Orientador: Alexandrina Sartori / Resumo: A vitamina D (VitD) ativa possui várias funções importantes incluindo efeitos imunomoduladores na imunidade inata e na específica. A deficiência desta vitamina já alcançou proporções epidêmicas em várias regiões e por isto sua suplementação tem sido sugerida em algumas doenças. Diferentes linhagens de camundongos têm sido utilizadas para avaliar os efeitos imunomoduladores da VitD. O estudo dos efeitos da deficiência e da suplementação com VitD tem sido realizado em seres humanos e também em linhagens isogênicas de camundongos. Neste trabalho comparamos o efeito da suplementação com 0,1 µg de VitD e de paricalcitol nas linhagens murinas C57BL/6 e DBA/1J. Estes animais foram injetados com 0,1 µg de VitD ou paricalcitol durante 15 dias, em dias alternados. O peso corporal foi avaliado diariamente e sangue e baço foram coletados 24 horas após a última dose. Na linhagem C57BL/6 a VitD diminuiu o peso corporal e aumentou a concentração de cálcio sérico. Em relação aos parâmetros imunológicos, houve diminuição da produção de citocinas por células esplênicas e maior expressão de MHC II nas células dendríticas. O paricalcitol não afetou o peso corporal e o nível de cálcio sérico, mas diminuiu a produção de citocinas nesta linhagem. Com exceção do peso corporal que diminuiu, os demais parâmetros não foram afetados pela VitD ou pelo paricalcitol nos camundongos DBA/1J. A suplementação com 0,2 µg de VitD nos animais DBA/1J desencadeou a diminuição de peso corporal, queda na produção de ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Antonio Carlos Alessi / Banca: Pamela Rodrigues Reina Moreira / Banca: Hiro Goto / Banca: Trícia Maria Ferreira de Sousa Oliveira / Resumo: O agente etiológico da leishmaniose visceral no Brasil, é a Leishmania chagasi. Ela é transmitida pela picada do flebotomíneo Lutzomyia longipalpis, que adquire o parasito ao realizar o hematofagismo em animais infectados. O presente trabalho teve como objetivo estudar a resposta imune de camundongos BALB/c imunizados com a proteína recombinante produzido a partir do gene A2-L de L. chagasi, amostra isolada de um cão atendido no Hospital Veterinário da FCAV-UNESP, campus de Jaboticabal-SP, e avaliar a capacidade dessa proteína recombinante em induzir imunoproteção nos animais, após desafio com o parasito. Quarenta camundongos foram divididos em quatro grupos: G1, 10 animais inoculados com promastigotas de L. chagasi; G2, 10 animais inoculados com a proteína recombinante A2-L; G3, 10 animais imunizados com a proteína recombinante A2-L e desafiados com promastigotas de L. chagasi; G4, 10 animais inoculados com solução salina (controle negativo). Os parâmetros da resposta imune humoral avaliados foram anticorpos da classe IgG e das subclasses IgG1 e IgG2a, pelo ELISA indireto. Quanto à resposta imune celular, avaliou-se a produção de células CD4+ e CD8+, pela técnica de citometria de fluxo e, as imunomarcações de CD4+, CD8+, iNOS, macrófagos, MHC I, MHC II e Linfócitos B, pela técnica de imunohistoquímica. A produção de citocinas (IL-2, IFN-γ, TNF-α, IL-4 e IL-10), pela técnica de PCR em Tempo Real Quantitativo de Transcrição Reversa (RTqPCR) e, a carga parasitária dos baços dos camundongos infectados com o parasita por qPCR. O grupo G3 teve um padrão de resposta humoral do tipo Th1=Th2, enquanto o grupo G1, o padrão de resposta foi do tipo Th1<Th2. O grupo G3 também apresentou maior produção de linfócitos CD8 e de células expressando MHC I, MHC II e iNOS. O grupo G3 se sobressai na produção de mRNA da IL-2, do IFN-γ e do TNF-α, pelas células do baço. A carga parasitária foi... / Abstract: The causative agent of the disease in Brazil is Leishmania chagasi. It is transmitted by the bite of the sand fly Lutzomyia longipalpis, which acquires the parasite to realize the hematophagism in infected animals. This work aimed to study the immune response of BALB / c mice immunized with the recombinant protein produced from A2-L gene of L. chagasi, isolated sample of a dog the Veterinary Hospital of FCAV-UNESP, Jaboticabal and to evaluate the ability of this recombinant protein to induce immunoprotection in animals after challenge with the parasite. Forty mice were divided into four groups: G1, 10 animals inoculated with L. chagasi promastigotes; G2, 10 animals inoculated with the recombinant protein A2-L; G3, 10 animals immunized with the recombinant protein A2-L and challenged with promastigotes of L. chagasi; G4, 10 animals inoculated with saline (negative control). Characteristics evaluated humoral immune response were antibodies of the IgG class and IgG1 and IgG2a subclasses, the indirect ELISA. As for the cellular immune response, we evaluated the production of CD4+ and CD8+ by flow cytometry technique and evaluated the immunoblots of CD4+, CD8+, iNOS, macrophages, MHC I, MHC II and B lymphocytes, by the technique of immunohistochemistry. The production of cytokines (IL-2, IFN-γ, TNF-α, IL-4 and IL-10) by RT-PCR in real time and, the parasite load of the spleens of mice infected with the parasite by qPCR. The G3 had a pattern of humoral response Th1 = Th2, while the G1, the pattern was Th1< Th2. The G3 group also showed higher production of CD8 cells and cells expressing MHC I, MHC II and iNOS. The group G3 excels in the production of IL-2, IFN-γ and TNF-α, mRNA the spleen cells. The parasite load was significantly lower in the group G3, less than half of that found in G1. We therefore conclude that the G3 group produced a pattern of humoral and cellular responses, which according to literature suggests be effective ... / Doutor

Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Coorientador: Fátima Regina Vilani Moreno / Banca: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Maria Esther Salles Nogueira / Banca: Sônia Maria Usó Ruiz Silva / Banca: Silvio Luís de Oliveira / Resumo: A doença de Jorge Lobo é micose cutânea-subcutânea de evolução crônica causada pelo fungo Lacazia loboi. Esta micose é predominante na região Amazônica e afeta principalmente trabalhadores rurais que vivem em contato constante com a vegetação e o solo, como é o caso dos seringueiros dessa região. Até o momento não existem estudos sobre a participação do estado nutricional na resposta imunológica abordando a doença de Jorge Lobo; assim, este estudo tem por finalidade avaliar os efeitos da desnutrição protéico-calórica na resposta imune de camundongos isogênicos da linhagem BALB/c inoculados com L. loboi, empregando parâmetros imunológicos e histopatológicos. O presente estudo foi desenvolvido com 120 camundongos do sexo masculino, da linhagem BALB/c, com idade aproximada de 12 semanas e cerca de 25g de peso corporal. Foram constituídos quatro grupos: G1: 30 camundongos inoculados com o fungo L. loboi, recebendo restrição dietética de 20% da dieta normal; G2: 30 camundongos não inoculados, recebendo restrição dietética de 20% da dieta normal; G3: 30 camundongos inoculados, recebendo dieta normal; G4: 30 camundongos sadios. Os animais dos grupos G1 e G2 foram submetidos previamente, por 20 dias, antes do início do estudo, a restrição dietética com oferta diária de 80% da quantidade ingerida pelos grupos G3 e G4. Após instalada a desnutrição, os animais foram inoculados no coxim plantar, via intradérmica, com fungo L. loboi e depois de 4 meses (período de aparecimento das lesões macroscópicas no coxim plantar), os animais foram sacrificados e submetidos ao lavado peritoneal e à necrópsia para a retirada dos órgãos: fígado e baço. Os coxins plantares foram removidos para determinação da viabilidade e do número total de fungos, além do histopatológico. As células do lavado peritoneal... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Jorge Lobo's disease is a cutaneous and subcutaneous mycosis with chronicle evolution caused by the fungus Lacazia loboi. This mycosis is predominant in the Amazon region and affects mainly rural workers who live in constant contact with the vegetation and the soil, such as the rubber tappers in this region. Up to this date there haven't been studies about the participation of the nutritional state in the immunological response approaching the Jorge Lobo; thus, this study aims to evaluate the effects of the protein-calorie malnutrition in the immune response of the isogenic mice lineage BALB/c inoculated with L. loboi, using hystopatological and immunological parameters. The present study was developed with 120 male mice lineage BALB/c, with approximately 12 weeks old and circa 25g of body weight. Four groups were made: G1: 30 mice inoculated with L. loboi fungus, receiving diet restriction of 20% of the normal diet; G2: 30 non inoculated mice, receiving diet restriction of 20% of normal diet; G3: 30 mice inoculated receiving normal diet; G4: 30 healthy mice. The animals in the groups G1 and G2 were previously submitted for 20 days before the beginning of the study to a diet restriction with a daily offer of 80% of the quantities ingested by groups G3 e G4. After malnutrition was installed the animals were inoculated in the plantar cushion, via intradermic, with L. loboi fungus and after 4 months (period of the appearance of the macroscopic lesions in the plantar cushion), the animals were sacrificed and submitted to a peritoneal washing and to a necropsy to remove the organs: liver and spleen. The plantar cushions were removed for determining the viability and the total number of fungi, besides the hystopatological. The cells in the peritoneal washing were used for: total cell culture for the dosage of cytokine IFN-γ, macrophage... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Jean Leandro dos Santos / Banca: Chung, Man Chin / Banca: Simone Kashima Haddad / Resumo: A reativação da expressão gênica de gama-globina e consequente produção de hemoglobina fetal (HbF) por mecanismos epigenéticos é uma valiosa intervenção terapêutica na anemia falciforme. Estudos recentes mostram que a inibição da enzima Histona Deacetilase (HDAC), principalmente HDAC-1 e HDAC-2, mostrou ser uma estratégia promissora em promover o aumento da expressão gênica de gama-globina e a produção de HbF sem causar alteração no ciclo e proliferação celular. Neste trabalho foram planejadas por modelagem molecular novos compostos inibidores de HDAC 1 e 2. Os estudos de ancoragem molecular revelaram a forma como estes compostos interagem com a HDAC-2, sendo a subunidade N-(2-aminofenil)benzamida responsável por interagir com o átomo de zinco presente no sítio ativo. Durante o processo de otimização das estruturas, os valores de docking score passaram de -9,8 para - 12,3, indicando melhores interações com o receptor. Onze compostos inéditos foram sintetizados e caracterizados por métodos analíticos. Os estudos enzimáticos mostraram atividade inibitória dos novos compostos variaram de 83 à 96% para HDAC-1, 83 à 94% para HDAC-2 e 82 à-89% para HDAC-3. O composto (22) (4-(4-aminofenetil)-N-(2-aminofenil)benzamida) foi um dos mais ativos apresentando, na concentração de 10 μM, atividade inibitória contra as HDACs 1 e 2 com valores superiores a 90%. Estes resultados mostram que os compostos planejados neste trabalho são potenciais inibidores de HDAC, sendo a molécula (22) a mais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Reactivation of gamma-globin gene expression and fetal hemoglobin (HbF) production through epigenetic mechanisms are valuable strategy to sickle cell anemia treatment. Early studies have demonstrated that histone deacetylase inhibition, especially HDAC-1 and HDAC-2, is a promising strategy to increase gamma-globin gene expression and HbF production without alteration in cell cycle or cell proliferation. At this work it was designed, by molecular modeling, new compounds HDAc 1 and 2 inhibitors. The molecular modeling studies has demonstrated how these compounds interacts with HDAC-2, being the subunit N-(2-aminophenyl)benzamide responsible for interact with the zinc atom of active site. During the optimization process, the docking score values hava changed from -9,8 to -12,3, which indicates better interactions with the receptor. It was synthesized and characterized eleven new compounds. Enzimatic assays have demonstrated that the enzymatic inhibition of the compounds varied from 83 to 96% against HDAC 1, 83-94% against HDAC 2 and 82-89% of HDAC 3. Compound (22) (4-(4-aminophenetyl)-N-(2-aminophenyl) benzamide was one of the most promisor among all compounds. At 10uM it was able to inhibit HDAC 1 and 2 more than 90%. These data has demonstrated that the design compounds in this work are potencial inhibitors of HDAC, being...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Thais Borges César / Banca: Neuza Mariko Aymoto Hassimoto / Banca: Amanda Martins Baviera / Resumo: Objetivo: Avaliar efeitos regulatórios da tangeritina e heptametoxiflavona sobre perfil bioquímico, inflamação e estresse oxidativo de camundongos induzidos à obesidade por dieta hiperlipídica. Métodos: 50 camundongos C57BL/6J machos foram divididos aleatoriamente em 4 grupos: Controle, alimentados com dieta padrão (n=10); DH, alimentados apenas com dieta hiperlipídica (n=10); TAN, alimentados com dieta hiperlipídica e suplementados com tangeritina (n=15); e HMF, alimentados com dieta hiperlipídica e suplementados com heptametoxiflavona. Nas primeiras quatro semanas foi realizada indução da obesidade e os animais receberam apenas dieta padrão (9,5% kcal gordura) ou dieta hiperlipídica (45% kcal gordura). Após esse período, nas quatro semanas seguintes, os grupos TAN e HMF receberam dieta hiperlipídica com seus respectivos suplementos na dose de 100mg/kg, e os demais grupos continuaram a receber suas referidas dietas. Ao fim da oitava semana, os animais foram eutanasiados por exsanguinação total via punção cardíaca, e foram coletados sangue e órgãos para posteriores análises de perfil bioquímico, citocinas inflamatórias, marcadores de estresse oxidativo e histologia. Resultados: Tangeritina e heptametoxiflavona diminuiram os níveis séricos de glicose, leptina e resistina, e do índice HOMA-IR (p<0.05). Os níveis de TBARS também foram menores nos grupos suplementados em comparação ao grupo alimentado com dieta hiperlipídica não suplementada (p<0,05). Em adição, a tangeritina red... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To evaluate the regulatory effects of tangeretin and heptamethoxyflavone on biochemical profile, inflammation and oxidative stress of mice induced obesity by a high-fat diet. Methods: 50 male C57BL / 6J mice were randomly divided into 4 groups: Control, fed standard diet (n = 10); DH, fed only high-fat diet (n = 10); TAN, fed high-fat diet and supplemented with tangeretin (n = 15); HMF, fed high-fat diet and supplemented with heptamethoxyflavone. In the first four weeks, obesity induction was performed and the animals received only standard diet (9.5% kcal fat) or high-fat diet (45% kcal fat). After this period, in the following four weeks, the groups TAN and HMF received high-fat diet with their respective supplements in the dose of 100mg/kg, and the other groups continued to receive their referred diets. At the end of the eighth week, the mice were euthanized by total exsanguination via cardiac puncture, and blood and organs were collected for further analysis of biochemical profile, inflammatory cytokines, oxidative stress markers and histology. Results: Tangeretin and heptamethoxyflavone decreased serum levels of glucose, leptin and resistin, and the HOMA-IR index (p <0.05). The TBARS levels were also lower in the supplemented groups compared to the group fed a not supplemented high-fat diet (p <0.05). In addition, tangeretin reduced adipocyte size (p <0.05) and heptamethoxyflavone decreased fat accumulation in hepatic tissue (p <0.05). Conclusion: Supplementat... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T07:25:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 291802.pdf: 1475983 bytes, checksum: 286ced70d413df7d52effecb7dbadf31 (MD5) / A síndrome da dor complexa regional (SDCR) pode ter início após um trauma, geralmente em uma extremidade, resultando em dor, disfunção da regulação vasomotora e sudomotora, mudanças tróficas na pele e anormalidades motoras. A SDCR pode ocorrer na ausência ou presença de lesão nervosa (tipo I ou II, respectivamente). Apesar de estudada, a SDCR ainda necessita de uma definição precisa que engloba o entendimento de sua patofisiologia. Diversos estudos demonstram que o exercício físico regular é capaz de beneficiar, neste contexto, positivamente a saúde diminuindo a dor ocasionada pela SDCR tipo I. Desta forma, os objetivos deste estudo foram: (1) caracterizar o modelo de SDCR tipo I em camundongos (Swiss) adultos machos através de análises bioquímicas, farmacológicas e comportamentais e (2) observar alguns efeitos do exercício físico de natação de alta intensidade neste modelo experimental. Para tanto, sob anestesia (hidrato de cloral # 7%, 0,6 mg/kg), os animais foram submetidos à isquemia prolongada através de um torniquete na pata traseira direita por um período de 3 horas que foi logo em seguida removido para permitir a reperfusão, induzindo a dor pós isquemia crônica (DPIC). O nervo tibial foi analisado através de microscopia óptica e foi detectada ausência de dano nervoso, demonstrando que o modelo trata da SDCR tipo I. Os animais submetidos à isquemia apresentaram inicialmente sinais de inflamação, com hiperemia e edema que duraram quatro a cinco dias, bem como hipersensibilidade ao frio (placa fria, 10 °C) por um período de quatro semanas, quando comparados aos animais naive. A hipersensibilidade mecânica (testada através de filamentos de von Frey) também foi evidente por quatro semanas e foi diminuída por anti-inflamatórios como ibuprofeno e dexametasona se tratada agudamente. Entretanto, em estágios crônicos, apenas os anti-neuropáticos (morfina ou gabapentina) e o antioxidante N-acetil-L-cisteína (NAC) foram capazes de reduzir a hipersensibilidade. No sexto dia após a lesão, a isquemia e reperfusão (IR) também aumentou os níveis de tióis, mas não os de citocinas na pele da pata e na medula dos camundongos. Na segunda fase do trabalho, foram observados os efeitos da natação sobre a DPIC, assim, comparou-se os grupos que realizaram o exercício de natação por 30 minutos durante cinco dias antes (NIR), após (IRN) ou antes e após a IR (NIRN). O exercício de natação aumentou a hiperemia e o grupo IRN apresentou diminuição do edema da pata. Além disso, todos os grupos que foram submetidos ao exercício apresentaram redução da hipersensibilidade mecânica. O grupo NIRN também apresentou redução da hipersensibilidade térmica ao frio. Em conclusão, este estudo descreve primeiramente o perfil farmacológico, bioquímico e comportamental em camundongos com DPIC, modelo de SDCR tipo I; num segundo momento, mostra que o exercício de natação crônico de alta intensidade induz efeito anti-hipernociceptivo, sugerindo que este pode ser uma abordagem efetiva no tratamento da SDCR. / Complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I) initiates after a trauma, usually in one of the limbs in which the patient develops pain, dysfunction of vasomotor regulation and sudomotor, trophical changes on skin and motor unction abnormalities. CRPS-I does not cause nerve injury while complex regional pain syndrome-type II damages the nerves. Although studies on CRPS can be found in the literature, a formal and precise definition and also a better understanding of its pathophisiology is required. Additionally, many studies show that regular exercising can positively bring health benefits including reduction of pain caused by CRPS-I. Thus, the objectives of this study were: (1) characterization of an animal model of CRPS type-I (called chronic post-ischemic pain # CPIP in mice) using biochemical, pharmacological and behavioral analysis and (2) observation of the effects of high intensity swimming exercise on animal model. CPIP was induced following prolonged hind paw ischemia by placing a tourniquet proximal to the ankle joint for three hours in an anesthetized mouse and removing it to allow reperfusion. Light-microscopic examination of the tibial nerve taken from the region proximal to the tourniquet revealed no signs of nerve damage. Mice presented initial inflammation, hyperemia and edema that lasted four or five days, as well as cold hypersensitivity (cold plate, 10 °C) for a period of four weeks. Mechanical hypersensitivity (von Frey hairs) was also evident for four weeks and could be relieved by anti-inflammatory drugs like ibuprofen and dexamethasone if treated acutely. However, in chronic stages, only antineuropathic drugs (morphine or gabapentine) or antioxidant N-acetyl-Lcysteine (NAC) were able to reduce hypersensitivity. CPIP also increased thiols levels but did not affect the levels of pro-inflammatory cytokines in both hind paw skin and spinal cord in mice. Furthermore, swimming exercise changed the pattern of hyperemia and edema and reduced both mechanical and cold hypersensitivity in CRPS-I mice. In conclusion, this study describes the pharmacological, biochemical and behavioral analysis in a model CRPS-I applied in mice; and also indicates that the exercise of swimming has some benefits in CPIP, suggesting that it can be an effective approach to treat CRPS-I.

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-01Bitstream added on 2015-05-14T16:58:53Z : No. of bitstreams: 1 000829408.pdf: 2465739 bytes, checksum: 3b6cd69550973141a95f15638eea0959 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O controle da raiva é mundialmente reconhecido como um dos grandes desafios mundiais. As diferentes variantes virais isoladas das diversas espécies animais apresentam características imunogênicas distintas assim como na sequência de nucleotídeos, o que permite sua classificação em variantes e genótipos. Além disso, diferenças na patogenicidade também foram observadas através de inoculação experimental em camundongos e cultivo celular. Os mecanismos pelos quais o vírus rábico (RABV) infecta um indivíduo e se perpetua na natureza ainda não foram totalmente esclarecidos. Entretanto alguns fatores que levam ao sucesso da infecção já foram estabelecidos, entre os mais importantes podemos citar a capacidade de induzir a apoptose das células de defesa e preservar a integridade e funcionalidade dos neurônios. Estes eventos são mediados por citocinas que regulam diversos genes envolvidos nesse complexo processo ainda pouco compreendido. Considerando a diversidade de linhagens virais circulantes e a complexidade dos eventos envolvidos na neuroinvasão do RABV o presente projeto avaliou os genes mais importantes envolvidos na expressão gênica do processo de resposta immune inata e adaptativa após infecção e avaliou a patogenicidade de diferentes amostras virais através da inoculação experimental em camundongos SPF (Specific Pathogen Free) realizando a quantificação viral por qRT-PCR e imunofluorescência das amostras coletadas / Rabies control is considered a worldwide challenge. Different virus strains (RABV) are isolated from different species, they have distinct immunogenic characteristics as well in their nucleotides sequence, allowing their classification into variants and genotypes. Furthermore, differences in pathogenicity have also been observed through experimental inoculation in mice and cell cultures. The mechanisms by which RABV infects an individual and perpetuated the infection in nature have not been fully clarified. However some factors that lead to successful infection are already established, among the most important we can mention the ability to induce apoptosis of T cells and maintain the integrity and functionality of neurons. These events are mediated by cytokines that regulate several genes involved in this complex process still poorly understood. Considering the diversity of viral strains circulating and the complexity of events involved in the neuroinvasiveness of RABV this project aims to study the gene expression pathway, innate and adaptative immune response and pathogenicity of different virus strain by means of experimental inoculation in mice, clinical evaluation and avaliating viral replication by DFA and qRT-PCR / FAPESP: 2012/00895-5

Orientador: Jane Megido / Banca: Hélio Langoni / Banca: Maria Luiza Carrieri / Banca: Marcos Bryan Heinemann / Banca: Paulo Eduardo Brandão / Resumo: O controle da raiva é mundialmente reconhecido como um dos grandes desafios mundiais. As diferentes variantes virais isoladas das diversas espécies animais apresentam características imunogênicas distintas assim como na sequência de nucleotídeos, o que permite sua classificação em variantes e genótipos. Além disso, diferenças na patogenicidade também foram observadas através de inoculação experimental em camundongos e cultivo celular. Os mecanismos pelos quais o vírus rábico (RABV) infecta um indivíduo e se perpetua na natureza ainda não foram totalmente esclarecidos. Entretanto alguns fatores que levam ao sucesso da infecção já foram estabelecidos, entre os mais importantes podemos citar a capacidade de induzir a apoptose das células de defesa e preservar a integridade e funcionalidade dos neurônios. Estes eventos são mediados por citocinas que regulam diversos genes envolvidos nesse complexo processo ainda pouco compreendido. Considerando a diversidade de linhagens virais circulantes e a complexidade dos eventos envolvidos na neuroinvasão do RABV o presente projeto avaliou os genes mais importantes envolvidos na expressão gênica do processo de resposta immune inata e adaptativa após infecção e avaliou a patogenicidade de diferentes amostras virais através da inoculação experimental em camundongos SPF (Specific Pathogen Free) realizando a quantificação viral por qRT-PCR e imunofluorescência das amostras coletadas / Abstract: Rabies control is considered a worldwide challenge. Different virus strains (RABV) are isolated from different species, they have distinct immunogenic characteristics as well in their nucleotides sequence, allowing their classification into variants and genotypes. Furthermore, differences in pathogenicity have also been observed through experimental inoculation in mice and cell cultures. The mechanisms by which RABV infects an individual and perpetuated the infection in nature have not been fully clarified. However some factors that lead to successful infection are already established, among the most important we can mention the ability to induce apoptosis of T cells and maintain the integrity and functionality of neurons. These events are mediated by cytokines that regulate several genes involved in this complex process still poorly understood. Considering the diversity of viral strains circulating and the complexity of events involved in the neuroinvasiveness of RABV this project aims to study the gene expression pathway, innate and adaptative immune response and pathogenicity of different virus strain by means of experimental inoculation in mice, clinical evaluation and avaliating viral replication by DFA and qRT-PCR / Doutor

Orientador: Joni Augusto Cirelli / Banca: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Daniela Bazan Palioto / Banca: Pedro Paulo Chaves de Souza / Banca: Francisco Humberto Nociti Junior / Resumo: A patogênese de osteonecrose dos maxilares (ONJ) e os fatores de risco ainda não estãototalmente elucidados e continuam sendo foco de contínuos estudos visando estabelecer umcorreto diagnóstico, prevenção e tratamento. Assim, os objetivos do presente estudo foram:(1) desenvolver em camundongos, um modelo experimental de ONJ induzido porbisfosfonatos (BPs) e inibidores de RANK-L associado a doença periodontal espontânea; (2)investigar neste modelo se a descontinuação desses medicamentos alteraria as característicasclinicas e radiográficas de osteonecrose e, (3) avaliar a influência da artrite reumatoide (AR)no agravamento de ONJ experimental. As análises em todos os estudos foram estabelecidaspor meio de avaliações radiográficas, por microtomógrafo, e histológicas. No primeiro estudo,foi estabelecido um novo modelo experimental animal utilizando-se diferentes medicamentosanti-reabsortivos, resultando em características clinicas semelhantes ao que ocorre emhumanos, ou seja, extensas áreas necróticas e com exposição óssea a cavidade oral. Osresultados do estudo 2 demonstraram que a descontinuação de OPG-Fc, um inibidor deRANK-L, mas não de BPs reverteu todas as características clinicas e radiográficas de ONJ.Além disso, os resultados do estudo 3 sugerem que a AR associada ao tratamento com altasdoses de BPs exacerba a incidência e a severidade de ONJ em camundongos. Com base nosachados do presente estudo, conclui-se que ONJ induzida por BPs e por ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The pathogenesis of the osteonecrosis of the jaw (ONJ) and its risk factors still remain poorly understudied and continue to be the focus on ongoing studies to establish a proper diagnosis, prevention and treatment. Thus, the aims of this study were: (1) to develop in mice, an experimental model of osteonecrosis induced by bisphosphonates (BPs) and RANK-L inhibitors associated with spontaneously periodontal disease. Then, (2) using the same experimental model in mice, to investigate if the discontinuation of these drugs alters the clinical and radiographic features of ONJ. In addition, (3) the influence of systemic diseases such as rheumatoid arthritis (RA), and ONJ was assessed as a possible risk factor for worsening ONJ characteristics. The analyses in all studies were established through radiographic, by means of micro-computed tomography, and histological assessments. In the first study, a new experimental animal model using different antiresorptive drugs was established with clinical features similar to what occurs in humans, with extensive necrotic areas and exposed bone o the oral cavity. The results of the study 2 showed that discontinuing OPG-Fc, a RANK-L inhibitor, but not BPs reversed all the clinical and radiographic features of ONJ. Furthermore, the results of study 3 suggest that treatment with high doses of BPs associated with the presence of RA exacerbated the incidence and severity of ONJ in mice. These data evidenced that BPs and RANK-L inhibitors possess gr... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Gisele Faria / Resumo: Os objetivos do presente estudo foram: Publicação 1 - Realizar uma revisão sistemática sobre os parâmetros microtomográficos de aquisição, reconstrução e análise da lesão periapical (LP) em ratos e camundongos. Além disso, ilustrar o efeito da variação destes parâmetros (tamanho do voxel, beam hardening correction, smoothing, gray dataset, plano de orientação, região de interesse - ROI e threshold) em imagens microtomográficas de hemimandíbulas com LP induzida em molares inferiores de camundongos; e Publicação 2 - Avaliar a acurácia da microtomografia computadorizada (micro-CT) na análise de LP induzida em dentes de camundongos empregando como padrão ouro para comparação os valores obtidos por estereologia aplicada a dados histológicos. Na Publicação 1, foram pesquisados artigos que usaram a micro-CT para avaliar LP em ratos e camundongos de 2000 a janeiro de 2015 no PubMed. Para a ilustração dos efeitos da variação dos parâmetros de aquisição, reconstrução e análise da LP foram utilizadas mandíbulas de camundongos que tiveram LP induzida nos primeiros molares inferiores. Foram encontrados 21 artigos. Destes, 18 citaram algum parâmetro usado na aquisição, nenhum descreveu os parâmetros de reconstrução e 16 citaram alguns parâmetros de análise da LP. Nenhum artigo relatou o protocolo completo para aquisição, reconstrução e avaliação da LP. Nenhum artigo foi classificado como alta qualidade, 7 foram como moderada qualidade e 14 de baixa. A ilustração da variação dos parâmetros ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objectives of this study were: Publication 1 - Perform a systematic review of the microtomographic parameters of acquisition, reconstruction and analysis of periapical lesion (LP) in rats and mice. In addition, to illustrate the effect of the variation of these parameters (voxel size, beam hardening correction, smoothing, gray dataset, orientation plane, region of interest - ROI and threshold) in microtomographic pictures of hemimandibles with LP induced in lower molars of mouse; and Publication 2 - Evaluate the accuracy of computed microtomography (micro-CT) in the analysis of LP induced in teeth of mouse employing as the gold standard for comparing the values obtained by stereology applied to histological data. In Publication 1, were researched papers that used micro-CT to evaluate LP in rats and mouse from 2000 to January 2015 in PubMed. To illustrate the effect of variations in acquisition-, reconstruction-, and analysis parameters on images of LP were used mouse's jaws that had LP induced in the lows first molars. 21 articles were found. Of these, 18 cited a parameter used in the acquisition, none described the reconstruction parameters and 16 cited some of the LP analysis parameters. No article reported the complete protocol for acquisition, reconstruction and analysis of LP. No study was classified as high seven were classified as moderate-, and 14 as low quality. The effect of variation in parameters was that voxel size may interfere with image sharpness and reconstruction may interfere with image sharpness. The inadequate plane orientation may alter the size of the LP. Nonpersonalized ROIs select the regions beyond the LP and the personalized selects only the lesion. The increase of the threshold values increased the lesion. It was concluded that no defined protocol for acquiring and analyzing micro-CT images of LP in rats...(Complete abstract electronic sccess below) / Doutor