Autonomic nervous system activity is related to body weight regulation. Based on the MONA LISA hypothesis it has been suggested that most obese subjects and animals have low sympathetic nervous system activity. The aim of this study was to investigate whether there are differences in autonomic nervous system activity between lines of chickens selected for either high (HWS) or low body weight (LWS). In Exp. 1, various pharmacological agents were injected intravenously, and the changes in blood pressure (BP) and heart rate (HR) of both HWS and LWS chickens were compared. The results showed that the HWS birds had a greater increase in BP and HR than the LWS following injection of atropine, a muscarinic receptor blocker, and LWS birds had a greater decrease in BP and HR to propranolol, a beta- adrenergic receptor blocker than the HWS birds. These results suggested that HWS chickens have higher parasympathetic tone, whereas LWS chickens have a higher sympathetic nervous system tone regulating the cardiovascular system. HWS and LWS chickens displayed a similar response in BP and HR following injection of the ganglion blocker tetraethylammonium chloride. These results suggest that there is no significant difference in the central autonomic nervous system in the cardiovascular regulation between HWS and LWS together. Since there does not appear to be any differences in the activity of the autonomic nervous system activity at the level of the central nervous system, these findings imply that the difference in response to atropine and propranolol could be caused by differences in adrenal activity. The ratio of heart rate and blood pressure after the injection of phenylephrine showed significant difference between these two lines of birds, but not when phenylephrine was injected following atropine. This result indicated that HWS are more dependent on the parasympathetic nervous system to regulate the baroreceptor reflex. The percentage of adrenal and sympathetic impact on the regulation of heart rate showed that LWS females required greater adrenal activity than the other birds. In Exp. 2, the body weight and food intake responses of HWS and LWS chickens to ip injections of reserpine were compared. Reserpine caused a transitory decrease in food intake and body weight in both lines of birds. However HWS chickens recovered more slowly from the depression caused by reserpine than the LWS chickens. This could be due to lower sympathetic nervous system activity. In conclusion, it appears that HWS may have lower sympathetic activity than LWS. Combining the results of both experiments, it appears that the HWS birds have lower sympathetic and higher parasympathetic activity. Furthermore central nervous system autonomic activity in BP and HR regulation is not different between HWS and LWS, but the activity of the adrenal gland may be different between these two lines of birds. / Master of Science

Tyrimų tikslas – išsiaiškinti DVAsiurblių aktyvumą dar neištirtose E. typographi bakterijose, esančiose žievėgraužio tipografo žarnyno mikrofloroje, jas veikiant eterinių aliejų sudedamąją dalimimircenu (MC). Tyrimai atlikti VDU Biochemijos katedroje vykdant potenciometrinius universalaus daugiavaisčio atsparumo siurblių substrato TPP+ jonų srautų per ląstelės apvalkalėlį matavimus.E. typographiląsteliųreakcijas į mirceną lyginome su šios medžiagos poveikiu gramneigiamosiomsE. coli ir S. enterica, ir gramteigiamosiomsS. aureus ir B. subtilis ląstelėms. MC poveikįE. typographiląstelėms stebėjome ir lyginome su pokyčiais, paveikus jas rezerpinu (RZ) ir RND šeimos siurblių slopikliufenilalanil-arginil-β-naftilamidu(PAβN).Tyrėme laukinio tipo ir mutantines E. coliirS. entericaląsteles, o taip pat ląsteles su pralaidinta išorine membrana bei pažeistais DVA siurbliais. Lygindami E. typographiląsteles su gramteigiamosiomis ląstelėmis, išsiaiškinome, kadPAβN panašiai slopina TPP+ kaupimąsi S. aureus, B. subtilis ir E. typographi ląstelėse, bet gramteigiamosioms ląstelėms reikia didesnės MC koncentracijos iki pilnos ląstelių plazminės membranos depoliarizacijos. Alkaloidas rezerpinas EDTA dorotose E. typographi ląstelėse skatino substrato TPP+ jonų sugertį, o ląstelėse su intaktine išorine membrana depoliarizavo plazminę membraną. / The aim of the study was to determine activity of MDR pumps in yet uninvestigated E. typography cells discovered in bark beetle gut microflora. The cells were exposed to myrcene anintegral part essential oils. The Investigations were carried out at department of Biochemistry of VMU using potentiometric analysis of a flow through the cell envelope of an universal substrate of multidrug resistant pumps substrate TPP+ions. Reactions of E. typography cells to myrcene were compared with effects of this compound on Gram-negative E. coli and S. entericaas well as Gram-positive S. aureus and B. subtiliscells. Effects of myrcene on E. typography cell were compared with the cell responses to alkaloid reserpine (RZ) and RND-type efflux pump inhibitor phenylalanyl – arginine – β – naphthylamide ( PAβN ). We investigated also wild type and mutant E. coli and S. enterica cells, including the cells with EDTA-permeabilized outer membrane. Comparing E. typographycells with Gram-positive bacteria we found that inhibition of S. aureus, B. subtilis and E. typography pumpsusing PAβN was similar, but Gram-positive bacteria required higher concentrations of MC to depolarize the cells. Alkaloid reserpine stimulated the accumulation of TPP+ions by EDTA-treated E. typographycells but in the case of cells with the intact outer membrane this inhibitor depolarized the cells.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Regular practice of physical activity promotes beneficial effects to the body. However, excessive duration and intensity of exercise may surpass individual tolerance to exercise, generating oxidative stress (OS). Studies have shown these effects in various organs, such as the heart and muscles, but little is known about their action and mechanisms in the brain. Various neurological and neurodegenerative diseases are associated with OS and neurotoxicity. Considering these aspects, the first objective of this study was to determine the influence of chronic moderate exercise in an OS model induced by reserpine in rats. The animals were submitted to daily sessions of swimming, with a gradual increase in the length of training. After eight weeks, the animals received two injections of reserpine or control solutions (1 mg/kg-sc), alternately. A behavioral evaluation was performed, after which the rats were euthanized and the striatum was dissected for enzymatic and biochemical assays. Reserpine increased the vacuous chewing movements frequency (VCM) and facial twitching (FT), as well as catalase activity, but decreased reduced glutathione levels (GSH). Exercise partially prevented FT, and partially recovered GSH levels, but did not modify the effects on catalase and VCM. There was a positive correlation between catalase activity and orofacial dyskinesia (OD) and a negative correlation between GSH and OD. The second objective of this study was to evaluate the effects of an intense physical activity in the same model of OS. Rats were submitted to eleven weeks of swimming (1 h/day), where each rat s load was increased according to its body weight until reaching 7% of its weight. Behavioral evaluations were performed before euthanasia and the striatum was then dissected for assays. The effectiveness of the training was confirmed through reduced levels of serum lactate and cardiac hypertrophy, observed in exercised animals. Intense exercise reduced the locomotor index and exploratory activity of the animals, demonstrating the development of emotional stress. In the presence of reserpine, exercise increased lipid peroxidation (TBARS) and caused an increase in catalase activity, which were positively correlated with each other. Based on the results, it was concluded that chronic physical activity of moderate intensity improved the antioxidant defenses in movement disorders associated with cerebral OS. On the other hand, excessive exercise caused negative emotional disorders and, in the presence of another aggressor agent, modified brain antioxidant capacity, which possibly could aggravate cases of neurological and/or neurodegenerative diseases associated with oxidative processes. / A atividade física praticada de maneira regular promove adaptações benéficas ao organismo, enquanto a inadequação do tempo e intensidade pode exceder a tolerância individual ao exercício gerando estresse oxidativo (EO). Estudos mostram esses efeitos em diversos órgãos como, por exemplo, coração e músculos, mas pouco se conhece sobre sua ação e mecanismos em nível cerebral. Diversas doenças neurológicas e neurodegenerativas estão associadas ao EO e neurotoxicidade. Considerando esses aspectos, o primeiro objetivo desse estudo foi determinar a influência do exercício crônico moderado em modelo de EO induzido por reserpina em ratos. Os animais foram submetidos a sessões diárias de natação com aumento gradual no tempo de treinamento e, após oito semanas, receberam duas doses de solução de reserpina ou controle (1 mg/kg-sc) em dias alternados. Fez-se avaliação comportamental, eutanásia dos animais e retirada da região estriatal do cérebro para determinação enzimática e bioquímica. A reserpina aumentou a freqüência dos movimentos de mascar vazio (MMV) e o tempo de tremor facial (TF); aumentou a atividade da catalase e diminui os níveis de glutationa reduzida (GSH). O exercício preveniu parcialmente o TF e houve recuperação parcial nos níveis de GSH, mas não modificou os efeitos sobre a catalase e MMV. Foi observada uma correlação positiva entre a atividade da catalase e o desenvolvimento de discinesia orofacial (DO), e uma correlação negativa entre GSH e DO. O segundo objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos de uma atividade física intensa sobre este mesmo modelo de EO. Os animais foram submetidos a onze semanas de natação (1 h/dia) com aumento gradual na carga de treinamento até que essa atingisse 7% de seu peso corporal. Realizaram-se as avaliações de comportamento, eutanásia e retirada do estriado para análises. A efetividade do treinamento foi confirmada através dos níveis diminuídos de lactato sérico e do desenvolvimento de hipertrofia cardíaca, observados nos animais exercitados. O exercício intenso reduziu a atividade locomotora e exploratória dos animais, demonstrando desenvolvimento de estresse emocional. Na presença de reserpina, o exercício elevou a peroxidação lipídica (TBARS) e provocou aumento na atividade da catalase, cujos parâmetros apresentaram correlação positiva. Com estes estudos se concluiu que a atividade física crônica de intensidade moderada foi capaz de melhorar as defesas antioxidantes nos distúrbios motores associados ao EO cerebral. Por outro lado, o exercício excessivo provocou alterações emocionais negativas e, quando na presença de um agressor adicional, modificou a capacidade antioxidante do cérebro, o que poderia agravar casos de doenças neurológicas e/ou neurodegenerativas associadas a processos oxidativos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ClarissaLCC_DISSERT.pdf: 1971406 bytes, checksum: 8e8a69b6fc521e4494ca707dfa5a90fe (MD5) Previous issue date: 2013-04-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A doen?a de Parkinson (DP) ? uma doen?a cr?nica e progressiva que acomete principalmente os neur?nios dopamin?rgicos da subst?ncia negra parte compacta (SNpc) e ? caracterizada pela presen?a de sintomas motores , altera??es cognitivas e depress?o. Estudos com modelos animais da DP permitem ampliar o conhecimento dos mecanismos neuropatol?gicos e bioqu?micos e auxiliar no desenvolvimento de novas abordagens terap?uticas. A estimula??o ambiental ? uma estrat?gia neuroprotetora em diferentes modelos animais de dano neurodegenerativo, inclusive na DP. Os estudos realizados at? o momento priorizam as repercuss?es da estimula??o ambiental sobre os aspectos motores e em modelos farmacol?gicos agudos desta patologia. O presente estudo teve como objetivo avaliar as repercuss?es da exposi??o ao ambiente enriquecido nos aspectos motores, cognitivos e neuronais (n?veis de tirosina hidroxilase (TH) e fator neurotr?fico derivado do enc?falo (BDNF)) no modelo progressivo da DP pela administra??o repetida de reserpina (RES) em camundongos. Foram utilizados 76 camundongos machos tratados repetidamente com ve?culo ou 0,1 mg/kg de RES (s.c), divididos em duas condi??es de alojamento: padr?o e ambiente enriquecido. Nos animais mantidos na condi??o padr?o, o tratamento com RES foi capaz de provocar altera??es motoras (teste de catalepsia, atividade motora no campo aberto e movimentos orais) e altera??es cognitivas nos teste de reconhecimento do objeto novo (RON) e na tarefa da esquiva discriminativa no labirinto. Quando iniciada antecedendo o tratamento (mas n?o quando iniciada concomitantemente), a estimula??o ambiental retardou o aparecimento dos d?ficits motores avaliados pela catalepsia e facilitou a recupera??o destes d?ficits ap?s o final do tratamento. Al?m disso, a estimula??o ambiental preveniu o aparecimento do d?ficit cognitivo no teste de RON. Na avalia??o histoqu?mica, o tratamento com RES reduziu o n?mero de c?lulas positivas para TH na SNpc e em VTA dos animais eutanasiados ao final das inje??es. Contudo, 30 dias ap?s o final do tratamento esse d?ficit foi revertido. Apesar da ANOVA ter apontado efeito do ambiente neste par?metro, essa diferen?a n?o foi detectada pelo teste post hoc. O tratamento com RES reduziu os n?veis de BDNF no estriado e na regi?o CA3 do hipocampo e a exposi??o ao ambiente enriquecido impediu esse efeito no estriado. Desta forma, o protocolo de estimula??o ambiental utilizado no presente estudo, quando iniciado previamente ao tratamento, foi eficiente em retardar o aparecimento dos d?ficits motores e acelerar a recupera??o destes, al?m de prevenir o d?ficit de mem?ria de curto prazo e evitar a redu??o dos n?veis de BDNF. Esses resultados corroboram estudos pr?vios sugerindo que altera??es pl?sticas cerebrais induzidas pelo enriquecimento ambiental promovem efeitos ben?ficos sobre a progress?o de doen?as neurodegenerativas

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Parkinson’s disease (PD) is a neurodegenerative disease characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons in the Substantia Nigra pars compact (SNpc) with consequent depletion of dopamine in the striatum, which gives rise to characteristic motor symptoms of PD. Although its etiology of is unknown, several studies have been suggested that oxidative stress and inflammation play a critical function in the physiopathology of PD and antioxidant and ani-inflammatory agents could be helpful to slown down the dopaminergic neurodegeneration. Thus, many studies have evaluated the potential neuroprotective effect of these agentes, including Carvacrol (CA). CA is a phenolic monoterpene found in essential oils of many aromatic plants and it has a variety of pharmacological effects on Central Nervous System, including antioxidant and anti-inflammatory activities. In this context, the objective of this study was to investigate a possible neuroprotective effect of CA in two rat models of PD. Two experiments were performed: in the experiment I, male Wistar rats were submitted to repeated administration of a low dose (0.1 mg/kg, s.c.) of reserpine (RES) or vehicle of reserpine (VR) and concomitantly treated with CA at doses of 12.5 or 25 mg/kg (i.p.) or vehicle of carvacrol (VC). Across the treatment, the animal motor behavior was evaluated by catalepsy test, open field test and assessment of oral movements. In the experiment II, male Long-Evans rats were pretreated for seven days with CA at doses of 50 or 100 mg/kg (i.p.) or VC, and were then submitted to unilateral injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) or vehicle of 6-OHDA into the medial forebrain bundle (MFB). The animals were treated with CA or VC for three weeks after injection. Thereafter, they were assessed for motor behavioral function by open field, cylinder test, rotarod and amphetamine-induced circling test. In both experiments, upon completion behavioral tests, rats were perfused and theirs brains were subjected for tyrosine hydroxylase (TH) immunohistochemical analysis. In the experiment I, the results showed that the CA treatment, in both doses 12.5 e 25 mg/kg, was able to prevent the catalepsy behavior and the development of vacuous chewing movements induced by RES, however, CA failed to revert the decreased locomotor activity induced by RES in the open field test. In addition, CA in both doses prevented the depletion of TH immunostaining induced by RES in the SNpc and dorsal striatum. In the experiment II, the treatment with CA at dose of 50 mg/kg prevented the motor deficits induced by 6-OHDA injection in the open field test, cylinder test and rotarod, and increased the number of rotations induced by amphetamine. Moreover, CA attenuated the dopaminergic neurons damage in the SNpc and dorsal striatum induced by 6-OHDA injection. Taken together, our results suggest that CA shows neuroprotective effect, preventing or attenuating motor and neurochemical impairments induced by RES and 6-OHDA, so it may be regarded a promising therapeutic candidate for the prevention or treatment of PD. / A Doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa caracterizada por uma degeneração progressiva de neurônios dopaminérgicos da Substância Negra parte compacta (SNpc), o que resulta nas alterações motoras características desta patologia. Embora sua etiologia ainda permaneça desconhecida, vários estudos indicam que o estresse oxidativo e a inflamação exercem uma função crítica na fisiopatologia da DP e agentes antioxidantes e anti-inflamatórios poderiam desacelerar a neurodegeneração dopaminérgica. Assim, tem sido crescente o número de pesquisas relacionadas a investigação do potencial neuroprotetor destes agentes, entre eles, o Carvacrol (CA). O CA é um monoterpeno fenólico encontrado nos óleos essenciais de diversas plantas aromáticas e apresenta uma variedade de atividades farmacológicas sobre o Sistema Nervoso Central, incluindo atividades antioxidante e anti-inflamatória. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi investigar um possível efeito neuroprotetor do CA em ratos submetidos a dois modelos de DP. Foram realizados dois experimentos: no experimento I, ratos Wistar foram submetidos a administração repetida de uma dose baixa (0,1 mg/kg, s.c.) de reserpina (RES) ou veículo da reserpina (VR) e tratados concomitantemente com CA nas doses de 12,5 ou 25 mg/kg (i.p.) ou com o veículo do carvacrol (VC). Ao longo do experimento, os animais tiveram seu comportamento motor avaliado através dos testes de catalepsia, campo aberto e avaliação dos movimentos orais. No experimento II, ratos Long-Evans foram pré-tratados por sete dias com CA nas doses de 50 ou 100 mg/kg (i.p.) ou VC, e então foram submetidos a uma injeção unilateral de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) ou veículo no feixe prosencefálico medial (medial forebrain bundle -MFB). Os animais foram tratados com CA ou VC por três semanas após a injeção de 6-OHDA e após este período tiveram seu comportamento motor avaliado através dos testes do campo aberto, cilindro, rotarod e rotações induzidas por anfetamina. Em ambos os experimentos, ao fim dos testes comportamentais, os animais foram perfundidos e seus cérebros foram processados para imunohistoquímica para tirosina hidroxilase (TH). No experimento I, os resultados mostraram que o CA em ambas as doses (12,5 e 25 mg/kg) preveniu o comportamento de catalepsia e o desenvolvimento de movimentos de mastigação no vácuo induzidos pela RES, porém não reverteu a redução da atividade locomotora causada pela RES no teste do campo aberto. O CA em ambas as doses preveniu a redução da marcação de TH induzida pela RES na SNpc e no estriado dorsal. No experimento II, os resultados mostraram que o CA na dose de 50 mg/kg preveniu os déficits motores induzidos pela injeção de 6-OHDA nos testes do campo aberto, cilindro e rotarod, e aumentou o número de rotações induzidas por anfetamina. Além disso, o CA atenuou o dano provocado pela injeção de 6-OHDA nos neurônios dopaminérgicos da SNpc e estriado dorsal. Os resultados obtidos no presente estudo sugerem que o CA apresenta um efeito neuroprotetor, prevenindo ou atenuando as alterações motoras e neuroquímicas induzidas pela RES e 6-OHDA. Desta forma, o CA pode ser considerado um candidato terapêutico promissor para a prevenção ou tratamento da DP.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Abnormal movements are clinical symptoms present in neurodegenerative diseases, such Parkinsonism , as well as Tardive dyskinesia. It is thought that unbalance in monoamine levels with their consequent metabolism could be involved in the etiology of these abnormal movements. However, until this moment there is not efficacious treatment with low side effects for these conditions. In this context, Hypericum perforatum (H. perforatum), popularly known as St. John s Wort, is a plant largely used as antidepressant and presenting high amount of polyphenol constituents. Its antidepressant mechanism seems to involve the increase of monoamines and monoaminoxidase inhibition. Here, we evaluated the effect of H. perforatum on different models of abnormal movements in rats, either using fluphenazine or reserpine. It were quantified the number of vacuous chewing movements (VCMs) and locomotor activity (number or rearings and crossings) in both models. In experiment 1, rats received a single administration of fluphenazine enantate (25 mg/Kg, i.m.) and/or H. perforatum (300 mg/Kg, in place of drinking water) during 7 days. Fluphenazine treatment increased VCMs and decreased the locomotor activity after 7 days of treatment. However, H. perforatum did not alter either the number of VCMs or the locomotor activity (represented by number of crossing and rearing in the open field test) in rats. In experiment 2, rats received reserpine administration once a day during 3 days (0.5 mg/Kg, s.c.) and/or H. perforatum (300 mg/Kg, in place of drinking water) during 16 days. Reserpine treatment increased VCMs and decreased the locomotor activity. H. perforatum did not alter the number of VCMs or the number of rearing. However, H. perforatum co-treatment could avoid the effect of reserpine on number of crossings. In conclusion, H. perforatum did not seem to be efficacious to protect against orofacial movements induced by fluphenazine or reserpine in rats. / As desordens motoras são sintomas de doenças neurodegenerativas bem como podem estar associadas ao tratamento com antipsicóticos. Cita-se como exemplo destas desordens, sintomas da Doença de Parkinson (DP) e a Discinesia Tardia (DT), respectivamente. O desequilíbrio cerebral nos níveis de monoaminas e, consequentemente, seu metabolismo tem sido relacionados ao desenvolvimento dos movimentos anormais que aparecem nas desordens motoras, tendo em vista que os circuitos dopaminérgicos estão envolvidos na gênese da DP e da DT. No entanto, ainda não existem tratamentos eficazes e com poucos efeitos colaterais para tais condições. A Hypericum perforatum (H. perforatum), popularmente conhecido como Erva de São João, consiste numa planta amplamente utilizada como antidepressiva e que possui uma grande quantidade de compostos fenólicos, cujo mecanismo para esta atividade está relacionado à inibição da monoamina oxidade (MAO) e da recaptação de monoaminas cerebrais. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do H. perforatum em modelos de desordem motora induzida por flufenazina ou reserpina em ratos. Foram quantificados os movimentos de mascar no vazio (MMV) e atividade locomotora (cruzamentos e levantadas observados no teste de campo aberto) em ambos os modelos. No experimento 1, os ratos receberam uma única administração de enantato de flufenazina (25 mg/Kg, i.m.) e ou H. perforatum (300 mg/Kg, no lugar da água de beber) durante 7 dias. O tratamento com flufenazina aumentou o número de MMVs e diminuiu a atividade locomotora em ratos após 7 dias de tratamento. No entanto, o tratamento com H. perforatum não protegeu das alterações comportamentais causadas pelo tratamento com flufenazina. No experimento 2, os ratos receberam água ou H. perforatum (300 mg/Kg, no lugar da água de beber) durante 16 dias. A partir do dia 9 de tratamento os animais receberam uma administração diária de reserpina (0,5 mg/Kg, s.c.) ou veículo durante 3 dias com intervalo de 48 horas. A reserpina aumentou o número MMVs e diminuiu a atividade locomotora em campo aberto. O prétratamento com H. perforatum não alterou o efeito da reserpina sobre o número de MMVs e levantadas. Porém, o pré-tratamento com H. perforatum preveniu o efeito da reserpina sobre número de cruzamentos. Desta forma, podemos concluir que o H. perforatum não apresentou efeito benéfico sobre os movimentos orofaciais induzidos por flufenazina ou reserpina em ratos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Chronic treatment of psychotic disorders is associated with adverse effects that affect motor function. Movement disorders include Parkinsonism, akathisia, dystonia and tardive dyskinesia. Magnesium (Mg) is an essential mineral for various physiological functions in the body and its supplementation is used in several diseases. The purpose of this study was investigate the effect of Mg supplementation on the prevention and reversal of orofacial dyskinesia (OD), designated as experiment 1 and 2, respectively, as well as the effect on oxidative stress parameters. In both experiments, male Wistar adult rats were used. In experiment 1, rats were randomly divided into two groups both supplemented with oral solution of magnesium aspartate (40 mg/Kg/mL) or deionized water. After 28 days of supplementation, half of each experimental group was treated with a reserpine solution (0.7 mg/kg/ml, sc) (Mg + R and R groups) or vehicle (C and Mg groups) for 3 days (every other day). One day (24 hours) after the last administration of R/vehicle, all animals were subjected to OD and catalepsy time behavioral assessments. In the experiment 2 rats were randomly divided into two groups and treated with a solution of reserpine (0.7 mg / kg / ml, sc) (R groups) or vehicle (Group C) for 3 days (every other day). Twenty-four hours after the last administration of R/vehicle, the development of OD was quantified. One-half of each experimental group was supplemented immediately once a day (by gavage) with magnesium aspartate (40 mg / kg / ml) (Mg, and groups R + Mg) or deionized water (groups C and R). The OD was measured during subsequent days (every 48 hours). Mg supplementation was maintained throughout the time of behavioral assessment (10 consecutive days). After behavioral evaluations, all animals were euthanized by exsanguination. Blood was drawn for analysis of erythrocytes lipid peroxidation (LP). The brains were immediately dissected for separating cortex, striatum and substantia nigra for determining reactive species (RS) and protein carbonyl (PC). The results showed that Mg supplementation before reserpine administration was sufficient to prevent movement disorder observed in the vacuous chewing movement frequency (VCM) and catalepsy time and also was able to prevent the generation of RS and PC, in both the cortex and the substantia nigra regions, also preventing LP in the erythrocytes. Supplementation of Mg after treatment with reserpine was able to minimize the frequency of VCM and catalepsy time, reduce the generation of RS and PC levels in both cortex and the corpus striatum regions and also reversing the increasing the level of LP in the erythrocytes. Our results underscore the importance of including alternative therapies through supplementation of essential natural substances, like magnesium, which can prevent or ameliorate motor disturbances, often related to chronic treatment of psychotic disorders that so far have no effective treatment. / O tratamento crônico de distúrbios psicóticos está associado a efeitos adversos que afetam a função motora. Os distúrbios do movimento incluem o Parkinsonismo, acatisia, distonias e também discinesia tardia. O magnésio (Mg) é um mineral essencial para diversas funções fisiológicas no organismo e sua suplementação tem sido empregada em diversas doenças. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da suplementação de Mg sobre a prevenção e a reversão da discinesia orofacial (DO), designados como experimento 1 e 2, respectivamente, bem como o efeito sobre parâmetros de estresse oxidativo. Em ambos os experimentos foram utilizados ratos machos Wistar adultos. No experimento 1, os ratos foram divididos aleatoriamente em dois grupos, ambos suplementados oralmente com solução de aspartato de magnésio (40 mg/Kg/mL) ou água deionizada. Depois de 28 dias de suplementação, metade de cada grupo experimental foi tratada com uma solução de reserpina (0,7 mg/kg/mL; sc) (R e Mg + R grupos) ou veículo (C e Mg grupos) durante 3 dias (em dias alternados). Um dia (24 horas) após a última administração de R / veículo, todos os animais foram submetidos a avaliações comportamentais de DO, através da quantificação de movimentos de mascar no vazio (MMV), e tempo de catalepsia. No experimento 2 os ratos foram divididos aleatoriamente em dois grupos e tratados com solução de reserpina (0,7 mg/kg/mL; sc) (grupos R) ou veículo (grupo C) durante 3 dias (em dias alternados). Vinte e quatro horas após a última administração de R / veículo, o desenvolvimento de DO foi quantificada. Metade de cada grupo experimental foi suplementado imediatamente, uma vez por dia (por gavagem) com aspartato de magnésio (40 mg/kg/mL) (grupos Mg e R + Mg) ou água desionizada (grupos C e R). A DO foi quantificada durante os dias subsequentes (cada 48h). A suplementação de Mg foi mantida durante todo o tempo de avaliação comportamental (10 dias consecutivos). Após as avaliações comportamentais todos os animais foram eutanasiados por exsangüinação. O sangue foi retirado para análise dos níveis de lipoperoxidação (LP) eritrocitária. Os cérebros foram imediatamente dissecados para a separação da região do córtex, corpo estriado e substantia nigra para a determinação de espécies reativas (ER) e de proteína carbonil (PC). Os resultados mostraram que a suplementação de Mg antes da administração da reserpina foi suficiente para prevenir os distúrbios do movimento, observados pela frequência de MMV e tempo de catalepsia; bem como foi capaz de evitar a geração de ER e PC, tanto na região do córtex como na substantia nigra, também impedindo a LP nos eritrócitos. A suplementação de Mg após o tratamento com reserpina foi capaz de minimizar a frequência de MMV e o tempo de catalepsia, reduzir a geração de ER e os níveis de PC nas regiões do córtex e do corpo estriado, revertendo também o aumento do nível de LP nos eritrócitos. Nossos resultados ressaltam a importância da inclusão de terapias alternativas através da suplementação de substancias naturais essenciais, como o magnésio, as quais podem prevenir ou atenuar distúrbios motores, frequentemente relacionados ao tratamento crônico de distúrbios psicóticos que até o momento não dispõe de um tratamento eficaz.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Parkinson´s disease (PD) is a common neurodegenerative disorder of movement, which affects 1% of the population over 65 years and 4% to 5% of the population over 75 years. Currently, it is known that the disease is not only characterized by motor abnormalities, but also by a set of non-motor abnormalities that precede perhaps over several years, in preclinical phase of the disease. Studies in the premotor phase of PD are important for the understanding of when and where the disease begins to develop and how it evolves in the early stages. Although still incipient, some studies have pointed to the presence of sensory nociceptive and auditory disorders in PD. Using an animal model of PD that takes into account the progressive nature, allows a better understanding of the relationship between the pathophysiological aspects and non-motor abnormalities of the disease and enables the exploration of temporal manifestation of these changes. The aim of this study was to evaluate the nociceptive, motor and hearing functions of Wistar rats submitted to progressive model of parkinsonism induced by low and repeated doses of reserpine (RES). In the first stage, 19 Wistar rats were used, divided into two groups (n = 9/10 per group): G1: RES (0.1 mg / kg sc) and G2: CTR (RES vehicle). The animals were subjected daily to catalepsy test and the nociceptive von Frey electronic test and received injections every 48 hours for 20 days. The grip strength test was performed on days 9, 12, 14 and 17. In the second stage, the animals were divided into two groups (n = 10/11 per group) G1: RES (0, 1 mg / kg sc) and G2: CTR (RES vehicle). The catalepsy test was performed daily and the injections were made every 48 hours. On day 8, the animals were sedated to perform the hearing test of otoacoustic emissions by distortion product (DPOAE). On day 10, the nociceptive formalin test was performed, and 60 minutes later, each animal was anesthetized, perfused and their brains removed for subsequent immunohistochemical analysis for tyrosine hydroxylase (TH) and c-FOS. Repeated treatment with RES induced progressive motor abnormalities evidenced by catalepsy test from the 16th day. Likewise, induced changes in the nociceptive response of rats evidenced in electronic von Frey test and the formalin test, which occurred on the 10th day, i.e, before the motor changes. Muscle strength as measured by grip strength test, did not change with treatment. Changes in the auditory function were observed on the 8th day of treatment. Neurochemically on the 10th day, repeated treatment with the RES induced a decrease in the number of TH+ cells in the substantia nigra pars compacta (SNpc) and the ventral tegmental area (VTA) and not changed TH levels in the striatum. Regarding the immunostaining for c-FOS, noxious stimulation caused an increase in the number of cells c- FOS+ in the dorsal raphe nucleus (NDR), periaqueductal gray (PAG) and rostral ventromedial medulla (SVR) after repeated treatment with the RES, on the 10th day. We conclude that nociceptive changes precede motor changes, while the strength remains unchanged in the progressive model of parkinsonism induced by low and repeated doses of RES, reinforcing the idea that pain is one of the early signs of PD. In addition, animals with parkinsonism were more susceptible to hearing loss due to exposure to environmental noise, suggesting a possible link between the DP and the predisposition to hearing loss, including the premotor phase of the disease. / A doença de Parkinson (DP) é uma desordem neurodegenerativa comum do movimento, que afeta 1% da população acima de 65 anos e 4% a 5% da população acima de 75 anos. Atualmente, sabe-se que a doença não é caracterizada somente pelas alterações motoras, mas também por um conjunto de alterações não motoras, que talvez as precedam por vários anos, em fase pré-clínica da doença. Estudos na fase pré-motora da DP são importantes para o entendimento sobre quando e onde a doença começa a se desenvolver e como ela evolui nos estágios iniciais. Apesar de ainda incipientes, alguns estudos têm apontado para a presença de alterações sensoriais, nociceptivas e auditivas, na DP. O uso de um modelo animal da DP, que leve em conta a sua natureza progressiva, possibilita uma melhor compreensão das relações entre os aspectos fisiopatológicos e as alterações não motoras da doença e viabiliza a exploração temporal da manifestação dessas alterações. O objetivo desse estudo foi avaliar as funções nociceptiva, motora e auditiva de ratos Wistar submetidos ao modelo progressivo de parkinsonismo, induzido por doses baixas e repetidas de reserpina (RES). Na primeira etapa, foram utilizados 19 ratos Wistar, divididos em dois grupos (n=9/10 por grupo): G1: RES (0,1 mg/kg s.c.) e G2: CTR (veículo da RES). Os animais foram submetidos diariamente ao teste motor de catalepsia e ao teste nociceptivo do von Frey eletrônico, e receberam as injeções a cada 48h, durante 20 dias. O teste de força de preensão (grip strenght test) foi realizado nos dias 9, 12, 14 e 17. Na segunda etapa, os animais foram divididos em dois grupos (n=10/11 por grupo): G1: RES (0,1 mg/kg s.c.) e G2: CTR (veículo da RES). O teste de catalepsia foi realizado diariamente e as injeções foram feitas a cada 48h. No dia 8, os animais foram sedados para realização do teste auditivo de otoemissões acústicas por produto de distorção (OEAPD). No dia 10, foi realizado o teste nociceptivo da formalina e, 60 minutos depois, cada animal foi anestesiado, perfundido e seus cérebros extraídos para posterior análise imunohistoquímica para tirosina hidroxilase (TH) e c-FOS. O tratamento repetido com a RES induziu alterações motoras progressivas evidenciadas através do teste de catalepsia a partir do 16º dia. Da mesma forma, ocasionou alterações na resposta nociceptiva dos ratos evidenciadas no teste do von Frey eletrônico e no teste da formalina, as quais ocorreram a partir do 10º dia, ou seja, antes das alterações motoras. A força muscular, avaliada através do teste de força de preensão, não se alterou com o tratamento. Alterações na função auditiva foram observadas no 8º dia de tratamento. Neuroquimicamente, no 10º dia, o tratamento repetido com a RES induziu diminuição na quantidade de células TH+ na substância negra parte compacta (SNpc) e na área tegmental ventral (do inglês ventral tegmental área VTA) e não alterou os níveis de TH no estriado. Quanto à imunomarcação para c-FOS, o estímulo nocivo provocou aumento na quantidade de células c-FOS+ nas regiões do núcleo dorsal da rafe (NDR), substância cinzenta periaquedutal (do inglês, periaqueductal gray PAG) e no bulbo rostro ventromedial (do inglês, rostral ventromedial medulla RVM), após o tratamento repetido com a RES, no 10º dia. Concluímos que alterações nociceptivas precedem as alterações motoras, enquanto a força permanece inalterada no modelo progressivo de parkinsonismo induzido por repetidas e baixas doses de RES, reforçando a ideia de que a dor seja um dos sinais precoces da DP. Além disso, animais com parkinsonismo se mostraram mais suscetíveis às alterações auditivas por exposição aos ruídos ambientais, sugerindo uma possível relação entre a DP e a predisposição à perda de audição, inclusive em fase pré-motora da doença.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4714773 bytes, checksum: e1d2845582482ef401e124b0aa366365 (MD5) Previous issue date: 2008-08-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Leishmaniases are a complex of infectious parasitic diseases caused by species of the Leishmania genus. These diseases comprise a large spectrum of manifestations ranging from localized self-healing cutaneous lesions to fatal visceral infections. In Brazil, the visceral leishmaniasis is caused by Leishmania chagasi which affects ca. 2 million people every year with estimated 90% of cases occurring in Northeastern. Current treatments of leishmaniasis are based on first line pentavalent antimonials or other drugs like amphotericin B and pentamidine. Toxicity of those drugs, their high sideeffects, besides the high cost of treatment, difficulty for administering them and the surge of resistance are their great drawbacks. These aspects have stimulated the search for new leishmanicide agents, like the isolation and identification of natural compounds which could provide new therapeutic models for the treatment of leishmaniases. It was aimed in the present work a comparative evaluation of potentially antileishmania natural isolate compounds and their action on promastigote and amastigote forms of Leishmania chagasi by observing the cycle of this parasite in vitro. Assays were carried out with usnic acid, coumarin, quercetin, and reserpine which showed to have significant antileishmanial activity on promastigote forms of Leishmania chagasi, presenting IC50 equal to 0.0417; 1.07; 0.271 and 1.7 mM, respectively. It was possible in our experimental conditions of standardized cultivation of parasites, to establish their life cycle in vitro, by observing their metamorphosis from promastigote to mastigote. The in vitro life cycle was characterized by parasite cultivations with establishment of: 1) lag (initial), log or exponential and stationary stages of promastigotes; 2) transformation of promastigotes to intracellular amastigotes by infection of murine macrophages; this step favoured the promastigotes infectivity; and 3) amastigote isolation and transformation to promastigotes completing the cycle. Furthermore, it was also possible to establish the in vitro transformation of promastigotes in axenic amastigotes of Leishmania chagasi and its use for the evaluation of antileishmanial activity. In this case, the natural compound usnic acid exhibited antileishmanial activity against axenic amastigote forms with IC50 of 1,16 mM. It was not observed any similarity of IC50 on antileishmanial activity of usnic acid and pentamidine between the axenic amastigote and promastigote forms. This demonstrates that it is important to characterize the action of compound on each life form of the parasites. It is concluded that all assayed compounds carried out in this work had antileishmanial activity on promastigote forms, mainly, and the effect of concentration was different between promastigote, of lower IC50 values, and axenic amastigotes forms, of greater IC50 values. / As leishmanioses constituem-se por um complexo de doenças infectoparasitárias, causadas por parasitas do gênero Leishmania, e apresentam um espectro de sintomas variando de simples lesões cutâneas de cicatrização espontânea a lesões viscerais letais. A leishmaniose visceral, causada pela espécie Leishmania chagasi, no Brasil infecta cerca de duas mil pessoas por ano, sendo cerca de 90% dos casos no Nordeste. Os tratamentos atuais são baseados em compostos antimôniais pentavalentes, ou na utilização de outras drogas como a anfotericina B e a pentamidina. A toxicidade desses agentes, com efeitos colaterais graves, o alto custo dos tratamentos, as dificuldades de administração e o surgimento de resistência são grandes desvantagens, tornando essencial a busca por novos agentes leishmanicidas, como a identificação de compostos naturais isolados, que podem fornecer novos modelos terapêuticos no tratamento das leishmanioses. A presente pesquisa teve como objetivo avaliar comparativamente o potencial antileishmania de compostos naturais isolados sobre as formas promastigotas e amastigotas de Leishmania chagasi, estabelecendo o ciclo do parasito in vitro. Os compostos naturais ensaiados, ácido úsnico, cumarina, quercetina e reserpina apresentaram significativa atividade antileishmania sobre as formas promastigotas de Leishmania chagasi, com IC50 igual a 0,0417; 1,07; 0,271 e 1,7 mM respectivamente. Nas condições de cultivo padronizadas no presente estudo foi possível estabelecer o ciclo de vida in vitro dos parasitos, com passagem destes pelas duas principais formas de vida: promastigotas e amastigotas. O ciclo in vitro foi caracterizado pelo cultivo das promastigotas com estabelecimento: 1) das fases: lag (inicial), log ou exponencial e estacionária dos parasitos; 2) transformação das formas promastigotas em amastigotas intracelulares, pela infecção de macrófagos murinos, o que favoreceu a infectividade das promastigotas; e 3) pelo isolamento das formas amastigotas e transformação destas em promastigotas novamente, completando o ciclo. Além disto, foi também possível estabelecer a transformação in vitro das promastigotas em amastigotas axênicas de L. chagasi e o cultivo das formas axênicas para ensaios de ação antileishmania sobre essa forma. Nesse caso, o composto natural isolado ácido úsnico apresentou atividade antileishmania sobre amastigotas axênicas de L. chagasi, com IC50 igual a 1,16 mM. Não foi observada similaridade da IC50 na atividade antileishmania do ácido úsnico e da pentamidina entre as formas amastigotas axênicas e promastigotas, o que demonstra a importância de caracterizar a ação dos compostos sobre cada forma de vida dos parasitos. Conclui-se que os compostos isolados têm atividade antileishmania sobre as formas promastigotas e o ácido úsnico sobre as formas amastigotas axênicas de L. chagasi.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:36:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ValeriaFS.pdf: 345539 bytes, checksum: 1cbc07c3638d88ff94751b6f8e0b5d61 (MD5) Previous issue date: 2008-04-03 / We have recently verified that the monoamine depleting drug reserpine at doses that do not modify motor function - impairs memory in a rodent model of aversive discrimination. In this study, the effects of reserpine (0.1-0.5 mg/kg) on the performance of rats in object recognition, spatial working memory (spontaneous alternation) and emotional memory (contextual freezing conditioning) tasks were investigated. While object recognition and spontaneous alternation behavior were not affected by reserpine treatment, contextual fear conditioning was impaired. Together with previous studies, these results suggest that mild monoamine depletion would preferentially induce deficits in tasks involved with emotional contexts. Possible relationships with cognitive and emotional processing deficits in Parkinson disease are discussed / Recentemente verificamos que a administra??o de reserpina (que causa deple??o de monoaminas) em doses que n?o afetam a fun??o motora, levou a preju?zos na mem?ria em roedores submetidos ? tarefa de esquiva discriminativa. Em conjunto com dados da literatura, esses resultados sugerem que o efeito amn?sico da reserpina em ratos pode ser uma abordagem adequada para o estudo dos sintomas cognitivos da doen?a de Parkinson. No presente estudo, foram investigados os efeitos da reserpina (0,1 - 0,5 mg/Kg) no desempenho de ratos no reconhecimento de objetos, na mem?ria operacional espacial (alterna??o espont?nea) e na mem?ria emocional (condicionamento contextual de medo). O reconhecimento de objetos e a alterna??o espont?nea n?o foram afetados pelo tratamento com reserpina, ao contr?rio do condicionamento contextual de medo, que foi prejudicado. Associados a estudos pr?vios, esses resultados sugerem que uma deple??o moderada de monoaminas pode eferencialmente induzir d?ficits em tarefas que envolvem contextos emocionais. Dessa forma, ? poss?vel que haja uma rela??o entre d?ficits cognitivos e processamento emocional na doen?a de Parkinson