El objetivo principal de esta Tesis Doctoral es analizar cual es la frecuencia y la relevancia clínica de la persistencia de células linfoides T y de células mieloides originarias del receptor (quimerismo mixto) tras un trasplante alogénico de progenitores hemopoyéticos. La hipótesis de trabajo es comprobar si el estudio secuencial y cuantitativo del patrón de quimerismo mixto en linfocitos T y en neutrófilos permite predecir el rechazo del injerto alogénico o la recidiva leucémica, respectivamente.Para ello se ha estudiado el quimerismo hemopoyético en dos grupos de pacientes:1. Pacientes tratados con un trasplante alogénico en el que se eliminan de forma parcial los linfocitos T del inóculo (alo-TSP/ELT) mediante selección positiva de las células CD34+.2. Pacientes que recibieron un trasplante alogénico con acondicionamiento de intensidad reducida de tipo "no mieloablativo" (alo-TIR "no mieloablativo").En nuestros estudios hemos aplicado una técnica molecular basada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para el análisis automatizado de fragmentos de ADN repetitivos en tandem o microsatélites (PCR/STR multiplex), la cual permite analizar cuál es el componente del donante y del receptor en diferentes líneas celulares, así como un estudio cuantitativo de cada una de ellas. Las muestras analizadas fueron obtenidas de forma secuencial a partir de la sangre periférica. Para el análisis del quimerismo mediante PCR/STR utilizamos un preparado comercial (AmpFlSTR Profiler Plus PCR; Perkin-Elmer, Norwalk, CT, USA) que analiza nueve STR: D3S1358, vWA, FGA, D8S1179, D21S11, D18S51, D5S818, D13S317, D7S820, y un segmento del gen de la amelogenina para distinguir el cromosoma X o Y. La separación y detección de los productos amplificados por PCR se llevó a cabo mediante un secuenciador automático de ADN (ABI Prism 310 automated DNA sequencer; Applied Biosystems). El tamaño de los fragmentos se detecta automáticamente mediante dos métodos informáticos (ABI Prism GeneScan 2.0 y GenoTyper; Applied Biosystems). La tinción con diferentes colores permite identificar alelos de tamaño muy similar. Por último, la cuantificación del quimerismo mixto se efectúa calculando el porcentaje de componente del donante y del receptor utilizando unas fórmulas matemáticas específicas. Se considera quimerismo mixto cuando el porcentaje de linfocitos T o de neutrófilos del receptor es superior al 5%. La sensibilidad de la PCR/STR se sitúa entre el 1-5%.Las conclusiones de los dos estudios incluidos en esta Tesis Doctoral fueron:1. La técnica de la PCR/STR permite realizar un análisis secuencial y cuantitativo del quimerismo hemopoyético tras el trasplante alogénico de progenitores hemopoyéticos con un nivel de sensibilidad suficiente. 2. La eliminación de linfocitos T del producto de leucaféresis mediante selección positiva de las células CD34+ se asocia a un aumento significativo de la frecuencia de quimerismo mixto en linfocitos T, el cual puede ser predictivo de fallo de implante. En este mismo contexto, el quimerismo mixto mieloide se asocia a recidiva leucémica en pacientes con hemopatías malignas que afectan a esta línea celular (ej. leucemia mieloide crónica).3. El régimen de acondicionamiento "no mieloablativo" con fludarabina e irradiación corporal total 2 Gy permite alcanzar un implante hemopoyético completo y mantenido, pero con un retraso significativo del injerto en el compartimiento linfoide T, por lo que puede ser útil en pacientes con enfermedades malignas con índice proliferativo bajo o en remisión, pero ineficaz para el control de enfermedades hematológicas malignas en progresión.

En esta tesis, fruto de cinco años de trabajo, en los laboratorios de Hemoterapia y Coagulación así como en el de Bioquímica pretendemos el estudio y puesta a punto de las técnicas necesarias para medir algunas de las funciones plaquetarias; aplicación clínica en enfermos con sospecha de padecer procesos trombóticos y con ello su posible profilaxis así como su modificación en trombosis constituidas. Por fin, interrelación entre lípidos y funciones plaquetarias. Dentro de las funciones plaquetarias hemos estudiado la adhesividad y la agregación. Estas dos funciones en dos grupos de sujetos sanos y enfermos con predisposición o trombosis constituidas. Dentro de los enfermos predispuestos hemos estudiado arterioesclerosis, diabetes, enfermedades infecciosas, cáncer, corazón-pulmonares. Entre los sanos, hemos estudiado mujeres que tomaban anticonceptivos (combinación de d,l norgestrel - 0,5 mgs. y etinilestradiol - 0,05 mgs.). En el estudio lipídico se midieron por métodos químicos las cifras de lípidos totales, colesterina, triglicéridos, las lipoproteínas por electroforesis en acetato de celulosa y cromatografía en capa fina. Esta última nos ha servido para control de las determinaciones químicas. Se utilizó un inhibidor de la agregación «in vitro» dipiridamol para in-tentar sensibilizar la prueba y para comprobar si habría efectos diferencia-les sobre la agregación plaquetaria en individuos normales y en los diferentes enfermos. Junto con el Prof. Castillo estudiamos los efectos del Dipiridamol «in vitro», en sujetos sanos con medidas de la agregación previa y a las dos horas de 10 mgs. intramuscular.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000395298-Texto+Completo-0.pdf: 318741 bytes, checksum: 41a56bfc7c02a45cb7253931529c0a99 (MD5) Previous issue date: 2007 / Platelet and/or red blood cell transfusion is usually necessary immediately after the splenic artery ligature in patients with Immune Thrombocytopenic Purpura who are submitted to splenectomy. The purpose of this study is to test whether preoperative embolization of the splenic artery can reduce the need for transfusion of platelets and/or red blood cells. Twenty-seven consecutive patients submitted to splenectomy for purpura between October 1999 and March 2006 by the same surgical team were enrolled. The first 17 patients were not submitted to embolization and were compared to the next 10 patients in whom embolization was performed. The platelet count in the embolization group rose from an average of 7000 u/μl before the procedure to 75000 u/μl afterwards. There was no need for platelet and red blood cell transfusion in the group submitted to embolization compared to 11 patients (p=0. 001) with platelet transfusion and 8 patients (p=0. 01) with red blood cell transfusion in the group without preoperative embolization. We concluded that embolization of the splenic artery pre-splenectomy is a safe method to avoid blood transfusion in ITP patients. / A transfusão de plaquetas e/ou hemácias geralmente é realizada em pacientes submetidos à esplenectomia por Púrpura Trombocitopênica Imune (PTI). O objetivo deste estudo é testar se a embolização pré-operatória da artéria esplênica é eficaz na redução da necessidade de transfusão de hemácias ou plaquetas. Vinte e sete pacientes foram submetidos à esplenectomia por PTI de outubro de 1999 a março de 2006 pela mesma equipe cirúrgica. Os primeiros 17 pacientes não foram submetidos a embolização e foram comparados com os outros 10 indivíduos nos quais a embolização foi realizada. A contagem de plaquetas no grupo em que a embolização foi realizada subiu de uma média de 7000/mm ³ antes do procedimento, para 75000/mm³ após. Não foi necessário transfundir plaquetas ou glóbulos vermelhos no grupo submetido a embolização, comparando com 11 pacientes com transfusão de plaquetas (p=0,001) e 8 pacientes com transfusão de hemácias (p=0,01) no grupo sem embolização pré-operatória. Neste estudo, concluiu-se que a embolização pré-operatória da artéria esplênica é um método seguro e eficaz para evitar o uso de transfusões em esplenectomias por PTI.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-01-20Bitstream added on 2014-06-13T18:40:48Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_a_dr_jabo.pdf: 482879 bytes, checksum: 0e902aebca008cecff34c13a46883198 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Este trabalho avaliou o efeito de dietas contendo probiótico e espirulina sobre a formação de macrófagos, variáveis hematológicas e bioquímicas em tambaqui Colossoma macropomum jovens mantidos em duas densidades de estocagem. Previamente foi conduzido por três meses com três dietas alimentares - grupo controle, probiótico e espirulina; utilizando três caixas de água com capacidade de 500 L em sistema aberto de produção com renovação de água e filtragem biológica. Posteriormente, o experimento teve a duração de 12 dias, utilizando 36 caixas plásticas com capacidade de 50 L, com aeração e renovação de água constantes. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em um esquema fatorial 3 x 2 x 2 (dietas x densidade de estocagem x lamínulas), totalizando em 12 tratamentos, onde cada tratamento apresentava um grupo com peixes implantados lamínulas (I) e outro grupo com peixes sem implantes de lamínulas (S), apresentando três repetições cada, sendo: T1 – ração controle com densidade 5 kg/m3 com (I) e (S); T2 – 1g probiótico/kg ração com densidade 5 kg/m3 com (I) e (S); T3 – 5g espirulina/kg ração com densidade 5 kg/m3 com (I) e (S); T4 – ração controle com densidade 20 kg/m3 com (I) e (S); T5 – 1g probiótico/kg ração com densidade 20 kg/m3 com (I) e (S); T6 – 5g espirulina/kg ração com densidade 20 kg/m3 com (I) e (S). Foram coletados dois indivíduos por tratamento, nos intervalos de 0, 3, 7, 10 e 12 dias experimentais para avaliação das variáveis hematológicas, bioquímicas e contagem dos núcleos das células gigantes. Os resultados mostraram que a suplementação da dieta de tambaqui com probiótico ou espirulina não causaram alterações nos valores hematológicos, bioquímicos e na formação de célula gigante. Contudo, ocorreu maior... / The aim of this experiment was to evaluate the effect of diets contend probiotic and spirulina on small glass blades implanted, hematological and biochemistry parameters of tambaqui, Colossoma macropomum, juveniles, submitted the two different stockage density. The pay-experimental period was lead by three months with three alimentary diets – control group I, group contend probiotic in diet and group contend spirulina in diet; three boxes were used in a 500 L water capacity, in open system of production with water renewal and biological filtering. After, the experiment had the duration of twelve days; thirty six plastic boxes were used in a 50 L, with aeration and constant water renewal. The experimental design was a factorial design - 3 x 2 x 2 (diets x stockage density x small glass blades), totalizing in twelve treatments, presented a group with small glass blades implanted fish (I) and another group with fish without implantations of small glass blades (S), with three repetitions each, being: T1 - ration has controlled in density 5 kg/m3 with (I) and (S); T2 - ration contend 1g probiotic/kg in density 5 kg/m3 with (I) and (S); T3 - ration contend 5g spirulina/kg in density 5 kg/m3 with (I) and (S); T4 - ration has controlled in density 20 kg/m3 with (I) and (S); T5 - ration contend 1g probiotic/kg in density 20 kg/m3 with (I) and (S); T6 – ration contend 5g spirulina/kg in density 20 kg/m3 with (I) and (S). Were collected two fish for treatment, in the intervals of 0, 3, 7, 10 and 12 experimental days for evaluation of the hematological and biochemistry parameters, and counting of giant cells nucleus. The results had shown that the diet supplemented of with probiotic and spirulina had not caused alterations in the hematological and biochemistry parameters and in the formation of giant cell o tambaqui. However... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by MARIANA APARECIDA DE ALENCAR JERONYMO SIMÃO PEREIRA null (marijeronymo@hotmail.com) on 2016-01-08T17:53:03Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO PRONTA.pdf: 787804 bytes, checksum: 8dd3495fc630349abe21c6dcfb223556 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-01-11T19:19:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pereira_maajs_me_araca_par.pdf: 526159 bytes, checksum: 71ab4bbd6a9422ab372a2a3d227fd793 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-11T19:19:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pereira_maajs_me_araca_par.pdf: 526159 bytes, checksum: 71ab4bbd6a9422ab372a2a3d227fd793 (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do trabalho foi avaliar a influência de diferentes frequências de treinamento sobre as concentrações séricas de lactato, CK, AST e LDH e sobre os parâmetros clínicos e hematológicos de equinos após exercício físico de alta intensidade e curta duração. Amostras de sangue venoso foram obtidas de 16 equinos da raça Quarto de Milha, divididos em dois grupos: grupo de treinamento regular (GTR) e grupo de treinamento esporádico (GTE), em sete diferentes momentos: 30 minutos antes do exercício (M0), imediatamente após (M1), 30 minutos (M2), uma (M3), duas (M4), seis (M5) e 24 (M6) horas após o exercício. Diferenças entre os grupos foram observadas em relação ao VG, à concentração de hemoglobina, ao VCM e ao número de linfócitos, inclusive no repouso. Entre os momentos, no GTE foram observadas diferenças significativas após o exercício quanto ao lactato, VG, PPT, número de granulócitos e LDH e no GTR quanto ao VG, contagem total de hemácia, concentração de hemoglobina e LDH. Conclui-se que os equinos avaliados apresentaram alterações nas concentrações séricas de lactato e enzimas musculares e nos parâmetros clínicos e hematológicos após o exercício. A menor magnitude de elevação após o exercício, observada no GTR, quanto às FC, FR e ao VG sugere que esses animais estariam melhor adaptados ao exercício imposto. A baixa magnitude das elevações das concentrações de CK, AST e LDH e o rápido retorno aos valores basais, inclusive do lactato, das FC e FR e dos parâmetros hematológicos, sugerem que os animais avaliados estavam condicionados e aptos a realizar o tipo de exercício estabelecido, não havendo diferença entre o treinamento regular e o treinamento esporádico. / The objective was to evaluate the influence of different frequencies of training on serum concentrations of lactate, CK, AST and LDH and on clinical and hematological parameters of horses after exercise of high intensity and short duration. Venous blood samples were obtained from 16 Quarter Horses, divided into two groups: regular training group (GTR) and sporadic training group (GTE) in seven different times: 30 minutes before exercise (M0), immediately after (M1), 30 minutes (M2), one (M3), two (M4), six (M5) and 24 (M6) hours after exercise. Differences between groups were observed in VG, hemoglobin concentration, VCM and number of lymphocytes, including on resting. Between the moments, in GTE significant differences were observed after exercise for lactate, VG, PPT, granulocyte number and LDH and in GTR for VG, total count of red blood cells, hemoglobin concentration and LDH. We conclude that the assessed horses showed changes in serum concentrations of lactate and muscle enzymes and in clinical and hematological parameters after exercise. The lower magnitude of elevation after exercise, observed in GTR, for HR, RR and VG suggests that these animals were better adapted to exercise. The low magnitude of elevations of CK, AST and LDH concentrations and the rapid return to baseline, including lactate, HR, RR and hematological parameters suggest that evaluated animals were conditioned and able to perform the established type of exercise, with no difference between regular training and the sporadic training. / FAPESP: 2014/09362-5

Orientadora: Maria José Tavares Ranzini de Paiva / Banca: Áureo Evangelista Santana / Banca: Ângela Teresa da Silva e Souza / Resumo: Este trabalho teve como objetivo determinar a Concentração Letal Média (CL50) através do teste de toxicidade aguda em tilápia de linhagem "Tailandesa", Oreochromis niloticus, exposta a diversas concentrações de cloreto de mercúrio (HgCl2) na água. O teste foi conduzido no laboratório de Toxicologia Aquática do Instituto de Pesca - SP, em ambiente climatizado. A metodologia foi padronizada de acordo com as recomendações expressas em APHA et al. (1989). Neste teste foram utilizados alevinos com peso médio de 0,41 ± 0,12 g e comprimento médio de 2,46 ± 0,21 cm. Os peixes foram mantidos em aquários contendo 5 litros de água e as concentrações de mercúrio correspondente à concentração desejada. Os aquários foram dispostos em uma bateria de três réplicas contendo 5 concentrações tóxicas: 0,037; 0,185; 0,370; 0,740 e 0,925 mg.L-1 Hg, e mais um grupo controle. O teste foi conduzido por um período de 96 horas e a ocorrência de mortalidade registrada a cada 24 horas. Com os dados obtidos ao final do experimento, foi possível determinar, pelo método estatístico Trimmed Spearman Karber (HAMILTON et al., 1977) a concentração letal média (CL50-96) de 0,1961 mg.l-1 Hg para alevinos de tilápia expostos ao cloreto de mercúrio / Abstract: This paper reports the median lethal concentration (LC50-96) of mercury by semi-static acute toxicity test, in "Tailand" tilapia, Oreochromis niloticus. The challenge was conduct in the Toxicology Laboratory - Instituto de Pesca, SP, with constant temperature. The methods used were those recommended by APHA et al. (1986) and the tests performed with alevins (mean length of 2.46+0.21 cm and mean weight of 0.41+0.12 g). The fish were kept in eighteen 5-liter glass aquaria fill with dischlorinate water plus the mercury of the following concentrations (control, 0.037, 0.185, 0.370, 0.740, 0.925 mg.L-1Hg) during 96 hours. The mortality was registered each 24 hours. Was determined, by the Trimmed Spearman Karber statistic method (HAMILTON et al. 1977). The median lethal concentration (LC50-96) of 0.1961 mg.L-1Hg of mercury for tilapia alevin / Mestre

Orientador: Luciane Cruz Lopes / Coorientador: Marcus Tolentino Silva / Banca: Tais Freire Galvão / Banca: Patrícia de Carvalho Mastroianni / Resumo: Introdução: Alguns pacientes com dengue tendem a desenvolver plaquetopenia durante a infecção ficando vulneráveis às manifestações hemorrágicas e outras complicações. Fatores associados ao desenvolvimento de plaquetopenia são desconhecidos. Objetivo: Identificar os fatores associados ao aumento do risco de plaquetopenia em casos confirmados de dengue. Delineamento: Estudo de caso-controle. Contexto: O sistema de Informação de Agravos de Notificações (SINAN) foi a base de dados utilizada para identificação dos pacientes com dengue da região metropolitana de Campinas, Brasil. Todas as informações desta base de dados foram cruzadas com as informações fornecidas pela Secretaria Municipal de Saúde de Campinas para confirmação sorológica e hemograma dos pacientes. Método: Este estudo identificou 48.290 notificações no SINAN das quais 7.873 pacientes tinham dengue confirmada por sorologia. Excluindo-se aqueles com plaquetose e com dados incompletos e aqueles sem hemograma disponível, a amostra foi composta por 387 pacientes (156 casos e 231 controles). Considerou-se como caso a contagem de plaquetas abaixo de 150.000/ mm3 (plaquetopenia) e como controle os resultados normais (de 150.000/mm3 a 400.000/mm3). As seguintes variáveis foram investigadas quanto associação com plaquetopenia: sexo, idade, etnia, escolaridade e alterações hematológicas. Calculou-se o odds ratio (OR) como medida de associação, o qual foi ajustado por sexo, idade e dia da coleta em regressão logística. Proc... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: Some patients with dengue tend to develop thrombocytopenia during an infection and are vulnerable to hemorrhagic manifestations and other complications. Factors associated with the development of thrombocytopenia are unknown. Objective: To identify the factors associated with the increased risk of thrombocytopenia in confirmed cases of dengue. Design: Case-control study. Settings: The Notification of Injury Information System (SINAN) was the database used to identify patients with dengue in the metropolitan region of Campinas, Brazil. All the information in this database was cross-checked with the information provided by the Municipal Health Department of Campinas for serological confirmation and hemogram of the patients. Method: This study identified 48,290 reports in SINAN of which 7,873 patients had confirmed serology. Excluding those with platelet count and incomplete data and those with no available blood count, the sample consisted of 387 patients (156 cases and 231 controls). Platelet counts below 150,000 / mm3 (thrombocytopenia) and control of normal results (from 150,000 / mm3 to 400,000 / mm3) were considered as the case. The following variables were investigated regarding the association with thrombocytopenia: sex, age, ethnicity, schooling and hematological alterations. The odds ratio (OR) was calculated as a measure of association, which was adjusted for sex and age in a logistic regression. Sensitivity analysis was performed by resampling (bootstrap). Results: The mean age of the participants was 35.7 ± 19.0, which was composed by 168 men, 31.7% by blacks / browns / indigenous people and 71.4% were not in high school. The prevalence of thrombocytopenia was 40.3% (95% CI 35.5 - 45.3%). The ensuing factors indicated association with... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-24T23:22:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 287244.pdf: 1340162 bytes, checksum: e2080b666c4e2d50f67647da5bbe0429 (MD5) / O cultivo intensivo de surubim híbrido no Brasil é responsável pelo aparecimento de enfermidades e consequentemente perdas durante o cultivo, porém, pouco se sabe sobre o agente causador. O objetivo deste estudo foi isolar e caracterizar o agente patogênico causador de mortalidades em cultivo de surubins, e comprovar por meio de desafio experimental a sua virulência. Foram coletados dez peixes em fazenda do estado de Mato Grosso do Sul (Brasil), e isoladas 14 cepas de bactérias hemolíticas do rim (8) e do cérebro (6), caracterizadas como Aeromonas hydrophila hydrophila. Esta cepa foi utilizada no desafio experimental onde 144 surubins, com 98,1±23,6 g, foram desafiados com 1mL de salina e 2x 102, 104, 106 e 108 UFC de A. hydrophila·mL-1. Os peixes desafiados com maior concentração de bactérias apresentaram maior prevalência dos sintomas externos e internos e mortalidade de 50±12,5% após 96 h. Verificou-se que o aumento na concentração de A. hydrophila usada no desafio resultou em diminuição no percentual de hematócrito e do número de eritrócitos, linfócitos e eosinófilos, bem como aumento no número de monócitos, neutrófilos, títulos de aglutinação e atividade antimicrobiana do soro. Conclui-se que A. hydrophila hydrophila foi responsável por sintomas característicos de septicemia hemorrágica bacteriana (BHS), além de alterações hematológicas e imunológicas que resultaram em mortalidade do peixe.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-22T15:57:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 227224.pdf: 360205 bytes, checksum: 7f5f9aacd844e90d7535ea52e7562c3c (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Aquicultura / Made available in DSpace on 2012-10-24T06:29:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 261119.pdf: 382322 bytes, checksum: 13df7cc289bac75f2e60a2ca3b935800 (MD5)