A crescente demanda por fontes de energia limpas e sustentáveis tem impulsionado a busca por matérias-primas alternativas para a produção de biocombustíveis. Dentre as fontes vegetais não utilizadas para a alimentação, a mamona, o pinhão-manso e o caroço de algodão apresentam elevados teores de óleo para produção de biodiesel e potencial para utilização dos resíduos na alimentação de ruminantes. Entretanto, para que esses \"resíduos\" adquiram status de coprodutos, é necessário avaliar sua toxicidade, para administrá-los em níveis seguros ou realizar sua destoxificação. Este estudo teve por objetivo mensurar o teor das moléculas biotivas gossipol, ricina e ésteres de forbol em tortas de caroço de algodão, mamona e pinhão-manso, respectivamente, a fim de avaliar o potencial de utilização desses subprodutos na alimentação de ruminantes, considerando a ação dessas biomoléculas na fermentação ruminal in vitro em diferentes níveis de substituição ao farelo de soja do concentrado. O delineamento experimental foi totalmente casualizado, utilizando três níveis de adição de biomoléculas extraídas das tortas, simulando a substituição da soja do concentrado em 33,3 66,6 e 100% e adicionadas sobre uma dieta base (controle), e um nível de torta em substituição a 22,2% ao farelo de soja do concentrado da mesma dieta base dos demais tratamentos, a fim de avaliar possíveis diferenças de ação da biomolécula in natura na torta ou extraída. Os dados foram analisados por regressão linear e quadrática, ANOVA e teste de Dunnett para comparação das médias dos tratamentos em relação ao controle. As metodologias em CLAE (HPLC) para quantificação das biomoléculas foram adaptadas e validadas. As concentrações das biomoléculas nas tortas analisadas estiveram dentro da faixa citada pela literatura, sendo que o gossipol e a ricina poderiam ser adicionados na alimentação de ruminantes nos teores propostos neste estudo, proporcionando níveis de ingestão inferiores aos citados como tóxicos pela literatura. Da mesma forma, a produção de gases na fermentação ruminal in vitro não demonstrou ocorrência de efeitos destas biomoléculas sobre a microbiota ruminal. Os níveis de adição de pinhão-manso propostos poderiam ocasionar toxicidade pela ingestão de ésteres de forbol. No bioensaio com pinhão-manso, foram observados efeitos com 22,2% de adição de torta sobre a taxa de eficiência de conversão do metano, sugerindo que os ésteres de forbol estejam bioativos apenas na torta in natura ou ainda que a presença de outro composto tóxico, sozinho ou sinergia com os ésteres de forbol, possa ter interferido na microbiota ruminal. A viabilidade da inclusão das tortas de caroço de algodão e mamona in natura não foi negada por este estudo, entretanto, é necessário considerar a concentração de suas biomoléculas e o manejo animal correto. Para a utilização de pinhão-manso in natura em qualquer nível de adição, ainda são necessários novos estudos sobre a toxicidade dos ésteres de forbol nas tortas e sua possível sinergia com outros compostos tóxicos. A identificação e quantificação dos ésteres de forbol antes e após o tratamento de destoxificação constituem os principais entraves para que a utilização da torta de pinhão-manso se torne um coproduto da alimentação animal / The growing demand for sustainable and clean energy sources has increased the search of alternative raw materials for the production of biofuels. Castor-oil plant, jatropha and cotton seeds are among the plant resources that are not used for food although they have high level of oil for biodiesel production and might have considerable potential to use their residues to feed ruminants. However, for these \"residues\" to achieve status of co-products it is necessary to evaluate its toxicity before using them at safe levels or to perform its detoxification. This study aimed to measure the content of gossypol, ricin and phorbol esters bioactives molecules in cottonseed, castor and jatropha meals respectively in order to evaluate the potential of the use of these co-products to feed ruminants, considering the action of these biomolecules in ruminal fermentation in vitro into different substitution levels of soybean meal in the concentrate. The experimental design was completely randomized; one level of a meal by replacing 22,2% of soy in its concentrate and three levels by adding biomolecules extracted from meals simulating the replacement of 33,3, 66,6 and 100% of soy in its concentrate in the same diet base (control) of others treatment in order to evaluate differences of effects of biomolecules in natura both in a meal or extracted. The results were analyzed by linear and quadratic regression, ANOVA and Dunnett´s test for comparison of averages of treatments compared to control. The HPLC methodologies to quantify the biomolecules were adapted and validated. The biomolecules\' concentrations were within the values were quoted in the literature and both the gossypol as ricin could be added in the feeding of ruminants at the levels proposed in this report, providing intake levels below those quoted as toxic in literature. Likewise, the gas production in rumen fermentation in vitro showed no effects of biomocules on rumen microbial. According to the literature, the jatropha levels proposed could cause toxicity by the content of phorbol esters ingested. In the bioassay with jatropha, effects on methane efficiency rate were observed when 22,2% of meal were added, suggesting that phorbol esters are bioactives only in meal in natura or even the presence of other toxic compound, alone or in synergy with phorbol esters, might have affected the ruminal microflora. The viability of cottonseed and castor meal in natura inclusion was not denied by this report, however, it is extremely necessary to consider their concentration of biomolecules and correct animal handling. For the use of jatropha in natura at any level of addition further studies are still needed on the toxicity of phorbol esters in meal in natura and its possible synergy with other toxic compounds. The identification and quantification of phorbol esters before and after detoxification treatment has still being a main barrier to jatropha meal becomes a co-product of animal nutrition

A análise química do extrato bruto de esponja marinha é um método clássico de descoberta de novas drogas. Metabólitos secundários e peptídeos são geralmente os resultados neste tipo de pesquisa, utilizando diferentes e consecutivos protocolos de purificação. Neste estudo de uma amostra de extrato aquoso esponja separada numa coluna Sephadex®-G25 foi purificado por HPLC, numa tentativa de isolar uma única molécula. Com uma base de dados de RNA e a análise in silico espera-se que o RNAm pode ser relacionado com a molécula precursora do composto bioativo ou mesmo o seu gene. A dissociação de células a partir da matriz da esponja é um método importante para a extração de RNA optimizado em quantidade e qualidade. Frações extrato bruto do organismo e dados de RNAm a partir de células isoladas da esponja podem ser comparados por uma abordagem de comparação dos dados. Ensaios de MTS foram utilizados para analisar a bioatividade e microscopia confocal foi a principal ferramenta para examinar os danos em células tumorais (T47D). / The chemical analysis of sea sponge crude extract is a classic method in drug discovery. Secondary metabolites and peptides are usually the results in this type of research using different and consecutives purification protocols. In this study a sample of sponge aqueous extract separated in a sephadex-G25 column was purified by HPLC in an attempt to isolate a single molecule. With a RNA databank and in silico analysis is expected that the mRNA may be related with the precursor molecule of the bioactive compound or even its gene. The dissociation of cells from the sponge matrix was an important method to the optimized RNA extraction in quantity and quality. Crude extract fractions of the organism and mRNA data from sponge-isolated cells were obtained to a next step cross-data approach. MTS assays were used to analyze the bioactivity and confocal microscopy was the main tool to scan the damage in tumor cells (T47D).

O câncer é uma das doenças que mais acometem a população no mundo. Dessa forma, estudar suas terapêuticas é importante para o entendimento dos mecanismos e alvos biológicos por detrás da doença. Apesar dos tratamentos convencionais apresentarem uma boa eficácia, eles também provocam respostas indesejadas, como danos moleculares, resistência de células neoplásicas e efeitos colaterais fortes, colaborando para uma maior taxa de reincidência de neoplasias e mortalidade de pacientes. Sendo assim, a busca por alternativas é um importante desafio da Ciência Moderna para aprimorar e/ou substituir esses tratamentos. As plantas medicinais, como alternativa, são o foco de muitos estudos voltados ao câncer. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito citotóxico de 59 extratos em linhagens celulares humanas de câncer de mama (MDA-MB-231 e MCF7), próstata (PC-3 e DU 145) e fígado (HepG2). Foi realizada, inicialmente, uma triagem dos extratos por MTT em duas diluições 100x e 1000x para análise da viabilidade celular desses extratos. No total, 35 extratos obtiveram uma resposta para, pelo menos, uma das linhagens de câncer. A próxima etapa envolveu estudar os extratos pré-seletivos na triagem através de curvas-resposta quantificando a seletividade desses extratos para cada linhagem testada. Para essa etapa, foram selecionados 31 extratos. No câncer de mama, para a linhagem MDA-MB-231 nove extratos foram seletivos, e para MCF7 foram seis extratos. No câncer de próstata, para a linhagem PC-3, quinze extratos foram seletivos, e para DU 145 dezesseis extratos foram seletivos, mostrando uma maior sensibilidade do câncer de próstata comparado ao câncer de mama e fígado (HepG2 - sete extratos seletivos) em relação aos extratos testados. De todos os resultados apresentados, algodão de seda (Calotropis procera), camomila (Matricaria chamomilla), casca de anta (Drimys winteri), erva de São Caetano (Momordica charantia L.), estigmas de milho (Zea mays), graviola (Annona muricata), ipê roxo (Tabebuia sp.), malva - folhas (Malva sylvestris) e unha de gato (Uncaria tomentosa) foram os extratos mais amplamente significativos atingindo as linhagens celulares apresentando altos índices de seletividade. Com a realização desse trabalho podemos concluir que os extratos apresentam atividade antiproliferativa e seus fitoquímicos podem ser utilizados no estudo de novos fitoterápicos. O próximo passo é elucidar os mecanismos moleculares onde eles atuam. / Cancer is one of the most common diseases overworld. Studying the therapeutics of it is important to understand the biological mechanisms and targets behind this disease. Although conventional treatments show a good outcome against some types of cancer, they also currently cause undesired responses, such as molecular damage, neoplastic cell resistance and strong side effects, increasing recurrence of neoplasms, metastasis formation, and patient mortality. Therefore, the search for new alternatives is a challenge for Modern Science to improve or replace conventional treatments. In view of their antiproliferative effects medicinal plants have become the focus of many cancer studies as an alternative. The aim of the present study was to evaluate the cytotoxic and antiproliferative effect of 59 plant extracts in human cancer cell lines as breast cancer (MDA-MB-231 and MCF7), prostate cancer (PC-3 and DU 145) and liver cancer (HepG2). Initially, the extracts were screened in two different dilutions 100x and 1000x by MTT to analyze the cellular viability and cytotoxicity effects of them. To 59 extracts analyzed, 35 were effective against at least one of the tested lineages. The next step involved studying those pre-selective extracts through response curves to quantify the selectivity of these extracts for each cell lineage tested. For this stage, 31 extracts were selected. In breast cancer, for MDA-MB-231, nine extracts were selective and for MCF7 were six extracts. In prostate cancer, for PC-3, fifteen extracts were selective and for DU 145 were sixteen extracts. For liver cancer (HepG2) only seven extracts were selective. Comparing all the cancer lineages we can see a greater sensitivity of prostate cancer lineages compared to breast cancer and liver cancer in response of these tested extracts. Of all the results presented, silk cotton (Calotropis procera), chamomile (Matricaria chamomilla), winter\'s bark (Drimys winteri), bitter melon (Momordica charantia L.), corn silk (Zea mays), graviola (Annona muricata), purple trumpet tree (Tabebuia sp.), malva - folhas (Malva sylvestris) e unha de gato (Uncaria tomentosa) silk cotton (Calotropis procera), chamomile (Matricaria chamomilla), graviola (Annona muricata) and mallow-leaves (Malva sylvestris) were the most effective extracts reaching different cell types and present high selectivity indices. With the accomplishment of this work we can conclude that the natural extracts of plants presented antiproliferative activity in cancer lines and their phytochemicals can be used to study new herbal medicines. The next step, then, is to understand the molecular mechanisms where they act.

Materiais vítreos e vitrocerâmicos bioativos podem ser usados particulados ou como scaffolds em diferentes tratamentos de defeitos ósseos. Tratamentos térmicos que possibilitam o desenvolvimento de scaffolds a partir de composições de vidros bioativos introduzem fases cristalinas em sua estrutura amorfa com potencial impacto na bioatividade e biocompatibilidade do material. O objetivo do presente estudo foi avaliar, qualitativa e quantitativamente, o desenvolvimento do fenótipo osteogênico de culturas de células osteoblásticas sobre substratos vítreos e vitrocerâmicos bioativos. Células MC3T3-E1 foram cultivadas em condições osteogênicas por períodos de até 21 dias sobre superfícies de Bioglass® 45S5, de duas preparações de vitrocerâmica bioativa e altamente cristalina, Biosilicato® e Biosilicato® para scaffold, e de borosilicato (vidro bioinerte). Foram avaliados, nos períodos de 7, 12 e 21 dias, morfologia celular, formação de matriz mineralizada e expressão de genes relacionados à osteogênese. Os resultados mostraram confluência das culturas sobre as superfícies de vidros e vitrocerâmicas, com progressiva formação de multicamadas celulares. A quantificação de vermelho de Alizarina revelou aumento de mineralização para culturas sobre materiais bioativos, com os maiores valores para Biosilicato® para scaffold. Expressão diferencial de genes foi observada nos 3 períodos de culturas sobre os materiais vítreo e vitrocerâmicos bioativos em comparação ao vidro bioinerte e sobre as vitrocerâmicas em comparação ao vidro bioativo. Os resultados permitem concluir que modificações em aspectos químicos de materiais vítreos e vitrocerâmicos, com efeitos sobre sua bioatividade, resultam em alteração do potencial osteogênico e do perfil de expressão gênica de células osteoblásticas in vitro. A maior atividade osteogênica sobre o Biosilicato® para scaffold permite considerar esse material um potencial candidato para aplicações em defeitos ósseos. / Bioactive glasses and glass-ceramics have been used as bone substitutes in either particulate or scaffold forms. Various thermal treatments that allow the development of scaffolds from bioactive glasses may create varied proportions of new crystalline phases in the amorphous phase with a potential impact on the bioactivity and biocompatibility of the material. The aim of the present in vitro study was to qualitatively and quantitatively evaluate the development of the osteogenic phenotype in osteoblastic cell cultures grown on bioactive glass and glass-ceramic surfaces. MC3T3-E1 cells, subclone 14, were cultured under an osteogenic condition for periods of up to 21 days on the following disc surfaces: Bioglass® 45S5 (bioactive glass), Biosilicate® (bioactive glass-ceramic), Biosilicate® as the material for scaffold preparation (Bio-sc, bioactive glass-ceramic), and borosilicate (bioinert glass). At days 7, 12, and 21 post-plating, cell morphology, mineralized matrix formation and the expression profile of genes associated with osteogenesis were evaluated. Epifluorescence of actin cytoskeleton and DAPI DNA stain revealed confluent cell cultures at day 7 for all groups, with progressive cell multilayering formation. The quantitative analysis of Alizarin red-stained cultures at day 21 revealed significantly enhanced mineralization in cultures grown on bioactive materials compared with the ones on borosilicate and the highest absorbance intensities for the Bio-sc group. Differential gene expression profiles were detected at the three time points evaluated in cultures grown on the bioactive materials in comparison with borosilicate, and on the glass-ceramics in comparison with Bioglass® 45S5. From the results presented, it can be concluded that changes in chemical characteristics of glass and glass-ceramic that may have an impact on their bioactivity index can affect the osteogenic potential and the gene expression profile of osteoblastic cells in vitro. The highest osteogenic activity on Bio-sc renders this material a good candidate for bone defect applications.

A obtenção de moléculas enantiomericamente puras ou enriquecidas tem se demonstrado um desafio em química orgânica sintética. Nesse âmbito, a biocatálise aparece como uma importante ferramenta sintética. Neste trabalho, desenvolveu-se uma metodologia para a obtenção de 6-hidróxioct-7-inoato de metila, 5-hidróxihept-6-inoato de metila, e 4-hidróxihex-5-inoato de metila enantiomericamente enriquecidos via resolução cinética enzimática. Primeiramente foram investigadas variáveis como temperatura, tempo, quantidade de doador de acila, solvente e enzima adequada para a reação. Em uma segunda etapa do trabalho, foram desenvolvidas seqüências reacionais onde os hidroxiésteres originariam moléculas bioativas Utilizando o 5-hidróxihept-6-inoato de metila, após três etapas reacionais, foi possível sintetizar intermediários sintéticos avançados das moléculas bioativas goniotalamina e argentilactona. De maneira análoga, após algumas etapas reacionais, o 4-hidróxihex-5-inoato de metila originou os feromônios buibuilactona, japonilura e 4-hexanolida / The synthesis of enantiomerically pure or enriched molecules has been an important challenge in synthetic organic chemistry. Among a variety of disciplines dedicated to achive this goal, biocatalysis appears as an important synthetic tool. Herein, we developed a methodology to obtain methyl 6-hydroxyoct-7-ynoate, methyl 5-hydroxyhept-6-ynoate and methyl 4-hydroxyhex-5-ynoate enantiomerically enriched by an enzymatic kinetic resolution. Reaction conditions such as temperature, reaction time, amount of acyl donor, solvent and enzyme were screened, in order to obtain high yields and enantioselectivities. In the second part of our work, synthetic pathways were developed where the hydroxyesters lead to bioactive molecules. Using methyl 5-hydroxyhept-6-ynoate, after three steps, advanced synthetic intermediates for the synthesis of the bioactive molecules, such as goniothalamine and argentilactone, were prepared. In the same way, methyl 4-hydroxyhex-5-ynoate was submitted to a reaction sequence leading the pheromones buibuilactone, japonilure and 4-hexanolide.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:42:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GeovaneCC_DISSERT.pdf: 2255225 bytes, checksum: bbeea0560f32e4ce6bfbdaafa5961d9f (MD5) Previous issue date: 2014-06-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / In this study, we worked with the validation of a methodology for analysis of bioactive amines in shrimp, considering it to be one of the main products of the northriograndense trade balance, maintaining the state of Rio Grande do Norte topped the list of Brazilian exports of this product the last decade. The sector of the Brazilian shrimp works exclusively with gray shrimp Litopenaeus Vannamei since the late 1990s. This study used liquid chromatography with conductimetric detector, using as the mobile phase methylsulfonic 3 mM acid (MSA) with gradient and phase C18 column with reverse the development of methodology for the analysis of bioactive amines in shrimp. In the sample preparation was used as 5% trichloroacetic acid (TCA) extraction solution. Validation analysis of biotativas amines (putrescine - PUT, histamine - HIST, agmatine - AGM, spermidine - EPD and spermine - EPN) in shrimp, the linear working range was 0.1 to 2.0 mg L-1 to was sensitive, homoscedastic, in effect, selective, accurate and precise array. Thus, considered feasible for these determinations bioactive amines in this array. Determined the concentration of these amines in fresh shrimps (AGM = 0.61 ? 0.05 mg kg- 1 EPD = 2.57 ? 0.14 mg kg-1 and EPN = 1.79 ? 0.11 mg kg-1), and freezing weather predetermined in cooked shrimp (AGM = 6.28 ? 0.18 mg kg-1, EPD = 12.72 ? 0.02 mg kg- 1 and EPN = 22.30 ? 0.60 mg kg-1), the shrimp with twenty-four hour stay at room temperature (PUT = 879.52 ? 28.12 mg kg-1, AGM = 848.13 ? 19.40 mg kg-1, ESPD = 13.59 ? 0.97 mg kg-1 and ESPN = 18.47 + 1.57 mg kg-1). In shrimp subjected to freezing for a week, two weeks, three weeks and four weeks, the results showed that there is an increase in the content of agmatine (7.31 ? 0.21 mg kg-1) while in spermine ( 1.22 ? 0.14 mg kg-1) and spermidine (below limit of quantification) there was a decrease in the freeze time, while there is a decrease in the level of spermidine not reaching detectad. The putrescine was only found in shrimp that remained for 24 hours at room temperature and histamine was not found in any of the samples / Neste trabalho trabalhou-se com a valida??o de uma metodologia para an?lise de aminas bioativas em camar?o, considerando ser este um dos principais produtos da balan?a comercial norte-riograndense, mantendo o Estado do Rio Grande do Norte no topo da lista de exporta??o brasileira deste produto na ?ltima d?cada. O setor da carcinicultura brasileira trabalha exclusivamente com o camar?o cinza Litopenaeus Vannamei desde o final da d?cada de 1990. Este trabalho utilizou a cromatografia l?quida com detector condutim?trico, usando como fase m?vel o ?cido metilsulf?nico 3 mM (MSA) com gradiente e coluna C18 com fase reversa para o desenvolvimento da metodologia para an?lise de aminas bioativas em camar?o. Na prepara??o da amostra utilizou-se como solu??o extrativa ?cido tricloroac?tico a 5% (TCA). Na valida??o da an?lise das aminas biotativas (putrescina - PUT, histamina - HIT, agmatina - AGM, espermidina - EPD e espermina - EPN) em camar?o, a faixa linear de trabalho foi de 0,1 a 2,0 mg L-1 que se mostrou sens?vel, homosced?stico, com efeito de matriz, seletivo, exato e preciso. Dessa maneira, considerada vi?vel para determina??es dessas aminas bioativas nessa matriz. Determinou-se a concentra??o destas aminas em camar?es frescos (AGM = 0,61 ? 0,05 mg Kg-1, EPD = 2,57 ? 0,14 mg Kg-1 e EPN = 1,79 ? 0,11 mg Kg-1), e com tempo de congelamento pr?-determinados, no camar?o cozido (AGM = 6,28 ? 0,18 mg Kg-1, EPD = 12,72 ? 0,02 mg Kg-1 e EPN = 22,30 ? 0,60 mg Kg-1), no camar?o com vinte e quatro horas de perman?ncia ? temperatura ambiente (PUT = 879,52 ? 28,12 mg Kg-1 , AGM = 848,13 ? 19,40 mg Kg-1, EPD = 13,59 ? 0,97 mg Kg-1 e ESPN = 18,47 + 1,57 mg Kg-1). No camar?o submetido a congelamento por uma semana, por duas semanas, por tr?s semanas e por quatro semanas, os resultados apresentaram que h? um aumento no teor de agmatina (7,31 ? 0,21 mg Kg-1) enquanto que na espermina (1,22 ? 0,14 mg Kg-1) e na espermidina (menor que o limite de quantifica??o) o houve uma diminui??o com o tempo de congelamento, enquanto que h? diminui??o no teor de espermidina chegando a n?o ser detectad. A putrescina s? foi encontrada no camar?o que permaneceu por 24 horas ? temperatura ambiente e a histamina n?o foi encontrada em nenhuma das amostras analisadas

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Amburana cearensis (Allemao) A. C. Smith, usually known in portuguese language as âImburana-de-Cheiroâ or âCumaruâ, is a leguminous tree, subfamily Papilionoideae with common occurrence in âCaatingaâ Dominium. Despite the numerous ethnobotanical uses, few studies report biological activities of medical interest and / or agribusiness for this species or yet its utilization as food for humans and / or animals. This study aimed to evaluate the proteins of A. cearensis on its nutritional value associated with its biochemical characterization and as to the presence of bioactivity against bacteria, yeasts and filamentous fungi, all pathogens of humans, animals or plants of economic importance, and also against the vectors of disease, Aedes aegypti and Ae. albopictus. For this, seeds were collected in areas of caatinga trees in the municipality of Quixadà - CE and, subsequently, dried and finely ground. The seeds of A. cearensis have high nutritional potential, evidenced by the high content of proteins (22.69 &#61617; 0.81 g 100 g-1), lipid (24.45 2.02 g 100 g-1) and dietary fiber (34.75 1.78 g 100 g-1), keeping smaller quantities of starch (11.43 0.18 g 100 g-1), of total sugars (5.60 0.09 g 100 g-1) and minerals (4.51 0.21 g 100 g-1). Its amino acid composition is comparable to that of soybeans and beans. Moreover, the seeds have moderate levels of antinutritional factors, being detected only trypsin inhibitory activity (27.41  0.03 gTI Kg-1), urease activity (434  34 U kg-1) and some secondary metabolites such as tannins, phenols, flavones, flavonols, and xantone steroids. Chemical components, probably of low molecular mass present in seeds flour incorporated into diets, seem to interfere with their acceptance and use by animals since when the protein fraction (F0/90), obtained from its soluble protein, was incorporated into the balanced diet, the rats accepted well the diets and their performance indicated that F0/90 a good source of protein, comparable to major sources of vegetable protein such as soy and beans. Proteins of A. cearensis seeds are mainly composed of globulins (74.43 g 100 g-1) and albumins (14.23 g 100 g-1), with smaller quantities of glutelin basic proteins (10.07 g 100g-1), prolamins (1.20 g 100 g-1) and glutelin acidic proteins (0.07 g 100 g-1). The seeds crude extract (GE) offers a wide variety of proteins as shown by electrophoretic profiles with a predominance of proteins with apparent molecular mass over 45.0 kDa. The seeds of A. cearensis show also high bioactive potential, especially the activities of their majority proteins (albumins and globulins) against the growth of human pathogenic bacteria and yeast and phytopathogenic filamentous fungi, and against larvae of Aedes aegypti and Ae. albopictus. The inhibitory activity of the growth of phytopathogenic fungi concentrated in the albumins F70/90 fraction, being rich in proteins of low molecular mass (<30 kDa). Thus we can conclude that F0/90 is a good source of protein food when compared to other plant sources already used by the population. In addition, the globulins and albumins of A. cearensis are promising sources of bioactive proteins to be studied further and in greater purity. / Amburana cearensis (Allemao) A. C. Smith, popularmente conhecida como Imburana-de-Cheiro ou Cumaru, à uma leguminosa arbÃrea da subfamÃlia Papilionoideae de ocorrÃncia freqÃente na regiÃo do domÃnio Caatinga. Apesar dos inÃmeros usos etnobotÃnicos, poucos trabalhos relatam atividades biolÃgicas de interesse mÃdico e/ou agroindustrial para esta espÃcie ou, mesmo, sua utilizaÃÃo como fonte de alimento para humanos e/ou animais. Assim, o presente trabalho objetivou avaliar as proteÃnas de A. cearensis quanto a seu valor nutricional aliado à sua caracterizaÃÃo bioquÃmica e quanto à presenÃa de bioatividade contra bactÃrias, leveduras e fungos filamentosos, todos patÃgenos do homem, de animais ou de plantas de importÃncia econÃmica, e, ainda, contra os vetores de doenÃas, Aedes aegypti e Ae. albopictus. Para tanto, sementes foram coletadas em Ãrea de caatinga arbÃrea, no municÃpio de Quixadà â CE, sendo, posteriormente, desidratadas e finamente moÃdas. As sementes de A. cearensis possuem alto potencial nutricional, revelado pelo alto teor de proteÃnas (22,69 &#61617; 0,81 g. 100 g-1), lipÃdios (24,45 2,02 g. 100 g-1) e fibra alimentrar (34,75 1,78 g.100 g-1), retendo quantidades menores de amido (11,43 0,18 g.100g-1), aÃÃcares totais (5,60 0,09 g.100 g-1), e de minerais (4,51 0,21 g.100 g-1). Sua composiÃÃo aminoacÃdica à comparÃvel Ãquela da soja e feijÃo. AlÃm disso, as sementes apresentam moderados nÃveis de fatores antinutricionais, sendo detectados apenas atividade inibitÃria de tripsina (27,41  0,03 gTI.Kg-1), atividade ureÃsica (434,0  34,0 U.Kg-1) e alguns metabÃlitos secundÃrios, como taninos, fenÃis, flavonas, flavonÃis, xantonas e esterÃides. Componentes quÃmicos, provavelmente de baixa massa molecular, presentes nas sementes incorporadas a dietas interferem na sua aceitaÃÃo e aproveitamento por parte dos animais, uma vez que quando a fraÃÃo proteica (F0/90) obtida de suas proteÃnas solÃveis à incorporada à dieta balanceada, apresenta boa aceitaÃÃo pelos animais, mostrando-se uma boa fonte de proteÃnas, comparÃvel a importantes fontes de proteÃnas vegetais como a soja e os feijÃes. As proteÃnas das sementes de A. cearensis sÃo compostas principalmente por globulinas (74,43 g. 100g-1) e albuminas (14,23 g.100 g-1), com quantidades menores de proteÃnas do tipo glutelinas bÃsicas (10,07 g.100 g-1), prolaminas (1,20 g.100 g-1) e proteÃnas do tipo glutelinas Ãcidas (0,07 g.100 g-1). O extrato bruto (EB) das sementes apresenta uma grande diversidade de bandas proteicas com predominÃncia de bandas com massa molecular aparente > 45,0 kDa. As sementes de A. cearensis possuem tambÃm alto potencial bioativo, destacando-se as atividades de suas proteÃnas majoritÃrias (globulinas e albuminas) contra o crescimento de bactÃrias e leveduras patÃgenas do homem e de fungos filamentosos fitopatogÃnicos, e atividade contra larvas de Aedes aegypti e Ae. albopictus. A atividade inibitÃria do crescimento de fungos fitopatogÃnicos concentra-se na fraÃÃo F70/90 das albuminas, sendo rica em proteÃnas de baixa massa molecular (< 30 kDa). Assim, pode-se concluir que a F0/90 à uma boa fonte de proteÃna alimentar quando comparada a outras fontes vegetais jà utilizadas pela populaÃÃo. AlÃm disso, as globulinas e albuminas de A. cearensis sÃo fontes promissoras de proteÃnas bioativas que devem ser estudadas mais detalhadamente e em maior grau de pureza.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As macroalgas sÃo fontes de molÃculas bioativas com propriedades antioxidantes, muitas das quais apresentam variaÃÃes ao longo do ano. Cinco algas verdes do gÃnero Caulerpa (C. cupressoides, C. mexicana, C. prolifera, C. racemosa e C. sertularioides) foram coletadas mensalmente na Praia do Pacheco, de janeiro a dezembro de 2006. ApÃs as coletas, elas foram transportadas para o laboratÃrio, lavadas com Ãgua corrente para retirada de impurezas e epÃfitas e liofilizadas. Os extratos algÃceos foram preparados em metanol (MeOH) na proporÃÃo 1:20 (p:v) sob agitaÃÃo por 1 h a 20ÂC em um agitador orbital, em seguida, filtrados, e os resÃduos submetidos a mais duas extraÃÃes sucessivas. O material das trÃs extraÃÃes metanÃlicas foi reunido e concentrado em um evaporador rotativo. PorÃÃes de 10 mg do extrato concentrado foram suspensas em 10 mL de MeOH (50%). Esse extrato (1 mg/mL) foi utilizado para a determinaÃÃo do conteÃdo fenÃlico total (CFT). A atividade antioxidante in vitro foi medida atravÃs da capacidade de sequestrar o radical DPPH, do poder de reduÃÃo de Ãons fÃrricos (FRAP), do branqueamento do &#946;-caroteno (BCB) e da habilidade de quelaÃÃo de Ãons ferrosos (FIC), nas concentraÃÃes 5, 50, 500 e 1.000 Âg/mL, preparadas a partir do extrato. O quelante de metais EDTA foi utilizado como controle positivo no FIC, e o antioxidante sintÃtico BHA, nas demais determinaÃÃes. Os valores de CFT foram maiores no segundo semestre do ano e variaram de 4 a 32 mg AGE/g extrato. Os resultados do sequestro do radical DPPH, do BCB e do FIC nÃo exibiram padrÃo de variaÃÃo e apresentaram atividades superiores a 25%, 70% e 10%, respectivamente. O FRAP nos extratos de C. cupressoides, C. racemosa e C. serlularioides foi maior no segundo semestre do ano, no de C. mexicana o maior valor ocorreu no primeiro semestre e no de C. prolifera, as variaÃÃes ao longo do ano nÃo obedeceram a um padrÃo como nos demais. Em todas as metodologias as atividades dos extratos algÃceos foram inferiores Ãquelas dos controles positivos. As cinco espÃcies de Caulerpa podem ser consideradas fonte de potenciais antioxidantes, com possÃveis usos, como na indÃstria alimentÃcia, nÃo requisitando de um perÃodo do ano especÃfico para a extraÃÃo desses compostos antioxidantes, jà que embora haja variaÃÃo ao longo do ano, ela nÃo à muito pronunciada. / Macroalgae are sources of bioactive molecules with antioxidant properties, many of which present seasonal variation. Five green algae of the genus Caulerpa (C. cupressoides, C. mexicana, C. prolifera, C. racemosa and C. sertularioides) were collected monthly at Pacheco Beach, from January to December 2006. After collection, they were transported to the laboratory, washed under running water to remove impurities and epiphytes, and freeze-dried. The algae extracts were prepared in methanol (MeOH) in the proportion 1:20 (w:v) under stirring for 1 h at 20ÂC in an orbital shaker followed by filtration, and the residues were submitted to two further successive extractions. The filtrate from the three methanolic extractions was gathered and concentrated in a rotary evaporator. Portions of the concentrated extract (10 mg) were suspended in 10 mL MeOH (50%). This extract (1 mg/mL) was used in the determination of the total phenolic content (TPC). In vitro antioxidant activity was measured by DPPH radical scavenging, ferric-reducing antioxidant power (FRAP), &#946;-carotene bleaching (BCB), and ferrous ion chelating (FIC), at the concentrations 5, 50, 500 and 1000 Âg/mL, prepared from the extract. The metal chelator EDTA was used as a positive control in FIC, while the remaining essays used the synthetic antioxidant BHA. The TPC values were higher in the second semester of the year and varied from 4 to 32 mg GAE/g extract. The DPPH radical scavenging, BCB and FIC results did not exhibit variation patterns and presented activities greater than 25%, 70% and 10%, respectively. FRAP in the extracts of C. cupressoides, C. racemosa and C. sertularioides was higher in the second half of the year, while for C. mexicana the largest value was found in the first half of the year, and for C. prolifera variations during the year did not obey a pattern similar to the others. In all methodologies the activities of the alga extracts were inferior to the positive controls. The five species of Caulerpa can be considered potential sources of antioxidants with possible uses, such as in the food industry, not requiring a specific annual period for the extraction of these antioxidant compounds, as though there is variation across the year, it is not highly pronounced.

Materiais vítreos e vitrocerâmicos bioativos podem ser usados particulados ou como scaffolds em diferentes tratamentos de defeitos ósseos. Tratamentos térmicos que possibilitam o desenvolvimento de scaffolds a partir de composições de vidros bioativos introduzem fases cristalinas em sua estrutura amorfa com potencial impacto na bioatividade e biocompatibilidade do material. O objetivo do presente estudo foi avaliar, qualitativa e quantitativamente, o desenvolvimento do fenótipo osteogênico de culturas de células osteoblásticas sobre substratos vítreos e vitrocerâmicos bioativos. Células MC3T3-E1 foram cultivadas em condições osteogênicas por períodos de até 21 dias sobre superfícies de Bioglass&reg; 45S5, de duas preparações de vitrocerâmica bioativa e altamente cristalina, Biosilicato&reg; e Biosilicato&reg; para scaffold, e de borosilicato (vidro bioinerte). Foram avaliados, nos períodos de 7, 12 e 21 dias, morfologia celular, formação de matriz mineralizada e expressão de genes relacionados à osteogênese. Os resultados mostraram confluência das culturas sobre as superfícies de vidros e vitrocerâmicas, com progressiva formação de multicamadas celulares. A quantificação de vermelho de Alizarina revelou aumento de mineralização para culturas sobre materiais bioativos, com os maiores valores para Biosilicato&reg; para scaffold. Expressão diferencial de genes foi observada nos 3 períodos de culturas sobre os materiais vítreo e vitrocerâmicos bioativos em comparação ao vidro bioinerte e sobre as vitrocerâmicas em comparação ao vidro bioativo. Os resultados permitem concluir que modificações em aspectos químicos de materiais vítreos e vitrocerâmicos, com efeitos sobre sua bioatividade, resultam em alteração do potencial osteogênico e do perfil de expressão gênica de células osteoblásticas in vitro. A maior atividade osteogênica sobre o Biosilicato&reg; para scaffold permite considerar esse material um potencial candidato para aplicações em defeitos ósseos. / Bioactive glasses and glass-ceramics have been used as bone substitutes in either particulate or scaffold forms. Various thermal treatments that allow the development of scaffolds from bioactive glasses may create varied proportions of new crystalline phases in the amorphous phase with a potential impact on the bioactivity and biocompatibility of the material. The aim of the present in vitro study was to qualitatively and quantitatively evaluate the development of the osteogenic phenotype in osteoblastic cell cultures grown on bioactive glass and glass-ceramic surfaces. MC3T3-E1 cells, subclone 14, were cultured under an osteogenic condition for periods of up to 21 days on the following disc surfaces: Bioglass&reg; 45S5 (bioactive glass), Biosilicate&reg; (bioactive glass-ceramic), Biosilicate&reg; as the material for scaffold preparation (Bio-sc, bioactive glass-ceramic), and borosilicate (bioinert glass). At days 7, 12, and 21 post-plating, cell morphology, mineralized matrix formation and the expression profile of genes associated with osteogenesis were evaluated. Epifluorescence of actin cytoskeleton and DAPI DNA stain revealed confluent cell cultures at day 7 for all groups, with progressive cell multilayering formation. The quantitative analysis of Alizarin red-stained cultures at day 21 revealed significantly enhanced mineralization in cultures grown on bioactive materials compared with the ones on borosilicate and the highest absorbance intensities for the Bio-sc group. Differential gene expression profiles were detected at the three time points evaluated in cultures grown on the bioactive materials in comparison with borosilicate, and on the glass-ceramics in comparison with Bioglass&reg; 45S5. From the results presented, it can be concluded that changes in chemical characteristics of glass and glass-ceramic that may have an impact on their bioactivity index can affect the osteogenic potential and the gene expression profile of osteoblastic cells in vitro. The highest osteogenic activity on Bio-sc renders this material a good candidate for bone defect applications.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Lorena de Almeida Ribeiro Prudente.pdf: 339298 bytes, checksum: 85271945cc6981d1e0a7a1803021dcad (MD5) Previous issue date: 2009-03-17 / The microorganisms are essential for the environment and contribute to stabilize the environments, playing a hole in the basic ecologic process such as biogeochemistry cycles and food chains, and sometimes responsible for the maintenance of the ecologic relationship between the organisms. So we have a diversity of microorganism and in consequence bioactive molecules that they produce as a result of primary and secondary metabolism, and are used by humans in many important social-economic activities, which includes the search for new medicines and new enzymes with biotechnology interest. This study analyzed different microorganisms isolated from different habitats, and the objective was select microorganisms with the capacity of inhibit the growing of pathogenic microorganisms and that produces enzymes with biotechnological applications. The isolates antimicrobial and enzymatic activities were evaluated, bioactive substances extracted and the cytotoxic activity with Artemia salina determined. The biggest part of the isolates produces substances with antimicrobial activity for the evaluated gram-positives, and none are toxic in low levels. The isolates are great producers of esterases and &#946;-glucosidades. The isolates described in this study are from four different environments: Cerrado soil, Mata Atlântica, Azadirachta indica A. JUSS (Nim) e cave environment and are related to unique environmental conditions, the majority part of the isolates are able to produce molecules with biotechnology activity, this suggests a great microbial potential for the production of bioactive molecules that can be used in industries and medicine. Key Words: Antimicrobial activity, microorganisms, enzymes, bioactive. / Os microrganismos são essenciais para o meio ambiente e contribuem para a estabilidade de ecossistemas, participando de processos ecológicos básicos como os ciclos biogeoquímicos e cadeias alimentares, muitas vezes mantendo relações ecológicas com outros organismos. Desta forma há uma diversidade de microrganismos e conseqüentemente de moléculas bioativas que eles produzem como resultado do metabolismo primário e secundário, que têm sido amplamente utilizadas pelo homem em diversas atividades de importância sócio-econômica, que incluem a busca por novos fármacos e por enzimas de interesse biotecnológico. Este estudo analisou microrganismos isolados de diferentes habitats com o objetivo de selecionar microrganismos com habilidade de inibir o crescimento de microrganismos patogênicos e que sejam produtores de enzimas com importância biotecnológica. Os isolados tiveram sua atividade antimicrobiana e enzimática avaliadas, substâncias biotivas extraídas e a atividade citotóxica frente à Artemia salina determinada. Dos isolados avaliados a maior parte demonstrou ser produtora de substâncias com atividade antimicrobiana frente as bactérias gram-positivas avaliadas, sendo que nenhum isolado demonstrou ser tóxico em baixas concentrações. Os isolados demonstraram predomínio na produção de esterases e &#946;-glucosidases. Embora os isolados descritos neste estudo pertençam a quatro ambientes distintos: solo de Cerrado e Mata Atlântica, Azadirachta indica A. JUSS (Nim) e ambiente cavernícola e estejam sujeitos a condições ambientais distintas, a maior parte dos isolados obtidos mostrou-se capaz de produzir substâncias com aplicações biotecnológicas, fato que sugere um grande potencial por parte dos microrganismos em produzir moléculas bioativas que possam ser empregadas na indústria e medicina.