Orientadora: Mirela Tinucci Costa / Banca: Suely Nunes Esteves Beloni / Banca: José Jurandir Fagliari / Resumo: A erliquiose canina é uma doença de alta incidência na região nordeste do Estado de São Paulo, sendo responsável pela morte de muitos cães. O diagnóstico precoce favorece a pronta instituição do tratamento e melhora o prognóstico do animal. Estudos têm apontado que a determinação da concentração de proteínas de fase aguda (PFA) pode contribuir para detecção precoce de doenças e auxiliar na predição do prognóstico. O presente estudo objetivou avaliar o perfil de proteínas de fase aguda (PFA) em cães experimentalmente infectados com Ehrlichia canis, amostra Jaboticabal, no início da infecção e após o tratamento. Para tanto, foram utilizados 10 cães sem contato prévio com hemoparasitas. Deste, cinco foram infectados e cinco serviram de controle da infecção. Hemogramas, nested PCR, detecção de anticorpos anti-E. canis e eletroforetograma de proteínas séricas foram realizados em períodos pré-determinados. Os resultados mostraram que a proteína-C reativa, ceruplasmina e a α1-glicoproteína ácida tiveram suas concentrações aumentadas antes do aparecimento dos sinais clínicos e das alterações de hemograma nos cães infectados. Os sinais clínicos da doença tornaram-se evidentes por volta do 17º dia de infecção. Trombocitopenia foi registrada a partir do 3º dia de infecção. Mórulas intracitoplasmáticas foram detectadas a partir do 15º dia. Títulos sorológicos anti-E. canis, variando de 1:2560 a 1:5120, e nPCR positiva foram evidenciados no 18º dia. Nas avaliações após o tratamento os cães infectados estavam assintomáticos, com nPCR negativo e acentuada redução dos títulos de anticorpos específicos em quatro dos cinco cães. Todas as PFA estudadas reduziram suas concentrações a títulos próximos aos iniciais. Este estudo mostrou que as mensurações das PFA contribuem para o diagnóstico precoce e predição de cura... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Canine ehrlichiosis is an endemic disease, with high incidence in the Northwest area of Sao Paulo State - Brazil and it is responsible for the death of numerous dogs. The rapid and accurate diagnosis helps the prompt establishment of treatment and improves the prognosis of the animal. Evidence has shown that the measurement of acute phase proteins (APP) can contribute for the early detection of the disease and help to predict its prognosis. This study evaluated the profile of APP in dogs experimentally infected with Ehrlichia canis, Jaboticabal - SP - Brazil sample, at the onset of the infection and after its treatment. Ten dogs, with no previous hemoparasitosis, were randomly assigned in either the infected group (5 animals), which received the bacteria, or the control group (5 animals). In pre-determined intervals, their blood was colected and hemogram, nested PCR, anti-E. canis antibodies detection and tritation and eletrophoresis of serum proteins were performed. We showed that, in infected dogs, the concentration of C-reactive protein, ceruplasmin and α-1 acid glycoprotein were increased previous to the clinical signs forthcoming and hemogram alterations. The clinical signs were evident around the 17th day of infection. Thrombocytopenia was found on the 3th day of infection. Intra-cytosolic morules were detected on the 15th day of infection. Sorologic tritation of anti-E. canis, ranging from 1:2560 to 1:5120, and positive nPCR were found on the 18th day of infection. In the post-treatment evaluation, the infected dogs were asymptomatic with negative nPCR and decreased tritation of specific antibodies in four out of five dogs. All APP analyzed were similar to basal levels. This study showed that the measurement of APP can, indeed, contribute for the early diagnosis and prediction of cure, after treatment, of the experimental acute phase of canine Ehrlichiosis. / Mestre

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007-Marcel Teixeira.pdf: 1273236 bytes, checksum: aab3a6b9a04277f697a5e04ba6149d75 (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Purposing to evaluate the anatomy-clinics and biology in broilers chicks experimentally infected with Eimeria acervulina and supplemented with betaine, a study was carried out. Thus, 390 broiler chicks Cobb were housed in battery cages distributed in a randomized block design composed of five treatments, six replicates with 13 chicks each, including a positive control, a group treated with the salinomycin plus potassium penicillin G and three levels of betaine in the feed 0.05%, 0.10% and 0.15%. A soybean-maize based diet was prepared according the nutritional requirements of broiler chickens; food and water were given ad libitum. Chicks 14 days old were individually infected orally with 2 x 105 sporulated oocysts of E. acervulina. Weight gain, feed consumption, oocyst output and clinical signs were performed during 1-7 and 7-14 days after inoculation (DAI). After, from 0-7 and 7-14 DAI weight gain, feed consumption, oocyst output, plasma proteins and clinical signs were evaluated. At 0, 4, 7 and 14 DAI one bird from each replicate were euthanatized to perform lesion score and collection of blood and intestinal tissues for histopathology and villous measuring. Laboratorial analyses were made using saturated sugar centrifugation technique following oocyst counting and measurements with an ocular micrometric. Biology of the parasite was evaluated throughout the sporulation time, pre-patent and paten periods of infection, morphology of endogenous stages and oocyst and relationship with the mathematical cons tant Phi. It was not observed anatomy-clinics differences (p>0.05) between birds of different treatments due to all parameters used, however the response with betaine was similar to treatment with salinomycin and potassium penicillin G, indicating there are possibilities to use betaine to substitute these drugs. Nevertheless, betaine show ability to decrease oocyst output against control group but fewer than salinomycin. Regarding the biology of the parasite, although betaine affected the form and size of oocysts, little influence was observed in the endogenous stages according to measurements of trophozoites and macrogametes. Within the morphology it was observed a great relationship between the development of sporocysts of E. acervulina and the mathematical constant Phi. / Um estudo foi realizado com o objetivo de se avaliar a an?tomo-cl?nica e a biologia em frangos de corte experimentalmente infectados com Eimeria acervulina e suplementados com beta?na. Para tanto 390 pintos de corte Cobb foram alojados em baterias met?licas num delineamento experimental em blocos ao acaso constitu?do de cinco tratamentos e seis repeti??es com treze aves, incluindo-se um controle positivo, um grupo tratado com salinomicina e penicilina G pot?ssica e mais tr?s n?veis de beta?na na ra??o sendo estes 0,05%, 0,10% e 0,15%. A dieta era composta de uma mistura de milho e soja elaborada conforme as exig?ncias de frangos de corte, sendo ?gua e comida fornecidos ad libitum. Aos 14 dias de vida as aves foram infectadas individualmente por via oral com 2 x 105 oocistos esporulados de E. acervulina. A seguir, nos per?odos de 0-7 e 7-14 dias ap?s a infec??o (DAI), foram determinados o ganho de peso, consumo de ra??o, produ??o de oocistos, n?vel de prote?nas plasm?ticas e observados sinais cl?nicos. Necropsias foram realizadas no 0, 4?, 7? e 14? DAI, sendo uma ave de cada repeti??o eutanasiada para realiza??o do escore de les?o, coleta de sangue e de tecido intestinal para histopatologia e mensura??o das vilosidades intestinais. A an?lise laboratorial e preparo dos oocistos foi realizada atrav?s da t?cnica de centrifuga??o em solu??o saturada de a??car seguida de contagem por grama de fezes e mensura??o com ocular microm?trica. A biologia do parasito foi avaliada atrav?s do tempo de esporula??o, per?odo pr?-patente, per?odo patente da infec??o, morfometria de fases end?genas e oocistos e a rela??o com a constante matem?tica Phi. N?o foi observada diferen?a (p>0,05) an?tomo-cl?nica nas aves dos diferentes tratamentos utilizados em rela??o a todos os par?metros utilizados, no entanto a resposta com a beta?na foi semelhante a do tratamento com salinomicina e penicilina G pot?ssica, indicando que h? possibilidade de ser utilizada em substitui??o a este medicamento. Ainda, a beta?na demonstrou capacidade de limitar a produ??o de oocistos frente ao grupo controle, por?m num n?vel inferior a salinomicina. Quanto ? biologia do parasito, embora a beta?na fosse capaz de exercer influ?ncia sob o formato e o tamanho dos oocistos e esporocistos, pouca influ?ncia foi exercida nos est?gios end?genos com base na mensura??o de trofozo?tos e macrogametas. Atrav?s da morfologia foi poss?vel se observar uma grande rela??o entre o desenvolvimento dos esporocistos de E. acervulina e a constante matem?tica Phi.

In der vorliegenden Arbeit wurde einerseits der Verlauf der Schutzwirkung der zurzeit in Sachsens Legehennenbeständen überwiegend angewandten Impfschemata gegen Salmonella Enteritidis (SE) untersucht. Andererseits wurden die Impfschemata, die ausschließlich modifizierte Lebendimpfstoffe (MLV) umfassen, und Impfschemata, die aus einer Kombination von MLV und Inaktivatimpfstoffen (KV) bestehen, auf Unterschiede in der Wirksamkeit geprüft. Um die Wirksamkeit der Impfschemata im Verlauf der Legeperiode und im Vergleich miteinander untersuchen zu können, wurden zu drei verschiedenen Zeitpunkten der Legeperiode (39., 54. und 69. Lebenswoche (LW)) Infektionsversuche mit einem Nalidixinsäure-resistenten SE-Stamm durchgeführt. Es wurden insgesamt 180 Legehennen verwendet, die in fünf verschiedenen Herkunftsbetrieben etwa gleicher Größe aufgezogen und geimpft worden waren. In jedem der Herkunftsbetriebe wurde eines von fünf Impfschemata (A bis E) angewendet. Die Impfschemata A und C beinhalteten ausschließlich MLV, die Impfschemata B, D und E eine Kombination aus MLV und KV. Zu den genannten Zeitpunkten (39., 54. und 69. LW) wurden jeweils zwölf Tiere aus den Betrieben in den Infektionsstall des Instituts für Tierhygiene und Öffentliches Veterinärwesen verbracht und eingestallt. Nach der Adaptionsphase von einer Woche und der Prüfung der Tiere auf Salmonellenfreiheit wurde jedes Tier mit 1,0 x109 KbE SE oral infiziert. Zwei und sieben Tage post infectionem (p.inf). wurden jeweils sechs Hennen euthanasiert und seziert. Caeca, Leber-, Ovar- und Oviduktproben wurden entnommen und gemäß anerkannter quantitativer und qualitativer Untersuchungsmethoden auf den Infektionsstamm untersucht. Zur Kontrolle der Erregerausscheidung wurden ein, drei und fünf Tage p.inf. Kloakentupferproben von jedem Tier entnommen und entsprechend auf SE untersucht. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen variierten in Abhängigkeit von Versuchs- und Sektions- bzw. Kloakentupferentnahmezeitpunkt, untersuchtem Organ sowie quantitativer und qualitativer Untersuchung. Die ausschließlich mit MLV geimpften Gruppen A und C wiesen im Vergleich zu den Gruppen D und E, die mit demselben MLV und zusätzlich mit einem KV geimpft worden waren, in den Kloakentupfer- und Caecumproben in der Regel qualitativ und quantitativ weniger Salmonellen auf. Der Salmonellennachweis in den Leberproben und den vereinzelt besiedelten Reproduktionsorganen variierte nur geringfügig zwischen den Impfgruppen. Da die Tiere der vier Impfgruppen aus jeweils anderen Herkunftsbetrieben stammten, sind haltungsbedingte Unterschiede anzunehmen. Das äußere Erscheinungsbild (Befiederung, Bemuskelung, makroskopische pathologische Veränderungen) und das Sozialverhalten der Tiere variierten, was mit Unterschieden in der Immunität einhergehen kann. Bei den Tieren der Gruppe A bzw. C waren in der 69. LW und in 54. LW, respektive, ein ausgeprägtes kannibalistisches Verhalten und dessen Konsequenzen (reduzierte Wasser- und Futteraufnahme der gepickten Tiere, Hackverletzungen) zu beobachten. Tendenziell waren die Tiere der Gruppen B bis E in der 54. LW stärker mit SE belastet als in der 39. und 69. LW. Ein Einfluss der unter Umständen erhöhten Umgebungstemperaturen in den Betrieben sowie des hohen Leistungsstresses während der mittleren Phase der Legeperiode auf die Immunität der 54 LW alten Tiere, die im August 2010 infiziert wurden, ist nicht auszuschließen. Auch eine sich ausbildende Altersresistenz könnte die bessere Salmonellenabwehr der 69 LW alten Tiere erklären. Tiere der Gruppe A waren jedoch in der 69. LW am stärksten mit SE belastet, was auf ein Nachlassen der durch die Impfung induzierten Immunität und möglicherweise auf den im Vergleich zu den jüngeren Tieren allgemein schwächeren Zustand der Tiere zurückzuführen ist. Die Ergebnisse einer Kontrollgruppe zur Beurteilung der von der Impfung unabhängigen Faktoren fehlen. Da in den sächsischen Legehennenhaltungen aufgrund der hohen Tierzahlen entsprechend der Hühner-Salmonellen Verordnung (Impfpflicht für Betriebe mit mehr als 350 Tieren) gegen SE geimpft wird, hätten zur Bildung einer ungeimpften Kontrollgruppe Tiere aus kleineren Betrieben oder Zuchttierhaltungen mit völlig anderen Haltungsstrukturen verwendet werden müssen. Damit wären die wissenschaftlichen Ansprüche an eine Kontrollgruppe jedoch nicht erfüllt worden. Entsprechend der Ergebnisse und Umstände dieser Studie scheint eine Zusatzimpfung mit einem KV im Vergleich zu einer Impfung mit ausschließlich MLV keinen Vorteil im Schutz vor SE zu bieten. Es konnte gezeigt werden, dass die Immunität der gemäß der Impfschemata B bis E geimpften Legehennen gegen SE am Ende der Legeperiode nicht nachlässt. Die Impfung allein kann den Erreger nicht eliminieren und muss daher stets in ein verantwortungsvolles und vielseitiges Bekämpfungsprogramm integriert werden.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-08Bitstream added on 2014-06-13T19:22:39Z : No. of bitstreams: 1 hoppe_egl_dr_jabo.pdf: 1540256 bytes, checksum: 5f7596806464f080af8ea17e52f8fafd (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A adequada compreensão dos mecanismos fisiopatológicos das doenças que afetam os animais silvestres contribui positivamente para a melhoria das condições de manutenção desses animais em cativeiro e fornece subsídios para a elaboração de planos de conservação de animais de vida livre. Diversos relatos de Haemonchus contortus em cervídeos de cativeiro e vida livre, bem como a importância desse nematódeo para a ovinocultura, motivaram o presente estudo. Inicialmente, foram determinados valores de normalidade para os parâmetros hematológicos e bioquímicos, bem como testada possível influência do sexo sobre eles. Num segundo momento, os animais foram separados em grupos e infectados experimentalmente. O processo infeccioso foi monitorado por um período de 60 dias, ao final do qual os animais foram submetidos à eutanásia e necropsiados. O processo infeccioso estabelecido, em intensidade parasitária similar à observada em animais de vida livre, não foi capaz de suscitar alterações hematológicas, bioquímicas ou anátomo-patológicas relevantes, tampouco interferir na ingestão de alimentos, sugerindo que, apesar da possibilidade de parasitismo, a infecção por H. contortus, nos níveis deste experimento, não provocam doença clínica nos animais. À luz dos dados morfométricos e parasitológicos, sugere-se uma má adaptação do H. contortus aos veados-catingueiros, apesar da possibilidade de manutenção do parasita nestes animais. / The comprehension of the pathophysiological aspects concerning wild animals’ diseases contributes favourably to the improvement of captive rearing of these animals, and also to the elaboration of conservation action plans for free-ranging animals. The diverse reports on deer parasitism by Haemonchus contortus and the importance of this nematode for sheep production motivated this research. First, reference values for haematological and biochemical parameters were determined for this species and the gender influence on them was tested. Then, the animals were divided in groups and infected. The infectious process was monitored over a 60 days period, and then the animals were killed and necropsied. The established infection, similar to natural acquired infections, was insufficient to lead to haematological, biochemical or pathological changes or interfere with food uptake. Based on this, despite the possibility of infection, H. contortus did not cause clinical disease in gray-brocket deer. Moreover, the morphometric and parasitological data suggest a maladaptation of H. contortus in this host species.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study describes aspects of the pathogenesis of bovine herpesvirus-5 (BoHV-5) infection in goats and rabbits. The study performed in goats was aimed at investigating the susceptibility of this species to BoHV-5 infection, due its potential role as a virus reservoir. Young goats were inoculated intranasally with three Brazilian BoHV-5 isolates (SV-507, G1; SV-609, G2; and EVI-88, G3) and monitored thereafter regarding to virus shedding, clinical signs and antibody response. The acute infection was characterized by virus shedding in nasal secretions for up to 14 days post-inoculation (pi) in titers reaching up to 105.97 TCID50/mL, mild respiratory signs and seroconversion. At day 60 pi, two animals of each group were euthanized for tissue collection to search viral DNA. The remaining animals were submitted to dexamethasone (Dx) administration to reactivate latent infection. Dx treatment resulted in virus reactivation in 75% (9/12) animals, as ascertained by virus shedding (8/12), and/or seroconversion (3/12). Latent viral DNA was detected in the trigeminal ganglia (TG) and/or in the main olfactory bulb (MOB) of all goats euthanized at days 60 pi and 40 post-dexamethasone. These results demonstrate that goats are susceptible to BoHV-5 acute and latent infection and may shed virus upon reactivation of latency. Thus, this species should be considered a potential reservoir for BoHV-5 in areas where goats and cattle are raised in close contact. The second experiment was aimed at investigating the role of the olfactory pathway in the transport of BoHV-5 to the brain of rabbits. For this, thirty days-old rabbits had the MOB surgically removed and were subsequently inoculated intranasally (IN) or conjunctivally (IC) with the strain SV-507 of the BoHV-5. Intranasal inoculation resulted in neurological disease in 100% of the control animals (with MOB), with clinical signs starting between days 5 and 10 pi; in the group submitted to MOB ablation only one animal (9.1%) developed neurological signs (started at day 17 pi). Following IC inoculation 10/12 (83.3%) control rabbits (with MOB) developed neurological disease with clinical signs starting between days 11 and 20 (mean 15.3 days). Furthermore, 10/12 rabbits lacking the MOB also developed neurological disease starting between days 9 and 15 pi (mean 12.5 days). These results demonstrate that both the olfactory and the trigeminal pathways may be used by BoHV-5 to invade the brain of rabbits after experimental infection. The transport by the olfactory pathway is faster and more efficient, while the trigeminal transport is slower and less efficient. These results add important information to the knowledge about the neuropathogenesis of alphaherpesvirus infection. / O presente estudo descreve aspectos da patogenia da infecção pelo herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) em caprinos e coelhos. O estudo em caprinos teve como objetivo investigar a susceptibilidade da espécie ao BoHV-5, devido ao seu possível papel como reservatório do vírus. Para isto, caprinos jovens foram inoculados pela via intranasal (IN) com três isolados brasileiros do BoHV-5 (SV-507, G1; SV-609, G2; e EVI-88, G3) e monitorados nos aspectos virológicos, clínicos e sorológicos. A fase aguda caracterizou-se por excreção viral em secreções nasais por um período de até 14 dias pós-inoculação (pi) em títulos de até 105,97 DICC50/mL, sinais respiratórios brandos e soroconversão. No dia 60 pi, dois animais de cada grupo foram submetidos à eutanásia para a coleta de tecidos e pesquisa de DNA viral. Os animais restantes foram submetidos à administração de dexametasona (Dx), na tentativa de reativar a infecção latente. A administração de Dx resultou em reativação da infecção latente em 75% (9/12) animais, detectada pela excreção viral (8/12) e/ou soroconversão (3/12). O DNA viral latente foi detectado no gânglio trigêmeo (TG) e/ou no bulbo olfatório (BO) de todos os animais eutanasiados nos dias 60 pi e 40 pós-dexametasona. Esses resultados demonstram que caprinos são susceptíveis a infecção aguda e latente pelo BoHV-5 e podem excretar vírus durante a reativação da infecção. Portanto, essa espécie pode ser considerada um potencial reservatório do BoHV-5 em áreas onde caprinos e bovinos são criados conjuntamente. O segundo experimento teve como objetivo investigar a importância da via olfatória na invasão do encéfalo de coelhos pelo BoHV-5. Para isto, coelhos recém desmamados foram previamente submetidos à ablação cirúrgica do BO e inoculados pela via IN ou conjuntival (IC) com a cepa SV-507 do BoHV-5. A inoculação IN resultou no desenvolvimento de doença neurológica em 100% dos animais controle (com BO), com início dos sinais clínicos entre os dias 5 e 10 pi. No grupo submetido à ablação do BO apenas um animal (9,1%) apresentou sinais neurológicos (início dia 17 pi). Após a inoculação IC, 10/12 (83,3%) coelhos controle (com BO) desenvolveram doença neurológica com o início dos sinais entre os dias 11 e 20 (média 15,3 dias); 10/12 coelhos (83,3%) sem o BO também desenvolveram a doença neurológica, com os sinais iniciando entre os dias 9 e 15 pi (média 12,5 dias). Esses resultados demonstram que tanto a via olfatória como a via trigeminal podem ser utilizadas pelo BoHV-5 para invadir o SNC de coelhos após infecção experimental. Porém, o transporte pela via olfatória é mais rápido e mais eficiente enquanto que a via trigeminal atua como via de acesso mais lento e menos eficiente. Esses resultados são importantes para um melhor conhecimento sobre a neuropatogênese das infecções pelos alfaherpesvírus.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-19Bitstream added on 2014-06-13T19:50:57Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_lg_me_jabo.pdf: 385808 bytes, checksum: 724ed5f57dfbaab664f6c58ba810c163 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A transmissão pela via fecal-oral é considerada o mais importante meio de disseminação de Salmonella sp. entre os suínos. Foi comprovada que a transmissão de Salmonella sp. através do contato naso-nasal entre suínos pode ser viável. Porém, alguns experimentos não conseguiram demonstrar tal transmissão em determinados sorotipos de Salmonella enterica. Este ensaio teve como objetivo produzir infecção experimental de Salmonella enterica subsp. enterica sorotipo Panama e verificar a importância da via nasonasal na transmissão entre leitões desmamados. Seis leitões recém-desmamados foram adquiridos de granja previamente selecionada, livre de Salmonella sp. Análises bacteriológicas confirmaram que todos os animais estavam livres de contaminação por Salmonella sp. Utilizaram-se baias isoladoras que proporcionavam o contato naso-nasal e eliminavam a possibilidade de outras vias de transmissão e de contaminação externa. Três grupos foram formados: controle, sentinela e infectados. Os leitões do grupo controle e do grupo sentinela receberam, individualmente, por via oral, solução estéril, enquanto que leitões do grupo infectado receberam inóculo contendo 2,16 X 1010 UFC de Salmonella Panama. Foram alojados nos isoladores respectivos e retirados depois de 14 dias, período no qual amostras de fezes eram colhidas e avaliadas diariamente. Os animais foram necropsiados e amostras de tecidos colhidas. Realizaram-se testes bacteriológicos, ELISA e sorotipificação. Houve infecção sistêmica por Salmonella Panama nos animais do grupo infectado, porém os resultados revelaram não haver a transmissão pela via naso-nasal entre leitões desmamados, pois em nenhum momento o agente foi isolado dos animais sentinelas. / The faecal-oral transmission is considering the most important route for transmission of Salmonella sp. between pigs. It has been proven that the Salmonella sp. transmission through the nose-to-nose contact among pigs can be viable. However, current data could not demonstrate such transmission in certain serovars of Salmonella enterica. This study aimed to produce experimental infection of Salmonella enterica serovars Panama and verifies the importance of the nose-to-nose contact in the transmission among weaned pigs. Six recently-weaned pigs were acquired from farm previously selected; free from Salmonella sp. Bacteriological analysis ruled out previous Salmonella sp contamination in all selected subjects. Isolations cabinets were used that provided the nose-to-nose contact and to eliminated the presence of other transmission routes and of outside contamination. Three groups were formed: control, sentinel and infected. The pigs of the control group and of the sentinel group, received, individually, orally sterile solution, while pigs of the infected group received solution containing 2,16 X 1010 CFU of Salmonella Panama. They were housed in the respective isolations cabinets and removed from it after 14 days, period in which samples of faeces were collected and submitted to daily analysis. The animals were necropsied and samples of tissues were collected. They were tested by bacteriological analysis, ELISA and serovars typification. There was systemic infection for Salmonella Panama in the animals of the infected group; however there was non transmission by nose-to-nose contact among weaned pigs, justifying the non isolation of the agent in the sentinel group at any moment.

Submitted by MARINA LOPES MECHLER null (mlopesvet@gmail.com) on 2018-02-19T14:08:06Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Marina Lopes Mechler.pdf: 2026984 bytes, checksum: ffc0d70577dd42d4b80d5ee121754dbd (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-02-20T12:49:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mechler_ml_me_jabo.pdf: 2026984 bytes, checksum: ffc0d70577dd42d4b80d5ee121754dbd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-20T12:49:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mechler_ml_me_jabo.pdf: 2026984 bytes, checksum: ffc0d70577dd42d4b80d5ee121754dbd (MD5) Previous issue date: 2018-02-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O tremor congênito em suínos possui diversas etiologias, inclusive os pestivirus. O objetivo deste trabalho foi avaliar se o vírus da diarreia viral bovina (BVDV) é um dos agentes etiológicos da enfermidade. Para tal, foi realizada inoculação de dez fêmeas suínas gestantes com BVDV-2 em dois diferentes modelos experimentais, sendo o primeiro a inoculação oronasal das fêmeas (Grupo 1; n=4), e o segundo a inoculação fetal intrauterina (Grupo 2; n=4). O terceiro grupo (Grupo 3; n=2) foi o controle. As marrãs e os fetos foram desafiados aos 45 dias de gestação com BVDV-2. Foram colhidas amostras sangue de todos os leitões nascidos para obtenção de sangue total e soro, para determinação dos títulos de anticorpos pela virusneutralização (VN) e detecção de RNA viral pela técnica de RTPCR. Um terço dos neonatos foram eutanasiados ao terceiro dia de idade, e deles coletaram-se fragmentos de encéfalo, tronco encefálico e medula espinhal para avaliação anatomohistopatológica e RT-PCR. Os leitões que permaneceram vivos foram avaliados clinicamente todos os dias, e foi realizada colheita de sangue periodicamente durante 35 dias, as quais foram submetidas à sorologia (VN) e RTPCR. Os leitões de ambos os grupos não apresentaram sinais clínicos neurológicos e nasceram com ausência de vírus no sangue e nos órgãos. Os leitões do Grupo 1 não apresentaram anticorpos contra o BVDV-2 ao nascimento, que posteriormente foram adquiridos por transferência passiva materna. Ao contrário, os leitões do Grupo 2 nasceram com altos títulos de anticorpos contra o agente, que permaneceram altos até o término do período experimental. Microscopicamente, não foram observadas alterações dignas de nota. Macroscopicamente, observou-se que 29,5% do total de leitões abatidos dos grupos infectados nasceram com baixa relação entre cérebro e cerebelo, o que pode ser indicativo de hipoplasia cerebelar. Desta forma, concluiu-se que o BVDV não parece ser um agente etiológico para o tremor congênito suíno. / Congenital tremor in pigs has several etiologies, including pestiviruses. The objective of this study was to evaluate whether bovine viral diarrhea virus (BVDV) is one of the etiological agents of this disease. Ten pregnant gilts were inoculated with BVDV-2 in two different experimental models, the first being the oronasal inoculation of the females (group 1; n=4), and the second was the intrauterine fetal inoculation (group 2; n=4). The third group (group 3; n=2) constituted the control group. Gilts and fetuses were challenged at 45 days of gestation with strain BVDV-2 SV 280. Blood samples were collected from all piglets born to obtain whole blood and serum for determination of antibody titers by virus neutralization (VN) and detection of viral RNA by the RT-PCR technique. One third of the neonates were euthanized at the third day of age, and fragments of brain, cerebellum, brain stem and spinal cord were collected for anatomopathological and RT-PCR evaluation. The piglets that remained alive were clinically evaluated every day, and blood samples were collected periodically for 35 days, which were submitted to serology (VN) and RT-PCR. The piglets of both groups showed no clinical neurological signs and were born without virus in the blood and organs. Group 1 piglets did not present antibodies against BVDV-2 at birth, which were acquired by passive maternal transfer. In contrast, Group 2 piglets were born with high antibody titers against the agent, which remained high until the end of the experimental period. Microscopically, no noticeable changes were observed. Macroscopically, it was observed that 29.5% of the total piglets slaughtered from the infected groups were born with a low ratio between brain and cerebellum, which may be indicative of cerebellar hypoplasia. Thus, it was concluded that BVDV does not appear to be an etiological agent for congenital pig tremor. / 409435/2016-3 / 2016/02982-3,

Nesse trabalho avaliamos a proteção que o anticorpo monoclonal (AcM) contra CMH e contra Hsp60 fornecem aos animais infectados com as leveduras de Paracoccidioides brasiliensis e P. lutzii em modelo profilático. O tratamento com os AcMs de isotipos IgG2a e IgG2b foram protetores, induzindo a secreção das citocinas IL-12p70, IFN-<font face=\"Symbol\">g e TNF-<font face=\"Symbol\">a, padrão de resposta imune Th1. Nós mostramos por imunomarcação que moléculas de CMH e Hsp60 estão acessíveis na célula. E o anticorpo monoespecífico contra CMH e os anticorpos policlonais contra melanina, gerados nesse trabalho foram eficazes nos ensaios in vitro de proteção. Foram gerados anticorpos monoclonais contra glicoproteina extraída de Pb18, o AcM reconheceu, por imunomarcação, estruturas internas e a parede celular da levedura. Avaliamos um novo modelo de hospedeiro, com o uso da larva Galleria mellonella, o que pode servir de triagem e reduzir desta forma o uso excessivo de camundongos, as leveduras P. lutzii e H. capsulatum são letais para as larvas e evocam resposta celular que se organizam semelhante a um granuloma. / In this work we evaluated the protection that the monoclonal antibody (MAb) against Hsp60 and against CMH provides the animals infected with the yeast Paracoccidioides brasiliensis and P. lutzii in prophylactic model. The treatment with the MAbs of IgG2a and IgG2b isotypes were protective, inducing the secretion of IL-12p70, IFN-<font face=\"Symbol\">g and TNF-<font face=\"Symbol\">a, Th1 pattern of immune response. We show by immunogold that Hsp60 and MHC molecules are accessible on the cell. And the monospecific antibody against HCM and polyclonal antibodies against melanin, generated in this study were effective in in vitro assays of protection. Monoclonal antibodies were generated glycoprotein extracted from Pb18, Mab recognized by immunogold, internal structures and cell wall material. Evaluated a new type of host, using the larvae Galleria mellonella, which can serve as a screening and reduce thus the overuse of mice, yeast P. lutzii and H. capsulatum are lethal to larvae and evoke cellular responses that are organized like a granuloma.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lundia Bin.pdf: 419626 bytes, checksum: 784b66188ef611a6dd9abf0fdddd231f (MD5) Previous issue date: 2013-08-23 / Toxocariasis is an important zoonosis mainly transmitted by ingestion of embryonated T. canis eggs, a parasite of dogs, present in soil. The nematode larvae can migrate by a variety of organs e may cause disturbances, including respiratory, hepatic, neurological, cardiac and ophthalmic problems. Diagnostic of toxocariasis is based on detection of anti-Toxocara antibodies, particularly IgG, by ELISA. Avidity of IgG has been employed in order to evaluate the phase of infection of a disease. However, experimental studies regard to toxocariasis are scarce in literature. This study aimed to evaluate the Toxocara canis-IgG avidity in experimentally infected rabbits, before and after lactation, and of their offsprings. Seventeen nullipar white New Zealand female rabbits were distributed in two groups. In experimentally infected group, 12 animals were inoculated by oral route with 1,000 T. canis embryonated eggs, whereas five animals were uninfected (control group). Blood samples collections were performed on +7, +14, +21 and +28 days post-infection (dpi) and on the first day following the weaning (60 dpi) in order to obtaining serum for ELISA analysis. ELISA indirect test was run in order to obtain the anti- T. canis antibody reactivity index (RI) as well as the avidity index (AI). Seroconversion was observed on 14 dpi, and all the evaluated animals showed a high AI, excepting one animal (on 14 dpi). After the weaning period, all the studied rabbit showed seroconversion. All the studied bunnies were considered positive for ELISA and showed a high AI. Nevertheless, both RI and AI of mothers were significantly higher than their offspring. According to the results, it was possible to demonstrate the vertical transmission of T. canis larvae. In addition, the negative correlation between the RI obtained from the rabbits and the bunnies pointed out the possibility of passive protection due to the maternal transfer of antibodies. / A toxocaríase é uma importante zoonose transmitida principalmente pela ingestão de ovos embrionados de T.canis, um parasito de cães, presente no solo. A larva do nematódeo pode migrar por vários órgãos do corpo e ocasionar distúrbios, como problemas respiratórios, hepáticos, neurológicos, cardíacos e oftálmicos. O diagnóstico é realizado principalmente com a detecção de anticorpos, em especial de Imunoglobulinas da classe G (IgG), pela técnica de ELISA. A avidez de IgG tem sido utilizada para avaliar a fase de infecção de uma doença. No caso da toxocaríase, estudos experimentais são escassos na literatura. O objetivo do estudo foi o de avaliar a avidez de anticorpos anti-Toxocara canis em coelhas infectadas experimentalmente, antes e após lactação, e de suas progênies. Foram utilizadas 17 coelhas da linhagem Nova Zelândia, brancas, nulíparas, distribuídas em dois grupos. No grupo experimental, doze coelhas foram infectadas, oralmente, com 1.000 ovos larvados de T. canis. O segundo grupo, constituído por cinco coelhas serviu como controle. Nos dias 7, 14, 21 e 28 pós-infecção (DPI) e no primeiro dia após o desmame (60 DPI), foram coletadas amostras de soro para análise. O teste de ELISA indireto foi realizado para avaliar a o índice de reatividade (IR) de anticorpos IgG anti-T. canis e para cálculo do índice de avidez (IA). A soroconversão nos animais ocorreu a partir do 140 DPI. Com exceção de um animal (aos 14 DPI), todos os IA foram classificados como de alta avidez. Após lactação, (60 DPI), todos os animais foram considerados como ELISA positivo. Em relação aos filhotes todos os animais foram sororreagentes e apresentaram alto IA. Entretanto, tanto o IR quanto o IA das fêmeas foram significativamente maiores que da sua progênie. Os resultados demonstraram a transmissão vertical de larvas. A correlação negativa entre os valores da IR das coelhas e de seus filhotes sugere a possibilidade de proteção passiva pela transferência de anticorpos maternais.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lundia Bin.pdf: 419626 bytes, checksum: 784b66188ef611a6dd9abf0fdddd231f (MD5) Previous issue date: 2013-08-23 / Toxocariasis is an important zoonosis mainly transmitted by ingestion of embryonated T. canis eggs, a parasite of dogs, present in soil. The nematode larvae can migrate by a variety of organs e may cause disturbances, including respiratory, hepatic, neurological, cardiac and ophthalmic problems. Diagnostic of toxocariasis is based on detection of anti-Toxocara antibodies, particularly IgG, by ELISA. Avidity of IgG has been employed in order to evaluate the phase of infection of a disease. However, experimental studies regard to toxocariasis are scarce in literature. This study aimed to evaluate the Toxocara canis-IgG avidity in experimentally infected rabbits, before and after lactation, and of their offsprings. Seventeen nullipar white New Zealand female rabbits were distributed in two groups. In experimentally infected group, 12 animals were inoculated by oral route with 1,000 T. canis embryonated eggs, whereas five animals were uninfected (control group). Blood samples collections were performed on +7, +14, +21 and +28 days post-infection (dpi) and on the first day following the weaning (60 dpi) in order to obtaining serum for ELISA analysis. ELISA indirect test was run in order to obtain the anti- T. canis antibody reactivity index (RI) as well as the avidity index (AI). Seroconversion was observed on 14 dpi, and all the evaluated animals showed a high AI, excepting one animal (on 14 dpi). After the weaning period, all the studied rabbit showed seroconversion. All the studied bunnies were considered positive for ELISA and showed a high AI. Nevertheless, both RI and AI of mothers were significantly higher than their offspring. According to the results, it was possible to demonstrate the vertical transmission of T. canis larvae. In addition, the negative correlation between the RI obtained from the rabbits and the bunnies pointed out the possibility of passive protection due to the maternal transfer of antibodies. / A toxocaríase é uma importante zoonose transmitida principalmente pela ingestão de ovos embrionados de T.canis, um parasito de cães, presente no solo. A larva do nematódeo pode migrar por vários órgãos do corpo e ocasionar distúrbios, como problemas respiratórios, hepáticos, neurológicos, cardíacos e oftálmicos. O diagnóstico é realizado principalmente com a detecção de anticorpos, em especial de Imunoglobulinas da classe G (IgG), pela técnica de ELISA. A avidez de IgG tem sido utilizada para avaliar a fase de infecção de uma doença. No caso da toxocaríase, estudos experimentais são escassos na literatura. O objetivo do estudo foi o de avaliar a avidez de anticorpos anti-Toxocara canis em coelhas infectadas experimentalmente, antes e após lactação, e de suas progênies. Foram utilizadas 17 coelhas da linhagem Nova Zelândia, brancas, nulíparas, distribuídas em dois grupos. No grupo experimental, doze coelhas foram infectadas, oralmente, com 1.000 ovos larvados de T. canis. O segundo grupo, constituído por cinco coelhas serviu como controle. Nos dias 7, 14, 21 e 28 pós-infecção (DPI) e no primeiro dia após o desmame (60 DPI), foram coletadas amostras de soro para análise. O teste de ELISA indireto foi realizado para avaliar a o índice de reatividade (IR) de anticorpos IgG anti-T. canis e para cálculo do índice de avidez (IA). A soroconversão nos animais ocorreu a partir do 140 DPI. Com exceção de um animal (aos 14 DPI), todos os IA foram classificados como de alta avidez. Após lactação, (60 DPI), todos os animais foram considerados como ELISA positivo. Em relação aos filhotes todos os animais foram sororreagentes e apresentaram alto IA. Entretanto, tanto o IR quanto o IA das fêmeas foram significativamente maiores que da sua progênie. Os resultados demonstraram a transmissão vertical de larvas. A correlação negativa entre os valores da IR das coelhas e de seus filhotes sugere a possibilidade de proteção passiva pela transferência de anticorpos maternais.