OLIVEIRA, Viviane Pinho de. Caracteres fisiológicos e bioquímicos de Sorghum bicolor E Sorghum sudanense sob condições de salinidade. 2011. 143 f. Tese (Doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2011. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-28T14:27:37Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_vpoliveira.pdf: 1375579 bytes, checksum: 0f56113f4c4ae98e3935348044793fbf (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T14:44:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_vpoliveira.pdf: 1375579 bytes, checksum: 0f56113f4c4ae98e3935348044793fbf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T14:44:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_vpoliveira.pdf: 1375579 bytes, checksum: 0f56113f4c4ae98e3935348044793fbf (MD5) Previous issue date: 2011 / This study aimed to evaluate some physiological and biochemical variables of two species of sorghum subjected to different growing conditions and salinity. For this, two experiments were set up. In the first study, the variables in Sorghum bicolor and Sorghum sudanense were evaluated according different levels of salinity stress. In the second, the variables were studied in two distinct phases of development of two species of sorghum, to determine which one of these species are more resistant to the deleterious effects of salinity. In the first experiment, treatments were arranged in a 5 × 2 factorial, consisting of two species (S. bicolor and S. sudanense) and five treatments (NaCl at 0, 25, 50, 75 and 100 mM). In this experiment, the gas exchange parameters were little affected by salinity in both species. Plant growth of both species decreased as salinity increased. The osmotic potential (ψs) leaves was strongly reduced by salinity in these plants, which significantly increased the concentration of organic solutes in the two species of sorghum. The concentrations of Na+ and Cl- increased with salinity in both species. S. bicolor and S. sudanense maintained relative water content under saline conditions the same as the control. In sorghum species studied, the soluble carbohydrates and the ions K+ and Cl- were the main contributors to the osmotic adjustment of plants. In leaves of S. bicolor, there was an increase in activity of ascorbate peroxidase (APX) and guaiacol (GPX) and a reduction in activity of catalase (CAT), while superoxide dismutase (SOD) was not affected. In S. sudanense, the activity of GPX and SOD increased with increasing salinity. In roots, just SOD activity in S. bicolor were increased with salt stress. Ribonuclease activity in the leaves of both species increased with increasing doses of NaCl, whereas in roots it was reduced as the salt stress intensified. In the second experiment, treatments were arranged in a factorial 2 × 3 × 2, composed of two species (S. bicolor and S. sudanense), three concentrations of salts in irrigation water (electrical conductivities of 0.0, 4.0 and 8.0 dS m-1) and two periods of application of salt stress to plants [from sowing until 25 days later (Phase I) and from 25th to 50th day after sowing (Phase II)], with five repetitions. The main changes in gas exchange occurred in Phase II development. The salt stress reduced plant growth of sorghum in both phases of development, but this reduction was more pronounced in Phase I. The levels of organic solutes varied according to the phases of development, species and salinity. In Phase I, in both species of sorghum, there were increases in levels of Na+ and K+ and reduced Cl- by salinity, whereas in Phase II development, the levels of Na+ and K+ were reduced and Cl- extended, both in S. bicolor as in S. sudanense. In Phase I of development, only SOD in S. bicolor, and CAT in S. sudanense showed activity increases in response to salt stress. In the Phase II, no increase in the activity of antioxidant enzyme system was observed as a function of salinity in both species. In Phase I, the activity of RNase in both species was reduced by salinity, while in Phase II development, it was expanded. Plant growth of S. sudanense was slightly more affected than the S. bicolor. Sorghum species studied in this work were able to reduce the leaf ψs high concentrations of NaCl, which may have contributed to a better osmotic adjustment. In addition, under the conditions employed in the first experiment, S. bicolor appeared to have a more effective antioxidant system against the effects of salinity than S. sudanense. For the second experiment, the growth of sorghum plants was more affected when the salt stress was applied in the early stage of development. The oxidative stress caused by salinity seems to have been sufficient to stimulate the enzymatic antioxidant defense system in Phase II development in both species. Furthermore, increased activity RNase may indicate the role of this enzyme in protecting against the deleterious effects of salinity in these species of sorghum. Overall, there were no marked differences in plant tolerance between S. bicolor and S. sudanense under salinity. / Este trabalho teve por finalidade avaliar algumas variáveis fisiológicas e bioquímicas de duas espécies de sorgo forrageiro submetidas a diferentes condições de cultivo e de salinidade. Para isso, foram montados dois experimentos. No primeiro deles estudou-se tais variáveis em Sorghum bicolor e Sorghum sudanense, em função de diferentes níveis de estresse salino, enquanto no segundo, as variáveis foram estudadas em duas fases distintas de desenvolvimento das duas espécies de sorgo, visando determinar em qual delas essas espécies são mais resistentes aos efeitos deletérios da salinidade. No primeiro experimento, os tratamentos foram dispostos em esquema fatorial 2 × 5, composto por duas espécies (S. bicolor e S. sudanense) e cinco tratamentos (NaCl a 0, 25, 50, 75 e 100 mM). Nesse experimento, os parâmetros de trocas gasosas foram pouco afetados pela salinidade, em ambas as espécies. O crescimento das plantas de ambas as espécies reduziu à medida que a salinidade aumentou. O potencial osmótico (s) foliar foi fortemente reduzido pela salinidade nessas plantas, a qual aumentou significativamente a concentração de solutos orgânicos nas duas espécies de sorgo. As concentrações de Na+ e Cl- aumentaram com a salinidade em ambas as espécies. S. bicolor e S. sudanense mantiveram o teor relativo de água sob condições salinas igual ao do controle. Nas espécies de sorgo estudadas, os carboidratos solúveis e os íons K+ e Cl- foram os que mais contribuíram para o ajustamento osmótico das plantas. Nas folhas de S. bicolor, houve um aumento na atividade das peroxidases do ascorbato (APX) e do guaiacol (GPX) e uma redução na atividade da catalase (CAT), enquanto a dismutase do superóxido (SOD) não foi afetada. Em S. sudanense, à medida que foram elevadas as doses de NaCl, observou-se um aumento na atividade da GPX e da SOD. Nas raízes, apenas a SOD apresentou aumento em atividade no S. bicolor. A atividade ribonucleásica nas folhas de ambas as espécies aumentou com as doses crescentes de NaCl, enquanto que nas raízes, ela foi reduzida à medida que o estresse salino intensificou-se. No segundo experimento, os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 2 × 3 × 2, composto por duas espécies (S. bicolor e S. sudanense), três concentrações de sais na água de irrigação (condutividades elétricas de 0,0; 4,0 e 8,0 dS m-1) e dois períodos de aplicação do estresse salino às plantas [desde a semeadura até 25 dias depois (Fase I) e do 25º ao 50º dia após a semeadura (Fase II)], com cinco repetições. As principais alterações nas trocas gasosas ocorreram na Fase II do desenvolvimento. O estresse salino reduziu o crescimento das plantas de sorgo em ambas as fases de desenvolvimento, porém essa redução foi mais acentuada na Fase I. Os teores dos solutos orgânicos variaram em função das fases de desenvolvimento, da espécie e da salinidade. Na Fase I, em ambas as espécies de sorgo, houve acréscimos nos teores de Na+ e K+ e redução nos de Cl- pela salinidade, enquanto que, na Fase II do desenvolvimento, os teores de Na+ e K+ foram reduzidos e os de Cl-, aumentados, tanto em S. bicolor como em S. sudanense. Na Fase I do desenvolvimento, apenas a SOD, em S. bicolor, e a CAT, em S. sudanense, mostraram incrementos de atividade em resposta ao estresse salino. Já na Fase II, nenhum aumento na atividade do sistema enzimático antioxidativo foi observado em função da salinidade, nas duas espécies estudadas. Na Fase I, a atividade da RNase, em ambas as espécies, foi reduzida com a salinidade, enquanto na Fase II do desenvolvimento, ela foi aumentada. O crescimento das plantas de S. sudanense foi ligeiramente mais afetado que o de S. bicolor. As espécies de sorgo forrageiro estudadas neste trabalho foram capazes de reduzir o s foliar em concentrações elevadas de NaCl, o que pode ter contribuído para um melhor ajustamento osmótico. Além disso, nas condições empregadas no primeiro experimento, S. bicolor pareceu ter um sistema antioxidante mais eficaz contra os efeitos da salinidade do que S. sudanense. Em relação ao segundo experimento, o crescimento das plantas de sorgo forrageiro foi mais afetado quando o estresse salino foi aplicado em estádios iniciais do desenvolvimento. O estresse oxidativo causado pela salinidade parece não ter sido suficiente para estimular o sistema de defesa enzimático antioxidativo na Fase II do desenvolvimento, em ambas as espécies. Além disso, o aumento na atividade RNásica pode indicar o papel desta enzima na proteção contra os efeitos deletérios da salinidade nessas espécies de sorgo. De modo geral, não houve diferenças marcantes na tolerância das plantas de S. bicolor e S. sudanense à salinidade.

Orientador: Prof. Dr. Rodrigo Maghdissian Cordeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Ciência & Tecnologia - Química, 2015. / Os componentes lipídicos das membranas celulares são substratos comuns de ataque oxidativo. Durante uma oxidação não-enzimática, tanto os fosfolipídios quanto o colesterol podem reagir com moléculas de 1O2 geradas fotodinamicamente via adição ene, produzindo hidroperóxidos de fosfolipídios e colesterol, respectivamente. Os efeitos citotóxicos e apoptóticos desses hidroperóxidos estão relacionados com a sua influência sobre as propriedades biofísicas das membranas fosfolipídicas, assim como na sua habilidade em disseminar o stress oxidativo. Estas habilidades relacionam-se fortemente com a estrutura química destes hidroperóxidos. Contudo, os mecanismos moleculares subjacentes ainda não estão bem compreendidos. Aqui, foram realizadas simulações de dinâmica molecular de diferentes produtos da oxidação dos fosfolipídios e hidroperóxidos de colesterol em bicamadas de fosfatidilcolina monoinsaturadas. O efeito combinado da peroxidação do colesterol e fosfolipídio também foi investigado. Depois da oxidação, tanto o núcleo rígido de esterol quanto as cadeias acila sn-2 dos fosfolipídios reorientam-se e os grupos hidrofílicos inseridos formam ligações de hidrogênio com os grupos carboniléster dos fosfolipídios. Para o colesterol, esta reorientação provocou a perda das propriedades de condensação e ordenação, com possíveis implicações à formação de domínios laterais na membrana. No caso dos radicais peroxila de colesterol, pequenas mudanças na orientação foram observadas dependendo da posição dos grupos -OO no núcleo de esterol. As possíveis implicações para as habilidades do radical propagar a reação em cadeia foram discutidas. / Lipid components of cell membranes are common substrates for oxidative attack. During a non-enzymatic oxidation, both phospholipids as well as cholesterol molecules can react with photodynamically generated 1O2 via ene addition, producing phospholipids and cholesterol hydroperoxides, respectively. The cytotoxic and apoptotic effects of these hydroperoxides are related to their influence on the biophysical properties of phospholipid membranes, as well as their ability to disseminate oxidative stress. These abilities relate strongly to the chemical structure of these hydroperoxides. However, the underlying molecular mechanisms are not well understood. Here, molecular dynamics simulations of different oxidation products of phospholipids and cholesterol hydroperoxides in monounsaturated phosphatidylcholine bilayers have been performed. The combined effect of phospholipid and cholesterol peroxidation was also investigated. After oxidation, both the rigid ring sterol and the sn-2 acyl chains of the phospholipids tilt themselves and the inserted hydrophilic groups form h-bonds with carbonylester groups of phospholipids. For cholesterol, this tilting caused the loss of condensation and ordering properties, with possible implications for the formation of lateral domains in the membrane. In the case of cholesterol peroxyl radicals, small changes in orientation were observed depending on the position of -OO groups in the sterol ring. The possible implications for the radical skill to propagate the chain reaction were discussed.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-31Bitstream added on 2014-06-13T18:08:54Z : No. of bitstreams: 1 felicio_aa_me_sjrp.pdf: 1498649 bytes, checksum: 34a28588d5030bb4de185eccf70e6b9a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cada vez mais os níveis de contaminantes que são lançados no ambiente aumentam. Dentre os principais poluentes estão o petróleo e seus derivados, como o óleo diesel. Eles são motivo de muitas preocupações, já que apresentam grande persistência ambiental e são potencialmente mutagênicos e carcinogênicos. Além disso, o petróleo é uma forma de energia não renovável e assim, outras formas de energia renováveis vêm sendo pesquisadas, como é o caso do Biodiesel, que vem substituindo gradualmente o petróleo. Desde 2010 passou a ser obrigatória a venda em postos de combustíveis no Brasil, o óleo diesel B5, que apresenta 5% de biodiesel em sua composição. Porém, pouco se sabe sobre os efeitos deste biocombustível no ambiente. Assim, este trabalho visou verificar quais os efeitos das diferentes misturas do óleo diesel e biodiesel e o biodiesel puro (B5, B20 e B100) nos peixes Pterygoplichthys anisitsi às concentrações de 0,01 e 0,001 mL.L-1 de cada contaminante, pelos períodos de 15 e 30 dias. Após as exposições, amostras de fígado, brânquias, cérebro e sangue dos peixes foram retirados para as seguintes análises: 7-etoxi-resorufina-0-deetilase (EROD), glutationa S-transferase (GST), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), níveis de malondialdeído (MDA), acetilcolinesterase (AChE), carboxilesterase (CbE), teste de micronúcleo (MN) e ensaio do cometa. Desta forma pudemos observar que o contaminante B100 0,001 mL.L-1 foi o que menos causou alterações nas atividades enzimáticas, sendo alteradas apenas a SOD e a CbE. Já o B5 0,001 mL.L-1 foi o que causou mais alterações nas atividades enzimáticas dos peixes, alterando a GST, SOD, CAT, GPx, os níveis de MDA e as quantidades de MN e AN (anormalidades nucleares), principalmente após 30 dias de exposição, sendo seguido... / Increasing levels of contaminants that are released into the environment have been increasing. Among the main pollutants, including petroleum and its derivatives, such as diesel oil is a major concern, since they are environmental persistent and potentially carcinogenic and mutagenic. Furthermore, oil is a non-renewable form of energy, so other forms of renewable energy have been investigated, such as Biodiesel, which is gradually replacing the oil. Since 2010, it is required to sell diesel B5, with 5% biodiesel in this composition at gas stations in Brazil. However, just a little is known about the effects of biofuel in the environment. This work aimed to verify that the effects of different blends of diesel and biodiesel and only biodiesel (B5, B20 and B100) in fish Pterygoplichthys anisitsi, in that concentrations, 0,01 and 0,001 mL.L -1 for each contaminant for 15 and 30 days. After exposure, samples of liver, gills, brain and blood were collected for the following analyzes: 7-ethoxy-resorufin-0-deetilase (EROD), glutathione S-transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT ), glutathione peroxidase (GPx), levels of malondialdehyde (MDA), acetylcholinesterase (AChE), carboxylesterase (CBE), micronucleus test (MN) and comet assay. Thus we found that that the contaminant B100 0,001 mL.L -1 was the one that has caused less changes in enzyme activity, changing only SOD and CbE. On the other hand, the B5 0,001 mL.L -1 caused more changes in enzyme activity of the fish, changing the GST, SOD, CAT, GPx, MDA levels and quantities of MN and AN (nuclear abnormalities), especially after 30 days of exposure, followed by B5 0,01 mL.L -1 and B20 0,001 mL.L -1 . The period of exposure that led to more changes was 15 days. These results allow us to conclude that even in mixtures, biodiesel and diesel fuel, even at low concentrations, can cause risks to aquatic biota

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1020341 bytes, checksum: f638bd7ab95ba74cf47b6726efa8b374 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Silicon (Si) plays important roles in alleviating various abiotic stresses, possibly by counteracting stress-induced oxidative damage. In rice (Oryza sativa), arsenic (As) is believed to cause oxidative stress and to share the Si transport pathway for entry into roots. Despite much progress in understanding the mechanisms underlying the uptake of As and how they can be affected by Si, the physiological mechanisms through which Si might alleviate As toxicity in plants remain to be elucidated. We combined gas exchange and chlorophyll fluorescence measurements with analysis of the activity of the antioxidant system to examine the effects of Si nutrition on photosynthetic performance and oxidative stress in rice plants (a wild-type cultivar and its lsi1 mutant defective in Si uptake) challenged with arsenite. Arsenite treatment led to an impairment of carbon fixation that was unrelated to stomatal and photochemical limitations but, rather, was associated with decreased mesophyll conductance. This impairment could be reverted to a considerable extent by Si in a time- and genotypedependent manner. The ameliorative effects of Si on As-treated plants were uncoupled from any noticeable up-regulation of the antioxidant capacity. We identified Si nutrition as an important target in attempts to not only decrease As concentrations but also to improve the photosynthetic performance of rice plants challenged with As, which may ultimately result in better crop yield coupled with enhanced food safety. / O silício (Si) desempenha um papel importante em mitigar vários estresses abióticos, possivelmente por minimizar o dano oxidativo induzido por estresse. Em arroz (Oryza sativa), acredita-se que o arsênio (As) possa causar estresse oxidativo compartilhando com o Si a mesma via de entrada nas raízes. Apesar dos grandes avanços na compreensão dos mecanismos de absorção de As e como estes podem ser afetados por Si, os mecanismos fisiológicos pelos quais o Si pode mitigar a toxicidade do As em plantas ainda precisam ser esclarecidos. Neste trabalho, avaliaram-se os efeitos isolados e combinados de Si e arsenito [As(III)] em plantas de arroz, usando um genótipo selvagem e o mutante lsi1 (low silicon rice 1) defectivo para a absorção de Si, no que diz respeito às trocas gasosas e parâmetros de fluorescência da clorofila a e aos danos celulares. A presença de As(III) levou a uma diminuição da fixação de carbono, fato não relacionado com limitações estomáticas e fotoquímicas, mas associada à diminuição da condutância mesofílica. Esta redução pôde ser revertida ao longo do tempo de forma considerável pela presença do Si, nos dois genótipos. Entretanto, os efeitos benéficos do Si em plantas tratadas com As(III) não apresentaram relação direta com o aumento da regulação da capacidade antioxidante. A fertilização com Si pode ser importante tanto na tentativa de diminuir as concentrações de As(III) quanto para melhorar o desempenho fotossintético de plantas de arroz contaminadas com As, o que pode resultar em uma melhor produtividade da cultura, além de promover aumento da segurança alimentar.

A exposição a tintas, as quais contêm solventes orgânicos e metais, pode levar a danos no DNA e formação de espécies reativas (ER), que podem lesar diversas classes de moléculas. Em vista disso, este trabalho teve como objetivo avaliar possíveis danos oxidativos, genotóxicos e mutagênicos em 33 indivíduos, do sexo masculino, ocupacionalmente expostos a tintas há, no mínimo, 6 meses. Para o grupo controle, foram selecionados 29 indivíduos saudáveis, não expostos a tintas, pareados em idade com o grupo exposto. A fim de verificar a influência do descanso do fim de semana, foram realizadas coletas na segunda-feira pela manhã e na sexta-feira ao final da jornada de trabalho. Os danos oxidativos foram avaliados pelos produtos de reação com o ácido tiobarbitúrico (TBARS), proteínas carboniladas (PC) e atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (Sod) e catalase (Cat). Foram medidos, ainda, o ácido hipúrico (AH) e o ácido deltaaminolevulínico (ALA), marcadores urinários de exposição ao tolueno e ao chumbo, respectivamente. A genotoxicidade foi avaliada pelo ensaio cometa (em sangue periférico) e pelo teste de micronúcleos (MN) (em linfócitos e células da mucosa bucal). Não foi observado aumento significativo nos níveis de TBARS no grupo exposto quando comparado ao grupo controle. Entretanto, verificou-se, neste grupo, um maior índice de danos aos lipídeos nas amostras coletadas na sexta-feira comparado com as amostras coletadas na segunda-feira (p = 0,008; z = -2,637). Ao final da semana (amostras coletadas na sexta-feira), os indivíduos expostos a tintas apresentaram mais danos às proteínas em comparação com o grupo controle (p = 0,032; z = -2,14). Observou-se também, que os trabalhadores expostos a tintas tiveram uma diminuição nas atividades de Sod (p = 0,003; z = 2,935) e Cat (p = 0,025; z = -2,247) nas amostras de segunda-feira, bem como valores mais elevados de AH (p = 0,010; z = - 2,591) e de ALA (p = 0,000; z = -4,487). A exposição a tintas induziu um aumento significativo dos danos ao DNA (principalmente classes um e dois), tanto nas amostras coletadas na segunda (p = 0,000; z = - 5,356) quanto nas de sexta-feira (p = 0,000; z = -6,456). Apesar de não ter sido encontrado um aumento na frequência de MN em linfócitos ou em células da mucosa bucal no grupo exposto, observou-se um aumento de nuclear buds (NBUDs) (segunda-feira, p = 0,004, z = - 2,894), uma diminuição do índice de divisão nuclear (IDN) (sexta-feira, p = 0,000, z = -4,78) nos linfócitos e um aumento na frequência de células com cromatina condensada nas células da mucosa bucal (segunda-feira, p = 0,000, z = -4,503; sexta-feira, p = 0,000, z = -5,203), indicativo de amplificação gênica e indução de mecanismos apoptóticos nestas células. Observou-se uma correlação positiva entre o índice de danos no DNA (ensaio cometa) e o tempo de exposição a tintas (r = 0,376; p = 0,031), assim como entre o tempo diário de exposição a tintas e a frequência de micronúcleos (segunda-feira, r = 0,450; p = 0,018) e de NBUDs (sexta-feira, (r = 0,402; p = 0,038) nos indivíduos expostos. Embora outros estudos sejam necessários, esses resultados mostram que a exposição ocupacional a tintas pode induzir um aumento de danos no DNA, os quais parecem estar sendo reparados durante o descanso do final de semana. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-05-29T19:53:19Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Carina Cassini.pdf: 626115 bytes, checksum: 4477a810de80e2c9702e22c8302fba89 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-29T19:53:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Carina Cassini.pdf: 626115 bytes, checksum: 4477a810de80e2c9702e22c8302fba89 (MD5) / Organic solvents and metals, widely used in paints, can lead to DNA damages and reactives species (RS) generation. The aim of this study was to evaluate possibles oxidative, genotoxic and mutagenic damages in 33 male workers exposed for at least six months to paint. To constitute the control group 29 healthy individuals were choosen, without paint exposure, which matched in age with exposed group. Two sampling were performed to verify a possible DNA repair during the weekend: in the beginning and at the end of work week. The oxidative damages were evaluated by thiobarbituric acid reaction products (TBARS), carbonylated proteins (CP), superoxide dismutase (Sod) and catalase (Cat) activities. Hippuric acid (HA) and delta-aminolevulinic acid (ALA) were used as toluene and lead markers exposure, respectively. The genotoxicity was evaluated by comet assay (in peripherical blood) and by micronucleus (MN) test (in limphocytes and exfoliated buccal cells). The results showed no significant increase in TBARS levels in exposed group in relation to the control group. However, the lipidic damages was higher in Friday samples comparing to Monday samples (p = 0.008; z = -2.637). The proteins damage was higher in exposed group in comparison to control group exclusively in Friday samples (p = 0.032; z = -2.14). It was also observed that the workers exposed to paints showed lower Sod (p = 0.003; z = 2.935) and Cat (p = 0.025; z = -2.247) activities in Monday samples. The exposed group presented HA levels (p = 0.010; z = - 2.591) and ALA levels (p = 0.000; z = -4.487) higher than the control group. The workers exposed to paints presented a significant increase in DNA damage in both Monday (p = 0.000; z = -5.356) and Friday (p = 0.000; z = -6.456) samples. No increase was observed in MN frequency in limphocytes and buccal cells. However, the individuals exposed to paints showed an increase in nuclear buds (NBUDS) (Monday samples, p = 0.004, z = -2.894), a reduction in nuclear division index (NDI) (Friday samples, p = 0.000, z = -4.78) in lymphocytes and an increase in condensed chromatin frequency in buccal cells (Monday samples, p = 0.000, z = -4.503; Friday samples, p = 0.000, z = -5.203), indicating genic amplification and apoptosis induction. The DNA damage index (comet assay) correlated positively with average working time (r = 0.376; p = 0.031). It was also observed a positive correlation between time daily exposure and MN (Monday samples, r = 0.450; p = 0.018) and NBUDs (Friday samples: r = 0.402; p = 0.038) frequency. These results showed that paint exposure is able to generate DNA damages and these damages are being repaired during the weekend.

Orientador: Leandro Gobbo Braz / Resumo: O presente estudo objetivou determinar as concentrações dos resíduos de gases anestésicos (RGA) em salas de operação (SO) e o impacto dessa exposição ocupacional em relação aos danos genômicos e estresse oxidativo em profissionais recém-expostos. O estudo foi conduzido no Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP. As concentrações de isoflurano, sevoflurano e óxido nitroso (N2O) foram medidas nas SO por espectrofotometria infravermelha, com equipamento portátil. Sessenta e três médicos residentes, ao final de três anos do Programa de Residência Médica, foram alocados em dois grupos: exposto (Anestesiologia e Cirurgia, n=32) e controle (Clínica Médica, n=31). Amostras de sangue periférico e células bucais foram coletadas e protegidas da luz. Avaliaram-se danos no material genético (teste do cometa - danos basais, purinas e pirimidinas oxidadas em linfócitos; 8-hidroxi-2’-desoxiguanosina no plasma), micronúcleo (MN) em células bucais, proteínas carboniladas, marcadores de lipoperoxidação (malonaldeído e 4-hidroxinonenal) e capacidade antioxidante plasmática (ferric reducing antioxidant power, oxygen radical absorbance capacity e total antioxidant performance). As concentrações médias dos RGA foram superiores aos limites internacionalmente recomendados (2,7 vezes: isoflurano; 4,9 vezes: sevoflurano; 7,2 vezes: N2O). Os grupos não diferiram quanto aos dados demográficos (p>0,05). Detectou-se aumento significativo de danos basais no DNA (p=0,01) e maior frequê... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study determined the waste anesthetic gases (WAG) in operating rooms (OR) and evaluated the impact of the occupational exposure in genetic damage and oxidative stress in medical residents. The study was performed at “Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP”. The concentrations of isoflurane, sevoflurane and nitrous oxide (N2O) were measured in ORs. Sixty-three medical residents completing their three-year Medical Residency Program were recruited for the study and were assigned to two groups: exposed group (n=32) of Anesthesiology and Surgery areas and control group (n=31) of Internal Medicine area. Blood and buccal cells were concomitantly collected from both groups and protected from light to measure genetic instability by buccal micronucleus (MN), basal and oxidized DNA damage (comet assay and 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine), biomarkers of protein and lipid oxidation, and three different assays for plasma antioxidant activity. Mean WAG concentrations were above international thresholds (2.7-fold: isoflurane; 4.9-fold: sevoflurane; 7.2-fold: N2O). There was no significant difference between groups regarding demographic data. Basal DNA damage (p=0.01) and buccal MN frequency (by 2.3-fold; p=0.07) were increased in the exposed group compared to the control group. Results showed no significant difference for oxidative stress biomarkers between groups. In conclusion, this study shows that medical residents exposed to high WAG concentrations have increase... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Banca: Mariza Pires de Melo / Banca: Eduardo Maffud Cilli / Resumo: Em pacientes com doença renal crônica é observado à presença de estresse oxidativo e a exacerbação desse estresse com o tratamento hemodialítico, bem como tem se postulado a ação antioxidante de alguns solutos urêmicos. Esse contexto instigou-nos explorar, a ação antioxidante dos solutos urêmicos: L-arginina, Ácido Úrico, Ácido Hipúrico, Creatinina, Fenol, Metilguanidina, p-Cresol, L-tirosina e Uréia, utilizando sistemas-modelo in vitro. Quatro desses solutos mostraram eficiência (expressa via o IC50 em µmol/L) para os sistemas-modelo: Capacidade de captura sobre o ABTS + , p-Cresol (3,99 ± 0,01), L-tirosina (5,23 ± 0,02), Fenol (12,98 ± 0,09) e o Ácido Úrico (16,75 ± 0,14); Capacidade de captura sobre o HOCl / OCl -, L-tirosina (2,83 ± 0,04), Ácido Úrico (5,75 ± 0,13), Fenol (8,95 ± 0,10) e p- Cresol (15,75 ± 0,12), e o bleaching da crocina (lipoperoxidação), Ácido Úrico (6,90), Fenol (1125,81) e p-Cresol (1162,31). Em relação à capacidade de captura sobre o Ânion Radical Superóxido e o Peróxido de Hidrogênio nenhum dos solutos apresentou atividade significativa. Em todos os ensaios onde não foi observada atividade antioxidante, investigou-se desde concentrações fisiológicas, urêmicas e até 10 vezes maior que as concentrações urêmicas médias. Como os solutos urêmicos, Ácido Úrico, p-Cresol, Fenol e L-tirosina capturaram significativamente as espécies reativas, ABTS + , HOCl / OCl - e ROO  , estudou-se o comportamento da mistura desses solutos, tendo como referência o IC50 de cada soluto. Obteve-se nos ensaios de captura do ABTS + e do HOCl / OCl - os IC50, como uma fração de concentração de 26 e 27%, respectivamente, para cada soluto na mistura, o que demonstrou um efeito aditivo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Patients with chronic kidney disease suffer from oxidative stress and this stress is exacerbated by hemodialysis. It has been postulated that some uremic solutes have antioxidant effects. This context prompted us to explore the antioxidant action of the uremic solutes: L-arginine, uric acid, hippuric acid, creatinine, phenol, methylguanidine, p-cresol, L-tyrosine and urea, by means of 5 in vitro model systems. Only four of these solutes were effective antioxidants (assessed by their IC50 in µmol/L) in 3 model systems: ABTS + scavenging: p-cresol (3.99±0.01), L-tyrosine (5.23±0.02), phenol (12.98±0.09) and uric acid (16.75±0.14); hypochlorous acid scavenging: L-tyrosine (2.83±0.04), uric acid (5.75±0.13), phenol (8.95±0.10) and p-cresol (15.75±0.12); and crocin bleaching (lipoperoxidation): uric acid (6.90), phenol (1,125.81) and p-cresol (1,162.31). In tests with the superoxide radical anion and hydrogen peroxide, none of the solutes showed antioxidant activity. In each of the assays in which no activity was detected, tests were carried out over a range of solute concentrations, from normal physiological levels, through typical uremic up to ten times higher than mean uremic concentrations. As the 4 uremic solutes, uric acid, p-cresol, phenol and L-tyrosine showed significant scavenging activity for 3 reactive species, ABTS + , HOCl / OCl - and ROO  , the behavior of mixture of these solutes was investigated, with reference to the IC50 of each solute. In the ABTS + and HOCl / OCl - scavenging assays, the IC50 involved a concentration of 26% and 27%, respectively, of each solute in the mixture, demonstrating... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

We investigated biomarkers of injury, inflammation and oxidative stress in the blood after high intensity training. Nineteen male athletes performed a combination of high-intensity aerobic and anaerobic training. Samples were acquired immediately before and from 3 h to 72 h after the exercise. CK was elevated 200% at 3 h post-exercise, reaching a 300% peak increase at 12 h and returning to pre-exercise levels within 48 h. LDH activity was 25% higher 3 h after exercise, increasing to 56% higher 6 h after exercise and returning to pre-exercise levels within 12 h. Leukocyte levels were 50% higher and neutrophil levels were 70% higher 3 h after exercise than at baseline, while lymphocyte levels increased by up to 55% after 12 h. MCP-1 was elevated by 40% after 6 h and decreased by 37% 72 h after exercise. TNF-alpha levels were lower in all post-exercise samples. IL-6 and CRP levels remained stable throughout the entire recovery period. The levels of oxidative stress markers remained stable during the experiment. CK and LDH blood appearance and clearance are faster than classic described, coaches and physicians must respect these windows to accurately estimate muscle damage. The neutrophil/lymphocyte ratio summarizes the mobilization of two leukocyte subpopulations in a single marker and may be used to predict the end of the post-exercise recovery period. Further analysis of the immune response using serum cytokines indicated that the high-intensity exercise performed by highly trained athletes only generates inflammation localized to the skeletal muscle. / Foram investigados biomarcadores séricos de lesão muscular, inflamação e estresse oxidativo após exercício combinado de alta intensidade. Dezenove atletas do sexo masculino executaram uma combinação de exercício aeróbico e anaeróbico de alta intensidade. Amostras foram coletadas imediatamente antes e entre 3h e 72 após o exercício. CK estava elavada 3h após o exercício, atingindo seu pico de 300% de incremento 12h após o exercício. A atividade de LDH estava 25% elevata 3h após o exercício, aumentando até 56% em 6h após e retornando aos níveis pré exercicio em até 12h. Os nívies dos marcadores de estresse oxidativo não se alteraram durante o experimento. A janela de aparacimento dos marcadores de lesão muscular foi mais rápido do que o classicamente descrito. Os treinadores devem respeitar essa janela para estimar a extensão muscular de forma precisa. A razão neutrófilo/linfócito resume a mobilização de duas populações de células brancas em um único marcador e pode ser usada para predizer o término da recuperação pós exercício. Uma análise mais profunda da resposta imune analisando citocínas séricas indicou que o exercício de alta intensidade proposto por nós e realizado por atletas de alto desempenho apenas gerou inflamação localizada no músculo esquelético. / Doutor em Genética e Bioquímica

Introduction: The intrauterine environment is responsible for the development and health of the progeny. Thus, consumption of diets with the western pattern during the perinatal period can cause deleterious effects on the fetus with persistent pathological consequences of adolescence and adult life. Objective: To evaluate the supply of a western diet during gestation and lactation, promoting vascular and markers of oxidative stress in offspring of male rats at 60 days of age. Methods: Sixteen male rats and eight male Wistar rats were available for 2 to 3 months. From the determination of pregnancy, a western diet (O = 8, 31% lipids) or control (C = 8, 18% of lipids) was offered until the weaning of the pups. After 60 days of life, rats from the western offspring (PO, n = 34) or control (PC, n = 32) were euthanized, and the thoracic aorta bed (LAT) was removed for the vascular reactivity study. Concentration curves were performed on acetylcholine (ACh), sodium nitroprusside (NPS), phenylephrine (FEN), potassium chloride (KCl) and calcium chloride (CaCl2) in an isolated organ bath. In addition, the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) was measured. Also, intracellular levels of nitric oxide (NO) and superoxide anion were measured in the muscle cells of the thoracic aorta by probes that emit fluorescence in the presence of these substrates (NO and O.-). Values were expressed as the mean ± SEM. Unpaired t-test for the maximum response (Rmax) and sensitivity (Log EC50) values extracted from the vascular reactivity curves. The unpaired t-test for oxidative stress markers was also used, except for NO bioavailability, which was used with Bonferroni post-test Anova one-way. Results: At 60 days, an increase in efficacy (RMax) to phenylephrine in rings without endothelium (PC: 5.78 ± 0.3 vs. PO: 7.7 ± 0.5 * mN / mm) and with endothelium (PC: 4.6 ± 0.4 vs. PO: 6.43 ± 0.4 * mN / mm), to potassium chloride (KCl) in rings with endothelium (PC: 3.89 ± 0.28 vs. PO: 4 (PC: 3,78 ± 0,12 vs PO: 4,82 ± 0,09 mN / mm) and to CaCl2 in rings without endothelium (PC: 5, 7 ± 0.16 vs. PO: 6.75 ± 0.18 mN / mm) and a reduction in efficacy to ACh (PC: 93 ± 3.1 vs. PO: 86 ± 1.8 *% relax) as in Sensitivity (Log EC50) to NPS (PC: 8.5 ± 0.05 vs. PO: 8.2 ± 0.04 *% relax). In addition, the PO presented a lower bioavailability of NO in the basal condition (PC: 1.0 ± 0.03 vs. PO: 0.4 ± 0.01 ua) and stimulated with Ach (PC: 1.46 ± 0, 04 vs. PO: 0.88 ± 0.02 water). In addition, PO presented a higher production of superoxide anion (PC: 1.0 ± 0.06 vs. PO: 2.06 ± 0.13 water) associated with a higher SOD activity (PC: 0.026 ± 0.004 vs. PO : 0.27 ± 0.06 mg / ptn) and a reduction of CAT (PC: 0.021 ± 0.03 vs. PO: 0.08 ± 0.03 mg / ptn). Conclusion: The introduction of a western diet in the perinatal period reduced relaxation and increased contraction of the thoracic aortic bed associated with the reduction of NO bioavailability and elevation of intracellular levels of superoxide anion in the offspring of 60 - day - old male rats. / Introdução: O ambiente intrauterino é responsável pelo desenvolvimento e saúde da progênie. Assim, o consumo de dietas com o padrão ocidental durante o período perinatal pode causar efeitos deletérios no feto com consequências patológicas persistentes da adolescência e vida adulta. Objetivo: Avaliar se à oferta de uma dieta ocidental durante a gestação e a lactação, promove alterações vasculares e nos marcadores do estresse oxidativo da prole de ratos machos com 60 dias de vida. Métodos: Foram utilizadas 16 ratas virgens e 8 ratos machos da linhagem Wistar com 2 a 3 meses. A partir da determinação da prenhez foi oferecida uma dieta ocidental (O = 8, 31% lipídios) ou controle (C = 8, 18% de lipídios) até o desmame dos filhotes. Após 60 dias de vida, os ratos da prole ocidental (PO, n = 34) ou controle (PC, n = 32) foram eutanasiados, e o leito aorta torácico (LAT) foi removido para a realização do estudo de reatividade vascular. Foram realizadas curvas concentração respostas à acetilcolina (ACh), nitroprussiato de sódio (NPS), fenilefrina (FEN), cloreto de potássio (KCl) e cloreto de cálcio (CaCl2) em um banho isolado de órgãos. Além disso, foi mensurada a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Também, foram mensurados nas células musculares da aorta torácica os níveis intracelulares do óxido nítrico (NO) e do ânion superóxido através de sondas que emitem fluorescência na presença destes substratos (NO e O.-). Os valores foram expressos como a média ± EPM. Teste t não pareado para os valores da resposta máxima (Rmax) e sensibilidade (Log EC50) extraídos das curvas de reatividade vascular. Foi utilizado também o teste t não pareado para os marcadores do estresse oxidativo com exceção da biodisponibilidade de NO que foi utilizado Anova one way com pós-teste de Bonferroni. Resultados: Aos 60 dias foi observou-se um aumento na eficácia (RMax) à fenilefrina em anéis sem endotélio (PC:5,78±0,3 vs. PO:7.7±0,5* mN/mm) e com endotélio (PC:4,6±0,4 vs. PO:6,43±0,4* mN/mm), ao cloreto de potássio (KCl) em anéis com endotélio (PC: 3,89±0,28 vs. PO:4,64±0,26 mN/mm) e sem endotélio (PC:3,78±0,12 vs. PO:4,82±0,09 mN/mm) e ao CaCl2 em anéis sem endotélio(PC: 5,7 ± 0,16 vs. PO: 6,75 ± 0,18 mN/mm) e uma redução da eficácia à ACh (PC:93±3,1 vs. PO:86±1,8* %relax) como na sensibilidade (Log EC50) ao NPS (PC:8,5±0,05 vs. PO:8,2±0,04* %relax). Além disso, a PO apresentou uma menor biodisponibilidade do NO em condição basal (PC: 1,0 ± 0,03 vs. PO: 0,4 ± 0,01 ua) e estimulados com Ach (PC: 1,46 ± 0,04 vs. PO: 0,88 ± 0,02 ua). Ademais, a PO apresentou uma maior produção do ânion superóxido (PC: 1,0 ± 0,06 vs. PO: 2,06 ± 0,13 ua) associado a uma maior atividade da SOD (PC: 0,026 ± 0,004 vs. PO: 0,27 ± 0,06 mg/ptn) e uma redução da CAT (PC: 0,021 ± 0,03 vs. PO: 0,08 ± 0,03 mg/ptn). Conclusão: A introdução de uma dieta ocidental no período perinatal reduziu o relaxamento e aumentou a contração do leito aórtico torácico associado a redução da biodisponibilidade do NO e elevação nos níveis intracelulares do ânion superóxido na prole de ratos machos com 60 dias de vida. / São Cristóvão, SE

A exposição a tintas, as quais contêm solventes orgânicos e metais, pode levar a danos no DNA e formação de espécies reativas (ER), que podem lesar diversas classes de moléculas. Em vista disso, este trabalho teve como objetivo avaliar possíveis danos oxidativos, genotóxicos e mutagênicos em 33 indivíduos, do sexo masculino, ocupacionalmente expostos a tintas há, no mínimo, 6 meses. Para o grupo controle, foram selecionados 29 indivíduos saudáveis, não expostos a tintas, pareados em idade com o grupo exposto. A fim de verificar a influência do descanso do fim de semana, foram realizadas coletas na segunda-feira pela manhã e na sexta-feira ao final da jornada de trabalho. Os danos oxidativos foram avaliados pelos produtos de reação com o ácido tiobarbitúrico (TBARS), proteínas carboniladas (PC) e atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (Sod) e catalase (Cat). Foram medidos, ainda, o ácido hipúrico (AH) e o ácido deltaaminolevulínico (ALA), marcadores urinários de exposição ao tolueno e ao chumbo, respectivamente. A genotoxicidade foi avaliada pelo ensaio cometa (em sangue periférico) e pelo teste de micronúcleos (MN) (em linfócitos e células da mucosa bucal). Não foi observado aumento significativo nos níveis de TBARS no grupo exposto quando comparado ao grupo controle. Entretanto, verificou-se, neste grupo, um maior índice de danos aos lipídeos nas amostras coletadas na sexta-feira comparado com as amostras coletadas na segunda-feira (p = 0,008; z = -2,637). Ao final da semana (amostras coletadas na sexta-feira), os indivíduos expostos a tintas apresentaram mais danos às proteínas em comparação com o grupo controle (p = 0,032; z = -2,14). Observou-se também, que os trabalhadores expostos a tintas tiveram uma diminuição nas atividades de Sod (p = 0,003; z = 2,935) e Cat (p = 0,025; z = -2,247) nas amostras de segunda-feira, bem como valores mais elevados de AH (p = 0,010; z = - 2,591) e de ALA (p = 0,000; z = -4,487). A exposição a tintas induziu um aumento significativo dos danos ao DNA (principalmente classes um e dois), tanto nas amostras coletadas na segunda (p = 0,000; z = - 5,356) quanto nas de sexta-feira (p = 0,000; z = -6,456). Apesar de não ter sido encontrado um aumento na frequência de MN em linfócitos ou em células da mucosa bucal no grupo exposto, observou-se um aumento de nuclear buds (NBUDs) (segunda-feira, p = 0,004, z = - 2,894), uma diminuição do índice de divisão nuclear (IDN) (sexta-feira, p = 0,000, z = -4,78) nos linfócitos e um aumento na frequência de células com cromatina condensada nas células da mucosa bucal (segunda-feira, p = 0,000, z = -4,503; sexta-feira, p = 0,000, z = -5,203), indicativo de amplificação gênica e indução de mecanismos apoptóticos nestas células. Observou-se uma correlação positiva entre o índice de danos no DNA (ensaio cometa) e o tempo de exposição a tintas (r = 0,376; p = 0,031), assim como entre o tempo diário de exposição a tintas e a frequência de micronúcleos (segunda-feira, r = 0,450; p = 0,018) e de NBUDs (sexta-feira, (r = 0,402; p = 0,038) nos indivíduos expostos. Embora outros estudos sejam necessários, esses resultados mostram que a exposição ocupacional a tintas pode induzir um aumento de danos no DNA, os quais parecem estar sendo reparados durante o descanso do final de semana. / Organic solvents and metals, widely used in paints, can lead to DNA damages and reactives species (RS) generation. The aim of this study was to evaluate possibles oxidative, genotoxic and mutagenic damages in 33 male workers exposed for at least six months to paint. To constitute the control group 29 healthy individuals were choosen, without paint exposure, which matched in age with exposed group. Two sampling were performed to verify a possible DNA repair during the weekend: in the beginning and at the end of work week. The oxidative damages were evaluated by thiobarbituric acid reaction products (TBARS), carbonylated proteins (CP), superoxide dismutase (Sod) and catalase (Cat) activities. Hippuric acid (HA) and delta-aminolevulinic acid (ALA) were used as toluene and lead markers exposure, respectively. The genotoxicity was evaluated by comet assay (in peripherical blood) and by micronucleus (MN) test (in limphocytes and exfoliated buccal cells). The results showed no significant increase in TBARS levels in exposed group in relation to the control group. However, the lipidic damages was higher in Friday samples comparing to Monday samples (p = 0.008; z = -2.637). The proteins damage was higher in exposed group in comparison to control group exclusively in Friday samples (p = 0.032; z = -2.14). It was also observed that the workers exposed to paints showed lower Sod (p = 0.003; z = 2.935) and Cat (p = 0.025; z = -2.247) activities in Monday samples. The exposed group presented HA levels (p = 0.010; z = - 2.591) and ALA levels (p = 0.000; z = -4.487) higher than the control group. The workers exposed to paints presented a significant increase in DNA damage in both Monday (p = 0.000; z = -5.356) and Friday (p = 0.000; z = -6.456) samples. No increase was observed in MN frequency in limphocytes and buccal cells. However, the individuals exposed to paints showed an increase in nuclear buds (NBUDS) (Monday samples, p = 0.004, z = -2.894), a reduction in nuclear division index (NDI) (Friday samples, p = 0.000, z = -4.78) in lymphocytes and an increase in condensed chromatin frequency in buccal cells (Monday samples, p = 0.000, z = -4.503; Friday samples, p = 0.000, z = -5.203), indicating genic amplification and apoptosis induction. The DNA damage index (comet assay) correlated positively with average working time (r = 0.376; p = 0.031). It was also observed a positive correlation between time daily exposure and MN (Monday samples, r = 0.450; p = 0.018) and NBUDs (Friday samples: r = 0.402; p = 0.038) frequency. These results showed that paint exposure is able to generate DNA damages and these damages are being repaired during the weekend.