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Estudo da toxicidade reprodutiva de duas formulações fitoterápicas comerciais contendo soja (Glycine max (L.) Merr) em ratos wistar.

Hollenbach, Clarissa Boemler January 2008 (has links)
No presente trabalho avaliou-se os efeitos de duas formulações fitoterápicas comerciais contendo soja [Glycine max (L.) Merr], Soyfemme® da Ache Laboratórios Farmacêuticos S.A e Isoflavine® da Herbarium Laboratório Botânico Ltda. sobre a fertilidade e o desenvolvimento ponderal de ratos Wistar, bem como o desenvolvimento ponderal das progênies. As dosagens foram obtidas através da recomendação dos fabricantes sendo a dose terapêutica recomendada 4,3 mg.kg-1. Constituíram-se oito grupos experimentais, um grupo controle negativo (GC-) que recebeu água destilada, um grupo controle positivo (GC+) que recebeu isoflavonas semelhantes às da soja na dose de 4mg.kg-¹, três grupos tratados com o fitoterápico Soyfemme® e três grupos tratados com Isoflavine® em três doses 4,3mg.kg-1, 21,5mg.kg-1 e 43mg.kg-1, respectivamente, GS1, GS2, GS3 e GI1, GI2, GI3. Os animais foram tratados diariamente por via oral, em fases determinadas. Os machos foram tratados durante 91 dias, sendo 70 dias antes do acasalamento e o restante durante o acasalamento. As fêmeas foram tratadas antes e durante o acasalamento, gestação e lactação.Metade das fêmeas prenhes sofreu cesariana no 21º dia de gestação, o restante das fêmeas pariu a termo e as suas proles foram avaliadas até a manifestação das características sexuais nos machos (descida dos testículos à bolsa escrotal e separação prepucial) e nas fêmeas (abertura do canal vaginal) e até a realização do teste de comportamento em campo aberto, aos 75 dias de idade. Os resultados mostram que as formulações fitoterápicas não interferiram no desenvolvimento ponderal dos machos tratados nem das suas progênies, mas interferiram no desenvolvimento ponderal das fêmeas antes do acasalamento. As formulações fitoterápicas interferiram no número total de espermatozóides armazenados na cauda do epidídimo e na morfologia espermática nos grupos tratados de forma dose dependente. O número de espermatozóides x 106 armazenados na cauda do epidídimo (x ± epm) foi de (GC- = 1978,8 ± 184,4; GC+ = 1322 ± 142,6; GS1 = 1735 ± 90,3; GS2 = 1448,3 ± 222,3; GS3 = 1174 ± 219,8; GI1 = 2071,6 ± 156,5; GI2 = 1864 ± 203,2; 1121,7 ± 175,9). O percentual de alterações morfológicas nos espermatozóides foi de (GC- = 6%; GC+ = 8,8%; GS1 = 13,3%; GS2 = 19,7%; GS3 = 22,6% e GI1 = 12,3%; GI2 =28,8% e GI3 =27,7%). As taxas de19,7%; GS3 = 22,6% e GI1 = 12,3%; GI2 =28,8% e GI3 =27,7%). As taxas de acasalamento apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo nas três doses do fitoterápico Isoflavine® (GC- = 69,2%; GC+ = 45,5%; GI1 = 22,2%; GI2 = 22%; GI3 = 37,5%) enquanto que os grupos tratados com o fitoterápico Soyfemme®, apenas a dose maior (GC- = 69,2%; GS3 = 30%). As taxas de gestação apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo no grupo controle positivo e a dose maior do fitoterápico Isoflavine® (GC- = 81,3; GC+ = 20%; GI3 = 0%). As taxas de perdas pós-implantação apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo em diferentes doses testadas dos dois fitoterápicos (GC- = 0%; GS3 = 21%; GI1 = 11,1%; GI2 = 8%). As taxas de parto foram diferentes estatisticamente do grupo controle negativo nos dois fitoterápicos (GC- = 100%; GS2 = 50%; GI2 = 50%). As taxas de desmame e viabilidade foram diferentes em relação ao grupo controle negativo apenas os grupos do fitoterápico Soyfemme® (GC- = 100%; GS2 = 0%; GS3 = 61,5). Na taxa de viabilidade GS2 diferiu de GC- (GC- = 100%; GS2 = 60%). Nas taxas de natalidade, apenas a maior dose do fitoterápico Isoflavine® apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo (GC- = 100%; GI2 = 55,5%). As fêmeas tratadas como fitoterápico Soyfemme® que sofreram cesarianas foram diferentes estatisticamente do grupo controle negativo no número de filhotes e no peso do útero gravídico. Com relação às progênies, não houve alterações nos grupos, no que se refere ao desenvolvimento ponderal individual, na massa corporal total da ninhada e no teste de comportamento em campo aberto. / In these work the effects of two commercials phytoterapics formulations containing [Glycine max (L.) Merr] soy Soyfemme® of Ache Laboratórios Farmacêuticos S.A and Isoflavine® of Herbarium Laboratório Botânico Ltda were evaluated on fertility, development weight of Wistar rats and of their offspring. Doses was obtained through the manufacturer recommendation be the therapeutical dose 4,3 mg.kg-1. The animals were divided in eight experimental groups, one negative control group (GC-), that received distillated water, one positive control group (GC+), that received similar soy isoflavones and three groups were treated with phytoterapic formulation Soyfemme® and three groups were treated with phytoterapic formulation Isoflavine® in three doses, 4,3mg.kg-1, 21,5m.kg-1 and 43mg.kg-1, respectively, GS1, GS2, GS3 and GI1, GI2, GI3. The animals were treated daily orally, in determined phases. The males were treated during ninety days, seventy days before the mating and twenty one during the mating. The females were treated before and during the mating, pregnancy and lactation.Half of the pregnant females were submitted to a cesarean section on the 21st day of pregnancy. The rest of the female were allowed to give birth, and their pups were evaluated until the manifestation of the sexual characteristics and until open field habituation task. The results showed that phytoterapics formulations have not interfered in the weight development of the male treated and neither their offspring but, have interfered weight development before mating females. Both phytoterapics formulations have interfered in the total number of spermatozoa stored in the caudal epididymis and the sperm morphology, in dose dependency. The number of stored spermatozoa in the caudal epididymis (x ± epm) was GC- = 1978,8 ± 184,4; GC+ = 1322 ± 142,6; GS1 = 1735 ± 90,3; GS2 = 1448,3 ± 222,3; GS3 = 1174 ± 219,8; GI1 = 2071,6 ± 156,5; GI2 = 1864 ± 203,2; 1121,7 ± 175,9. The percentage of morphologic modifications in the sperms was: GC- = 6%; GC+ = 8,8%; GS1 = 13,3; GS2 = 19,7; GS3 = 22,6 e GI1 = 12,3%; GI2 =28,8% e GI3 =27,7%. The index the of mating have presented statistic difference among the groups in three doses the Isoflavine® related to the negative control group (p < 0,01) (GC- = 69,2%; GC+ = 45,5%; GI1 = 22,2%; GI2 = 22%; GI3 = 37,5%) while the groups treated withSoyfemme® only the higher dose (GC- = 69,2%; GS3 = 30%). The index of pregnancy have presented statistic difference among the groups related to the negative control group in the positive control group and the Isoflavine® higher dose (p < 0,01) (GC- = 81,3; GC+ = 20%; GI3 = 0%). The index of pos-implantation loss presented statistic difference among the groups related to the negative control group in different doses in both phytoterapics (GC- = 0%; GS3 = 21%; GI1 = 11,1%; GI2 = 8%). The delivery index were different statistically to the negative control group in both phytoterapics (GC- = 100%; GS2 = 50%; GI2 = 50%). The index of the weanling and viability was different statistically related to the negative control only Soyfemme® (GC- = 100%; GS2 = 0%; GS3 = 61,5%). The viability index (GC- = 100%; GS2 = 60%). In the birth index only the higher dose presented statistic difference related to the negative control group Isoflavine® phytoterapic (GC- = 100%; GI2 = 55,5%). Females treated with Soyfemme® in the higher doses submitted to a cesarean section were different statistically to the negative control group in the pup numbers and the uterine gravidic weight. Concerning the pups there wasn’t any modification among the groups in terms of individual weight development, in the weight young’s and the open field habituation task.
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Efeitos do exercício de ultra-endurance sobre a cartilagem articular de ratos / Effects of the ultra-endurance exercise in the articular cartilage of trainned rats

Franciozi, Carlos Eduardo da Silveira [UNIFESP] January 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: O exercício físico é um hábito difundido com comprovados benefícios à saúde. Quando praticado em intensidade leve e moderada, acarreta alterações benéficas na cartilagem, sendo até mesmo preconizado no tratamento da artrose. Porém, a relação entre o exercício excessivo e a osteoartrose ainda é controversa. Objetivo: Avaliar se o exercício excessivo pode acarretar osteoartrose utilizando um novo protocolo denominado treinamento de ultra-endurance em ratos. Métodos: Ratos Wistar foram divididos em dois grupos: grupo controle (GC) com 12 animais e grupo treinado (GT) com 12 animais. Os animais do GT foram submetidos a um treinamento de corrida em esteira com melhora progressiva do condicionamento físico durante 12 semanas realizando um exercício final de corrida até exaustão, tendo percorrido pelo menos 55 km nessas 12 semanas. Ao término desse período, todos os animais foram sacrificados e seus joelhos removidos para estudo hitomorfométrico, histomorfológico, histoquímico, eletroforético e fluorimétrico. Resultados: Houve diferenças significativas entre os dois grupos. O GT apresentou maior número de condrócitos, um importante aumento no número de pares de clones de condrócitos, uma quantidade de condrócitos em processo de morte celular expressivamente maior, alcançando graus mais elevados da classificação histológica de osteoartrose e uma marcante diminuição dos glicosaminoglicanos sulfatados e do ácido hialurônico. Conclusões: A cartilagem articular dos ratos treinados submetidos ao exercício de ultra-endurance demonstrou alterações predisponentes do processo osteoartrósico através de modificações celulares patológicas como aumento dos pares de clones de condrócitos e aumento da quantidade de condrócitos com características de morte celular, além da diminuição expressiva de componentes da matriz extracelular como os glicosaminoglicanos sulfatados e o ácido hialurônico. / Introduction: Exercise is an increasingly widespread habit with proven health benefits. Mild and moderate exercise causes beneficial changes in cartilage and are advocated for the treatment of osteoarthritis, however, the relationship between excessive or strenuous exercise and osteoarthritis remains a matter of controversy. Objective: Investigate whether osteoarthritic changes could be obtained in a new protocol named ultra-endurance training of rats. Methods: Wistar rats were divided into two groups: control group (GC) with 12 animals and trained group (GT) with 12 animals. The GT animals undergone a training run on a treadmill with progressive improvement in fitness for 12 weeks doing a final running exercise to exhaustion. They ran at least 55 km in 12 weeks. After this period, both groups were sacrificed and their knees were removed for histomorphometrical, histomorphological, histochemical, electrophoretic and fluorimetric analyses. Results: There were significant differences between the two groups. The GT had a higher number of chondrocytes, a significant increase in the number of chondrocytes clusters, more chondrocyte cell death, higher grades of osteoarthritis histological classification and a marked decrease in suphated glycosaminoglycans and hyaluronic acid concentrations. Conclusions: The articular cartilage of the trained rats submitted to ultraendurance exercise showed predisposing osteoarthritic changes such as pathological cellular alterations like increased clusters of chondrocytes and increased chondrocytes with features of cell death in addition to the significant reduction of extracellular matrix components such as hyaluronic acid and sulfated glycosaminoglycans. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Relação do desempenho de ratos em uma tarefa de esquiva inibitória com o padrão de sono / Relationship between rats performance on a inhibitory avoidance task with sleep pattern

Moreira, Karin Di Monteiro [UNIFESP] January 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011 / Estudos mostrando que o sono intervém no processamento da memória levaram ao surgimento de várias teorias. Inicialmente atribuiu-se ao sono REM (ou sono paradoxal) grande importância na consolidação de memórias dependentes do hipocampo. Posteriormente foi visto que outros estágios do sono também sofriam modificações após a realização de tarefas de aprendizagem. Assim outra teoria (chamada de dual-process) ganhou espaço na tentativa de se inferir a importância de cada estágio do sono em diferentes tipos de memória. No entanto os trabalhos realizados com ambas as abordagens não forneceram resultados consistentes para que essas teorias fossem consolidadas. Outra teoria, chamada de Hipótese Seqüencial, propõe que não apenas cada estágio do sono isoladamente seria importante para memória, mas a sucessão cíclica e ordenada dos estágios, não descartando o papel de cada um nesse processo. Os objetivos do presente estudo foram avaliar os efeitos da privação e do rebote de sono paradoxal na aquisição e retenção da resposta de esquiva inibitória em ratos, avaliados pelo desempenho na tarefa de Esquiva Inibitória por Múltiplas Tentativas (EIMT), a qual permite avaliar separadamente as fases de aquisição e retenção da resposta de esquiva, levando em consideração os elementos gerais e seqüenciais do ciclo sono/vigília. Na primeira etapa foi feita a caracterização da arquitetura e dos elementos seqüenciais do ciclo sono/vigília após o treino na tarefa de EIMT, em animais privados de sono e não privados. O objetivo da segunda etapa foi interferir no padrão seqüencial do ciclo sono/vigília após o treino e assim impedir o prejuízo de memória na tarefa em animais previamente privados de sono. Os resultados da primeira etapa mostraram prejuízo de desempenho nas sessões de aquisição e retenção da resposta de esquiva inibitória nos animais privados de sono e alterações nos padrões geral e seqüencial do ciclo sono/vigília após o treino em ambos os grupos. Nos animais controles essas alterações foram atribuídas às conseqüências do próprio treino da tarefa e nos animais privados de sono à combinação entre os fatores treino e o rebote de sono paradoxal nesse período, sugerindo que as alterações no padrão sono/vigília, causadas pelo rebote após o treino estejam relacionadas com o prejuízo na retenção/consolidação da resposta de esquiva inibitória. Na segunda etapa os resultados mostraram que o rebote se sono paradoxal no período pré-treino previne os prejuízos de desempenho na tarefa de EIMT, tanto na aquisição quanto na retenção da resposta de esquiva. Também mostraram que a administração de modafinil ou haloperidol (agentes dopaminérgicos que inibem o rebote se sono paradoxal) antes do treino previne os prejuízos na tarefa induzidos pela privação de sono prévia, sugerindo que possíveis alterações no padrão sono/vigília tenham ocorrido nesses animais no período pós-treino. Em animais não privados de sono foi visto que administração de modafinil facilita seletivamente a aquisição da resposta de esquiva inibitória. A partir dos dados obtidos no presente estudo conclui-se que: 1) o protocolo de EIMT utilizado é uma importante ferramenta para se estudar separadamente aquisição e retenção da resposta de esquiva inibitória; 2) aumento de sono paradoxal após o treino prejudica a consolidação/retenção da resposta de esquiva inibitória; 3) as modificações no padrão sono/vigília após o treino associadas com o desempenho não podem ser explicadas baseando-se em uma única teoria tendo em vista que foram observadas: modificações no padrão seqüencial; modificações em parâmetros gerais do sono/vigília; aumento de sono de ondas lentas em animais controles e diminuição em animais privados; e aumnto de sono paradoxal associado a prejuízo de memória e não à melhora. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Diodo emissor de luz (LED) λ 850nm no reparo do tendão do calcâneo, em ratos / Light emitting diode λ 850nm on repair of calcaneus tendon in rats

Gobbato, Rafael Correa [UNIFESP] January 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010 / Introdução: A ruptura do tendao calcaneo e considerada uma lesao grave devido ao seu escasso suprimento sanguineo, podendo levar semanas ou meses para completar sua cicatrizacao. O LED (Light Emitting Diode) vem sendo uma alternativa em relacao a luz laser na aceleracao da cicatrizacao. Objetivo: Avaliar o efeito do LED &#955; 850nm na reparacao do tendao calcaneo de ratos. Metodos: Trinta ratos machos Wistar tiveram seus tendoes calcaneos parcialmente lesionados por um trauma direto e foram distribuidos aleatoriamente em 3 grupos: Grupos 1-simulacao; 2- LED com densidade de energia 10J/cm2 e 3- LED com densidade de energia de 20J/cm2. Foram tratados por 6 dias consecutivos e no 7° dia apos lesao os tendoes foram removidos e avaliados quanto ao alinhamento das fibras (birrefringencia) e quantidade de colageno tipos I e III (picrosirius). Resultados: Grupo 2 (10J/cm2) apresentou melhor alinhamento das fibras de colageno, seguido pelo Grupo 3 (20J/cm2) quando comparados ao Grupo 1 (simulacao) (p=0*). Os Grupos 2 e 3 apresentaram maior quantidade de colageno tipo I que o Grupo 1 (p=0*). Nao houve diferenca entre os grupos tratamento entre si para esta avaliacao. Os Grupos 2 e 3 apresentaram menor quantidade de colageno tipo III que o simulacao (p=0*). Nao houve diferenca entre os grupos 2 e 3 entre si para esta avaliacao. Conclusao: O LED foi eficaz no processo de reparo de lesao parcial do tendao calcaneo em ratos, promovendo maior alinhamento das fibras de colageno e aumento na quantidade de colageno tipo I na regiao da lesao / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Influência da intensidade de exercício físico em diferentes etapas do desenvolvimento cerebral pósnatal de ratos. / Influence of the physical exercise intensity at different stages of postnatal brain development of rats

Almeida, Alexandre Aparecido de [UNIFESP] January 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Neurociência Translacional - INCT-INNT / Introdução: Estudos experimentais mostram que a pratica de exercicio fisico durante o periodo adolescente e capaz de aumentar a formacao de novos neuronios, a expressao hipocampal de fatores neurotroficos e aprimorar a aprendizagem e a memoria de ratos. Entretanto, e importante destacar que a intensidade adequada de exercicio fisico durante o periodo pos-natal do desenvolvimento nao esta bem esclarecida. Das poucas pesquisas realizadas com o treinamento fisico durante o desenvolvimento cerebral de ratos foi demonstrado que a neurogenese pode ser modificada de forma dependente da intensidade do exercicio fisico. Apesar disso, nao se sabe se existe uma etapa do desenvolvimento em que a intensidade do exercicio fisico poderia resultar em uma maior neuroplasticidade. Objetivo: Investigar a influencia de duas intensidades de exercicio fisico em diferentes etapas do desenvolvimento cerebral pos-natal de ratos. Materiais e Metodos: Foram utilizados ratos Wistar machos nascidos em nosso laboratorio. Os filhotes foram colocados com suas maes em caixas individuais ate o desmame no dia pos-natal 21 (P21). Os ratos foram divididos em diferentes grupos de idade: P21 (n=44), P31 (n=44), P41 (n=44) e P51 (n=44). Cada grupo de idade foi submetido a duas intensidades (baixa e alta) de exercicio fisico em esteira ao longo de 10 dias consecutivos, 30 minutos por dia. As intensidades de exercicio foram determinadas de acordo com o estagio de desenvolvimento de cada grupo. Depois da ultima sessao de exercicio, os niveis hipocampais de BDNF e citocinas inflamatorias foram determinadas por imunoensaio, a proliferacao celular por imunohistoquimica e degeneracao celular pela tecnica de fluoro jade B. Resultados: A analise quantitativa revelou que a densidade de celulas em proliferacao foi significativamente maior na regiao do giro dentado dos ratos submetidos a exercicio fisico de baixa intensidade em P21-30 e exercicio de alta intensidade em P31-P40 quando comparados aos ratos controles (p < 0,001 para ambos). Um aumento significativo dos niveis hipocampais da citocina pro-inflamatoria IL6 foi detectado em ratos submetidos a exercicio fisico de alta intensidade em P21-P30 comparados aos ratos controles (p = 0,001). Em P41-P50, nivel elevado da citocina pro-inflamatoria TNF foi encontrado na formacao hipocampal dos animais submetidos ao exercicio de alta intensidade comparados aos animais controles (p = 0,014). Em contraste, niveis elevados da citocina anti-inflamatoria IL10 e BDNF tambem estavam aumentados nos animais submetidos a exercicio fisico de alta intensidade em P41- P50 comparados aos animais controle (p = 0,009). Em todos os grupos de idade, nao foram encontrados neuronios em degeneracao na formacao hipocampal dos ratos submetidos as duas intensidades de exercicio fisico durante o desenvolvimento cerebral pos-natal. Conclusao: Estes resultados mostram que os efeitos neuroplasticos induzidos pelo exercicio sobre os niveis de BDNF e proliferacao celular na regiao do hipocampo sao dependentes da intensidade de exercicio e periodo de desenvolvimento. Alem disso, a intensidade do exercicio foi um fator indutor de inflamacao e a resposta inflamatoria induzida pelo exercicio fisico tambem foi relacionada com a fase de desenvolvimento. Estes resultados indicam que as alteracoes neuroplasticas induzidas pelo exercicio fisico durante o periodo de desenvolvimento cerebral pos-natal dependem tanto da intensidade do treinamento como do estagio de desenvolvimento cerebral / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Efeito da administração crônica de ayahuasca em modelos pré-clínicos de memória e ansiedade / Effect of chronic administration of ayahuasca in preclinical models of memory and anxiety

Favaro, Vanessa Manchim [UNIFESP] January 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Associação Fundo de Incentivo à Psicofarmacologia (AFIP) / A ayahuasca e uma bebida alucinogena que combina a acao agonista serotonergica da dimetiltriptamina da Psychotria viridis com a inibicao da enzima monoamino oxidase induzida pelas beta-carbonilas da Banisteriopsis caapi. Estudos em humanos tem mostrados que a inGestão de ayahuasca ativa regioes conhecidamente envolvidas com os mecanismos de memoria episodica, associacao contextual, processamento emocional e ansiedade, como amigdala e giro parahipocampal. Utilizando modelos pre-clinicos, nos avaliamos os efeitos da administracao cronica de ayahuasca nas doses de 120, 240 e 480mg/kg em animais submetidos as seguintes tarefas: labirinto aquatico de Morris (LAM), condicionamento de medo e labirinto em cruz elevado (LCE). Os dados comportamentais mostraram que a administracao cronica de ayahuasca nao alterou o desempenho dos animais no LAM, mas foi observado um aumento da resposta de medo nos animais que receberam a dose de 120mg/kg no condicionamento de medo ao contexto (CMC). Nao foram observadas diferencas entre os grupos apos a apresentacao do som no condicionamento de medo ao som (CMS). Alem disso, tambem nao foram observadas diferencas entre os grupos no LCE. A administracao aguda nao alterou o desempenho dos animais no CMC e CMS, mostrando que o aumento do medo ocorre apenas com o tratamento cronico. Os dados obtidos sugerem que a administracao cronica de ayahuasca foi capaz de fortalecer uma memoria aversiva especifica para uma experiencia emocional que depende de informacoes contextuais. Portanto, este estudo contribui para uma maior compreensao dos efeitos do consumo de ayahuasca a longo prazo em processos de aprendizagem e memoria / FAPESP: 2011/03791-3 / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Laser de baixa intensidade na expressão de genes ligados a mineralização óssea e ao cálcio em cultura de osteoblastos adultos

Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP] January 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A reducao ou minimizacao das consequencias das fraturas osseas e a regeneracao tecidual e objetivo de recursos clinicos e terapeuticos. O tecido osseo tem funcao mecanica, de deposito mineral e hematopoietica sendo composto por tres tipos celulares, osteoblastos, osteocitos e osteoclastos. Diversas substancias sao secretadas pelos osteoblastos, entre elas o calcio, que tem papel fundamental na homeostase celular e na producao do tecido osseo mineralizado e em cujo fluxo estao envolvidos os genes S100A6, PMCA1b e a osteocalcina ligados ao processo transporte e de mineralizacao. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade, no que concerne a sinalizacao de calcio e mineralizacao ossea, na expressao dos genes S100A6, PMCA1b e osteocalcina em celulas osteoblasticas adultas. Trinta fragmentos mediais de femures com aproximadamente 5mm foram coletados cirurgicamente de ratos Wistar e distribuidos em dois grupos A (n=15, laser) e B (n=15, sem laser). Os fragmentos foram digeridos mecanica e enzimaticamente com colageno tipo II. Apos sete dias de cultura o grupo A foi irradiado com laser de baixa intensidade de Arseneto de Galio e Aluminio &#955;=808nm, 250mW de potencia nominal, densidade de potencia de 200mW/cm2, densidade de energia de 2000mJ/cm2, dose de energia de 2J/cm2, diametro de feixe de 0,02mm, tempo de 5s em 1 ponto de aplicacao durante 6 dias. Em seguida, o RNA foi extraido, quantificado, submetido a sintese de cDNA e realizada quantificacao de Ct comparativo pela Reacao em Cadeia da Polimerase em Tempo Real. Os valores foram submetidos a analise estatistica de teste Mann-Whitney com p<0,05. A analise em relacao a quantidade de RNA dos grupos A (mediana 3,80) e B (mediana 3,80) e os valores das medianas de &#916;Ct dos tres genes, S100A6 (A=2,22 e B=2,89), osteocalcina (A=4,06 e B=3,45) e PMCA1b (A=1,85 e B=4,16) nao mostraram diferencas significativas. O laser de baixa intensidade em osteoblastos adultos nao alterou a expressao dos genes S100A6, PMCA1b e osteocalcina descartando a relacao, no periodo estudado, destes genes com a mineralizacao e regeneracao ossea / The aim of clinical and therapeutic features is to reduce or minimize the consequences of fractures and bone regeneration. The bone has mechanical, mineral deposit and hematopoietic functions due to three types of cells, osteoblasts, osteocytes and osteoclasts. Several substances are secreted by osteoblasts, including calcium, which plays a fundamental role in cellular homeostasis and production of mineralized bone tissue and in whose flow are involved the S100A6, PMCA1b and osteocalcin genes related to the transport and mineralization process. This study was designed to evaluate the effects of low-level laser, when it comes to calcium signaling and bone mineralization, in S100A6, PMCA1b and osteocalcin genes expression in adult osteoblast cells. Thirty medial femoral fragments with approximately 5mm were surgically collected from Wistar rats and distributed into two groups A (n=15, laser) and B (n=15 without laser). The fragments were digested mechanical and enzymatically with type II collagen. After seven days of culture group A was irradiated with low intensity Gallium-Aluminum-Arsenide laser λ=808nm, 250mW nominal power, power density 200mW/cm2, energy density 2000mJ/cm2 dose of energy 2J/cm2 beam diameter 0,02 mm, length of 5s in one application point for 6 days. Then, RNA was extracted, quantified, underwent to cDNA synthesis and quantification performed by the comparative Ct by Real Time Polymerase Chain Reaction. The values were underwent to statistical analysis by Mann-Whitney test with p<0,05. The analysis for the amount of RNA of group A (median 3,80) and B (median 3,80) and ΔCt median values of the three genes, S100A6 (A=2.22 and B=2.89), osteocalcin (A=4.06 and B=3.45) and PMCA1b (A=1.85 and B=4.16) showed no significant differences. Low-level laser irradiation in adult osteoblasts did not modify the expression of S100A6, PMCA1b and osteocalcin genes discarding the relationship of these genes with the mineralization and bone regeneration in the studied period. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Efeito da suplementação de ácidos graxos ômega-3 no músculo esquelético e no perfil lipídico em ratos submetidos à natação / Effect of omega-3 fatty acid supplementation in skeletal muscle and in the lipid profile in rats submitted to swimming

Miller, Tânia Corrêa [UNIFESP] January 2015 (has links) (PDF)
Submitted by Maria Anália Conceição (marianaliaconceicao@gmail.com) on 2016-06-24T18:00:35Z No. of bitstreams: 1 Publico-NOVO-14.pdf: 989536 bytes, checksum: e6c3eb00413264d6c5e35014ebf79271 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Anália Conceição (marianaliaconceicao@gmail.com) on 2016-06-24T18:01:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Publico-NOVO-14.pdf: 989536 bytes, checksum: e6c3eb00413264d6c5e35014ebf79271 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-24T18:01:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Publico-NOVO-14.pdf: 989536 bytes, checksum: e6c3eb00413264d6c5e35014ebf79271 (MD5) Previous issue date: 2015 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: Existe alguma evidência que sugere que os ácidos graxos ômega-3 (AGω-3) podem alterar a atividade das vias anti-catabólicas e/ou anabólicas do músculo esquelético para promover a manutenção da massa muscular. Objetivo: Analisar o efeito da suplementação de AGω-3 no músculo esquelético e no perfil lipídico em ratos submetidos à natação. Método: Sessenta ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: sedentário placebo (SP), sedentário AGω-3 (Sω-3), exercício placebo (EP) e exercício AGω-3 (Eω-3). Os animais dos grupos EP e Eω-3 foram submetidos à 30 sessões de natação com duração de 45 minutos, intermitente, com sobrecarga de 15% do peso corporal, cinco dias por semana. Os animais receberam 500mg/dia de AGω-3 ou óleo de oliva (placebo) por gavagem. Após a eutanásia, amostras sanguíneas foram coletadas para dosagens de CK, DHL e lipídeos sanguíneos. Foi retirado o músculo gastrocnêmio, preparadas lâminas em HE e estimadas as áreas seccionais pelo método estereológico. Resultados: O grupo placebo submetido ao exercício (EP) apresentou menor ganho de peso comparado ao grupo sedentário placebo (SP) (p<0,0001). O grupo Sω-3 apresentou menor área das fibras musculares (p=0,018), menor valor de CK (p=0,001) e de colesterol (p<0,0001) comparado ao grupo SP. O grupo Eω-3 apresentou menor valor de DHL (p=0,029), menor valor de LDL (p=0,0002) e maior valor de HDL (p=0,035) comparado ao grupo EP. Conclusão: A suplementação com AGω-3 em ratos diminuiu a área seccional do músculo esquelético, diminuiu os níveis séricos das enzimas CK e DHL e melhorou o perfil lipídico / Introduction: There is some evidence suggesting that omega-3 fatty acids (AGω-3) can alter the activity of anti-catabolic and/or anabolic pathways of the skeletal muscle to promote the maintenance of muscle mass. Objective: To analyze the effect of AGω-3 supplementation in skeletal muscle and in the lipid profile in rats submitted to swimming. Method: Sixty male Wistar rats were divided into four groups: sedentary placebo (SP), sedentary AGω- 3 (Sω-3), exercise placebo (EP) and AGω-3 exercise (Eω-3). The animals in the EP and Eω-3 groups were subjected to 30 swimming sessions with a duration of 45 minutes, with intermittent exercise and an overload of 15% of body weight, five days a week. The animals received 500mg/day of AGω-3 or olive oil (placebo) by gavage. After euthanasia, blood samples were collected for CK, LDH and blood lipids dosages. The gastrocnemius muscles were removed and slides were prepared with HE and an estimated cross-sectional area was calculated by the stereological method. Results: The placebo group submitted to exercise (EP) had less weight gain compared to the sedentary groups (SP) (p <0.0001). The group Sω-3 presented with a lower area of muscle fibers (p = 0,018), lower CK (p=0,001) and cholesterol (p<0,0001) compared to the groups SP. The Eω- 3 group presented lower LDH (p=0,029), lower LDL (p=0,0002) and higher value of HDL (p=0,035) compared to the EP group. Conclusion: The supplementation with omega-3 in rats submitted to swimming decreased the sectional area of the skeletal muscle, decreased CK and DHL enzyme and improved lipid profile.
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Avaliação do efeito terapêutico da colina após a recirculação em ratos submetidos à isquemia encefálica global transitória

Borges, Andrea Aurélio [UNIFESP] 24 November 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-24 / O Acidente Vascular Encefalico (AVE) representa uma das principais causas de mortalidade e morbidade , sendo a estimativa dos custos gerados pelo cuidado paliativo de pacientes portadores de sequelas neurológicas decorrentes do AVC de aproximadamente 43 bilhões de dólares ao ano somente nos Estados Unidos. A citicolina, um intermediário na síntese de fosfolipídeos da membrana, é a única droga cujos efeitos neuroprotetores contra a lesão isquêmica foram comprovados cientificamente. Apesar disso, o mecanismo de sua neuroproteção ainda não foi completamente elucidado. Uma vez que a ligação entre a colina e a citidina é quebrada após a sua administração e seu efeito benéfico não foi reproduzido com a administração isolada de citidina, é provavel que a colina seja a única responsável pela neuroproteção atribuida a citicolina. Baseando-se nesses dados o presente estudo procurou investigar a viabilidade da colina como agente terapêutico no modelo de isquemia global transitória em ratos. Na primeira fase do estudo, foram administradas diferentes doses de bitartarato de colina por via oral ao longo de sete dias de sobrevida para a avaliação da sobrevida neuronal. A dose terapêutica com melhor efeito neuroprotetor foi a dose de 400mg colina/Kg. Na segunda fase do estudo, foi verificada a estabilidade da neuroproteção numa sobrevida mais longa (2 meses) pela administração crônica de colina. Nesta fase também estudamos o efeito pró-neurogênico da colina e seu efeito sobre o desempenho cognitivo dos animais. O resultados obtidos demonstraram que a dose de 400mg colina/Kg ao longo de 7 dias propiciou um efeito neuroprotetor bastante significante (p<0,001; ANOVA seguido pelo teste de Newman-Keuls) e esse efeito manteve-se estável na sobrevida longa. A adminstração crônica de colina não propiciou neuroproteção adicional em relação à sobrevida de 7 dias, mas propiciou melhor desempenho cognitivo dos animais no teste do labirinto aquático de Morris. Em conclusão, a colina é uma substância capaz de propiciar um efeito neuroprotetor na isquemia global transitória. Tal efeito é duradouro e capaz de promover melhora do desempenho cognitivo no modelo lesional empregado neste estudo. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Efeito da privação e restrição de sono na função reprodutiva de ratos machos / Effects of sleep loss on reproductive function of male rats

Alvarenga, Tathiana Aparecida [UNIFESP] 27 April 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-27 / Tem sido documentado que a experiência copulatória pode alterar o desempenho sexual em ratos machos. No entanto, as bases hormonais e o número de cópulas necessárias para o rato adquirir experiência sexual ainda não estão claramente estabelecidos. Por outro lado, as alterações hormonais podem ser resultantes de diversos fatores, em especial a falta de sono. A diminuição do tempo de sono presente na sociedade atual quer seja pelo excesso de trabalho ou até mesmo a troca do tempo de sono por momentos de lazer, pode levar ao comprometimento de diversas funções do nosso organismo, em especial o bom funcionamento do sistema endócrino que pode acarretar em prejuízos no comportamento sexual e consequentemente na função reprodutiva. Neste sentido, a presente etapa se divide em 2 estudos: no Artigo 1 determinamos o tempo necessário para o rato adquirir experiência sexual bem como o perfil hormonal de ratos sexualmente ativos e inexperientes. No Artigo 2 avaliamos a influência da falta de sono no comportamento sexual (CS), perfil hormonal e parâmetros espermáticos em ratos sexualmente experientes. Para a realização do Artigo 1, ratos machos foram submetidos ao treino de CS na presença de fêmeas receptivas durante 9 dias intercalados. Os resultados indicaram que durante esse período, 42,5% dos animais apresentaram excelente desempenho sexual, 17,5% mostraram um desempenho adequado, 7,5% tiveram baixa atividade e inesperadamente 32,5% dos animais não apresentaram nenhuma resposta sexual. Em relação aos resultados hormonais, os ratos com baixo/nenhum desempenho apresentaram menores concentrações de progesterona comparadas aos animais de excelente/adequado desempenho. A testosterona, por sua vez, foi significativamente reduzida nos animais de baixa/nenhuma atividade comparados com os animais de excelente/adequado desempenho. No Artigo 2, os ratos sexualmente ativos foram submetidos à privação de sono paradoxal durante 96 horas (PSP96h) ou a restrição de sono por 21 dias consecutivos (RS21d) que consiste em expor os animais a PSP por 18 horas e as 6 horas restantes deixá-los na gaiola moradia. Os grupos controles (CTRL) foram mantidos em gaiola de moradia durante todo o experimento. Em seguida foram avaliados o CS, o perfil hormonal e também o espermograma desses animais. Verificou-se que a PSP 96h foi capaz de diminuir o desempenho sexual. Entretanto, a RS21d não alterou o CS dos ratos em relação ao grupo CTRL. Quanto às alterações hormonais, os ratos submetidos à PSP 96h tiveram uma diminuição das concentrações de testosterona. A progesterona, LH e FSH não apresentaram nenhuma alteração significativa após os protocolos de falta de sono. Em relação à análise do sêmen, tanto o grupo PSP 96h como o grupo RS21d apresentaram uma menor viabilidade espermática em relação ao grupo CTRL. No entanto, a diminuição dos espermatozóides vivos foi mais acentuada no grupo PSP 96h do que no grupo RS21d. Tomados em conjunto, os achados do presente estudo indicam que além da testosterona, a progesterona também é um fator limitante para o bom desempenho dos ratos machos. Além disso, os animais com excelente atividade sexual, quando submetidos à PSP, apresentaram uma diminuição do desempenho sexual, da viabilidade espermática e ainda das concentrações de testosterona. Similarmente, os animais que foram restritos de sono, também tiveram comprometimento na porcentagem de espermatozóides vivos. Assim, nossos resultados sugerem que para manter uma resposta sexual adequada é necessária concentrações ideais não só de testosterona, mas também do hormônio tipicamente feminino, a progesterona. Ainda, independente das concentrações hormonais envolvidas na cascata de formação dos espermatozóides, a falta de sono prejudica a função reprodutiva de ratos machos. / It has been reported that copulatory experience may actually alter sexual performance in male rats. But indicating experience is a risky proposition since the statement is made in the absence of an established hormonal basis and number of copulations that define sexual experience condition. And also, the associated hormonal alterations observed in sexually high performing rats could have been caused by factors other than experience, such as sleep deprivation (SD). Whether it is trading sleep time for leisure time or for work, the shortage of sleep in present day society may lead to adverse alterations in body functions, even in the endocrine system, prompting changes sexual behavior and therefore, in reproductive function. In light of such considerations the current stage of the overall investigation forks into 2 studies: Study 1 seeks to determine the required time for the rat to acquire sexual experience as well as the hormonal profile of sexually active and sexually naïve rats. Study 2 examines the influence of sleep shortage upon sexual behavior (SB), hormonal profile, and spermatic parameters in sexually experienced rats. In Study 1 male rats underwent SB training in the presence of receptive females every other day over a nineday period. Results show that throughout this period 42.5% of the subjects displayed excellent sexual performance, 17.5% had adequate performance, 7.5% had low sexual activity and an unexpected 32.5% showed no sexual response at all. The hormonal analysis that followed showed that, when compared to subjects with adequate/excellent performance, the progesterone concentrations in the rats whose sexual performance was low or nil were decreased, as were those of testosterone. In Study 2 sexually experienced subjects underwent to a PSD protocol for 96h (PSD96h) and a sleep restriction protocol for 21 consecutive days (SR21d). In the latter, subjects experienced 18h of sleep deprivation followed by 6h in their home cages. Control groups (CTRL) remained in their home cages throughout the entire protocol. SB, hormonal profile and sperm analysis were assessed and it was found that PSD96h reduced sexual performance but SR21d did not alter SB in the rat subjects when compared to CTRL. As for hormonal alterations, the subjects submitted to PSD96h experienced a reduction in their levels of testosterone but no alterations occurred in the concentrations of progesterone, LH, and FSH. As for the semen analysis, both groups (PSD96h and SR21d), presented lower spermatic viability in relation to the CTRL. However, the loss of live spermatozoids was more pronounced in the PSD96h group than in the SR21d group. Taken together, the findings herein indicate that in addition to testosterone, progesterone is also a limiting factor in the sexual performance of male rats. And furthermore, that when submitted to PSD96h, rat subjects with excellent sexual activity loose sexual performance and also, they experience loss of spermatic viability as well as suffer decreases in testosterone concentrations. Likewise, there were also detrimental effects in the percentage of live spermatozoids in the SR21d subjects. The current study thus indicates that in order to maintain adequate sexual response an ideal concentration of not only testosterone but of the typically female hormone progesterone is also required. And also, regardless of the concentrations of one or another hormone involved in the cascade of events leading to spermatozoid formation, lack of sleep can be singled out as a detrimental factor in the reproductive function of male rats. / TEDE / São Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)

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