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Correlação entre mudanças na expressão e atividade da enzima anidrase carbônica VI e polimorfismos genéticos neste gene (CA6) / Correlation between changes in expression and activity of human salivary enzyme carbonic anhydrase VI and genetic polymorphisms in this gene (CA6)

Aidar, Marisi, 1958- 19 August 2018 (has links)
Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-19T23:00:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aidar_Marisi_D.pdf: 1551109 bytes, checksum: 0124186b772962c7d027715999e971c5 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: As anidrases carbônicas mantém o PH fisiológico catalisando a hidratação do dióxido de carbono na reação...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The carbonic anhydrases maintain the physiological pH catalyzing the hydration of carbon dioxide in the reaction ...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental
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Influencia do tratamento termico nas propriedades funcionais de isolados proteicos de soja e de seus hidrolisados enzimaticos

Takeiti, Cristina Yoshie 01 August 2018 (has links)
Orientador: Flavia Maria Netto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-01T09:08:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Takeiti_CristinaYoshie_M.pdf: 21627179 bytes, checksum: 0279ac84d7dd3bccd6e4bef7d390bed4 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi estudar a influência do tratamento ténnico sofiido pelos isolados protéicos de soja nas suas propriedades funcionais de seus hidrolisados. O isolado protéico de soja (IPS) foi produzido a partir da farinha desengordurada de soja (FDS) e posteriormente submetido à diferentes tratamentos ténnicos (70, 80 e 90°C/30'), apresentando diferentes graus de desnaturação, determinado por calorimetria diferencial de varredura (CDV). O comportamento eletroforético das proteínas dos IPSs foi analisado por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e não apresentou diferenças quanto à composição relativa das frações 7S e 11S. O perfil de hidrofilicidade/hidrofobicidade dos IPSs foi analisado por cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa (CLAE-FR) e demonstrou caráter hidrofóbico. Os teores de fitato dos isolados tratados termicamente não diminuíram devido aos tratamentos técnicos empregados, mas a atividade dos inibidores de tripsina reduziu significativamente (p< 0,05). Os isolados nativo (IPSn) e tratados tennicamente (IPS70, IPS80 E IPS90) foram submetidos à hidrólise enzimática com 'alfa'-quimotripisina monitorada pelo método pH-stat e interrompida após atingir o grau de hidrólise (GH) desejado (2 e 4%). Os hidrolisados obtidos (HIPSs] a partir de IPSs com diferentes graus de desnaturação, embora com igual GH, apresentaram distribuição de peso molecular (SDS-PAGE) e características de hidrofobicidade (CLAE-FR) diferenciados, que resultaram em produtos com propriedades funcionais distintas. Embora os HIPSs apresentassem caráter hidrofilico, determinado por CLAE-FR, a hidrólise resultou em aumento significativo da solubilidade apenas em pH5 (PI), de até 20 vezes ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The objective of this work was to study the influence of the heat treatment on the functional properties of soy protein isolates (SPIs) and their a-chymotrypsin hydrolysates. The soy protein isolates (SPI) was produced ftom defatted soy fiour (DSF) and submitted to the different heat treatments (70, 80 and 90°C/30 minutes) in order to obtain isolates with different degrees of denaturation determined by Differential Scanning Calorimetric (DSC). The electrophoretic profile (SDS-PAGE) showed no differences in relative composition of 7S and 11S ftactions of the SPIs. The hydrophilic/lipophilic characteristics, determined by Reversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC), showed hydrophobic characteristics. The heat treatment had no effect on the phytate content, but the trypsin inhibitor activity significantly decreased (p< 0.05). The native soy isolated protein (SPIn) and the treated SPIs (SPI70, SPI80 and SPI90) were submitted to enzymatic hydrolysis with a-chimotrypsin, monitored by pH-stat and the hydrolysis reaction was intenupted when the appropriate degree of hydrolysis (DH) was reached (2 and 4%). Hydrolysates (HSPIs) obtained ftom SPIs with different degrees of denaturation, although with the same DH, presented different molecular weight distribution and hydrophobic characteristics, resulting in products with different functional properties. Although the hydrolysates presented hydrophilic characteristics, the hydrolysis resulted in significant increase of solubility only at pH5, up to 20 times ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Mestrado / Mestre em Alimentos e Nutrição
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Separação de proteinas de soro de queijo com sistema aquoso bifasico em uma coluna de discos rotativos

Chumpitaz, Lucy Doris Aburto 07 December 2002 (has links)
Orientador : Antonio Jose de Almeida Meirelles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-01T18:56:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Chumpitaz_LucyDorisAburto_D.pdf: 24039369 bytes, checksum: 5d1a5b4d4417887199c422ede420053b (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O presente trabalho visou a purificação das proteínas a-Lactoalbumina e (3-Lactoglobulina do isolado protéico de soro de queijo (BiPRO, Davisco Food International Inc., USA), uti1i~ndo um sistema aquoso bifásico (pEG 1500 / Sal, pH 7,0) em coluna de discos rotativos perfurados(pRDC) à temperatura ambiente (25°C). Inicialmente, foi estudada a composição química da matéria prima (BjpRO), que apresenta elevado teor de proteínas (99,6 % base seca), baixo teor de cinzas (1,94 %), umidade (5,1 %) e é quase isenta de gorduras. Posteriormente, realizou-se a quantificação das proteínas do BjpRO utilizando o Método de CromatografiaLíquida (HPLC), a partir da construção de curvas de cah"bração com proteínas puras, obtendo-se um coeficiente de determinação (R2)de 0,996...Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This work bad as a goal the a-Lactoalbumin (a-La) and ~-Lactoglobulin(~-Lg) proteins purificationttom WheyProtein lsoJate using a aqueoustwo-phasesystem (pEG 1500/ SaltpH 7,0)in a erforatedRotatingDisc Column (pRDC)underroom temperature (25 °C). The chemical composition of the raw material (BiPRO) was studied initially. This analysis presented a high protein values (99,6% dry base), low ash values (1,94%), humidity (5,1%) and almost fat exempt. In a further step, protein quantification ftom BiPRO was done using the Liquid Chromatography (HPLC) method and based on calibration curves for pure proteins. A regression (R2) of 0,996 was obtained....Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos
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Produção de concentrados proteicos de leite de cabra por ultrafiltração utilizando membranas de fibra oca

Olim, Jose Andrade Crisostomo Vieira de 08 May 2002 (has links)
Orientador: Luiz Antonio Viotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-01T22:17:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Olim_JoseAndradeCrisostomoVieirade_M.pdf: 22667218 bytes, checksum: 50ae21270f87200885cecc5ad08ff320 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo; Leite em pó integral de cabra foi reconstituído à temperatura de 50°C e ultrafiltrado a fator de concentração FC4 em unidade piloto, utilizando membrana de fibra oca de polissulfona Romicom "Hollow Fiber", PM 10.000 Daltons, "Fiber 43", área efetiva de aproximadamente 1,3 m2, pressão máxima de 2,5 bar e temperatura máxima de 75°C, resultando em produtos com cerca de 40% de proteína total, em base seca. Amostras de alimentação, do retentado e do permeado a FC2 e FC4 foram tomadas para análise de composição química. Para as condições operacionais de pressão transmembrana na faixa de 0,2 a 1,2 bar e de vazão volumétrica entre 1,8 e 4 'm POT. 3'/h, foi possível verificar, através do planejamento experimental, o efeito combinado destes parâmetros sobre a porcentagem de variação da relação, entre proteína e lactose (pt/Lact) a FC4 em relação a alimentação e sobre o fluxo de permeado global, também até FC4. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: Whole goat milk powder was reconstituted at 50°C and ultrafiltered up to a concentration factor CF4, using a pilot system composed by a polissulfone membrane Romicon "Hollow Fiber", MW 10.000 D, "Fiber 43" with 1.3 m2 of permeation effective area, 2.5 bar of maximum pressure and maximum temperature of 70°C. Products obtained had approximately 40% of total protein in "dried base". Chemical composition analysis were made in samples taken off the feed, retentate and permeate at CF 2.0 and CF 4.0. ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Marcadores de estresse oxidativo induzido pelo exercicio fisico e tecnologia para sua quantificação

Alves, Armindo Antonio 29 July 2002 (has links)
Orientador: Denise Vaz de Macedo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T01:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_ArmindoAntonio_D.pdf: 5173341 bytes, checksum: f164b56a1c4720949bbb447e7cbbf42c (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O estresse oxidativo induzido pelo exercício físico, dependendo do nível atingido, é um fator importante tanto nos processos que levam à melhora da performance quanto nos que induzem fadiga ou lesão muscular. O nosso principal objetivo foi responder se as respostas induzidas por diferentes protocolos de treinamento podem ser quantificadas através de marcadores de estresse e desta forma serem aplicadas para o diagnóstico de "overreaching". Para isso, analisamos marcadores sanguíneos e musculares em diferentes situações de exercício físico. Primeiramente mostramos que a concentração de TBARS na urina e a concentração de proteínas carboniladas (PC) e grupamentos sulfidrila no plasma refletem as diferenças na adaptação induzida por dois tipos de treinamento distintos, contínuo e intermitente. Em seguida, mostramos que após um exercício exaustivo a cinética dos biomarcadores de ataque no músculo apresenta um aumento, com pico 3 horas após o exercício, e que se reflete no sangue 6 horas após o estímulo. Esse estresse é acompanhado pela queda na atividade do sistema antioxidante muscular. O pico de concentração de TBARS e PC no músculo coincide com o pico de atividade da creatina quinase no plasma. Mostramos ainda que há uma correlação positiva entre o pico de concentração de TBARS no músculo com o do sangue e de ambas com o pico da CK plasmática, não ocorrendo o mesmo com a de PC. Esses dados indicam que a coleta dos biomarcadores no tempo certo permitem a utilização de amostras de sangue para o acompanhamento do estresse oxidativo induzido pelos diferentes tipos de exercício, de forma que o treinamento induza o aumento desejado da performance, sem no entanto, provocar danos musculares. Outro ponto importante refere-se à metodologia adequada para determinação desses marcadores. Assim, desenvolvemos um sensor amperométrico para a análise da atividade da enzima glutationa redutase para ser utilizado em campo. Este apresentou uma boa linearidade da resposta em função da atividade entre 0-0,40 UI/mL, usando-se 3_L de hemolisado de hemácias, que pode ser obtido a partir de uma gota de sangue / Abstract: Physical exerci se induced oxidative stress is widely documented in literature. However, training is essential to improve the performance leading to an adaptative response, although it can lead also to oxidative damage of cellular strutures and ultimately to tissue injury. This points the importance of choosing the best suitable training programo Our aim was to answer if the induced response obtained employing different training protocols could be quantified through the determination of oxidative stress biomarkers and used to overreaching diagnosis. Our approach was to analyse blood and muscle biomarkers in different exerci se situations. First we showed that the variation of TBAR5 concentration in urine and the concentration of plasma carbonyl proteins and sulfhydryl groups reflected the different adaptations induced by two types of training protocols: continuous and intermittent training. Than we showed that after an exhaustive exercise the biomarkers of oxidative attack reached maximum values at 3 hours after the exercise, resulting in the blood maximum values 6 hours after the stimulus. This stress was followed by the decrease of the muscular enzymatic antioxidant system. The muscle TBAR5 and carbonyl proteins peak coincided with the peak concentration of plasma activity of creatine kinase. There was a positive correlation when we compare the concentration of TBARS in both muscle and blood, and both with plasma creatine kinase activity. There was no such correlation with the carbonyl protein concentrations. Our data indicated that the correct time of sampling is an important factor to allow the use of blood samples to follow the different exercise-induced stress in order to prevent overreaching. Another important point is how to develop a suitable method for determination of these biomarkers. 50, we built an amperometric sensor for the glutathione reductase activity to be used in the ground. This sensor has the accuracy for 0-0.4 IUjmL using 3J.1L of erytrocyte haemolisate, obtained from a blood dro / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular
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Analise proteomica da Xylela fastidiosa e desenvolvimento de novo metodo para analise quantitativa de proteomas por espectrometria de massa

Smolka, Marcus Bustamante 12 May 2002 (has links)
Orientador : Jose Camillo Novello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:24:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Smolka_MarcusBustamante_D.pdf: 13169476 bytes, checksum: 534084d55f017b34ca272ac8bba62a9e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A bactéria Xy/ella fastidiosa é responsável por várias doenças de plantas economicamente importantes, incluindo a clorose variegada do citros (CVC). Apesar de seu genoma já estar completamente sequenciado, os estudos das proteínas expressas pela bactéria são quase inexistentes. Na presente tese, foi utilizada a eletroforese de duas dimensões em combinação com a espectrometria de massas para identificar os produtos de 142 diferentes genes da X. fastidiosa, incluindo proteínas secretadas e as relacionadas com adesão, que apresentam particular interesse para o estudo da patogenicidade. Análise comparativa do perfil protéico da bactéria crescida como colônias isoladas em meio sólido de cultura com o da bactéria formando biofilme em meio líquido de cultura indicou a expressão específica de uma cisteíno protease, uma lipase e uma isoforma da subunidade da fímbria do tipo IV na condição de formação de biofilme. Análise do índice de uso de códons específicos ("codon bias") das proteínas mais expressas no extrato celular total revelou uma distribuição de valores inesperadamente baixa, o que é proposto como sendo possível causa da natureza fastidiosa da X. fastidiosa. Um banco de dados disponibilizando as informações geradas foi construído e pode ser acessado pela intemet: URL: www.proteome.ibLunicamp.br. Os resultados representam um esforço inicial para a caracterização da expressão de proteínas na X. fastidiosa e devem ajudar a promover um maior entendimento dos mecanismos de sobrevivência, adesão e secreção, bem como viabilizar subsequentes estudos de análise diferencial do proteoma da X. fastidiosa em diversos modelos experimentais. Na segunda parte da tese é mostrado um novo método para análise quantitativa de proteomas por espectrometria de massas. A estratégia proposta se baseia em marcar duas amostras a serem comparadas com diferentes formas isotópicas do reagente ICA T ("Isotope Coded Afinity Tags"), comigrá-Ias num único gel 2DE e identificar e quantificar as proteínas por espectrometria de massas. Os resultados mostram que proteínas rotuladas com as formas isotopicamente pesada e normal do reagente ICA T comigram na mesma posição em géis 2DE. Quando as proteínas são subsequentemente digeridas e analisadas por espectrometria de massas, a razão da abundância relativa das proteínas em cada amostra pode ser determinada precisamente, baseando-se nas intensidades relativas do sinal espectro métrico dos peptídios contendo as diferenças isotópicas. Utilizando esta estratégia, foi possível realizar quantificações com precisão melhor que 20 % / Abstract: The bacteria Xy/ella fastidiosa is the causative agent of a number of economically important crop diseases, including citrus variegated chlorosis (CVC). Although its complete genome is already sequenced, X. fastidiosa is poorly characterized by biochemical approaches at the protein level. In the present work it was used two dimensional electrophoresis in combination with mass spectrometry to identify the products of 142 different X. fastidiosa genes, including secreted and adhesion related proteins that show particular interest for the study of pathogenesis. Comparative proteome analysis of the bacteria grown as isolated colonies on a solid culture medium and the bacteria forming biofilm on a liquid culture medium indicated the specific expression of a cysteine protease, a lipase and an isoform of the type IV fimbriae subunit in the biofilm forming condition. A codon usage analysis of the most expressed proteins from the whole cell extract revealed a low biased distribution, which we propose to be related with the slow growing nature of X. fastidiosa. A database of the X. fastidiosa proteome was developed and can be accessed via the intemet (URL: www.proteome.ibLunicamp.br). The results represent an initial effort to characterize protein expression in X. fastidiosa and should contribute for a better understanding of the survival, adhesion and secretion mechanisms. It also provides the basis for subsequent differential proteome analysis on various experimental models. The second part of the thesis presents a new method for quantitative proteome analysis using mass spectrometry. The proposed strategy is based on labelling two different samples to be compared with the different istopic forms of the ICA T (Isotope Coded Afinity Tags) reagent, combine and comigrate them in a single 2DE gel and identify and quantify the proteins by mass spectrometry. It is shown that proteins labeled with the isotopically heavy and normal forms of the reagent co-migrate in 2DE gels and that the ratio of protein abundance can be accurately determined from the rein active mass spectrometric signal intensities of the heavy and normal forms of labeled, cysteine containing peptides. 80th identification and accurate quantification (better than 20 %) are therefore achieved in a simple single-step analysis / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular
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Estudo funcional e estrutural da proteina humana AUF1

Moraes, Karen Cristiane Martinez de 02 August 2018 (has links)
Orientador : Jorg Kobarg / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:46:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_KarenCristianeMartinezde_D.pdf: 5254739 bytes, checksum: 0ad62e8da65f64eb496edbbea59a467f (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado
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Estudo da atividade de supressão da proteina HC-Pro e analise do perfil de expressão de PTGS em cana-de-açucar

Pereira, Tiago Campos 03 August 2018 (has links)
Orientador : Paulo Arruda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T12:02:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_TiagoCampos_M.pdf: 5014451 bytes, checksum: d2047dfc11426a4b6bf79cbe548a81ec (MD5) Previous issue date: 2002 / Mestrado
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Elaboração e caracterização de biofilmes a base de farinha de amaranto

Tapia Blácido, Delia Rita 03 August 2018 (has links)
Orientadores: Florencia Cecilia Menegalli, Paulo Jose do Amaral Sobral / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:21:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TapiaBlacido_DeliaRita_M.pdf: 31081064 bytes, checksum: 2f1098b3f83096d6e8dd07a469915cd0 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Nos últimos vinte anos, as pesquisas dedicadas a desenvolver materiais comestíveis e biodegradáveis, para ser usado como material de embalagem e conservação, a partir de biopolímeros naturais têm-se incrementado grandemente. As proteínas, os lipídeos e os polissacarídeos têm sido usados como agentes formadores do filme. As proteínas e os polissacarídeos são bons materiais formadores do filme, mas apresentam baixa barreira ao vapor de água. Os lipídeos oferecem limitadas propriedades de barreira ao oxigênio devido à presença de poros microscópicos, à elevada solubilidade e difusividade. O objetivo deste trabalho foi elaborar filmes a base de farinha de amaranto usando o glicerol como plastificante. Primeiro, foi determinada a metodologia para produzir farinha de amaranto por moagem úmida. O rendimento na produção de farinha de amaranto foi de 67,46%. A farinha de amaranto apresentou teores de 14,21% de proteínas, 8,27% de lipídeos e 68,17% de amido. Foram estudados os efeitos da concentração de glicerol, do pH da solução filmogênica, da temperatura de processo, da temperatura e da umidade relativa do ar na secagem sobre as propriedades mecânicas dos filmes de farinha de amaranto. Os efeitos destas variáveis foram analisados segundo o planejamento fracionado 2(5-1)e foram determinados os fatores que influem significativamente, os quais depois foram considerados no desenvolvimento de um planejamento experimental completo. As variáveis escolhidas foram a concentração de glicerol, o valor do pH e a temperatura de processo. Os efeitos destas variáveis foram analisadas em função das propriedades dos filmes como: solubilidade, força e deformação no teste de perfuração e tensão, elongação e módulo de Young, no teste de tração. Utilizou-se a metodologia de superficie de resposta para obter a formulação ótima, a qual consistiu em: concentração de glicerol 22,5%, pH 10,7 e temperatura de processo 82°C. Os biofilmes apresentaram uma coloração amarelada, moderada opacidade, alta flexibilidade, baixa resistência e excelente propriedade de barreira ao vapor de água. O processo de desnaturação das proteínas e a presença de lipídeos no filme permitiram obter baixa permeabilidade ao vapor de água quando comparados com filmes de amido e proteína encontrados na literatura. / Abstract: For the last twenty years, research interest into the use of natural biopolymers for manufacturing edible or biodegradable materiaIs for packaging and preservation, has greatly increased. Proteins, lipids and polysaccharides have been used as film-forming agents. Proteins and polysaccharides are good film-former materiaIs, but they are poor moisture barriers. Lipids offer limited oxygen barrier properties, due to the presence of microscopic pores and elevated solubility and diffusivity but provide a better moisture barrier. The aim of this work was to developed amaranth fiour films using glycerol as plasticizer. First, the methodology of production of amaranth fiour by humidity milling was defined. The yield of amaranth fiour was 67.46%. The amanth fiour had 14.21% protein, 8.27% fat and 68.17% starch. The effects of glycerol concentration, pH values of the solution to film formation, temperature of process (heat denaturation), drying temperature and drying air humidity on properties mechanical of amaranth fiour films were evaluated. The effect of these variables was analyzed according to a fractional experimental design 2 (5-1), for determination of the statistically significative factors significative factors. With these factors previously chosen a complete experimental desingn was performed. Glycerol concentration, pH values and process temperature were optimized to obtain low solubility and fiexibIe amaranth fiour films, using an experimental design (response surface methodology). The effect of these variables was investigated at film formation conditions analyzing the final properties of the films as solubility, puncture strength, puncture deformation, tensile strength, elongation and modulus of Young. The optimum conditions were reached at 22.5% glycerol, pH 10.7 and 82°C. The biofilms presented a yellowish color, moderate opacity and high fiexibility but low tensile strength. The denaturation of proteins and lipid presence improved water vapor permeability of amaranth fiour films compared to that of other protein and polysaccharide films. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Ultra-estrutura e citoquimica dos espermatozoides em Euptoieta hegesia (Insecta : Lepidoptera) ao longo dos tratos reprodutores masculino e feminino

Mancini, Karina Carvalho 27 August 2003 (has links)
Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:20:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mancini_KarinaCarvalho_D.pdf: 22242865 bytes, checksum: 011013b83d6b4da00716d61fef0eeb42 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Borboletas e mariposas apresentam um dos casos mais evidentes de polimorfismo espermático, com a produção de dois tipos de espermatozóides: os apirenes e os eupirenes, que diferem em morfologia e função. Estudos ultra-estruturais descreveram a morfologia e organização de ambos os tipos de espermatozóides ao longo dos tratos reprodutores masculino e feminino da borboleta Euptoieta hegesia. Os espermatozóides apirenes extratesticulares adquirem membranas concêntricas externas provenientes do rearranjo da membrana plasmática. Já os eupirenes, adquirem um complexo envoltório que sofre modificações ao longo dos tratos reprodutores e parece ser parcialmente resultante do rearranjo dos apêndices laciniados. Foram usados também métodos citoquímicos, à saber: ácido fosfotúngstico-etanólico, ácido tânico, cuprolinic blue, vermelho de rutênio, tiosemicarbazida/proteinato de prata e lectinas. Apirenes e eupirenes apresentaram, diferencialmente, proteínas e carboidratos no lúmen dos microtúbulos e nos elementos de ligação do axonema, nas membranas e principalmente nas estruturas extra-celulares. Nos espermatozóides apirenes ainda foram detectados esses componentes no capuz anterior e nas regiões paracristalinas dos derivados mitocondriais. Nos espermatozóides eupirenes, os apêndices laciniados apresentaram, principalmente, componentes protéicos, enquanto os apêndices reticulados apresentaram carboidratos. Ambos os tipos de apêndices apresentaram organização paracristalina, formada por estruturas cilíndricas. Além disso, por meio da técnica de ácido tânico, foi verificada significativa similaridade entre os envoltórios apirenes e eupirenes, indicando uma possível origem comum. Com o uso de lectinas, os apêndices laciniados e os envoltórios apirenes e eupirenes apresentaram os mesmos glicoconjugados, sugerindo que os envoltórios se originaram do rearranjo destes apêndices. O método imunocitoquímico para detecção de tubulinas mostrou que os apêndices laciniados não são compostos microtubulares. No trato reprodutor feminino foram descritas as morfologias da espermateca e dos espermatozóides apirenes e eupirenes armazenados. O epitélio espermatecal, desconhecido na literatura, apresenta morfologia similar àquela encontrada em outras ordens de insetos / Abstract: Butterflies and moths present one of the most evident examples of sperm polymorphism, with the production of two types of spermatozoa: the apyrene and the eupyrene, that differ in functional and morphological characteristics. Ultrastructural studies were carried out to describe the morphology and organization of both sperm types along the male and female reproductive tracts of the butterfly Euptoieta hegesia. The extra-testicular apyrene spermatozoa acquire external concentric membranes as a result of the plasma membrane rearrangement. The eupyrene spermatozoa acquire a complex coat that is modified along the reproductive tracts and is apparently originates from the rearrangement of the lacinate appendages. Different cytochemical methods were applied: ethanol fosfotungstic acid, tannic acid, cuprolinic blue, ruthenium red, tiosemicarbazide/silver proteinate and lectins. Both sperm types presented differences in the proteins and carbohydrates found in the microtubule lumens and in the links binding the axoneme, in the cellular membranes and, principally, in the extracelullar structures. In apyrene sperm these components were detected in the anterior cap and in the paracrystalline cores of the mitochondrial derivatives. In the eupyrene sperm, the lacinate appendages were predominant1y protein in composition, while the reticular appendages seem to be composed principa11y of carbohydrates. Both appendage types presented paracrystalline organization, made up of small cylindrical structures. With the tannic acid technique, a significant similarity was verified between the coats of both sperm types, indicating a possible common origin. With t he lacinate technique, the lacinate appendages and the c oat of both sperm types were shown to contain the same glycoconjugates, suggesting that the coats are originated by reorganization of these appendages. The immunocytochemical method for tubulin detection demonstrated that the lacinate appendages are not microtubular structures. In the female reproductive tract, the morphology of the spermatheca was described as well as the apyrene and eupyrene spermatozoa, stored in this organ after mating. The morphology of the spermatheca epithelium, which had not been previously investigated for Lepidoptera, presented a somewhat similar organization to what is known for other insect / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências Biológicas

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