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Efeito do ácido graxo de cadeia curta, acetato, nas células da microglia ativadas por lipopolissacáride (LPS). / Effect of the short chain fatty acid, acetate, on microglial cells activated by lipopolysaccharide (LPS).Daniel May de Oliveira 20 August 2015 (has links)
Introdução: Ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) são compostos que contêm de 1 a 6 átomos de carbono. Estudos mostraram que possuem efeitos imunomoduladores, antiproliferativos e pró-apoptóticos, via ativação de receptores acoplados à proteína G ou via controle epigenético, agindo na histona acetil transferase (HAT) e na histona deacetilase (HDAC). O acetato é o AGCC encontrado em maiores concentrações nos cólons e no sangue, sendo também um intermediário em diversas reações metabólicas. Apesar disso, foi pouco estudado até o momento. As células da microglia são os macrófagos residentes no sistema nervoso central e desempenham importante papel em diversas doenças. Objetivo: estudar os efeitos do acetato na microglia esclarecendo seus efeitos na produção de mediadores inflamatórios e na viabilidade celular. Conclusão: O acetato estimula a produção de TNF-α e melhora a viabilidade de culturas da microglia ativadas por LPS. A melhora da viabilidade celular ocorre pela indução de autofagia. O mecanismo responsável pela indução da autofagia é epigenético, sendo completamente independente da ativação de receptores GPR. / Introduction: short-chain fatty acids (SCFA) are compounds containing from 1 to 6 carbon atoms. Studies have shown that these compounds have immunomodulatory, anti-proliferative and pro-apoptotic effects via activation of G-protein coupled receptors or via epigenetic control acting on histone acetyl transferase (HAT) and histone deacetylase (HDAC). Acetate is the SCFA found in highest concentrations in the colon and blood. It is also an intermediate in many metabolic reactions. Nevertheless, it was little studied so far. The microglial cells are resident macrophages of the central nervous system and play an important role in several diseases. Objective: To study the effects of acetate on microglia and clarify its effects on inflammatory mediators production and cell viability. Conclusion: Acetate stimulates TNF-α production and improves cell viability of microglial cultures activated by LPS. The improved cell viability occurs by autophagy induction. The mechanism responsible for induction of autophagy is epigenetic, being completely independent of the GRP receptor activation.
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Viabilidade econômica da irrigação de pastagem de capim tanzânia em diferentes regiões do Brasil. / Pasture irrigation economic viability for tanzania grass in different Brazilian regions.Valter Dantas Pinheiro 13 March 2002 (has links)
A estacionalidade da produção de forragens é um fator de grande importância, porque se relaciona com os baixos índices de lucratividade na pecuária de corte nacional. Nos últimos 5 anos, alguns pecuaristas capitalizados dos Estados de Goiás e Mato Grosso do Sul, implantaram aproximadamente, 120 equipamentos de irrigação (pivô central), totalizando cerca de 10.000 ha de pastagens irrigadas com gado de corte no Brasil Central. Os resultados econômicos obtidos até o presente momento, apresentam-se variáveis e imprevisíveis, sendo que alguns pecuaristas já apresentaram insucessos na condução desses projetos, enquanto outros, demonstram lucros surpreendentes para esse setor agropecuário. O objetivo dessa pesquisa é apresentar uma metodologia de análise econômica da viabilidade de irrigação de pastagens em diferentes regiões do Brasil, estimando-se a produtividade do capim tanzânia irrigado, através de um modelo matemático, calibrado em um experimento de campo, conduzido no município de Piracicaba - SP, com base na disponibilidade mensal local de unidades fototérmicas (temperatura e fotoperíodo) para diferentes níveis de adubações nitrogenadas. No estudo realizado, foram ajustados os parâmetros da função de Gompertz para as diferentes doses de adubação nitrogenada analisadas, sendo os melhores ajustes observados para as maiores dosagens de nitrogênio: 275, 756 e 2079 kg N ha-1 ano-1 com r2 = 0,9650; 0,8938 e 0,9784 respectivamente; já as menores dosagens estudadas, 0 e 100 kg N ha-1 ano-1, a equação ajustada apresentou precisão moderada para estimativa da produção, r2 = 0,7047 e 0,7112 respectivamente. As simulações efetuadas da viabilidade econômica da irrigação (pivô central elétrico) em pastagens de capim tanzânia em território nacional apresentaram retornos econômicos interessantes (R$ 400,00 a 600,00 ha-1 ano-1) em diversas regiões analisadas (Cuiabá MT, Aragarças GO, Petrolina PE, Porto Nacional - TO). Em outros casos, os retornos econômicos foram pouco atraentes aos investidores (R$ -100,00 a 300,00 ha-1 ano-1), (Campo grande - MS, Uberaba MG, Rio Verde GO, Piracicaba - SP), o que justifica a utilização da metodologia desenvolvida no processo de tomada de decisão do pecuarista, visando minimizar os riscos de insucesso nesse tipo de empreendimento. / The seasonality in forage production is one of the most important factors related to low profit indexes concerning the national beef cattle raising activities. In the last 5 years, some cattle breeders captalized in Goiás and Mato Grosso do Sul states, have set up nearly 120 irrigation machines (center pivot), totalizing around 10.000 ha of irrigated pastures for beef cattle in Central Brazil. The economic results achieved so far, have shown to be variable and unpredictable, as while some cattle breeders have already failed to carry on these projects, others have obtained surprising profitability for this activity. The purpose of this study is to present a methodology for the economic analysis of pasture irrigation viability in different Brazilian regions, estimating the productivity of irrigated Tanzania grass through a mathematical model adjusted by means of a field experiment carried out in Piracicaba SP, based on the local monthly availability of photo-thermal units (temperature and photoperiod) for different nitrogen fertilization levels. In the present study, the parameters of the Gompertz function were adjusted for the different nitrogen doses analyzed, being the best adjustments observed for the highest nitrogen doses: 275, 756 and 2079 kg N ha-1 year-1, with r2 = 0,9650; 0,8938 and 0,9784 respectively. Yet, for the lowest nitrogen doses studied, 0 and 100 kg N ha-1 year-1, the adjusted equation presented moderate precision for the production estimative, r2 = 0,7047 and 0,7112, respectively. The simulations carried out for the center pivot irrigation of tanzania grass pastures in the Brazilian territory, presented interesting economic responses (R$ 400,00 to 600,00 ha year-1) in several regions analyzed (Cuiabá MT, Aragarças GO, Petrolina PE, Porto Nacional - TO). In other cases, the profit was little attractive to investors (R$ -100,00 to 300,00 ha year-1), (Campo Grande - MS, Uberaba MG and Rio Verde GO, Piracicaba - SP), justifying the use of the developed methodology in the cattle raisers decision making process, aiming to minimizing the risks of failure in this business.
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A vitrificação de oócitos bovinos prejudica sua capacidade reprodutiva, independente do estadio de maturação / Vitrification of bovine oocytes impairs their reproductive capacity independently of maturation stageDaiane Lopes Bulgarelli 14 December 2011 (has links)
Até o momento a literatura não determinou qual o melhor estadio de maturação (imaturo ou maduro) para que o oocito mantenha sua competência para o desenvolvimento reprodutivo após a criopreservação. O objetivo deste estudo foi determinar em qual estadio meiótico (imaturo -VG (vesícula germinativa) ou maduro- MII (metáfase II)) o oócito é menos susceptível ao dano na criopreservação, utilizando modelo experimental bovino. Foram utilizados ovários de vacas abatidas em matadouro, após a aspiração dos folículos, os oócitos imaturos (VG) foram selecionados para a maturação in vitro e vitrificação, e foram divididos em três grupos: 1) oócitos maturados in vitro e não submetidos à vitrificação (CONTROLE); 2) oócitos vitrificados imaturos (VG), descongelados e submetidos à maturação in vitro (CRIO-MIV); 3) oócitos maturados in vitro (MII), vitrificados e descongelados (MIV-CRIO). Os oócitos foram avaliados quanto a: a)maturação nuclear pela técnica de orceína acética; b) integridade da zona pelúcida (ZP) através de microscopia de polarização; c) viabilidade oocitária pela técnica de DEAD-LIVE; d) desenvolvimento embrionário (taxa de clivagem, produção e eclosão de blastocistos) através da fertilização in vitro (FIV) e ativação partenogenética (AT). Não houve diferença na capacidade de maturação nuclear entre os oócitos frescos e descongelados no grupo CRIO-MIV (p=0,23). Em relação à zona pelúcida a totalidade dos oócitos (100%) nos três grupos apresentou leitura de zona pelúcida positiva, não havendo correlação com evolução embrionária posterior. Na análise de viabilidade celular pelo DEAD-LIVE verificou-se que houve redução da viabilidade do grupo MIV-CRIO (27%) quando comparado com controle (84%) (p<0,0001). Na análise do potencial de desenvolvimento embrionário o grupo controle apresentou melhores taxas de clivagem após FIV (80%) e AT (58%), do que os grupos CRIO-MIV (28%; p<0,0001; 28%; p=0,0002, respectivamente) e MIV-CRIO (26%; p<0,0001; 22%, p<0,0001,respectivamente). As taxas de formação de blastocisto e eclosão após FIV nos grupos CRIO-MIV, MIV-CRIO e após AT no grupo MIV-CRIO foram nulas. Houve a produção e eclosão de apenas um blastocisto no grupo CRIO-MIV após AT. No modelo experimental utilizado, o procedimento de vitrificação comprometeu parcialmente a viabilidade dos oócitos medida pela técnica de DEAD- LIVE e completamente o desenvolvimento embrionário subseqüente, independente do estadio de maturação meiótica (VG ou MII) durante a criopreservação. No entanto, oócitos vitrificados em estadio de VG e submetidos à MIV foram meioticamente competentes e progrediram até o estadio de MII, sugerindo que o dano não compromete a capacidade de maturação nuclear do oócito. Este estudo não conseguiu determinar qual o melhor estadio meiótico oocitário para criopreservação, já que os dois estadios meióticos (VG e MII) se mostraram igualmente prejudicados pela criopreservação em relação à capacidade reprodutiva. / Until the present literature has not achieved a consensus regarding the best maturation stage for oocyte to maintain their reproductive capacity after cryopreservation. The aim of this study was to determine, using an experimental bovine model, in which stage of development (VG stage, immature, or MII stage, post-maturation in vitro) the oocyte is less susceptible to damage during cryopreservation. Immature oocytes (VG) from the ovaries of slaughtered cows were selected for in vitro maturation or vitrification and divided into three groups. The first group (CONTROL) consisted of immature oocytes, matured in vitro without vitrification; the second group (CRYO-IVM) consisted of vitrified immature oocytes thawed and submitted to in vitro maturation; and the third group (IVM-CRYO) consisted of matured in vitro oocytes submitted to vitrification and thawing. The oocytes were evaluated for: nuclear maturation by acetic orcein staining; integrity of the zona pellucida using a polarized microscope; cell viability by the Dead-Live technique; and embryo development (cleavage, production and hatching rate) by in vitro fertilization and parthenogenetic activation. There was no difference in capacity of nuclear maturation between fresh and thawed oocytes (p=0.23). Regarding the zona pellucida (ZP), all oocytes (100%) of all three groups (control, CRYO-IVM and IVMCRYO) presented a positive ZP reading, with no correlation with later embryo evolution. DEAD-LIVE analysis of cell viability revealed reduction of viability in the IVM-CRYO group (27%) compared to control (84%) (p<0.0001) and to the CRYO-IVM group (56%) (p=0.017), with no difference between the last two groups (p=0.055). Analysis of the potential for embryo development by means of in vitro fertilization showed that the control group presented better cleavage and blastocyst formation rates than the CRYO-IVM (p<0.0001 and p<0.0001, respectively) and the IVM-CRYO (p<0.0001 and p=0.0004, respectively) groups. Analyzing the potential for embryo development the control group presented better cleavage by means of in vitro fertilization (80%) and parthenogenetic activation (58%) than the CRYOIVM (28%; p<0,0001; 28%; p=0,0002, respectively) and the IVM-CRYO groups (26%; p<0,0001; 22%, p<0,0001,respectively) Analysis of blastocyst formation rates and hatching after FIV and AT in CRYO-IVM and IVM-CRYO groups were null. Vitrification of bovine oocytes causes great impairment of their reproductive capacity regardless of the stage of maturation at the time of freezing. However the vitrified immature oocytes submitted to IVM maintained their capacity of nuclear maturation, as they achieved MII stage. This study was not able to determine which stage was better in reducing crio damage, as both stages (VG and MII) presented equally impaired by the process.
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Padronização da metodologia de congelamento de células da granulosa antrais humanas para suporte no co-cultivo com oócitos imaturos / Cryopreservation of human granulosa cells for future use in assisted reproductive proceduresMarina Meirelles Machado 05 April 2016 (has links)
As técnicas de cultivo de folículos e oócitos in vitro, com o objetivo de se obter oócitos maduros para procedimentos de Reprodução Assistida (RA), têm sido aplicadas em diferentes contextos. O sucesso destes procedimentos está diretamente relacionado ao sistema de cultivo utilizado. A utilização de células da granulosa (CG) humanas cultivadas in vitro como um suporte para o co-cultivo destes oócitos imaturos e folículos tem sido descrita por alguns autores. A criopreservação destas células, considerando-se o contexto de sua obtenção em procedimentos de RA, permitiria a viabilização da aplicação destas células na prática clínica diária. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi padronizar o congelamento de células da granulosa (CG) humanas para aplicação em sistemas de co-cultivos de folículos e oócitos imaturos. Foram obtidas CG de 20 voluntárias em tratamento de reprodução assistida, células de 10 voluntárias foram cultivadas em meio ?-MEM suplementado para interrupção da luteinização e congeladas após 48 horas em container \"Cryostep\" (grupo 2C- 2 cultivos) (etapa 2) e células de 10 voluntárias foram congeladas em container \"Cryostep\" sem cultivo prévio (grupo CD- congelamento direto) (etapa 3). Após o descongelamento estas células foram (re)cultivadas por 144 horas, com troca de meio em 48, 96 e 144 horas para avaliações da produção de estradiol (E2) e progesterona (P4) (ng/mL). Verificamos redução na contagem celular e na viabilidade celular tanto no método de congelamento direto (CD) quanto no método com dois cultivos (2C) após o descongelamento (p<0,05), e isso se refletiu na produção de estradiol e progesterona que foi maior nas culturas de células frescas em relação às células criopreservadas (p<0,05). Porém, a relação de E2/célula foi mantida após o descongelamento, sugerindo que esta redução na produção se deve à redução no número de células, as que sobrevivem se mantém normofuncionantes (p=0,23).O CD foi mais eficiente pois permitiu uma maior recuperação celular e uma melhor viabilidade quando comparado ao grupo 2C. A relação estradiol/progesterona foi mantida em todos os tempos de cultivo, fresco, CD e 2C (p>0,05), indicando que a característica funcional destas células foi preservada após o descongelamento. Concluímos que a criopreservação de CG humanas obtidas durante a captação de oócitos compromete a contagem celular e a viabilidade geral da cultura, entretanto, a capacidade funcional e a característica destas células se mantêm preservadas (manutenção das relações E2/célula e E2/P4) / Follicle and oocyte in vitro culture techniques, aiming to obtain mature oocytes for Assisted Reproductive Treatments (ART), have been applied to different contexts. The success of these procedures depends on the culture system used. The use of human granulosa cells (GC) in co-culture systems for follicle and oocyte maturation have been described by some authors. The cryopreservation of these cells, considering the context in which they are obtained during ART, would enable the usage of these cells in such procedures in daily clinical practice. Thus, the objective of this study was to standardize the freezing protocol for human granulosa cells (GC) for future applications in co-culture systems for follicle and oocyte maturation. Twenty volunteers submitted to ART donated their granulosa cells after oocyte retrieval, 10 were cultivated previously in order to interrupt the luteinization process and then frozen \"Cryostep\" container (group 2C- two cultures) (step 2) and 10 were directly frozen with no previous culture in the \"Cryostep\" container (group DF- direct freeze) (step 3). After thawing these cells were (re)cultured for 144 hours, with medium exchange at 48, 96 and 144 hours to evaluate the estradiol (E2) and progesterone (P4) production (ng/mL). After thawing, there was a reduction in the cell number (p<0,05) and cell viability in both methods, the direct freezing (DF) and the two cultures (2C) (p<0,05); this had an impact in the production of estradiol and progesterone, which were higher in fresh cultures than in the frozen ones (p<0,05). However, the E2/cell ratio was maintained after thawing (p=0.23), suggesting that this impairment in steroid production was probably due to the reduction in the cell count. The cells that survive remain functionally normal. The DF was more efficient since it allowed greater cell recovery and better viability when compared to 2C. The estradiol/progesterone ratio was maintained in all culture times, in the fresh, DF or 2C groups (p>0.05), indicating that the functional characteristic of these cells was preserved post-thawing. We conclude that cryopreservation of human GC obtained during oocyte retrieval compromises the cell count and the overall viability of the culture; however, the functional capacity and the characteristic of these cells are preserved (maintenance of E2/cell and E2/P4 relations)
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Pós-tratamento de esgoto sanitário com biofiltro aerado submerso preenchido com carvão granular: desempenho técnico e estudo de viabilidade econômica / Wastewater post-treatment with submerged aerated biofilter filled with granular coal: technical performance and economic viability studyHallan Fontana 08 February 2008 (has links)
Neste trabalho avaliou-se o desempenho técnico e a viabilidade econômica do biofiltro aerado submerso preenchido com carvão granular antracitoso, empregado no pós-tratamento de efluente proveniente de reator anaeróbio de fluxo ascendente com manta de lodo. Os biofiltros experimentais utilizados no trabalho, com volume reacional de 47 L, operaram por 200 dias, com tempos de detenção hidráulica de 5 e 7,5 h. Constatou-se a viabilidade técnica em relação à remoção de matéria orgânica e nitrogênio amoniacal. O BF1 (TDH = 5 h), apresentou eficiências médias na remoção de \'DQO IND.f\', \'DBO IND.5\' e nitrogênio amoniacal de 62%, 46% e 89%, respectivamente, com valores médios de efluente de 25 \'+ OU -\' 11 mg\'DQO IND.f\'/L, 36 \'+ OU -\' 29 mg\'DBO IND.5\'/L e 4 \'+ OU -\' 9 mg N-\'NH IND.3\'/L. Por outro lado, o BF2 (TDH = 7,5 h), com desempenho superior, apresentou eficiências médias na remoção de \'DQO IND.f\', \'DBO IND.5\' e nitrogênio amoniacal de 68%, 95% e 89%, respectivamente, com valores médios de efluente de 21 \'+ OU -\' 12 mg\'DQO IND.f\'/L, 3 \'+ OU -\' 3 mg\'DBO IND.5\'/L e 6 \'+ OU -\' 12 mg N-\'NH IND.3\'/L. Os sistemas combinados UASB+BF apresentaram eficiências globais médias acima de 87% para DQO filtrada. Na análise da viabilidade econômica, o custo do leito filtrante de carvão representou, em média, 23% do custo total de implantação. Para o horizonte de projeto de 20 anos e taxa de juros de 11% ao ano, as receitas mínimas estimadas para sistemas de pós-tratamento com biofiltro preenchido com carvão foram de R$ 0,19; R$ 0,20; R$ 0,22 e R$ 0,24 por metro cúbico tratado, para populações de 200.000, 100.000, 50.000 e 25.000 habitantes respectivamente, sem considerar o custo com o tratamento do lodo gerado neste tratamento. / This research refers to technical performance and economic viability of submerged aerated biofilter with bed granular anthracite coal, employed in the post-treatment of effluent from upflow anaerobic sludge bed reactor. The experimental biofilters used in this research, with 47 L reaction volume, were loaded for 200 days with hydraulic retention time of 5 and 7.5 h. Technical feasibility regarding the removal of organic matter and ammonia nitrogen was confirmed. BF1 (HRT = 5 h) removal efficiencies of filtered COD, BOD and ammonia nitrogen were 62%, 46% and 89%, respectively, with average effluent concentration of 25 \'+ OU -\' 11 mg \'COD IND.f\'/L, 36 \'+ OU -\' 29 mg \'BOD IND.5\'/L e 4 \'+ OU -\' 9 mg \'NH IND.3\'/L. Moreover, BF2 (HRT = 7.5 h), with higher performance, achieved removal efficiencies 68%, 95% and 89% of filtered COD, DBO and ammonia nitrogen respectively, with average effluent concentration of 21 \'+ OU -\' 12 mg \'COD IND.f\'/L, 3 \'+ OU -\' 3 mg \'BOD IND.5\'/L and 6 \'+ OU -\' 12 mg \'NH IND.3\'/L. Combined systems UASB+BF achieved average overall efficiencies above 87% to filtered COD. Concerning economic feasibility study, the coal bed represented, on average, 23% of the total deployment cost. Within a twenty-year-project horizon and 11% of annual interest rate, the estimated minimum revenues for post-treatment system with submerged aerated biofilter with bed coal were R$ 0,19; R$ 0,20; R$ 0,22 and R$ 0,24 - brazilian real - per cubic meter of wastewater treated for 200,000, 100,000, 50,000 and 25,000 inhabitants respectively, without evaluating treatment cost of sludge generated in this system.
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Efeito de ligaduras elásticas sobre a viabilidade celular e produção de óxido nítrico em células J744Silva, Adriana Alves 20 February 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-02-20 / Muitos estudos têm avaliado o comportamento das ligaduras elásticas em relação às suas propriedades físicas. No entanto, a biocompatibilidade destes materiais não se apresenta bem documentada na literatura. O presente estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, a viabilidade celular de macrófagos murinos J774 na presença de ligaduras elásticas de diferentes marcas e cores e, analisar o efeito destas ligaduras na produção de óxido nítrico (NO) produzido por estas células, com e sem ativação de interferon-gama (IFN-γ), uma citocina pró-inflamatória. Para cada tempo estudado, foram utilizados 6 elos de ligaduras elásticas de 3 marcas diferentes (Morelli, GAC e TP) nas cores prata e transparente após esterilização com óxido de etileno. As placas de cultura de 96 poços, utilizadas no experimento, foram divididas em 2 metades. A primeira foi preenchida pelas células J774 resuspensas em meio RPMI suplementado juntamente com os elos de cada tipo de ligadura e células controle. A segunda metade foi completada com outros 6 elos dos mesmos tipos de ligaduras mantidos em culturas juntamente com 10μl de IFN—γ (5 ng/ml) e grupo controle. As placas foram incubadas em diferentes intervalos de tempo: 24, 48 e 72 horas. As células foram submetidas à avaliação da viabilidade celular através da técnica do MTT [3 – (4,5-dimethylthiazol-2-yl) – diphenyl tetrazolium bromide] e os sobrenadantes foram coletados para a análise da produção de NO, utilizando-se o método de Griess. Para análise dos resultados foram utilizados os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. Na ausência do estímulo (IFN—γ), a viabilidade celular nos grupos de ligaduras foi maior no período final da avaliação em relação ao grupo controle. No entanto, 3 grupos de ligaduras (Morelli prata, Morelli transparente e GAC prata) exibiram proliferação significativa em 72 horas. As ligaduras da marca TP Orthodontics (prata e transparente) não influenciaram de forma significativa a viabilidade celular e a produção de NO. Embora a ligadura Morelli prata tenha estimulado as células J774 a realizarem uma maior produção de NO, os outros tipos de ligaduras nos diferentes tempos avaliados não apresentaram diferenças significativas na produção de óxido nítrico em relação às células controle. Na presença do IFN-γ, houve uma redução significativa da viabilidade celular no tempo 48 horas para o grupo das ligaduras Morelli e GAC. Entretanto, uma média de viabilidade superior ao apresentado pelas células controle foi observada em todos os grupos de ligaduras no tempo 72 horas, sendo significativa para o grupo das ligaduras GAC transparente. O grupo das ligaduras TP foi o que apresentou comportamento semelhante ao grupo controle, apesar das ligaduras TP prata terem apresentado menor viabilidade em 24 horas. O IFN-γ proporcionou aumento significativo na produção de NO em todos os grupos no período final em relação ao inicial. As ligaduras Morelli transparente e GAC (prata e transparente) demonstraram a menor produção desta molécula nos 3 tempos analisados. / Although the physical properties of elastic ligatures have been the subject of several studies, the biocompatibility of these materials has not been well documented in the literature. This study was an in vitro investigation of the cellular viability of the murine macrophage J774 cell line in the presence of elastomeric ligatures of different brands and colors, and of nitric oxide (NO) production of these cells both, under the presence of such ligatures, and under the influence of a proinflammatory cytokine: gamma-interferon. After sterilization with ethylene oxide, 6 chains of ligatures of 3 different brands (Morelli, GAC e TP) and colors (silver and transparent) were used at each study time. The 96-well culture plates used in the experiment were divided in 2 halves. The first was filled with J774 cells resuspended in supplemented RPMI medium, along with the chains of each kind of ligature and control cells. The second half was filled with another 6 chains of the same kinds of ligatures, kept in J774 cell cultures in supplemented RPMI medium, along with 10μl of IFN-γ (5 ng/ml) and control cells. The plates were incubated at 24, 48, and 72 hours. The MTT [3 – (4,5-dimethylthiazol-2-yl) – diphenyl tetrazolium bromide] technique was used for cellular viability assessment, and the supernatants were collected for NO production analysis with the Griess method. Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were used to analyze the results. Cellular viability in the elastomeric groups was higher at the final time point in relation to the control group. However, 3 elastomeric groups (silver Morelli, transparent Morelli and silver GAC) showed significant proliferation after 72 hours. TP-ligature-exposed cells had the same behavior of controls, no significant changes in cellular viability and NO production being found. Although silver Morelli ligatures led to higher NO production, the other types of ligatures did not
significantly affect NO production, as compared to control cells. In the presence of IFN-γ, Morelli and GAC ligatures led to a significant reduction of cellular viability after 48 hours. Yet a viability mean higher than that seen in control cells was observed for all ligatures after 72 hours, with transparent GAC showing significant proliferation. Cells exposed to TP ligatures had the same behavior of controls, although silver TP ligatures led to lower viability at 24 hours. Nitric oxide production was significantly greater in all groups at the final time point in relation to the initial time point. The transparent Morelli and silver and transparent GAC showed the smallest NO production at the 3 study time points.
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Métodos nutricionais de muda forçada em poedeiras semi-pesadas. / Forced-moulting nutritional methods for brownegg laying hens.Girardon, Juliana Cardoso 25 March 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-03-25 / This study aimed to investigate four forced-moulting methods on productive
performance and egg quality of brown-egg layers. A total of 448 100 week-old laying
hens were fed experimental diets during 148 days (from August to December of
2009). The experimental design was a completely randomized block design, with 16
replicates per treatment. Treatments consisted of: 1) fasting during 14 days; 2)
soybean hulls based diet; 3) wheat bran based diet and 4) High tannin sorghum
based diet. A post-moulting corn-soybean meal basal diet, formulated to fulfill
nutrient requirement of birds was fed to the animals. Hens fed alternative ingredient
based diets showed better performance. Productive performance, viability and
decrease in egg production were similar between hens fed the soybean hulls based
diet and those exposed to fasting. Birds fed high tannin showed lower mortality, but
showed a lower egg production. Birds fed alternative ingredients showed 12% egg
production at 6 days after the beginning of the experiment. These results indicate
that hens fed alternative ingredient sources showed better performance than those
exposed to fasting at the end of the first productive cycle. / Objetivou-se avaliar e verificar o desempenho produtivo, a eficiência da muda
forçada e a qualidade dos ovos de poedeiras comerciais semipesadas de
linhagem comercial, com 100 semanas de idade inicial, submetidas a quatro
métodos nutricionais de muda forçada. O experimento foi realizado entre agosto
de 2009 em dezembro de 2009, compreendendo 142 dias experimentais,
utilizando-se 448 aves. O delineamento experimental utilizado foi completamente
casualizado, com quatro tratamentos distribuídos por sorteio dentro das baterias,
compostos por: 1) jejum de 14 dias; 2) ração à base de casca de soja; 3) ração à
base de farelo de trigo e 4) ração à base de sorgo alto tanino, sendo cada
tratamento com 16 repetições. As aves foram distribuídas em 64 gaiolas com
sete aves em cada. A dieta basal do pós muda foi formulada à base de milho e
farelo de soja, com níveis nutricionais estabelecidos pelo manual da linhagem de
acordo com a fase produtiva. Foi observado melhor desempenho durante a
muda, nas aves que receberam dietas alternativas. Para as variáveis produtivas
analisadas, viabilidade do lote e queda de postura, as aves que receberam
alimentação à base de casca de soja tiveram desempenho semelhante ao das
aves em jejum, quando comparadas aos animais que receberam os demais
alimentos. O uso de sorgo com alto tanino reduziu de forma notável a
mortalidade entre as aves, entretanto não tem o efeito desejado sobre a redução
na taxa de postura. Com níveis de postura considerados de 12%, as aves
submetidas aos protocolos alternativos atingiram este nível em
aproximadamente seis dias após o início da muda forçada. Assim, é possível
substituir o método convencional de muda (jejum prolongado), por métodos
alternativos que não são tão degradantes fisiologicamente e nem no bem estar
animal para as poedeiras comerciais no fim do primeiro ciclo produtivo.
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Conservação à baixa temperatura e avaliação da viabilidade de grãos de pólen de mamoneira / Conservation in low temperatures and avaliation of the viability of castor bean pollen grainCuchiara, Cristina Copstein 19 March 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-03-19 / The castor bean (Ricinus communis L.) it is known by the high adaptation capacity to
the different climate conditions and soil, characteristics these that it possible be her
cultivated commercially in different areas of Brazil. Consequently, researches about
conservation and germination of the pollen are indispensable to the programs of
genetic improvement. The purpose is to evaluate the viability and conservate grains
of castor bean pollen. For the study, were used floral buttons of the cultivars IAC 80,
AL Guarany 2002 and Lara. In the first experiment, were selected appropriate
parameters of pH (5, 6, 7 and 8), temperature (15, 20, 25 and 30 ºC), sucrose (0; 5;
10 and 20%) and combinations of 4, 8 and 10 mgL-1 boron with sucrose. In the
second experiment, the storage of pollen was evaluated of the cultivars IAC 80 and
AL Guarany 2002 in four places (liquid nitrogen (-196 ºC); ultrafreezer (-72 ºC);
freezer (-18 ºC) and refrigerator (4 ºC)) being analyzed week after week to complete
thirty days and in the sixty days. The third experiment was evaluated the effect about
the time of defreezing of pollen cultivars IAC 80 and AL Guarany 2002, submitted to
the same places and storage periods (15, 30 and 60 days) analyzed of hour after
hour to complete six hours and after twenty-four hours. The viability test was
constituted preparing ideal culture medium for each experiment, after that it was
deposited in excavated plates, where the pollen was distributed on the surface of the
medium, the plates were put in humid camera and taken for incubation. In random
delineation, were analyzed a hundred pollens per repetitions in a total of four
repetitions for the first experiment and six for the others. I In the first experiment was
observed that pH values above 6,0 cause decrease in the amount of germinated
pollens. The temperature of 20 ºC and 5% and 10% of sucrose were appropriate for
the germination. Sucrose and 4 and 8 boron mgL-1 increased the germination,
however 10 mgL-1 didn't favor. It was observed in the second experiment that the
storage in 4 and -18 ºC is not efficient, the number of germinated pollens falls quickly
causing unviability after the fifth week, in -72ºC the pollens of the cultivar IAC 80
stayed viable even the fourth week and the cultivar AL Guarany 2002 presented
viability the sixty days and -196 ºC was very efficient even to fifth week. With the third
experiment can be verified that for the cultivars IAC 80, to the 15 and 30 days of
storage, the temperature of the -72 ºC presented around 50% of germination needing
five and six hours of incubation for the defreezing, respectively; for the cultivar AL
Guarany 2002, the best result was reached to -196 ºC and the sixty days was
occurred the unviability. Therefore, the cultivars answered in a different way the best
methodology of evaluation of pollen viability and conservation, however, the one that
suggests be species-specific. / A mamoneira (Ricinus communis L.) é conhecida pela alta capacidade de adaptação às
diferentes condições de clima e solo, características estas que a possibilita ser comercialmente
cultivada em diferentes regiões do Brasil. Consequentemente, pesquisas sobre conservação
e germinação do pólen são indispensáveis aos programas de melhoramento
genético. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade e a conservação de grãos
de pólen de mamoneira. Para tanto, foram utilizados botões florais das cvs. IAC 80,
AL Guarany 2002 e Lara. No 1º experimento, foram selecionados parâmetros
adequados de pH (5, 6, 7 e 8), temperatura (15, 20, 25 e 30 ºC), sacarose (0; 5; 10 e
20%) e combinações de 4, 8 e 10 mgL-1 boro com sacarose. No 2º experimento, foi
avaliado o armazenamento de pólen das cvs. IAC 80 e AL Guarany 2002 em 4
ambientes (nitrogênio líquido (-196 ºC); ultrafreezer (-72 ºC); freezer (-18 ºC) e
refrigerador (4 ºC)) sendo a análise realizada de semana em semana até completar
30 dias e aos 60 dias. No 3º experimento foi avaliado o efeito do tempo de
descongelamento de pólen das cvs. IAC 80 e AL Guarany 2002, submetidas aos
mesmos ambientes e períodos de armazenamento (15, 30 e 60 dias) analisados de
hora em hora até completar 6h e após 24h. O teste de viabilidade foi constituído do
preparo do meio de cultura ideal para cada experimento, após depositado em placas
de lâmina escavada, onde o pólen foi distribuído sobre a superfície do meio e após
as placas foram colocadas em câmara úmida e levadas para incubação. Em
delineamento inteiramente casualizado, foram analisados 100 polens/repetição num
total de 4 repetições para o 1º experimento e 6 para os demais. No 1º experimento
foi verificado que valores de pH acima de 6,0 provocam diminuição na quantidade de
polens germinados. A temperatura de 20 ºC com 5% e 10% de sacarose foram
adequadas para a germinação. Sacarose com 4 e 8 mgL-1 de boro aumentaram a
germinação, porém 10 mgL-1 não favoreceu. Observou-se no 2º experimento que o
armazenamento em 4 e -18 ºC não é eficiente, pois o número de polens germinados
cairam rapidamente causando inviabilidade após a 5ª semana. Em -72 ºC os polens
da cv. IAC 80 permaneceram viáveis até a 4ª semana e os da cv. AL Guarany 2002
apresentaram viabilidade aos 60 dias e -196 ºC foi muito eficiente até a 5ª semana.
Com o 3º experimento foi possivel verificar que para a cv. IAC 80, aos 15 e 30 dias
de armazenamento, a temperatura de -72 ºC apresentou em torno de 50% de
germinação necessitando de 5 e 6h de incubação para o descongelamento,
respectivamente; para a cv. AL Guarany 2002, o melhor porcentual foi alcançado a
temperatura de -196 ºC sendo observado aos 60 dias a ocorrência de inviabilidade.
Portanto, as cultivares responderam de forma diferente a melhor metodologia de
avaliação de viabilidade polínica e conservação, no entanto, o que sugere ser
espécie-específico.
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Efeito da temperatura durante a diferenciação de gemas, floração, crescimento e desenvolvimento de frutos em pessegueiro na região de Pelotas, RS. / Effect of the temperature during bud differentiation, blooming, fruit growth and development in peach tree in the area of Pelotas,RSCouto, Marcelo 27 November 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-11-27 / Insufficient chilling accumulation limits the production of peach in subtropical areas.
Comparatively this combined with the wide temperature fluctuation during bud
differentiation, through the bloom period and fruit growth and development may
cause crop losses. Problems with low productivity in southern Rio Grande do Sul
often attributed to the mild winter conditions, however, the environmental conditions
especially around bloom period to be critical for optimal yields. In subtropical áreas
temperature oscillations may cause problems during fertilization with subsequent
reduction of fruit set and production instability of some peach cultivars. To better
understand the effect of high temperatures on flower differentiation, pre-blooming,
blooming, fruit set and fruit development and growth observations were made during
the stages of bud differentiation, leafing and blooming, which included pollen
production and viability, floral morphology, fruit set and the fruit growth and
development. Temperature elevation with the tree was obtained by bagging branches
with transparent plastic or with transparent plastic bottles. Plants of two low chilling
peach cultivars (200 to 300 hours): Granada and Maciel were used in the years of
2003, 2004 and 2005. Conditions of high temperatures during the period of bud
differentiation of Granada and Maciel did not promote the formation of double pistils
or any morphologic anomalies. Bagging shoots with transparent plastic bags and
plastic bottles is a simple and economical way of increasing the temperature on the
branches under field conditions. High temperatures conditions during pre-blooming
period advanced and accelerated the flowers anthesis and pistil growth. Flower
morphology, regarding pistil length and weight, was not influenced by temperature
elevation under experimental conditions. High temperatures during the pre-blooming
negatively influenced the fruit set of the peach cultivar Granada. The percentage of in
vitro pollen germination was different among cultivars and incubation temperatures.
Pollen viability of cultivars Esmeralda, Granada, Jade and Maciel, can be evaluated
by in vitro germination in standard culture medium (10% of sucrose + 1% of agar,
dissolved in distilled water), three hours after the inoculation, with incubation at 24°C
and 28°C. Under high temperatures conditions during the stage I of fruit growth and
development of peach cultivars Granada and Maciel, cell division may be accelerated
since a larger number of cells was counted in the pericarp tissue. / As horas de frio necessárias às gemas vegetativas e floríferas, quando insuficientes,
limitam a produção de pessegueiros nas zonas subtropicais e temperadas
brasileiras. A redução na produtividade pode ocorrer também, devido a variações
bruscas na temperatura durante os períodos de diferenciação das gemas, préfloração,
floração, crescimento e desenvolvimento dos frutos desta espécie. Estas
variações de temperatura podem ser uma das causas da instabilidade produtiva de
algumas cultivares de pessegueiro. Muito dos problemas que se verificam, após a
floração ou mesmo na colheita, como baixa produtividade, atribuídos muitas vezes,
apenas às condições de inverno com pouco frio que ocorrem no sul do Rio Grande
do Sul, podem ter origem em etapa anterior do desenvolvimento e, muito
provavelmente, na diferenciação floral. Com os objetivos de estudar a influência de
altas temperaturas sobre diferenciação de gemas, pré-floração, floração, frutificação
efetiva, crescimento e desenvolvimento de frutos, foram realizadas observações no
avanço dos estádios de diferenciação das gemas, épocas de brotação e floração,
testes de viabilidade e produção de pólen. Foram, ainda, feitas observações na
morfologia e biologia floral, frutificação efetiva, crescimento e desenvolvimento dos
frutos. A elevação da temperatura foi proporcionada com a utilização de casas de
plástico ou através do ensacamento dos ramos com mangas de plástico
transparente ou garrafas de plástico. Foram utilizadas plantas de duas cultivares
comerciais de pessegueiro de baixa necessidade de frio (200 a 300 horas): Granada
e Maciel em 2003, 2004 e 2005. Não há a formação de pistilos duplos ou quaisquer
anomalias morfológicas mesmo sob temperaturas maiores que 25°C durante o
período de diferenciação das gemas das cultivares de pessegueiro Granada e
Maciel. Há diferenças entre cultivares e entre temperaturas de incubação quanto à
porcentagem de germinação do pólen in vitro. A viabilidade do pólen das cultivares
de pessegueiro testadas (Esmeralda, Granada, Jade e Maciel) pode ser avaliada por
germinação in vitro em meio de cultura padrão (10% de sacarose + 1% de agar,
dissolvidos em água destilada), três horas após a inoculação, com incubação a 24°C
e 28°C. Ensacamento de ramos com plástico transparente ou com garrafas de
plástico, é uma forma simples e econômica de aumentar a temperatura junto aos
ramos das plantas, em condições de campo, sendo mais efetivo que o uso de
estufas de plástico. Conclui-se que em condições de temperaturas elevadas, durante
a pré-floração, ocorre a antecipação da antese das flores para as cultivares Granada
e Maciel. A morfologia das flores, em relação ao comprimento e ao peso dos pistilos,
não é influenciada pela elevação da temperatura nas condições experimentais
utilizadas. Temperaturas elevadas durante a pré-floração, influenciam negativamente
na frutificação efetiva da cultivar de pessegueiro Granada. Em condições de
temperaturas, elevadas durante o estádio I de crescimento e desenvolvimento dos
frutos, para as cultivares de pessegueiro Granada e Maciel, há uma tendência de
formação de um maior número de células do pericarpo, o que ampliaria o potencial
da produção de frutos com maior tamanho.
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Commande prédictive d'un robot humanoïde / Model predictive control of a humanoid robotHerdt, Andrei 27 January 2012 (has links)
L'étendue des mouvements que les robots humanoïdes peuvent réaliser est fortement limitée par des contraintes dynamiques. Une loi de commande qui ne prend pas en compte ses res- trictions, d'une manière ou autre, ne va pas réussir d'éviter une chute. La Commande Prédictive est capable de considérer les contraintes sur l'état et le contrôle de manière explicite, ce qui la rend particulièrement appropriée pour le contrôle des mouvements des robots marcheurs.Nous commençons par dévoiler la structure spécifique de ces contraintes, démontrant notamment l'importance des appuis au sol. Nous développons ensuite une condition suffisante pour l'évitement d'une chute et nous proposons une loi de commande prédictive qui y réponde. Cette formulation nous sert ensuite pour la conception des contrôleurs pratiques, capables d'un contrôle plus efficace et plus robuste des robots marcheurs humanoïdes. / The range of motions that humanoid robots are able to realize is strongly limited by inherent dynamical constraints so that any control law that does not consider these limitations, in one way or another, will fail to avoid falling. The Model Predictive Control (MPC) technique is capable of handling constraints on the state and the control explicitly, which makes it highly apt for the control of walking robots.We begin by unveiling the specific structure of these constraints, stressing especially the impor- tance of the supports on the ground. We give thereupon a sufficient condition for keeping balance and formulate an MPC law that complies with it. This formulation serves us then for the design of practicable controllers capable of more efficient and more robust control of humanoid robots.
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