OBJETIVO: A imagem molecular de transportadores de dopamina (DAT) oferecer uma informação diferencial na investigação de doenças neurodegenerativas, como a Doença de Parkinson, diante de uma sólida abordagem quantitativa. Porém, são diversos o número de diferentes métodos semiquantitativos aplicados na prática clínica, que nos quais podem produzir resultados distintos quando aplicados por diferentes avaliadores ou condições de avaliação da imagem de SPECT do corpo estriado. Logo, este estudo pode avaliar a acurácia, precisão e reprodutibilidade de diferentes métodos semiquantitativos de imagens de SPECT do corpo estriado. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram realizadas 23 aquisições de SPECT utilizando um simulador antropomórfico estriatal preenchido com diferentes concentrações de atividade de 99mTc. A preparação deste simulador estriatal foi realizada a partir de concentrações de atividades nas cavidades de interesse (núcleo caudado, putâmen e corpo estriado) proporcionalmente maiores do que a da cavidade de referência (background). As imagens foram reconstruídas utilizando parâmetros ideais já protocolados. Cinco métodos baseados em ROIs, dedicados para a quantificação de SPECT do corpo estriado foram avaliados: ROIs desenhadas sobre as imagens de SPECT - (A) Manual, ROIs com dimensões padronizadas - (B) método Twobox e (C) método Threebox; e baseado em imagens estruturais (D) MRI e (E) CT. A acurácia de cada método aplicado foi avaliada através do coeficiente de correlação de concordância (CCC), sua precisão utilizando o coeficiente de Pearson e modelos regressão linear, assim como a reprodutibilidade pode ser investigada através de análises de variabilidade intra- e interobservadores. RESULTADOS: Tanto para as cavidades avaliadas de forma individual (Caudado e Putâmen), quanto para o corpo estriado como um todo, todos os métodos aplicados apresentaram um aumento no CCC dos índices quantificados diante de uma diminuição dos valores nominais de preenchimento. Os métodos D e E apresentaram os máximos valores de CCC na avaliação do núcleo caudado _ 0,89 baixo MRI CA CCC ? e _ 0,84 baixo CT CA CCC ? ) e putâmen ( _ 0,86 baixo MRI PU CCC ? e _ 0,82 baixo CT PU CCC ? ). Entretanto, na avaliação do corpo estriado, o método B apresentou a máxima acurácia dentre os cinco aplicados ( _ 0,95 baixo TWOBOX ST CCC ? ). A significante correlação entre os métodos foi evidenciada por um elevado coeficiente de correlação (r > 0.8). Na avaliação da reprodutibilidade intra e interobservadores uma grande variabilidade foi observada na aplicação do método A, principalmente quando aplicada na semiquantificação de baixas concentrações de atividade. Conclusão: Os cinco métodos semiquantitativos de SPECT do corpo estriado, demonstraram ser eficientes na realização de leituras proporcionais dos índices de BPI mesmo quando aplicados a imagens de diferentes concentrações de atividade. Porém, diante de investigações que necessitem de um processo de quantificação mais acurado e visando avaliar putâmen e núcleo caudado de forma isolada, os métodos estruturais (MRI e CT), demonstraram uma crescente eficiência em representar acurados parâmetros semiquantitativos diante da diminuição dos índices nominais de preenchimento. Na investigação de todo o corpo estriado e carente de qualquer informação estrutural, o método TwoBox passa a ser recomendado devido sua melhor performance diante todos os métodos avaliados. / AIM: The molecular image of dopamine transporters (DAT) gives differential information in research of neurodegenerative diseases, such as Parkinson\'s, when properly approached quantitatively. Yet, each method used in clinical routine may give, or not, different results when the quantifications are applied in images of several activity levels. Hence, this study assessed the accuracy, precision and reproducibility of striatum SPECT images semi-quantification methods, based in ROIs. METHODOLOGY: Twenty-three SPECT images were acquisitions of anthropomorphic striatal phantom filled with different activity concentrations of 99mTc. For each acquisition performed, the specific chambers (caudate and putamen chambers) to large chamber (simulating nonspecific background activity) was filled with solutions activity of different specific to nonspecific ratios (10, 8, 6, 4 and 2 to 1). The images were reconstructed by iterative algorithm, corrected to attenuation effects and the extracted values were analyzed by the specific binding ratio (SBR). Five semi-quantification methods for striatum SPECT, using ROIs was assessment: (A) draw freehand ROIs on SPECT image (manual); standard size ROIs: (B) TwoBox and (C) ThreeBox Methods and VOIs using structural images: (D) MRI and (E) CT. Accuracy of methods applied was assessed by concordance correlation coefficient (CCC) and precision by Pearson\'s coefficient and linear regression. RESUlTS: The SBR quantified both to individual specific chambers and striatal chamber analyzed to all methods applied resulted in a CCC increase with decrease of the nominal values used. For lower SBR values, the D and E methods evidenced the maximum values of CCC in assessment of caudate (CCCMRI_CA = 0.89 e CCCCT_CA = 0.84) and putamen (CCCMRI_PU = 0.86 e CCCCT_PU = 0.82). However, striatal assessments the B method highlights a maximum accuracy between all methods applied (CCCTWOBOX_ST = 0.95), for low values of SBR. A high Pearson\'s coefficient was found in the correlation between the all methods, report thereby a good precision between them (r > 0.8). The high ICC and variability values, showed a high reprodutibility intra- and interobserver for B, C and D methods, white the A and E methods presented a high variability between the raters. CONCLUSION: The five semi-quantification methods of striatum SPECT reported a high precision even when applied in images with activity solutions different. Therefore, to research much accurate and need to assessment just caudate or putamen individually the structural methods - MRI and CT - demonstrated progressive improvement in its quantification to reduction nominal fill index. To assessment striatal chamber and in the absence of structural information, the TwoBox method is advisable due to its excellent agreement with all nominal values when compared to the various semi-quantitative methods investigated. Keywords:

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-04T19:33:42Z No. of bitstreams: 1 André Tiago Rossito Goes.pdf: 1026499 bytes, checksum: 77124a4a69965e808db970de8c093af4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-04T19:33:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 André Tiago Rossito Goes.pdf: 1026499 bytes, checksum: 77124a4a69965e808db970de8c093af4 (MD5) Previous issue date: 2013-01-17 / A doença de Parkinson (DP) é caracterizada por uma degeneração progressiva dos neurônios dopaminérgicos do sistema nigroestriatal e depleção de dopamina (DA) no corpo estriado. O exercício físico tem demonstrado ser uma abordagem não farmacológica promissora para reduzir o risco de doenças neurodegenerativas. Este estudo investigou o efeito potencial neuroprotetor do treinamento de natação (TN) em um modelo animal da DP induzida por 6-hidroxidopamina (6-OHDA) em camundongos. O presente estudo demonstrou que um TN de 4 semanas foi eficaz em atenuar as seguintes deficiências resultantes da exposição a 6-OHDA: depressão como o comportamento em teste de suspensão da cauda, aumento no número de quedas no teste rota-rod; diferenciação na memória de longo prazo no teste de reconhecimento de objeto, o aumento dos níveis de espécies reativas; inibição da enzima glutationa peroxidase (GPx) atividades aumentadas da glutationa redutase (GR) e da glutationa S-transferase (GST), aumento do nível de interleucina 1-beta (IL-1β) e redução os níveis de DA, ácido homovanílico (HVA) e 3,4-di-hidroxifenilacético (DOPAC). Os mecanismos envolvidos no presente estudo são a modulação da atividade da GPx, GR e GST e níveis de IL-1β em um modelo de DP induzida pela 6-OHDA, em camundongos e portanto, a proteção contra a diminuição dos níveis de DA, DOPAC e HVA no estriado. Estes resultados reforçam que um dos efeitos induzidos pelo exercício em doenças neurodegenerativas, tais como DP, é devido ao efeito antioxidante e anti-inflamatório. Sugerimos que o exercício atenua os declínios cognitivos e motores, depressão, estresse oxidativo e neuroinflamação induzidas pela 6-OHDA suportando a hipótese de que o exercício pode ser usado como uma ferramenta não farmacológica para reduzir os sinais da DP. / Parkinson’s disease (PD) is characterized by progressive degeneration of dopaminergic neurons in the nigrostriatal system and dopamine (DA) depletion in the striatum. Exercise has been showed to be a promising non-pharmacological approach to reduce the risk of neurodegeneration disease. This study was designed to investigate the potential neuroprotective effect of swimming training (ST) in a mouse model of PD induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA) in mice. The present study demonstrated that an 4-week ST was effective in attenuating the following impairments resulting from 6-OHDA exposure: depressive-like behavior in tail suspension test; increase in number of falls in rota rod test; impairment on long-term memory in the object recognition test; increased reactive species levels; inhibition of the glutathione peroxidase (GPx) activity and rise the glutathione reductase (GR) and glutathione S-transferase (GST) activities; increased interleukin 1-beta (IL-1β) level and decrease the levels of DA, homovanillic acid (HVA) and 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC)). The mechanisms involved in this study are the modulation of GPx, GR and GST activities and IL-1β level in a PD model induced by 6-OHDA in mice, and hence protecting against the decrease of DA, DOPAC and HVA levels in striatum of mice. These findings reinforce that one of the effects induced by exercise on neurodegenerative disease, such as PD, is due to antioxidant and anti-inflammatory properties. We suggest that exercise attenuates cognitive and motor declines, depression, oxidative stress, and neuroinflammation induced by 6-OHDA supporting the hypothesis that exercise can be used as a non-pharmacological tool to reduce the signs of PD.

A doença de Parkinson (DP) apresenta declínio da capacidade respiratória. Estudo utilizando um modelo de DP induzido pela injeção de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) no estriado mostrou redução no número de neurônios envolvidos no controle da respiração. O objetivo desse estudo foi avaliar alterações gliais no núcleo retrotrapezóide (RTN), núcleo do trato solitário, complexo pré-Bötzinger e grupamento respiratório ventrolateral rostral (rVRG) utilizando o mesmo modelo experimental. Em ratos Wistar que receberam a injeção de 6-OHDA bilateralmente no estriado observou-se redução na imunorreatividade para proteína ácida fibrilar glial em astrócitos no rVRG a partir de 30 dias, no RTN a partir de 40 dias e nas demais regiões a partir de 60 dias. Ainda, observamos o aumento da proteína ligante de actina cruzada em microglias na região do RTN aos 30 e 40 dias. Nossos dados sugerem que a redução astrocitária contribui para as alterações respiratórias observadas neste modelo experimental e a presença de neuroinflamação no RTN pode contribuir para a perda celular nesta região. / Parkinson\'s disease (PD) has a decline in respiratory capacity. A study using a model of PD induced by the injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) in the striatum showed a reduction in the number of neurons involved in the control of breathing. The aim of this study was to evaluate glial changes in the retrotrapezoid nucleus (RTN), nucleus of the solitary tract, pre-Bötzinger complex and rostral ventral respiratory group (rVRG) using the same experimental model. Wistar rats that received bilateral 6-OHDA injection in the striatum present a reduction in immunoreactivity for glial fibrillary acidic protein in astrocytes in the rVRG from 30 days, in the RTN from 40 days and in the other regions from 60 days. We also observed an increase of the Ionized calcium binding adaptor molecule 1 in microglia in the region of the RTN at 30 and 40 days. Our data suggest that astrocytic reduction contributes to the respiratory changes observed in this experimental model and the presence of neuroinflammation in the RTN may contribute to the cellular loss in this region.

Mestrado em Saúde Pública / Master Degree Course in Public Health / A etiologia da Doença de Parkinson (DP) encontra-se, em parte, por desvendar. Factores ambientais e genéticos poderão interagir e contribuir para o desenvolvimento desta condição neurodegenerativa. Estudos epidemiológicos recentes colocam o enfoque na possibilidade de determinadas exposições a agentes ambientais com acção neurotóxica poderem precipitar o desenvolvimento da DP, uma vez que as formas puramente genéticas da doença são raras. O objectivo deste estudo foi avaliar possíveis factores familiares e ambientais para a DP. Foi realizado um estudo caso-controlo de base hospitalar, tendo como amostra 88 casos de indivíduos com diagnóstico de DP, efectuado por neurologista, e 176 controlos seleccionados segundo a idade, sexo e local de residência, semelhante aos casos. Vários possíveis factores de risco e/ou protectores foram avaliados, relacionados com estilos de vida, história anterior, profissão, local de residência e diferentes exposições a potenciais agentes neurotóxicos. Os resultados do estudo permitiram verificar diferenças estatisticamente significativas entre a história familiar positiva de DP (p=0,002), profissão (p=0,001), habitação em ambiente rural (p=0,037), habitação/trabalho perto de fábrica ou indústria (p=0,017), exposição a pesticidas, herbicidas e insecticidas (p<0,001), consumo de café (p=0,036) e consumo de chá (p=0,001), em casos e controlos. O modelo de regressão logística permitiu identificar como potenciais factores de risco da DP a história familiar positiva de DP (odds ratio [OR]=9,996; intervalo de confiança [IC] 95%=2,191-45,597), as profissões manuais (blue collar) (OR=3,967; IC 95%=1,670 9,426), exposição a pesticidas, insecticidas e herbicidas (OR= 2,619 ; IC 95%=1,170-5,862). Por outro lado, o consumo de chá sugeriu um efeito protector na ocorrência da DP (OR= 0,356 ; IC 95%=0,174-0,727). Os resultados parecem consistentes, com estudos actuais, que apontam um modelo multifactorial para etiologia da DP. / The etiology of Parkinson s disease (PD) remains in a certain part unknown. Both genetic susceptibility an environmental factors are some times considered to be putative contributors to its origin. Recent epidemiologic studies have focused on the possible role of environmental risk factors present during adult life or aging, once pure genetic forms of PD are rare. The purpose of this study was to investigate environmental and familial risk factors for PD. We perfomed a hospital based case-control study using 88 PD patients with neurologist confirmed diagnostic, and 176 sex, age, and residence similiar controls. Several possible risk factors were evaluted related to life style, past history, family history, occupational history and other exposures to potencial neurotoxins agents. Statist differences, using a 95% confidence interval, were observed in positive family history of PD (p=0,002), occupation category (p=0,001), rural living (p=0,037), living/working near a industry (p=0,017), exposure to pesticides, herbicides and insecticides (p<0,001), coffee consumption (p=0,036) and tea consumption (p=0,001). Logistic regression showed as potencial risk factors, a positive family history of PD (odds ratio [OR]=9,996; 95% confidence interval [CI]=2,191-45,597), blue collar occupations (OR=3,967; 95% CI=1,670 9,426), exposure to pesticides, herbicides and insecticides (OR= 2,619 ; 95% CI=1,170-5,862). An inverse relanshionship was found between tea consumption and the risk of PD (OR=0,356 ; 95% CI=0,174-0,727). The results of the study show that both familial and environmental factors may contribute to the development of PD. Like other study s suggest, PD is of unknown, but presumably multifactorial etiology.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000417575-Texto+Completo-0.pdf: 5448343 bytes, checksum: c2400c3e66de9c19b7b14a8dd168d231 (MD5) Previous issue date: 2009 / The present study was aimed to investigate neuropathological changes in adult and old rats, and in APP/PS1 transgenic mice subjected to supplementary iron administration in a critical postnatal period in order to study the contribution of environmental and genetic risk factors to the pathogenesis of neurodegenerative disorders. No significant differences in abundance of proteins β-amyloid, phosphorylated tau and α-synuclein analysed by IHC in brain were seen, when treated and non-treated rats were compared. Increased astrocytosis, revealed by densitometry of immnoreactive astrocytes marcked with GFAP, was found in old (24 months) treated rats in substantia nigra and striatum and in the hippocampus of adult (3 months) treated rats when compared to age-matching controls. No modifications in β-amyloid burden were seen in treated and non-treated APP/PS1 mice. No differences in microglial reactions were observed when comparing the four groups of mice: transgenic with iron (TgFe), transgenic with sorbitol (TgSb), wild type with iron (WtFe) and wild type with sorbitol (WtSb). Yet increased astrocytosis, as revealed by densitometry of immnoreactive astrocytes marcked with GFAP, and increased expression levels of GFAP, as revealed by western blotting, were found in iron-treated mice (both Tg and Wt) when compared with TgSb and WtSb. This was accompanied by significant changes in brain fatty acid composition in APP/PS1 mice that lead to a lower membrane peroxidizability index and to reduced protein oxidative damage. The present findings clearly document that excess of iron during the neonatal period impacts in the cellular and molecular composition of the adult and old brain rats and APP/PS1 trangenic mice. These observations may encourage further studies focused on the effects of dietary supplementations in children. / O presente estudo foi planejado para investigar alterações neuropatológicas em ratos adultos e velhos, e em camundongos trangênicos APP/PS1 submetidos à administração de ferro suplementar num período crítico pós-natal, com o objetivo de estudar a contribuição de fatores de risco ambientais e genéticos na patogênese de doenças neurodegenerativas. Nenhuma diferença significativa foi vista na abundância das proteínas β-amilóide, tau fosforilada e na α-sinucleína, analisados por IHC no encéfalo, quando ratos tratados com ferro e sem ferro são comparados. Aumento de astrocitose, detectada por densitometria de astrócitos imunoreativos marcados por GFAP, foi encontrado em ratos velhos (24 meses) tratados com ferro na substância negra e estriado e no hipocampo de ratos adultos (3 meses) tratados com ferro quando comparados com controles pareados por idade. Nenhuma modificação nas placas de β-amilóide foram vistas em camundongos trangênicos APP/PS1 tratados e não tratados. Nenhuma diferença na reação microglial foi observada quando comparados os 4 grupos: trangênicos com ferro (TgFe), transgênicos com sorbitol (TgSb), wild type com ferro (WtFe), wild type com sorbitol (WtSb). Ainda, aumento em astrocitose, revelado por densitometria de astrócitos reativos marcados por GFAP, e aumento de níveis de expressão de GFAP, revelados por western blotting, foram encontrados em camundongos tratados com ferro (tanto Tg como Wt) quando comparados com TgSb e WtSb. Este aumento foi acompanhado por alterações significativas na composição de ácidos graxos no cérebro de camundongos APP/PS1 que levaram à diminuição do índice de capacidade peroxidativa de membrana e redução do dano oxidativo protéico. Os presentes achados claramente documentam que o excesso de ferro durante o período neonatal impacta na composição celular e molecular de cérebros de ratos adultos e velhos e de camundongos trangênicos APP/PS1. Estas observações podem encorajar mais estudos focados nos efeitos de suplementações na dieta de crianças.

Submitted by Carla Barros (carla.barros@udesc.br) on 2017-06-09T23:44:05Z No. of bitstreams: 1 Resumo Ana Cristina Tillmann.pdf: 298510 bytes, checksum: 5a3dcf145d765e3cc816232ec57fa8b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-09T23:44:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Resumo Ana Cristina Tillmann.pdf: 298510 bytes, checksum: 5a3dcf145d765e3cc816232ec57fa8b3 (MD5) Previous issue date: 2017-03-10 / CAPES / Introduction: Parkinson's disease (PD), which, when worsen, increase the limitations of their patients, affecting their quality of life (QOL) directly. Despite different treatment options already developed for the disease, the concomitant involvement of other health care areas, such as dance, plays an important role in complementing treatment. Objective: To analyze the influence of Brazilian samba through a protocol on the motor and non-motor symptoms of individuals with PD. Methods: This research followed three steps: 1. Creation of a Brazilian Samba protocol for adjuvant treatment of individuals with PD; 2. Check the feasibility of this protocol in this population; And 3. Application of the protocol through a non-randomized clinical trial to determine the protocol influence on motor symptoms (outcome 1) and nonmotor symptoms (outcome 2). The feasibility study consisted of 20 participants, members of the Santa Catarina Parkinson's Association (APASC), with mean age of 66.4 ± 10.7 years, divided into control (CG) and experimental groups (EG). The non-randomized clinical trial sample consisted of 47 participants, also APASC members (68.3 ± 9.3 years), with 6.5 ± 5.7 years of disease initial symptoms and approximately 5.2 ± 5, 1 year of diagnosis. Of these, 23 were integrated in EG and 24 the CG, thus far for the second outcome analysis, individuals were divided into the two subtypes of the disease according to the motor phenotype predominant characteristics, of each in Tremor Dominant (TD) or Postural Instability and Gait Difficulty (PIGD). Before starting the data collection, individuals with PD responded to the Mini Mental State Exam (MMSE), which was used as exclusion criteria. For the data collection, a questionnaire was used as an interview format, divided into ten parts: General information; Scale of stages of disability of Hoehn and Yahr; Unified Parkinson's Disease Rating Scale - Parkinson Disease Questionnaire; Parkinson's Disease Sleep Scale; Beck Depression Inventory; Berg Balance Scale; Fatigue Severity Scale and a likert scale for obtaining the Minimal Clinically Important Difference. It was also applied the Brazilian Samba Protocol. Statistical analysis was performed using the following tests: Chi square, Fisher exact test, T test for independent samples, Pearson correlation, multiple linear regressions, Anova Two way with repeated measurements and Sydak comparison test, with significance level of 5%. Results: The Brazilian Samba protocol was formulated with twelve weeks of intervention, with two weekly classes of 60 minutes. The same was shown to be feasible for use in individuals with PD, with high student frequency and absence of falls. Because of its safe and pleasant characteristics and because it presents sufficient physical benefits as a concomitant activity to drug treatment, with improvements in social relations, it becomes a possible tool for the maintenance of students in intervention programs. When the results of the first outcome were observed, after 12 weeks the EG presented a significant improvement in the balance (p = 0.003), with a change score of 3.4, and when comparing with the post CG period (p = 0.010). The motor exploration presented a change in the EG, with a highlight of the total values, with a score change of 5.0 (p <0.001) and alternating fast movements of the hands with a change of 0.7 (p <0.001). The agility of the legs (p = 0.007) and walking (p = 0.029) were significant in the comparison with the CG. Positive changes were also observed in daily life activities (ADLs), with emphasis on hygiene (p = 0.043) and falls (p = 0.043). When checking the impact that the changes in balance, and motor exploration caused in the ADL of the individuals with PD, the influence of the improvement of the symptoms was also observed in the improvement of the ADL scores, especially for the gait item in all the adjusted models by bradykinesia, finger agility, postural termor (characterized by tremor when performing an action) in addition to total motor exploration scores UPDRS III. When analyzing the second outcome after the twelve weeks of intervention, it is observed that the EG showed improvement in the scores of all the tests (without significant changes). The comparison between the groups, however, indicated a significant difference in the post-UPDRSI period (p = 0.020) in which the GE group presented improvement in cognitive impairment, whereas the CG presented a deficit in these values (ME = 0.4 / ME = -0,4). The results from the division between the subtypes of the disease, show a greater change in the values between the individuals of the TD group, where only the sleep did not present significant differences when compared to the EG with the GC. Regarding GE, the greatest difference found between the pre-and post-period was related to fatigue (ME = 7.8 / p = 0.013). Among the individuals who presented PIGD as the main characteristic, no significant changes were observed when compared to the post-period between the SG and GC, nor between the pre- and post-SG periods. In GC, a significant improvement was observed in the scores of depressive symptoms (ME = 4.1 / p = 0.041). Conclusion: Through the results of this dissertation, it was observed that the Brazilian samba appears to be a viable tool for this population, since it seems to be a safe and beneficial activity, physically and psychologically, to be used concomitantly to the drug treatment. It had a positive effect on the motor symptoms of PD after twelve weeks of intervention and although the evidence for non-motor symptoms was not as striking as those found in motor manifestations, there was a positive trend in all variables studied. Also, the differences found after the intervention between the subtypes of PD, where individuals with TD characteristics seem to present better results, show that interventions such as dance may have greater effects on non-motor symptoms depending on the expected progression of the disease. Maybe the scarcity of studies that use this approach in them analyzes, be the reason for the lower number of evidences in this symptomatology when related to dance. It is also important to note that the numerical results do not always indicate the desired values, but the clinically importante changes pointed out by them were many and are very relevant because of the progressive nature of the disease, in which the minimal improvement or even the temporary stagnation of the evolution of the symptoms should be celebrated and considered for new proposals for protocols, rehabilitation actions and studies. In the meantime, the production of new rehabilitation programs that do not emphasize medical involvement is stimulated, but rather a pleasant interaction environment that also brings the necessary physical benefits to PD patients. / Introdução: A doença de Parkinson (DP), promove sintomas motores e não motores, que ao se agravarem aumentam as limitações destes indivíduos afetando diretamente na qualidade de vida (QV) destes. Apesar de diferentes opções de tratamento já desenvolvidas para a doença, o envolvimento concomitante de outras áreas de cuidados de saúde, como a dança, desempenha um papel importante na complementação do tratamento. Objetivo: Analisar a influência do samba brasileiro por meio de um protocolo nos sintomas motores e não motores de indivíduos com DP. Metodologia: Esta pesquisa seguiu três etapas: 1. Criação de um protocolo de Samba Brasileiro para tratamento adjuvante de indivíduos com DP; 2. Verificar a viabilidade deste protocolo nesta população; e 3. Aplicação do protocolo por meio de ensaio clínico não randomizado para averiguar a influência do mesmo nos sintomas motores (desfecho 1) e não motores (desfecho 2). O estudo de viabilidade contou com 20 participantes, integrantes da Associação Parkinson Santa Catarina (APASC), com média de idade de 66,4±10,7 anos, divididos em grupo controle (GC) e experimental (CE). O ensaio clínico não randomizado foi composto por 47 integrantes da APASC (68,3±9,3 anos), com 6,5±5,7 anos de sintomas iniciais da doença e aproximadamente 5,2±5,1 anos de diagnóstico da mesma. Destes 23 integraram o (GE) e 24 o (GC), ainda para a análise do segundo desfecho os indivíduos foram divididos nos dois subtipos da doença de acordo com as características predominantes do fenótipo motor de cada um em Tremor Dominante (TD) e instabilidade postural e dificuldade de andar (PIGD). Antes de iniciar a coleta de dados os indivíduos com DP responderam ao Mini Exame do Estado Mental (MEEM), que foi utilizado como critério de exclusão. Para a coleta dos dados utilizou-se um questionário aplicado em formato de entrevista, dividido em dez partes: informações gerais; Escala de estágios de incapacidade de Hoehn e Yahr; Escala unificada de avaliação da doença de Parkinson - Parkinson Disease Questionnaire; Escala de sono para doença de Parkinson; Inventário de Depressão de Beck; Escala de equilíbrio de Berg; Escala de severidade de fadiga e escala likert para a obtenção da mínima diferença clinicamente importante; e o Protocolo de samba brasileiro para indivíduos com DP. A análise estatística foi realizada por meio dos testes: Qui quadrado, Teste Exato de Fisher, Teste T para amostras independentes, correlação de Pearson, Regressão linear múltipla, Anova Two way com medidas repetidas e Teste de comparação de Sydak, com nível de significância de 5%. Resultados: O protocolo de Samba Brasileiro foi formulado com doze semanas de intervenção, com duas aulas semanais de 60 minutos. O mesmo se mostrou viável para aplicação em indivíduos com DP, com alta frequência dos alunos e ausência de quedas. Por sua característica segura, prazerosa e por apresentar benefícios físicos suficientes a uma atividade concomitante ao tratamento medicamentoso, com benfeitoria também nas relações sociais se torna uma possível ferramenta de manutenção dos alunos em programas de intervenção. Quando observados os resultados do primeiro desfecho, após as doze semanas o GE apresentou melhora significativa no equilíbrio, com mudança de escore de 3,4 (p=0,003), e ao comparar com o período pós do GC, apresentou também diferença significativa (p=0,010). A exploração motora apresentou mudança no GE com destaque para os valores totais, com mudança de escore de 5,0 (p<0,001) e os movimentos rápidos alternados das mãos com mudança de 0,7 (p<0,001). Na comparação com o GC destacaram-se a agilidade das pernas (p=0,007) e a marcha (p=0,029). Também foram observadas mudanças positivas quanto as atividades de vida diária (AVDs) com destaque para higiene (p=0,043) e quedas (p=0,043). Ao verificar o impacto que as mudanças do equilíbrio, e da exploração motora causaram nas AVDs dos indivíduos com DP observou-se a influência da melhora dos sintomas motores também na melhora dos escores das AVDs, em especial para o item marcha em todos os modelos ajustados seguidos pela bradicinesia, agilidade dos dedos, tremor postural (caracterizado pelo tremor ao executar uma ação) além dos escores totais de exploração motora UPDRS III. Ao analisar o segundo desfecho após as doze semanas de intervenção, observa-se que o GE apresentou melhora nos escores de todos os testes (sem mudanças significativas). A comparação entre os grupos, porém indicou diferença significativa no período pós do UPDRS I (p=0,020) no qual o grupo GE apresentou melhora no comprometimento cognitivo, enquanto que o GC apresentou déficit nesses valores (ME=0,4/ ME= -0,4). Os resultados a partir da divisão entre os subtipos da doença, mostram uma maior mudança nos valores entre os indivíduos do grupo TD, onde apenas o sono não apresentou diferenças significativas quando comparado ao GE com o GC. E quanto ao GE, a maior diferença encontrada entre o período pré e pós foi em relação a fadiga (ME=7,8/ p=0,013). Entre os indivíduos que apresentaram PIGD como principal característica, não foi observada mudanças significativas quando comparadas ao período pós entre o GE e GC, nem entre os períodos pré e pós do GE. Já no GC observou-se melhora significativa nos escores dos sintomas depressivos (ME= 4,1/ p= 0,041). Conclusão: Por meio dos resultados desta dissertação, observou-se que o samba brasileiro aparenta ser uma ferramenta viável a essa população, uma vez que parece ser uma atividade segura e benéfica, física e psicologicamente, a ser utilizada concomitantemente ao tratamento medicamentoso. Influenciou positivamente nos sintomas motores da DP após as doze semanas de intervenção e apesar das evidencias quanto aos sintomas não motores não terem sido tão marcantes quanto as encontradas nas manifestações motoras, houve uma tendência positiva em todas as variáveis estudadas. Ainda as diferenças encontradas após a intervenção entre os subtipos da DP, onde indivíduos com características TD parecem apresentar melhores resultados, demonstram que as intervenções como a dança podem acarretar maiores efeitos nos sintomas não motores dependendo da progressão já esperada da doença. Talvez a escassez de estudos que utilizem essa abordagem em suas análises seja a razão para o menor número de evidencias nesses sintomas quando relacionado a dança. É importante salientar também que, nem sempre os resultados numéricos apontam os valores desejados, porém as mudanças clinicamente importantes apontadas por eles foram muitas e mostram-se bastante relevantes pelo caráter progressivo da doença, em que a mínima melhora ou mesmo a estagnação temporária da evolução dos sintomas devem ser comemoradas e levadas em consideração para novas propostas de protocolos, ações de reabilitação e estudos. Neste interim, estimula-se a produção de novos programas de reabilitação que não enfatizem o envolvimento médico, e sim um ambiente agradável de interação que acarrete também os benefícios físicos necessários aos indivíduos com DP.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais frequente, depois da doença de Alzheimer, com uma incidência de aproximadamente 3,3% na população brasileira acima dos 60 anos. Ela é caracterizada por uma perda dos neurônios dopaminérgicos da parte compacta da substância negra e pela presença de inclusões protéicas intracelulares denominadas corpúsculos de Lewy nos neurônios sobreviventes. A DP tem uma etiologia complexa que envolve interações genes-ambiente e múltiplos genes de susceptibilidade. Nesse contexto, mutações de perda de função no gene da glicocerebrosidase (GBA) têm sido bem validadas como importantes fatores de risco para a DP. Esse gene está localizado na região 1q21 e compreende 11 exons que codificam a enzima lisossômica glicocerebrosidase. O principal objetivo deste estudo foi investigar se alterações no gene GBA constituem um fator de predisposição para o desenvolvimento da DP na população brasileira. Para isso, um grupo de 126 pacientes brasileiros, não-aparentados, com DP (24 casos familiares e 102 isolados; idade média 66,4 11,4) foram analisados para mutações no GBA através do seqüenciamento completo de todos os exons e alguns íntrons. Sete alterações e um alelo recombinante, anteriormente encontrados em pacientes com a DP analisados em outros estudos, foram detectados (K(-)27R, IVS2+1G>A, N370S, L444P, T369M, A456P, E326K e RecNciI), assim como, uma variante nunca antes identificada associada à DP (G325G) e uma nova mutação (W378C), num total de 18 pacientes (14,3%). Além disso, foram encontradas três alterações intrônicas (c.454+47G>A, c.589-86A>G e c.1225-34C>A), que constam do banco de SNPs, entretanto, não foram associadas a nenhuma doença. Dentre todas as variantes identificadas, três são comprovadamente patogênicas (IVS2+1G>A, L444P e N370S) e foram encontradas em 5,5% da amostra, não sendo detectadas na amostra controle, indicando uma freqüência significativamente alta dessas mutações em pacientes com DP quando comparadas aos controles (P=0,0033). Esses resultados reforçam a associação entre o gene GBA e a DP na população brasileira, além de apoiar a hipótese de que alterações nesse gene representam um importante fator de susceptibilidade ao desenvolvimento da DP / Parkinsons disease is the second most common neurodegenerative disorder, after Alzheimers disease, with an incidence of 3.3% in Brazilian population over the age of 60 years. Its characterized by the degeneration of dopaminergic neurons within the substantia nigra pars compacta and the presence of intracellular protein inclusions called Lewy bodies in the surviving neurons. PD has a complex etiology which may involve gene-environment interactions and multiple susceptibility genes. In this context, loss-of-function mutations in the glucocerebrosidase gene (GBA) have been well-validated as important susceptibility factors for PD. This gene is located on 1q21 and comprises 11 exons that encode them lysosomal enzyme glucocerebrosidase. The main objective of our study was to investigate if alterations in the GBA gene constitute a predisposing factor for the development of PD in the Brazilian population. For this, a Brazilian cohort of 126 unrelated PD patients (24 familial and 102 sporadic cases; mean age: 66.4 11.4) were screened for GBA mutations by complete sequencing of the genes exons and some introns. Seven alterations and one recombinant allele, previously found in PD patients performed in other studies, were detected (K(-)27R, IVS2+1G>A, N370S, L444P, T369M, A456P, E326K e RecNciI), as well as, a variant never identified in PD patients (G325G) and one newly identi&#64257;ed variant (W378C), in a total of 18 patients (14.3%). In addition, were found three intronic changes (c.454 +47 G>A, c.589- 86A>G and c.1225-34C>A), which are present in the database of SNPs, however, were not associated with any disease. Among all the variants identified, three are proven pathogenic (IVS2 +1 G>A, N370S and L444P) and were found in 5.5% of the sample and not detected in the control sample, indicating a significantly higher frequency of these mutations in patients with PD compared to controls (P = 0.0033). Our results, have strengthened the association between the GBA gene and PD in the Brazilian population, in addition to support the hypothesis that alterations in this gene represent a significant genetic susceptibility factor for the development of PD

Os mecanismos moleculares que levam ao dano da via nigroestriatal durante a progressão da Doença de Parkinson (DP) ainda não estão totalmente elucidados. Dessa forma, existe a necessidade de desenvolver modelos experimentais adequados para o estudo desse distúrbio neurodegenerativo. A linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y tratada com neurotoxinas indutoras deste distúrbio (ex.: 6-hidroxidopamina - 6-OHDA) é amplamente utilizada como modelo in vitro da DP. Muitos estudos mostram que esta linhagem pode ser diferenciada em células dopaminérgicas através da combinação da diminuição do soro fetal bovino (SFB) em meio de cultura e da adição de neurotrofinas como o ácido retinóico (AR). No entanto, há poucos estudos mostrando as diferenças entre células proliferativas e diferenciadas da linhagem de neuroblastoma SH-SY5Y, além do efeito do tratamento com 6-OHDA. Ainda, não há um consenso nos protocolos de diferenciação. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi estabelecer um protocolo de diferenciação dopaminérgica da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y, bem como avaliar a potencialidade do modelo como plataforma para o screening de neurotoxicidade/neuroproteção de compostos e a possibilidade de manipulação gênica. As células proliferativas SH-SY5Y foram mantidas em meio de cultura DMEM/F12 (1:1) suplementado com 10% de SFB. A diferenciação foi induzida pela combinação de 10 μM de AR e meio de cultura com 1% de SFB durante 4, 7 e 10 dias. Foram avaliados parâmetros morfológicos (presença de neuritos) e neuroquímicos, através marcadores de diferenciação neuronal (DAT- transportador de dopamina; TH – tirosina hidroxilase; ENS – enolase neurônio específica; NeuN – proteína nuclear de neurônio; Nestina). Ainda, avaliamos parâmetros de estresse oxidativo através da atividade de enzimas antioxidantes e dos níveis de tióis reduzidos. Nossos dados mostraram que as células SH-SY5Y diferenciadas por 7 dias apresentaram mudanças morfológicas e o aumento do imunoconteúdo de todos os marcadores neuronais testados, e a concomitantemente diminuição do imunoconteúdo de nestina (marcador de células indiferenciadas). Além disso, o fenótipo neuronal apresentou uma maior atividade de alguns sistemas antioxidantes. Também foi avaliada a citotoxicidade frente ao H2O2 e à 6-OHDA nos dois fenótipos. As células diferenciadas se mostraram mais resistentes ao dano causado pelo H2O2 e mais sensíveis à 6-OHDA. Dessa forma, a citotoxicidade da 6-OHDA pode estar relacionada com o aumento do imunoconteúdo do DAT, visto que a neurotoxina entra na célula dopaminérgica através deste transportador. Interessantemente, as células diferenciadas apresentaram aumento dos níveis da proteína neuroprotetora DJ-1, que está relacionada a uma forma prematura de Parkinsonismo em humanos. Após a caracterização do modelo, nós utilizamos o fenótipo diferenciado como plataforma experimental para o screening de compostos neuroprotetores como os organocalcogênios. Nós determinamos a citotoxidade destes compostos em células diferenciadas da linhagem de neuroblastoma SH-SY5Y. A partir destes dados, foram selecionados compostos com baixa citotoxicidade e avaliamos a morfologia celular (densidade de neuritos). Nós verificamos que antes da perda de viabilidade, ocorre a perda de neuritos, sendo que este parâmetro é outra vantagem do modelo de célula diferenciada para avaliação da neurototoxicidade. Ainda, verificamos que estes compostos são capazes de prevenir o dano celular causado pela 6-OHDA. Além disso, nós caracterizamos a capacidade do modelo de ser manipulado geneticamente através da transfecção e superexpressão de plasmídeo contendo a proteína verde fluorescente, onde verificamos que a expressão é mantida durante a diferenciação. Dessa forma, nossos dados mostraram a eficácia da padronização da diferenciação induzida por AR da linhagem de neuroblastoma humano SH-SY5Y, pois estas células apresentam características morfológicas e neuroquímicas adequadas de neurônio dopaminérgico bem como pode ser aplicado não só para avaliação de neurototoxicidade/neuroproteção, mas também pode ser manipulado geneticamente. / The molecular mechanisms underlying the massive cellular loss found in the nigrostriatal pathway during the progression of Parkinson’s disease (PD) are not completely understood. Therefore, it is important to develop more suitable experimental models to study the molecular mechanisms of this neurodegenerative disorder. Proliferative human neuroblastoma cell line SH-SY5Y challenged with neurotoxins (e.g.: 6-hydroxydopamine – 6-OHDA) has been widely used as an in vitro model for PD. Many lines of evidence showed that this cell line differentiates with the combination of lower fetal bovine serum (FBS) and retinoic acid (RA) to dopaminergic-like neural cell. However, there are few studies addressing the differences between proliferative and RA-differentiated SH-SY5Y cells as well as their responses to 6-OHDA cytotoxicity. Moreover, there is no consensus in differentiation protocols. Hence, the objective of this study was to establish a RAinduced dopaminergic differentiation protocol and also evaluate its capabilities for drug screening of neurotoxicity/neuroprotection and genetic manipulation. Exponentially growing SH-SY5Y cells were maintained with DMEM/F12 (1:1) medium plus 10% FBS. Differentiation was triggered by the combination of 10 μM of RA plus medium with 1% of FBS during 4, 7 and 10 days. We evaluated the cell morphology (neurites) and the neuronal markers (Dopamine Transporter- DAT, Tyrosine Hydroxylase-TH, Neuron-Specific Enolase-NSE, Neuronal Nuclei Protein- NeuN, and Nestin immunocontent). Furthermore, we verify the activity of antioxidant enzymes and the reduced thiol levels. Our data demonstrated that SH-SY5Y cells differentiated for 7 days expresses all neuronal markers tested with concomitant decrease in nondifferentiated marker (nestin). Besides, they showed a higher activity of some antioxidant systems. We also evaluated the cytotoxicity of H2O2 and 6-OHDA in both phenotypes. Differentiated cells are more resistant to H2O2 and more sensitive to 6- OHDA. Hence, the damage caused by 6-OHDA could be related with the increase of DAT immuncontent, because this neurotoxin enters into the dopaminergic cell through this transporter. Interestingly, the differentiated cells have more levels of neuroprotective DJ-1 protein, which is related with a juvenile Parkinsonism. After establish the conditions of differentiation, we used the neuronal phenotype to perform a drug screening with organoselenide compounds. We verify the cytotoxicity of these compounds in differentiated cells. From these data, we selected compounds with low toxicity and evaluated the cell morphology (neurites density). We verify that before the loss of viability, there is a loss of neurites. This parameter is another advantage of the differentiated cells model to neurotoxicity evaluation. Moreover, these compounds were able to prevent neuronal cell death caused by 6-OHDA. We also characterized the ability of the model to be manipulated genetically through transfection and overexpression of a green fluorescent protein (GFP) plasmid. We verify that the expression of GFP is maintained during the differentiation. Hence, our data showed the efficacy of the RA-induced differentiation protocol of the neuroblastoma cell line SH-SY5Y, because these cells have morphological and neurochemical characteristics of dopaminergic neurons. Furthermore, the neuronal phenotype can be applyed not only to evaluate neurocytotoxicity/neuroprotection but also can be manipulated genetically.

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Evidências crescentes mostram que os distúrbios de sono associados à doença de Parkinson (DP) são mais relacionados à doença per se, do que apenas fenômenos secundários. Dados apresentados pela literatura sugerem a hipótese de que o sistema dopaminérgico nigroestriatal esteja envolvido na regulação de padrões de sono. Demonstrou-se no presente trabalho que uma lesão de 50% dos neurônios dopaminérgicos residentes na substância negra pars compacta (SNpc) foi capaz de gerar um prejuízo em diversos parâmetros de sono em ratos. Essa redução neuronal provocou uma diminuição importante na porcentagem de sono paradoxal durante os três primeiros dias de registro de sono. Observou-se também uma forte correlação (r=0.91) entre o número de neurônios e a porcentagem de sono paradoxal. A partir disso, propomos que os neurônios dopaminérgicos presentes na SNpc possuem um papel fundamental para a regulação dos padrões de sono, particularmente na promoção de sono paradoxal. Em outro experimento, apresentamos evidências de que a proteína tirosina hidroxilase (TH) encontra-se com sua expressão reduzida no sistema dopaminérgico nigroestriatal após um período de 24 h de privação de sono paradoxal (PSP) em camundongos. De acordo com esses resultados, sugerese que a redução da expressão da TH, produzida pela (PSP), possa explicar em parte a existência da supersensibilidade dopaminérgica de receptores D2. As implicações dessas alterações podem reverberar diretamente sobre anormalidades motoras e de sono encontradas em pacientes portadores da DP. xiii Achados eletrofisiológicos demonstraram que o bloqueio dos receptores D2 (por haloperidol) produziu uma redução de sono paradoxal durante o período de rebote, realizado após 96 h de PSP. Essa redução foi acompanhada por um incremento de sono de ondas lentas, o que possivelmente tenha ocorrido em decorrência de um observado aumento de eficiência de sono. Os resultados também indicaram que a administração de piribedil não pôde gerar um aumento adicional de sono paradoxal. Sugerimos a existência de uma ação particular da neurotransmissão dopaminérgica recaindo sobre a ativação dos receptores D2. As evidências demonstradas no presente trabalho e na literatura permitem sugerir que os neurônios dopaminérgicos presentes na SNpc e na aérea tegmental ventral podem ser considerados essenciais para a regulação de sono, em particular no disparo e manutenção do sono paradoxal, respectivamente. Propõe-se que o paradigma que envolve a dopamina como sendo responsável apenas pela vigília, não é totalmente acurado. A teoria proposta nessa tese alega que esse neurotransmissor pode apresentar uma importante participação em ambos os estados: vigília e sono, e que cada estado deva ser gerado por intermédio de diferentes graus de modulação dopaminérgica. A conclusão delineada a partir desses achados é que a dopamina apresenta implicações significantes na regulação de sono, e essa condição particular deve ser considerada em relação ao tratamento de pacientes com a DP. / Dopamine (DA) is critically involved in regulating neural processes responsible for complex movements and emotions. Alterations in central dopaminergic neurotransmission have been implicated in important neurological and psychiatric disorders such as Parkinson’s disease (PD) and schizophrenia. In addition, DA has recently been recognized as instrumental in the regulation of sleep-wake states. Herein, we present evidence that tyrosine hydroxylase (TH) is down-regulated in the nigrostriatal pathway after 24 h of sleep deprivation (SD) in mice. To identify the involvement of DA in SD and sleep rebound (R) we administered reserpine (1 mg/kg) associated to a-methyl-p-tyrosine (aMT) (250 mg/kg) to produce DA depletion, and rotenone (10 mg/kg) to increase striatal DA turnover. Behavioral tests (catalepsy, grasping and open-field) were conducted to evaluate muscular rigidity and motor alterations inflicted by the drugs immediately after SD and R. Western blot and immunohistochemistry demonstrated that SD alone produced important down-regulation on TH protein expression within the substantia nigra (SN), without affecting the number of dopaminergic neurons. Pharmacological depletion of DA or increase of its turnover affected the entire nigrostriatal pathway. We propose that downregulation of TH expression produced by SD greatly explains the existence of supersensitivity of dopaminergic D2 receptors, especially along the nigrostriatal pathway, and suggest a novel role of DA in the mediation of sleep-wake states as a consequence of the modulation of TH protein expression along that pathway. The implications of these alterations may directly reverberate in motor and sleep abnormalities found in patients with PD. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

INTRODUÇÃO: A Estimulação cerebral profunda (ECP) do núcleo subtalâmico (NST) é uma técnica neurocirúrgica utilizada para tratamento de indivíduos com Doença de Parkinson (DP) idiopática quando a terapia farmacológica não atinge mais a sua finalidade. Entretanto, a ECP provoca deterioração nos sintomas fonoarticulatórios e fluência verbal. Durante as testagens vocais estudos mostram grande variação do intervalo entre a desativação da ECP e o início das tarefas vocais sendo inconclusivo seu efeito. Este estudo teve o objetivo de verificar as modificações acústicas da voz, fala, fluência verbal fonológica e motoras durante a ECP do NST ligado e desligado em pacientes com DP. MÉTODOS: Foram avaliados 16 pacientes com DP submetidos ao implante de ECP do NST, em tratamento estabilizado e sob efeito da medicação antiparkinsoniana. As avaliações acústicas da voz e da fluência verbal fonológica foram realizadas no início e 5, 15, 30, 45 e 60 minutos após o ECP ser desligado. Após religar o neuroestimulador estas avaliações foram repetidas aos 5 e 15 minutos. Já as avaliações motora global através do UPDRS III e perceptiva da fala (item 18 da UPDRS III) foram realizadas no início e 5, 30 e 60 minutos após o ECP ser desligado, após religar o neuroestimulador estas avaliações foram repetidas aos 5 minutos. RESULTADOS: Um padrão sequencial de retorno dos sinais parkinsonianos foi observado, com agravamento do tremor e da bradicinesia logo nos primeiros 5 minutos após o ECP desligado, já a rigidez retornou de forma significativa após 30 minutos do aparelho desligado. Os sintomas se estabeleceram quando o ECP foi religado. A fala apresentou melhora significativa após 5 minutos do ECP desligado, apresentando escores semelhantes ao baseline após o aparelho ser religado. O parâmetro acústico Shimmer apresentou melhora significativa nos momentos 30, 45 e 60 minutos após o ECP desligado e também aos 5 minutos após religar o ECP, a proporção ruído-harmônico apresentou piora significativa nos momentos 15, 30, 45 e 60 minutos após o ECP desligado. Os demais parâmetros não apresentaram alteração significativa. Os resultados da fluência verbal não apresentou alteração significativa em nenhum dos momentos testados. CONCLUSÃO: A descontinuação da ECP do NST acarreta um agravamento dos sintomas motores, sendo o tremor o primeiro sintoma a reaparecer seguido da bradicinesia e rigidez. Em contrapartida, pacientes submetidos a este procedimento sofrem de alterações da fala e voz que pioram com estimulador ligado. / INTRODUCTION: Deep brain stimulation (DBS) of subthalamic nucleus (STN) is a technique used for neurosurgical treatment of patients with Parkinson's disease (PD) idiopathic when drug therapy does not achieve its purpose more. However, DBS causes deterioration symptoms phonoarticulatory and verbal fluency. During testing vocal studies showed wide variation in the interval between the deactivation of the DBS and the beginning of the tasks being inconclusive vocal effect. This study aimed to check the voice acoustic, speech, phonologic verbal fluency and motor changes during the on and off states of the subthalamic nucleus (SNT) deep brain stimulation (DBS) in patients with Parkinson’s disease (PD). METHODS: Sixteen PD patients with a STN DBS and stable antiparkinsonian medication were evaluated. Voice acoustics and verbal fluency were assessed with DBS on and after 5, 15, 30, 45, 60 minutes after the device was turned off and after 5 and 15 minutes of DBS was on again. Motor assessment was done using the UPDRS III and speech perception with the DBS on and after 15, 30, 60 minutes of DBS off and 5 minutes after DBS on again. RESULTS: A sequence pattern was identified for the return of the parkinsonian signs. There is an aggravation of the tremor and bradykinesia after 5 minutes of DBS off while rigidity aggravates after 30 minutes. Speech showed a significant improvement after 5 minutes of DBS off. Symptoms approached baseline 5 minutes after the DBS was turned on. The Shimmer acoustic parameters showed significant improvement after 30 minutes of DBS off and after 5 minutes of DBS on, the noise-harmonic ratio showed significant worsening after 15 minutes of DBS off. The results of verbal fluency did not 13 change significantly in any of the times tested. CONCLUSION: Discontinuation of the DBS of the subthalamic nucleus carries a worsening of motor symptoms, the tremor being the first symptom to reappear followed by bradykinesia and rigidity. In contrast, patients undergoing this procedure suffer from speech and voice changes that worsen with stimulator is turned on.