with Montanide and saponin adjuvants or without adjuvant. Control mice were inoculated with E. coli extract or the adjuvant alone. Blood from all animals were collected with intervals of seven days during seventy days, the sera were analyzed by ELISA to verify the kinetic of antibodies production of all immunized animals. Mice inoculated with GST-Hl emulsified with Montanide showed an increase in the antibodies levels from day 21. The maximum level of antibodies was detected on day 42 and decreased after day 56. The other animals did not show an increase in antibodies levels.

Introdução: A vacinação contra a hepatite B, aliada às precauções padrão, é um importante instrumento para a prevenção deste agravo em profissionais de saúde, que podem sofrer exposição a material biológico potencialmente contaminado. Objetivos: Estimar a cobertura da vacinação contra a hepatite B, a prevalência de imunizados e de exposição ocupacional a material biológico por acidentes perfurocortantes nos profissionais de saúde do município de Santa Rosa/RS/Brasil. Metodologia: Foram pesquisados, através de um estudo transversal, 322 profissionais de saúde que atuam em hospitais, no banco de sangue e nas unidades de saúde (Médicos, Enfermeiros, Técnicos e Auxiliares de Enfermagem, Odontólogos, Auxiliares de Consultório Dentário (ACD), Farmacêuticos e Auxiliares de Laboratório). A significância estatística das associações foi avaliada usando-se o teste de qui-quadrado para a comparação de variáveis categóricas, e regressão logística para a análise multivariável. Resultados: A média de idade dos entrevistados foi de 38,1 anos, com média de 13 anos de atuação na profissão. 24,8% eram do sexo masculino e 75,2 do sexo feminino. A cobertura vacinal nestes profissionais foi de 87,9% (IC 95% 83,8 a 91,2%). As coberturas de vacinação foram maiores em profissionais com nível médio e que não atuam em hospitais. A taxa de acidentabilidade com instrumento perfurocortante foi de 40,5% na amostra. A prevalência de imunizados com testagem realizada até 6 meses foi de 78,8%. Conclusão: A cobertura de vacinação e a prevalência de imunizados foram inferiores ao preconizado pelo Ministério da Saúde e Centers for Diseases Control and Prevention. Há necessidade de maiores investimentos na prevenção da infecção ocupacional pelo vírus da hepatite B para esses profissionais. / Introduction: The vaccination against hepatitis B, together with standard precautions, is an important tool for the prevention of this disease in health professionals, who can suffer exposure to biological potentially contaminated. Goals: Estimate the coverage of vaccination against hepatitis B, the prevalence of immunized and the occupational exposure to biological material from perforating injuries in health professionals located in city of Santa Rosa/RS/Brazil. Methodology: 322 health professionals who work in hospitals, in blood bank and in health services (Phisicians, Nurses, Technicians and Assistants in Nursing, Dentists, Dental Office Assistants (DOA), Pharmacists and Laboratory Assistants) were investigated, through an cross-sectional study. The statistic significance of the associations was evaluated by using the chi-square test to compare categorical variables and logistic regression for multivariable analysis. Results: The interviewed are, on average, 38,1 years old, and have been working in the profession for around 13 years. 24,8% werw male and 75,2 female. The vaccination in those professional was 87.9% (IC 95% 83.8 to 91.2%). The vaccination was larger in professionals with high school and that do not work in hospitals. The rate of injury due perforating instrument was 40.5% in the sample. The prevalence on immunized with testing performed up to 6 months was 78.8%. Conclusion: The vaccination and the prevalence of immunization were below the recommended by Brazilian Ministry of Health and Centers for Diseases Control and Prevention. More investments in the prevention of occupational infection by Hepatitis B virus for those professionals are necessary.

Orientadores: Clarice Weis Arns, Fernando Rosado Spilki / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Orsi_MariaAngela_D.pdf: 5800043 bytes, checksum: 7c499fd86a0e94ef1057fc62e1ba024f (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O vírus da doença de Newcastle (VDN) é o agente causador de uma das mais importantes doenças em aves e representa uma ameaça para a indústria avícola. O VDN é um membro da família Paramyxoviridae, subfamília Paramyxovirinae, gênero Avulavirus. São vírus envelopados, não segmentados dotados de genoma RNA de fita simples sentido negativo, associado à doença do trato respiratório, digestivo e nervoso das aves. O Controle da DN se baseia em biossegurança, uso de vacinas e detecção precoce de lotes infectados. No presente estudo, examinamos dez vacinas vivas comercializadas no Brasil quanto à sua estabilidade térmica (ET), virulência e imunogenicidade. Em outra etapa do trabalho, investigou-se a soroprevalência perante o VDN em regiões de produção avícola voltada à exportação ou não de produtos aviários, seguido da detecção do VDN em aves migratórias. Os estudos são complementados pela análise filogenética de VDN isolado de aves comerciais, dos resultados alcançados, cumpre ressaltar: i) os testes de ET revelam elevada estabilidade para as vacinas utilizadas no país, mesmo após dois anos de sua fabricação; ii) o grau de proteção conferido por vacinas vivas contra a DN não depende da virulência residual conforme testes de inoculação intracerebral; iii) a soroprevalência contra VDN em aves nas regiões produtoras e exportadoras, foi de 39,1% e foram isoladas 77 amostras virais, sempre com perfil não-patogênico; iv) sorologia realizada em uma segunda oportunidade detectou-se uma soroprevalência de 28,8% e isolamento de 15 amostras virais que também foram caracterizadas como não-patogênicas; v) observou-se numa soropositividade de 41,7 a 84,3% dependendo da região e isolamento de 12 VDN na região Nordeste, caracterizados como não-patogênicas, indicando que nas áreas não exportadoras circulam vírus de baixa patogenicidade; vi) o genoma dos vírus isolados e das vacinas vivas, atesta que os vírus circulantes em aves comerciais são de provável origem vacinal e pertencem à classe II sendo 71,8% do genótipo II ou La Sota-like e 28,2% do genótipo I ou Ulster-like; vii) por último, a caracterização biológica dos isolados de aves migratórias mostram que há circulação de vírus de baixa e alta patogenicidade em nosso território. Portanto, este conjunto de trabalhos evidencia o status do Brasil como país livre da Doença de Newcastle em aves comerciais / Abstract: Newcastle disease virus (NDV) is the agent that causes one of the most important diseases in birds and represents a threat to industrial aviculture. NDV is a member of the Paramyxoviridae family, Paramyxovirinae subfamily, Avulavirus genus. In the present study, live vaccines commercialized in Brazil were examined in regard to their thermostability (TS), virulence and immunogenicity. In another stage of this work, soroprevalence was investigated, with viral isolation and characterization carried out in poultry production regions focused on production for exportation or domestic commercialization, followed by the detection of the virus in migratory birds. The studies were complemented by phylogenic analysis carried out on the isolates from the commercial birds. From the results obtained, it is important to underscore that i) the tests of TS revealed a high stability of the vaccines used in Brazil, even two years after their manufacture; ii) the level of protection given by live vaccines against NDV does not depend on residual virulence, as confirmed by tests of intracerebral inoculation iii) soroprevalence against NDV in regions with production for exportation was 39.1% and it was possible to isolate 77 samples, always with a non-pathogenic profile; iv) on a second opportunity, a soroprevalence of 28.8% was detected, with isolation of 15 samples, also classified as non-pathogenic; v) in the Brazilian Northeast, a seropositivity of 41.7 to 84.3% was observed depend of region, with isolation of 12 NDVs, characterized as non-pathogenic, indicating that virus of low pathogenicity circulates in those areas that do not export; vi) the genome of the isolated virus and vaccine implies that the circulating virus in commercial birds probably originates from the vaccine and belongs to class II, being 71.8% from genotype II or La Sota-like and 28.2% from genotype I or Ulster-like; vii) finally, the biological characterization of isolates from migratory birds showed that there is circulation of virus of low and high pathogenicity in Brazil. However, this set of studies agrees with the status of Brazil as being a country free of Newcastle disease in commercial birds / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Marcelo Brocchi, Fabio Trindade Maranhão Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-14T03:58:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franzin_FernandaMaria_M.pdf: 1412458 bytes, checksum: 2fe89ebc9e03c37ffcc48000024a232d (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A malária é uma doença tropical causada pelo parasita Plasmodium spp e é considerada um sério problema de saúde pública. São aproximadamente 500 milhões de casos anuais e mais de um milhão de mortes, especialmente na África e Ásia. No Brasil, são 500 mil novos casos por ano, principalmente na região Amazônica. Esses elevados índices de mortalidade e morbidade são motivadores da busca por estratégias de controle e eliminação dessa doença. A vacinação é uma ferramenta promissora no controle e prevenção da malária, entretanto, uma vacina segura e efetiva ainda não está disponível, em parte devido ao complexo ciclo de vida do parasita e a expressão de diferentes antígenos em cada fase. O antígeno de membrana similar ao ligante de eritrócitos (MAEBL), é um forte candidato a ser usado no desenvolvimento de uma vacina efetiva contra a malária, uma vez que esse antígeno é expresso em diferentes períodos do ciclo de vida do parasita. Neste estudo, o domínio M2 do antígeno MAEBL de Plasmodium yoelli foi expresso em linhagens vivas atenuadas de Salmonella enterica Typhimurium (?3987, ?4550 e H683) e o uso dessas bactérias como vacina recombinante potencialmente indutora de proteção contra malária murina foi avaliado. Essas linhagens foram obtidas após construção e transdução do plasmídio pYA3137trc contendo a região m2 do gene maebl e a expressão do antígeno foi confirmada por immunoblotting. A administração oral das linhagens recombinantes a camundongos BALB/c/AnUnib resultou na colonização dos tecidos hospedeiros apenas pela linhagem H683. Essa linhagem foi então avaliada em termos de indução de resposta imune humoral contra M2 e capacidade de imunização no modelo murino. Apesar da resposta humoral contra M2 ter sido detectada in vivo, a linhagem recombinante não demonstrou proteção potencial contra a infecção por Plasmodium yoelii no modelo murino. / Abstract: Malaria is a tropical disease caused by the parasite Plasmodium spp and is considered a serious public health problem. There are about 500 million annual cases and more than one million of deaths, especially in Africa and Asia. In Brazil, there are 500.000 new cases per year, mainly in the Amazon region. Those high rates mortality motivate the search for strategies of control and elimination of this illness. The vaccination is a promising tool in the control and prevention of malaria; however, a safe and effective vaccine is not available yet, in part due to the complex life cycle of the parasite and expression of different antigens in each phase. Membrane antigen erythrocyte binding like (MAEBL) is a strong candidate to be used in the development of an effective vaccine against malaria, since this antigen is expressed in different periods of the parasite life cycle. In this work, the M2 domain of Plasmodium yoelli MAEBL antigen was expressed in attenuated strains of Salmonella enterica Typhimurium (?3987, ?4550 e H683) and the use of these bacterias as potential inductor of protection against murine malaria was evaluated. These strains were obtained by construction and transduction of the plasmid pYA3137trc carrying the m2 region of the maebl gene and the antigen expression was confirmed by immunoblotting. The oral administration of the recombinant strains to BALB/c/AnUnib mice resulted in the colonization of host tissues only for the H683 strain. This strain was further evaluated in terms of induction of humoral immune response against M2 and immunization capacity in murine model. Even though humoral response against M2 was detected in vivo, the recombinant strains did not shown protective potential against the infection of Plasmodium yoelii in murine model. / Mestrado / Genetica de Microorganismos / Mestre em Genética e Biologia Molecular