Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-05-19T12:14:27Z No. of bitstreams: 1 Amanda Emmanuelle Sales.pdf: 4982712 bytes, checksum: 90011cbdafe7a0363213b2fff5735b44 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T12:14:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amanda Emmanuelle Sales.pdf: 4982712 bytes, checksum: 90011cbdafe7a0363213b2fff5735b44 (MD5) Previous issue date: 2015-12-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Fibrinolytic proteases are enzymes that degrade fibrin, the main component of blood clots. The accumulation of this protein leads to thrombosis responsible for cardiovascular disease including myocardial infarction. A promising alternative to thrombolytic therapy has been the production of these enzymes by microorganisms which promotes low cost, high efficiency and capacity for large scale production. This study aimed to select species of filamentous fungi isolated from Caatinga soil samples - Pernambuco - Brazil and assess their potential for production of proteases with fibrinolytic activity. Among the 36 isolates studied, 58% showed fibrinolytic activity above 100 U/mL. The microorganism with the higher activity in terms of enzyme production was Mucor subtilissimus UCP 1262 with 415 U/mL. Further optimization of the fermentation process resulted in the production of 1075 U/mL of enzymatic activity. The fibrinolytic enzyme had a capacity of enzymatic degradation of the blood clot of 16.7 % in vitro. Extraction of fibrinolytic protease produced at submerged fermentation was carried out using a PEG/ammonium sulphate aqueous two-phase system (ATPS). PEG 8000 15% and 25% ammonium sulphate were selected as the most appropriate components for extraction with Fibrinolytic Activity in salt phase: 345 U/mL; K: 0.65; Y: 253.1 % and FP: 8.8. The fibrinolytic enzyme from Mucor subitilissimus UCP 1262 was pre-purified using extractive fermentation in PEG and ammonium sulphate ATPS, in which the fungal strain was able to grown even in high salt concentration, produced and extracted simultaneously to the PEG phase. A novel protease with fibrinolytic activity was purified also by chromatographic methods using a two-step purification protocol. Compared to the crude enzyme extract, the specific activity of the enzyme increased 5.30 fold with a recovery of 36.31%. The initial crude extract with the enzyme was pre-purified using acetone precipitation and adsorbed by ion exchange chromatography on DEAE-sephadex G50. The two-dimensional electrophoresis system (2DE) coupled with SDS-PAGE showed a single protein band of approximately 15.3 kDa and isoelectric focusing point of 3.9, exhibiting a nature as an acidic enzyme. Additionally, the activity was slightly inhibited by EDTA, but significantly inhibited by PMSF and also had a higher affinity for the N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe p-nitroanilide (SAApNA) and azocasein substrates, suggesting to be a chymotrypsin-like protease. Protein unfolding induced by pH and temperature were applied to study the protein conformational changes and showed from the thermal denaturation curve, change in ellipticity at 222 nm, indicated Tm (Melting temperature) of the protein to be 58.14°C. The far UV circular dichroism (CD) of the fibrinolytic protease showed the secondary structure with most content percentage of α-helix. These results demonstrate an economical, viable enzyme purification protocol. And studying the purified fibrinolytic enzyme have established basis for elucidating mechanisms responsible for the changes in conformation of the new fibrinolytic enzyme under varying conditions of temperature and pH. This novel fibrinolytic enzyme may represent a new source of therapeutic agents to treat thrombosis diseases. / Proteases fibrinolíticas são enzimas que degradam a fibrina, o principal componente dos coágulos sanguíneos. O acúmulo da fibrina nos vasos sanguíneos leva a trombose, fenômeno responsável por doenças cardiovasculares. Uma alternativa promissora para a terapia trombolítica tem sido a produção dessas enzimas por micro-organismos que promovem baixo custo, alta eficiência e capacidade de produção em larga escala. Produzir proteases fibrinolíticas por linhagens de fungos filamentosos por fermentação submersa e desenvolver o processo de purificação utilizando Sistemas de Duas Fases Aquosas (SDFA) e cromatografia líquida, além de caracterizar bioquímico e estruturalmente a enzima. Dentre as 36 espécies estudadas, 58% apresentaram atividade fibrinolítica acima de 100 U/mL A espécie com maior atividade foi Mucor subtilissimus UCP 1262 com 415 U/mL. Foram realizados processos fermentativos que resultaram na produção de 1075 U/mL de atividade fibrinolítica, com capacidade de degradação do coágulo sanguíneo de 16,7% in vitro. A extração da protease fibrinolítica produzida por fermentação submersa foi realizada utilizando o sistema de duas fases aquosas (SDFA) com Polietileno glicol (PEG) e sulfato de amônio. O PEG 8000 (g/mol) a 15% e sulfato de amônio a 25% foi selecionado como a condição mais eficiente para a extração da enzima na fase do sal, apresentando 345 U/mL de atividade, coeficiente de partição K=0,65; Recuperação Y=253,1% e Fator de purificação FP=8,8. A protease fibrinolítica produzida por Mucor subitilissimus UCP 1262 foi também pré-purificada utilizando fermentação extrativa com SDFA (PEG e sulfato de amônio), onde a espécie fúngica foi capaz de crescer mesmo em altas concentrações de sal, produzir e extrair simultaneamente para a fase do PEG do sistema. A protease fibrinolítica foi purificada também através de métodos cromatográficos utilizando um protocolo de purificação com dois passos. O extrato bruto inicial com a enzima foi pré-clarificado utilizando precipitação com acetona e adsorção em cromatografia de troca-iônica em DEAE-sephadex G50, o qual foi capaz de aumentar a pureza em 5,30 vezes com a recuperação de 36, 31%. O sistema de eletroforese bidimensional 2DE acoplado ao SDS-PAGE mostrou uma banda única de aproximadamente 15,3 kDa e a focalização isoelétrica apresentou o ponto isoelétrico no pH 3,9, exibindo uma natureza de enzima ácida. Adicionalmente a enzima foi significativamente inibida por PMSF e alta afinidade catalítica para o substrato sintético amidolítico N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe p-nitroanilide (SAApNA) e azocaseína. Sugerindo ser uma serino-protease semelhante à quimotripsina. Desdobramento proteico induzido por pH e temperatura foram aplicados para estudar as mudanças conformacionais da enzima e mostraram através da curva de desnaturação térmica, mudança da elipticidade a 222 nm, indicando um Tm (Temperatura de desnaturação) da proteína de 58,14°C. O dicroísmo circular no UV distante (far UV CD) da protease fibrinolítica mostrou a estrutura secundária da proteína com maior teor de α-hélix. Estes resultados demonstram um protocolo de purificação de enzimas eficiente. E o estudo da enzima purificada estabeleceu bases para elucidar mecanismos responsáveis pelas mudanças de conformação de uma nova enzima fibrinolítica sob a variação de condições variadas de temperatura e pH. Esta enzima fibrinolítica pode representar uma nova fonte de agente terapêutico no tratamento de doenças trombolíticas.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-05-19T12:41:06Z No. of bitstreams: 1 Tatiana Pereira Shiu Lin Liu.pdf: 880008 bytes, checksum: 5eed3ce34aa09053744a3f45eca49b25 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T12:41:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiana Pereira Shiu Lin Liu.pdf: 880008 bytes, checksum: 5eed3ce34aa09053744a3f45eca49b25 (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / Tannin acylhydrolase (TAH) known as tannase (E.C:3.1.1.20) is an enzyme which hydrolizes esters and lateral bonds of hydrolizable tannins. The tannic acid is a typical hydrolizable tannin, which can be hydrolized by tannase along with glucose and gallic acid. Tannase can be obtained from vegetables, animal and microbial sources. From those, the last is the most important source to obtain the enzyme. Green tea has several substances, among which catechins are a major source of antioxidant, which help in maintaining the organism.The activity and purification of tannase produced by Aspergillus melleus URM 5827 was evaluated by semi solid fermentation using seeds of mangosteen (Garcinia humilis (Vahl) C. D. Adam) as substract. Forty two cultures fungical cultures of Aspergillus were used for qualitative selection purposes in order to verify potential for tannase production. After selecting cultures, it was performed a semi solid fermentation using seeds of mangosteen as substrate. A factorial planning (2³) was used to verify the influence of production variables such as: quantity of substrate; initial moisture and amount of tannic acid over tannase activity. The purification was evaluated by ionic change chromatography at DEAE-Sephadex. Maximum activity was produced by Aspergillus melleus URM 5827 with 452.55 units per gram of dry-based substract (U/gss) using 5.0 grams of substrate, with initial moisture of 60% and 2% of tannic acid through 48 hours fermentation. The purified enzyme has a molecular weight of 69.52 kDa on Superdex G-75, while on SDS-PAGE electrophoresis showed 66.5 kDa. As for the characterization, the optimum pH and temperature was 5.5 and 40ºC, respectively, achieving thermostability at 30ºC. Coughing increases the antioxidant activity of green tea significantly. The results obtained in this study show the promising potential of tannase produced by Aspergillus melleus URM 5827 and its use in improving the antioxidant potential of green tea. / Tanino acil hidrolase (TAH) conhecida como tanase (E.C:3.1.1.20) é uma enzima que hidrolisa ésteres e ligações laterais de taninos hidrolisáveis. O ácido tânico é um típico tanino hidrolisável, que pode ser hidrolisado por tanase em glicose e ácido gálico. A tanase pode ser obtida a partir de fontes vegetais, animais e microbianas, sendo o meio microbiológico a fonte mais importante de obtenção desta enzima. O chá verde apresenta várias substâncias, dentre elas, as catequinas que são uma importante fonte de antioxidante, que ajudam na manutenção do organismo.A atividade e a purificação de tanase produzida por Aspergillus melleus URM 5827 foi avaliada por fermentação em estado sólido utilizando como substrato sementes de achachairú (Garcinia humilis (Vahl) C. D. Adam). Foram utilizadas 42 culturas de fungos do gênero Aspergillus para seleção qualitativa das culturas com potencial para produção da tanase. Com a cultura selecionada foi realizada uma fermentação em estado sólido utilizando sementes de achachairú como substrato. Um planejamento fatorial (23) foi utilizado para analisar a influência das variáveis de produção: quantidade de substrato, umidade inicial e quantidade de ácido tânico sobre a atividade da tanase. A purificação foi avaliada por cromatografia de troca iônica em DEAE- Sephadex. A máxima atividade foi produzida por Aspergillus melleus URM 5827 com 452,55 unidades por grama de substrato na base seca (U/gss) utilizando 5,0 g de substrato, com umidade inicial de 60% e 2,0% de ácido tânico em 48 horas de fermentação. A enzima purificada apresentou peso molecular de 69,52 kDa em Superdex G-75, enquanto que em eletroforese SDS-PAGE apresentou 66,5 kDa. Quanto a caracterização, apresentou pH e temperatura ótima de 5,5 e 40ºC respectivamente, obtendo termoestabilidade a 30ºC. A atividade enzimática na presença de íons, surfactantes e inibidores de protease, foi inibida na presença dos íons ZnCl2, ZnSO4 e dos surfactantes triton X-100, SDS, reduzida com os íons CaCl2, KCl, NaCl, MgSO4, CuSO4, dos surfactantes Tween 20, Tween 80 e dos inibidores de protease EDTA e β-mercaptoetanol. A tanase aumentou a atividade antioxidante do chá verde significativamente. Os resultados obtidos no presente estudo, mostram o potencial promissor da tanase produzida por Aspergillus melleus URM 5827 e na sua utilização no aumento do potencial antioxidante do chá verde.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-15T13:07:09Z No. of bitstreams: 1 Aurenivia Bonifacio de Lima.pdf: 158583 bytes, checksum: c8dae3b865cbbb770850897214bbac02 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T13:07:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aurenivia Bonifacio de Lima.pdf: 158583 bytes, checksum: c8dae3b865cbbb770850897214bbac02 (MD5) Previous issue date: 2008-02-15 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Physiologic and biochemical aspects of the two corianders cultivate submitted to the salinity were evaluated, have in view the effect on the development and the oxidative nature of the salt stress. Coriander plants of two cultivates (Tabocas and Verdão) were submitted at the tree levels of the NaCl (0, 50 and 100 mol.m-3). Were observed, weekely, the leaves number (LN) and the height (H). The fresh and dry biomass of the shoot (FBS and DBS) and root (FBR and DBR) was quantified and it was calculated the succulency of the shoot (SCS) and roots (SCR) and the absolute growth tax (AGT). Were determinate, still, sodium (Na+), chloride (Cl-) and potassium (K+) ions, free proline (FP), soluble protein (SP), total phenols (TP), total soluble carbohydrate (TSC), sucrose (SUC), reduce sugars (RS) analyze and peroxidase (POX) and poliphenol oxidase (PPO) enzimatic ativity. Data were analysed with the ASSISTAT program. Detrimental effects of NaCl were observed in the growth parameters of both cultivate studied, except in LN and DBR (in the cv. Tabocas). The Na+ and Cl- tenors increased while the K+ decreased, in the shoot and roots. The Na/K relationship reached values of up to 1,5. The FP, SP, TP, TSC, SUC and RS levels increased with the added of NaCl in the nutritious solution, as well as the enzymes activities of the POX and PPO. In general, Verdão cultivate it was the better grew in the salinity conditions imposed. / Aspectos fisiológicos e bioquímicos de cultivares de coentro submetidas à salinidade foram avaliados, tendo em vista o efeito sobre o desenvolvimento e a natureza oxidativa do estresse salino. Plantas de coentro de duas cultivare (Tabocas e Verdão) foram submetidas a três concentrações de NaCl (0, 50 e 100 mol.m-3). Foram observados, semanalmente, o número de folhas (NF) e a altura (ALT). Quantificou-se a biomassa fresca e seca da parte aérea (BFPA) e das raízes (BFR) e calculou-se a suculência da parte aérea (SCPA) e das raízes (SCR) e a taxa de crescimento absoluto (TCA). Determinaram-se, ainda, as concentrações de íons sódio (Na+), cloreto (Cl-) e potássio (K+), prolina livre (PL), proteína solúvel (PS), fenóis totais (FT), carboidratos solúveis totais (CST), sacarose (SAC), açucares redutores (AR) e a atividade enzimática de peroxidase (POX) e polifenoloxidase (PPO). Os dados foram analisados com o programa ASSISTAT. Foram observados efeitos danosos do NaCl nos parâmetros de crescimento em ambas cultivares, exceto no NF e BSR (na cv. Tabocas). Os teores de Na+ e Cl- aumentaram enquanto que os de K+ decresceram, na parte aérea e nas raízes. A relação Na/K alcançou valores de até 1,5. Os concentrações de PL, PS, FT, CST, AR e SAC acresceram com a adição do NaCl à solução nutritiva, bem como as atividades das enzimas POX e PPO. De modo geral, a cv. Verdão foi a que melhor se desenvolveu nas condições de salinidade impostas.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-05T13:26:20Z No. of bitstreams: 1 Gileno Vitor Mota Lima.pdf: 2181747 bytes, checksum: c8dd011d95738d15e850b0e9be7650fd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T13:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gileno Vitor Mota Lima.pdf: 2181747 bytes, checksum: c8dd011d95738d15e850b0e9be7650fd (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) is a fruit tree found in various regions of Brazil. It features a large adaptive plasticity and is exposed to different environmental conditions that may confer abiotic stress induced by several factors, influencing the composition and production of secondary metabolites of the plant, including latex.The protein metabolites (oxidases and proteases) present in the latex, can act as a defense mechanism, which involves ranging from environmental fluctuations to attacks by pathogens and predators. The secondary metabolites in plants are related to most of these therapeutic properties, making them a great source of drugs which have shown an incredible healing power in its natural state or as a source of new antimicrobial agents. The proteases are a class of enzymes which represent about 60% of the world market for enzymes. Proteases originating from plants have particular significance for medicine and industry, as exhibit activity in a wide range of temperature and pH. Proteases are one of the major ingredients of a wide variety of detergents from those used for household cleaning, even those used for cleaning contact lenses and dentures. Being that the majority of these proteases is used in formulations of powder detergents, accounting for around 25% of the total market of enzymes. Most of the production costs for a biological product is in the purification strategy. The aqueous two-phase systems (ATPS) play a strategic role because the two phases are formed mainly (60-95%) by water which minimizes the possibility of denaturation and loss of biological activity, providing an effective and economically viable alternative to new bioprocesses. This study aimed to evaluate in vivo biochemical responses of three lattices access (PE, PB and RN) of mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) compared to water deficit due to rainfall variation, but also evaluate the biotechnological potential of latex of this specie. The latex of mangaba tree was collected in Experimental Station José Irineu Cabral, unit belonging to the State Company for Agricultural Research of Paraíba SA (EMEPA-PB) located in João Pessoa (PB), through incisions in the stem with cutting stainless steel material and subsequently stored under refrigeration at -20 °C until analysis. The activity of SOD, APX, CAT, PPO enzymes and the content of H2O2 was determined. For evaluation of antimicrobial activity, we created a standard solution of latex mangaba tree protected under BR 102013018181-1 (Patent Registration Request) number nine strains of bacteria were used: Escherichia coli (UFPEDA 224), Staphylococcus aureus (02 UFPEDA), Klebsiella pneumoniae (UFPEDA 396), Candida albicans (UFPEDA 1007), Pseudomonas aeruginosa (UFPEDA 416), Micrococcus luteus, Enterococcus faecalis (UFPEDA 138), Bacillus subtilis (UFPEDA 86) and Staphylococcus aureus (32) (isolated from goat mastitis ) and twenty-eight isolates of Staphylococcus, with fourteen causes of cattle mastitis and the other fourteen isolates causing goat mastitis that were kept in test tubes containing Mueller-Hinton broth for 24 hours at 37 º C for subsequent inoculation on plates Petri. We evaluated the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). For the pre-purification and characterization of proteases of mangabeira latex was used ATPS (PEG-phosphate). Subsequently, we evaluated the compatibility and stability of the crude extract and pre-purified with commercial detergents. From the results obtained, highlights the potential use of latex for understanding the antioxidant metabolism of plants mangaba tree subjected to conditions of oxidative stress, but also to obtain products for industrial purposes, allowing the strengthening of veterinary and chemical poles at the regional and nationally. / A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) é uma árvore frutífera encontrada em várias regiões do Brasil. Apresenta uma grande plasticidade adaptativa e está exposta a distintas condições ambientais que podem conferir estresse abiótico induzido por fatores diversos, exercendo influência na produção e composição dos metabólitos secundários do vegetal, dentre eles o látex. Os metabólitos proteicos (oxidases e proteases) presentes no látex, podem atuar como mecanismo de defesa, o qual envolve desde flutuações ambientais até ataques por patógenos e predadores. Os metabólitos secundários presentes nas plantas estão relacionados com a maioria das propriedades terapêuticas destas, tornando-as uma grande fonte de medicamentos os quais têm apresentado um incrível poder de cura no seu estado natural ou como fonte de novos agentes antimicrobianos. As proteases compõem uma classe de enzimas que representam cerca de 60% do mercado mundial de enzimas. As proteases originárias de vegetais possuem especial importância para a medicina e para a indústria, pois exibem atividade em ampla faixa de temperatura e pH. As proteases são um dos principais ingredientes de uma grande variedade de detergentes, desde aqueles usados para limpezas domésticas, até àqueles usados para limpeza de lentes de contato e próteses dentárias. Sendo que, a maior parte dessas proteases é utilizada em formulações de detergentes em pó, respondendo por aproximadamente 25% do mercado total de enzimas. A maioria dos custos de produção para um produto biológico reside na estratégia de purificação. Os sistemas de duas fases aquosas (SDFAs) desempenham um papel estratégico pois, as duas fases são formadas predominantemente (60-95%) por água o que minimiza a possibilidade de desnaturação ou perda da atividade biológica, constituindo uma alternativa eficaz e economicamente viável para novos bioprocessos. Este estudo, objetivou avaliar in vivo as respostas bioquímicas dos látices de três acessos (PE, PB e RN) de mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) frente ao déficit hídrico decorrente da variação pluviométrica, como também avaliar o potencial biotecnológico do látex desta espécie. O látex de mangabeira foi coletado na Estação Experimental José Irineu Cabral, unidade pertencente à Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuária da Paraíba S.A. (EMEPA-PB) localizada em João Pessoa (PB), através de incisões no caule com auxílio de material cortante de aço inoxidável, e posteriormente armazenado sob refrigeração à -20°C até o momento das análises. Determinou-se a atividade das enzimas SOD, APX, CAT, PPO e do teor de H2O2. Para avaliação da atividade antimicrobiana, foi elaborada uma solução padrão do látex de mangabeira protegida sob o número BR 102013018181-1 (Pedido de Registro de Patente); foram utilizadas nove cepas de bactérias: Escherichia coli (UFPEDA 224), Staphylococcus aureus (UFPEDA 02), Klebsiella pneumoniae (UFPEDA 396), Candida albicans (UFPEDA 1007), Pseudomonas aeruginosa (UFPEDA 416), Micrococcus luteus, Enterococcus faecalis (UFPEDA 138), Bacillus subitilis (UFPEDA 86) e Staphylococcus aureus (32) (isolado de mastite caprina) e vinte e oito isolados do gênero Staphylococcus, sendo quatorze causadores da mastite bovina e os outros catorze isolados causadores da mastite caprina que foram mantidos em tubos de ensaio contendo caldo Mueller-Hinton por 24 horas em temperatura de 37ºC para posterior inoculação nas placas de Petri. Avaliou-se a concentração mínima inibitória (CMI) e concentração bactericida mínima (CBM). Para a caracterização e a pré-purificação de proteases do látex de mangabeira, utilizou-se SDFA (PEG-Fosfato). Posteriormente, avaliou-se a compatibilidade e estabilidade do extrato bruto e pré-purificado com detergentes comerciais. A partir dos resultados obtidos, evidencia-se a potencialidade da utilização do látex para a compreensão do metabolismo antioxidativo de plantas de mangabeira submetidas à condições de estresse oxidativo, como também a obtenção de produtos com fins industriais, possibilitando o fortalecimento dos pólos veterinário e químico em âmbito regional e nacional.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-14T18:15:40Z No. of bitstreams: 1 Erica de Oliveira Silva.pdf: 1403409 bytes, checksum: a688216735ac9dba44682d2f6e21d83a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-14T18:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erica de Oliveira Silva.pdf: 1403409 bytes, checksum: a688216735ac9dba44682d2f6e21d83a (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In tropical conditions, the availability of phosphorus (P) in the soil for plants is one of the main limiting factors. One of the alternatives to reduce the cost of fertilization is the use of natural phosphate rock. The activity of phosphate solubilizing microorganisms is critical to use of phosphate fertilizers of low solubility. This work aimed to evaluate the changes introduced in the chemical and biological attributes of a Entisol cultivated with corn, by the application of water-soluble phosphate fertilizer, Gafsa rock phosphate and phosphatic biofertilizers. The experiment was conducted in two stages. The first step was performed to produce biofertilizers and biofertilizers in the second stage that showed better solubilization of phosphorus were used in growing corn in pots in the greenhouse The biofertilizers: poultry manure + Gafsa Phosphate (CA + FG) and bovine manure + Gafsa Phosphate (EB + FG), were produced in plastic pots with a capacity of 1000 mL over a period of 60 days. The experimental design was completely randomized in a 6 x 2 factorial with four replications, six sources of phosphorus: Gafsa Phosphate (FG), simple superphosphate (SS), poultry manure + Gafsa Phosphate (CA + FG), bovine manure + Gafsa Phosphate (EB + FG), poultry manure + single superphosphate (CA + SS), bovine manure + simple superphosphate (EB + SS) and two application forms: Incorporated (I) and surface (S). The parameters evaluated were: dry mass of roots and shoots, chemical characterization of soil and plant, biological indicators of soil phosphatase enzyme activity and identification and quantification of organic acids in the soil and rhizosphere. The results were submitted to analysis of variance and the averages of the data separated by the Scott-Knott test, at 5% probability. The lower content of P in the soil was determined by the addition of FG (8.42 mg kg-1). Fertilization with EB + FG and CA + FG so embedded produced the highest dry matter (MSPA), 10.55 and 9.20 g plant-1. The EB + FG showed the highest values of microbial biomass carbon (C-MBC), total organic carbon (COT) and microbial quotient (qMIC) and lower values of basal respiration (C-O2), metabolic quotient (qCO2), water-soluble carbon (CSA), indicating high stability of the microbial activity. The highest activity of alkaline phosphatase was verified by treating EB + SS, while the highest acid phosphatase activity was verified by treatment with EB + FG. The samples analyzed in the gas chromatograph detected the presence of acetic acid, propionic acid and butyric, with acetic more significant. In samples from the rhizosphere of corn plants were identified three low molecular weight acids, acetic, propionic and butyric acids, but in much higher concentrations than in the soil. / Em condições tropicais, a disponibilidade de fósforo (P) no solo para as plantas é um dos principais fatores limitantes da produção. Uma das alternativas para reduzir o custo com as adubações é o uso de fosfatos de rocha natural. A atividade dos microrganismos solubilizadores de fósforo é fundamental para uma utilização dos fertilizantes fosfatados de baixa solubilidade. Este trabalho teve como objetivo avaliar as alterações promovidas nos atributos químicos e biológicos de um Neossolo Regolítico, cultivado com milho, pela aplicação de fertilizante fosfatado hidrossolúvel, fosfato natural de Gafsa e biofertilizantes fosfatados. O experimento foi conduzido em duas etapas. Na primeira etapa foi realizada a produção de biofertilizantes e na segunda etapa os biofertilizantes que apresentaram melhor solubilização de fósforo foram utilizados no cultivo de milho em vasos, em casa de vegetação Os biofertilizantes: Cama de aviário + Fosfato de Gafsa (CA+FG) e Esterco bovino + Fosfato de Gafsa (EB+FG), foram produzidos em potes plásticos com capacidade de 1000 mL durante um período de 60 dias. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 6 x 2 com quatro repetições, sendo seis fontes de fósforo: Fosfato de Gafsa (FG), Superfosfato simples (SS), Cama de aviário + Fosfato de Gafsa (CA+FG), Esterco bovino + Fosfato de Gafsa (EB+FG), Cama de aviário + Superfosfato simples (CA+SS), Esterco bovino + Superfosfato simples (EB+SS) e duas formas de aplicação: Incorporada (I) e em Superfície (S). Os parâmetros avaliados foram: massa seca de raiz e parte aérea, caracterização química de solo e planta, indicadores biológicos do solo, atividade enzimática de fosfatase e identificação e quantificação dos ácidos orgânicos presentes no solo e na rizosfera. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância, sendo as médias dos dados separadas pelo teste Scott-Knott, ao nível de 5% de probabilidade. O menor teor de P no solo foi determinado pela adição de FG (8,42 mg kg-1). A adubação com EB+FG e CA+FG de forma incorporada proporcionaram as maiores produções de matéria seca de parte aérea (MSPA), 10,55 e 9,20 g planta-1. O EB+FG apresentou os maiores valores de carbono da biomassa microbiana (C-CBM), carbono orgânico total (COT) e quociente microbiano (qMIC) e menores valores de respiração basal (C-O2), quociente metabólico (qCO2), carbono solúvel e água (CSA), indicando alta estabilidade da atividade microbiana. A maior atividade da fosfatase alcalina foi verificada pelo tratamento EB+SS, enquanto que a maior atividade da fosfatase ácida foi verificada pelo tratamento com EB+FG. As amostras de solos analisadas no cromatógrafo gasoso detectaram a presença do ácido acético, butírico e propiônico, sendo o acético mais expressivo. Nas amostras da rizosfera de plantas de milho foram identificados três ácidos de baixo peso molecular, acético, butírico e propiônico, porém em concentrações muito mais elevadas do que no solo.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-08-09T13:34:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO MESTRADO_LEILALAISE.pdf: 1763156 bytes, checksum: 413491e06eb1b6bbe4b88cc82def5cd5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T13:34:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO MESTRADO_LEILALAISE.pdf: 1763156 bytes, checksum: 413491e06eb1b6bbe4b88cc82def5cd5 (MD5) Previous issue date: 2016-06-14 / CAPES / A produção de pescado no Brasil cresce em ritmo acelerado, devido principalmente ao desenvolvimento da aquicultura. No entanto, alguns setores da aquicultura, como a larvicultura, ainda apresentam entraves que limitam a produção de espécies promissoras para o cultivo. Dentre os problemas a serem solucionados é possível citar a demanda por alimento vivo ou inerte para aprimorar a produção durante a fase de larvicultura. A espécie Dendrocephalus brasiliensis tem sido alvo de estudos que objetivam conhecer mais detalhadamente o ciclo de vida para a sua utilização como alimento vivo e/ou inerte para o cultivo de organismos aquáticos buscando abordagens que promovam a eficiência de eclosão dos náuplios. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de cistos em condições experimentais e a ação enzimática da quitinase comparado com tratamentos químicos tradicionais no processo de eclosão de náuplios de branchoneta (D. brasiliensis). No ensaio experimental 1, foram testadas concentrações de 0,02mg/mL, 0,1mg/mL e 0,2mg/mL de quitinase comercial em 20 mg de cistos, obtendo a concentração ideal de eclosão a 0,2mg/mL com 88% de eficiência de eclosão. Assim, esta concentração foi utilizada no ensaio experimental 2 e consistiu de um controle (com água destilada) e cinco tratamentos com três réplicas: submetido à quitinase (T1), Hidróxido de cálcio (T2), ácido ascórbico (T3), hidróxido de cálcio e ácido ascórbico (T4) e com hidróxido de cálcio, ácido ascórbico e quitinase (T5). As concentrações de hidróxido de cálcio (HC) e ácido ascórbico (AA) foram estabelecidas de acordo com os resultados de melhor taxa de eclosão relatados na literatura. O T5 apresentou maior eficiência de eclosão (96%) estatisticamente, quando comparado aos demais tratamentos, possibilitando o uso desta enzima juntamente com HC e AA para elaboração de um protocolo de eclosão eficiente. Os resultados deste estudo certamente criarão mais subsídios tecnológicos para o estabelecimento da branchoneta como alimento vivo em cultivos de animais aquáticos. / The fisheries production in Brazil grows in a fast pace due to the aquaculture development. However, some aquaculture sectors, such as the larviculture, have presented some issues which affect the production of species that are really valuable to the cultivation. Among the problems to be solved, it’s possible to mention the live or inert food demand used to improve the production during the larviculture stage. The Dendrocephalus brasiliensis has been the subject of some recent studies that aim to find out its biology and use as live and/or inert food to cultivate aquatic organisms. One of the studied approaches is to increase the efficiency of the nauplii hatching which presents the major delicate lifespan factor of this animal. Therefore, the purpose of this paper was to evaluate the enzymatic action of the chitinase when compared with traditional chemical treatments in the brachoneta nauplii (D. brasiliensis) hatching process. In the first test, it was tested concentrations of 0.02mg/mL, 0.1mg/mL e 0.2mg/mL of commercial chitinase in 20mg of cyst, which resulted the ideal concentration to hatch at 0.2mg/mL with 88% of hatching efficiency. Thus, this concentration was used in the second test and consisted of a control (with distilled water) and five treatments with three replicas: subjected to chitinase (T1), calcium hydroxide (T2), ascorbic acid (T3), calcium hydroxide and ascorbic acid (T4), and calcium hydroxide, ascorbic acid and chitinase (T5). The concentrations of the calcium hydroxide (HC) and ascorbic acid (AA) were established according to the results of best hatching rate described in the literature. The T5 presented a higher hatching efficiency (96%) statistically, when compared to only the use of chitinase, enabling the use of this enzyme combined with HC and AA for the development of an efficient hatching protocol. The results of this study willcreate more technical supportfor the establishment of branchoneta as live feed in cultivations of aquatic animals.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-06-26T14:47:39Z No. of bitstreams: 1 Camila Guedes Valadares.pdf: 460577 bytes, checksum: 33616dfe9cdb0f9fb011d1128541a7d8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-26T14:47:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camila Guedes Valadares.pdf: 460577 bytes, checksum: 33616dfe9cdb0f9fb011d1128541a7d8 (MD5) Previous issue date: 2014-08-04 / Corn is the main ingredient used in energy rations of broilers, significantly contributing to the larger fraction of the final cost of the ration. Research is being carried out with alternative in order to remedy the final value of food production. However, there is little literature on the chemical composition of these alternative so that they can enter in the formulation of diets, thus meeting the nutritional requirements of the animal ingredients. In broilers, we highlight the use of agro-industrial byproducts hominy feed (FRM), and alternative in poultry production. As by-products, these foods may have low nutrient digestibility or availability for use in animal diets. Thus, many studies are being conducted with the use of conventional foods or not the use of enzymes / enzyme complexes, which will aim to increase the availability of nutrients for the best utilization of the animal, thus generating a satisfactory response production. Given the context of an experiment metabolism to evaluate the nutritional value and determine the metabolizable energy of hominy feed (FRM) with and without the use of alpha amylase enzyme was performed. Metabolism of an experiment with 180 male Cobb chicks with 14 days allotted in a completely randomized design with six treatments, five replicates of six birds per treatment was performed. The experimental diets were: T1: basal diet (RR), T2: T1 60% + 40% of FRM, T3: RR + enzyme, T4: T1 60% + 40% of FRM with enzyme addition, T5: RR with replacement 100% of corn by FRM and T6: RR with 100% replacement of corn by FRM with enzyme addition. The chemical composition of the FRM was: 88.33% dry matter (DM), 10.23% crude protein (CP), 15.44% of ether extract (EE), 4.33% ash (CZ) and 4555 kcal / kg of gross energy (GE). The coefficients of apparent metabolizable for FRM with and without addition of enzyme were 73.37 and 76.33% for MS (p = 0.0136), 70.44 and 70.39% for CP (p = 0 , 9595) and 74.79 and 76.77% for EB (p = 0.0128). The values of apparent metabolizable energy (AME) and AME corrected for nitrogen retention (AME) for the FRM (on natural basis) were 3322 ± 19 and 3241 ± 18 kcal / kg and 3334 ± 16 and 3261 ± 17 kcal / kg, respectively, with and without addition of enzyme. The addition of the enzyme had no statistically significant effect on the AME and AME. Enzyme addition improved metabolization coefficient of dry matter and energy. / O milho é o principal ingrediente energético utilizado nas rações de frangos de corte, contribuindo significativamente na maior fração dos custos finais da ração. Pesquisas estão sendo realizadas com alimentos alternativos no intuito de sanar o valor final da produção. Contudo, há pouca literatura sobre a composição química desses ingredientes alternativos para que estes possam entrar na formulação das dietas, atendendo assim as exigências nutritivas do animal. Em frangos de corte, podemos destacar o uso de subprodutos agroindustriais, como o farelo residual de milho (FRM), sendo alternativa na produção avícola. Como subprodutos, esses alimentos podem possuir nutrientes com baixa digestibilidade ou disponibilidade para a utilização nas dietas dos animais. Assim, muitos estudos estão sendo realizados com emprego aos alimentos convencionais ou não o uso de enzimas/complexos enzimáticos, que terão como objetivo aumentar a disponibilidade dos nutrientes para o melhor aproveitamento do animal, gerando assim uma resposta satisfatória da produção. Diante do contexto foi realizado um experimento de metabolismo com objetivo de avaliar o valor nutricional e determinar a energia metabolizável do farelo residual de milho (FRM) sem e com o uso da enzima alfa amilase. Foi realizado um experimento de metabolismo com 180 pintos machos Cobb com 14 dias distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos, cinco repetições e seis aves por parcela. As dietas experimentais foram: T1: ração referência (RR), T2: 60% T1 + 40% de FRM, T3: RR + enzima, T4: 60% T1 + 40% de FRM com adição de enzima, T5: RR com substituição de 100% do milho pelo FRM e T6: RR com substituição de 100% do milho pelo FRM com adição de enzima. A composição química do FRM foi: 88,33 % de matéria seca (MS), 10,23 % de proteína bruta (PB), 15,44 % de extrato etéreo (EE), 4,33 % de cinzas (CZ) e 4555 Kcal/kg de Energia Bruta (EB). Os valores dos coeficientes de metabolizabilidade aparente para o FRM sem e com adição de enzima foram de 73,37 e 76,33% para MS (p=0,0136), 70,44 e 70,39% para PB (p=0,9595) e de 74,79 e 76,77% para EB (p=0,0128). Os valores da energia metabolizável aparente (EMA) e EMA corrigida para retenção de nitrogênio (EMAn) para o FRM (na base natural) foram de 3322±19 e 3241±18 kcal/kg e de 3334±16 e 3261±17 kcal/kg, respectivamente, sem e com adição de enzima. A adição da enzima não teve efeito estatístico significativo sobre os valores de EMA e EMAn. A adição de enzima melhorou o coeficiente de metabolização da matéria seca e da energia.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-05-07T16:00:27Z No. of bitstreams: 1 Alana Emilia Soares de Franca Queiroz.pdf: 1707043 bytes, checksum: a39422a2af368896ba728e0695674283 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T16:00:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alana Emilia Soares de Franca Queiroz.pdf: 1707043 bytes, checksum: a39422a2af368896ba728e0695674283 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / With the increase in public debate on contemporary issues such as population aging and people-related illnesses, the general interest in food and its effects on human health has been increasingly aroused. One of the food products that can act to prevent and reduce some pathologies is the cheese, which presents bioactive peptides capable of modulating a series of reactions in an animal organism. Therefore, it was the objective of this study to obtain and apply Aspergillus tamarii URM6599 milk coagulant enzymes and commercial origin in the preparation of Minas Frescal goat cheeses and to evaluate the biological activities of their peptides. For that, it was necessary to produce and optimize the production of coagulant enzymes by means of the factorial statistical plans 2³ complete and central composite design; to evaluate the production of aflatoxins (B1, G1, B2 and G2) by the microorganism and the toxicity of the enzymatic extract by means of bioassay with Artemia salina and to characterize the obtained enzymatic extract for the optimum pH and temperature, thermal stability and pH, NaCl and CaCl2 and to the effects of ions and inhibitors on coagulant activity. After obtaining and analyzing the enzymatic extract, the cheeses were produced and their peptides extracted for evaluation of antioxidant, antihypertensive and antimicrobial activities. From the statistical planning, the enzymatic production was optimized for an activity of 289.16 U.mL-1; the microorganism did not produce aflatoxins in any of the tests carried out and the LD50 of the A. salina nauplii was 683 μg.mL-1, considered of low toxicity. The enzymes presented optimum performance at 70 ºC and pH at 5.5; activity above 50% at temperatures below 60 °C and activity above 60% at acid and alkaline pH values for 1 hour. The enzymes were inhibited by PMSF and pepstatin A, suggesting the existence of serine and aspartic proteases in the crude extract. The enzymes were also tolerant to metal ions, NaCl and CaCl2. The peptides of both cheeses presented antioxidant, antihypertensive and antimicrobial activities. In view of the above, it is observed that the coagulant enzymes produced in the study demonstrate potential use in the elaboration of Minas coolcal goat cheese. In addition, the results demonstrate that Minas Frescal type cheese produced with goat milk is an excellent source of bioactive peptides. / Com o aumento no debate público acerca de questões contemporâneas como o envelhecimento da população e as doenças relacionadas aos estilos de vida adotados pelas pessoas, têm-se cada vez mais despertado o interesse geral sobre a alimentação e seus efeitos sob a saúde humana. Um dos produtos alimentícios que pode atuar prevenindo e reduzindo algumas patologias é o queijo, que apresenta peptídeos bioativos capazes de modular uma série de reações em um organismo animal. Diante disso, foi objetivo desse estudo obter e aplicar enzimas coagulantes de leite de Aspergillus tamarii URM6599 e de origem comercial na elaboração de queijos caprinos Minas Frescal e avaliar as atividades biológicas de seus peptídeos. Para tanto, foi necessário produzir e otimizar a produção de enzimas coagulantes por meio dos planejamentos estatísticos fatorial completo 2³ e delineamento composto central; avaliar a produção de aflatoxinas (B1, G1, B2 e G2) pelo micro-organismo e a toxicidade do extrato enzimático por meio de bioensaio com Artemia salina e caracterizar o extrato enzimático obtido quanto ao pH e temperatura ótimos, estabilidade térmica e ao pH, a NaCl e CaCl2 e aos efeitos de íons e inibidores na atividade coagulante. Após obtenção e análise do extrato enzimático, os queijos foram produzidos e seus peptídeos extraídos para avaliação das atividades antioxidantes, anti-hipertensivas e antimicrobianas. A partir dos planejamentos estatísticos, a produção enzimática foi otimizada para uma atividade de 289,16 U.mL-1; o micro-organismo não produziu aflatoxinas em nenhum dos testes realizados e a DL50 dos náuplios de A. salina foi de 683 μg.mL-1, considerada de baixa toxicidade. As enzimas apresentaram atuação ótima aos 70 ºC e pH em 5,5; atividade acima dos 50% em temperaturas abaixo de 60 ºC e atividade acima dos 60% em valores de pH ácidos e alcalinos, por 1 hora. As enzimas foram inibidas por PMSF e pepstatina A, sugerindo a existência de serino e aspártico proteases no extrato bruto. As enzimas também foram tolerantes a íons metálicos, NaCl e CaCl2. Os peptídeos de ambos os queijos apresentaram atividades antioxidantes, anti-hipertensivas e antimicrobianas. Diante do exposto, observa-se que as enzimas coagulantes produzidas no estudo demonstram potencial de uso na elaboração de queijo Minas Frescal caprino funcional. Ademais, os resultados demonstram que o queijo tipo Minas Frescal produzido com leite caprino é uma excelente fonte de peptídeos bioativos.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-06-15T20:56:23Z No. of bitstreams: 2 Dissertacão - Petain Jose Ferreira Neto - 2015.pdf: 1935098 bytes, checksum: 58b97940c1a11dda51ddc983a41e4bd9 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-28T13:06:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacão - Petain Jose Ferreira Neto - 2015.pdf: 1935098 bytes, checksum: 58b97940c1a11dda51ddc983a41e4bd9 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T13:06:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacão - Petain Jose Ferreira Neto - 2015.pdf: 1935098 bytes, checksum: 58b97940c1a11dda51ddc983a41e4bd9 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) Previous issue date: 2015-07-13 / The Cerrado is the second largest biome in Brazil. Such an environment has a different soil several other regions. There are various living beings in this biome, among them, the actinobacteria. They are microorganisms whose cell wall Gram-positive, >50% G+C (guanine + cytosine) in its DNA, produce substances with high economic value. Actinobacteria are major producers of enzymes useful to humans. L-asparaginase enzyme is used in acute limphoblastic leukemias therapy (ALL) also being used in the pre-treatment of foods rich in reducing sugars, inhibiting the formation of acrylamide. The aim of this study was to produce L-asparaginase enzyme isolated from a soil actinobacteria, characterize the enzyme and identify the species of bacteria isolated. A soil sample from Cerrado was collected and submited to a pretreatment. Chemotaxis of Actinoplanetes spores used for the selection of this organism. Nineteen morphspecies were recovered. We used a medium inducing L-asparaginase, and the pink halo around the colony measured. Isolated BC-A.1 produced the largest halo in less time, with an average enzyme content of 4.1. After the completion of the production steps, partial purification and optimization of enzymatic activity, it was realized that the enzyme produced by isolated morphospecies is very efficient at 40 ° C and pH 8.0. Biochemical, physiological and molecular tests were performed, and the observation with optical microscopy and scanning electron microscopy, but it was not possible to identify the species isolated, probably belongs to the genus Streptomyces. / O Cerrado é o segundo maior bioma do Brasil. Tal ambiente possui um solo diferenciado de várias outras regiões. Existem vários seres vivos neste Bioma, dentre estes, as actinobactérias. São micro-organismos cujas células têm parede celular Gram-positiva, >50% de G+C (guanina + citosina) em seu DNA, produzem diversas substâncias com alto valor agregado. Actinobactérias são importantes produtores de enzimas úteis aos seres humanos. A enzima L-asparaginase é utilizada na terapia de Leucemias Linfoblásticas Agudas (ALL) sendo também empregada no pré-tratamento de alimentos ricos em açúcares redutores, inibindo a formação de acrilamida. O objetivo deste estudo foi produzir a enzima L-asparaginase a partir de uma actinobactéria isolada do solo, caracterizar a enzima e identificar a espécie do isolado bacteriano. Uma amostra do solo foi coletada no Cerrado e passou por um pré-tratamento. Foi utilizada a quimiotaxia dos esporos de Actinoplanetes para a seleção deste organismo. Foram recuperadas 19 morfoespécies. Utilizou-se um meio indutor de L-asparaginase, e o halo róseo ao redor da colônia medido. O isolado BC-A.1 produziu o maior halo em tempo menor, com índice enzimático médio de 4,1. Após a realização das etapas de produção, purificação parcial e otimização da atividade enzimática, percebeu-se que a enzima produzida pela morfoespécie isolada é muito eficiente a 40°C e pH 8,0. Foram realizados testes bioquímicos, fisiológicos e moleculares, bem como a observação em microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura, mas não foi possível identificar a espécie do isolado, provavelmente pertence ao gênero Streptomyces.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Objetivou-se com esta pesquisa avaliar diferentes tÃcnicas de superaÃÃo de dormÃncia, o comportamento germinativo sob condiÃÃes salinas e de dÃficit hÃdrico, o desenvolvimento de plÃntulas submetidas a diferentes potenciais de solutos com NaCl e relacionar as condiÃÃes estressantes com a mobilizaÃÃo de reservas cotiledonares em plÃntulas de copaÃba (Copaifera langsdorffii Desf.). Os tratamentos de superaÃÃo de dormÃncia constituÃram-se de imersÃes em Ãgua/24, 48 e 72 h; Ãgua quente, 50, 75 ÂC e fervente/10, 15 e 20 min, em H2SO4 (98,08)/15, 30 e 60 min e controle. Para as condiÃÃes estressantes, as sementes foram imersas em 100 mL de soluÃÃo de NaCl ou de PEG 6.000 com potenciais de solutos: [0,0 -0,2, -0,4, -0,6, -0,8 e -1,0 MPa]. Avaliaram-se a embebiÃÃo (durante 168 h), percentagem de germinaÃÃo (%G) Ãndice de velocidade de germinaÃÃo (IVG) e tempo mÃdio de germinaÃÃo (TMG). Para a mobilizaÃÃo das reservas, os tratamentos foram os mesmos potencias de solutos com NaCl. A semeadura foi em papel germitest e a germinaÃÃo em cÃmara do tipo BOD a 25 ÂC com fotoperÃodo de 12 horas, com cinco repetiÃÃes de 25 sementes por tratamento. Os estudos dos efeitos do NaCl nas plÃntulas de copaÃba fez-se em trÃs estÃdios de desenvolvimento: ED 1 (raiz com 5Â2 cm); ED 2 (emissÃo dos protÃfilos) e ED 3 (protÃfilos expandidos), Quinze plÃntulas por repetiÃÃo foram separadas em cotilÃdones e eixos embrionÃrios. Quantificaram-se a massa seca dos cotilÃdones e dos eixos embrionÃrios, os teores de lipÃdios, proteÃnas, amido, aÃÃcares solÃveis, aminoÃcidos e Ãons Na+, K+ e Cl-. Avaliaram-se as atividades das enzimas: lipase, liase do isocitrato, sintase do malato, α e β-amilases e fosforilase do amido nos cotilÃdones de plÃntulas cultivadas em Ãgua destilada e em soluÃÃes de NaCl com potenciais de solutos de 0,0, -0,4 e -0,8 MPa. A imersÃo das sementes de copaÃba em Ãcido sulfÃrico concentrado/60min à eficiente para embebiÃÃo e superaÃÃo da dormÃncia. O PEG 6.000 e o NaCl atrasam a embebiÃÃo. Nas condiÃÃes estressantes, o NaCl -1,0 MPa nÃo influencia no %G, mas, aumenta oIVG e reduz o TMG a partir do potencial de soluto de -0,6, MPa. O PEG reduz o %G a partir de -0,8 MPa com maior efeito no IVG e TMG, do que NaCl. Sementes de copaÃba possuem 42% de lipÃdios, principal reserva. O potencial de soluto de -0,8 MPa inibe a mobilizaÃÃo de reservas e aumenta os teores de Ãons Na+ e Cl- nos cotilÃdones e eixos embrionÃrios de sementes de copaÃba. A inibiÃÃo da mobilizaÃÃo das reservas causada pelo sal aumenta os teores de aÃÃcares solÃveis nos cotilÃdones e inibe o crescimento das plÃntulas. As sementes de copaÃba apresentam forte resistÃncia à entrada de Ãgua, a qual pode ser anulada com imersÃo em Ãcido sulfÃrico concentrado por 60 min. Para o %G, as sementes testadas sÃo tolerantes ao NaCl em -1,0 MPa e intolerantes ao PEG em potenciais de solutos equivalentes. A germinaÃÃo à menos sensÃvel ao NaCl do que a fase de plÃntula. O NaCl em potenciais de solutos abaixo de -0,4 MPa reduzem o crescimento e desenvolvimento inicial de plÃntulas de copaÃba. As atividades das enzimas do metabolismo dos lipÃdios e do amido sÃo inibidas com o aumento da salinidade. / The objective of this research was to evaluate different techniques for breaking dormancy, the germination under saline conditions and drought, the development of seedlings subjected to different potentials of solutes and NaCl stress conditions relate to the cotyledonary reserve mobilization in seedlings Copaifera langsdorffii. The treatments of over come consisted of immersion in water/24, 48 and 72 h, hot water, 50, 75 C and boiling water/10â, 15â and 20â and H2SO4 (98,08%)/15, 30â and 60â min and control. For stress conditions, the seeds were immersed in 100 ml of NaCl or PEG 6000 with a potential of the solute, [0,0 (control), -0,2, -0,4, -0,6, -0,8 and -1,0 MPa]. The water absorption, was evaluated (168 h) germination percentage (G%), germination speed index (GSI) and mean germination time (MGT). For the mobilization of the reserves were used as the same solute potential with NaCl above. Sowing was on paper germitest and germination in a germination chamber of the BOD at 25 ÂC and photoperiod of 12 h, consisting of five replicates of 25 seeds per treatment. Studies of the effects of NaCl was done in three stages of developing an ED (radicle with 5  2 cm) ED 2 (issuing protophilus) and ED 3 (protophilus expanded), taking as reference quiescent seeds (DE 0). 15 seedlings per replicate were separated into cotyledons and axis. Quantified the dry mass of cotyledons and axis, the levels of lipids, proteins, starch, soluble sugars, amino acids and Na+, K+ and Cl-. We evaluated the activities of enzymes: lipase, the isocitrate lyase, malate synthase, α and β-amylases and starch phosphorylase in the cotyledons of seedlings grown in distilled water and in NaCl solutions with solute potential of -0,4 and -0,8 MPa. The water absorption by seeds copaiba was higher and faster in the treatments with boiling water and sulfuric acid. The PEG 6000 and NaCl delayed the time of soaking, Overall, the immersion in H2SO4 performed best in breaking dormancy. In stressful conditions, NaCl had no influence on %G, however, reduced the (IVG) and increased the TMG, the solute potential of -0,6, -0,8 and -1,0 MPa. PEG reduced the %G in solute potential of -0,8 and -1,0 MPa and had a greater effect on IVG and TMG, compared with NaCl. The seeds were quiescent lipids as the main reserve. The increase in salinity inhibited the mobilization of reserves in the cotyledons of the seeds, especially in the solute potential of -0,8 and -1,0 MPa and increasing the concentrations of Na+ and Cl- in the embryonic axis and cotyledons. Inhibition of the mobilization of reserves caused by salt provided an increase in soluble sugars in the cotyledons, this effect inhibited the growth and seedling development. The activities of enzymes in the metabolism of lipids and of starch phosphorylase were significantly inhibited with increasing salinity, with more effectively inhibited the enzymes of lipid metabolism. The seeds have a strong resist entry of water, the immersion of the seed in concentrated sulfuric acid for 60â is effective to remove the barrier. For %G, the copaiba seeds under conditions that were tested are NaCl-tolerant and intolerant to PEG. The germination is less sensitive than the NaCl seedling stage. The NaCl in solute potential below -0,4 MPa negatively affects the growth and early development of seedlings of copaiba