Orientador: Jane Megid / Banca: Paulo Eduardo Brandão / Banca: Hélio Langoni / Resumo: O tratamento pós-expositivo da raiva é a principal medida para evitar o desenvolvimento da doença, e baseia-se na aplicação da vacina anti-rábica associada ou não ao soro anti-rábico, em número de doses variáveis de acordo com o tipo de exposição. Protocolos terapêuticos utilizando drogas antivirais vêm sendo aplicados em seres humanos, com resultados positivos e negativos, gerando dúvidas quanto à eficácia. A possibilidade de utilização de RNA de interferência (siRNA) e da ribavirina, associado ou não ao Dimetilsulfóxido (DMSO) no tratamento pós expositivo da raiva experimental em camundongos, representa uma nova perspectiva. Camundongos C57BL6 foram inoculados com uma amostra de rua de vírus rábico proveniente de cão, separados em diferentes grupos e diferentes protocolos terapêuticos, sendo estes administrados 24 horas após a inoculação viral. De cada grupo, oito animais foram separados para observação durante um período de 30 dias sendo os demais sacrificados cinco e dez dias após a inoculação. O cérebro dos animais sacrificados foi coletado e RT-PCR em Tempo Real foi realizada para a detecção e quantificação do gene N do vírus rábico e avaliação da expressão de genes relacionados a resposta imune. Tanto a ribavirina como o siRNA, isoladamente ou associados ao DMSO não demonstraram diferença estatística significante relacionada à letalidade, no entanto, os grupos tratados com ribavirina demonstraram maior percentagem de letalidade e sintomatologia clínica mais severa. Nos animais não inoculados e tratados com a ribavirina, houve um estímulo transitório da resposta imune inata, no entanto, quando associado ao virus rábico este aumento da resposta imune não foi observado. No grupo tratado com siRNA o período de evolução da doença foi mais prolongado quando comparado ao dos demais grupos, sugerindo uma atividade antiviral parcial... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Rabies post-exposition treatment is the main measure to prevent disease development, and is based on the use of anti-rabies vaccine with or without anti-rabies serum, in a number of doses varying according to the exposure type. Therapeutic protocols using antiviral drugs have been applied in humans, with positive and negative results, raising doubts about effectiveness. The possibility of using RNA interference (siRNA) and ribavirin, with or without Dimethyl sulfoxide (DMSO) in post exposure treatment of experimental rabies in mice represents in rabies treatment. C57BL6 mice were inoculated with street dog rabies virus, and then separated into different groups and received different post-exposure treatment, wich were administered 24 hours after the inoculation. In each group, eight animals were separated for 30 days of observation and the ramaining sacrificied five and ten days after inoculation. Brains of the sacrificed animals were collected and RT-Real-Time PCR was performed for detection and quantification of the N gene of rabies virus, and for evaluation of the expression of immune response related genes. Both ribavirin and siRNA, alone or associated with DMSO showed no statistically significant differences related to mortality, however, the groups treated with ribavirin showed a greater percentage of mortality and more severe clinical symptoms. In animals not inoculated and treated with ribavirin, there was a transient stimulation of the innate immune response, however, when associated to rabies virus such increase in immune response was not observed. In the group treated with siRNA the period of the disease was more prolonged when compared to the other groups, suggesting a partial antiviral activity with this therapy. The results of ribavirin "in vivo" were evaluated "in vitro in fibroblasts and neuroblastoma cells demonstrating a cell type-dependent efficacy / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-08-13T18:01:17Z : No. of bitstreams: 1 000725965.pdf: 3262047 bytes, checksum: 967510b01f68ddd4e971fa2d99518101 (MD5) / A esclerose múltipla (EM) é uma doença desmielinizante que afeta o sistema nervoso central (SNC). A encefalite autoimune experimental (EAE) é o modelo animal mais empregado para investigar mecanismos imunopatogênicos, terapia e efeito de agentes infecciosos na EM. Neste contexto, utilizamos este modelo para avaliar o efeito de cepas produtoras de superantígenos (SAgs) no desenvolvimento da EAE. Para isto, camundongos C57BL/6 foram infectados com cepas distintas de S. aureus e 3 dias após foram submetidos à indução de EAE por imunização com MOG (myelin oligodendrocyte glycoprotein). O efeito das infecções foi avaliado através dos seguintes parâmetros: perda de peso corporal, escore clínico, inflamação do SNC e produção de citocinas por células esplênicas ou isoladas do SNC. A presença de células T CD4+CD25+Foxp3+ (Tregs) foi determinada em alguns experimentos. Os resultados obtidos foram organizados em 3 manuscritos. Na primeira etapa, comparamos 2 cepas de S. aureus quanto às suas habilidades de causar bacteremia, migração para o cérebro e efeito da infecção sobre a fase aguda da EAE. Foram escolhidas as cepas de S. aureus ATCC 51650 que é produtora do superantígeno TSST-1 (TSST-1+) e ATCC 43300 (TOX-) que não produz nenhum tipo de SAg. As 2 cepas causaram bacteremia e atingiram o cérebro, entretanto, só a cepa TOX- causou inflamação local. As 2 cepas reduziram os sintomas clínicos da EAE durante a fase aguda mas a cepa produtora de TSST-1+ determinou efeito mais acentuado. O efeito protetor de ambas foi associado com modulação da produção local e periférica de citocinas. No segundo manuscrito investigamos se o efeito protetor da infecção prévia com S. aureus era mantido na fase crônica da EAE. Constatamos que o efeito protetor perdurou até a fase crônica sendo também caracterizado por menor incidência da doença, menor perda de peso e escores clínicos mais baixos. O efeito da cepa produtora de... / Multiple sclerosis (MS) is a demyelinating disease of the central nervous system (CNS). Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is a widely accepted model used to investigate immunopathogenic mechanisms, therapy and the effect of infectious agents on MS. In this context, this model was employed to evaluate the effect of S. aureus superantigen (SAg) producer strains on EAE development. For this C57BL/6 mice were infected with distinct S. aureus strains and three days after infection they were submitted to EAE induction by immunization with MOG (myelin oligodendrocyte glycoprotein). The effect of infections was evaluated by body weight loss, clinical score, inflammation of the CNS and cytokine production by spleen cells or CNS cells. The presence of CD4+CD25+Foxp3+ T cells (regulatory T cells) was determined in some experiments. The results were organized into 3 manuscripts. Initially, we compared the ability of 2 S. aureus strains to cause bacteremia, to migrate to the brain and their effect in the acute phase of EAE. The S. aureus strains ATCC 51650 that is a TSST-1 producer (TSST-1+) and ATCC 43300 that does not produce any SAg (TOX-) were used in this work. Both S. aureus strains were capable to cause bacteremia and migrate of the brain, however, only TOX- group caused inflammation in the brain. Both S. aureus strains were able to decrease the severity of EAE during the acute phase, but TSST-1+ strain triggered a more accentuated protective effect. Protective activity of both S. aureus strains was associated with local and peripheral cytokine modulation. In the second manuscript we investigated if the protective effect of the previous infection with S. aureus remained during the chronic disease phase. The results indicated that protection persisted during chronic EAE phase and was characterized by lower disease incidence, smaller body weight loss and also reduced clinical scores. The effect of the TSST-1+ was also more...

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-08-13T18:00:51Z : No. of bitstreams: 1 000753090.pdf: 1071388 bytes, checksum: f5c4d37fa2437b3af69429353ea51425 (MD5) / O Diabetes mellitus (DM) é caracterizado como uma desordem metabólica, resultante de defeitos da ação ou secreção na insulina, ou ambos, defeitos estes que levam a alterações no metabolismo de proteínas, carboidratos e lipídios. Tais alterações causam sérias consequências aos pacientes diabéticos, levando a graves complicações como perda de peso, aumento nos níveis lipídios no sangue, aumento da incidência de aterosclerose e doenças arteriais periféricas, danos à visão e aos rins, e em casos mais graves, óbito. A incidência de pessoas diabéticas em todo mundo vem aumentando de modo alarmante ao longo dos anos, e pesquisas recentes têm mostrado que o número de diabéticos na população tende a aumentar cada vez mais nas próximas décadas. Esse preocupante aumento na incidência do diabetes deve-se aos atuais estilos de vida das pessoas, que incluem hábitos não saudáveis, sedentarismo e obesidade. Os tratamentos atuais para o DM incluem a insulinoterapia, assim como o uso de hipoglicemiantes orais. No entanto, são relatados pelos pacientes, inúmeros efeitos colaterais e desconfortos causados pelos mesmos. Partindo dessas informações, a pesquisa por novos agentes que possam agir na melhora do diabetes tornou-se alvo de estudos. Nesse contexto, o estudo de plantas medicinais que possuam efeitos hipoglicemiantes e que atuem na melhora do quadro diabético vem despertado o interesse dos pesquisadores. A família Myrtaceae é uma família botânica com muitos representantes na flora brasileira, e, desse modo, gera muito interesse nas pesquisas a respeito de suas espécies. O gênero Myrcia ainda é pouco explorado pelos pesquisadores, e há um número reduzido de estudos acerca da atividade hipoglicemiante de espécies desse gênero. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi o de avaliar a possível atividade hipoglicemiante do extrato bruto das folhas de Myrcia bella Cambess., uma planta proveniente ... / Diabetes mellitus (DM) is characterized as a metabolic disorder resulting in defects of action and/or insulin secretion, resulting in disturbances in the metabolism of proteins, carbohydrates and lipids which can cause serious consequences to diabetic patients, resulting in complications such as weight loss, increased blood lipid levels, increased incidence of atherosclerosis and peripheral artery diseases, vision and kidneys injury, and in severe cases, death. The incidence of diabetics worldwide is increasing alarming over the years, and recent research has shown that the number of diabetics in the population will tend to a significantly increasing in coming decades. This alarming increase in the incidence of diabetes is due to the current lifestyles including unhealthy habits, sedentary lifestyle and obesity. Current treatments for diabetes include the use of exogenous insulin, as well of oral hypoglycemic agents. However, patients report numerous side effects and discomfort caused by them. Based on this information, the search for new agents that can act to improve diabetes has become the focus of several studies. In this context, the study of medicinal plants that has hypoglycemic effects and that acts in improving the diabetic state coming arousing interest of researchers. Myrtaceae is a botanical family that has many representatives in the Brazilian flora, and thus generates much interest in research on their species. The genus Myrcia is still not well explored by the researchers, and there are a few studies about the hypoglycemic activity of species in that genus. Thus, the aim of this study was to evaluate the possible hypoglycemic activity of the crude extract of the leaves of Myrcia bella Cambess, a plant from the Brazilian cerrado, in streptozotocin-induced diabetic mice. Diabetic (STZ SAL and STZ EXT) and control mice (CTL SAL and CTL EXT) were treated during 21 days with saline and the crude extract of ...

Orientador: Andrei Moroz / Coorientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Elenice Deffune / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Resumo: O câncer de próstata (CaP) é o mais diagnosticado e a segunda causa de morte por câncer entre os homens na América e nos países da Europa Ocidental. No Brasil, o número de novos casos de CaP estimado para o ano de 2016 foi de 61.200. A forma mais letal do CaP é aquele resistente à castração, nos quais os tratamentos disponíveis conferem sobrevida média de 24 meses. Não há terapias curativas efetivas para os estágios avançados. Por essa razão, tratamentos adjuvantes associados à quimioterapia e radioterapia têm grande importância; destaque à imunoterapia passiva que utiliza anticorpos monoclonais (AcM), ferramentas que também tem relevância no diagnóstico e estadiamento da doença. Nesse sentido, esse projeto teve como objetivo principal a obtenção de um painel de AcM murinos reconhecedores de células tumorais prostáticas humanas. Para a obtenção dos AcM foi estabelecido um banco de células prostáticas e, também, de células mielomatosas murinas não secretoras de imunoglobulinas utilizadas durante todas as etapas de produção. Foram utilizados camundongos Balb/C imunizados pela técnica de imunização subtrativa com o uso da ciclofosfamida como agente tolerizador com um e dois ciclos (LNCAPS e LNCAPSS, respectivamente) e pela técnica convencional sem o uso de ciclos de tolerização (LNCAP), tendo como tolerógeno células não tumorais da linhagem RWPE-1 e como imunógeno, células tumorais da linhagem LNCaP. Após o término das imunizações, os camundongos foram sacrificados e os baços co... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Prostate cancer (PCa) is the most diagnosed and the second leading cause of cancer deaths among men in America and in Western European countries. In Brazil, the number of new cases of PCa estimated for the year 2016 was 61,200. The most lethal form of PCa is that resistant to castration, in which the available treatments confer an average survival of 24 months. However, there are no effective curative therapies for the advanced stages. For this reason, adjuvant treatments associated with chemotherapy and radiotherapy are of great importance; The use of passive immunotherapy using monoclonal antibodies (MAbs), tools that also have relevance in the diagnosis and staging of the disease. In this sense, this project had as main objective the obtaining of a panel of murine MAbs recognizing human prostatic tumor cells. In order to obtain the MAbs, a bank of prostatic cells and also nonsecretory murine myelomatosis cells used during all stages of production were established. Balb/C mice immunized by the subtractive immunization technique with the use of cyclophosphamide as a tolerant agent with one and two cycles (LNCAPS and LNCAPSS, respectively) and the conventional technique without the use of tolerance cycles (LNCAP) were used as tolerogen Non-tumor cells of the RWPE-1 lineage and as immunogen, tumor cells of the LNCaP lineage. After the immunizations were completed, the mice were sacrificed and the spleens collected to obtain lymphocytes for fusion with myelomatosis cells. A total of 12 hybridomas producing antibodies to the immunogen were obtained. The 4 best hybridomas were cloned, obtaining a total of 94 clones with positivity above 90% against the immunogen, but also 66.07% positive against the tolerogen. With the results obtained and with results obtained in related works of the group, it was concluded that the efficiency of the subtractive immunization... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Resumo: A esporotricose é uma micose subcutânea aguda ou crônica causada por fungos termodimórficos do complexo de espécies de Sporothrix schenckii e pode acometer tanto animais como seres humanos. A doença tem distribuição mundial e no Brasil se tornou endêmica, sendo S. schenckii e S. brasiliensis as duas espécies patogênicas maisrelacionadasà transmissão zoonóticaassociada principalmente ao gato. O tratamento convencional com antifúngicos é demorado e tem muitos efeitos adversos, especialmente em pacientes com imunocomprometidos. Logo, nos últimos anos tem-se focado a atenção sobre os componentes da parede celular de espécies do complexo Sporothrixque possam estar envolvidos na sua virulência, para serem utilizados como potenciais alvos antigênicos nodiagnóstico e terapêutica contra a esporotricose. Recentemente, nosso grupo de trabalho demonstrou que um soro obtido em camundongos imunizados com um extrato de proteínas da superfície celular (PSC) de S. schenckii foi imunorreativo contra a enolase contida nesse extrato e uma outra proteína de função desconhecida. A capacidade desse soro de potencializar a fagocitose e inibir a adesão do fungo aos fibroblastos in vitro, e ainda a proteção por transferência passiva em animais infectados pelo fungo foi atribuída à sua atividade ligante de enolase.Diante disto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da enolase na adesão de S. schenckii ATCC 16345 e S. brasiliensis (Ss250 e Ss256) a fibroblastos assim como suas propriedades imuno... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sporotrichosis is an acute or chronic subcutaneous mycosis caused by thermodimorfic fungi from the Sporothrix schenckii species complex that can affect both humans and other animals. The disease is amply distributed worldwide and endemic in Brazil, with S. schenckii and S. brasiliensis being the two pathogenic species most associated to the zoonotic transmission which, in turn, involves mainly the domestic cat. The conventional antifungal therapy takes long and has adverse effects, especially in immunocompromised patients. In light of this, attention has been focused in recent years on the cell wall components of species from the Sporothrix complex that could be involved in their virulence, so that they could be used as potential antigenic targets in the diagnosis and therapy of sporotrichosis. Recently, we showed that a serum obtained from mice which had been immunized with a S. schenckii cell surface protein (CSP) extract reacted with enolase, found in the extract, and another protein of unknown function. The capacity of this serum to enhance phagocytosis and inhibit adhesion of the fungus to fibroblasts in vitro, as well as the protection afforded upon its passive transference into infected mice, was attributed to its enolase-binding activity. In face of the above, this study aimed to assess both the immunogenic properties and the role played by enolase in S. schenckii ATCC 16345 and S. brasiliensis (Ss250 and Ss256) adhesion to fibroblasts. The S. schenckii enolase (rEno)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Daniela Cardoso Umbelino Cavallini / Banca: Vivian Marques Miguel Suen / Banca: Amanda Martins Baviera / Resumo: Objetivo: analisar o efeito de um produto à base de extrato aquoso de soja, fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus 416 e com adição de Bifidobacterium longum ATCC 15707, sobre a composição da microbiota fecal, variação de peso corporal e parâmetros inflamatórios de camundongos submetidos à dieta hiperlipídica. Métodos: O protocolo experimental teve duração de 10 semanas sendo utilizados camundongos machos Swiss (Unib: SW) com oito semanas de idade. Os animais foram divididos em quatro grupos (n=10): C (controle negativo) - animais alimentados com dieta padrão para roedores (DP); OB (controle positivo) - animais induzidos à obesidade por dieta hiperlipídica (DHL - 61,01% do valor energético total de lipídios); OBF (fermentado probiótico) - animais induzidos à obesidade por DHL e que receberam o produto fermentado probiótico; OBP (placebo) - animais induzidos à obesidade por DHL e que receberam o produto placebo (sem os cultivos microbianos). A bebida probiótica e o produto placebo foram produzidos semanalmente e a viabilidade das cepas E. faecium CRL 183, L. helveticus 416 e B. longum ATCC 15707 foi determinada imediatamente após o preparo do produto probiótico (T0) e com sete dias de armazenamento à temperatura de refrigeração (5 ºC). Ao longo do protocolo experimental foram monitorados os seguintes parâmetros: ingestão hídrica e de ração (diariamente), variação do peso corporal (semanalmente) e verificação da glicemia de jejum (final do protoc... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Aim: to investigate the effect of an aqueous soy extract beverage, fermented with Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus 416, supplemented with Bifidobacterium longum ATCC 15707, on the composition of fecal microbiota, change in body weight and inflammatory parameters of mice submitted to a hyperlipidic diet. Methods: The length of the experimental protocol was 10 weeks, and it was performed using Swiss type male mice (Unib: SW) at eight weeks of age. The animals were divided into four groups (n = 10): C (negative control) - animals fed with a standard diet for rodents; OB (positive control) - animals induced to obesity by a high-fat diet (HFD - 61.01% of the total energetic value of lipids); OBF (beverage fermented with probiotics) - animals induced to obesity by HFD, that also was fed with the probiotic fermented product; OBP (placebo) - animals induced to obesity by HFD, that also was fed with the placebo product (the same product without microbial cultures). The beverage fermented with probiotics and the placebo product were produced weekly and the viability of its microbial strains (E. faecium CRL 183, L. helveticus 416 and B. longum ATCC 15707) was determined immediately after its preparation (T0) and after seven days of storage at controlled temperature (5 °C). During the experimental protocol, the following parameters were monitored: water and food intake (daily), body weight variation (weekly) and fasting glycemia (at the end of the protocol). The composition of the intestinal microbiota was evaluated by Real-Time Polymerase Chain Reaction (qPCR) at the beginning, middle and at the end of the protoc... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T15:57:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 288523.pdf: 1311836 bytes, checksum: 32f42013c6ecff80dd02e2bfdb21627b (MD5) / A agmatina é uma substância endógena que possui características neuromoduladoras. Estudos recentes têm indicado efeitos neuroprotetores para esta poliamina em modelos experimentais de isquemia, estresse e de doenças neurodegenerativas. O presente estudo teve como objetivo investigar o potencial protetor do tratamento sistêmico com agmatina (30 mg/kg, i.p.) durante 5 dias consecutivos sobre as alterações comportamentais e neuroquímicas induzidas pela administração intranasal (i.n.) de 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina (MPTP, 1 mg/narina) em camundongos C57BL/6 envelhecidos (15 meses de idade), um modelo experimental da doença de Parkinson desenvolvido em nosso laboratório. O tratamento com agmatina foi capaz de aumentar em 40% a taxa de sobrevida dos animais infudidos com MPTP. Nos testes comportamentais realizados durante um período de 21 dias após a administração i.n. do MPTP, o tratamento com agmatina preveniu o desenvolvimento de prejuízos cognitivos e motores avaliados, respectivamente, nos testes de reconhecimento social e campo aberto, além de reduzir os prejuízos no Escore Neurológico de Severidade (ENS) que avalia o estado neurológico geral dos animais. De maneira importante, os resultados do presente estudo demonstram que a agmatina não inibe a atividade da enzima monoamino oxidase B (MAO-B) e, portanto, não interfere diretamente na etapa limitante da metabolização do MPTP a MPP+ (metabólito ativo do MPTP). No entanto, a agmatina não foi capaz de previnir a diminuição da captação hipocampal de glutamato induzida pelo tratamento i.n. com MPTP. Em conjunto, esses resultados sugerem que o tratamento repetido com agmatina é capaz de prevenir, ao menos em parte, os efeitos comportamentais e neuroquímicos induzidos pela administração i.n. de MPTP em camundongos envelhecidos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T17:21:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 290837.pdf: 7456675 bytes, checksum: 6d4384354dfda32f471a2a2c055ea370 (MD5) / Estudos recentes demonstraram que a terapia por diodo emissor de luz (LEDT, do inglês, light-emitting diode therapy) apresenta atividade antinociceptiva em modelos animais de nocicepção aguda, além de ser capaz de estimular o processo de regeneração do tendão calcâneo em ratos. No entanto, sua possível atividade na hipersensibilidade e regeneração em modelos crônicos de neuropatia após lesão nervosa ainda não foi investigada. Com este objetivo, camundongos foram submetidos ao modelo de esmagamento do nervo ciático (ENC). Após sete dias, a LEDT (950 nm, a 80 mW/cm2, 2,5 J, a cada 24 horas por 15 dias) foi aplicada no local da lesão (grupo local) ou na face medial do membro posterior direito (grupo distal) dos animais operados. Os resultados obtidos demonstram que a LEDT, em ambos os locais de irradiação, reduziu efetivamente a hipersensibilidade mecânica induzida pelo ENC em relação ao grupo controle. Por outro lado, apenas no grupo distal a LEDT foi capaz de inibir a hipersensibilidade ao frio induzida pelo ENC. Além disso, a LEDT, no grupo distal, diminuiu os níveis de TNF-? e IL1-? na medula espinal e, no grupo local, diminuiu os níveis de TNF-? na medula espinal e nervo ciático dos animais submetidos ao ENC. Por fim, a LEDT não foi capaz de acelerar a recuperação da função motora, nem a regeneração nervosa dos animais. Em conjunto, estes dados fornecem, pela primeira vez, evidências que a LEDT promoveu anti-hipersensibilidade via diminuição dos níveis de citocinas pró-inflamatórias, tanto no nervo ciático como na medula espinal, mas não conseguiu acelerar a regeneração nervosa de camundongos submetidos à lesão por ENC. / Light-emitting diode therapy (LEDT) has been shown to present antinociceptive activity in animal models of acute nociception, as well as stimulate the repair process of the calcaneal tendon in rats. However, LEDT possible antihypersensitivity and regenerative effects in chronic models of neuropathy after nerve injury have not been investigated. To that purpose, mice were submitted to the sciatic nerve crush model (SNC). After seven days, LEDT (950 nm, 80 mW/cm2, 2.5 J, every 24 hrs for 15 days) was irradiated on the crush site (local group) or on the medial aspect of the right hind leg (distal group). The results obtained demonstrate that LEDT when irradiated on both local and distal sites effectively reduced mechanical hypersensitivity induced by the SNC injury in comparison to control group. On the other hand, only in distal group LEDT was able to inhibit cold hypersensitivity induced by SNC. Furthermore, LEDT, in distal group, decreased the levels of TNF-? And IL1-? in the spinal cord; and in local group, decreased the level of TNF-? in the spinal cord and sciatic nerve after SNC. Lastly, chronic LEDT neither accelerate motor functional recovery, nor morphological nerve regeneration after SNC. Taken together these data provide, for the first time, evidence that LEDT promoted antihypersensitivity effect via decrease of pro-inflammatory cytokines levels, both in the sciatic nerve and the spinal cord, but failed to accelerate nerve regeneration of mice submitted to the SNC injury.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T17:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 293142.pdf: 853789 bytes, checksum: d4dcd865400aacbf3ecc8bc1b9e46119 (MD5) / As condições de alojamento são importantes determinantes do comportamento animal. Seu impacto sobre o comportamento depende do comportamento de interesse, da espécie, da linhagem e da idade dos animais avaliados. No presente estudo, camundongos Swiss machos criados a partir do desmame até 8 semanas em isolamento social (IS8), ambiente enriquecido (AE8) ou em ambiente padrão (P8) e foram avaliados no labirinto em cruz elevado (LCE), teste do campo aberto (TCA) e teste da suspensão pela cauda (TSC). O efeito do alojamento por seis semanas no AE seguido por 2 semanas em IS (AE6IS2) e a condição oposta (IS6AE2) também foram estudadas. As condições de alojamento são conhecidas por afetar a neurogênese e, portanto, a expressão de doublecortina (DCX) no giro denteado do hipocampo (GD) desses camundongos foi avaliada. Os dados mostraram que AE8, IS8 e AE6IS2 reduziram o número de estiramentos corporais no LCE, quando comparados com P8. A exploração no TCA em camundongos AE8 foi semelhante aos P8, indicando que o AE8 não afetou a atividade motora. O comportamento de camundongos no TSC não foi alterado em nenhuma das condições de alojamento, indicando que este teste não foi sensível às mudanças ambientais nesta linhagem. Comparado com P8, o AE8 não afetou o número de células DCX, enquanto o AE6IS, IS8 e IS6AE2 diminuíram este número. Em conjunto, nossos dados sugerem que o comportamento dos camundongos Swiss adultos no LCE e TCA foi afetado por mudanças ambientais, mas que essas mudanças parecem ser independentes da neurogênese. Adicionalmente, o resultado das diferentes condições de alojamento, uma semana antes dos testes comportamentais (período de habituação frequente nos laboratórios) indica que o enriquecimento e o isolamento alteram o efeito do diazepam no LCE e nas convulsões induzidas por PTZ. Além disso, o enriquecimento parece melhorar a memória de longa duração. As condições de alojamento não alteraram os resultados no teste do nado forçado ou na suspensão pela cauda, bem como no efeito da imipramina. A condição de alojamento, padrão ou enriquecida, mas não o isolamento, poderia ser utilizada para a criação dos animais que forem testados no LCE, TCA ou TSC. Em outros testes comportamentais, ou que envolvam a neurogênese, seria bom fazer uma padronização e o isolamento social deve ser evitado. Esses resultados são específicos para camundongos Swiss, linhagem mais usada em testes comportamentais e de neurogênese.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T08:01:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T20:48:52Z : No. of bitstreams: 1 289252.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Muitos estudos têm demonstrado os efeitos analgésicos dos agonistas canabinoides em diferentes estudos pré-clinicos e clínicos de dor crônica e inflamatória. Dentre os modelos de dor crônica, a avulsão do plexo braquial (APB) é caracterizada por um rápido estabelecimento da resposta dolorosa, que pode ser observada por várias semanas e meses após a lesão. No presente estudo foi avaliada a ação antinociceptiva de diferentes agonistas canabinoides na hiperalgesia mecânica induzida pela APB no 5º e 30º dias após o procedimento cirúrgico, a fim de avaliar a relação dos canabinoides com os processos iniciais e/ou tardios da neuropatologia associada a APB. Os resultados do presente trabalho demonstram que o ACEA, agonista seletivo para o receptor canabinóide 1 (CB1), o JWH-015, agonista seletivo para o receptor canabinóide 2 (CB2), e o WIN 55,212-2, agonista não-seletivo para os receptores CB1/CB2, não alteraram a hiperalgesia mecânica induzida pela APB quando administrados localmente pela via intraplantar (i.pl.). Por outro lado, o tratamento sistêmico intraperitoneal (i.p.) reduziu significativamente a resposta nociceptiva no 5º e 30º dias após a APB, com uma maior inibição produzida pelo agonista não-seletivo, WIN 55,212-2. A fim de verificar o envolvimento das vias espinhais e supraespinhais na analgesia produzida pelos agonistas canabinóides no modelo de APB, foram avaliados os tratamentos com os agonistas canabinoides pela via intratecal (espinhal) e intracerebroventricular (supraespinhal). Nesse contexto, a administração dos agonistas canabinoides em ambas as vias produziu inibição significativa da resposta nociceptiva mecânica induzida pela APB, principalmente quando observada no 30º dia após a cirurgia. A atividade antinociceptiva produzida pela administração dos agonistas canabinoides pode estar associada com o aumento dos níveis de RNA mensageiro e da expressão dos receptores canabinoides no gânglio da raiz dorsal e medula espinhal, no 5º e 30º dias após a cirurgia, além do aumento significativo de ambos os receptores no córtex cerebral no 30º dia. Além disso, foi observado um aumento na ativação da microglia e astrócitos no 5º e 30º dias na medula espinhal. Ademais, este estudo sugere que a analgesia produzida pelos agonistas canabinoides ocorre de forma dependente com a inibição de MAP-quinases, como a p-JNK e p-p38, as quais se encontram aumentadas na medula espinhal no 30º dia após a APB. Por outro lado observou-se um aumento na expressão dos fatores de transcrição, CREB no 30º dia e da subunidade p65 NF-?B no 5º e 30º dias, na medula espinhal após a APB. Em contrapartida, o tratamento com o agonista não-seletivo para os receptores canabinoides não foi capaz de reverter este efeito. Em conjunto, os resultados do presente estudo demonstram o efeito antinociceptivo dos agonistas canabinoides no modelo de dor neuropática induzido pela APB e sugere seu potencial terapêutico para o tratamento de dores crônicas, especialmente lesões do plexo braquial.