Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Curso de Pós-Graduação em Ciências Médicas. / Made available in DSpace on 2012-10-18T03:30:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T21:34:54Z : No. of bitstreams: 1 182530.pdf: 4339796 bytes, checksum: 1b7bfab2b30d1aef8cb1aae6ada0dedb (MD5) / A exposição ao látex da borracha natural pode ocasionar reações de hipersensibilidade do tipo I. A prevalência para os trabalhadores da área da saúde está situada na faixa de 2,9% a 22%. Os acadêmicos e profissionais da odontologia também estão expostos ao látex. O objetivo deste estudo foi descrever a ocorrência de hipersensibilidade do tipo I ao látex e os fatores associados à sensibilização ao látex em estudantes do Curso de Odontologia da Universidade do Vale do Itajaí, no período de outubro de 2000 a abril de 2001. Os dados foram coletados por meio da aplicação de um questionário, da realização de testes cutâneos de leitura imediata para o látex e para o Dermatophagoides pteronissynus e da dosagem de IgE total e de IgE específica in vitro. Participaram do estudo 161 alunos, dos quais cinco apresentaram testes cutâneos positivos para o látex. Os fatores associados à sensibilização ao látex com significado estatístico foram os seguintes: história prévia de alergias, presença de teste cutâneo positivo para Dermatophagoides pteronissynus e presença de algum sintoma nas mãos durante ou após o uso de luvas de látex. Não houve associação estatisticamente significativa entre a presença de sintomas sugestivos de alergia ao látex e o teste cutâneo positivo para este. A prevalência de hipersensibilidade do tipo I ao látex encontrada foi de 3,1%.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias da Saude / Made available in DSpace on 2012-10-16T08:22:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T19:26:34Z : No. of bitstreams: 1 101681.pdf: 3505184 bytes, checksum: 09b9d59fd408db6c1062007e4db0090b (MD5) / Objetivo: Analisar a influência do tabagismo materno nos níveis de IgE do sangue do cordão umbilical dos recém nascidos (RN). Local: O estudo desenvolveu-se na Maternidade Escola da UFSC (Maternidade Carmela Dutra) em Florianópolis, Santa Catarina. Sujeitos: Investigou-se 492 RN e respectivos pais e mães. Métodos: Colheu-se sangue do cordão umbilical dos RN para análise laboratorial de imunoglobulina E, pela técnica de enzima imuno ensaio (ABBOTT IgE EIA). As mães foram também questionadas em relação ao uso de tabaco e fatores outros relativos à gravidez. Para analisar a influência das três variáveis independentes (antecedentes alérgicos maternos, paternos e tabagismo materno), utilizamos o modelo de análise de variância múltipla. Resultados: Os RN de mães certamente alérgicas tiveram, em média, níveis de IgE mais elevados que aqueles de mães não alérgicas. Tabagismo materno foi o mais importante fator determinante de elevação dos níveis de IgE no cordão umbilical. Diminuir o número de cigarros/dia, durante a gravidez, não excluiu o efeito do tabaco sobre a IgE no cordão umbilical. Os RN de mães ex-fumantes apresentaram o mesmo comportamento daqueles de mães não fumantes, em relação à IgE. Conclusões: Nossos resultados demonstraram que o tabagismo materno está associado a níveis elevados de IgE no sangue do cordão umbilical. A abolição do tabagismo durante a gravidez, permitiu observar a eliminação deste efeito.

Com o objetivo de avaliar as imunidades humoral e celular de pacientes com endometriose, analisamos as concentrações das Imunoglobulinas ( A, G e M ) e das Interleucinas (1β, 10 e IFγ) no soro e no líquido peritonial. Também analisamos a sua associação com a presença de infertilidade, o nível de dor apresentado e a extensão da endometriose. Foram coletadas amostras de soro e líquido peritonial de 43 pacientes submetidas a laparoscopia, que foram divididas em 4 grupos : 20 pacientes inférteis com endometriose, 9 pacientes inférteis sem endometriose, 4 pacientes férteis com endometriose e 10 pacientes férteis sem endometriose. As concentrações de IL-1β, IL-10 e IFγ foram determinadas pela método de ELISA e as concentrações de IgA, IgG e IgM foram feitas pela técnica de imunodifusão radial. Nas pacientes com endometriose, as concentrações de IgA no soro e do líquido peritonial foram maiores nas pacientes inférteis do que nas férteis. A IgG estava mais elevada nas pacientes sem endometriose do que nas pacientes com endometriose, todas inférteis. Os níveis de interleucina 10 no líquido peritonial de pacientes com endometriose foram mais elevados nas pacientes inférteis do que nas férteis e Interferon γ apresentou concentrações mais baixas no soro e no líquido peritonial de pacientes inférteis sem endometriose. Não houve diferenças significativas entre os grupos para as concentrações de IgM e IL-1β, bem como nas correlações entre os níveis de citocinas e imunoglobulinas entre os diferentes grupos com os graus de endometriose e os níveis de dor nessas pacientes.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-14T15:24:05Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Samara Alves Sá Teles.pdf: 1106383 bytes, checksum: 1bb15f702feb2f073001225aaae2d132 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-29T13:56:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Samara Alves Sá Teles.pdf: 1106383 bytes, checksum: 1bb15f702feb2f073001225aaae2d132 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T13:56:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Samara Alves Sá Teles.pdf: 1106383 bytes, checksum: 1bb15f702feb2f073001225aaae2d132 (MD5) / CAPES / Com o aumento da prevalência de doenças inflamatórias, em especial as alérgicas, a busca por estratégias terapêuticas visando à melhoria de vida dos indivíduos doentes tornou-se um vasto campo de pesquisa. Neste âmbito, o uso de helmintos e derivados que possuem potencial imunomodulatório tem se mostrado eficiente na inibição da inflamação em modelos experimentais dessas doenças. Objetivo: Produzir e analisar, in silico, o antígeno recombinante do Trichuris trichiura homólogo ao fator inibidor de migração de macrófagos (rTt-MIF) e avaliar seu efeito em cultura de células monomorfonucleares de sangue periférico (CMSP) de indivíduos atópicos e não atópicos. Métodos: A análise in silico da proteína foi realizada utilizando diversas ferramentas de bioinformática. A sequência codificadora do antígeno recombinante foi sintetizada e clonada em um plasmídeo de expressão, a partir do qual foi realizada a expressão heteróloga da proteína em sistema procarioto, com posterior purificação por cromatografia de afinidade e determinação do conteúdo proteico e de endotoxina. Após teste cutâneo e dosagem de IgE por ImunoCAP, foram selecionados 12 indivíduos não atópicos e 14 indivíduos atópicos cujo sangue periférico foi coletado para realizar o cultivo de células monomorfonucleares. As células foram cultivadas sob três condições: estímulo do rTt-MIF, meio de cultivo sem estímulo e estimuladas por Pokeweed ou LPS. Após o cultivo, os sobrenadantes foram coletados para realização da dosagem das citocinas IL-10, IFN-γ, IL-5 e IL-17A. Resultados: A molécula caracterizada como estável e solúvel foi produzida, obtida na quantidade de 2,4 mg/mL com 1,9 EU/mL. O rTt-MIF induziu o aumento da produção de IL-10 pelas células dos indivíduos atópicos (P=0,0001) e dos não atópicos (P=0,0005). Em relação às citocinas IFN-γ, IL-5 e IL-17, o rTt-MIF não induziu a produção destas pelas células dos indivíduos atópicos e não atópicos. Conclusão: A ação do rTt-MIF sobre o cultivo de células momonucleares do sangue periférico, de aumentar a produção de IL-10 e não induzir a produção de IFN-γ, IL-5 e IL-17A, mostra o potencial imunomodulador dessa molécula, com possível efeito de reduzir a elevação de eosinófilos, neutrófilos e citocinas inflamatórias. / With the increasing prevalence of inflammatory diseases, in particular allergies, the search for therapeutic strategies aiming to improve life quality of sick individuals has become a vast field of research. In this context, the use of helminths and their derivatives that demonstrate potential immunomodulatory effect has been effective in inhibiting inflammation in experimental models of inflammatory diseases. Objective: To produce and analyze in silico the recombinant antigen from Trichuris trichiura homologous to the macrophage migration inhibitory factor (rTt-MIF) and evaluate its effect on peripheral blood mononuclear cells culture (PBMC) of atopic and non-atopic individuals. Methods: Bioinformatics tools made the analysis in silico. The Tt-MIF codifying sequence was synthesized and cloned into a plasmid, allowing the heterologous expression of the protein in a prokaryotic system, with subsequent purification by affinity chromatography and protein and endotoxin quantifications. After prick test and IgE dosage by ImmunoCAP test, 12 non-atopic individuals and 14 atopic individuals were selected, whose peripheral blood were collected to obtain the mononuclear cells (PBMC) for in vitro culture. Cells were stimulated with the rTt-MIF, as negative control cells were cultivated without stimuli and, as positive control, cells were cultivated with Pokeweed or LPS. After the culture, the supernatants were assayed to quantify IL-10, IFN-γ, IL-5 and IL-17A. Results: The protein characterized as soluble and stable was produced and obtained in the amount of 2,4 mg/mL with 1,9 EU/mL. The rTt-MIF induced a stimulatory effect on IL-10 production by cells from atopic individuals (P=0.0001) and by cells from non-atopic individuals (P=0,0005). The rTt-MIF did not induce the production of IFN-γ, IL-5 and IL-17A by cells from atopic and non-atopic individuals. Conclusion: The effects of rTt-MIF increasing IL-10 production and not inducing the production of IFN-γ, IL-5 and IL-17A on human PBMC cultures are indicative of its immunomodulatory potential, with possible effect of decreasing eosinophilic and neutrophilic presence and inducing immune regulation.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-03-13T17:29:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Flávia.pdf: 1128860 bytes, checksum: 42e7e0ff6c678d2edae8e8d9c7311c94 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-03-23T13:26:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Flávia.pdf: 1128860 bytes, checksum: 42e7e0ff6c678d2edae8e8d9c7311c94 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T13:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Flávia.pdf: 1128860 bytes, checksum: 42e7e0ff6c678d2edae8e8d9c7311c94 (MD5) / FAPESB / Introdução: Têm-se debatido o papel de microrganismos na imunomodulação de doenças alérgicas atópicas cuja prevalência tem aumentado. A Micobactéria emerge, então, como um potencial agente imunomodulador. Objetivo: Identificar os perfis de citocinas induzidos pelo extrato de Mycobacterium bovis e pelo PPD e como elas são induzidas em adolescentes atópicos e não atópicos de Salvador, Bahia. Metodologia: O estudo utilizou amostra de conveniência de 55 indivíduos cujo sangue periférico coletado fora utilizado no cultivo de sangue total. As células foram estimuladas com 5μg do extrato de M. bovis ou 5μg do PPD. Utilizou-se o Multiplex para verificar o perfil de citocinas (IFNγ, IL-10, TNFα, IL-13, IL-5 e IL-17) induzido em 24h. A atopia foi determinada através da presença de IgE acima de 0,7 kU/mL para pelo menos um alérgeno (Blomia tropicalis, Dermatophagoides pteronissinus, Blatella germanica e Periplameta americana). A amostra foi dicotomizada em respondedor e não respondedor com base no limite mínimo de detecção do kit para cada citocina e o teste Exato de Fisher foi aplicado. Resultados: O estímulo com PPD e com extrato induziu mudanças significativas nas frequências de respondedores à IL-5, IL-13 e IL- 17, e à IL-5, IL-13, IL-17 e IFNγ, respectivamente. 97,7% dos indivíduos foram produtores de IL-10 em resposta ao extrato. Os compostos não induziram alterações significativas nas frequências de respondedores entre os grupos de atopia. Conclusão: As dosagens de citocinas serão finalizadas, incluindo-se a do sobrenadante de 120h, permitindo a aplicação de teste estatístico com maior poder para verificação dos efeitos dos compostos utilizados / Introduction: The role of microrganisms in immunomodulation of atopic allergic diseases whose prevalence has increased has been discussed. Mycobacteria emerges as a potential immunomodulatory agent. Objective: Identify the cytokine profile inducede by Mycobacterium bovis extract and PPD and how they are induced in adolescentes atopic and non-atopic from Salvador, Bahia. Methodology: This study used a convenience sample of 55 individuals. Pefipheral blood samples were used in the whole blood culture. The cells where stimulated with 5μg of M. bovis extract or 5μg of PPD. Multiplex was used to verify cytokine profile (IFNγ, IL-10, TNFα, IL-13, IL-5 e IL-17) induced in 24h. Atopy was determined by the presence of IgE above 0.7 kU / mL for at least one allergen (Blomia tropicalis, Dermatophagoides pteronissinus, Blatella germanica e Periplameta americana). The sample was dichotomized into responder and non-responder based on the minimum limit of kit detection for each cytokine and Fisher's Exact Test was applied. Results: The stimulation with PPD and with the extract induced significant changes in the frequency of responders to IL-5, IL- 13 and IL-17, and the frequency of responders to IL-5, IL-13, IL-17 and IFNγ, respectively. 97,7% of subjects were producers of IL-10 in response to the extract. The compounds did not induce significant changes in the frequency of responders between atopy groups. Conclusion: Cytokines dosages will be finalized including the 120h supernatant, allowing the application of statistical analysis with the largest verisimilitude as the power and verify the effects of these compounds used.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-09-28T17:21:18Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Camile Lima de Souza Alves.pdf: 994154 bytes, checksum: 017f16795201593987913483897eddab (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-28T17:21:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Camile Lima de Souza Alves.pdf: 994154 bytes, checksum: 017f16795201593987913483897eddab (MD5) / CAPES; FAPESB; CNPq / A prevalência das doenças alérgicas no Brasil está entre as maiores do mundo. Dentre essas patologias destaca-se a asma como uma das mais importantes. A asma é caracterizada como uma doença inflamatória crônica, associada à hiperresponsividade das vias aéreas, no qual diversos fatores podem interagir e influenciar seu desenvolvimento. Entre os fatores ambientais, os ácaros da poeira doméstica destacam-se como os principais agentes desencadeadores de hipersensibilidade tipo I. Os ácaros mais frequentes na poeira doméstica, em países tropicais são as espécies Dermatophagoides pteronyssinus e Blomia tropicalis (B. tropicalis). Quanto á predisposição genética, os indivíduos são classificados como atópicos e não atópicos, sendo os atópicos aqueles que produzem anticorpos IgE, de forma exagerada, mesmo que a exposição aos alérgenos seja muito baixa, que o torna mais suscetíveis ás doenças alérgicas. Várias pesquisas demonstraram que existem fatores que levam a redução dos sintomas das doenças alérgica, dentre essas, pode-se destacar as infecções helmínticas, devido ao tipo de resposta imune que o hospedeiro produz. Esse efeito protetor depende da espécie do helminto, da idade do indivíduo, fase da infecção e da carga parasitária. Dentre os helmintos estudados observou-se que o Schistosoma mansoni é um dos parasitos encontrados com maior ação protetora contra as doenças alérgicas. Moléculas desse helminto têm sido avaliadas na tentativa de identificar quais estão envolvidas no efeito imunomodulatório do parasito sobre estas enfermidades. Diante disso, o presente estudo tem como objetivo avaliar a capacidade das proteínas recombinantes Sm200, Sm10.3, Sm147730 e Quimera B de S. mansoni, de induzir imunomodulação in vitro, em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos atópicos e não atópicos, estimuladas ou não com extrato de B. tropicalis. Após cultivo das células, seus sobrenadantes foram coletados e ensaiados pela técnica de ELISA sanduíche para determinar a concentração das citocinas IL-10, IL-4, IL-5 e IFN-. Observou-se que as proteínas rSm200 e rS147730 se destacaram por seu potencial imunomodulador, estimulando a produção de IL-10, citocina que tem importante papel na regulação inflamatória. Quando essas proteínas foram associadas ao extrato de B. tropicalis, foi reduzida a proliferação de IL-5, com diferença estatisticamente significativa entre células estimuladas, em indivíduos não atópicos. Além disso, a rSm147730 associada ao extrato de B. tropicalis também estimulou a produção de INF-, citocina que suprime a resposta imune Th2. Como descrito, as proteínas rSm200 e rSm147730 apresentaram atividade imunomodulatória em PBMC de humanos, atópicos e não atópicos. Esses resultados proporcionam, portanto um maior conhecimento da atividade dos antígenos do S. mansoni nas doenças alérgicas, sendo que após os resultados in vitro essas moléculas serão utilizadas para os ensaios in vivo o que futuramente possibilitará o desenvolvimento de arsenais profiláticos no tratamento da asma e das patologias alérgicas.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-07-12T16:54:43Z No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Tiana Figueiredo.pdf: 1325713 bytes, checksum: 63568b1c8914bc029fbb0ecf80e03c2a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-12T16:54:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Tiana Figueiredo.pdf: 1325713 bytes, checksum: 63568b1c8914bc029fbb0ecf80e03c2a (MD5) / FAPESB; RENORBIO / O ácaro de poeira doméstica Blomia tropicalis é encontrado em regiões tropicais e subtropicais da América, Europa e Ásia, sendo um das mais importantes fontes de aeroalérgenos nestas regiões. Este trabalho teve por objetivo o desenvolvimento de um modelo experimental de alergia a B. tropicalis e sua utilização em estudos de imunoprofilaxia. Para isto, quatro linhagens de camundongos foram sensibilizadas e desafiadas com extrato de B. tropicalis (Bt) sendo considerados como marcadores de inflamação pulmonar e de resposta Th2 a elevação do número de leucócitos, da atividade de peroxidase de eosinófilos e de IL-4 no lavado bronqueoalveolar (BAL) e da atividade de peroxidase de eosinófilos no pulmão, bem como elevação de IgE sérica específica para Bt. A linhagem A/J foi considerada a mais sensível a inflamação pulmonar induzida pelo sendo utilizada nas análises subseqüentes. O modelo de alergia experimental ao B. tropicalis foi utilizado então para a investigação do efeito da imunização com adjuvantes em desempenhar papel protetor ao desenvolvimento da alergia experimental. Entre os diversos candidatos a adjuvantes testados destacaram-se a saponina e o CpG emulsionados em montanide ISA 720 por proteger os animais da inflamação pulmonar induzida pela sensibilização com Bt, embora a resposta imune estimulada por esses adjuvantes seja aparentemente mista com produção de citocinas Th1 e Th2. Visando a utilização de um antígeno mais purificado partimos para o fracionamento do Bt por cromatografia líquida de troca iônica. As frações obtidas foram inicialmente analisadas quanto ao papel hipersensibilizante para o ser humano, através de dosagem de IgE específica para cada fração obtida no soro de indivíduos com teste cutâneo positivo para B. tropicalis e em indivíduos controle. A fração que apresentou maior reatividade frente aos soros positivos (74,3%) foi utilizada no modelo murino como agente sensibilizante. Observamos então que a fração do Bt utilizada foi efetiva em promover resposta inflamatória pulmonar em alguns dos critérios analisados, no entanto não foi observada produção de IL-4 no BAL nem IgE específica nos animais. A sensibilização com B. tropicalis induziu em camundongos o desenvolvimento de doença inflamatória pulmonar análoga a asma humana. Oligonucleotídeos CpG e a saponina mostraram-se promissores candidatos a adjuvantes em formulações de vacinas. O fracionamento do extrato de B. tropicalis produziu frações reativas a IgE humana e capazes de promover inflamação pulmonar murina, sendo um bom caminho para a obtenção de antígenos mais purificados. / Salvador

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-09-17T19:23:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Raquel Crisóstomo Lima Verde.pdf: 2317368 bytes, checksum: 9ec788fa9a7fd79189cbb5ee2ca7e2f5 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso(pbarroso@ufba.br) on 2013-09-18T17:40:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Raquel Crisóstomo Lima Verde.pdf: 2317368 bytes, checksum: 9ec788fa9a7fd79189cbb5ee2ca7e2f5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-18T17:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Raquel Crisóstomo Lima Verde.pdf: 2317368 bytes, checksum: 9ec788fa9a7fd79189cbb5ee2ca7e2f5 (MD5) / National Institutes of Health (NIH); Bolsa de Estudo da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / Introdução: A infecção pelo vírus linfotrópico humano de células T do tipo 1 é caracterizada por proliferação de linfócitos e elevada produção espontânea de citocinas do tipo Th1, como IFN- e TNF-α. A atopia é uma disfunção do sistema imunológico na qual há produção exacerbada de citocinas do tipo Th2, principalmente IL-4, IL-5 e IL-13, proliferação de linfócitos B, produção elevada de IgE e eosinofilia. Na literatura, a relação da influência do HTLV-1 na resposta imune do tipo Th2 e na prevalência de atopia não estão completamente esclarecidos. Objetivos: Avaliar se a atopia interfere no desenvolvimento e na gravidade das manifestações neurológicas associadas ao HTLV-1. Comparar a produção espontânea de citocinas em pacientes infectados com HTLV-1 com e sem atopia. Metodologia: Foram realizados um estudo de corte transversal e uma coorte retrospectiva. No primeiro foi determinada a prevalência de atopia em portadores de HTLV-1 e em pacientes com HAM/TSP. Adicionalmente foi comparada a produção espontânea de citocinas entre os indivíduos atópicos e não atópicos de cada grupo. Na coorte retrospectiva foi comparado o desenvolvimento de manifestações neurológicas em indivíduos atópicos e não atópicos. Resultados: Não houve diferença estatística na prevalência de atopia entre portadores de HTLV-1 e pacientes com HAM/TSP (p=0,884). Porém, pacientes com HAM/TSP atópicos tiveram uma maior produção espontânea de IL-5 do que os não atópicos (p=0,008), e apresentaram uma elevada produção de IFN-γ (1724±1201pg/ml). Não houve associação entre a presença de atopia e o desenvolvimento de manifestações neurológicas. Porém, houve associação estatísticamente significante entre a presença de rinite alérgica e o desenvolvimento de sinal de Babinsky (p=0,039) e bexiga hiperativa (p=0,007). Conclusões: Apesar de não haver diferença estatística entre a presença de atopia e o desenvolvimento de manifestações neurológicas ou de formas graves da infecção pelo HTLV-1, foi observado que, não só coexistem respostas Th1 e Th2 exacerbadas nos indivíduos infectados pelo HTLV-1, mas também, a doença alérgica pode interferir no curso clínico da infecção pelo HTLV-1. / Salvador

Submitted by Tatiana Oliveira (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2012-06-05T18:34:39Z No. of bitstreams: 1 Tatiana Oliveira Fulco.pdf: 6352891 bytes, checksum: 35625276b78761742a718df841963873 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-05T18:34:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiana Oliveira Fulco.pdf: 6352891 bytes, checksum: 35625276b78761742a718df841963873 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / Estudos anteriores de nosso grupo demonstraram que o Mycobacterium leprae induz apoptose de monócitos humanos por uma via dependente de proteasoma. No presente trabalho nós demonstramos que o M. leprae induz a produção de TNFa e induz apoptose de monócitos por uma via dependente de NF-?B. A talidomida, utilizada no tratamento do Eritema Nodoso Hansênico, possui atividade anti-TNF por um mecanismo ainda não completamente elucidado. Nós demonstramos que a Talidomida suprime a produção de TNF por uma via dependente de p38 MAPK e NF-?B. O papel da remoção de células apoptóticas também foi avaliado. Apesar de macrófagos ativados pela via alternativa ou Mf2 possuírem maior capacidade de associação com o M. leprae quando comparados a macrófagos ativados pela via clássica ou Mf1, o estímulo com células apoptóticas levou ao aumento na associação do M. leprae em macrófagos Mf1, mas não Mf2. Esse aumento na associação do M. leprae com macrófagos Mf1 estimulados com células apoptóticas está associado ao aumento da expressão gênica de COX-2 e elevados níveis de PGE2, IL-10 e TGF-ß, com redução dos níveis de IL-6 e IL-15. Em conjunto, tais dados sugerem que na presença de células apoptóticas, macrófagos pró-inflamatórios estimulados com o M. leprae, desviam para um fenótipo antiinflamatório o que pode explicar o estabelecimento da infecção em pacientes com a forma tuberculóide da doença / Previous studies o four group revealed that Mycobacterium. leprae induces apoptosis of human monocytes by a proteasome-dependent pathway. In the present work we demonstrated that M. leprae induces TNFa and apoptosis by a NF-?B-dependent pathway. Thalidomide, drug used in treatment of erithema nodosum leprosum, has been described by its anti-TNFa activity although the mechanism is not fully understood. We demonstrated that thalidomide suppress TNFa production by p38 MAPK and NF-?B – dependent pathways. The role of apoptotic cell clearance was also evaluated. Although macrophages activated by alternative pathway or Mf2 have increased phagocytic activity when compared to macrophages activated by classical pathway or Mf1, apoptotic cell uptake increased the association of M. leprae with Mf1 but not Mf2. The increase in M. leprae association with apoptotic cell stimulated Mf1 is associated with the increased COX-2 gene expression and higher levels of PGE2, IL-10 and TGF-ß, with reduced levels of IL-6 and IL-15. Together, these data suggest that in the presence of apoptotic cells, M. leprae stimulated pro-inflammatory macrophages deviates to an anti-inflammatory phenotype that could explain the establishment of M. leprae infection in patients with the tuberculoid form of the disease

Made available in DSpace on 2016-03-08T14:03:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 mariana_gandini_ioc_dout_2014.pdf: 15196987 bytes, checksum: 785cdc40cbdacbdb42278c64af49aee2 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O vírus dengue é um flavivírus causador de síndrome febril hemorrágica, sendo alguns casos graves evidenciados pelo acúmulo de plasma nas cavidades. Sugerese que a intensa replicação viral na fase aguda resultaria na intensa produção de mediadores inflamatórios, levando ao extravasamento plasmático. A imunidade inata é uma importante barreira na limitação da dispersão viral. As células dendríticas plasmacitoides (PDCs) e as células NK são fundamentais durante a fase inicial das infecções por suas características antivirais e citotóxicas contra células infectadas. O fenótipo \201CKiller\201D das PDCs (IKPDCs) resultaria da ativação viral e é caracterizado pela expressão membranar do ligante indutor de apoptose relacionado ao fator de necrose tumoral (TRAIL) e pela produção de interferons do tipo I. As células NK podem ser diretamente ativadas reconhecendo as células alvo ou, indiretamente ativadas pelas citocinas (como os interferons) tornando-se citotóxica, expressando TRAIL membranar. Apesar do papel antiviral, pouco se sabe sobre os mecanismos de ação dessas populações celulares durante a febre do dengue (FD). Nosso objetivo foi estudar o envolvimento das PDCs e células NK ativadas na imunopatologia da FD. Analisando as células de pacientes ex vivo, observamos maior frequência de IKPDCs nos casos brandos de FD, assim como de células NK TRAIL+. Outros marcadores de ativação como o marcador de degranulação CD107a e o receptor de reconhecimento padrão TLR3 foram expressos em maiores níveis nos pacientes comparando aos controles saudáveis As citocinas relacionadas a ativação celular - IFN\03B1, TRAIL solúvel e IL12 - foram correlacionadas com os quadros brandos. Em modelos in vitro, o DENV induziu a transformação das PDCs em IKPDCs, em via dependente dos endossomos e da dose viral. Além disso, as IKPDCs reduziram a detecção de antígenos virais em modelos de cocultura com monócitos humanos infectados, em mecanismo dependente da via dos interferons do tipo I e independente de TRAIL. As células NK foram capazes de expressar TRAIL durante estimulação in vitro tanto estimuladas pelo DENV2 quanto pelo IFN\03B1, sugerindo mecanismos de ativação indireta da população. Assim, observamos que o DENV pode ativar ambas as populações. A relação entre a maior ativação das PDCs e células NK promoveria maior limitação da dispersão viral, contribuindo para diminuir a intensidade da resposta inflamatória. Sugerimos então que a ativação do eixo antiviral PDCs-Células NK contribuiria para proteção dos quadros graves durante a dengue / Dengue virus is a flavivirus that can cause a hemorrhagic febrile syndrome, in which some severe cases are characterized by plasma accumulation in cavities. It is suggested that a high viral burden in the acute phase would lead to an enhanced production of inflammatory mediators, leading to plasma leakage. Innate immunity is an important barrier limiting viral spread. Plasmacytoid dendritic cells (PDCs) and NK cells are main actors in the beginning of infection because of their antiviral and cytotoxic features against infected cells. PDC killer phenotype (IKPDCs) is induced by viral activation and main profile is membrane expression of TNF-related apoptosis-inducer ligand (TRAIL) and type I interferon production. NK cells can be activated directly, by target recognition, or indirectly, by cytokines (like interferons) and become cytotoxic, expressing membrane TRAIL. Despite its antiviral role, the function of those cell populations during dengue fever (DF) is not largely known. Our aim was to study activated PDCs and NK cells involvement in DF immunopathology. DF patients’ cells analysis ex vivo presented higher frequency of IKPDCs and also higher frequency of TRAIL+NK cells in mild DF cases. NK activation markers such as CD107a degranulation marker and pattern recognition receptor TLR3 were upregulated in patients’ cells compared to healthy donors. Cytokines – IFNα, soluble TRAIL, IL12 – related to cell activation were upregulated in mild DF cases. In vitro models show DENV induced transformation of PDCs into IKPDCs, in endosome and viral-dependent pathways. Besides, IKPDCs could reduce viral antigen detection on co-culture models with human infected monocytes, in a type I interferon-dependent, TRAIL-independent mechanism. DENV-stimulated and IFNα-stimulated NK cells were able to express TRAIL in vitro, suggesting an indirect activation of cells. Therefore, we observed DENV-induced activation of both populations studied. A higher activation of PDCs and NK cells would promote limited viral spread, resulting in dimished inflammatory response. Then, we suggest that activation of antiviral axis PDCs-NK cells would promote protection against severity during dengue