Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-26Bitstream added on 2014-06-13T20:16:38Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_mcm_me_jabo.pdf: 755871 bytes, checksum: 00a7ca290b99eaeb7742fdd22cdc3c6c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A glicoproteína S1 do vírus da broquite infecciosa (VBI) além de ser altamente variável é responsável pela adsorção com os receptores das células hospedeiras e pela indução de anticorpos vírus-neutralizantes e inibidores da hemaglutinação em galinhas. A disponibilidade desse tipo de proteína pode contribuir com o imunodiagnóstico e com a imunoprofilaxia da bronquite infecciosa aviária. O presente estudo foi conduzido com a finalidade de fazer a clonagem e a expressão do gene da glicoproteína S1 derivada da estirpe M41 do VBI no sistema constituído pelo vetor pFLDa – Picchia pastoris. O cDNA completo do gene S1 foi preparado a partir do RNA extraído do líquido alantóide infectado com a estirpe M41 do VBI e o amplicon obtido pela PCR foi clonado no vetor de expressão pFLDa. O plasmídeo foi linearizado e usado na transformação da linhagem GS115 de Picchia pastoris por eletroporação. Foi avaliada a influência da composição do meio de cultura sobre a produção de biomassa e a expressão da proteína recombinante S1 durante a fase de indução. A produção da proteína S1 recombinante foi detectada somente no compartimento intracelular, embora o vetor pFLDa seja capaz de direcionar a síntese de uma proteína heteróloga para a via secretora. A proteína recombinante foi caracterizada imunoquimicamente como uma banda de aproximadamente 90 kDa e com reatividade específica para os anticorpos monoclonais anti-polihistidina. Concluindo, o sistema hospedeiro de células da levedura P. pastoris com o vetor pFLDa usado nesse estudo comprovou ser um método eficaz para a produção no compartimento intracelular da proteína recombinante S1 da estirpe M41 do VBI, com potencial para futura utilização em técnicas de imuno-diagnóstico da bronquite infecciosa aviária. / The glycoprotein (S1) of infectious bronchitis virus (IBV) has been shown to be highly variable and responsible for attachment to the receptor in host cellular membrane, induction of neutralizing and haemagglutination-inhibiting antibodies in chickens. Thus, the availability of such protein can contribute to the immuno-diagnosis and immunoprofilaxis of avian infectious bronchitis. The present study was carried out aiming to clone and to express the gene of S1 glycoprotein from M41 strain fo IBV in the system constituted by pFLDa vector – Picchia pastoris. Full length cDNA of IBV S1 glycoprotein was prepared from RNA extracted from infected allantoic fluid and the amplicon generated by PCR was cloned into yeast expression vector pFLDa to construct the plasmid of pFLDa - S1 - IBV. This plasmid was linearized and then transformed in Picchia pastoris GS115 by electroporation. The recombinant yeast clones were cultivated and selected. The influence of media composition on biomass and in the production of recombinant S1 during induction phase was studied. The production of recombinant S1 protein was detected only in the intra-cellular compartment, though the pFLDa vector would direct the synthesis for the secretor pathway. The recombinant protein was characterized by SDS-PAGE and Western-Blotting as a band of a molecular weight of approximately 90 kDa with specific reactivity against anti-Histidina monoclonal antibodies. The use of complex media promotes an increase in biomass, but no soluble S1 recombinant protein was produced. Concluding, the yeast system composed by pFLDa - P. pastoris was efficient to express intra-cellularly the recombinant S1 protein of M41 strain of IBV which has a potential to be used in the immuno-diagnosis of avian infectious bronchitis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-28Bitstream added on 2014-06-13T19:57:09Z : No. of bitstreams: 1 fernando_fs_me_jabo.pdf: 950487 bytes, checksum: d2d43750639241a82b3ddb07a03ff528 (MD5) / Nesse estudo, um isolado de campo do vírus da bronquite infecciosa (VBI) no Brasil (IBVPR-12), previamente classificado como um genótipo variante, foi caracterizado de forma comparativa com a estirpe M41 do VBI, sendo levantadas as características de patogenicidade em diferentes órgãos como a traqueia, o pulmão, os rins, as gônadas e as tonsilas cecais (patotipo) e a imunidade cruzada com relação à estirpe vacinal H120 do VBI (protectotipo), incluindo as respostas imunes humorais sistêmicas e locais induzidas. Para tanto, foram utilizados grupos experimentais de galinhas “specific pathogen free” (SPF) previamente vacinadas ou não com a estirpe H120 do VBI e depois desafiados com essa variante viral, ou com a estirpe M41. Para essas duas estirpes virais foram avaliadas a capacidade de replicação e as lesões produzidas em diferentes órgãos, a atividade inibidora do movimento ciliar no epitélio traqueal e as respostas imunes humorais desenvolvidas no soro sanguíneo e na secreção lacrimal dessas aves. Foram observadas diferenças marcantes na patogenicidade e no tropismo tecidual desses vírus, sendo que a estirpe M41 apresentou replicação mais intensa e lesões mais pronunciadas no trato respiratório, especialmente na traqueia, enquanto que a estirpe variante foi encontrada de forma mais distribuída em vários dos órgãos analisados, tendo-se replicado e provocado menos lesões na traqueia, mas alcançando maior replicação e tendo causado lesões mais severas nos rins e nos testículos. Nas regiões teciduais mais afetadas por lesões, a presença do VBI foi detectada por marcação específica com anticorpos policlonais contra a nucleoproteína do VBI pela técnica de imuno-histoquímica. As aves vacinadas com a estirpe H120 do VBI, revelaram proteção parcial contra a estirpe variante em órgãos como traqueia e... / In this study a Brazilian field isolate of infectious bronchitis virus (IBV), previously classified as variant genotype, was characterized comparatively with the M41 strain of IBV, by evaluating the pathogenicity in different organs (trachea, lung, kidney, gonads and caecal tonsil) and the cross-immunity with H120 vaccine strain, including the systemic and local humoral immune responses. Experimental groups of specific pathogen free (SPF) chickens were vaccinated or not with H120 strain of IBV and challenged with this variant isolate. The viral replication and histopathology in different tissues and organs, the ability to inhibit ciliar movement of tracheal epithelial cells, and local and systemic humoral immune responses were evaluated in these chickens. The pathogenicity and tissue tropism of these IBV strains showed marked differences, and while the M41 strain damaged more the respiratory tract, specially the trachea, the variant isolated has a wide tissue distribution, showing less replication and lesions in the trachea, but affecting more severely the kidney and the testicles. In the most affected tissue regions, the presence of IBV was detected by immunohistochemistry technique, using an anti-nucleoprotein polyclonal antibodies. The H120 vaccine induced against this variant isolate a partial protection with regard to the infection of trachea and kidney and no cross-protection to the infection of testicles. In conclusion, a new pathotype and a new protectotype of a variant genotype of a Brazilian IBV isolate were characterized in this study with regard to Massachusetts genotype and serotype strains of IBV, indicating the importance for... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador : Profª. Drª Daniela Parada Pavoni / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 31/08/2016 / Inclui referências : f. 106-114 / Resumo: A doença infecciosa da bursa (IBD) ou doença de Gumboro é uma doença viral de galinhas (Gallus gallus) relevante para o comércio internacional de animais e de seus produtos. Está associada à mortalidade e imunossupressão dos animais. Considerando a importância econômica da avicultura para o Brasil e o estado do Paraná, é obrigatório a tomada de medidas de controle em granjas comerciais, que visem a prevenção de surtos e a vigilância sobre o aparecimento de novas variantes, mais patogênicas, e que não respondem às vacinas. Testes diagnósticos confiáveis são ferramentas importantes no controle dessa infecção. A utilização de proteínas recombinantes como substrato de testes sorológicos é uma atraente alternativa para a produção nacional de reagentes, uma vez que os testes atualmente utilizados são importados. Sequências das proteínas antigênicas VP2 e VP3 de cepas brasileiras e estrangeiras, selvagens e vacinais foram buscadas no banco de dados do NCBI e alinhadas utilizando o programa ClustalW. Foram selecionadas 10 sequências nucleotídicas para síntese comercial clonadas no pUC57, das quais 9 da VP2 e uma da VP3. Os genes sintéticos foram clonados no vetor pET-28a (Novagen) para expressão em Escherichia coli e pMIB/V5-His (Invitrogen) para expressão em células de insetos. Fragmentos da VP3 foram obtidos por PCR fusionados à GFP para aumentar a massa molecular dos peptídeos. A expressão da VP2 em células de insetos e em E. coli não foi obtida. A VP3 e os fragmentos foram expressos na cepa BL 21 Star. A VP3 foi expressa em corpos de inclusão e solubilizada com 2 M de ureia. Os fragmentos foram obtidos na fração solúvel. A purificação das proteínas foi realizada por afinidade em resina de níquel. A reatividade da VP3 e fragmentos foi testada no teste de ELISA indireto. O teste de ELISA da VP3 com soros de animais vacinados e não vacinados apresentou 93,75% de sensibilidade e 85,19% de especificidade. Utilizando somente soros de animais imunizados o teste de ELISA apresentou 100% de sensibilidade e especificidade. O mapeamento das regiões antigênicas da VP3 mostrou duas regiões, fragmentos 2 e 7, que concentraram maior número de epitopos. Os fragmentos 5, 6, e 7 foram as regiões da VP3 mais reativas. Este estudo mostrou que a proteína recombinante VP3 pode ser utilizada para avaliar o status imunológico pós-vacinal das aves. A utilização da VP3 recombinante para diagnosticar a presença/ausência da doença em animais não vacinados deve ser melhor avaliada utilizando uma amostragem maior desses animais no teste de ELISA. Através dos resultados do mapeamento foi possível estabelecer regiões da proteína VP3 mais antigênicas, entretanto mais testes devem ser conduzidos antes de considerar a utilização dos fragmentos no diagnóstico do vírus da doença infecciosa da bursa (IBDV) em galinhas. Palavras-chave: doença infecciosa da bursa, doença de Gumboro, proteína recombinante, vírus da doença infecciosa da bursa, proteína VP2, proteína VP3, mapeamento de regiões antigênicas, teste de ELISA, diagnóstico da doença infecciosa da bursa. / Abstract: Infectious bursal disease (IBD) or Gumboro disease is a viral disease of chickens (Gallus gallus) relevant to international trade in animals and their products. It is associated with mortality and immunosuppression in animals. Considering the economic importance of poultry production to Brazil and to the state of Paraná, taking control measures on commercial farms is mandatory for the prevention of outbreaks and surveillance of the appearance of new more pathogenic variants that do not respond to vaccines. Reliable diagnostic tests are important tools in the control of this infection. The use of recombinant proteins as serological tests substrates is an attractive alternative to the domestic production of reagents, since the currently used tests are imported. Sequences of antigenic proteins VP2 and VP3 of Brazilian and foreign strains, wild and vaccine were sought in the NCBI database and aligned using the ClustalW program. Ten nucleotide sequences were selected, 9 sequences of VP2 and one of VP3. These sequences were commercially synthesized and cloned into pUC57. The synthetic genes were cloned into pET-28a vector (Novagen) for expression in Escherichia coli and into pMiB/V5-His (Invitrogen) for expression in insect cells. Fragments obtained by PCR using VP3 as template were used fused to GFP to increase the molecular weight of the peptides. Expression of VP2 in insect cells and E. coli was not obtained. The VP3 and the fragments were expressed in BL 21 Star strain. The VP3 was expressed in inclusion bodies and was solubilized with 2 M urea. The VP3 fragments were obtained in the soluble fraction. Purification of the protein was accomplished by nickel affinity resin. The reactivity of VP3 and fragments was tested by ELISA. The ELISA test with VP3 sera of animals vaccinated and non-vaccinated showed sensitivity of 93.75% and specificity of 85.19%. Using only the sera of immunized animals ELISA showed sensitivity and specificity of 100%. Mapping the antigenic regions of VP3 showed that two regions, fragments 2 and 7, present the highest proportion of epitopes. Fragments 5, 6, and 7 were the most reactive VP3 regions. This study showed that the recombinant protein VP3 can be used to assess post-vaccination immune status of the birds. The use of recombinant VP3 for diagnosing the presence / absence of the disease in non-vaccinated animals should be further evaluated using a larger sample of these animals in the ELISA test. Through the results of the mapping it was possible to establish regions of more antigenic protein VP3, though more tests should be conducted before considering the use of fragments in the diagnosis of IBDV in chickens. Keywords: infectious bursal disease, Gumboro disease, recombinant protein, infectious bursal disease vírus, VP2 protein, VP3 protein, mapping of antigenic regions ELISA test, diagnosis of infectious bursal disease.

Introduction: The infection by the virus HCV has been one of the main causes of hepatic diseases in the world, besides the difficult and late diagnosis. In this sense, it is important to estimate the impact generated by the hepatitis C regarding the premature mortality as well as the generated disability, the is that “Burden of Disease”. Objective: Estimating the burden of disease due to hepatitis C in the state of Santa Catarina in the year 2009. Methods: An epidemiologic study of ecologic design was carried out. The population analyzed was composed by estimated data of prevalence and mortality by HCV of resident citizens in the state of Santa Catarina in the year 2009. The burden of disease by HCV was estimated through the indicators YLD, YLL, and DALY and their respective rates by gender, age brackets and health region. Results: The burden of disease was estimated in 65,832 DALYs, being the component YLD responsible for 96% of this data. Males demonstrated a higher YLL, whilst the distributions of YLD and DALY were similar by gender. The age brackets of 45 to 59 years showed higher number of DALYs. The age brackets of 45-59 and 30-44 showed higher quantity of YLD, and of 60-69 showed a higher quantity of YLL. The region of the Extremo Oeste was responsible by the highest quantity of DALYs among all the regions. Conclusion: The burden of disease in Santa Catarina was estimated in 65,832 DALYs, and the age brackets of 30-44 and 45-59 the highest values. The Extremo Oeste region showed the highest value. The male gender and the age 30-44 and 45-59 years-old also showed the highest DALY rates. / Submitted by Rogele Pinheiro (rogele.pinheiro@unisul.br) on 2017-10-23T17:18:29Z No. of bitstreams: 1 109325_Katia.pdf: 625028 bytes, checksum: 83189c27cd1a491f5b66dd1851f705ff (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Correa da Cruz (caroline.cruz@unisul.br) on 2017-10-23T20:16:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 109325_Katia.pdf: 625028 bytes, checksum: 83189c27cd1a491f5b66dd1851f705ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T20:16:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 109325_Katia.pdf: 625028 bytes, checksum: 83189c27cd1a491f5b66dd1851f705ff (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / Introdução: A infecção pelo vírus da Hepatite C(HCV) tornou-se uma das principais causas de doença hepática no mundo, com diagnóstico difícil e tardio. Nesse contexto, é importante estimar o impacto gerado pela hepatite C no que diz respeito tanto à mortalidade precoce quanto à incapacidade gerada, o que constitui a Carga de Doença. Objetivo: Estimar a Carga de Doença por hepatite C no estado de Santa Catarina no ano de 2009. Métodos: Estudo epidemiológico de delineamento ecológico, composto por dados estimados de prevalência e mortalidade por HCVde indivíduos residentes no Estado de Santa Catarina no ano de 2009. Foi estimada a Carga de Doença por HCV através dos indicadores YLD, YLL e DALY e suas respectivas taxas, por sexo, faixa etária e macrorregião de saúde de Santa Catarina. Resultados: A Carga de Doença foi estimada em 65.832 DALYs, sendo o compontente YLD responsável por 96% do indicador. O sexo masculino apresentou maior YLL, enquanto as distribuições do YLD e DALY foram semelhantes por sexo. As maiores taxas do Dalys estão nas faixas etárias de 45-59 anos, as maiores taxas de YLD também na faixa de 45-59 e 30-44 anos , a maior quantidade de YLD foi na faixa de 60-69 anos de YLL. A macrorregião do Extremo Oeste foi responsável pela maior quantidade de DALYs entre as macrorregiões. Conclusão: A Carga de Doença em Santa Catarina foi estimada em 65.832 DALYs, e as faixas etárias 30-44 e 45-59 anos apresentaram as maiores taxas. A macrorregião do Extremo Oeste apresentou a maior carga. O sexo masculino e as faixas etárias 30-44 anos e 45-59 anos apresentaram as maiores taxas de DALY.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-26T19:16:12Z No. of bitstreams: 1 DiegoGomesTeixeira_DISSERT.pdf: 3901094 bytes, checksum: 8c230a0e1503d41ddbfe3f8758b2dbce (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-28T21:48:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DiegoGomesTeixeira_DISSERT.pdf: 3901094 bytes, checksum: 8c230a0e1503d41ddbfe3f8758b2dbce (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T21:48:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiegoGomesTeixeira_DISSERT.pdf: 3901094 bytes, checksum: 8c230a0e1503d41ddbfe3f8758b2dbce (MD5) Previous issue date: 2015-07-02 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A Leishmaniose ? uma doen?a infecciosa que at? o momento n?o possui uma vacina capaz de eliminar o parasita do hospedeiro, sendo tratada apenas por meio de drogas pouco eficientes e de alto custo. Essa doen?a normalmente se apresenta formando ulcera??es na pele, mucosas e v?sceras. Os pa?ses mais atingidos por esse parasita encontram-se nas regi?es tropicais do planeta, e afeta aproximadamente dois milh?es de pessoas a cada ano. Acredita-se que no continente americano a esp?cie Leishmania infantum tenha sido introduzida pelos imigrantes durante o processo de coloniza??o dos pa?ses da Am?rica Central e do Sul. Nas ?ltimas d?cadas, estudos v?m mostrando que a expans?o urbana associada com o fluxo de pessoas para regi?es muito povoadas est?o contribuindo para uma expans?o no n?mero de reservat?rios para o parasita, influenciando uma maior varia??o de suas caracter?sticas g?nicas. Tais varia??es gen?ticas v?m sendo associadas ao perfil sintomatol?gico dos parasitas em seus hospedeiros, principalmente humanos. No estado do Rio Grande do Norte, Brasil, foram isolados e sequenciados o genoma de 20 cepas de L. infantum as quais apresentaram diferentes padr?es sintomatol?gicos (sintom?tico e assintom?tico) e com diferentes per?odos de isolamento, 5 na d?cada de 1990 e 15 nos anos recentes. Apesar dos diferentes padr?es cl?nicos o genoma dos isolados apresentaram alto grau de identidade entre si, at? mesmo os isolados da d?cada de 90 quando comparados com os recentes. Entretanto, as poucas varia??es foram suficientes para a identifica??o de padr?es de agrupamentos dos isolados por meio de an?lises de componentes principais, mostrando que os isolados dos anos recentes se encontram mais homog?neos na popula??o. An?lises de reconstru??o filogen?tica utilizando m?todos Bayesianos foram realizadas e observou-se a manuten??o nos padr?es de agrupamento j? vistos nos resultados anteriores, al?m disso foi gerado um expanded bayesian skyline plot por onde foi poss?vel constatar o crescimento da popula??o gen?mica de L. infantum quando comparado com a d?cada de 1990. Foram observadas altera??es no n?mero de c?pias cromoss?micas em todos os isolados, entretanto apenas o cromossomo 31 se apresentou como exclusivamente triss?mico. O presente trabalho apresenta ind?cios de padr?es nos genomas de isolados de L. infantum relacionando-os ?s caracter?sticas cl?nicas dos hospedeiros. / Leishmaniasis is a complex of diseases with no preventable or therapeutic vaccine available. There is only a small set of drugs for treatment of these diseases, which evolve with distinct clinical outcomes from skin ulcers, to mucosal involvement or visceralization. The type of clinical presentation usually is associated with the infecting species of Leishmania. Leishmania infantum is the visceralizing species, causing visceral leishmaniasis, in Latin America, Europe and northern Africa and was introduced in the Americas by Europeans during colonization. Visceral leishmaniasis used to be a sporadic disease found in rural areas Northeast of Brazil, however with urbanization, outbreaks have been reported in periurban areas of major cities. L. infantum infection can evolve with control of the parasite without apparent clinical symptoms, with only a minority developing symptomatic disease. The reasons why one evolve with selfresolution and others develop full blown disease is not entirely understood, but seems to include host genetic susceptibility, comorbidity, sand fly exposure and potentially genetic variation in the infecting Leishmania species. Our ongoing study, have shown structural genome variations in several clinical Leishmania isolates obtained from people infected in the State of Rio Grande do Norte. Despite the different clinical patterns, the isolates? genomes showed a high identity degree to each other, even the ones isolated from the 90 compared with the latest. However, the few found changes were sufficient for the isolation of the distinct groups by a principal component analysis, showing that the isolates from more recent years are more homogeneous among the population. Phylogenetic analyzes using Bayesian reconstruction methods have been made and supported the grouping patterns already seen in the foregoing results. Moreover by an Expanded Bayesian Skyline Plot it was possible to observe the growth of the genomic population of L. infantum compared with the 1990s. Changes were observed in the number of chromosome copies in all strains, but only chromosome 31 is presented as exclusively trisomic. This work presents evidence on patterns of L. infantum isolated genomes relating them to clinical characteristics of their hosts.

Introdução: O crescente aumento do número de casos de AIDS em mulheres evidencia um progressivo aumento da Transmissão Vertical (TV) do HIV, gerando assim a necessidade de focalizarmos esforços no intuito de impedir ou minimizar este tipo de transmissão. Objetivos: avaliar as condutas profiláticas adotadas para redução da TV do HIV em serviços de referência pertencentes à 7ª CRS. Metodologia: Os dados foram obtidos por meio de pesquisa de campo retrospectiva com análise quanti-qualitativa dos formulários de cadastro, fichas de notificação e investigação compulsória, além de prontuários das gestantes e puérperas soro positivas para o HIV, no período de 01 de janeiro de 2010 a 01 de janeiro de 2013 mediante aprovação ética. Resultados: A população estudada compreendeu um universo de 22 mulheres notificadas como Gestante HIV +, dentre as quais 72% foram notificadas na cidade de Bagé, e destas, 9% foram notificadas em 2010, 27,3% em 2011 e 63,7% em 2012. A faixa etária de maior prevalência é de 15 a 24 anos (59%), 50% das mulheres não teve a via de parto nem a evolução da gravidez informada e 60% não tem registro de profilaxia no período intra-parto. Em 50% das fichas, não foi informado o uso da medicação pela criança nas primeiras 24h e 59% das notificações foram feitos por profissional enfermeiro. Pôde-se caracterizar com os dados coletados os aspectos individual, escolar e sócio-demográfico da 7ª CRS. Indo ao encontro das informações publicadas por Brasil (2013), este estudo evidencia uma sub-enumeração de casos no SINAN, pois apenas 63% das mulheres foram notificadas/cadastradas nos sistemas de informação. Considerações: As práticas de saúde adotadas pelos serviços estão de acordo Protocolo Vigente, no que se trata da administração da TARV a partir da 14ª semana de gestação, da escolha, sempre que possível da via de parto, a administração de medicamentos intra-parto, a inibição da lactação, o uso do ARV no bebê e o fornecimento de fórmula láctea. As medidas educativas necessárias para qualificar o atendimento realizado na região de saúde estudada relacionam-se principalmente à qualidade das informações das ações de saúde (alimentação dos bancos de dados dos sistemas), além de estimular a população em geral para o conhecimento do prénatal e das testagens para HIV. Para que pudéssemos trabalhar acerca deste tema, discutimos os resultados do estudo em equipe no SAIS de Bagé, e pensamos em algumas estratégias que nos aproxime dos demais profissionais da rede. Criamos um perfil em uma rede social, onde estão sendo postadas diariamente informações acerca dos temas: HIV, AIDS, DSTs, Hepatites Virais, medidas de prevenção, meios de transmissão, atividades do serviço, dados importantes, dentre tantas outras informações, sendo imprescindível relatar que todos os componentes da equipe tem acesso a senha, para que possa sentir-se ator no processo de educação da comunidade. Logo, serão propostas oficinas e fóruns, com os temas em questão para discutir com a comunidade local, com o apoio da equipe da 7ª CRS/RS. / The increasing number of AIDS cases among women reveals a progressive increase of Vertical Transmission (VT) of HIV, thus generating the need of focusing efforts in order to prevent or minimize this type of transmission. The aim of the study was to evaluate the prophylactic measures adopted to reduce HIV in TV reference belonging to the 7th CRS services. Data were obtained from retrospective research field with quantitative and qualitative analysis of the registration forms, reporting forms and compulsory research, and medical records of pregnant and postpartum serum positive for HIV in the period from January 1, 2010 to January 1, 2013 by ethical approval. The study population comprised a universe of 22 women reported / registered as HIV + Pregnant Women, among which 72% were reported in the city of Bage, while 09% reported in 2010, 27.3% in 2011 and 63.7% in the year 2012 the most prevalent age group is 15-24 years (59%), 50% of women had no way of delivery, or pregnancy outcome informed and 60% have no record of prophylaxis in intra period partum. In 50% of the chips, was not informed use of medication by the child in the first 24h and 59% of registrations / notifications were made by professional nurses. Could be characterized with the data the individual, school and socio-demographic aspects of CRS 7th. Going against the information published by Brazil (2013), this study highlights an under-enumeration of cases in SINAN because only 75% of women were reported / registered in information systems. Practices adopted by health services meet the Effective Protocol, it is the administration of ART from the 14th week of gestation, the choice where possible the mode of delivery, medication administration intra-partum, the inhibition of lactation, the use of ARVs in providing baby and milk formula. Educational measures to improve service held at the health region studied relate primarily to information quality of health (nutrition database systems), in addition to encouraging the general population to the knowledge of prenatal and testings for HIV. So we could work on this subject, discuss the results of the study team at SAIS Bage, and think of some strategies that bring us closer to the other networking professionals. We created a profile on a social network, where they are being posted daily information on the topics: HIV, AIDS, STDs, Viral Hepatitis, prevention, transmission media, service activities, important data, among many other information, is indispensable report that all team members have access to the password, so you can feel an actor in the process of educating the community. Soon, workshops and forums will be proposed, with the issues in question to discuss with the local community, with the support of the 7th CRS / RS staff.

A Doença Infecciosa da Bolsa de Fabrício (DIB) é uma doença viral altamente contagiosa que afeta as galinhas nas primeiras semanas de vida. Ela pode causar altas taxas de morbidade e mortalidade dependendo da cepa viral envolvida no surto. Como o vírus é muito resistente no ambiente, a vacinação é requerida em alta pressão de infecção. Devido às variações no grau de virulência das vacinas disponíveis para o controle da DIB, o presente estudo objetivou avaliar a patogenicidade e imunogenicidade de três vacinas comerciais: as vacinas recombinante, complexo-imune e intermediária. Quatro grupos com 55 aves specific pathogen free (SPF) cada foram imunizadas no primeiro dia e desafiadas aos 25 dias com a cepa muito virulenta G11 para verificar o grau de proteção conferido pelas vacinas. As aves foram examinadas, sangradas, eutanaziadas e necropsiadas aos 25, 30 e 35 dias de idade. As bolsas de Fabrício (BF) foram coletadas, pesadas, mensurados seus diâmetros e pesos relativos e submetidas ao exame histopatológico para verificar a presença de lesões. Amostras de soro foram submetidas ao teste de ELISA para quantificação dos anticorpos contra a DIB. Aos 23 dias de idade, as aves SPF foram submetidas à prova de hipersensibilidade cutânea à fitohemaglutinina para avaliar o efeito das vacinas sobre a imunidade celular. Os resultados mostraram que a vacina complexo-imune induziu a maior redução no peso relativo e diâmetro e o maior grau de lesões nas BF. A vacina recombinante foi a que apresentou os melhores resultados, preservando a integridade tecidual e celular das BF. A vacina intermediária apenas induziu um discreto grau de atrofia nas BF. As análises sorológicas, antes do desafio, revelaram que as três vacinas testadas induziram com a mesma intensidade a imunidade humoral das aves SPF, apresentando semelhantes títulos de anticorpos. A avaliação da imunidade celular mostrou que a resposta à fitohemaglutinina das aves SPF imunizadas com as vacinas recombinante e complexo-imune foi menor do que as aves do grupo não vacinado. Nas condições em que o experimento foi conduzido verificou-se que a vacina complexo-imune é a mais patogênica, causando lesões em maior número e severidade nas BF. Todas as vacinas, quando administradas no primeiro dia, são eficazes em proteger as aves SPF contra o desafio com a cepa muito virulenta G11. / Infectious Bursal Disease (IBD) is a highly contagious viral disease that affects chickens in their first weeks of life. It may cause high morbidity and mortality depending on the strain involved in the outbreak. As the virus is very resistant to the environment, vaccination is required under high pressure of infection. Hence, due to variations in the degree of the virulence of vaccines available to control DIB, this study aimed to evaluate the pathogenicity and immunogenicity of three vaccines against Infectious Bursal Disease (IBD): recombinant, immune-complex and intermediate vaccines. Four experimental groups, with fifty-five specific pathogen free (SPF) chickens each, were vaccinated on the first day and challenged on the twenty-fifth day with the very virulent G11 strain in order to verify the protection conferred by the vaccines. The Chickens were examined, bled, euthanized and necropsied on the twenty-fifth, thirtieth and thirty-fifth days of age, and the Bursas of Fabricius (BF) were collected, weighed, having their diameter and relative weight measured, were subjected to histological examination to verify the presence of lesions, Serum samples were subjected to ELISA for the quantification of antibodies against IBD. On the twenty-third day of age, the chickens were submitted to cutaneous basophil hypersensitivity test at phytohemagglutinin to evaluate the immunosuppressive effect of the vaccines on the cell-mediated immunity. The results indicated that the immune-complex vaccine induced not only the greatest reduction in relative weight and diameter, but also the greatest lesion degree on the BF. The recombinant vaccine showed the best results, preserving the tissue and cellular integrity of the BF. The intermediate vaccine induced only a slight degree of atrophy on the BF. The intermediate vaccine induced only a slight degree of atrophy on the BF. The serological analyses, before the challenge, revealed that the three tested vaccines induced humoral immunity of SPF chickens with the same intensity, presenting similar antibody titers. In addition, the evaluation of the cellmediated immunity demonstrated that the cellular reaction to phytohemagglutinin of the immunized SPF chickens with the recombinant and immune-complex vaccines was smaller than the unvaccinated group. Thus, these results have indicated that, under the conditions of the experiment, the immune-complex vaccine is the most pathogenic, causing the highest atrophy degrees on the BF. Therefore, all vaccines, when administered on the first day, are considered effective to protect SPF chickens against the challenge with the very virulent G11 strain.

Introdução. A colonização pelo Pneumocystis jirovecii foi demonstrada em diversos grupos, como pacientes imunossuprimidos pela infecção do Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV), pacientes com doenças pulmonares crônicas e gestantes. Alguns estudos têm sugerido que os profissionais de saúde podem tornar-se colonizados após contato com pacientes com a pneumonia por Pneumocystis (PcP). Objetivos. Identificar a colonização pelo P. jirovecii, através de técnicas moleculares, em profissionais de saúde que apresentam contato ocupacional com pacientes com PcP no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Verificar a duração desta colonização. Analisar as variáveis clínico-demográficas dos pacientes com PcP que podem estar relacionadas à transmissão do P. jirovecii ao profissional de saúde. Métodos. Foi realizada uma nested-PCR para a detecção do P. jirovecii no lavado de orofaringe de 27 profissionais expostos a pacientes com PcP (médico; enfermeiro; técnico/auxiliar de enfermagem) e de 36 profissionais administrativos, no período de janeiro a agosto de 2008. As amostras de lavado da orofaringe foram obtidas na primeira, segunda e oitava semana após o contato com um paciente para avaliar o início e a duração da colonização pelo P. jirovecii. A nested-PCR utilizou os primers pAZ-102-A e pAZ-H no primeiro round e pAZ 102-X e pAZ 102-Y no segundo, para a amplificação da grande subunidade do RNA ribossômico mitocondrial (mtLSUrRNA) do microorganismo. Foram coletados os dados clínicos e demográficos dos pacientes com PcP através da revisão dos prontuários médicos. Resultados. A colonização pelo P. jirovecii foi observada em 33,3% (9/27) dos profissionais expostos, com uma duração que variou entre uma a duas semanas após o contato inicial com o paciente. Entre os profissionais não-expostos, foram identificados somente dois colonizados entre 36 indivíduos (p <0,05). Não foi identificada associação entre as características clínicas e demográficas dos pacientes com PcP e a colonização dos profissionais de saúde. Conclusões: Os profissionais de saúde em contato com os pacientes com PcP apresentaram uma taxa de colonização superior aos indivíduos não expostos. Este achado é sugestivo de uma transmissão nosocomial do microorganismo. Os profissionais de saúde podem constituir importante reservatório e fonte de infecção do fungo a outros pacientes.

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Initially, a literature review was made seeking scientific bases that demonstrated the possibility of using metallic nanoparticles (MeNPs) as innate immune system stimulators. It was also sought to find elements in which metallic nanoparticles could aid in the generation Th1, Th17 and T CD8 type cellular response. From this review, it was verified that the magnetic nanoparticles, or with metallic ions, were able to stimulate the activation of costimulatory molecules (CD80, CD40 and CD86), to induce secretion of cytokines (IL-1, IL-6, IFN-γ and TNF-α) as well as the humoral immune response, but no work demonstrated whether these nanoparticles were able to induce cellular response. Consequently, in the second part of the study, tuberculosis was used as model to verify if a vaccine formulation with a magnetic nanoparticle of manganese ferrite combined with recombinant fusion protein would have the ability to induce a protective cellular immune response, without adding other adjuvants. The nanoparticle was coated with recombinant CMX fusion protein and BALB/c mice were vaccinated with this formulation, in protocol with three vaccinations with 21-day intervals. Subsequently, the vaccinated animals were infected with Mycobacterium tuberculosis (H37Rv) to evaluate the protection conferred by the vaccine. The results showed that the nanoparticle was able to generate cellular immune responses of Th1, Th17 and T CD8 types, depending on the route of inoculation (subcutaneous, intranasal and mixed). The most preeminent response was Tc1 which was recalled after infection was able to protect against the challenge with Mtb. In addition, there was no appearance of side effects or damage to organs of infected animals, demonstrating that the formulation is safe. Finally, the vaccine formulations with MeNPs, more specifically with manganese ferrite, demonstrate potential application in vaccinology, and may be applied in vaccine formulations to generate cellular immune response, but the route must be considered and in case of use other adjuvants it should consider the possible interaction of NP with the molecule and their ligand. / A busca por novos adjuvantes é um dos objetivos principais dentro da vacinologia. Juntamente com isso, entender o impacto do uso de nanopartículas como sistema de entrega e imunomodulador em sistemas vacinais impacta diretamente no desenvolvimento de novas vacinas. Nesse trabalho, buscamos estudar e elucidar a adjuvanticidade de nanopartículas magnéticas, bem como a imunogenicidade e proteção de sistemas vacinais utilizando essas nanopartículas. Inicialmente foi feito uma revisão da literatura buscando bases científicas que demonstrassem a possiblidade do uso de nanopartículas metálicas (MeNPs) como estimuladores do sistema imune inato. Buscou-se também encontrar elementos em que as nanopartículas metálicas pudessem auxiliar na geração de uma resposta celular do tipo Th1, Th17 e T CD8. A partir dessa revisão, verificou-se que as nanopartículas magnéticas, ou com íons metálicos, eram capazes de estimular a ativação de moléculas coestimuladoras (CD80, CD40 e CD86), induzir secreção de citocinas (IL-1, IL-6, IFN-γ e TNF-α) bem como a resposta imune humoral, mas nenhum trabalho demonstrou se essas nanopartículas eram capazes de induzir resposta celular. Consequentemente, na segunda parte do trabalho utilizou-se a tuberculose como modelo de estudo para verificar se uma formulação vacinal com uma nanopartícula magnética de ferrita de manganês combinada com proteína de fusão recombinante, teria capacidade indutora de resposta imune celular protetora, sem adição de outros adjuvantes. A nanopartícula foi recoberta com a proteína de fusão recombinante CMX e os camundongos BALB/c foram vacinados com essa formulação, em protocolo com três vacinações com intervalos de 21 dias. Posteriormente, os animais vacinados foram infectados com Mycobacterium tuberculosis (H37Rv) para se avaliar a proteção conferida pela vacina. Os resultados mostraram que a nanopartícula teve capacidade de gerar resposta imune celular dos tipos Th1, Th17 e T CD8, dependendo da via de inoculação (subcutânea, intranasal ou mista). Essa resposta foi principalmente do tipo Tc1 e foi capaz de proteger contra o desafio com Mtb. Adicionalmente, não houve qualquer aparecimento de efeito colateral ou danos em órgãos dos animais infectados, demonstrando que a formulação é segura. Por fim, as formulações vacinais com MeNPs, mais especificamente com ferrita de manganês, então demonstram potencial aplicação em vacinologia, podendo ser aplicada em formulações vacinais para gerar resposta imune celular, mas deve-se levar em conta a rota e, caso for utilizar outros adjuvantes complementares, deve-se pensar na possível interação da NP com o adjuvantes e seus ligantes.

Introdução: O enfermeiro é responsável em atuar no controle da contaminação do ambiente, visando a prevenção de transmissão de infecções relacionadas à assistência à saúde. Surtos de gastroenterite causados por norovirus (NoV) em locais fechados são caracterizados pela persistência do vírus no ambiente, aerolização das partículas virais e baixa dose infectante, mesmo em indivíduos saudáveis. Portanto, há necessidade de definição de um protocolo seguro para limpeza e desinfecção do piso contaminado com vômito e fezes, considerando a possibilidade de dispersão de aerossóis a partir do piso. Objetivo: Avaliar a presença residual de partículas de NoV-GII no ar e no piso quando implementados diferentes protocolos de descontaminação do piso, após contaminação intencional. Método: Trata-se de um estudo experimental laboratorial. Dois tipos de piso, vinil e granito (matérias primas frequentemente utilizadas nos pisos dos serviços de saúde), foram contaminados intencionalmente com fezes humanas positivas 10% para NoV-GII, dissolvidas em 500ml de solução tampão salino-fosfato. Os pisos foram submetidos a três tipos de tratamento: limpeza padronizada com fricção manual, água e detergente neutro; limpeza seguida de desinfecção com hipoclorito de sódio 1% por 10 minutos; limpeza seguida de desinfecção com dispositivo portátil de luz ultravioleta por cinco minutos (SURFACE-UV®). Amostras foram obtidas do piso, por meio do swab, e do ar, por meio de um coletador de ar (Coriolis® - Bertin Technologies, França), nos seguintes momentos: antes e após a contaminação intencional; após a limpeza e após os métodos de desinfecção. Para detecção de NoV-GII nas amostras, utilizou-se a técnica 4.6.2. Reação em Cadeia pela Polimerase quantitativa precedida de Transcrição Reversa (RT-qPCR), pelo método TaqMan®. Resultados: Não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os tipos de piso após os protocolos de descontaminação, tanto para o residual de NoV-GII no piso, quanto no ar. Os valores médios de Cycle Threshold (Ct) após limpeza seguida de desinfecção foram maiores (38,75 40,00) comparados aos de após limpeza (35,67 38,66), comprovando a maior eficácia desse protocolo (p<0,001). Em algumas amostras, a limpeza isolada foi capaz de reduzir a contaminação por NoV do piso até níveis indetectáveis. Quando houve residual de NoV-GII após a limpeza do piso, o protocolo cuja desinfecção foi realizada com hipoclorito de sódio foi mais eficaz do que a luz ultravioleta (p<0,001), sendo que os valores de Ct de todas as amostras foram acima de 40. Em 27 das 36 (75%) amostras de ar coletas após a limpeza do piso, foram detectadas partículas de NoV, com diferenças estatisticamente significantes entre as segundas e terceiras amostras, coletadas a 150cm do piso. Foram identificadas que, em média, 17 cópias de RNA viral/L estavam presentes no ar após a limpeza, com redução gradual após a desinfecção. Conclusões: Quando vômito e fezes com NoV-GII contaminam o piso, há aerolização desse vírus já no ato da limpeza. Essas partículas podem ser inaladas ou depositarem em superfícies frequentemente tocadas pelas mãos, estabelecendo o ciclo de transmissão oro-fecal. As partículas virais residuais no piso após a limpeza, indiscutivelmente devem ser eliminadas, evitando assim a reaerolização do NoV a partir dessa fonte. Nesse sentido, a limpeza seguida de desinfecção com hipoclorito de sódio a 1% por 10 minutos mostra superioridade como protocolo de descontaminação do piso, quando comparado ao protocolo com limpeza seguida de desinfecção com luz ultravioleta por 5 minutos de exposição. / Introduction: Nurses are responsible for controlling contamination of the environment, working to prevent the transmission of health-care-associated infections. Gastroenteritis outbreaks caused by Norovirus (NoV) in closed settings are characterized as the result of persistence of the virus in the environment, aerosolization of viral particles, and small infectious dose, even in healthy individuals. Therefore, a safe protocol to decontaminate the floor after vomit or feces have spilled must be defined, considering that subsequent aerosol dispersal may occur. Objective: To assess the presence of residual NoV-GII particles in the air and on the floor after different decontamination protocols are conducted on a deliberately contaminated floor. Method: This is an experimental laboratory study. Two types of floor, vinyl and granite (materials which are often used in the flooring of healthcare facilities), were intentionally contaminated with 10% NoV-GII-positive human feces dissolved in 500ml of a saline-phosphate buffer solution. The floors received three types of treatment: standard cleaning, with manual friction, water, and neutral detergent; cleaning followed by a ten- minute disinfection procedure using 1% sodium hypochlorite; and cleaning followed by a five- minute disinfection procedure using a portable ultraviolet light device (SURFACE-UV®). Swab samples were taken from the floor, and air samples were obtained using an air sampler (Coriolis® - Bertin Technologies, France) at the following moments: before and after the intentional contamination, after cleaning, and after disinfection. The TaqMan® method for real-time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction was used to detect NoV-GII in the samples. Results: No statistically significant difference between the two types of floor was found for residual NoV-GII, either in the air or on the floor, after the decontamination protocols. The average Cycle Threshold (Ct) values found after cleaning followed by disinfection were higher (38.75 - 40.00) than those recorded after cleaning (35.67 - 38.66), thus attesting to the greater effectiveness of the latter protocol (p<0.001). In some samples, cleaning alone was enough to reduce floor contamination by NoV to undetectable levels. When residual NoV-GII was found after cleaning the floor, the disinfection protocol that involved using sodium hypochlorite proved more effective than UV-light exposure (p<0.001), and Ct values were higher than 40 for all samples. NoV particles were detected in 27 of the 36 (75%) air samples obtained after cleaning the floor, and significant statistical differences were found between the second and third samples, collected 150cm from the floor. An average of 17 copies of viral RNA/L were identified in the air after cleaning, gradually decreasing after disinfection. Conclusions: When NoV-GII-infected vomit or feces contaminate the floor, the virus is aerosolized even during cleaning. These particles may then be inhaled or settle on frequently touched surfaces, establishing the fecal-oral transmission cycle. Residual viral particles on the floor must undoubtedly be eliminated, thereby preventing NoV aerosolization from this source. Along these lines, cleaning followed by disinfection by 1% sodium hypochlorite for ten minutes proved to be a superior floor decontamination protocol when compared with cleaning followed by disinfection by UV-light exposure for five minutes.