Orientadores: Eros Antonio de Almeida, Sandra Cecília Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T06:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_MarianeBarroso_M.pdf: 1684202 bytes, checksum: 4d409617c2303278099fd5ac351f8186 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A doença de Chagas, descoberta por Carlos Chagas em 1909, é uma enfermidade causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, que já teve a via vetorial como sua principal forma de transmissão. Com o controle da transmissão vetorial, a incidência de novos casos diminuiu, propiciando uma mudança nas características da população infectada. Atualmente, a população chagásica no Brasil é constituída, sobretudo, por portadores da forma crônica da doença. Estes indivíduos estão envelhecendo e necessitam de acompanhamento clínico adequado. Os objetivos foram avaliar o perfil clínico, epidemiológico e laboratorial de pacientes idosos portadores da doença de Chagas atendidos pelo Grupo de Estudos em Doença de Chagas do Hospital de Clínicas da Universidade Estadual de Campinas. Na primeira etapa foi realizada entrevista e coleta de amostra de sangue para testes moleculares e sorológicos. Posteriormente, verificaram-se os dados clínicos e os resultados sorológicos nos prontuários médicos. A amostra de sangue foi submetida a uma extração de DNA e amplificação gênica da região nuclear do parasito. Os dados foram tratados estatisticamente pelo programa BioEstat 5.0. Verificou-se que não houve prevalência de um gênero. Houve prevalência de idosos na faixa etária entre 60 e 69 anos e a forma cardíaca como a forma clínica mais comum. A hipertensão arterial foi a comorbidade prevalente, principalmente no gênero feminino. Os fármacos mais utilizados foram os anti-hipertensivos e os diuréticos. A polifarmácia foi detectada em 34% dos idosos. O teste sorológico foi reagente em 95% das amostras. Em 36%das amostras houve amplificação gênica. Conclui-se que os idosos atendidos pelo GEDoCh são idosos jovens, cardiopatas, hipertensos,fazem uso de medicamentos, possuem antecedentes para a doença de Chagas e os testes sorológicos são reagentes em sua maioria / Abstract: Chagas disease, discovered by Carlos Chagas in 1909, is a disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, which already had the track vector as their main mode of transmission. With the control of vector transmission, the incidence of new cases decreased, providing a change in the characteristics of the infected population. Currently, the chagasic population in Brazil is constituted mainly by patients with the chronic form of the disease. These individuals are aging and require appropriate clinical follow-up. The objectives were to evaluate the clinical, epidemiological and laboratory elderly patients with Chagas disease seen by the Study Group on Chagas Disease, Clinical Hospital of University of Campinas. The first step was carried out with an interview and collect blood sample for molecular and serological tests. Later, there were the clinical and serologic findings in medical records. The blood sample was subjected to DNA extraction and amplification of the nuclear region gene of the parasite. The data were treated statistically by BioEstat 5.0. There was no prevalence of gender. There was prevalence of elderly people aged between 60 and 69 years and cardiac form as the most common clinical presentation. Hypertension comorbidity was prevalent, especially in females. The drugs used were antihypertensive and diuretics. Polypharmacy was detected in 34% of the elderly Serologic testing was positive in 95% of the samples. In 36% of the samples was gene amplification. We conclude that the elderly assisted by GEDoCh are younger elderly, cardiac patients, hypertensive use drugs, have antecedents for Chagas disease and serological tests are mostly reactive / Mestrado / Gerontologia / Mestra em Gerontologia

Orientadores : Antonio Carlos Corsini, Marcos Garcia Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T08:29:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ciampi_DeniseBalduino_M.pdf: 1277475 bytes, checksum: d505c7efe9461b32ab939b4f5838dff9 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: Neste trabalho estudamos a presença de anticorpos líticos contra o T. cruzi, cepa Y durante a infecção em camundongos (CBA/J x C57Bl/10)F1 e Biozzi "Bons" e "Maus" respondedores (seleção III) e correlacionamos os títulos dos soros obtidos através da técnica da lise imune mediada pelo complemento humano com os títulos verificados nas reações de imunofluorescência. Nossos resultados nos permitem concluir que: 1 - A resposta humoral para os anticorpos pertencentes à classe IgM foi detectada logo nos primeiros dias após a infecção somente nos camundongos Biozzi "Bons" respondedores. Nos híbridos F1 e nos Biozzi "Maus" respondedores esse anticorpo aparece mais tardiamente. 2 - Para os anticorpos da classe IgG, durante a resposta humoral primária, os camundongos BH foram os que responderam mais rapidamente. Os índices de mortalidade porém foram semelhantes aos dos camundongos Bl. 3 - Durante a resposta secundaria observamos títulos consideravelmente aumentados para os anticorpos da classe IgG, em relação aos títulos obtidos durante a resposta primária para os camundongos F1. Esses valores mostraram-se aumentados tanto para o grupo de animas reinfectados no 42º dia, como para aqueles reinfectados no 97º dia após a primo-infecção. 4 - A titulação dos soros pela técnica da lise imune mediada pelo complemento, indicou que os soros de todas as linhagens de animais testadas possuem anticorpos líticoso. 5 - Camundongos BL apresentaram altas porcentagens de lise em seus soros quando comparados aos F1 e aos BH, principalmente no 20º dia de infecção. 6 - A reinfecção nos camundongos F1 não causou um aumento nos níveis dos anticorpos líticos, portanto não se observou uma resposta secundária, diferentemente do que ocorreu com as reações de imunofluorescência. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Artur Torres Cordeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T07:11:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ranzani_AmericoTavares_M.pdf: 3887425 bytes, checksum: 3ae590890f0f321ec227cb9c0967c6de (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Tripanossomíases são enfermidades associadas à infecção por protozoários do gênero Trypanosoma. Estas doenças são normalmente tratadas com medicamentos de alta toxicidade e baixa eficiência. A pesquisa de novos compostos que atuem de maneira específica contra alvos metabólicos pré-estabelecidos pode levar ao desenvolvimento de fármacos mais eficientes no tratamento destas enfermidades. A enzima glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) é um alvo metabólico validado experimentalmente em Trypanosoma brucei. A G6PD catalisa o primeiro passo da via de síntese de pentoses que supre a célula com ribose-5-fosfato para síntese de bases nitrogenadas e NADPH para biosíntese de lípideos, colesterol e neutralização de espécies reativas de oxigênio. O esteróide desidroepiandrosterona (DHEA) e seus análogos são conhecidos inibidores incompetitivos da enzima humana e recentemente foram caracterizados também como potentes inibidores da G6PD de T. brucei e T. cruzi. Estes esteróides também apresentam efeito citotóxico à forma sanguínea de T. brucei e à forma epimastigota de T. cruzi. Em conjunto, estes resultados sugerem que esteróides análogos do DHEA devam ser explorados como uma nova classe de fármacos antiparasitários. Apesar de já haver estruturas da enzima, o sítio de ligação destes esteróides não é conhecido, informação que ajudaria no desenho racional de novos inibidores. Assim, este projeto teve como objetivo principal a identificação do sítio de inibição por cristalografia. Conseguiu-se estabelecer um protocolo de expressão, purificação e cristalização para a G6PD humana. Testou-se a co-cristalização, seeding e soaking com os esteróides DHEA, epiandrosterona (EA) e 16-bromo-epiandrosterona (16BrEA) com os substratos da enzima, além de outros complexos com frutose-6-fosfato, glucosamina-6-fosfato e NADPH. Na tentativa de diminuir a atividade da enzima para facilitar a cristalização com os substratos e os esteróides, fez-se o mutante D200N, que além de ser menos ativo, também apresentou uma menor inibição pelos esteróides. A enzima humana se apresenta como um equilíbrio de dímero e tetrâmero, não se sabendo a influência destes estados na atividade da enzima. Assim, para favorecer somente um estado oligomérico, foram avaliadas mutações na interface do tetrâmero. A mutação A277C permite a formação de uma ponte dissulfeto com a C294, estabilizando o tetrâmero. A mutação E347A é capaz de desestabilizar o tetrâmero, favorecendo a forma dimérica. Embora não tenha sido possível obter a estrutura da enzima com os esteróides, conseguiu-se pela primeira vez apontar para um resíduo importante para a inibição, o que abre oportunidade para investigações futuras que podem levar à descrição do sítio de inibição / Abstract: Trypanosomiases are infectious diseases caused by protozoan parasites from genus Trypanosoma. Such diseases are currently treated with low effective and highly toxic drugs. The research of novel compounds which inhibits validated metabolic targets might lead to the development of more efficient drugs to such neglected diseases. The enzyme glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) was experimentally validated as a metabolic target in T. brucei bloodstream form. G6PD catalyzes the first step of the pentose phosphate pathway (PPP), which supplies the cell with ribose-5-phosphate for synthesis of nucleotides and NADPH for biosynthesis of lipids, cholesterol and detoxification of reactive oxygen species. The steroid Dehydroepiandrosterone (DHEA) and analogues are known uncompetitive inhibitors of the human G6PD and recently they were also characterized as potent inhibitors of T. brucei and T. cruzi G6PD. It was also demonstrated that these steroids are toxic to cultured T. brucei bloodstream form and T. cruzi epimastigote form. Together these results suggest that DHEA derivatives must be explored as a novel anti-parasite drug class. Although the structure of the enzyme is solved, the binding site of these steroids is unknown, information that would help in the rational design of new inhibitors. So, the main goal of this project was the identification of the inhibition site by crystallography. It was established an expression, purification and crystallization protocol for the human G6PD. It was tried the co-crystallization, seeding and soaking of the steroids DHEA, epiandrosterone (EA) and 16-bromo-epiandrosterone (16BrEA) with the substrates of the enzyme, beyond other complexes with fructose-6-phosphate, glucosamine-6-phosphate and NADPH. Attempting to diminish the enzyme activity to facilitate the crystallization with the substrates and the steroids, it was made the mutant D200N, which not only is less active, but it's also less inhibited by the steroids. The human enzyme is in equilibrium between dimer and tetramer, being unknown the effect of these states to the enzyme activity. This way, to favor one oligomer state, it was assessed mutations at the tetramer interface. The mutation A277C allows the formation of a disulfide bond with the C294, stabilizing the tetramer. The mutation E347A is able to destabilize the tetramer, favoring the dimer. Although it was not possible to determine the structure of the enzyme with the steroids, for the first time it was shown the involvement of a residue in the steroid inhibition, which makes possible future investigations that can lead to the inhibition site description / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestre em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-11-21T16:38:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 32483634 bytes, checksum: 512f1ad54959a915407448133a75d3ed (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-21T16:38:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 32483634 bytes, checksum: 512f1ad54959a915407448133a75d3ed (MD5) Previous issue date: 2018-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O protozoário Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas, responsável por promover diversas alterações hematológicas e teciduais que afetam mais de 10 milhões de pessoas em todo o mundo. A espécie possui um ciclo evolutivo digene'tico. 0 T. cruzi possui uma grande diversidade genética o que lhe dá a habilidade de poder invadir uma ampla variedade de tecidos como o cardíaco, hepático, digestivo, conjuntivo e nervoso causando deficiências fisiológicas generalizadas. Neste estudo nós realizamos mediante revisões sistemáticas a avaliação das principais alterações hematológicas e morfológicas no Sistema Nervoso Central (SNC) que acontecem em mamíferos não humanos durante infecções naturais e experimentais com T. cruzi. Foram realizadas duas revisões sistemáticas utilizando bases de dados PubMed e Scopus e, através do Guia Prisma os estudos foram selecionados e submetidos à extração de dados e análise de vie's metodológico. A Tabela Arrive, foi utilizada para avaliar o nível de detalhamento cientifico dos trabalhos. No artigo 1, onde analisamos as alterações hematológicas em animais infectados com T. cruzi, dos Trinta e um estudos selecionados, a metade demostrou uma redução no número de eritrócitos, indicando anemia e, na maioria dos estudos a quantidade total de valores de leucograma aumentou, sugerindo infecção. No artigo 2, analisamos as alterações morfológicas no SNC em indivíduos infectados com T. cruzi, os 32 estudos selecionados mostraram que as alterações mais frequentes no SNC são a presença de T. cruzi e infiltrado inflamatório mononuclear, principalmente formado por linfócitos. Os principais focos de parasitismo foram as zonas perivasculares no cérebro, cerebelo, e medula espinal. Em geral nossos achados demostraram que: 1) os parâmetros hematológicos podem direcionar o diagnóstico da doença de Chagas na fase inicial; 2) O encéfalo e' o principal alvo de T. cruzi, e as alterações inflamatórias no SNC são mais frequentes na fase aguda da infecção; 3) As alterações morfológicas dependem das características da patogenicidade e virulência das cepas de T. cruzi; 4) As alterações inflamatórias foram dependentes das cepas indicando que há tropismo diferencial no SNC. / The protozoan Trypanosoma cruzi is the etiologic agent of Chagas’ disease, responsible for several hematological and tissue changes affecting more than 10 million people worldwide. The species has a digenetic evolutionary cycle. T. cruzi is endowed with great genetic diversity which gives it the ability to invade a wide variety of tissues such as the heart, liver, digestive, connective and nervous, causing generalized physiological deficiencies. In this study, we performed systematic reviews of the major hematological and morphological changes in the Central Nervous System (CNS) that occur in non-human mammals during natural and experimental T. cruzi infections. Two systematic reviews were carried out through systematic surveys in PubMed and Scopus by publications. Using the Prisma Guide, the studies were selected and submitted to data extraction and methodological bias analysis and, through the Arrive Table, the level of scientific detail of the work was evaluated. In the article 1, wherein analyzing the hematological changes in animals infected with T. cruzi, the selected Thirty-one study, half demonstrated a reduction in the number of erythrocytes, indicating anemia and, in most studies the total number of WBC values increased, suggesting infection. Article 2, we analyzed morphological changes in the CNS in subjects infected with T cruzi, the 32 selected studies showed that the more frequent changes in the CNS are the presence of T. cruzi and mononuclear inflammatory infiltrate primarily consists of T lymphocytes. The main foci of parasitism were the perivascular zones in the brain, cerebellum, and spinal cord. In general, our findings demonstrated that: 1) hematological parameters can direct the diagnosis of Chagas disease in the initial phase; 2) The brain is the main target of T cruzi, inflammatory changes in the CNS are more frequent in the acute phase of infection; 3) The morphological changes depend of the pathogenicity and virulence of T. cruzi strains; 4) Inflammatory changes were dependent on the strains indicating that there is differential tropism in the CNS.

Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Resumo: A doença de Chagas (DC), causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi (T. cruzi), ainda é considerada como um problema de saúde pública em muitos países da América Latina. De acordo com a Organização Mundial da Saúde, estima-se que entre seis a sete milhões de pessoas no mundo estejam infectadas. Indivíduos na fase crônica da doença podem ser classificados como assintomáticos ou sintomáticos (estes, desenvolvendo as formas clínicas cardíaca, digestiva ou mista). Os assintomáticos correspondem a 70% dos indivíduos nessa fase e, embora apresentem sorologia positiva para anticorpos anti T-cruzi, não desenvolvem manifestações clínicas da doença. O motivo pelo qual alguns pacientes permanecem assintomáticos, e outros desenvolvem sintomas severos, ainda é desconhecido. Fatores genéticos do hospedeiro são bastante relevantes e podem explicar a heterogeneidade encontrada em pacientes que vivem com a doença em áreas endêmicas. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) no gene TNF-α (rs1800629) e ACAT-1 (rs1044925) em indivíduos com DC crônica e verificar se os mesmos estão relacionados com a susceptibilidade para manifestação de formas clínicas sintomáticas com uso da técnica PCR-RFLP. Foram genotipadas 124 amostras para o gene TNF-α e 135 para o gene ACAT-1. Foi observada associação significativa da presença do alelo A do gene TNF- α em indivíduos sintomáticos em relação aos assintomáticos (p = 0,045). Também houve associação si... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chagas disease (CD), caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), is still considered a public health problem in many Latin America countries. According to the World Health Organization, it is estimated that between six and seven million people worldwide are infected. Disease’s chronic phase individuals may be classified as asymptomatic or symptomatic (these, developing as clinical cardiac, digestive or mixed forms). Asymptomatic individuals account for 70% of the patients at this stage and, although they have positive serology for anti-T-cruzi antibodies, they do not develop it’s clinical manifestations. The reason why some patients remain asymptomatic, and others develop severe symptoms, is still unknown. Host’s genetic factors are quite relevant and may explain the heterogeneity found in patients living with the disease in endemic areas. The objective of this study was to evaluate SNPs in the TNF-α (rs1800629) and ACAT-1 (rs1044925) genes in individuals with chronic CD and to verify if the polymorphisms are related to the susceptibility to manifestation of symptomatic clinical forms using the PCR-RFLP technique. Were genotyped 124 samples for the TNF-α gene and 135 for the ACAT-1 gene. Significant association for the presence of the A allele of the TNF-α gene was observed for symptomatic individuals in relation to the asymptomatic ones (p = 0.045). There was also a significant association between the G allele (p = 0.008) and the GG genotype (p = 0.001) of the TNF-... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Saúde Pública, Florianópolis, 2009 / Made available in DSpace on 2012-10-24T15:36:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Objetivo: O objetivo deste estudo foi analisar o perfil sorológico dos marcadores de doenças entre os candidatos à doação de órgãos sólidos no Estado de Santa Catarina no período de janeiro de 2001 a dezembro de 2007. Métodos: Foi conduzido estudo epidemiológico, transversal baseado em dados secundários. A população estudada foi composta por 1424 candidatos à doação de órgãos sólidos, no Estado de Santa Catarina. O perfil sorológico das doenças da população do estudo foi realizado pelo Centro de Hematologia e Hemoterapia de Santa Catarina, HEMOSC e os dados sócio-econômicos foram captados pela Central de Notificação, Captação e Distribuição de Órgãos de Santa Catarina, CNCDO/SC. As variáveis analisadas neste estudo foram os resultados das sorologias realizadas nos candidatos à doação de órgãos sólidos, sexo, idade e ano do exame. Resultados: O estudo constitui-se de 1424 dados das sorologias de candidatos à doação de órgãos sólidos, 551 (38,7%) do sexo feminino e 873 (61,3%), do sexo masculino. Os marcadores sorológicos em candidatos à doação de órgãos sólidos foram: anti-HBc=21,7%, HBsAg= 3,9%, anti-HCV=1,3, doença de Chagas=0,3%, sífilis=0,9%, HTLV I/II =0,3%, HIV I/II=0,5%, toxo IgG=38,2%, toxo IgM=2,3%, CMV IgG=46,2% e CMV IgM=2,6%. A soroprevalência de CMV IgM foi maior nas mulheres (p<0,01). Os outros marcadores não apresentaram diferença estatisticamente significativa entre os sexos. Conclusões: Houve maior prevalência do sexo masculino entre os candidatos à doação de órgãos e aumento na faixa etária acima de 60 anos. A exposição ao vírus da hepatite B é comum e crescente em Santa Catarina ao longo do tempo sendo o marcador HBsAg maior em homens. As soroprevalências de HCV, HIV I/II, HTLV I/II e doença de Chagas foram baixas sem alterações ao longo do período estudado. As infecções por citomegalovírus e toxoplasmose se mostraram elevadas, sendo a infecção aguda pouco comum. Citomegalovírus foi mais freqüente em mulheres e nos mais jovens. / Objective: This study examined the profile of serological markers of blood-borne diseases among the candidates for donation of solid organs. Methods: We conducted an epidemiological survey based on secondary data. The study population comprised 1424 candidates for donation of solid organs in the Santa Catarina State from January 2001 to December 2007. Serological analyses were conducted by the Center for Hematology and Hemotherapy of the Santa Catarina State (HEMOSC). Demographic data were collected by the Centre for Organs donation of the state (CNCDO/SC). The variables analyzed included serological tests results in the candidates for solid organ donation, as well as their sex, age and year of examination. Results: Among 1424 subjects examined, there were 551 (38.7%) females and 873 (61.3%) males. Seroprevalence of disease markers was as following: 21.7% with anti-HBc, 3,9% with HBsAg, 1,3% with anti-HCV, 0,3% with Chagas disease, 0,9% with VDRL marker for syphilis, 0,3% with HTLV 1 or 2, 0,5% with HIV 1 or 2, 38.2% with toxoplasmosis IgG, 2,3% with toxoplasmosis IgM, 46,2% with CMV IgG and 2,6% with CMV IgM. The seroprevalence of CMV IgM was higher in women (p <0.01). The other markers showed no statistically significant difference between the sexes. Conclusions: There was a higher percentage of males among the candidates for donation of organs. During the period analyzed, an increase in the percentage of candidates for donation over 60 years of age and of HBsAg-positive men was observed. The seroprevalences of HCV, HIV, HTLV and Chagas disease were low and with no change over the period studied. The infections by cytomegalovirus and toxoplasmosis were highly prevalent but rarely in the acute phase. Cytomegalovirus was more frequent in women and younger people.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseLVR.pdf: 6988214 bytes, checksum: d780cb227a0bf1454902b195e898d753 (MD5) Previous issue date: 2005-08-31 / Universidade Federal de Minas Gerais / Raputia praetermissa (Engler) Emmerich is a tree found only in the Forest Reserve Adolpho Ducke, Amazonas, Brazil. The genus Raputia was originally described by Engler and many species were included in this genus, but in 1978, Emmerich proposed three new genera Neoraputia, Raputiarana e Sigmathantus in order to accommodate six species, four belonging to the genus Raputia, which is assigned into the tribe Cuspariae, and two that had not been described yet. From our knowledge no previous phytochemical work has been reported on Raputia. Therefore, this study describes phytochemical and chemosystematic investigation and the search of compounds with trypanocidal and leishmanicidal activity from roots of R. praetermissa. The phytochemical work involved crude extract preparation, followed by fractionation and isolation of compounds thorough different chromatography methods. Spectroscopic analyses permitted the identification of them and the results showed the presence of new substances in addition to those isolated previously. Here we reported the isolation and identification of the new compounds: two new limonoids, 11&#946;,19&#945;-dihydroxi-7- deoxo-7-acetoxy-ichangin e 11&#946;,19&#945;-oxide-7-deacetoxy-7-hidroxy-ichangin, two new prenylated indoles alkaloids, 5-[(3 -dimethylalil-4 -methylidene)-2 -tetrahidrofuran-2 - il]-indol e 5-[(4 -carbomethoxy)-furan-2 -il]-indol and a new bisindol alkaloid, 5 ,6 -[5- methyl-5(7-indol-5 -il-etene-6,7-diil)-3(1-methylprop-2-en-2-il)]-ciclopentane-5 ,6 -diilindol. The following known substances were also obtained: T-cadinol, &#946;-sitosterol, stigmasterol, campesterol, 3-[2 ,6 -dimethoxy-6 ,6 -dimethylpyrano(2 ,3 :3 ,4 ) phenyl]-methylpropionate, 3-oxo-cadinol, lanosta-7,24-dien-21-oic acid-3-oxo, dictamine, &#947;-fagarine, 1-methyl-4-methoxy-2-quinolone, tricoccin S13 acetate, 6- formylindol. Our results showed that the chemical classes isolated from R. praetermissa roots are common to the Rutaceae family, but the prenylated indol alkaloids are not. These compounds are new classes of prenylated indol alkaloids. However, all isolated compounds confirm the assigned it into the tribe Cuspariae. In addition, the compounds were evaluated for: a) in vitro biological activity against trypanosomastigotes forms of Trypanosoma cruzi and amastigotes forms of Leishmania braziliensis; b) enzymatic inhibitory activity on glyceraldehydes- XXXII phospato-dehidrogenase (gGAPDH) of T. cruzi and enzymatic inhibitory activity on adenine-phosphoribosyl-transferase (APRT) of Leishmania tarentolae. None of isolated substances were promising against T. cruzi in vitro test as well as in enzymatic experimental models (gGAPDH e APRT) from which they not showed enzymatic inhibitory activity. Conversely, the T-cadinol was active against L. braziliensis and results in DL50 44 µM. / XXIX Raputia praetermissa (Engler) Emmerich é uma arvoreta encontrada somente na Reserva Florestal Adolpho Ducke, Amazonas, Brasil. O gênero Raputia foi originalmente descrito por Engler, onde várias espécies foram incluídas, mas em 1978, Emmerich propôs dividi-lo em três novos gêneros, Neoraputia, Raputiarana e Sigmathantus com o objetivo de acomodar seis espécies, quatro destas pertencentes a Raputia (incluída na tribo Cuspariae) e duas que ainda não haviam sido descritas. Atualmente este gênero possui 11 espécies. Não há relatos de estudos fitoquímicos em Raputia. Este trabalho descreve o estudo fitoquímico e quimiossistemático e a busca de compostos tripanocida e leishmanicida na raiz de R. praetermissa. O estudo fitoquímico envolveu desde a preparação dos extratos brutos, seguidos pelo fracionamento e isolamento dos compostos através de diferentes métodos cromatográficos. As análises espectroscópicas permitiram a identificação de substâncias conhecidas e inéditas. Neste são descritos o isolamento e identificação de dois limonóides inéditos, 11&#946;,19&#945;-dihidroxi-7-deoxo-7-acetoxi-ichangina e 11&#946;,19&#945;-óxido-7-deacetoxi-7- hidroxi-ichangina, dois alcalóides indólicos prenilados inéditos, 5-[(3 -dimetilalil-4 - metilideno)-2 -tetraidrofurano-2 -il]-indol e 5-[(4 -carbometoxi)-furano-2 -il]-indol, e um alcalóide bisindol também inédito, 5 ,6 -[5-metil-5(7-indol-5 -il-eteno-6,7-diil)-3(1- metilprop-2-en-2-il)]-ciclopentano-5 ,6 -diil-indol, e as substâncias conhecidas, Tcadinol, &#946;-sitosterol, estigmasterol, campesterol, 3-[2 ,6 -dimetoxi-6 ,6 - dimetilpirano(2 ,3 :3 ,4 ) fenil] propianato de metila, 3-oxo-T-cadinol, ácido 3- oxotirucala-7,24-dien-21-óico, dictamina, &#947;-fagarina, 1-metil-4-metoxi-2-quinolona, acetato de tricocina S13, 6-formilindol. Nossos resultados mostram que as classes químicas isoladas são comuns na família Rutaceae, exceto os indólicos prenilados que pertencem a uma nova classe de indólicos. Contudo, todas as substâncias isoladas confirmam o posicionamento de Raputia na tribo Cuspariae. Os compostos isolados foram avaliados quanto: a) Atividade biológica in vitro contra as formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi e amastigotas de Leishmania braziliensis; b) Atividade enzimática inibitória em gGAPDH (Gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase) do T. cruzi e em APRT (adenina-fosforribosil-transferase) de Leishmania tarentolae. Nenhuma das substâncias isoladas foi promissora no teste in vitro contra T. cruzi. No modelo experimental enzimático (gGAPDH e APRT) nenhum composto mostrou atividade inibitória promissora. Por outro lado, o T-cadinol foi ativo contra L. braziliensis resultando em uma DL50 de 44 µM.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1925.pdf: 5727198 bytes, checksum: 46e27e09d790ee7c1350bedf5b1e7a8f (MD5) Previous issue date: 2007-05-18 / Universidade Federal de Sao Carlos / Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, is endemic in 15 countries in Latin America, including Brazil, and it is estimated that about 16 million people are infected by this protozoan. The enzyme glyceraldehyde-3- phosphato-dehydrogenase (gGAPDH) is one of the nine enzymes involved in the T. cruzi glycolysis and experimentally it was proved that inhibition of this metabolic pathway causes the elimination of trypanosomes in the bloodstream. Among several natural products that have presented interesting inhibitory activity against this enzyme are the anacardic acids, isolated from cashew-nut shells. Many biologic and/or pharmacologic properties have been described for this class of compounds. In this work a serie of anacardic acids and analogues were synthetized and their biological activity evaluated . In total, 23 compounds were prepared and evaluated against T. cruzi gGAPDH and Schistossoma mansoni purine nucleoside phosphorylase (PNP) enzymes. In both cases the most active compound was 6-n-decylsalicylic acid with IC50 of 55 and 30 &#61549;M respectively. Through the analysis of the experimental results together with the molecular dock studies, it was possible to observe that the size and substituents of alkyl side chain in these compounds can influence the inhibitory activity and the free hydroxyl groups in the ring are essential for the activity. / A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é endêmica em 15 países da América Latina, incluindo o Brasil, e estima-se que cerca de 16 milhões de pessoas estão infectadas por este protozoário. A enzima gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase glicossomal (gGAPDH) é uma das nove enzimas presentes na via glicolítica desse protozoário, e experimentalmente foi comprovado que a inibição dessa via leva à eliminação dos tripanosomas da corrente sanguínea. Dentre diversos produtos naturais que apresentaram atividade inibitória contra esta enzima estão os ácidos anacárdicos, isolados do óleo da castanha de caju. Várias propriedades biológicas e/ou farmacológicas têm sido descritas para esta classe de compostos. O presente trabalho teve como objetivo sintetizar e avaliar a atividade biológica de uma coleção de ácidos anacárdicos e análogos. No total, 23 compostos foram preparados e avaliados com as enzimas gGAPDH de T. cruzi e Purina Nucleosídeo Fosforilase (PNP) de Schistossoma mansoni. Em ambos os casos, o composto mais ativo foi o ácido 6-n-decilsalicílico que apresentou um IC50 de 55 e 30 &#61549;M, respectivamente. Analisando-se os resultados obtidos, juntamente com estudos de modelagem molecular, observouse que o tamanho e subtituintes na cadeia lateral alquílica podem influenciar na atividade inibitória e que as hidroxilas livres das funções presentes no anel são essenciais para a atividade.

Orientador: Aparecido Antonio Camacho / Banca: Wagner Luís Ferreira / Banca: Ruthnéa Aparecida Lázaro Muzzi / Resumo: A cardiomiopatia chagásica está presente na história da humanidade, desde os primórdios da civilização. No continente americano, aproximadamente 200 milhões de pessoas estão afetadas por essa doença, principalmente em seu Hemisfério Sul, ocasionando importantes danos econômicos e sociais. A grande variedade de cepas e seu comportamento clínico obscuro na fase crônica indeterminada intensificam as falhas de diagnóstico e morte súbita. Sendo o cão um modelo experimental adequado para o estudo dessa doença em humanos, realizou-se este trabalho visando a caracterizar as alterações eletrocardiográficas, ecodopplercardiográficas e hematimétricas, de cães experimentalmente infectados com Trypanosoma cruzi, cepa Colombiana, em sua fase crônica indeterminada. Para tanto, 13 cães adultos, fêmeas foram infectados com o referido protozoário e submetidos a avaliações eletrocardiográfica, hematimétrica, bioquímico-sérica e ecocardiográfica durante sua fase crônica (1997 a 2004). A arritmia sinusal respiratória foi o ritmo predominante durante todo o período experimental, com baixa prevalência de bloqueio de ramo direito e crescente incidência de bloqueio atrioventricular de primeiro grau. A avaliação ecodopplercardiográfica revelou inversão das ondas E e A mitral, confirmando o distúrbio diastólico nesses animais. A avaliação bioquímica revelou atividade enzimática aumentada, confirmando a lesão cardíaca provocada pela infecção mesmo nesta fase. Desta forma, o presente ensaio contribui de forma singular para o conhecimento clínico desta afecção, trazendo mais informações acerca da tênue e obscura linha que separa a fase crônica indeterminada e a fase crônica cardíaca, na espécie canina experimentalmente infectada pela cepa Colombina do Trypanosoma cruzi. / Abstract: The Chagasic cardiomiopathy is present in the human history since the first civilization. In the American continent, 200 millions people have been affecting by this disease, mainly in south hemisphere, causing important economics and social damages. The great number of strains and obscure clinical behavior in the indeterminate phase, intensify diagnostic failure and increase sudden death. The dog is an excellent experimental model to study this disease in human, therefore this research was developed to characterize the electrocardiographic, echodopplercardiographic and haematological changes, in experimentally infected dogs with Trypanosoma cruzi, Colombian strain, in a chronic indeterminate phase. For that, thirteen infected adult dogs, female, were submitted to electrocardiographic, haematological, biochemical and echocardiographic evaluations during a chronic phase (1997 to 2004). The respiratory sinus arrhythmia was the most frequent rhythm during this research, with low prevalence of right bundle branch block and growing incidence of first degree atrioventricular block. The echocardiographic mitral waves E and A inversion, demonstrated the diastolic dysfunction on this animals. All tested serum enzymes had increased activity, confirming the cardiac lesion caused by the infection even in that phase. Therefore, this research contributed in a unique way for the clinic knowledge of this disease, bringing more information about this fine transition line between the indeterminate and cardiac phase, in experimentally Trypanosoma. cruzi, Colombian strain infection of canine species. / Mestre

Submitted by Izabel Franco (izabel-franco@ufscar.br) on 2016-09-23T20:42:45Z No. of bitstreams: 1 DissKCR.pdf: 5575397 bytes, checksum: 00bd8d0d865352126acd47e7512ab06e (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-27T19:32:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissKCR.pdf: 5575397 bytes, checksum: 00bd8d0d865352126acd47e7512ab06e (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-27T19:32:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissKCR.pdf: 5575397 bytes, checksum: 00bd8d0d865352126acd47e7512ab06e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T19:33:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissKCR.pdf: 5575397 bytes, checksum: 00bd8d0d865352126acd47e7512ab06e (MD5) Previous issue date: 2015-08-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / The available drugs for treating Chagas disease are not effective, therefore the development of new therapies is needed. Cruzain is the major Trypanosoma cruzi cysteine protease, the causative agent of the disease, and is a validated therapeutic target for the discovery of new trypanocidal agents. Our group has identified a cruzain inhibitor with fragment characteristics - [5- (2-chlorophenyl) -1,3,4- oxadiazol-2-yl] acetic acid (Neq0147) and its mode of interaction was validated by determining orthogonally its crystal structure. However, interactions of this inhibitor were not yet appropriately optimized. Therefore, this study aimed to optimize the interactions of Neq0147 to identify new fragments as non-peptide cruzain inhibitors, which was carried out through a structure-activity relationship study (SAR). Molecular modifications have been made based on Neq0147, wherein initially carboxylate was replaced by a nitrile to increase the affinity of the inhibitor and to act as an anchor to explore other modifications. Then it was made the replacement of the 1,3,4-oxadiazole ring for others heterocyclic five-membered rings, with the intention to explore interactions with Asp161 and Gly65. The position of the chlorine atom on the aromatic ring was also varied to explore interactions with amino acids in the S2 subsite. The compounds were tested against cruzain to determine its inhibition constant. From the SAR study it can be concluded that the change that generated higher affinity gain was the replacement of the carboxylate group by nitrile. It can also be seen that the presence of chlorine is essential for the fragments activity, which preferably should be present in the ortho or para positions. Among the evaluated inhibitors one fragment, Neq0617, has an affinity 14 times greater than the original fragment. Moreover, various inhibitors similar to fragments with high affinity and interaction efficiency have been identified, therefore these inhibitors are potential candidates for optimization. / Os fármacos disponíveis para o tratamento da doença de Chagas não são eficazes, portanto é necessário o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas. A cruzaína é a principal cisteínoprotease do Trypanosoma cruzi, agente causador da doença, e é um alvo terapêutico validado para a descoberta de novos agentes tripanossomicidas. Nosso grupo identificou um inibidor de cruzaína com características de fragmento, o ácido [5- (2- clorofenil) -1,3,4-oxadiazol-2-il] acético (Neq0147), e seu modo de ligação foi validado ortogonalmente através da determinação de sua estrutura cristalográfica. No entanto, as interações deste inibidor ainda não estavam otimizadas de maneira adequada. Então este trabalho teve como objetivo a otimização das interações do Neq0147 para identificação de novos fragmentos como inibidores não peptidícos da cruzaína, que foi realizado através de um estudo de relação estrutura-atividade (SAR). Modificações moleculares foram feitas baseadas no Neq0147, sendo que inicialmente o carboxilato foi substituído por uma nitrila para aumentar a afinidade do inibidor e atuar como âncora para explorar outras modificações. Em seguida, foi feita a substituição do anel 1,3,4- oxadiazol por outros anéis heterocíclicos de cinco membros, com a intenção de explorar interações com o Asp161 e a Gly65. A posição do átomo de cloro no anel aromático também foi variada para explorar interações com aminoácidos presentes no subsítio S2. Os compostos foram testados contra a cruzaína para a determinação da sua constante de inibição (Ki). A partir do estudo de SAR, pode-se concluir que a modificação que gerou maior ganho de afinidade foi à substituição do grupo carboxilato pela nitrila. Também pode-se observar que a presença do átomo de cloro é essencial para a atividade dos fragmentos, sendo que preferencialmente deve estar presente nas posições orto ou para. Entre os inibidores avaliados um fragmento, Neq0617, teve uma afinidade 14 vezes maior do que a do fragmento inicial. Além disso, vários inibidores similares a fragmentos com alta afinidade e eficiência de interação foram identificados, portanto estes inibidores são potencias candidatos para otimização.