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Células dentríticas condicionadas com rapamicina e pulsadas com aloantígenos na sobrevida de transplantes cutâneos alógenos neurocirúrgicos em ratosHoribe, Elaine Kawano [UNIFESP] January 2007 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2007 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Plastic Surgery Educational Foundation (PSEF) / American Society for Surgery of the Hand (ASSH) / Objetivos: Comparar o fenótipo e capacidade estimulatória in vitro de populações de
células dendríticas (DC) de ratos; testar estas populações celulares na sobrevida de
retalhos cutâneos alógenos (RcuA); avaliar os mecanismos pelos quais as DC
condicionadas com rapamicina e pulsadas com lisado de hospedeiro, em associação a
uma curta administração de drogas imunossupressoras e soro anti-linfocitário atuam na
sobrevida de RCuA. Métodos: As DC foram condicionadas com rapamicina (DC
GM+Rapa) ou IL-4 (DC controle), sendo pulsadas ou não com aloantígenos de doador. O
fenótipo e função das células foram comparados in vitro. Testou-se o potencial destas DC
de aumentar a sobrevida de RCuA e comparou-se a hiporesponsividade doadoraespecífica
dos receptores de RCuA. Avaliou-se e quantificou-se a presença das células T
reguladoras Foxp3+CD4+ (Tregs) nos retalhos transplantados e nos órgãos linfóides
secundários com citometria de fluxo e imunofluorescência. Resultados: As DC
GM+Rapa expressaram níveis menores de MHCII e CD40 e apresentaram menor
capacidade para estimular células T em reação mista de linfócitos. Ao estímulo com LPS,
as DC GM+Rapa produziram níveis significantemente menores de IL-6 e IL-10.
Somente as DC GM+Rapa pulsadas com aloantígenos aumentaram significantemente a
sobrevida dos retalhos cutâneos alógenos (>180 dias). Células T periféricas em
receptores com sobrevida prolongada de RcuA mostraram hiporesponsividade doadorespecífica.
Quantidades significantemente maiores de Tregs foram encontradas nos
retalhos com sobrevida prolongada e nos órgãos linfóides secundários destes receptores.
Conclusões: As DC GM+Rapa apresentaram fenótipo mais imaturo e menor capacidade
de estimulação de células T do que a população controle. A administração de DC
GM+Rapa pulsadas com aloantígenos prolongou significantemente a sobrevida dos
RCuA, sendo este fato associado à expansão de Tregs. / Introduction: Clinically applicable protocols capable of promoting operational tolerance to
vascularized skin allografts (VSA) would contribute towards a more widespread use of
composite tissue allografts (CTA). This study compared tolerogeneic properties of different
host bone-marrow (BM)-derived dendritic cells (DC) populations in vitro and their potential
to prolong survival of VSA across a full MHC mismatch in rats. Methods: DC were
generated either with GM-CSF, rapamycin and donor-alloAg-pulsing (GM+Rapa DCp) or
GM-CSF and IL-4, with (control DCp) or without alloAg-pulsing (control DC). Phenotype
and function were assessed in vitro. We then tested the potential of those DC, combined
with transient cyclosporine and anti-lymphocyte serum treatment to mediate prolonged
survival of VSA. Graft survival and donor-specific hyporesponsiveness were compared.
Presence of Foxp3+CD4+T cells (Tregs) in VSA and secondary lymphoid organs was
assessed and quantified by FACS and immunofluorescence. Results: These myeloid DC
populations demonstrated LPS stimulation-resistant immature phenotypes. GM+Rapa DC
displayed significantly lower T-cell stimulatory capacity and produced less proinflammatory
cytokines upon TLR activation. When combined with transient
immunosuppresion, GM+Rapa DCp was the only population to significantly prolong VSA
survival (>180days), in a donor-specific hyporesponsive milieu. Significantly higher
amounts of Tregs were detected in long-term surviving VSA and secondary lymphoid
organs of these recipients. Conclusion: Among the DC populations studied herein,
GM+Rapa DCp showed the most tolerogeneic profile in vitro and when employed in a
clinically applicable protocol in vivo led to operational tolerance of VSA, an unprecedented
finding in literature. Furthermore, this is the first report to correlate use of rapamycintreated
DC with Tregs expansion in vivo. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Desenvolvimento e avaliação de um software como recurso auxiliar ao ensino de imunologia básicaBerçot, Filipe Faria January 2011 (has links)
Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-05-11T16:01:58Z
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Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Este trabalho teve como objetivo desenvolver e avaliar um software educacional para o
ensino de imunologia básica. O software abordou os seguintes conteúdos: Órgãos e tecidos
linfoides, onde elaboramos uma prática virtual esquematizando a injeção de tinta nanquim
por duas vias de administração (intradérmica e endovenosa) em um camundongo com a
finalidade de demonstrar o processo de captação fagocítica em os órgãos e tecidos linfóides
específicos. E Inflamação, onde desenvolvemos animações gráficas representando uma
situação hipotética dos eventos que sucedem um dano tecidual com o propósito de
demonstrar eventos celulares, moleculares e suas relações em uma resposta inflamatória
aguda. A avaliação do software foi realizada com um grupo de alunos do curso da pós-
graduação Lato Sensu Ensino em Biociências e Saúde do Instituto Oswaldo Cruz e
constitui-se de duas etapas: avaliação da interface e conteúdo. Utilizamos questionários
para analisar critérios como usabilidade, afetividade, receptividade e organização da
interface. Além disso, pudemos verificar sua eficácia na aquisição e retenção de
conhecimentos relacionados aos temas abordados pelo software. Com relação à usabilidade
do programa, pudemos verificar que o software teve uma excelente aceitação entre os
alunos pesquisados. E, com relação à aquisição de conhecimentos, as análises estatísticas
demonstraram uma diferença significativa (p<0,0001) antes e após o uso do software. Desta
forma, concluímos com estes resultados que o software pode auxiliar no processo de
aprendizagem da disciplina imunologia. / The aim of this work was to develop and to evaluate an educational software for teaching of
immunology. This software emphasized two important subjects in teaching immunology:
organs and lymphoid tissues. Here, we create a virtual practice that simulating a nankeen
injection by two different pathways - intradermal and intravenous in a mouse. Thus, this
virtual practice aimed to demonstrate by macroscopic and microscopic ways the antigen flow
(nankeen) to specific organs and tissues lymphoid. In addition, we made a approach an
Inflammatory Acute Response. Through of motion graphics we showed a hypothetical event
after a tissue injury. The software was applied to group of post-graduate students engaged in
the Biosciences course to be tested. The students performed the virtual practice while
attending the discipline updates in Immunology. The software evaluation was done in two
steps: interface and content analysis. The questionnaires application allowed us to verify the
usability of the software and also perform a comparison before and after usage. Moreover, it
was possible to investigate it efficacy in the acquirement and retaining of the knowledge
related of the subjects approached by the software. Regarded the software usability, it was
possible to verify that the program had an excellent acceptance among the students
surveyed. With respect to retaining or acquirement of the knowledge, the statistics analysis
showed a significant difference (p<0,0001) before and after usage of the software. According
to our analysis, we can conclude that the software can be helpful in the teaching-learning
process of the immunology.
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Avaliação do papel da microbiota intestinal do Aedes aegypti no desenvolvimento esporogônico do Plasmodium gallinaceumOrfanó, Alessandra da Silva January 2012 (has links)
Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-01-07T15:58:08Z
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Dissertação Alessandra Orfanó.pdf: 10376056 bytes, checksum: 69183dcae9646089fc702958e90fc51d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-07T15:58:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação Alessandra Orfanó.pdf: 10376056 bytes, checksum: 69183dcae9646089fc702958e90fc51d (MD5) / A malária é responsável por cerca de 350 a 500 milhões de casos clínicos anuais,
permanecendo como um dos maiores problemas de saúde mundial. Estudos sobre a influência
da microbiota intestinal do vetor no desenvolvimento do ciclo de vida dos parasitos vêm sendo desenvolvidos. Em mosquitos, as pesquisas vêm mostrando que infecções por bactérias do intestino podem inibir o desenvolvimento esporogônico dos parasitas da malária. No presente trabalho, o papel da microbiota intestinal do Aedes aegytpi infectado com Plasmodium gallinaceum foi avaliado. Os insetos foram submetidos a cinco diferentes antibióticos (canamicina, carbenicilina, espectinomicina, gentamicina e tetraciclina). Somente canamicina e carbenicilina tiveram efeito sob a infecção com o parasito. Para esses dois
antibióticos e o controle, técnicas de cultivo bacteriano de isolamento e sequenciamento do DNA ribossomal 16S foram feitas. Asaia bogorensis, Asaia Krungthepensis, Asaia siamensis,
Bacillus licheniformis e Chryseobacterium meningosepticum foram identificadas para o
grupo controle. No grupo tratado com carbenicilina foram identificadas Chryseobacterium meningosepticum e uma bactéria da família Microbacteriaceae, e para o grupo com canamicina Microbacterium lacticum. Este trabalho sugere que a interação entre espécies de Asaia e C. meningosepticum são relevantes na resistência/suscetibilidade do A. aegypti ao P. gallinaceum. Para observar o efeito do tratamento com os dois antibióticos que mostraram efeito na infecção na expressão de peptídeos antimicrobianos, os níveis de gambicina e defensina foram medidos utilizando-se a técnica de Real-time PCR. Os níveis de defensina se mostraram super-expressos quando os mosquitos foram submetidos aos tratamentos com
canamicina e carbenicilina, enquanto gambicina se mostrou super-expressa nos mosquitos tratados com canamicina e sub-expressa naqueles com carbenicilina. A expressão desses dois AMPs também foi medida quando esses grupos de insetos se alimentaram com sangue e com sangue infectado. Nossos resultados mostraram que a expressão de defensina e gambicina no
grupo tratado com carbenicilina alimentado com sangue apresentou um aumento de 24h para
36h, e uma queda no grupo controle alimentado com sangue. Insetos tratados com
canamicina infectados aumentaram a expressão de defensina 24h e 36h após a alimentação,
diminuídas nos tratados com carbenicilina. É observada uma inibição do mRNA de gambicina no grupo carbenicilina infectado sugerindo assim que a ativação desse peptídeo não ocorre somente pelo parasita e necessita da ação da microbiota. Estes resultados indicam
que as bactérias associadas ao intestino do A. aegypti tem um papel importante na infecção e resposta imune ao parasito. / Malaria is responsible for about 350 to 500 million clinical cases annually, remaining as one of the largest health problems worldwide. Studies on the influence of the vector gut microbiota in the life cycle of the parasites are being performed. In mosquitoes, studies have shown that infection with midgut microbiota may inhibit the sporogonic development of malaria parasites. Here, the role of intestinal microbiota of Aedes aegytpi infected with
Plasmodium gallinaceum was assessed. The insects were subjected to five different
antibiotics (kanamycin, carbenicillin, spectinomycin, gentamicin and tetracycline). Only kanamycin and carbenicillin had effect over the infection process. The response of treated groups and control was analyzed by: bacterial culture techniques of isolation and sequencing of 16S ribosomal DNA. Asaia bogorensis, Asaia krungthepensis, Asaia siamensis, Bacillus licheniformis and Chryseobacterium meningosepticum were identified for the control group.
In the carbenicillin treated group Chryseobacterium meningosepticum and Microbacteriaceae family bacterium were identified. In the kanamycin treated group Lacticum microbacterium was found. This work suggests that the interaction between C. meningosepticum and Asaia species is relevant in the resistance/susceptibility balance in the A. aegypti/P. gallinaceum
model. To observe the effect of treatment over the expression of antimicrobial peptides, gambicin and defensin levels were measured by Real-time PCR. Levels of defensin proved to be up-regulated when the mosquitoes were subjected to treatment with kanamycin and carbenicillin. Gambicin levels were be up-regulated in mosquitoes treated with kanamycin and down-regulated in those treated with carbenicillin. The expression of these two AMPs was also measured when these groups of insects were fed with blood and infected blood. Our results showed that the expression of defensin and gambicin in carbenicillin treated blood fed group increased between 24 to 36 hours, and decreased in the blood fed control group.
Infected insects treated with kanamycin increased the expression of defensin between 24 to 36 hours after feeding, while it decreased in those treated with carbenicillin. An inhibition in the expression of gambicin in the infected group treated with carbenicillin was observed,
suggesting that activation of these peptides does not occur only by the parasite, or microbial action, but by both. These results indicate that the microbiota associated with A. aegypti has an important role in infection and immune response to the parasite.
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Tratamento da esporotricose felina com a associação de anfotericina B intralesional e itraconazol oralGremião, Isabella Dib Ferreira January 2010 (has links)
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isabella_gremiao_ipec_dout_2013pdf.jpg: 1214 bytes, checksum: 80ed7949f779ef37adbebe872e018c18 (MD5) / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Na esporotricose felina, os protocolos terapêuticos atualmente preconizados para o tratamento apresentam uma efetividade baixa e casos de falha terapêutica com itraconazol têm sido descritos. O presente estudo foi realizado no Laboratório de Pesquisa Clínica em Dermatozoonoses em Animais Domésticos (LAPCLIN-DERMZOO) do Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC)/FIOCRUZ com o objetivo de descrever a resposta terapêutica ao uso da anfotericina B intralesional associada ao itraconazol oral. A população do estudo foi constituída por gatos com lesões cutâneas localizadas residuais de esporotricose refratária ao itraconazol oral, acompanhados no LAPCLIN-DERMZOO no período de 2007 a 2009. Os animais foram submetidos a administrações intralesionais de anfotericina B semanalmente até a completa cicatrização da lesão, havendo um período de tolerância de duas semanas entre as aplicações. A terapia antifúngica oral (itraconazol 100 mg/dia) foi mantida durante o estudo e por um mês após a cicatrização da lesão
Vinte e três (85,2%) dos 27 gatos incluídos no estudo apresentaram remissão das lesões, sendo que 17 (73,9%) obtiveram cura clínica e em 6 (26,1%) as lesões recidivaram no mesmo local. Em 1 (3,7%) animal houve estagnação do quadro clínico e em 3 casos (11,1%) houve abandono do tratamento. Os efeitos adversos clínicos observados foram a formação de abscesso estéril em 4 (14,8%) e edema local em 3 (11,1%), independente do volume de anfotericina B administrado. Não foram observados efeitos adversos laboratoriais relacionados à anfotericina B. De acordo com os resultados obtidos, a associação de anfotericina B intralesional e itraconazol oral em gatos com esporotricose refratária ao itraconazol isoladamente pode ser benéfica, aumentando os índices de cura / In
feline sporotrichosis
, the
currently
recomm
ended
treatment protocols
for
treatment
have
a
low
effectiveness
and
cases of treatment failure
with
itraconazole
have been
described.
The present study was carried out at the
Laboratory of Clinical Research on Dermatozoonosis in Domestic Animals
(LAPCLIN
-
DERMZOO), Evandro Chagas Clinical Research Institute
(IPEC)/FIOCRUZ in order to describe the therapeutic response to the use of
intralesional amphotericin B associated with oral itraconazole. The study
included cats with residual cutaneous localised lesion
s of sporotrichosis
refractory to oral itraconazole that had been followed up at LAPCLIN
-
DERMZOO, between 2007 and 2009. The animals received weekly
administrations of intralesional amphotericin B until complete healing of the
lesion. It was accepted the
maximum range of up to two weeks between the
applications. Oral antifungal therapy (itraconazole 100 mg/day) was maintained
throughout the period of administration of intralesional amphotericin B and
during one month after the clinical cure. Twenty
-
three
(85.2%) of the 27 treated
cats achieved clinical remission, 17 (73.9%) of which were cured and in 6
(26.1%) the lesions recurred in the same site. Lack of clinical response was
observed in 1 (3.7%) animal and 3 (11.1%) animals abandoned treatment. The
cli
nical adverse effects observed in the animals during treatment were the
formation of a sterile abscess in 4 (14.8%) and edema in 3 (11.1%), irrespective
of the volume of amphotericin B administered.There were no laboratory adverse
effects related to amphot
ericin B. According to the results obtained in this study,
the combination of intralesional amphotericin B and oral itraconazole in cats
with sporotrichosis refractory to itraconazole alone can be beneficial, increasing
cure rates
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Estudo da relação estrutura-função da proteína antiofídica DM43Trugilho, Monique Ramos de Oliveira January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A proteína antiofídica DM43 isolada do soro do gambá Didelphis aurita inibe o efeito hemorrágico e a atividade proteolítica de metaloproteases de venenos de serpentes (SVMPs). Ao se ligar às SVMPs, o homodímero de DM43 se dissocia e cada monômero se liga a uma molécula de metaloprotease. O monômero é composto de três domínios tipo-imunoglobulina, dois dos quais são glicosilados. Para investigar a relação estrutura-função de DM43, os genes codificantes para esta proteína e para seus domínios foram clonados nos vetores pET101D/TOPO ou pET102D/TOPO; neste último, a proteína recombinante foi expressa em fusão com a tiorredoxina. Expressamos as construções obtidas em bactérias competentes da linhagem BL21 Star (DE3) de E. coli, na forma de corpúsculos de inclusão. Após purificação e reenovelamento por diálise, os espectros de dicroísmo circular (CD) na região do ultravioleta distante indicaram uma mistura de \03B1-hélices e folhas \03B2 pregueadas para os domínios recombinantes expressos em fusão com a tiorredoxina. A identidade das proteínas recombinantes foi confirmada, tanto por immunoblotting com anticorpo policlonal contra DM43, quanto por espectrometria de massas (MS/MS).
Entretanto, nenhum dos domínios recombinantes, isolados ou combinados, foi capaz de inibir a atividade proteolítica da jararagina, uma metaloprotease de Bothrops jararaca. Ao contrário, os domínios fusionados com a tiorredoxina foram degradados quando incubados com esta SVMP. Estes resultados podem indicar que a glicosilação é funcionalmente importante e/ou que a conformação nativa multidomínio é necessária para a atividade biológica deste inibidor. Para melhor entender seus requisitos estruturais, estudamos a DM43 nativa após degradação proteolítica. Sob condições nativas, a digestão limitada de DM43 com tripsina ou quimotripsina gerou vários fragmentos, mas nenhum peptídeo ativo contra a SVMP foi obtido. Sob condições desnaturantes, a digestão extensiva de DM43 pela endoproteinase Lys-C produziu peptídeos menores. Mesmo sem atividade biológica contra a jararagina, três destes peptídeos foram capazes de interagir com esta SVMP. Após sequenciamento por MS/MS, cada peptídeo foi localizado em um domínio diferente de DM43. Estes resultados parecem sugerir a participação conjunta dos três domínios na interação com as SVMPs / The antiophidic protein DM43 isolated from Didelphis aurita serum inhibits
the hemorrhagic effect and the proteolytic activity of snake venom metalloproteinases
(SVMPs). Upon SVMP addition, DM43 homodimer dissociates and one subunit binds
to one SVMP. The 43 kDa monomer is composed of three immunoglobulin-like
domains, two of which are glycosylated. To investigate the structure-function
relationship in this protein, the genes encoding DM43 and its domains were
separately cloned into pET101D/TOPO or pET102D/TOPO vector, this last with the
fusion partner thioredoxin. The obtained constructions were expressed in BL21 Star
(DE3) competent E. coli cells as inclusion bodies. After purification and dialysis
refolding, circular dichroism (CD) spectra in the far UV region of the recombinants
domains with fusion partner indicated the presence of folded proteins with both
alpha-helix and beta-sheet. The identities of the recombinant proteins were
confirmed by immunoblotting with polyclonal antibodies against serum DM43 and by
mass spectrometry (MS/MS). However, none of the domains either isolated or in
combination, were able to inhibit the proteolytic activity of jararhagin. In contrast,
thioredoxin-fused domains were readily digested by this SVMP. These results may
indicate that glycosylation is functionally important for DM43 and/or that a
multidomain native conformation is necessary for the biological activity of the
inhibitor. To better understand its structural requirements, serum DM43 was studied
after proteolytic degradation. Under native conditions, limited digestion of DM43 by
trypsin or chymotrypsin generated various fragments, but no active peptide against
SVMP was obtained. Extensive digestion of denatured DM43 by Lys-C
endopeptidase produced smaller peptides. Even though not able to neutralize the
proteolytic activity of jararhagin, three DM43 Lys-C peptides were able to bind to
SVMP. After sequencing by MS/MS, each peptide was localized to one DM43
domain. Taken together, these results seem to reinforce the participation of all three
domains of DM43 in the interaction with SVMPs
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Imunidade inata ao vírus da dengue: um estudo do interferon do tipo I / Innate immunity to dengue virus: a study of the type I interferonSilva, Mayara Marques Carneiro January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A febre da dengue (FD) e a febre hemorrágica da dengue (FHD) têm emergido como as mais importantes doenças causadas por arbovírus em áreas tropicais. A forma mais grave da doença, a FHD, apresenta taxa de mortalidade geralmente entre 1 por cento e 10 por cento e requer hospitalização e um cuidadoso controle hemodinâmico dos pacientes. O interferon do tipo I (IFN-I), IFN-alfa/beta, juntamente com o IFN tipo do II (IFN-II), IFN-gama, são fundamentais na mediação da resposta antiviral, através da modulação da resposta imune para inibir a propagação viral. No presente trabalho, propomos o estudo da resposta imune inata ao vírus da dengue (DENV), com ênfase no IFN-I. Para isso, investigamos os níveis de expressão dos genes que codificam os IFN-I e IFN-II, utilizando cDNA, obtido de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de pacientes infectados com o DENV, através do sistema de PCR em tempo real (qPCR), e analisamos os níveis de IFN-I no soro dos mesmos pacientes pelo ELISA. Avaliamos, também, a via de sinalização do IFN-I em células infectadas por diferentes cepas do DENV, utilizando a linhagem celular BHK21pISRELucHygro, que possui em seu genoma um plasmídeo que contém como promotor o ISRE (região responsiva ao IFN-I) fusionado ao gene repórter luciferase. A quantificação do IFN-I das PBMCs, por qPCR, mostrou que os pacientes acometidos com a FHD, com até 5 dias de febre, expressaram níveis mais elevados do IFN-I quando comparados aos pacientes acometidos pela FD. Enquanto, os níveis séricos de IFN-alfa dos pacientes FD e FHD, quantificados através do ELISA, mostraram níveis similares, representando um padrão diferente do observado nos transcritos de IFN-I em PBMCs. No entanto, os níveis séricos de IFN-gama foram significativamente maiores em pacientes FHD, confirmando o padrão observado na quantificação por qPCR / Por fim, na análise da via de sinalização do IFN-I via expressão da luciferase em células BHK21pISRELucHygro após infecção por diferentes cepas do DENV foi observado que esses isolados clínicos possuíram a capacidade de inibir a via em diferentes proporções
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Investigação de marcadores imunológicos na doença de Chagas utilizando os antígenos recombinantes CRA e FRA de Trypanosoma cruzi / Investigation of immunological markers in Chagas' disease using the CRA and FRA recombinant antigens of Trypanosoma cruziLorena, Virginia Maria Barros de January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / As manifestações clínicas da doença de Chagas humana estão associadas com as distintas e complexas relações parasito-hospedeiro que envolvem diretamente o sistema imune. Nesse contexto, nos propomos analisar a relação entre a produção de citocinas intracitoplasmáticas após estímulo in vitro com os antígenos recombinantes CRA (Cytoplasmatic Repetitive Antigen) ou FRA (Flagellar Repetitive Antigen) de Trypanosoma cruzi e as formas clínicas crônicas cardíaca e indeterminada da doença de Chagas. O grupo de pacientes chagásicos consistiu de 39 indivíduos portadores: forma cardíaca sem dilatação cardíaca (FC1) (n=15); forma cardíaca com dilatação cardíaca (FC2) (n=15) e forma indeterminada (FI), selecionados no Ambulatório de Doença de Chagas do Hospital Universitário Oswaldo Cruz da Universidade de Pernambuco. O sangue total destes indivíduos foram submetidos à cultura na presença de CRA ou FRA por 1 dia e citocinas intracitoplasmáticas produzidas por linfócitos e monócitos foram analisadas através da citometria de fluxo. Nossos resultados mostraram que IFN-? e TNF-? produzidas por linfócitos T CD8+ após estímulo in vitro com o CRA foi capaz de diferenciar os pacientes chagásicos portadores da FC2 dos pacientes portadores da FC1 e da FI, podendo ser consideradas marcadores imunológicos da forma clínica cardíaca da doença de Chagas. Após estudo prospectivo de indivíduos portadores da FI e FC1, essa ferramenta poderia ser utilizada no seguimento das intervenções terapêuticas, melhorando a qualidade de vida do paciente
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Avaliação de pseudopeptídeos derivados do ácido tartárico na replicação dos poliovírusTreiber, Stephanie January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2015-10-29 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os poliovírus são responsáveis por causar a poliomielite, mais conhecida como paralisia infantil ou pólio, que já foi de alta incidência no Brasil e em muitos outros países, deixando centenas de indivíduos com sequelas paralíticas. Atualmente, esta doença é rara no mundo devido ao sucesso da utilização sistemática da vacina oral atenuada. Em 1988, a OMS lançou um programa para erradicar a pólio mundialmente e o desenvolvimento de antivirais contra poliovírus é considerado uma condição necessária para o sucesso deste programa. Neste trabalho, analisou-se a possível atividade antiviral de sete pseudopeptídeos derivados do ácido tartárico na replicação dos poliovírus em culturas celulares. Essas moléculas foram sintetizadas racionalmente de acordo com os alvos específicos virais (as proteases virais). A viabilidade celular foi avaliada através da incorporação do vermelho neutro pelas células vivas e posterior quantificação por espectrofotômero. A avaliação da atividade antiviral foi realizada através da observação do efeito citopático nas células infectadas por poliovírus que foram incubadas com diferentes concentrações dos compostos. Os compostos testados neste estudo apresentaram faixas de concentração não-tóxicas às células, mas não afetaram a replicação dos poliovírus, não apresentando, portanto, nenhuma atividade antiviral. De qualquer maneira, estudos sobre o potencial antiviral de moléculas candidatas é de extrema importância e devem ser estimulados, uma vez que atualmente, não existe nenhum composto antiviral contra poliovírus aprovado para uso em humanos / P
oliovirus
(PV)
are
the causative agent
for causing
poliomyelitis
, better known
as
infantile paralysis
or
polio,
a disease that
has already been of
high incidence in
Brazil and many other countries, leaving hundreds of p
eople
with paralytic
disabilit
ies
. Currently, this disease is rare in the world due to the success of
systematic use of
the
attenuated oral vaccine. In 1988,
the World Health Assembly
launched a program
to eradicate polio worldwide and the development of anti
-
poliovirus
drugs
is a necessary condition for the success of this program.
In this study, we analyzed the possible antiviral activity of seven
pseudopeptides derived from tartaric acid
on
the repli
cation of poliovirus in cell
cultures. These molecules
have been synthesized
according to
a
specific target
, the
viral
protease
s.
Cell viability was assessed using neutral red incorporation by living
cells and subsequent quantification by
spectrophotometer
. Evaluation of the antiviral
activity was performed by observing the cytopathic effect in
in PV
-
infected
cells
that
were incubated with different concentrations of the compounds. The compounds
tested in this study showed concentration ranges non
-
toxic to
cells but did not affect
the replication of poliovirus, not showing
, thus, an
antiviral activity. Either way,
studies on
p
ot
ential i
nhibitors
of PV are
extremely important and should be
encouraged, since currently there is no poliovirus antiviral compound
approved for
use in humans.
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Pesquisa de anticorpos anti-HLA doador específico em pacientes submetidos a transplante renalGil, Beatriz Chamun January 2013 (has links)
Resumo não disponível
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Desnutrição proteica na lactação e plasticidade fenotípica: estudo de parâmetros imunológicos e hepáticos em ratos adultos submetidos à dieta hiperlipídica pós-desmameCarneiro, Isadora Braga Contreiras 23 April 2014 (has links)
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Dissertação_Nut_ Isadora Braga Contreiras Carneiro.pdf: 799433 bytes, checksum: df003b3acbf205cf097a19500ce224e4 (MD5) / No presente trabalho, foram investigados os efeitos da dieta hiperlipídica sobre
parâmetros imunológicos e hepáticos em ratos adultos, programados pela desnutrição
proteica no período de lactação. Ratos machos Wistar foram divididos em grupos,
segundo a dieta empregada: Desnutrido (D), submetido no aleitamento, período crítico
do desenvolvimento, à dieta contendo 8% de proteínas e Nutrido (N), submetido à dieta
contendo 23% de proteínas. Após o desmame, os grupos foram alimentados com dieta
padrão (C) ou dieta hiperlipídica (H). Constituindo-se os grupos: NC, NH, DC e DH.
Foram realizados os seguintes estudos no animal adulto: evolução ponderal e pesos do
baço, fígado e timo, parâmetros hematológicos, transaminases e perfil lipídico e o
lavado broncoalveolar para avaliação do índice de aderência de macrófagos. Os dados
foram avaliados utilizou-se o teste ANOVA seguido do teste de múltiplas comparações
Holm-Sidak e do teste t de Student, considerando-se significante p<0,05. O consumo de
dieta hiperlipídica por animais programados pela desnutrição provocou redução no
ganho ponderal e no peso do fígado; causou aumento do VCM e do HCM e redução do
VHCM; aumento dos linfócitos e redução dos neutrófilos, redução do ALT e aumento
da razão AST:ALT; aumento do colesterol total, o LDL e o HDL; ainda, causou
redução na função de aderência dos macrófagos alveolares. Esses resultados
demonstram que a dieta excessiva em lipídios em ratos programados pela desnutrição
não promove recuperação total do déficit ponderal gerado no período de lactação, e
produz modificações em parâmetros imunológicos, hepáticos e lipídicos, com possível
indicação de lesão hepática e sequelas na função de aderência dos macrófagos
alveolares.
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