Protozoários do gênero Acanthamoeba estão presentes nos mais variados ambientes, sendo esta a ameba mais isolada entre as amebas de vida livre (AVL). Acanthamoeba spp. pode causar encefalomielite e outras doenças graves em animais e seres humanos. Os fatores que contribuem para infecções por Acanthamoeba incluem biologia parasitária, diversidade genética, propagação no meio ambiente e suscetibilidade do hospedeiro. Acanthamoeba pode hospedar diversos microrganismos como: algas, bactérias, fungos, protozoários e vírus. Os estudos sobre as interações entre Acanthamoeba e microrganismos tem aumentado nos últimos anos, principalmente para entender como certas bactérias resistem à fagocitose de seus hospedeiros. Existem poucos estudos sobre adesão e a interação in vitro de Acanthamoeba com macrófagos, que são a primeira linha de defesa em doenças infecciosas. Neste trabalho foi proposto o isolamento de AVL do gênero Acanthamoeba de amostras clínicas de cães. Os resultados deste trabalho foram: 14 isolados de Acanthamoeba confirmados pela PCR, sendo o alvo o gene do 18S rDNA, de mucosa nasal e lesões cutâneas de 96 amostras coletadas de 48 cães. Destes, 13 isolados de Acanthamoeba foram sequenciados, o genótipo foi determinado e o potencial de patogenicidade em células VERO de 8 isolados foi avaliado. Os isolados eram pertencentes aos genótipos T3 (3 amostras), T4 (5 amostras), T5 (4 amostras) e T16 (1 amostra). Os 14 isolados de Acanthamoeba continham pelo menos uma espécie bacteriana internalizada e um isolado continha todas as espécies de endossimbiontes pesquisados. Observou-se que 79% dos isolados de Acanthamoeba hospedavam Legionella pneumophila, 50% Mycobacterium, 79% Pseudomonas e 57% Enterobacteriaceae. Os isolados de Acanthamoeba foram co-cultivados com macrófagos e observou-se à aderência em apenas 1h de contato, confirmando que Acanthamoeba é contato dependente. Este estudo descreveu os primeiros isolados de Acanthamoeba de amostras clínicas provenientes de cães. Também foi o primeiro relato da presença de endossimbiontes neste tipo de isolado realizado na América Latina. Neste estudo foi isolado pela primeira vez o genótipo T16 de amostra clínica. A importância deste estudo está no fato de verificar a presença de Acanthamoeba potencialmente patogênica em amostras clínicas de animais e pesquisar bactérias patogênicas internalizadas nestas amebas. Podendo estes microrganismos estar envolvidos em doenças infecciosas e futuras complicações como doenças graves em mamíferos. / Protozoa of the genus Acanthamoeba are present in diverse environments and are the most common free-living amoeba (FLA). Acanthamoeba spp. cause encephalitis and can cause severe illness in animals and humans. The factors that contribute to infections include Acanthamoeba parasite biology, genetic diversity, spreading in the environment and host susceptibility. Acanthamoeba may host various microorganisms such as algae, bacteria, fungi, protozoa and viruses. Studies regarding the interactions between Acanthamoeba and microorganisms have increased in recent years, mainly to understand how certain bacteria resist phagocytosis by their hosts. There are few studies on adherence and in vitro interaction of Acanthamoeba with macrophages, which are the first line of defense in infectious diseases. In this study, we proposed the isolation of the FLA Acanthamoeba from clinical samples from dogs. We found 14 Acanthamoeba isolates confirmed by PCR and by the 18S gene target rDNA in nasal mucosa and skin lesions out of 96 samples collected from 48 dogs. From this 14 isolates, 13 Acanthamoeba isolates were sequenced and the genotype was determined. Regarding the potential for pathogenicity in VERO cells, 8 isolates was assessed. The isolates belonged to genotype 3 (3 samples), T4 (5 samples), T5 (4 samples) and T16 (1 sample). The 14 isolates of Acanthamoeba contained at least one bacterial species internalized and one isolate contained all endosymbionts species studied. It was observed that 79% of isolates of Acanthamoeba carryng Legionella pneumophila, Mycobacterium 50%, 79% Pseudomonas and 57% Enterobacteriaceae. Acanthamoeba isolates were co-cultured with murine macrophages and adherence was observed in 1h of contact, confirming that Acanthamoeba interact with defense cells in a contact-dependent manner. This study describes the first clinical isolates of Acanthamoeba samples from dogs. It was also the first report of the presence of this type of endosymbionts isolated held in Latin America. As far as we know, this is the first study to isolate a T16 genotype amoeba from clinical sample. The importance of this study lies on the fact verify the presence of potentially pathogenic Acanthamoeba in samples from animals and search pathogenic bacteria internalized by these amoebae. These microorganisms may be involved in infectious diseases in mammals.

Acanthamoeba spp. são patógenos protistas de vida livre, capazes de causar ceratite grave e encefalite granulomatosa fatal. Trofozoíto é a forma infectiva de Acanthamoeba spp. e pode provocar infecções em uma variedade de hospedeiros mamíferos e seres humanos, como resultado da complexa interação patógeno-hospedeiro. O dano causado por trofozoítos em infecções da córnea ou do cérebro é o resultado de vários mecanismos patogênicos diferentes não elucidados a nível molecular até agora. Neste trabalho, descrevemos os resultados da caracterização genotípica de isolados ambientais de Acanthamoeba spp. e a identificão por análises proteômicas do repertório de proteínas expressas por trofozoítos de Acanthamoeba polyphaga. Nossos resultados permitiram a caracterização de 13 isolados ambientais de Acanthamoeba spp. obtidos da água de piscinas, que foram classificados em nível de genótipo com base na análise da sequência do gene da subunidade menor do rDNA. Nove dos 13 isolados foram identificados como pertencentes ao genótipo T5, três ao genótipo T4 e um ao genótipo T3. Vários genótipos têm sido relatados em todo o mundo como agentes causadores de ceratite amebiana, incluindo os genótipos T3, T4 e T5. O presente estudo indica que o genótipo T5 é um contaminante comum na água de piscinas. Este trabalho também estabeleceu uma ampla análise do repertório de proteínas expressas por trofozoítos de A. polyphaga, baseado no conjunto de estratégias por 2-DE MS/MS e LC-MS/MS. Foram identificadas 192 proteínas não redundantes. Um mapa proteômico de referência de A. polyphaga na faixa de pH 3-10 foi produzido e de 370 spots resolvidos, 136 proteínas foram identificadas. A classificação funcional das proteínas revelou diversas proteínas com relevância potencial para a sobrevivência do parasita e infecção de hospedeiros mamíferos, incluindo proteínas de superfície e proteínas relacionadas aos mecanismos de defesa. Este estudo descreveu a primeira análise proteômica abrangente do estágio de trofozoíto de Acanthamoeba spp. e fornece bases para estudos prospectivos, comparativos e funcionais de proteínas envolvidas nos mecanismos moleculares de sobrevivência, desenvolvimento e patogenicidade de Acanthamoeba spp. / Acanthamoeba spp. are free-living protist pathogen, capable of causing a blinding keratitis and fatal granulomatous encephalitis. Trophozoite is the form infective of Acanthamoeba spp. and can provoke infections in a variety of mammalian hosts and humans, as result of complex interaction host-pathogen. The damage caused by trophozoites in human corneal or brain infections is the result of several different pathogenic mechanisms not elucidated at the molecular level so far. Here, we describe the results of the characterization genotypic of environment isolates of Acanthamoeba spp. and we performed proteomic analysis to identify the repertoire of proteins expressed by trophozoites of an environmental strain of Acanthamoeba polyphaga. Our results allowed the characterization of 13 Acanthamoeba isolates from swimming pools water that were classified at the genotype level based on the sequence analysis of the small-subunit rDNA gene. Nine of the 13 isolates were genotype T5, three were genotype T4, and one was T3. Several genotypes have been reported worldwide as causative agents of keratitis, including genotypes T3, T4, and T5. The present study indicates that genotype T5 is a common contaminant in swimming-pool water. This work also established a comprehensive analysis of the proteins expressed by A. polyphaga trophozoites based on complementary 2-DE MS/MS and gel-free LC-MS/MS approaches. Overall, 192 nonredundant proteins were identified. An A. polyphaga proteomic map in pH range 3-10 was produced, with protein identification for 136 out of 370 resolved spots. Functional classification of identified proteins revealed several proteins with potential relevance for parasite survival and infection of mammal hosts, including surface proteins and proteins related to defense mechanisms. This study describes the first comprehensive proteomic survey of the trophozoite infective stage of an Acanthamoeba species, and provides foundations to prospective, comparative and functional studies of Acanthamoeba proteins involved in molecular mechanisms of survival, development, and pathogenicity.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-01-28T10:54:52Z No. of bitstreams: 1 2012_IzabellySaraivaSant’Ana.pdf: 4648030 bytes, checksum: c1587773e250a72ce5349091135d8e7c (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-02-07T12:34:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_IzabellySaraivaSant’Ana.pdf: 4648030 bytes, checksum: c1587773e250a72ce5349091135d8e7c (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-07T12:34:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_IzabellySaraivaSant’Ana.pdf: 4648030 bytes, checksum: c1587773e250a72ce5349091135d8e7c (MD5) / Hemiparasitas aéreas estabelecem conexões vasculares com suas plantas hospedeiras por meio do haustório para obter água e nutrientes minerais. Entre os nutrientes, nitrogênio (N) foi sugerido o mais limitante para o desenvolvimento dessas plantas. Os objetivos desse estudo foram (1) analisar estruturalmente a conexão do haustório secundário da hemiparasita Phthirusa ovata em ramos da hospedeira, (2) verificar as respostas fisiológicas da hemiparasita crescendo em uma hospedeira fixadora de N e outra não-fixadora e (3) as implicações do parasitismo nas respostas fisiológicas das duas hospedeiras. Para o estudo anatômico, foram coletadas raízes epicorticais e haustórios secundários de P. ovata crescendo em galhos de Dalbergia miscolobium. O estudo das respostas fisiológicas foi realizado na Reserva Ecológica do IBGE, em Brasília-DF, onde foram selecionados indivíduos de P. ovata na hospedeira fixadora de N, D. miscolobium, e não-fixadora, Byrsonima verbascifolia, e indivíduos parasitados e não-parasitados dessas hospedeiras. Foram medidos diversos parâmetros fisiológicos e a concentração foliar de macro (N, P, K, Ca, Mg e S) e micronutrientes (Zn, Fe, Mn, Cu e B). Nas secções anatômicas, observou-se que a penetração do haustório ocorreu pelas lenticelas da casca da hospedeira. Sugere-se que lenticelas e fissuras na casca da hospedeira facilitariam a penetração. Estruturalmente, se destacam grupos de braquiesclereídes com cristais prismáticos (sendo que os periféricos são células cristarque) e ocasionalmente, cristais no tecido parenquimático que podem ser caracteres distintivos da espécie. Na interface parasita-hospedeira, há células parenquimáticas comuns e células sugadoras de P. ovata em contato com o xilema secundário da hospedeira. Nessa região parasitada, houve a formação de tilos nos elementos de vaso e acúmulo de compostos fenólicos nas células do parênquima que são mecanismos de defesa da hospedeira a esta infestação parasítica. Dessa maneira, esse estudo mostrou que a conexão estabelecida por P. ovata não é xilema-xilema, mas envolve células parenquimáticas na interface. Quanto às respostas fisiológicas, P. ovata apresentou maior conteúdo de N foliar, clorofila a, clorofila total, carotenóides, maior taxa fotossintética e condutância estomática na hospedeira fixadora de N, indicando respostas positivas dessa hemiparasita a maior disponibilidade de N. O parasitismo de P. ovata afetou a eficiência intrínseca do uso da água e taxa de assimilação de CO2 da hospedeira D. miscolobium na estação seca, sem efeitos aparentes na estação chuvosa. Por outro lado, a presença da hemiparasita levou a uma redução no conteúdo de potássio foliar, razão clorofila total/carotenóides, taxa de assimilação de CO2 e condutância estomática de B. verbascifolia na estação chuvosa e do quenching não-fotoquímico relacionado à fotoproteção ((I)(NPQ) na estação seca. Esses resultados indicam que as hospedeiras foram diferentemente afetadas pela presença da hemiparasita, tendo maiores implicações em B. verbascifolia. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Mistletoes establish vascular connections with their host plants through the haustorium to acquire water and mineral nutrients. Nitrogen (N) has been suggested as the most limiting nutrient to the development of those hemiparasites. The objectives of this study were (1) to analyze structurally the connection that is established between the secondary haustorium of the mistletoe Phthirusa ovata and branches of the host plant; (2) check the mistletoe's physiological responses on a N-fixing and a non-fixing host and (3) the implications of the parasitism in the physiological responses of those two hosts. For the anatomical study epicortical roots and secondary haustoria of P. ovata were collected from plants attached to Dalbergia miscolobium's branches. The study of physiological responses was conducted at the IBGE Ecological Reserve, Brasilia-DF. P. ovata individuals on N-fixing (D. miscolobium), and non-fixing (Byrsonima verbascifolia) hosts, and parasitized and non-parasitized individuals of these hosts were sampled. Various physiological parameters were measured and leaf concentrations of macro (N,P, K, Ca, Mg and S) and micronutrients (Zn, Fe, Mn, Cu and B) were determined. In anatomical sections, it was observed that the haustorium penetrated the host through the bark lenticels. It is suggested that lenticels and fissures in the host bark would therefore facilitate penetration. Structurally, groups of brachysclereids with prismatic crystals stand up (peripheral ones are cristarque cells) and occasionally crystals were found in the haustorium parenchyma; they may be distinctive characters for this species. In the host-parasite interface, parenchymatic cells and sucker cells of P. ovata were in contact with the host's secondary xylem. In this parasitized region, there were formation of tylose in the vessel elements and accumulation of phenolic compounds in the parenchyma cells, which could be considered as host defense mechanisms against this parasitic infestation. Thus, this study showed that P. ovata does not establish a direct xylem-xylem connection with the host plant. An interface of parenchymatic cells of P. ovata is formed between the xylem of the hemiparasite and the xylem of the host. Regarding the physiological responses, P. ovata showed higher leaf concentrations of nitrogen, chlorophyll a, total chlorophyll, carotenoids, higher photosynthetic rate and stomatal conductance in the N-fixing host, indicating positive responses of this mistletoe to increased N availability. The parasitism by P. ovata negatively affected intrinsic water-use efficiency and CO2 assimilation rates of D. miscolobium host in the dry season, without apparent effects in wet season. In contrast, the mistletoe's presence led to a reduction in leaf concentrations of potassium, total chlorophyll / carotenoid ratios, CO2 assimilation rates and stomatal conductance of B. verbascifolia in the wet season and in non-photochemical quenching related to photoprotection ((I)NPQ) in the dry season. These results indicate that hosts were differently affected by the mistletoe presence, with major implications to B. verbascifolia.

Trichodysplasia spinulosa (TS) é uma doença proliferativa de pele observada em pacientes imunocomprometidos. Caracteriza-se pela formação de espinhas de queratina conhecidos como espículas, acantose epidérmica, dilatação do folículo piloso, queratose actínica, queda dos pelos, pápulas foliculares e, que normalmente, se manifestam na região facial do paciente e extremidades do corpo (constantemente confundida com danos por exposição prolongada ao sol). A TS resulta da infecção ativa com o poliomavírus TSassociado (TSPyV), onde observa-se alta carga viral, expressão de proteína do vírus e formação de partículas. Este estudo desenvolveu métodos moleculares de detecção e sequenciamento do genoma total e parcial de TSPyV e utilizou-se destes métodos para determinar padrões de excreção e viremia em indivíduos imunocompromentidos e imunocompetentes, bem como explorar possíveis vias de transmissão. Ainda, características genéticas e filogenéticas do TSPyV também foram determinadas. Apesar de observamos alta taxa de excreção urinaria em indivíduos imunocomprometidos (57,7%), o vírus não foi encontrado em amostras de água do meio ambiente. Ainda em termos de excreção urinária do TSPyV, apenas 1,4% dos indivíduos imunocompetentes apresentaram virúria (diferente do que se observa para os poliomavirus JCPyV e BKPyV), mas o vírus foi encontrado em leite materno, sugerindo assim a possibilidade de haver transmissão vertical do TSPyV. As análises filogenéticas revelaram a existência de 2 linhagens de vírus circulantes em nosso meio, com características distintas dos já descritos na literatura. As diferenças observadas foram suficientes para que os vírus sejam caracterizados como novos genótipos circulantes de TSPyV. / Trichodysplasia spinulosa (TS) is a proliferative skin disease seen in immunocompromised patients. It is characterized by the formation of keratin spines known as spicules, epidermal acanthosis, hair follicle dilatation, actinic keratosis, hair loss, follicular papules and, which usually manifest in the facial region and extremities of the body (constantly confounded with damage from prolonged exposure to the sun). TS results from active infection with TS-associated polyomavirus (TSPyV), where high viral load, virus protein expression and particle formation are observed. This study developed molecular methods for detection and sequencing the total and partial genome of TSPyV and, employing these methods, determined patterns of excretion and viremia in immunocompromised and immunocompetent individuals, as well as explored possible transmission pathways. Genetic and phylogenetic characteristics were also determined. Although we observed high rate of urinary shedding in immunocompromised individuals (57.7%), the virus was not found in environmental water samples. Also in terms of urinary excretion of TSPyV, only 1.4% of immunocompetent individuals presented viruria (different from what is observed for polyomaviruses JCPyV and BKPyV), but the virus was found in breast milk, thus suggesting the possibility of vertical transmission. Phylogenetic analyzes revealed the existence of 2 circulating virus strains in our country, with different characteristics from those already described in the literature. The differences seem to be sufficient to characterize the viruses as new genotypes of TSPyV.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Tradicionalmente o controle da transmissÃo humana do Trypanosoma cruzi à realizado pela aplicaÃÃo de inseticidas de aÃÃo residual. Entretanto, o conhecimento sobre o papel desempenhado por hospedeiros domÃsticos, peridomiciliares e silvestres sÃo fundamentais para a determinaÃÃo da manutenÃÃo e/ou dispersÃo do T. cruzi. Esta pesquisa teve por objetivo caracterizar a importÃncia dos reservatÃrios domÃsticos, peridomiciliares e silvestres na transmissÃo de T. cruzi na zona rural do municÃpio de Tauà (CE), inserido em Ãrea de Caatinga, com Ãnfase nos ambientes colonizados por Triatoma brasiliensis. Dentre os animais domiciliares e peridomiciliares foram considerados cÃes, gatos, suÃnos, caprinos e ovinos de 83 unidades domiciliares (UDs). No ambiente silvestre foi realizada captura e exame de pequenos mamÃferos em trÃs locais, com diferentes graus de antropofizaÃÃo, e tambÃm a captura de triatomÃneos. A pesquisa de infestaÃÃo domiciliar por triatomÃneos foi realizada em 251 UDs. Foram realizados exames parasitolÃgicos diretos em insetos e mamÃferos, sorolÃgicos em animais domiciliares e peridomiciliares, PCR Multiplex em reservatÃrios silvestres e pesquisa de fonte alimentar em insetos silvestres. A proporÃÃo de infecÃÃo para os suÃnos foi de 6% (2/34), ovinos 1% (1/102), gatos 2,4% (1/41), cÃes 38% (20/53). Foram capturados nove espÃcies dentre roedores e marsupiais. O Trichomys laurentius, com 74% (83/112), foi a mais abundante e amplamente distribuÃda no ambiente silvestre, seguida por Kerodon rupestres 10% (11/112) e Didelphis albiventris 3,5% (4/112). Foram capturados 749 triatomÃneos na pesquisa domiciliar, sendo 369 (49,3%) de T. brasiliensis e 377 (50,3%) de Triatoma pseudomaculata. Apenas espÃcimes de T. brasiliensis estavam infectados por T. cruzi (25, 12,8%). Destes 3 (5,9%) estavam no intradomicÃlio e 22 (14%) no peridomicÃlio. Dos 166 triatomÃneos silvestres capturados, 132 (79%) eram ninfas e outros 35 (21%) adultos. Destes, uma ninfa de 5 estÃdio e um macho encontravam-se infectados pelo T. cruzi. O T. brasiliensis partilha o ambiente natural com T. laurentius, K. rupestres, D. albiventris, M. domestica, G. spixii, W. pyrrhorinos, C. semistriatus e M. musculus (animais capturados) e com G. spixii, K. rupestres, T. oreadicus e T. merianae (identificados via fonte alimentar), alÃm de animais observados durante as capturas (Athene cuniculariae e Felis catus) e confirmados via fonte alimentar (C. hircus e G. gallus). A circulaÃÃo do T. cruzi entre o ambiente silvestre, peridomiciliar e intradomiciliar em mamÃferos e insetos enfatiza a possibilidade de ocorrÃncia de casos da doenÃa de Chagas na regiÃo estudada, bem como a dificuldade e real necessidade de seu controle em Ãreas do semiÃrido no Nordeste Brasileiro. / Traditionally, the control of human transmission of Trypanosoma cruzi is accomplished by the application of insecticides with residual action. However, knowledge about the role of hosts domestic and wild outdoor environments are critical for determining the maintenance and / or dispersion of T. cruzi. This study aimed to characterize the importance of domestic reservoirs, wild and peridomestic transmission of T. cruzi in the rural municipality of Taua (EC), inserted in Caatinga area, with emphasis on environments colonized by Triatoma brasiliensis. Among the animals household and neighbors were considered dogs, cats, pigs, goats and sheep 83 housing units (DUs). In the wild capture and examination was performed on small mammals at three sites with different degrees of antropofizaÃÃo, and also the capture of insects. The survey of domiciliary infestation by triatomines was performed in 251 DUs. Direct parasitological examinations were performed in insects and mammals, animals in serologic household and neighbors, Multiplex PCR on wild reservoirs and research of wild food source for insects. The proportion of infection of pigs was 6% (2/34), ovine 1% (1/102), cats 2.4% (1/41) dogs 38% (20/53). We captured nine species among rodents and marsupials. The Trichomys laurentius, with 74% (83/112), was the most abundant and widely distributed in the wild, followed by rock Kerodon 10% (11/112) and Didelphis albiventris 3.5% (4/112). 749 triatomines were captured in the household survey, with 369 (49.3%) of T. brasiliensis and 377 (50.3%) of Triatoma pseudomaculata. Only specimens of T. brasiliensis were infected with T. cruzi (25, 12.8%). Of these 3 (5.9%) were inside the home and 22 (14%) outside the home. Of the 166 triatomines captured, 132 (79%) were nymphs and other 35 (21%) adults. These, a fifth instar nymph and one male were infected with T. cruzi. The T. brasiliensis sharing the natural environment with T. laurentius, K. rock, D. albiventris, M. domestica, G. spixii, W. pyrrhorinos, C. and M. semistriatus musculus (captured animals) and G. spixii, K. cave, T. oreadicus and T. merianae (identified via food source), and animals observed during the catch (Athene cuniculariae and Felis catus) and confirmed via food source (C. hircus and G. gallus). The movement of the T. cruzi between sylvatic, peridomestic household in mammals and insects emphasizes the possibility of cases of Chagas disease in the studied region, as well as the difficulty and real necessity for its control in semi-arid areas in Northeast Brazil.

Estudos referentes à dinâmica espaço-temporal da interação hospedeiro-parasitóide são de fundamental importância para o desenvolvimento de técnicas de manejo de insetos em agroecossistemas. Uma recente abordagem têm sido o estudo de populações através da simulação computacional dos indivíduos que a compõem. Este método tem possibilitado a incorporação de importantes características como individualidade e estrutura espacial nos modelos teóricos. Neste sentido, o presente estudo visou a elaboração de um modelo baseado no comportamento individual para simular a dinâmica espaço-temporal da interação Spartocera dentiventris (Berg) (Hemiptera: Coreidae), inseto associado à cultura do fumo, e de seu inimigo natural, o parasitóide de ovos Gryon gallardoi (Brethes) (Hymenoptera: Scelionidae). Para a elaboração do modelo, estudos sobre a bioecologia de G. gallardoi foram desenvolvidos, de modo a investigar (i) o efeito da temperatura no seu desenvolvimento e viabilidade, (ii) a mortalidade de imaturos em campo, (iii) os parâmetros reprodutivos e a longevidade dos adultos, (iv) os padrões de dispersão em campo e (v) a resposta funcional e a interferência mútua dos parasitóides em diferentes densidades de ovos de S. dentiventris. No intuito de avaliar a capacidade de predição do modelo elaborado, a dinâmica espaço-temporal de ovos sadios e parasitados de S. dentiventris foi acompanhada em um cultivo de fumo, estabelecido em área experimental do Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Agronomia da UFRGS, Porto Alegre (30o01’S e 51o13’O), RS, Brasil A viabilidade do desenvolvimento dos parasitóides na faixa de 20 a 30oC não diferiu significativamente, alcançando 98,8%. O tempo de desenvolvimento ovo-adulto de machos e fêmeas foi inversamente proporcional ao aumento da temperatura. Os valores estimados para o limite térmico inferior de desenvolvimento e para a constante térmica foram 15,5oC e 185,19GD para machos e 15,6oC e 192,31GD para fêmeas. Diversos fatores afetam o sucesso de imaturos de G. gallardoi em campo, sendo que o malogro e a predação por sugadores são os principais responsáveis pela emergência de apenas 37,87% dos adultos. Foi observado um período médio de oviposição de 10,1 ± 1,74 dias, com o pico de oviposição no segundo dia, sendo depositados ao longo dos mesmos uma média de 67,5 ± 11,29 ovos por fêmea. Fêmeas de G. gallardoi foram significativamente mais longevas que os machos, vivendo, respectivamente, 13,7 ± 1,94 e 10,6 ± 1,78 dias. A razão sexual total observada foi de 0,79. A dispersão de G. gallardoi em cultivo de fumo não foi sensivelmente influenciada pelo vento, sendo estimada uma capacidade de locomoção diária média para fêmeas de no mínimo 7,62 m. O padrão de parasitismo de G. gallardoi ajustou-se perfeitamente à resposta funcional do tipo II (pseudo-r2= 0,99), sendo obtidos os valores de 0,0557 e 0,9989 h para os componentes a’ e Tm , respectivamente O aumento da densidade de parasitóides acarretou, de maneira geral, uma diminuição no número de ovos parasitados por parasitóide. Foi obtido para o índice de interferência mútua “m” o valor 0,626. A dinâmica temporal de S. dentiventris – G. gallardoi simulada ajustou-se muito bem aos dados obtidos em campo (r2= 0,82 para ovos sadios e r2= 0,72 para ovos parasitados). Da mesma forma, os arranjos espaciais dos ovos e da taxa de parasitismo observados em campo foram satisfatoriamente reproduzidos através das simulações computacionais. Os resultados indicam que G. gallardoi apresenta um bom potencial para controlar populações de S. dentiventris, seja pela sua viabilidade de desenvolvimento em uma larga faixa de temperatura ou pela sua capacidade reprodutiva e padrões de dispersão similares àqueles observados para outras espécies já utilizadas no controle biológico de insetos. Por outro lado, a sensibilidade às baixas temperaturas, a alta mortalidade de imaturos observada em campo e uma resposta funcional do tipo II podem ser fatores que se contrapõe ao sucesso do parasitóide no controle de populações de S. dentiventris. Considerando a independência entre os dados observados e os dados obtidos através de simulações, o modelo elaborado obteve pleno sucesso em simular a dinâmica da interação S. dentiventris – G. gallardoi a partir do comportamento individual dos diferentes agentes Duas importantes características associadas à estabilidade de sistemas hospedeiro-parasitóide foram observadas no estudo de campo e reproduzidas no modelo – um padrão de parasitismo inversamente dependente da densidade dos hospedeiros e uma resposta agregativa dos parasitóides em algumas regiões do sistema. Desta forma, futuros estudos podem avaliar, a partir de um enfoque baseado no indivíduo, quais mecanismos são responsáveis por tais comportamentos e qual é o seu efeito na dinâmica do sistema. Conclui-se, através deste trabalho, que o estudo da dinâmica de populações através de uma abordagem baseada no indivíduo, com base em modelos computacionais, pode ser uma alternativa viável para superar as limitações e a complexidade inerente ao uso de modelos populacionais analíticos. Desta forma, o maior realismo implícito nestes modelos os torna ferramentas muito úteis para diversas áreas da ecologia aplicada, particularmente para a entomologia agrícola.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-04T13:50:31Z No. of bitstreams: 1 Sandra Regina Dias Monteiro.pdf: 288069 bytes, checksum: 2cc114fdb6cd13e13530c9f7db095928 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-04T13:50:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sandra Regina Dias Monteiro.pdf: 288069 bytes, checksum: 2cc114fdb6cd13e13530c9f7db095928 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The occurrence of leishmaniasis has been expanding geographically in Brazil in recent years due mainly to socio-environmental changes. Due to their close association with human residences, infected marsupial species play an important role in the eco-epidemiology of leishmaniasis, especially regarding the maintenance of the parasite in the wild. The aim of the present study was to analyze the role of opossums (Didelphis sp) in metropolitan Recife and the Atlantic Forest of the state of Pernambuco, Brazil, as hosts for leishmaniasis. Blood and bone marrow samples were collected from 100 opossums from the genus Didelphis (Didelphimorphia: Didelphidae) – 74 white-eared opossum D. albiventris (36 males and 38 females) and black- eared opossum 26 D. aurita (10 males and 16 females). The animals were from seven sites of the Atlantic Forest (Estação Ecológica do Tapacurá, São Lourenço da Mata; Parque Estadual Dois Irmãos, Recife; Campo de Instrução Marechal Newton Cavalcanti, Paudalho; Parque Ecológico São José, Igarassu; Aldeia, Camaragibe; Estação Ecológica de Caetés, Abreu e Lima; and Reserva Biológica de Saltinho, Tamandaré) as well as the cities of Abreu e Lima, Camaragibe, Jaboatão dos Guararapes and Recife. The opossums were captured using Tomahawk and Sherman live traps arranged in a grid pattern on pre-existing trails. Each capture lasted six days and five nights and was carried out, on average, every two weeks, for a total catch effort of 25,231 traps/nights from January 2008 to February 2009. Blood samples were taken for the Indirect Immunofluorescence Test and a bone marrow biopsy was performed for the investigation of amastigote forms of Leishmania(L.) chagasi through a direct parasitological exam. DNA was also extracted from 29 bone marrow samples – 22 from D. albiventris (10 males and 12 females) and seven from D. aurita (1 male and 6 females). In the parasitological exam, all animals tested negative for the amastigote forms of Leishmania (L.) chagasi. The serologic exams revealed that, among the 100 opossums analyzed, only one (1%) D. albiventris (from the city of Abreu e Lima in metropolitan Recife) was positive for Leishmania (L.) chagasi and one (1%) D. aurita (from Campo de Instrução Marechal Newton Cavalcanti, Paudalho) was positive for Leishmania (L.) amazonensis. In the PCR, all opossums tested negative. Despite the low occurrence, this is the first report of Leishmania (L.) amazonensis in Didelphis aurita in the state of Pernambuco, which stresses the importance of these opossums as host for leishmaniasis in metropolitan region of Recife. Further studies are needed to clarify the role of opossums in the epidemiological chain of leishmaniasis in metropolitan Recife and the Atlantic Forest in Pernambuco, Brazil. / A ocorrência da leishmaniose vem se expandindo geograficamente no Brasil, ao longo dos últimos anos, devido principalmente às modificações sócio-ambientais. Em virtude da íntima associação com moradias humanas, espécies de marsupiais infectadas adquirem um importante papel na ecoepidemiologia da leishmaniose, especialmente pela manutenção do parasita na enzootia silvestre. O objetivo desta pesquisa foi analisar o papel dos gambás Didelphis sp, provenientes da Região Metropolitana do Recife e da Mata Atlântica do Estado de Pernambuco, como hospedeiros da leishmaniose. Amostras de sangue e medula óssea foram colhidas de 100 gambás do gênero Didelphi(Didelphimorphia: Didelphidae), sendo 74 gambás-de-orelha-branca D. albiventris (36 machos e 38 fêmeas) e 26 gambás-de orelha-preta D. aurita (10 machos e 16 fêmeas). Os animais foram provenientes de sete áreas de Mata Atlântica (Estação Ecológica de Tapacurá, São Lourenço da Mata; Parque Estadual de Dois Irmãos, Recife; Campo de Instrução Marechal Newton Cavalcanti, Paudalho; Parque Ecológico São José, Igarassu; Aldeia, Camaragibe; Estação Ecológica de Caetés, Abreu e Lima e Reserva Biológica de Saltinho, Tamandaré) e das cidades de Abreu e Lima, Camaragibe, Jaboatão dos Guararapes e Recife. Os gambás foram capturados em armadilhas do tipo Live trap Tomahawk e Sherman, dispostas na forma de Grid e em trilhas pré-existentes. Cada captura teve duração de seis dias e cinco noites e foi realizada a cada 15 dias, em média, totalizando um esforço de captura de 25.231 armadilhas/noite, no período de janeiro de 2008 a fevereiro de 2009. Foram colhidas amostras de sangue, dos 100 gambás capturados, para realização da Reação de Imunofluorescência Indireta – RIFI e realizada biópsia de medula óssea para pesquisa das formas amastigotas de Leishmania (L.) chagasi pelo exame parasitológico direto. Também foi extraído o DNA de 29 amostras de medula óssea, sendo 22 animais da espécie D. albiventris (10 machos e 12 fêmeas) e sete de D. aurita (um macho e seis fêmeas). No exame parasitológico, todos os animais foram negativos para a presença das formas amastigotas de Leishmania (L.) chagasi. Quanto aos resultados sorológicos, 1,0% (1/100) D. albiventris foi soropositivo para Leishmania (L.) chagasi procedente da Cidade de Abreu e Lima Região Metropolitana do Recife e 1,0% (1/100) D. aurita foi soropositivo para Leishmania (L.) amazonensis procedente do Campo de Instrução Marechal Newton Cavalcanti, Paudalho. Na PCR todos os marsupiais Didelphis foram negativos. Apesar da baixa ocorrência, observada nestes dois achados, relata-se o primeiro resultado soropositivo de Leishmania (L.) amazonensis, em Didelphis aurita, no Estado de Pernambuco. Ressalta-se a importância destes gambás como possíveis hospedeiros das leishmanioses. Contudo, serão necessários novos estudos em busca da elucidação do papel dos gambás na cadeia epidemiológica das leishmanioses na Região Metropolitana do Recife e Mata Atlântica do Estado de Pernambuco.

Orientador: Aricio Xavier Linhares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T09:52:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bossi_DavidEduardoPaolinetti_M.pdf: 5070385 bytes, checksum: 6f921151438dea2442e47fcc5958e867 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Com o objetivo de estudar as associações entre pequenos mamíferos da Mata Atlântica e artrópodes ectoparasitas, este estudo foi desenvolvido na Estação Ecológica de Juréia-Itatins - SP, no período de março de 1989 a fevereiro de 1990. Foram estudados seis hospedeiros, três roedores e três marsupiais e suas relações com 12 espécies de invertebrados, quatro insetos, incluindo uma espécie causadora de miíase e uma associação mutualística, e oito acarinos. A intensidade parasitária, a relação com a época do ano e a pluviosidade foram também correlacionados com a abundância tanto dos hospedeiros quanto dos ectoparasitas. O hospedeiro que apresentou maior freqüência de captura foi roedor Oryzomys intermedius, e o ectoparasita com maior freqüência foi o ácaro Gigantolaelaps gilmorei, que prevalece naquele hospedeiro. O díptero Metacuterebra apicalis provocou miíases em hospedeiros de classes taxonômicas diferentes, o roedor Oryzomys intermedius e o marsupial Metachirus nudicaudatus. O mesmo ocorreu na associação mutualística entre o coleóptero Amblyopinus sp. e seus dois hospedeiros, o roedor Trinomys iheringi e o marsupial Philander opossum / Abstract: In order to study the associations between small marnrnals living in the Atlantic Forest and their parasitic arthropods, a study was undertaken at the "Juréia-Itatins" Ecological Reservation, located in São Paulo State, from march 1989 to february 1990. Six host species were studied: three of rodents and three of marsupiaIs. Twelve species of parasitic arthropods were collected: four of insects, and eight of Acari. The intensity of parasitism , the period of the year and the pluviosity were correlated with the abundances ofthe ectoparasites and their hosts. The most abundant host was Oryzomys intermedius, and the most common parasite was the mite Gigantolaelaps gilmorei. The fly Metacuterebra apicalis caused myiasis in two different hosts: O'yzomys intermedius (Rodentia) and Metachirus nudicaudatus (Marsupialia). The same phenomenon ocorred with the mutualistic association between the staphylinid beetle Amblyopinus sp. and it hosts Trinomys iheringi (Rodentia) and Philander opossum (Marsupialia) / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas

Noctiliostrebla Wenzel, 1966 pertence a Streblidae, uma família de moscas parasitas exclusivas de morcegos, e compreende atualmente quatro espécies divididas em dois grupos, grupo A: Noctiliostrebla dúbia (Rudow, 1871) e N. traubi Wenzel, 1966; e grupo B: N. aitkeni Wenzel, 1966 e N. maai Wenzel, 1966. O gênero está incluído dentro da subfamília Trichobiinae, junto com Paradyschiria Speiser, 1900, sugerido como seu grupo-irmão hipotético. Com uma classificação sistemática complicada e poucos estudos taxonômicos, Noctiliostrebla caracteriza-se como um grupo muito homogêneo e de difícil distinção entre suas espécies. Restrito ao continente americano, exibe um alto grau de especificidade em relação às duas únicas espécies de morcegos do gênero Noctilio Linnaeus, 1766, N. albiventris Desmarest, 1818 e N. leporinus (Linnaeus, 1758). Não existem trabalhos filogenéticos para Noctiliostrebla, sendo que, os únicos estudos envolvendo Streblidae foram feitos para propor uma hipótese de relacionamentos entre as famílias de Hippoboscoidea. O projeto tem como objetivos realizar a revisão taxonômica do gênero Noctilostrebla e reconstruir uma hipótese de relacionamento entre as espécies do gênero, utilizando caracteres morfológicos e um conjunto de dados moleculares composto por três genes mitocondriais (12S, COI e cytB) e um gene nuclear (CAD). Dois métodos de análise foram empregados: análise de parcimônia, com pesagem igual dos caracteres, e análise de máxima verossimillhança. As análises foram realizadas com dados morfológicos e moleculares separados, enquanto os dados moleculares foram analisados com genes concatenados e separados em mitocondriais e nucleares. Como resultados, as quatro espécies já descritas foram consideradas válidas, sendo aqui redescritas, e outras seis novas espécies foram descritas. Do total de onze espécies, cinco são parasitas restritos de N. albiventris e seis de N. leporinus. As estruturas abdominais forneceram os únicos caracteres diagnósticos encontrados para separação entre as espécies. Tanto a análise morfológica como a molecular recuperaram Noctiliostrebla como monofilético e corroboraram a divisão do gênero em dois clados morfologicamente distintos. As análises com genes mitocondriais e nucleares foram incongruentes com relação a alguns clados, o que pode ser um indicativo de histórias filogenéticas diferentes. Os resultados obtidos para Noctiliostrebla apresentaram semelhanças com as hipóteses consideradas para os hospedeiros / Noctiliostrebla Wenzel 1966 belongs to Streblida, a family of batflies, and currently comprises four species divided into two groups, group A: Noctiliostrebla dubia (Rudow, 1871) and N. traubi Wenzel, 1966; Group B: N. aitkeni. Wenzel, 1966 and N. maai Wenzel, 1966. The genus is included within the Trichobiinae subfamily, along with Paradyschiria Speiser, 1900, suggested as your hypothetical sister group. With a complicated systematic classification and a few taxonomic studies, Noctiliostrebla is characterized as a very homogeneous group and difficult to distinguish between their species. Restricted to the American continent, exhibits a high degree of specificity with the only two bats species of the genus Noctilio Linnaeus, 1766, N. albiventris Desmarest, 1818 and N. leporinus (Linnaeus, 1758). There are no phylogenetic works with Noctiliostrebla and the only studies involving Streblidae were made to propose a relationship hypothesis among Hippoboscoidea families. The project aims to conduct a taxonomic revision of the Noctilostrebla genus and to rebuild a relationship hypothesis among Noctilostrebla species using morphological and molecular data set, with three mitochondrial genes (12S, COI and cytB) and one nuclear gene (CAD). Two analysis methods were used: parsimony with equal weighting of characters and lielihood. The analyses were performed using morphological and molecular data separate, while the molecular data were analyzed with concatenated genes and separated into mitochondrial and nuclear genes. As a result, the four described species were considered valid being here redescribed, and six new species have been described. Of all eleven species, five are restricted parasites of N. albiventris and six are restricted parasites of N. leporinus. The abdominal structures provided the only diagnostic characters found for separation of the species. Both morphological and molecular analysis recovered a monophyletic Noctiliostrebla and supported the division of the genus into two distinct clades. The analyses of mitochondrial and nuclear genes showed inconsistent clades, which may be indicative of different phylogenetic histories. The results obtained for Noctiliostrebla showed similarities with the assumptions for the hosts

Orientadores: Maria Elvira Pizzigatti Corrêa, Cecília Amélia Fazzio Escanhoela / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T05:39:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_TaniaCristinaBenetti_D.pdf: 3640740 bytes, checksum: 3cc935c816cada9809557953ff7cae3e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc) é um processo inflamatório aloimune o qual resulta da resposta celular (células T) do doador contra o receptor em pacientes tratados pelo transplante de células progenitoras hematopoiéticas (TCTH). Os órgãos mais afetados são pele, mucosa oral, glândulas salivares e fígado. O objetivo deste trabalho foi avaliar os achados histopatológicos das glândulas salivares menores (GSM) e fígado dos pacientes afetados pela DECHc, comparando-os entre si, com as amostras destes órgãos de pacientes que não desenvolveram DECHc pós TCTH e com pacientes que não foram tratados pelo TCTH. Amostras de GSM e fígado de pacientes tratados por TCTH mieloablativo, de doadores aparentados com HLA idêntico, entre 1994 e 2006, foram analisadas. Cinquenta e sete pacientes foram selecionados, sendo 36 com DECHc oral e hepática e 21 sem DECH. O diagnóstico de DECHc foi definido por critérios clínicos (extensa/localizada), laboratoriais e de seguimento. Amostras sem alterações de pacientes não transplantados também foram avaliadas (19 de GSM e 20 de fígado). Os espécimes foram corados em hematoxilina e eosina, ácido periódico de Schiff (PAS), Tricrômio de Masson, Reticulina e Perls e tratados pela técnica de imuno-histoquímica para CD45, CD45RO, CD68, CD4, CD8, CD138 e AE1/AE3. Os critérios definidos pela classificação proposta pelo grupo de trabalho em histopatologia da reunião de consenso do National Institutes of Health (NIH) foram empregados para a avaliação de todas as amostras de ambos os órgãos. Nos espécimes corados pelo PAS, foi tomada a medida da área acinar das GSM, em imagens digitalizadas. No fígado de pacientes que desenvolveram DECH, foi observado aumento estatisticamente significante do número de células imunomarcadas para CD8 e CD45RO, quando comparado ao dos outros 2 grupos...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Chronic graft-versus-host disease (cGVHD) is an alloimmune inflammatory process, which results from a donor-origin cellular response (T cells) against host tissues. The organs mostly affected are skin, oral mucosa, salivary glands and liver. The aim of this study was to evaluate the histopathological findings of minor salivary glands (MSG) and liver of patients affected by cGVHD, comparing the findings each other and with those of the patients who did not develop cGVHD after HSCT and patients who were not underwent HSCT. MSG and liver samples from patients who underwent myeloablative HLA-matched HSCT from sibling donors, between 1994 and 2006, were analyzed. Fifty-seven patients were selected, being 36 with oral and hepatic cGVHD and 21 without GVHD. The diagnosis of cGVHD was defined through clinical/ laboratory criteria and follow-up. Samples from non-transplanted patients were also evaluated (19 MSG and 20 liver specimens). The specimens were stained with haematoxylin & eosin, periodic acid-Schiff (PAS), Masson's trichrome, reticulin and Perls, and immunolabeled for CD45, CD45RO, CD68, CD4, CD8, CD138, and AE1/AE3. The criteria defined in the classification proposed by the consensus meeting of the National Institutes of Health were used for the evaluation of all samples of both organs. Digital images of the PAS stained sections were used to estimate the MSG acinar area. In the liver of patients who developed GVHD it was observed a statistically significant increase in the number of CD45RO and CD8 immunostained cells, comparatively with the other 2 groups...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia