Thèse numérisée par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

Thèse diffusée initialement dans le cadre d'un projet pilote des Presses de l'Université de Montréal/Centre d'édition numérique UdeM (1997-2008) avec l'autorisation de l'auteur.

Thèse diffusée initialement dans le cadre d'un projet pilote des Presses de l'Université de Montréal/Centre d'édition numérique UdeM (1997-2008) avec l'autorisation de l'auteur.

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

Los objetivos del presente estudio fueron: evaluar la CVRS en personas que viven con VIH/SIDA, relacionar la calidad de vida con variables sociológicas, clínicas e inmunológicas, caracterizar el perfil socioepidemiológico de la población que vive con VIH/SIDA, identificar las adicciones y comorbilidades que se presentan en dicha población, conocer el grado de inmunosupresión determinado por el recuento de LT CD4+ y de la carga viral plasmática, conocer el tipo, ocurrencia y distribución de enfermedades marcadoras de SIDA que presentan los pacientes durante la evolución de su enfermedad, estimar la prevalencia de hospitalización en la población de pacientes, conocer los aspectos más relevantes del tratamiento antiretroviral que realizan los pacientes y establecer la relación entre variables sociológicas, clínicas e inmunológicas y la puntuación obtenida en las dimensiones que integran el cuestionario de salud SF-36.

Peu d'études ont étudié l'impact du traitement antirétroviral sur l'activation et l'inflammation chez les patients infectés par le VIH. Ces études ont inclus des personnes ayant un contrôle virologique variable, ce qui explique leurs résultats discordants. Les objectifs de ce travail étaient d'évaluer l'évolution des marqueurs d'activation et d'inflammation chez les patients initiant un traitement antirétroviral avec un succès virologique rapide et persistante au cours de 2 ans, et d'identifier les facteurs associés à la persistance des niveaux élevés des marqueurs post-traitement. De plus, comparer l'impact des différents traitements antirétroviraux sur l'évolution des marqueurs.Mon travail a permis de montrer qu'avant l'initiation de traitement, les niveaux d'IL-6, IP-10, MIG et sCD14 étaient plus élevés chez les patients que chez les témoins VIH-séronégatifs. Après deux ans, les niveaux d'IL-6, IP-10 et MIG ont diminué significativement alors qu'aucun changement de CRP-us et de sCD14 n'a été observé. Les niveaux élevés d'IP-10 et MIG ont été associées à l'âge. La seule différence observée entre les traitements était une moindre diminution d'IP-10 et MIG avec l'ATV/r qu'avec l'EFV.Ces résultats suggèrent que le contrôle virologique rapide et persistant sous traitement antirétrovirale est nécessaire mais pas suffisant pour atténuer l'activation immunitaire et l'inflammation. L'initiation de traitement antirétroviral avec un meilleur impact sur l'activation immunitaire pourrait être considérée en particulier chez les patients âgés. La mesure des marqueurs d'activation immunitaire pourrait être un critère utile lors de l'évaluation de nouvelles molécules antirétrovirales.

La diversité génétique du virus de l'immunodéficience humaine, le VIH-1 responsable de la pandémie du SIDA, représente un challenge dans le développement d'un vaccin qui doit conférer une protection contre différentes formes du virus pour être efficace. L'identification de populations de lymphocytes T CD8+ (CTL) capables de reconnaître des variants peptidiques d'un épitope est donc une étape importante. Dans le modèle singes rhésus, j'ai montré en utilisant des tétramères spécifiques de 9 variants peptidiques d'un épitope qu'une même population de CTL générés par la vaccination, peut reconnaître l'épitope relatif à l'immunogène et un certain nombre de ses variants provenant de diverses formes du VIH-1. Ces études ont également permis de caractériser les populations de CTL spécifiques de chaque variant de cet épitope en analysant l'expression des différents gènes codant pour la chaîne variable β du TCR (Vβ répertoire) et par un large séquençage des régions complémentaires déterminantes 3 (CDR3) du TCRβ. Ces travaux ont montré qu'une vaccination utilisant la séquence du clade C de l'enveloppe du VIH-1 conduit à des réponses divergentes chez 2 singes rhésus Mamu-A*01+. De plus, ces résultats ont mis en évidence que l'usage de certainβes nVe permet pas de déterminer le potentiel cross-réactif des CTL. Par ailleurs, une immunisation utilisant des séquences de l'enveloppe du clade B du VIH-1 peut générer des CTL capables de reconnaître un large nombre de variants de l'épitope testé. L'analyse de 8112 séquences CDR3 du TCRβ a permis de les caractériser. Cependant, les tests fonctionnels ont démontré que bon nombre de ces variants peptidiques stimulent une production suboptimale de cytokines par les CTL générés après vaccination. Ces résultats démontrent que la reconnaissance de variant peptidiques d'un épitope est nécessaire mais pas suffisante pour protéger contre différentes formes du VIH-1 exprimant ces séquences. L'identification de variants peptidiques capables d'induire une réponse fonctionnelle des CTL pourrait contribuer au développement d'un vaccin efficace contre le VIH-1.

1) Antecedentes y objetivos.En adultos, la interrupción del tratamiento antirretroviral(IPT) guiada por CD4+ incrementa de forma significativa el riesgo de enfermedades oportunistas o muerte; la experiencia en niños es escasa. El estudio pretende evaluar la seguridad de una IPT única, entendida como una forma de reducir la exposición a los antirretrovirales, en una población pediátrica con una respuesta prolongada óptima a TARGA de primera línea.2) Pacientes y métodosSerie de casos prospectiva, con grupo de comparación. Criterios de inclusión: a. infección VIH de transmisión vertical; b. TARGA de primera línea, iniciada durante la fase aguda de la infección VIH (grupo A) o la fase crónica (grupo B); y al menos durante los últimos 24 meses: c. ausencia de condiciones clínicas relacionadas con el VIH, d. carga viral indetectable (ARN-VIH) (para el grupo B), y e. recuento normal de la cifra de CD4+ (>350 cél./mm3) o el porcentaje (>25%).Se recluta un grupo de comparación (grupo C) de pacientes que cumplen los mismos criterios de inclusión para pacientes tratados en la fase crónica de la infección VIH, pero que no serán sometidos a una IPT.3) Resultados. IPT en la fase aguda de la infección VIH: Se incluyen 6 pacientes.Un mes tras la IPT, se observa un repunte de la carga viral plasmática (valorm mediano: 4.6 log copias/mL); la viremia se estabiliza posteriormente. Los pacientes han permanecido una mediana de 39 meses en IPT. Tres pacientes han reiniciado TARGA, dos debido a una inmunodepresión libre de síntomas, y uno por deseo de los padres. A pesar de la progresiva inmunodepresión, no se han hallado diferencias con respecto a la evolución clínica entre los periodos pre y post-IPT. Todos los pacientes que han reiniciado TARGA han tenido una respuesta virológica e inmunológica óptimas. IPT en la fase crónica de la infección VIH: Se incluyen 25 pacientes, de los cuales 12 se someten a una IPT. Un mes tras la IPT, se observa un repunte de la carga viral plasmática (valor mediano: 4.7 log copias/mL); la viremia se estabiliza posteriormente. Tres pacientes han reiniciado TARGA precozmente, entre 2 y 4 meses de la IPT, debido a una inmunodepresión libre de síntomas. El resto ha permanecido una mediana de 39 meses en IPT. A pesar de la progresiva inmunodepresión, no se han hallado diferencias en la evolución clínica con respecto al grupo de comparación. Otros dos pacientes han reiniciado TARGA tardíamente, debido a una inmunodepresión libre de síntomas. Todos los pacientes que han reiniciado TARGA han tenido una respuesta virológica e inmunológica óptimas.4) Conclusiones.Se ha observado una inmunodepresión progresiva tras la IPT en la población seleccionada de pacientes, aunque no se han producido eventos clínicos mayores. / 1) Background and Aims. In adults, CD4-guided planned treatment interruptions (PTI) significantly increase the risk of opportunistic disease or death; experience in children is still very scarce. We evaluate the safety of a single PTI, intended as a sparing regimen, in pediatric patients with long-term optimal response to first-line HAART.2) Patients and Methods.Interventional case series. Inclusion criteria: a. verticallytransmitted HIV infection; b. first-line HAART, initiated during acute infection (group A) or chronic infection (group B); and at least a 24-month period of: c. no HIV-relatedclinical conditions, d. undetectable plasmatic HIV-RNA (for group B), and e. normal CD4 cell count (>350 cells/mm3) or percentage (>25%). A comparison group (group C) of patients fulfilling the inclusion criteria for patients treated during chronic infection but not undergoing PTI was used.3) Results.PTI in acute HIV infection: 6 patients were included. One month after PTI, HIV viral load had increased (median value: 4.6 log copies/mL); viremia stabilized thereafter. The patients have remained off therapy a median time of 39 months.Three patients had to reinitiate HAART, two because of symptom-free immunosuppression and one because of parents' wish. Despite progressiveimmunosuppression, differences in clinical evolution were not observed with respect to the pre-PTI period, during HAART. In those patients resuming treatment, an optimal virological and immunological response was observed. PTI in chronic HIV infection: Twenty-five patients were included, 12 underwent PTI. One month afterPTI, HIV viral load had increased (median value: 4.7log copies/mL); viremia stabilized thereafter. Three girls had to resume therapy within 2-4 months because of symptom-free immunosuppression. The rest remained off therapy a median time of 39 months. Despite progressive immunosuppression, differences in clinical evolution were not observed with respect to the comparison group. Two additional girls had toreinitiate HAART. In those patients resuming treatment, an optimal virological andimmunological response was observed.4) Conclusions. Progressive immunosuppression was observed after a single PTI in selected HIV-infected children, although major clinical events did not occur.

La present Tesi tracta sobre el desenvolupament d’inhibidors d’integrasa (INIs) del VIH alternatius. Es va partir de la base existent a la literatura química sobre diverses substàncies quelatants d’ions divalents com a potencials inhibidors del procés de strand transfer catalitzat per la integrasa. Amb aquest concepte en mà, varem pensar que la unió de grups quelatants semblants, però no idèntics, als àcids 2,4-dioxocarbonílics a nucleobases o nucleòsids purínics i pirimidínics podrien millorar les propietats farmacocinètiques dels substrats, tot reduint-ne la toxicitat intrínseca d’alguns dicetoàcids. Al Capítol 1 de la Tesi es duen a terme rutes accessibles i segures cap a la síntesis de tetrazols substituïts mitjançant una reacció de cicloaddició-[3+2] entre azides orgàniques i cianurs d’acil en presència de Cu2(OTf)2. Al Capítol 2 es concentren els nostres esforços cap a la preparació de “dicetotetrazols” juntament amb la síntesi de derivats de timidines i AZT amb subestructures de “dicetotetrazols”. Al Capítol 3 es preparen estructures que contenen nucleòsids o nucleobases units a hidroxiquinolines (com a farmacòfors del tipus “dicetoàcids” o “dicetotetrazols”). Finalment, al Capítol 4, es descriuen les diferents rutes que s’han assajat per arribar a la obtenció de N-hidroxiderivats d’hipoxantina i inosines, així com N-hidroxiderivats de benzopirimidines. En aquest cas, el farmacòfor està relacionat amb el Raltegravir, que és l’únic INI aprovat fins la data per la FDA. / As the initial diketo acids, uncovered by Shionogi and Merck pharmaceutical companies around 2000 as integrase inhibitors, turned out to be toxic, other small molecules were early designed. An obvious replacement of the carboxyl group by its bioisoster tetrazole ring was envisaged by many groups. This posed the question of how to prepare these substrates safely and efficiently. A new method to synthesize 5-acetyl or 5-methoxycarbonyl derivatives of tetrazoles was envisaged in our lab taking advantage of the [3+2]-cycloaddition reaction of organic azides with acyl cyanides and alcoxycarbonyl cyanides (ROCO-CO-CN) in the presence of Cu2(OTf)2 as the catalyst of choice. We achieved to carry out these processes under very mild conditions as described in chapter 1. The most outstanding facts of the second topic may be summarized as follows: 5-acetyl-tetrazole (prepared as reported in topic 1) was linked to N3 of thymidine and of 3’-azido-3’-deoxythymidine (AZT), as model compounds of natural nucleosides and of nucleoside RT inhibitors (NRTIs), respectively, by condensation of the lithium salt of 5-acetyl-1-(4-methoxybenzyl)tetrazole, with nucleoside-derived oxo nitriles. Most of the original activity of AZT was retained. A route for the conjugation of potential NRTIs with pharmacophores of integrase inhibitors (INIs) was disclosed. In the third topic, which we examined in parallel with the preceding one, 8-hydroxy-quinolinecarboxylic acids were linked to position 5 of 5-iodo-2’-deoxy- uridines or 5-iodouracils through spacers that were generated by [3+2]-cycloaddition of TMS–C=C–Ura (where Ura means any uracil derivative), with azides, catalysed by Cu2(OTf)2. This is an example of a click reaction with a non-terminal triple bond, but it was shown that the cleavage of C–Si bond preceded the CuAAC reaction. In topic 4, N-hydroxybenzopyrimidine-2-carboxamides and N-hydroxyhypoxanthine-2-carboxamide with the amide nitrogen substituted by a 4-fluorobenzyl group, containing the essential pharmacophoric elements of HIV-1 integrase inhibitor Raltegravir, were synthesized by means of a sequence that involved a cyclization of amino-hydroxamates with methyl trimetoxiacetate. Other approaches were unsuccessful. Unfortunately, prototypes prepared to date are devoid of integrase inhibition and antiviral activity (IC50 and EC50 > 10 μM).