Orientador: Noeme Souza Rocha / Banca: Julio Lopes Sequeira / Banca: Maurício Sforcin / Banca: André Schenka / Banca: Glenda Nicioli da Silva / Resumo: O tumor venéreo transmissível - TVT é objeto de numerosas investigações, apesar disso, existem lacunas que necessitam estudos. Há TVTs com graus variados de agressividade, portanto, alguns não respondem aos protocolos terapêuticos convencionais. Dando a entender que há modificações progressivas do seu perfil biológico. Técnicas como cultura celular, citometria de fluxo e a biologia molecular oferecem subsídios para se identificar e quantificar essas modificações, inclusive predizer comportamento biológico de tumor. O objetivo foi quantificar a expressão dos genes BAX, BCL2, TP53 e MDR1 em células de TVT primário e in vitro antes e depois da vincristina, a fim de identificar modificações quanto à resistência a agressividade e o tratamento. Foram obtidas 18 amostras de TVT caninos, para se estabelecer 8 culturas primárias. Logo depois se realizou testes de citotoxicidade, sobrevivência, apoptose, curva de crescimento e análise de expressão dos genes BAX, BCL2, TP53 e MDR1. Quando se comparou as células de TVT tratadas com vincristina, com aquelas que não receberam o tratamento, houve diferença estatística em relação às taxas de citotoxicidade, sobrevivência, e fases do ciclo celular, G1, Sub G1 e S. Sobre a expressão do gene MDR-1 a mesma diferença foi observada quando se comparou grupos de células tratadas e não tratadas. Nessa situação, o que se espera encontrar seria a baixa expressão do gene TP53, entretanto, ocorreu o oposto, qual seja alta expressão do gene TP53. Nessa situação acredita-se que tenha ocorrido o mecanismo regulador de apoptose. Quanto aos genes BAX e BCL-2 não foram observadas diferença estatística entre os grupos. Nesse caso, parecer não ter ocorrido a regulação esperada, do BAX pelo TP53. Acredita-se que houve mutação do TP53. Dados pouco relatados em TVT. Apesar de dados iniciais, podem concluir que estão relacionados à malignidade do tumor e resistência a quimioterapia / Abstract: Transmissible venereal tumor - TVT has been subject of numerous investigations, despite this, there are gaps that need studies. There TVTs with varying degrees of aggressiveness, so some do not respond to conventional treatment protocols. Implying that there is progressive alteration of their biological profile. Techniques such as cell culture, flow cytometry and molecular biology offer subsidies to identify and quantify these changes, including predicting the biological behavior of the tumor. The objective was to quantify the gene expression BAX, BCL2, TP53 and MDR1 in primary TVT cells and in vitro before and after vincristine, in order to identify changes regarding the aggressiveness and resistance to therapy. 18 samples of TVT canines were obtained to establish 8 primary cultures. After was performed cytotoxicity tests, survival, apoptosis, growth curve and analysis of expression of genes BAX, BCL2, p53 and MDR1. When comparing the TVT cells treated with vincristine, with those who did not receive treatment, there was statistical difference in relation to cytotoxicity rates, survival, and cell cycle phases, G1, Sub G1 and S. About the MDR-1 gene expression, the same difference was observed when comparing cells treated and untreated groups. In this situation, what would be expected at the low expression of the TP53 gene, however, was the opposite, in other words high expression of TP53 gene. In this situation it is believed that there has been a regulatory mechanism of apoptosis. In BAX and BCL-2 genes were not observed statistical difference between the groups, in this case, appears to have not occurred the regulation expected of BAX by TP53. It is believed that there TP53 mutation. Data low reported on TVT. Although initial, data may conclude that are related to tumor malignancy and chemotherapy resistance / Doutor

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2015-11-06T14:33:38Z No. of bitstreams: 1 GabrielaMedeirosAraujo_DISSERT.pdf: 6196726 bytes, checksum: bb286b387ac4454fac5063e624581413 (MD5) / Approved for entry into archive by Elisangela Moura (lilaalves@gmail.com) on 2015-11-06T14:49:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 GabrielaMedeirosAraujo_DISSERT.pdf: 6196726 bytes, checksum: bb286b387ac4454fac5063e624581413 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-06T14:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GabrielaMedeirosAraujo_DISSERT.pdf: 6196726 bytes, checksum: bb286b387ac4454fac5063e624581413 (MD5) Previous issue date: 2014-03-26 / A Helicobacter pylori ? uma bact?ria espiralada, Gram negativa, m?vel emicroaer?bia reconhecida como uma das principais causas de gastrite, ?lcera, c?ncerg?strico e do linfoma de c?lulas B de baixo grau de tecido linfoide associado ? mucosa(MALT), se constituindo um microrganismo em destaque na ?rea da microbiologiam?dica. Sua import?ncia se deve ? dificuldade de tratamento, devido ? necessidade douso concomitante de v?rios medicamentos al?m do crescente surgimento de cepasresistentes e multirresistentes aos antibi?ticos empregados na cl?nica. Com o intuito deampliar a gama de op??es terap?uticas eficazes e seguras, ultimamente, vem sendointensificados estudos qu?micos sobre plantas medicinais, seja atrav?s da obten??o deextratos, fra??es, compostos isolados ou ?leos essenciais que apresentem algum tipode atividade biol?gica. Diante do exposto, objetivouseavaliar a atividade inibit?ria deextratos vegetais oriundos do Syzygium cumini e Encholirium spectabile, plantas comhist?rico de a??o anti?lceras, e do ?leo essencial obtido do S. cumini frente a H. pylori(ATCC 43504) utilizando a t?cnica de difus?o em disco, para avalia??o qualitativa, e adetermina??o da concentra??o inibit?ria m?nima (CIM), atrav?s da t?cnica demicrodilui??o em caldo, para an?lise quantitativa. Tamb?m foi avaliada a toxicidade invitro dos extratos a partir de ensaio hemol?tico, utilizando eritr?citos de carneiro, e emcultura de c?lulas HeLa e VERO, pelo ensaio colorim?trico de viabilidade celularutilizando o MTT. Os extratos de ambos vegetais empregados nos ensaiosantimicrobianos n?o inibiram o crescimento bacteriano, em contrapartida o ?leoessencial do S. cumini (SCFO) mostrouseeficaz, exibindo CIM de 205 ?g/mL (dilui??oequivalente a 0,024% do ?leo bruto). Quanto ao ensaio hemol?tico, o mesmo ?leo aindaexibiu toxicidade intermedi?ria ao promover 25% de hem?lise a 1000 ?g/mL. Em rela??o? citotoxicidade em cultura de c?lulas, o SCFO, a 260 ?g/mL, comprometeu a viabilidadecelular de cerca de 80% das c?lulas HeLa e 50% das c?lulas VERO. Portanto o ?leoobtido das folhas do S. cumini apresenta potencial antibacteriano frente a H. pylori epotencial citot?xico, sugerindoseuma fonte de novas mol?culas candidatas a f?rmacos,desde que novas etapas de toxicidade in vitro e in vivo assim como caracteriza??oqu?mica sejam avaliadas. Al?m disso, o desenvolvimento de um sistema de libera??o def?rmacos pode resultar em um prot?tipo a ser utilizado em testes pr?cl?nicos. / Helicobacter pylori is a spiral, Gram negative, mobile, and microaerophilic bacteria recognized as a major cause of gastritis, ulcer, gastric cancer, and gastric low grade, B cell, mucosa ? associated lymphoid tissue (MALT) lymphoma, constituting an important microorganism in medical microbiology. Its importance comes from the difficulty of treatment because the requirement of multiple drugs use, besides the increasing emergence of resistant and multiresistant strains to antibiotics used in th e clinic. In order to expand safe and effective therapeutic options , chemical studies on medicinal plants by obtaining extracts, fractions, isolated compounds or essential oils with some biological activity has been intensified . Given the above, the objective was to evaluate the inhi bitory activity of organic extracts derived from Syzygium cumini and Encholirium spectabile, with antiulcer history, and the essential oil, obtained from S. cumini, against H. pylori (ATCC 43504) by the disk diffusion method, for qualitative evaluation, an d determination of minimum inhibitory concentration (MIC) using the broth microdilution method, for quantitative analysis. Also was evaluated the extracts in vitro toxicity by a hemolytic assay using sheep red blood cells, and VERO and HeLa cells using the MTT assay to analyze cell viability. The extracts of both plant used in antimicrobial assays did not inhibit bacterial growth, however the essential oil of S. cumini (SCFO) proved effective, showing MIC value of 205 ?g/mL (0.024 % dilution of the original oil). In the hemolytic assay, the same oil shows moderate toxicity, by promote 25% hemolysis at 1000 ?g/mL. Regarding the cytotoxicity in cell culture, the SCFO, at 260 ?g/mL, affected the cell viability around 80% of HeLa and 50% of VERO cells. So the oi l obtained from S. cumini leaves has antimicrobial activity against H. pylori and cytotoxicity potential, suggesting a source of new molecule drug candidates, since new stages of toxicity in vitro and in vivo, as well, chemical characterization be evaluate d. Moreover, the development of a prospective drug delivery system can result in a prototype to be used in preclinical tests.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-26T19:16:13Z No. of bitstreams: 1 JonalsonNogueiraAraujo_DISSERT.pdf: 2283136 bytes, checksum: 83cd9344cc38a30060e338ebb45988cd (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-28T22:04:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JonalsonNogueiraAraujo_DISSERT.pdf: 2283136 bytes, checksum: 83cd9344cc38a30060e338ebb45988cd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T22:04:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JonalsonNogueiraAraujo_DISSERT.pdf: 2283136 bytes, checksum: 83cd9344cc38a30060e338ebb45988cd (MD5) Previous issue date: 2015-06-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Sementes de plantas s?o reservat?rios de mol?culas com grande potencial para elabora??o de bioprodutos e por este motivo uma especial aten??o tem sido direcionada na busca de prote?nas bioativas com a??o antimetab?lica e propriedades farmacol?gicas. As lectinas de plantas s?o prote?nas com atividades biol?gicas relacionadas a defesa, mas que podem ser utilizadas, heterologamente, como interferentes no metabolismo de outros organismos. Uma lectina das sementes de Canavalia maritima (CML) foi purificada em dois passos, pelo fracionamento com sulfato de am?nio seguido pela cromatografia de afinidade em coluna Sephadex G- 50. CML foi analisada por SDS-PAGE e parte de sua sequ?ncia de amino?cidos determinada por espectrometria de massas. Os 20 res?duos identificados apresentaram 100% de identidade com ConM. ConM foi testada contra eritr?citos do sangue perif?rico humano e foi constatado a aus?ncia de toxicidade quando incubados com at? 1000 ?g/mL da prote?na. J? contra c?lulas mononucleares, a lectina n?o foi significativamente t?xica nas concentra??es de 1, 2,5 e 5 ?g/mL, mas o foi a partir da concentra??o 7 ?g/mL e contra a linhagem RAEC a prote?na n?o apresentou toxicidade significante com 25 ?g/ml da prote?na. Outros ensaios de citotoxicidade revelaram que a ConM ? t?xica para as linhagens tumorais A549, 786- 0, HT-29 e HeLa no intervalo entre 24 e 72 horas, principalmente nas concentra??es de 5, 7 e 10 ?g/ml. ConM foi capaz de aglutinar as formas promastigotas de Leishmania spp na concentra??o de 6,25 ?g/ml. Quanto a a??o contra Candida spp, nenhuma das concentra??es testadas (1 a 500 ?g/ml) foi capaz de interferir no crescimento. Quando avaliada a atividade bacteriost?tica, a ConM nas concentra??es variando de 0,39 a 400 ?g/ml n?o inibiu o crescimento de Escherichia coli, j? para Staphylococcus aureus a concentra??o de 25 ?g/ml se mostrou ativa, reduzindo o crescimento em 75 %. Com base nos dados obtidos, a lectina isolada corresponde a uma isolectina do tipo ConA, e suas propriedades anti-tumoral, bacteriost?tico e aglutinante para Leishmania precisam ser melhor investigados para que seu potencial biotecnol?gico seja explorado. / Plant seeds are reservoirs of molecules with great potential for development of bioproducts and for this reason special attention has been directed in the search of bioactive proteins with antimetabolic and pharmacological properties action. Plant lectins are proteins with biological activities related to defense, but that can be used, heterologously as interfering with the metabolism of other organisms. A Canavalia mar?tima seeds lectin (CML) was purified in two steps by ammonium sulfate fractionation followed by affinity chromatography on Sephadex G-50 column. CML was analyzed by SDS-PAGE and part of its amino acid sequence determined by mass spectrometry. The 20 resulting residues identified showed 100% identity with conm. ConM was tested against erythrocytes of human peripheral blood and it was observed absence of toxicity when incubated with up to 1000 ?g/mL of protein. Since against mononuclear cells, the lectin was not significantly toxic at concentrations of 1, 2.5 and 5 ?g/mL, but it was from concentration 7 ?g/mL. Against RAEC lineage protein showed no significant toxicity with 25 ?g/mL of protein. Other cytotoxicity assays revealed that CONM is toxic for the tumor cell lines A549, 786-0, HT-29 and HeLa in the range between 24 and 72 hours, particularly at concentrations of 5, 7 and 10 ?g/mL. ConM was still able to agglutinate promastigotes of Leishmania spp at concentrations of 6.25 ?g/mL. About action against Candida spp any of the tested concentrations (1 to 500 ?g/ml) was able to interfere with growth. When evaluated bacteriostatic activity, ConM in concentrations ranging from 0.39 to 400 ?g/mL did not inhibit the growth of Escherichia coli, but the concentration of 25 ?g/mL proved active aganist Staphylococcus aureus, reducing its growth by 75%. Based on these data, the lectin corresponds to a isolectin ConA-like, and its anti-tumor properties, bacteriostatic and binder for Leishmania need to be further investigated for its biotechnological potential exploited.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-06-06T18:56:53Z No. of bitstreams: 1 LucasAmaralMachado_DISSERT.pdf: 675823 bytes, checksum: cd1bcc94212045a3a4738ef67078d1cf (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-06-07T23:51:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LucasAmaralMachado_DISSERT.pdf: 675823 bytes, checksum: cd1bcc94212045a3a4738ef67078d1cf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-07T23:51:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LucasAmaralMachado_DISSERT.pdf: 675823 bytes, checksum: cd1bcc94212045a3a4738ef67078d1cf (MD5) Previous issue date: 2015-03-11 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi realizar a extra??o ?leo de r?-touro ?leo de r?-touro e desenvolver uma emuls?o adequada para uso t?pico do mesmo. Duas amostras de ?leo fora obtidas por diferentes m?todos, sendo uma por extra??o a quente e outra utilizando solvente org?nico. As amostras foram fisioquimicamente caracterizadas por t?cnicas de titula??o e seus compostos identificados atrav?s de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (GC/EM). O equil?brio hidrif?lico-lipof?lico requerido (EHLr) do ?leo de r?-touro foi determinado e em seguida um diagrama de fases constru?do. A estabilidade da emuls?o de uso t?pico contendo diferentes adjuvantes farmac?uticos foi determinada. A an?lise de citotoxicidade do ?leo de r?-touro in natura e na emuls?o de uso t?pico foi realizada atrav?s do ensaio de MTT, utilizando linhagem de fibroblastos normais (3T3) e de melanoma (B16F10). O rendimento da extra??o a quente foi de 60,6%. Os principais compostos insaturados encontrados foram o ?cido eicosapentaen?ico (17,6%) e ?cido araquid?nico (8,4%). O estudo de EHLr demonstrou a presen?a de sistemas est?veis com EHL entre 12 e 13,5 e o diagrama de fases revelou a predomin?ncia de sistemas caracterizados como emuls?o (62%). A emuls?o t?pica apresentou tamanho de got?cula igual a 390 nm, polidispers?o de 0,05, potencial zeta -25 mV e manteve-se est?vel durante os 90 dias avaliados. O ?leo de r?-touro e a emuls?o t?pica n?o apresentaram citotoxicidade frente ? linhagem de c?lulas 3T3. No entanto, estes sistemas inviabilizaram significativamente (p > 0,05) o crescimento das c?lulas B16F10. Em conclus?o, o ?leo de r?-touro apresenta caracter?sticas qu?micas desej?veis para o desenvolvimento de sistemas terap?uticos de uso farmac?utico e/ou cosm?tico. / The skin is one of the largest organs of the human body and accounts for about 16% of body weight. The body protection against the external environment microorganisms is one of its most important functions, however is necessary that the skin remain intact for this function be exercised, so that when there is an injury on the skin, the process of restructuring needs to be starts, however this restructuration may also be compromised due to some diseases, justifying even more the need for the development of topical products that promote or accelerate the skin healing. Thus the aim of this study was to extract bullfrog oil and to develop a suitable topical emulsion. Two different oil samples were extracted by hot or organic solvent process. Titration techniques and gas chromatography- mass spectrometry were used to characterize the bullfrog oil. The required hydrophile-lipophile balance (HLBr) of bullfrog oil was determined and a pseudo-ternary phase diagram was constructed. The stability of the topical emulsion was evaluated. Then, cellular viability was determined by MTT assay using normal fibroblasts (3T3) and melanoma (B16F10) cells lines. The hot extraction yield was 60.6%. The major polyunsaturated compounds found were Eicosapentaenoic acid (17.6%) and Arachidonic acid (8.4%). HLBr study demonstrated the presence of stable systems with HLB ranging from 12.1 to 13.5 and the pseudo-ternary phase diagram showed mainly emulsion systems (62%). Topical emulsion showed 390 nm, polydispersity 0.05, zeta potential -25 mV and remained stable for ninety days. The bullfrog oil and topical emulsion did not showed citotoxicity in normal fibroblasts cells. However, these systems showed significantly inhibition of melanoma cells growth. In conclusion, the bullfrog oil presented desirable chemical characteristics required to be used for the development of a pharmaceutical and cosmetic products.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-01-23T14:20:39Z No. of bitstreams: 1 ElisangelaBezerraDasNevesHolanda_TESE.pdf: 6612707 bytes, checksum: f9d2acfe515476ab9c03e0ac3ce7b4c2 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-01-24T15:42:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ElisangelaBezerraDasNevesHolanda_TESE.pdf: 6612707 bytes, checksum: f9d2acfe515476ab9c03e0ac3ce7b4c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-24T15:42:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ElisangelaBezerraDasNevesHolanda_TESE.pdf: 6612707 bytes, checksum: f9d2acfe515476ab9c03e0ac3ce7b4c2 (MD5) Previous issue date: 2017-08-14 / Os nanotubos de carbono de multicamadas (MWCNT) incorporados ? materiais de origem proteicas podem contribuir para o surgimento de interessantes biomateriais comp?sitos com grande potencial de aplica??es biol?gicas. Os MWCNT s?o promissores vetores de DNA em c?lulas e embri?es de seres vivos. Por?m, o desencadeamento do seu uso na ?rea biom?dica est? relacionado ? padroniza??o de sistemas e protocolos para avaliar os potenciais impactos na sa?de humana e no meio ambiente. O objetivo geral deste estudo foi avaliar o efeito da funcionaliza??o, a citotoxicidade e a ades?o celular dos nanotubos de carbono na sua forma comercial e modificados por diferentes processos em c?lulas macr?fagos (J774 e RAW). Nesta pesquisa, inicialmente foram realizados diferentes processos de funcionaliza??o nos MWCNT visando a inser??o de grupos funcionais e poss?vel compatibilidade com biopol?meros. Ap?s a funcionaliza??o os MWCNT foram caracterizados por diferentes t?cnicas e realizados os ensaios de citotoxicidade e a eletroan?lise. Os biopol?meros utilizados para a funcionaliza??o do substrato t?xtil da prote?na da soja foram o col?geno extra?do da pele da til?pia e o col?geno comercial. Os substratos t?xtis foram funcionalizados atrav?s do processo Dip coating e em seguida, foram incorporados os nanotubos de carbono pelo mesmo processo. Os resultados obtidos atrav?s das an?lises do processo de funcionaliza??o dos MWCNT revelaram que as amostras funcionalizadas com a quitosana tende a aumentar o di?metro do tubo devido a forma??o de uma monocamada polim?rica em sua superf?cie e que os melhores resultados de oxida??o foram para as amostras que passaram pelo processo de funcionaliza??o ?cida e funcionaliza??o ?cida com quitosana. Os resultados obtidos pela Espectroscopia Raman comprovaram que o processo de funcionaliza??o foi realizado com ?xito, possibilitando a inser??o de grupos funcionais sobre os nanotubos. A eletroan?lise nos nanotubos mostraram que os maiores valores da capacit?ncia por massa e por ?rea foram para as amostras funcionalizadas com ?cidos e que a adi??o da quitosana durante a funcionaliza??o aumenta a resist?ncia ? passagem da corrente, al?m de provocar um efeito isolante. Os ensaios de citotoxicidade dos MWCNT realizadas em macr?fagos nas concentra??es de 100, 75, 50, 25 e 5 ?g/mL demonstraram um percentual em torno de 95% de viabilidade celular para as amostras funcionalizadas com ?cido e quitosana para todas as concentra??es. Os ensaios de ades?o celular nos MWCNT revelaram excelentes intera??es em concentra??es mais elevadas para todas as amostras de nanotubos. A observa??o visual do efeito da modifica??o do substrato t?xtil com o col?geno indicou que o tipo e a origem da prote?na interferem no efeito da imobiliza??o dos nanotubos de carbono. Em conclus?o, as exposi??es de macr?fagos a baixas concentra??es de MWCNT funcionalizados n?o causaram impacto na viabilidade celular, o que abre as possibilidades de diversos estudos para potencializar aplica??es na ?rea biol?gica. / The multiwalled carbon nanotubes (MWCNT) incorporated into the materials of protein origin can contribute to the emergence of interesting composite biomaterials with great potential of biological applications. MWCNT are promising DNA vectors in living cells and embryos. However, the triggering of its use in the biomedical area is related to the standardization of systems and protocols to assess the potential impacts on human health and the environment. The general objective of this study was to evaluate the effect of functionalization, cytotoxicity and cellular adhesion of carbon nanotubes in their commercial form and modified by different processes in macrophages (J774 and RAW). In this research, different functionalization processes were initially performed in the MWCNT, aiming at the insertion of functional groups and possible compatibility with biopolymers. After functionalization, the MWCNT were characterized by different techniques and performed the cytotoxicity and electroanalysis tests. The biopolymers used for the functionalization of the textile substrate of the soy protein were the collagen extracted from the skin of the tilapia and the commercial collagen. The textile substrates were functionalized through the dip coat process and then the carbon nanotubes were incorporated by the same process. The results obtained through the analysis of the functionalization process of the MWCNT revealed that the functionalized samples with chitosan tend to increase the diameter of the tube due to the formation of a polymeric monolayer on its surface and that the best oxidation results were for the samples that passed by the process of acid functionalization and acid functionalization with chitosan. The results obtained by Raman Spectroscopy proved that the functionalization process was successful, allowing the insertion of functional groups on the nanotubes. The electroanalysis in the nanotubes showed that the highest values of capacitance per mass and per area were for the acid functionalized samples and that the addition of chitosan during functionalization increases the resistance to current flow, besides provoking an insulating effect. The cytotoxicity tests of MWCNT performed on macrophages at concentrations of 100, 75, 50, 25 and 5 ?g / mL demonstrated a percentage of around 95% cell viability for acid and chitosan functionalized samples at all concentrations. Cell adhesion assays in MWCNTs showed excellent interactions at higher concentrations for all nanotube samples. Visual observation of the effect of modification of the textile substrate with collagen indicated that the type and origin of the protein interfere with the immobilization effect of the carbon nanotubes. In conclusion, macrophage exposures at low concentrations of functionalized MWCNT had no impact on cell viability, which opens the possibilities of several studies to potentiate applications in the biological field.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A utilização de testes de biocompatibilidade de materiais odontológicos é necessária para avaliar a segurança dos mesmos. Listerine é um enxaguatório comercial usado para a prevenção e tratamento da gengivite. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos citotóxico e genotóxico do Listerine em culturas de Escherichia coli e plasmídios. Na avaliação da citotoxicidade, culturas de E. coli AB1157 e BW9091 foram incubadas com Listerine (10, 50 e 100%) e o crescimento acompanhado pela densidade óptica (DO) em 600nm por 7 horas(h). Para avaliar a sobrevivência, culturas de E. coli AB1157, em fase exponencial, foram centrifugadas, ressuspensas em solução salina (NaCl 0,9%) e incubadas (1h, 37C) com Listerine (10, 50, 100%, 1h, 37 C). Alíquotas foram semeadas em placas de Petri contendo meio nutritivo nos tempos 0, 30 e 60 minutos e armazenadas em estufa bacteriológica (18h, 37 C). As unidades formadoras de colônias contadas e as frações de sobrevivência (FS) calculadas. Como controles, culturas tratadas salina ou etanol (21,6%). Para genotoxicidade, plasmídios pBSK foram incubados com Listerine (10, 50 e 100%) e com etanol (2,16%, 10,8% e 21,6%), associados ou não ao SnCl2(200g/mL, 30 minutos, temperatura ambiente), realizada eletroforese em gel de agarose (0,8%, 8V/cm), observados por transiluminação UV e obtido o percentual da forma superespiralada (%SE). Os resultados indicam que o enxaguatório Listerine foi capaz de inibir o crescimento bacteriano de culturas de E. coli na maior concentração utilizada. O enxaguatório, na maior concentração, diminuiu a sobrevivência das culturas bacterianas testadas. Listerine não modificou o perfil eletroforético do plasmídios, indicando ausência de efeito genotóxico e também foi capaz de proteger os plamídios da ação do SnCl2. Além disso, o etanol, na mesma concentração presente no Listerine, não alterou o perfil eletroforético dos plasmídios, sendo capaz de protegê-lo da ação do SnCl2. Os resultados indicaram que o Listerine apresentou efeito citotóxico em culturas de E. coli e ausência de potencial genotóxico em plamídios, sendo capaz de protegê-los, bem como o etanol, dos efeitos genotóxicos do SnCl2. / The uses of biocompatibility tests to evaluate dentistry materials are necessary to assess safety. Listerine is a commercial mouthwash used to prevent and treat gingivitis. The aim of this study was to evaluate the citotoxic and genotoxic effects of Listerine on Escherichia coli cultures and bacterial plasmids. To citotoxicity tests, E.coli cultures AB1157 and BW9091 was incubated with Listerine (10, 50 and 100%) and de growth observed by optic density at 600nm for 7 hours. To cellular survival tests, E.coli AB1157 cultures, in exponential phase, was centrifuged, ressuspended in saline solution (NaCl 0.9%) and incubated (1h, 37 C) with Listerine (10, 50 and 100%). Aliquots were spread on Petri dishes with nutritive medium at 0, 30 and 60 minutes and incubated (18h, 37 C). The colony-forming units were counted and survival fractional (SF), calculated. As controls, cultures treated with saline and ethanol (21.6%). In genotoxicity assays, plasmids pBSK were incubated with Listerine (10, 50 and 100%) and ethanol (2.16%, 10.8% and 21.6%) in presence or absence of SnCl2 (200g/mL, 30 minutes, room temperature), electrophoresis agarose gel (0.8%, 8V/cm) was performed and plasmid forms were observed. Data indicated that Listerine is capable to inhibit bacterial growth of E. coli cultures at the highest concentrations used. The mouthwash, at the higher concentration used, decreased the survival of bacterial cultures tested. Listerine didnt modify the electrophoretic profile of plasmids indicating no genotoxic effect but this mouthwash could protect plasmids from action of SnCl2. In addition, ethanol, at concentration present in Listerine, didnt alter the electrophoretic profile of plasmids but was capable of protect plasmid from action of SnCl2. The results indicated that Listerine could present citotoxic effect on E. coli cultures, absence of genotoxic potential on plasmids but it could protect, similar to ethanol, plasmids from genotoxic effect of SnCl2.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-03-09T20:08:05Z No. of bitstreams: 1 PaulaIvaniMedeirosDosSantos_TESE.pdf: 2576570 bytes, checksum: ad723940125128ab00057ee1698f195a (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-03-13T20:16:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PaulaIvaniMedeirosDosSantos_TESE.pdf: 2576570 bytes, checksum: ad723940125128ab00057ee1698f195a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T20:16:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PaulaIvaniMedeirosDosSantos_TESE.pdf: 2576570 bytes, checksum: ad723940125128ab00057ee1698f195a (MD5) Previous issue date: 2015-07-10 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / As esponjas marinhas se apresentam como uma rica fonte de novos compostos bioativos de grande interesse biotecnol?gico, vimos, neste trabalho, relatar a purifica??o e caracteriza??o de uma lectina da esp?cie Aplysina fulva, denominada AFL com atividade imunomoduladora, bem como avaliar se a mesma possue efeito citot?xico sobre c?lulas em cultura (normais, tumorais e leishmanias). As prote?nas totais foram extra?das da esponja com tamp?o Tris-HCl 20 mM, pH 7,5, e fracionadas por precipita??o com acetona. A fra??o obtida com 1 volume de acetona possu?a maior atividade hemaglutinante e foi submetida a uma cromatografia em matriz de goma guar com tamp?o tetraborato de s?dio 20 mM, pH 7,5. Em seguida foi aplicada em uma coluna de Superdex 75 (FPLC-AKTA) contendo tamp?o Tris- HCl 20 mM, pH 7,5. A pureza da lectina foi atestada em uma coluna HILIC (HPLC). A sequ?ncia de 15 res?duos de amino?cidos do N-terminal da lectina foi determinada por degrada??o de Edman e n?o apresentou similaridade com nenhuma outra prote?na dos bancos de dados mais conhecidos. A massa foi estabelecida em 62 kDa, por gel filtra??o em Superdex 75. An?lise ap?s tratamento com agentes redutores permitiu deduzir que AFL ? uma prote?na homotetram?rica. Sua atividade hemaglutinante foi reduzida quando a lectina foi exposta em meio ?cido (pH < 4) ou quando submetida a temperaturas acima de 60 ?C. AFL apresentou especificidade para lactose e parcial para D-glicose e D-galactose. A lectina purificada AFL n?o apresentou efeito citot?xico para as linhagens de c?lulas cancer?genas (PANC, HeLa, HT-29, Bf16F10, A549) e de fibroblastos (MRC5). AFL foi capaz de aglutinar formas promastigotas vivas de Leishmania amazonensis e Leishmania. braziliensis,e teve sua atividade revertida pela adi??o de lactose ao ensaio. AFL n?o diminuiu de forma significante a viabilidade de Leishmania amazonensis. A lectina AFL apresentou atividade mitog?nica em concentra??es a partir de 40 ?g/mL para c?lula mononucleares do sangue perif?rico (mon?citos e linf?citos). A lectina AFL foi capaz de induzir na linhagem de macr?fagos (RAW264.7) de murinos a libera??o de TNF- ?, mas n?o de IL-6, na concentra??o de 10,0 ?g/mL. Quando AFL foi incubada com c?lulas espl?nicas de camundongos BALB/c, foi capaz de estimular a produ??o de IFN-? e promover a diferencia??o de c?lulas T para uma resposta imune celular do tipo Th1. A capacidade de modular a resposta imune do tipo Th1 jamais foi relatada em lectinas de esponjas marinhas. Todos os resultados corroboram com o alto potencial que a lectina AFL apresenta como uma nova mol?cula capaz de modular o sistema imune, podendo ser utilizada como adjuvante de vacinas contra microrganismos, dentre eles, os do g?nero leishmania. / Marine sponges are presented as a rich source of new bioactive compounds of great biotechnological interest. Here in this research we report the purification and characterization of a lectin from Aplysina fulva species, called AFL, that presents immunomodulatory activity, and it was also evaluated whether it possesses cytotoxic effects on cultured cells (normal, tumor and Leishmania). Total proteins were extracted from the sponge with Tris-HCl buffer 20 mM, pH 7.5, and fractionated by precipitation with acetone. The fraction obtained with 1 volume of acetone had greater hemagglutinating activity and was subjected to a column chromatography on guar gum matrix with 20 mM sodium tetraborate buffer, pH 7.5. It was then applied to a Superdex 75 column (AKTA-FPLC) containing 20 mM Tris-HCl buffer, pH 7.5. The purity of the lectin was attested in a HILIC (HPLC) column. The sequence of 15 residues of N-terminal amino acid of the lectin was determined by Edman degradation and showed no similarity to any other protein of the known databases. The molecular mass was set at 62 kDa by gel filtration on Superdex 75. Analysis after treatment with reducing agents enabled to deduce that the AFL is a homotetrameryc protein. Their hemagglutinating activity was reduced when the lectin was exposed in an acidic medium (pH <4) or when subjected to temperatures above 60 ? C. AFL showed specificity for partial lactose and D-glucose and D-galactose. The purified lectin LFA showed no cytotoxic effect on cancer cell lines (PANC, HeLa, HT-29, Bf16F10, A549) and fibroblast (MRC5). AFL was able to agglutinate living promastigotes of Leishmania amazonensis and Leishmania braziliensis, and had their activity reversed by the addition of lactose to the test. AFL did not decrease significantly the viability of Leishmania amazonensis. The AFL lectin showed mitogenic activity at concentrations from 40 ug / ml for mononuclear peripheral blood cells (lymphocytes and monocytes). The AFL lectin was able of induce the macrophage murine lineage (RAW264.7) release of TNF-?, but not IL-6 at a concentration of 10.0 mg / mL. When LPA was incubated with spleen cells from BALB / c mice was able to stimulate the production of IFN-? and to promote the differentiation of T cells to a cellular Th1 immune response. The ability to modulate the immune response of the Th1-type lectins has never been reported in marine sponges. All results confirm the high potential that the lectin AFL, that appears as a new molecule capable of modulating the immune system and can be used as an adjuvant for vaccines against microorganisms, including the gender Leishmania.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-04-03T21:43:19Z No. of bitstreams: 1 KleytonThiagoCostaDeCarvalho_DISSERT.pdf: 2993890 bytes, checksum: 64c5c1e9194dcf2ddec049dc4f793967 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-04-10T19:42:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 KleytonThiagoCostaDeCarvalho_DISSERT.pdf: 2993890 bytes, checksum: 64c5c1e9194dcf2ddec049dc4f793967 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T19:42:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KleytonThiagoCostaDeCarvalho_DISSERT.pdf: 2993890 bytes, checksum: 64c5c1e9194dcf2ddec049dc4f793967 (MD5) Previous issue date: 2016-07-27 / C?ncer cervical (CC) ? o terceiro tipo de c?ncer mais comum em mulheres no mundo todo e a quarta principal causa de morte em mulheres nos pa?ses em desenvolvimento. Os Papilomav?rus humano (HPV) de alto risco tais como HPV 16, 18, 31 e 33 s?o o principal fator de risco para esse tipo de c?ncer. Entre estes, o HPV-16 e -18 s?o respons?veis por quase 70% dos casos de CC. Quimioterapia com compostos ? base de platina em combina??o com a radioterapia ou a cirurgia ? o tratamento de escolha para CC, mas sua efic?cia ? limitada, especialmente em est?gios avan?ados da doen?a. Al?m disso, estes tratamentos podem facilmente levar a rea??es adversas e resist?ncia ?s drogas. Assim, a busca por novos agentes antitumorais seletivos e de alta efic?cia para o tratamento deste tipo de tumor ? necess?ria. Croton blanchetianus (CB), popularmente conhecida como ?marmeleiro preto?, ? um arbusto pertencente ? fam?lia Euphorbiaceae e amplamente disseminado no nordeste brasileiro. Alguns estudos t?m demonstrado a atividade citot?xica de plantas do g?nero Croton em linhagens tumorais humanas. Contudo, at? o momento, n?o h? nada descrito na literatura quanto ao efeito citot?xico da esp?cie Croton blanchetianus. Assim, o presente trabalho teve como objetivo investigar, in vitro, os efeitos de fra??es obtidas das folhas e raiz de CB nas linhagens de c?ncer cervical humano HeLa e SiHa. As fra??es foram obtidas pelo m?todo de varia??o do pH, a partir do qual foram obtidas duas fra??es ?cidas, uma das folhas (CBaF) e outra da raiz (CBaR), e duas b?sicas, tamb?m das folhas (CBbF) e raiz (CBbR). O perfil fitoqu?mico das fra??es foi avaliado por Cromatografia em camada delgada (CCD). A atividade citot?xica e a avalia??o do tipo de morte celular foram determinados pelos ensaios de MTT e Anexina V/PI, respectivamente, enquanto que para avalia??o de altera??es morfol?gicas nucleares e ensaio do ciclo celular foram utilizados, respectivamente, microscopia de fluoresc?ncia com o corante DAPI e citometria de fluxo. De acordo com os resultados, a maioria das fra??es apresentou terpenos, alcaloides e flavonoides. Al?m disso, todas as fra??es testadas foram capazes de diminuir significativamente a viabilidade celular de HeLa e SiHa de maneira concentra??o e tempo dependentes, promoveram modifica??es morfol?gicas celulares e nucleares, al?m de induzirem apoptose e parada do ciclo celular. Este ? o primeiro estudo que demonstrou os efeitos citot?xicos e pr?-apopt?ticos de CB em linhagens de c?ncer cervical humano. Portanto, CB parece ser uma fonte natural promissora para o desenvolvimento de agentes para o tratamento do CC. No entanto, mais estudos s?o necess?rios para isolar, purificar e elucidar os poss?veis mecanismos de a??o dos compostos ativos. / Cervical cancer (CC) is the third most common cancers in women worldwide and the fourth major cause of cancer death in the woman in developing countries. High-risk human papilloma viruses (HPVs) such as HPV 16, 18, 31 and 33 have been attributed to be the major risk factors for cervical cancer, out of which HPV-16 and -18 account for almost 70% of the cancers. Platinum-based chemotherapy in combination with radiotherapy or surgery is now mainly used to treat CC, but the efficacy is limited especially in advanced-stage disease. Furthermore, these treatments could easily lead to adverse reactions and drug resistance. Thus, it is necessary to seek antitumor drugs of high efficacy for the treatment of this kind of tumor. Croton blanchetianus (CB), known as ?black marmeleiro?, belongs to the family Euphorbiaceae and it is a widely disseminated shrub found in northeast Brazil. Some studies have demonstrated cytotoxic activity of plants of this genus against human tumor cell lines. However, to date, there is nothing described in the literature as to the cytotoxic effect of the Croton blanchetianus. Therefore, the present study aimed to investigate, in vitro, the effects of leaves and root fractions from Croton blanchetianus (CB) against human cervical cancer HeLa and SiHa cells. Fractions were obtained by pH variation method, from which were obtained two acidic fractions, one of the leaves (CBaF) and root (CBaR) and two basic also obtained from leaves (CBbF) and root (CBbR). Phytochemical screening was evaluated by thin layer chromatography. Cytotoxic activity and cell death evaluation were determined with MTT and annexin V/PI assays by flow cytometry, respectively. Nuclear morphological changes were evaluated by fluorescence with DAPI stanning and flow cytometry was used to cycle assay. According to results, most of the fractions exhibited terpenoids, alkaloids and flavonoids. All fractions decreased significantly cell viability of HeLa and SiHa cells in a concentration- and time-dependent manner, promoted cellular and nuclear morphological changes and induced apoptosis and cell cycle arrest. This is the first study that demonstrated cytotoxic and pro apoptotic effects of CB on HeLa and SiHa cells. Therefore, CB appears to be a valuable natural source for the development of agents for the treatment of CC. However, more studies are needed to isolate, purify and elucidate the possible action mechanisms of the active compounds.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / As estatinas são fármacos inibidores competitivos da enzima hidroxi-3-metil-glutaril Coenzima A (HMGCoA) redutase, amplamente utilizados para o controle da hipercolesterolemia total e, em especial, para a redução dos níveis séricos de LDLc (Low Density Lipoprotein cholesterol). Além do efeito primário, esses fármacos apresentam vários efeitos secundários, chamados de efeitos pleiotrópicos, envolvendo atividade anti-inflamatória, antitumoral e antiparasitária. Para o desenvolvimento de inovações na área de química medicinal é imprescindível avaliar o risco de efeitos adversos para saúde ou, em outras palavras, a segurança terapêutica do novo produto nas condições propostas de uso. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi investigar a genotoxicidade de quatro análogos inibidores da biossíntese de lipídios, da classe das estatinas, em modelos experimentais in vitro, testados previamente contra o clone W2 de Plasmodium falciparum a fim de se obter o IC50 dessas moléculas frente ao patógeno. Foram desenvolvidas quatro novas moléculas (PCSR02.001, PCSR09.001, PCSR08.002 e PCSR10.002). Para a avaliação da toxicidade, foram realizados o teste de mutagenicidade bacteriana (teste de Ames), o ensaio de viabilidade celular utilizando o reagente WST-1 e o ensaio de indução de micronúcleos, ambos utilizando uma linhagem ovariana (CHO-K1) e uma linhagem hepática (HepG2). Levando em conta o fato de nenhuma das amostras ter induzido efeitos mutagênicos nas linhagens de S. enterica sorovar Typhimurium, e PCSR10.002 ter apresentado citotoxicidade sugere-se então que este composto seja o mais tóxico. Comparativamente, PCSR10.002 foi mais genotóxico e citotóxico para a linhagem CHO-K1 do que para a linhagem HepG2. PCSR02.001 apresentou elevado potencial genotóxico para células ovarianas, mas não foi capaz de induzir a formação de micronúcleos em células hepáticas, apresentando, portanto um perfil similar ao observado em PCSR10.002. Assim como a atorvastatina, PCSR09.001 apresentou elevado potencial pró-apoptótico para a linhagem de hepatócitos. Já PCSR08.002, apresentou aumento na apoptose de CHO-K1. A indução de apoptose não é necessariamente um evento negativo, já que é pouco lesiva e responsável pela eliminação de células danificadas. Porém, as respostas de apoptose induzidas por esse composto foram muito inferiores àquelas induzidas pela atorvastatina (cerca de 4 vezes menor que a atorvastatina). PCSR08.002 foi aquele se mostrou menos tóxico e essa amostra foi a que teve menor risco relativo, em uma análise global das respostas de citotoxicidade e não demonstrou ter potencial genotóxico para as linhagens utilizadas nesse estudo. Conclui-se, portanto, que a análise da atividade toxicológica utilizando modelos experimentais in vitro dessas estatinas constitui um importante passo para o estabelecimento de novos candidatos à fármacos com maior segurança. / Statin drugs are competitive inhibitors of the enzyme 3-hydroxy-methyl-glutaryl coenzyme A (HMGCoA) reductase, widely used for the control of hypercholesterolemia and overall, in particular for the reduction of serum LDLc (Low Density Lipoprotein cholesterol). In addition to the primary effect, these drugs have many secondary effects, called pleiotropic effects, involving anti-inflammatory, antitumor, and antiparasitic activities. For the development of innovations in the field of medicinal chemistry is essential to evaluate the risk of adverse health effects, or in other words, the therapeutic safety of the new product under the proposed conditions of use. Accordingly, the aim of this study was to investigate the genotoxicity of four analogues of lipid biosynthesis inhibitors, from the class of statins in experimental models in vitro, previously tested against the W2 clone of Plasmodium falciparum to obtain the IC50 of these molecules against the pathogen. Four new molecules (PCSR02.001, PCSR09.001, PCSR08.002 and PCSR10.002) were developed. For the assessment of toxicity, bacterial mutagenicity test (Ames test) were performed, the cell viability assay using WST-1 reagent and micronuclei induction assay, both using an ovarian lineage (CHO-K1) and an hepatic lineage (HepG2). Taking into account the fact that none of the samples have induced mutagenic effects in strains of S. enterica serovar Typhimurium , and PCSR10.002 have shown cytotoxicity then we suggest that this compound is the most toxic. Comparatively, PCSR10.002 was more cytotoxic and genotoxic for the CHO-K1 cell line, than for HepG2 line. PCSR02.001 showed high genotoxic potential for ovarian cells, but was not able to induce the formation of micronuclei in liver cells, thus showing a similar profile to that observed in PCSR10.002. Just like atorvastatin, PCSR09.001 showed high pro-apoptotic potential for hepatocyte lineage. Have PCSR08.002, showed an increase in apoptosis of CHO-K1. The induction of apoptosis is not necessarily an adverse event, since little is harmful and responsible for the elimination of damaged cells. However, the apoptotic responses induced by this compound were much lower than those induced by atorvastatin (about 4 times less than atorvastatin). PCSR08.002 was that was less toxic and this sample had a lower relative risk in a global analysis of the responses and cytotoxicity demonstrated no genotoxic potential for strains used in this study. Therefore it is concluded that the analysis of toxicological activity using in vitro experimental models of these statins is an important step towards the establishment of more safely new candidate-drugs.

Made available in DSpace on 2015-05-14T13:00:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 7127283 bytes, checksum: 26b433761ccb1d15fbc422d3d6da7f5b (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Despite the investments in the search for more effective cancer therapies, the high incidence and mortality produced by this disease continue to increase, which has provoked public health problems to the population. In parallel to the progress of this situation, it has been found a breakthrough in the medicinal chemistry allowing synthesis of a variety of compounds, encouraging researchers into new structures with rich therapeutic potential. The synthesis of compounds derived from tetrahydropyran nucleus (DNT) has been receiving attention, considering the broad of biological activity from these structures. Therefore, the aim of this study was to analyze the cytotoxic activity of 31 DNT compounds. Cell viability was determined by MTT reduction and neutral red stain (CVN) assays. From such 31 compounds studied, only 42a-c and 43a - c showed potent cytotoxic effect on human cancer lines (K562, HL-60, HT-29 and MCF- 7) and a less significant cytotoxic effect on non-cancerous cells (L929 and PBMC cells) were shown. The leukemic cell lines K562 and HL-60 were the most sensitive ones. Compounds 42b and 43c, with IC50 values which range from 8.97 ± 4.1 to 35.35 ± 5.2 for the lines HL-60 and K562, were considered the most promising molecules in terms of their cytotoxic effect and they also demonstrated in primary cultures of peripheral blood and bone marrow from patients with chronic myeloid leukemia. The ability of 42b and 43c compounds to induce molecular changes related to the type of cell death was assessed by flow cytometry. In K562 cells, the compounds 42b and 43c showed similar effect causing an increase in the concentration of hipodiploide DNA and they arrested in the G1 phase of the cell cycle. From double labeling annexin/IP assay, the compound 43c increased about 20% of PI fluorescence. For HL-60 cell line, the compounds 42b and 43c augmented the concentration of hipodiploide DNA and and depolarization of mitochondrial membrane. The compound 43c stimulated ROS production and double staining to annexina/IP. Compounds 42b and 43c showed a potent cytotoxic effect and antileukemic activity, inducing apoptosis and cell cycle. However, there is a need for structural modifications that increase the selectivity of these compounds for cancer cells. / Apesar dos investimentos na busca de terapias mais eficazes contra o câncer, as elevadas taxas de incidência e mortalidade provocadas por esta doença, continuam a crescer, consistindo assim, um dos principais problemas de saúde pública. Em paralelo ao avanço dessa patologia, houve um avanço na química medicinal que permite a síntese de uma variedade de compostos, favorecendo a investigação de novas estruturas com excelentes perspectivas terapêuticas. A síntese de compostos derivados do núcleo tetraidropiranos (DNT) vem recebendo atenção, considerando a ampla atividade biológica dessas estruturas. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi analisar a atividade citotóxica de compostos DNT. A viabilidade celular foi determinada pelos ensaios de redução do sal de MTT e CVN. Dos 31 compostos DNT estudados, 42a-c e 43a-c demonstraram potente efeito citotóxico em linhagens cancerígenas (K562, HL-60, HT- 29, MCF-7), e um efeito citotóxico menos expressivo em células não cancerígenas (L929, PBMC), as linhagens leucêmicas humanas K562 e HL-60 foram as mais sensíveis. Os compostos 42b e 43c, com valores de CI50 que variam de 8,97 ± 4,1 a 35,35 ± 5,2 para as linhagens HL-60 e K562, foram considerados os mais promissores, demonstrando também um efeito citotóxico similar em cultura primária de sangue periférico e de medula óssea de pacientes com leucemia mieloide crônica. A capacidade destes compostos provocarem alterações moleculares associadas ao tipo de morte celular foi avaliada por citometria de fluxo. Na linhagem K562, os compostos 42b e 43c tiveram efeito semelhante, provocando um aumento na concentração do DNA hipodiploide e parada na fase G1 do ciclo celular. No ensaio com dupla marcação anexina/iodeto de propídeo (IP) o composto 43c aumentou 20% de fluorescência para o IP. Para a linhagem HL-60, os compostos 42b e 43c induziram aumento da concentração de DNA hipodiploide, nas maiores concentrações, além de induzir despolarização na membrana mitocondrial. Apenas o composto 43c estimulou produção de EROs, e 42b e 43c aumentaram a dupla marcação para anexina/IP. Desta forma, observa-se que os compostos 42b e 43c apresentaram um potente efeito citotóxico e atividade antileucêmica, sendo capazes de induz apoptose e parada no ciclo celular, porém há ainda necessidade de modificações estruturais que aumentem a seletividade destes compostos para células cancerígenas.