Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio Carlos Mattar Munhoz.pdf: 1942364 bytes, checksum: 27beadc3c2442dbed10751b6f4c34610 (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / The Synadenium grantii specie is a shrub that reaches between 3 and 5 meters high, native of tropical Africa, producing of toxic latex. It is known in Brazil as janauba, tiborna or leitosinha and its latex is popularly used as remedy for reducing warts, treatment of cancer, gastric and inflammatory diseases. From its latex and aerial parts, some terpenes, anthocyanins, glycoproteins as lectin and serine proteases were already isolated. Biological studies report antitumor, antiparasitic, anti-haemostatic and anti-ulcer activities. The current study aimed to isolate and indentify bioactive compounds, as well as to identify the antioxidant and antimicrobial potential of the crude stem bark extract of S. grantii and its fractions. The chemical study was performed with the chloroform fraction, obtained from the crude stem bark extract (CE) using column and thin layer chromatographic techniques what enabled to isolate three triterpenes: eufol, and for the first time from this specie friedelin and 3 friedelinol. The compounds were identified by NMR and IR spectrometry and compared with literature data. With HPLC technique it was detected the presence of flavonoids in the CE, result that was reinforced with the quantification of total phenolics, by Folin-Ciocalteaumethod, for both CE and its fractions. It was observed that this specie is source of antioxidant compounds, due to the pronounced CE action for both chemical (ABTS+•, DPPH•, O2, HOCl) and enzymatic (MPO) in vitro systems, as well as ex vivo system (free radical induced haemolysis) indicating potential not only to neutralize, but for reduce formation of free radicals, as protect cells (erythrocytes) of free radicals deleterious action. In addition, an antimicrobial study was performed using disc-diffusion and MIC methods with the following microorganisms: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa,Enterococcus faecalis and Candida albicans. The last one exhibited sensibility to CE in both disc-diffusion and MIC (312 μg/mL). / A Synadenium grantii é uma planta arbustiva que atinge entre 3 e 5 metros de altura, nativa da África tropical, produtora de um látex tóxico. É conhecida no Brasil como janaúba, tiborna ou leitosinha e seu látex é popularmente utilizado como remédio para a redução de verrugas, tratamento de câncer, doenças gástricas e inflamatórias. Do látex e partes aéreas da planta já foram isolados alguns terpenos, antocianinas e glicoproteínas como lectina e serino-proteases. Pesquisas biológicas já realizadas com esta espécie indicam ação antitumoral, antiparasitária, anti-hemostática e antiúlcera. O presente estudo objetivou isolar e identificar compostos bioativos, bem como identificar o potencial antioxidante e antimicrobiano do extrato bruto das cascas do caule da S. grantii e suas frações. O estudo químico foi realizado com a fração clorofórmica obtida do extrato bruto (EB) utilizando-se técnicas de cromatografia em coluna e camada delgada o que possibilitou o isolamento de três triterpenos: o eufol e também, pela primeira vez nesta espécie, a friedelina e o 3-friedelinol. As substâncias foram identificadas por espectroscopia de RMN e IV, comparando os dados obtidos com os existentes na literatura. Pela técnica de HPLC foi detectada a presença de compostos flavonoídicos no EB, resultado corroborado com a quantificação de fenólicos totais pelo método de Folin-Ciocalteau realizado tanto com o extrato bruto quanto com suas frações. Observou-se que esta espécie é fonte de compostos antioxidantes, devido à acentuada ação do extrato, tanto em sistemas químicos (ABTS+•, DPPH•, O2 •-, HOCl) e enzimáticos (MPO) in vitro, quanto em sistema ex vivo (hemólise induzida por radicais livres) indicando o potencial não apenas para neutralizar, mas também para reduzir a formação, bem como proteger células (eritrócitos) da ação deletéria de radicais livres. Ainda, um estudo antimicrobiano utilizando-se as técnicas de disco-difusão e CIM foi conduzido com os micro-organismos Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis e Candida albicans. Esta última demonstrou sensibilidade ao EB tanto na técnica de disco-difusão quanto na técnica de CIM (312 μg/mL).

Da fração hexânica do extrato metanólico das folhas de Guarea guidonia (Meliaceae), foram isolados os diterpenos: [11S-(1α,2E,6E,10α)]-3,7,11-trimetil-11-(4-metil-pent-3-en-1-i1)biciclo[8.1.0]undeca-2,6-dieno e [1S(1aβ,4aα,7aβ,7bβ)]-decaidro-1,7-dimetil-1-(4-metil-pent-3-en-1-il)-4-metilen-1H-cicloprop[e]azulen-7-ol, já descritos na literatura, além de dois novos isômeros de [1S-(1aβ,4aα,7aβ, 7aβ)]-decaidro-1,7-dimetil-1-(2-hidroxi-4-metil-pent-3-en-1-il)-4metilen-1H-cicloprop[e]azulen-7-ol. No óleo essencial obtido das folhas do mesmo espécimen foram identificados, através da análise dos dados espectroscópicos (RMN 13C, RMN 1H e EM), os sesquiterpenos: eudesma-5,7-dieno, 5α,6α-epoxi-eudesm-7-eno, eudesma-5,7-dien-2α-ol, 5α,6α-epoxi-eudesm-7-en-9-ol e guaia-6-en-10-ol, ainda não descritos na literatura, além de eudesma-4(15), 11(13)-dieno, eudesm-6-em-4α-ol, eudesma-4,11-dieno e 5α,6α,7α,8α-diepoxieudesmano. Diversos extratos vegetais assim como substâncias puras e misturas de composições conhecidas foram testadas com a finalidade de se detectarem substâncias com atividade anticancerígena. Para tal, empregou-se o bioensaio com linhagens mutantes do fungo Saccharomyces cerevisiae, utilizados pelo grupo do Prof. Dr. David Kingston, do Virgínia Tech Institute. Também foi realizado um estudo químico biomonitorado por aquele bioensaio. / From the hexanic extract of the dry leaves of Guarea guidonia (Meliaceae) two new isomers of decahydro-1,7-dimethyl-1-(2-hydroxy-4-methyl-pent-3-en-1-yl)4- methylen-1H-cycloprop[e]azulen-7-ol were isolated together with the known diterpenes [11S-(1α,2E,6E,10α)]-3,7,11-trimethyl-11-(4-methyl-pent-3-en-1yl) bicyclo[8.1.0]undeca-2,6-dien and [1S-(1aβ,4aα,7aβ,7bJ3)]-decahydro-1,7dimethyl- 1-(4-methyl-pent-3-en-1-yl)-4-methylen-1H-cycloprop[e]azulen-7-ol. The essential oil from the leaves of the same plant afforded the sesquiterpenes eudesma-5,7-diene, 5α,6α-epoxy-eudesm-7-ene, eudesma-5,7-dien-2α-ol, 5α,6α-epoxy-eudesm-7-en-9-ol and guaia-6-en-10-ol not previouly described, besides eudesma-4(15),11 (13)-diene, eudesm-6-en-4α-ol, eudesma-4,11-diene and 5α,6α,7α,8α-bisiepoxy-eudesmane. All of these compounds were identified through 13C and 1H NMR spectroscopy as well as MS. Several plant extracts and pure compounds were tested in the search for potential anticancer agents, through the mechanism-based yeast bioassay, utilizing mutants of the yeast Saccharomyces cerevisiae. The screening of those plant materials and a bioassay-guided fractionation of an active extract were both carryed out in the laboratories of Professor David G.I. Kingston at Virginia Tech Institute.

A presente tese relata o estudo químico de duas espécies vegetais pertencentes à família Asteraceae: Mikania sp. nov; e Wunderlichia crulsiana. Da espécie Mikania sp. nov. foram estudados os extratos diclorometânicos das folhas e dos galhos, tendo sido isolados e identificados sete ácidos diterpênicos; dos óleos voláteis das folhas e dos galhos foram identificadas vinte substâncias entre monoterpenos e sesquiterpenos. Da espécie Wunderlichia crulsiana foram estudados os extratos diclorometânicos das flores e dos galhos. Das flores foram isolados e identificados palmitatos e acetatos de triterpenoílas. Dos galhos foram isolados e identificados acetatos de triterpenoílas e triterpenonas e identificados por CG triterpenóis acetilados e palmitatos de triterpenoílas hidrolisados e posteriormente acetilados. Deste extrato foram também isolados e identificados três lactonas sesquiterpênicas e um sesquiterpeno. A identificação das substâncias foi realizada através de RMN de 1H, de 13C (BBD e DEPT 135º), CG/EM e co-injeção de padrões. Os extratos brutos de ambas as plantas apresentaram discreta atividade, quando submetidos a um ensaio antifúngico. As frações, contendo os triterpenóis, acetatos e palmitatos de triterpenoflas e as lactonas sesquiterpênicas, foram testadas quanto à atividade anti-infíamatória mostrando-se bastante ativas. Tanto os extratos brutos quanto as fraqões supracitadas não se mostraram ativos em um ensaio antitumoral. Estes resultados indicam a seletividade da atividade dos extratos e frações, possivelmente não contendo substâncias citotóxicas. / This work describes the chemical study of two plants which belong to the family Asteraceae: Mikania sp. nov. and Wunderlichia crulsiana. The dichlorometane extracts from leaves and stems of Mikania sp. nov. we studied and seven diterpenic acids were isolated and identified. The volatile oil from leaves and stems of this plant were also studied and twenty substances among monoterpenes and sesquiterpenes were identified. From Wunderlichia crulsiana we analysed the dichlorometane extracts from flowers and stems. From flowers we isolated and identified triterpenes esterified with palmitic acid and acetic acid. From stems we isolated and identified triterpenes esterified with acetic acid and 3-oxo-triterpenes. By GC, we identified hydroxylated triterpenes that were acetylated, and triterpenes esterified with palmitic acid that were hydrolysed and acetylated. From stems we also isolated and identified three sesquiterpene lactones and a sesquiterpene. The compounds were identified by PMR, CMR (BBD and DEIT 135º), GC/MS and co-injection with authentic samples The extracts of both plants showed low activity when submitted to bioassay with Cladosporium sphaerospermum. The fractions which contain the hydroxylated triterpenes, triterpenes esterified with acetic and palmitic acids and sesquiterpene lactones were submitted to anti-inflammatory bioassay and showed 42%, 29%, 29% and 47% of activity, respectively. The above mentioned extracts and the fractions did not show significant activity on the Saccharomyces cerevisae bioassay, so there were not citotoxic substances in them.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4543246 bytes, checksum: 7af86d095cf95ab3b670f13bd9a7c55d (MD5) Previous issue date: 2011-11-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Candidiasis has been important fungal infection related in hospital environment, and the main specie involved is Candida albicans. This fact has encouraged researchers alternatives in the treatment of candidiasis. The terpenes are strong candidates like antifungal agents, however it is necessary to study the toxicity of this molecules. The aim of this study was to investigate the antifungal activity, the mode of action of citral and carvacrol, the time-kill and synergism of carvacrol, besides toxicological studies. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) of citral was 512 μg/mL e 1024 μg/mL, respectively. The MIC and MFC of carvacrol was 256 μg/mL e 512 μg/mL, respectively. These phytoconstituints did not act sorbitol view. Carvacrol interacts with ergosterol. However, the phytoconstituints citral and carvacrol are able interacting with cholesterol. The monoterpenes did not showed synergism neither antagonism with amphotericine B. They inhibited the psedo-hife formation in C. albicans. Citral and carvacrol altered some biochemical paramenters, water and food consumption in mice. They showed citotoxicity action in MDCKs cells and they did not have oxidative and antioxidant effect. / A candidíase tem sido a principal infecção fúngica relatada em ambiente hospitalar, tendo como a principal espécie envolvida a Candida albicans. Essa realidade tem estimulado pesquisas no intuito encontrar alternativas terapêuticas. Os terpenos tem sido fortes candidatos como agentes antifúngicos, o que necessitou investigar também sua toxicidade. O objetivo desse trabalho foi de avaliar a atividade antifúngica, o modo de ação do citral e do carvacrol, a cinética de morte microbiana e do sinergismo do carvacrol, além da toxicidade pré-clínica. A concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) do citral foi de 512 μg/mL e 1024 μg/mL, respectivamente. A CIM e CFM do carvacrol foi de 256 μg/mL e 512 μg/mL, respectivamente. O citral e o carvacrol não atuam pela via do sorbital. Apenas o carvacrol interagiu com o ergosterol, enquanto que esse e o citral foram capazes de se ligarem ao colesterol. Os monoterpenos não apresentaram sinergismo e nem antagonismo com a anfotericina B. Citral, carvacrol e anfotericina B inibiram a formação de pseudo-hifas em C. albicans. O citral alterou ALT e triglicerídeos dos camundongos machos, enquanto que o carvacrol alterou a AST dos mesmos no experimento de toxicidade aguda, além de terem causado alterações no consumo de água e ração dos animais. Os monoterpenos apresentaram citoxicidade frente às células MDCKs e ambos não apresentaram efeitos oxidativos ou antioxidantes quando testados com as hemácias humanas.

Terpenos são compostos que fazem parte da constituição de óleos essenciais. Estes compostos são formados pela condensação de unidades de isopreno e quando contêm oxigênio são denominados terpenoides. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antioxidante dos terpenoides citral, citronelal, citronelol, 1,8-cineol, geraniol, α-terpineol e do sesquiterpeno β-cariofileno. Para tanto, as concentrações inibitórias mínimas (CIM) e as doses inibitórias 50% (DI50) foram determinadas através do método de diluição seriada (0 a 10 μL/mL v/v) em microplacas. A viabilidade celular, na concentração inibitória mínima, foi avaliada por plaqueamento e contagem. Foi avaliado também o efeito dos terpenoides sobre a respiração de bactérias e leveduras. Além disso, testes específicos envolvendo citral, citronelal, citronelol e geraniol foram realizados com as leveduras Saccharomyces cerevisiae e Candida albicans, sendo eles: avaliação da sobrevivência, lise celular e perda de componentes celulares. A atividade antioxidante in vitro dos terpenoides foi determinada pelo método DPPH(1,1-difenil 2-picrilhidrazil)A atividade antioxidante in vivo de citral e citronelal foi realizada utilizando S. cerevisiae como organismo modelo. Os resultados mostraram que os seis terpenoides e sesquiterpeno têm atividade antimicrobiana, com variação entre as concentrações destes isolados e o tipo de microrganismo avaliado. De um modo geral, o citral foi o terpenoide que exibiu ação antimicrobiana mais expressiva, enquanto o β-cariofileno afetou um número restrito de microganismos. A presença de citral e citronelal, nas concentrações inibitórias mínimas correspondentes, reduziu a respiração de Salmonella typhinmurium e Staphylococcus aureus. C. albicans e S. cerevisiae, quando tratadas com CIM de citral, citronelal, citronelol e geraniol, tiveram a respiração inibida. Geraniol foi o terpenoide com maior atividade microcida sobre C. albicans. Citral, citronelol, citronelal e geraniol induziram a perda de componentes celulares tanto em C. albicans quanto em S. cerevisiae. Todos os compostos mostraram atividade antioxidante in vitro, particularmente o citral. Por outro lado, citronelal foi o único terpenoide que apresentou atividade antioxidante in vivo, sobre células eucarióticas. De uma maneira geral, o presente trabalho mostrou que o citral apresenta importante atividade antioxidante e antimicrobiana, induzindo a perda de componentes celulares e inibindo a respiração. Estas informações são importantes para aplicações farmacológicas deste composto ou óleos essenciais com elevada concentração de citral. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-03T18:58:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Cristiane Menegotto Toscan.pdf: 1090361 bytes, checksum: 9966c4bc0984b31ac43b1694565a97b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-03T18:58:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Cristiane Menegotto Toscan.pdf: 1090361 bytes, checksum: 9966c4bc0984b31ac43b1694565a97b7 (MD5) / Terpenes are the main constituents of plant essential oils. These compounds are formed by the condensation of isoprene units, and when contain oxygen are named terpenoids. The present work aimed to evaluate the antimicrobial and antioxidant activity of terpenoids citral, citronellal, citronellol, 1,8-cineole, geraniol, α- terpineole and sesquiterpene β-caryophyllene. Thus for, the minimal inhibitory concentrations (MIC), and the inhibitory dosage 50% (ID50) were determined using the microplate serial dilution method (0 to 10 μL/mL v/v). Cell viability at the MIC concentration was evaluated by plating and counting. The effect of terpenoids on bacterial and yeast respiration was evaluated. Moreover, the following specific tests were developed on Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans using citral, citronellal, citronellol and geraniol: cell viability, cellular lysis, and loss of cellular components. The in vitro antioxidant activity of the terpenoids was determined by the DPPH (1,1-difenil 2-picrilhidrazil)essay. In vivo antioxidant activity of citral and citronellal was evaluated using S. cerevisiae as model organism. The results showed that all the six terpenoids and one sesquiterpene have antimicrobial activity, with variation among terpenoids and microrganisms. In general, citral exhibited the highest antimicrobial activity, where β-cariophyllene affects a restricted number of organisms. The presence of citral and citronellal at their MICs reduced respiration of Salmonella typhimurium and Staphylococcus aureus. Respiration inhibitory activity of citral, citronellol, citronellal and geraniol was also evidenced on C. albicans and S. cerevisiae. Geraniol was the terpenoid with the highest microcide activity on C. albicans and S. cerevisiae, as determined by the methylene blue staining method. Citronellal and citronellol exhibited low lytic activity on S. cerevisiae, but not on C. albicans. Citral, citronellol, citronellal and geraniol induced the loss of cellular components in both C. albicans and S. cerevisiae. All the compounds showed in vitro antioxidant activity, particularly citral. Conversely, citronellal was the only terpenoid with in vivo antioxidant activity on eukaryotic cells. In general, the present work showed that citral has an important antioxidant and antimicrobial activity, inducing the loss of cellular components and inhibiting cell respiration. These informations are important for the pharmacological application of this compound or essential oils with high concentration of citral.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A pesquisa para o desenvolvimento de novas drogas quimioterápicas, tem se baseado nas propriedades dos produtos de origem natural. Estudos experimentais em animais indicam que o álcool perílico (AP), um monoterpeno originalmente isolado dos óleos essenciais de várias plantas é capaz de causar a regressão de diferentes tipos de tumores. O tratamento clássico preconizado para os astrocitomas anaplásicos e glioblastoma multiforme consiste de: ressecção cirúrgica, radioterapia e/ou quimioterapia e raramente apresentam efeito curativo. O presente trabalho teve como objetivo analisar o efeito do AP na proliferação, na alteração da morfologia, na síntese de proteínas e migração celular de diferentes linhagens de glioblastoma murino e humano. Foram utilizados modelos in vitro de cultivo de células e ensaios in vivo de migração celular. O tratamento in vitro com o AP nas concentrações v/v de 0,003%, 0,02%, 0,03%, 0,3%, 3% e 30% nas linhagens de glioblastoma C6 de murinos e linhagens A172 e U87MG de glioblastoma humano, mostrou que mesmo nas concentrações (v/v) mais baixas (0,03% e 0,3%) o AP promove a inibição da proliferação celular e da síntese de proteínas. O tratamento in vitro com o AP a 0,3% v/v causou após 15 minutos perda da permeabilidade celular e mais tardiamente, 50 minutos, alterações acentuadas na citoarquitetura das linhagens C6, U87MG e A172. Nos ensaios in vivo com ovos embrionados, o tratamento com o AP nas concentrações v/v 0,3% e 0,03% causou efeito inibitório na migração celular da linhagem C6. Os resultados sugerem uma eficácia quimioterápica do AP na citotoxidade e na inibição da migração celular de linhagens de glioblastoma murino e humano. / The search for new chemotherapeutic drugs has increased, especially for those that have a natural origin. Perillyl alcohol (POH), is a naturally occurring monoterpene, found in the essential oils of citrus fruits and other plants, with pronounced chemotherapeutic activity and minimal toxicity in preclinical studies. Standard treatment of anaplastic gliomas and glioblastoma multiforme consisting of surgical resection, radiation therapy and/or chemotherapy is rarely curative. This work aimed to evaluate in vitro and in vivo effects of POH treatment, cell proliferation, changes in morphology, protein synthesis, and migration of distinct lineage of glioblastoma cells. It was chosen in vitro culture systems and in vivo assays for assessing cellular migration. In vitro treatment of POH at concentrations of (v/v) 0.003%, 0.02%, 0.03%, 0.3%, 3% and 30%, consistently inhibited proliferation of murine C6 and human A172 and U87MG of glioblastoma cells. In vitro treatment of POH at low concentrations 0.03% v/v and 0.3% v/v also produced marked changes in cell morphology and inhibited protein synthesis. Likewise in vitro assays with 0.3% v/v POH treatment for 15 minutes, initially caused marked alteration in membrane permeability and later (50 minutes) drastic changes in the cytoarchitecture of C6, U87MG and A172 cells. Furthermore, previous in vitro treatment of glioblastoma cells with 0.3% v/v and 0.03% v/v POH showed inhibition of cell migration and anti-metastatic activity in the in vivo model of the chick embryo with C6 cell line. Such results indicate the chemotherapeutic action of POH by promoting cytotoxicity and arresting migration of murine and human glioblastoma cell lines

Stachys lavandulifolia Vahl (Lamiaceae) is a medicinal plant widely used in Turkey and in Iranian folk medicine because of its analgesic and anti-inflammatory properties. The objective of this study was to evaluate the antinociceptive and anti-inflammatory effects of the essential oil of S. lavandulifolia (EOSl) and (-)-a-bisabolol (BIS), its main compound, in mice. Chromatographic analysis of EOSl showed the presence of (-)-a-bisabolol (56.4%), bicyclogermacrene (5.3%), d-cadinene (4.2%) and spatulenol (2.9%) as main compounds. Male Swiss mice were pretreated with EOSl (25 or 50 mg/kg, po), BIS (25 or 50 mg/kg, po), morphine (3 mg/kg, ip) or vehicle (saline solution 0.9% with two drops of tween 80). Formalin (20 µl, 2%), capsaicin (20 µl, 2.5 µg) or glutamate (20 µl, 25 µm) were injected into the right upper lip of the mice. The anti-inflammatory profile of EOSl or BIS (50mg/kg) was evaluated by the carrageenan-induced inflammatory response (2% in 0.2mL) (pleurisy model) (CEPA/UFS # 72/2015). Data were expressed as mean ± S.E.M. and the difference between groups was analyzed by ANOVA (one-way) with Tukey post-test (p<0.05 was considered significant). Treatment with EOS1 and BIS showed significant inhibitory effects (p<0.05 or p<0.01 or p<0.001) in different orofacial nociception tests, but BIS was effective, significantly reducing nociceptive behavior in all the tests including both phases of the formalin test. The analgesic effect is not related to any anomaly, since the mice treated with EOSl or BIS did not present change in performance in the grip strength. In addition, EOS1 and BIS presented a significant anti-inflammatory effect (p<0.001) in the pleurisy model, which seems to be related to a significant (p <0.05) reduction of the pro-inflammatory cytokine TNF-a in BIS treatment, and IL-1ß (p<0.01) on treatment with EOS1. Our results corroborate the use of S. lavandulifolia in traditional medicine as an analgesic, especially in orofacial pain, and anti-inflammatory, which seems to be related to (-)-a-bisabolol, the main compound of EOS1. / Stachys lavandulifolia Vahl (Lamiaceae) é uma planta medicinal amplamente utilizada na Turquia e na medicina popular iraniana devido às suas propriedades analgésicas e antiinflamatórias. Diante disso, objetivou-se avaliar os efeitos antinociceptivos e antiinflamatórios do óleo essencial de S. lavandulifolia (EOSl) e do (-)-a-bisabolol (BIS), seu principal composto, em camundongos. A análise cromatográfica do EOSl demonstrou a presença de (-)-a-bisabolol (56,4%), biciclogermacreno (5,3%), d-cadineno (4,2%) e espatulenol (2,9%) como compostos principais. Camundongos Swiss machos foram pré- tratados com EOSl (25 ou 50 mg/kg, v.o.), BIS (25 ou 50 mg/kg, v.o.), morfina (3 mg/kg, i.p.) ou veículo (solução salina 0,9% com tween 80 a 0,2%). Formalina (20µl, 2%), capsaicina (20µl, 2,5µg) ou glutamato (20µl, 25Mm) foram injetados no lábio superior direito dos camundongos. O perfil anti-inflamatório de EOSl ou BIS (50mg/kg) foi avaliado pela resposta inflamatória induzida por carragenina (2% em 0,2 mL) (modelo de pleurisia) (CEPA/UFS: 72/2015). Os dados foram expressos como média ± E.P.M. e a diferença entre os grupos foi analisada por ANOVA, uma via, com pós-teste de Tukey (p<0,05 foi considerado significativo). O tratamento com EOSl e BIS mostrou efeitos inibitórios significativos (p<0,05 ou p<0,01 ou p<0,001) em diferentes testes de nocicepção orofacial, porém o BIS demonstrou-se eficaz, reduzindo significativamente o comportamento nociceptivo em todos os testes, incluindo ambas as fases do teste da formalina. O efeito analgésico não está relacionado com qualquer desequilibrio, uma vez que os camundongos tratados com EOSl ou BIS não apresentaram alteração de desempenho na força de preensão. Além disso, EOS1 e BIS apresentaram efeito anti-inflamatório significativo (p<0,001) no modelo de pleurisia, o que parece estar relacionado a uma redução significativa (p<0,05) da citocina pró-inflamatória TNF-a no tratamento com BIS, e da IL-1ß (p<0,01) no tratamento com EOS1. Nossos resultados corroboram com o uso de S. lavandulifolia na medicina tradicional como analgésico, sobretudo na dor orofacial, e anti-inflamatório, o que parece estar relacionado ao (-)-a-bisabolol, principal composto do EOSl. . / Lagarto, SE

Terpenos são compostos que fazem parte da constituição de óleos essenciais. Estes compostos são formados pela condensação de unidades de isopreno e quando contêm oxigênio são denominados terpenoides. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antioxidante dos terpenoides citral, citronelal, citronelol, 1,8-cineol, geraniol, α-terpineol e do sesquiterpeno β-cariofileno. Para tanto, as concentrações inibitórias mínimas (CIM) e as doses inibitórias 50% (DI50) foram determinadas através do método de diluição seriada (0 a 10 μL/mL v/v) em microplacas. A viabilidade celular, na concentração inibitória mínima, foi avaliada por plaqueamento e contagem. Foi avaliado também o efeito dos terpenoides sobre a respiração de bactérias e leveduras. Além disso, testes específicos envolvendo citral, citronelal, citronelol e geraniol foram realizados com as leveduras Saccharomyces cerevisiae e Candida albicans, sendo eles: avaliação da sobrevivência, lise celular e perda de componentes celulares. A atividade antioxidante in vitro dos terpenoides foi determinada pelo método DPPH(1,1-difenil 2-picrilhidrazil)A atividade antioxidante in vivo de citral e citronelal foi realizada utilizando S. cerevisiae como organismo modelo. Os resultados mostraram que os seis terpenoides e sesquiterpeno têm atividade antimicrobiana, com variação entre as concentrações destes isolados e o tipo de microrganismo avaliado. De um modo geral, o citral foi o terpenoide que exibiu ação antimicrobiana mais expressiva, enquanto o β-cariofileno afetou um número restrito de microganismos. A presença de citral e citronelal, nas concentrações inibitórias mínimas correspondentes, reduziu a respiração de Salmonella typhinmurium e Staphylococcus aureus. C. albicans e S. cerevisiae, quando tratadas com CIM de citral, citronelal, citronelol e geraniol, tiveram a respiração inibida. Geraniol foi o terpenoide com maior atividade microcida sobre C. albicans. Citral, citronelol, citronelal e geraniol induziram a perda de componentes celulares tanto em C. albicans quanto em S. cerevisiae. Todos os compostos mostraram atividade antioxidante in vitro, particularmente o citral. Por outro lado, citronelal foi o único terpenoide que apresentou atividade antioxidante in vivo, sobre células eucarióticas. De uma maneira geral, o presente trabalho mostrou que o citral apresenta importante atividade antioxidante e antimicrobiana, induzindo a perda de componentes celulares e inibindo a respiração. Estas informações são importantes para aplicações farmacológicas deste composto ou óleos essenciais com elevada concentração de citral. / Terpenes are the main constituents of plant essential oils. These compounds are formed by the condensation of isoprene units, and when contain oxygen are named terpenoids. The present work aimed to evaluate the antimicrobial and antioxidant activity of terpenoids citral, citronellal, citronellol, 1,8-cineole, geraniol, α- terpineole and sesquiterpene β-caryophyllene. Thus for, the minimal inhibitory concentrations (MIC), and the inhibitory dosage 50% (ID50) were determined using the microplate serial dilution method (0 to 10 μL/mL v/v). Cell viability at the MIC concentration was evaluated by plating and counting. The effect of terpenoids on bacterial and yeast respiration was evaluated. Moreover, the following specific tests were developed on Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans using citral, citronellal, citronellol and geraniol: cell viability, cellular lysis, and loss of cellular components. The in vitro antioxidant activity of the terpenoids was determined by the DPPH (1,1-difenil 2-picrilhidrazil)essay. In vivo antioxidant activity of citral and citronellal was evaluated using S. cerevisiae as model organism. The results showed that all the six terpenoids and one sesquiterpene have antimicrobial activity, with variation among terpenoids and microrganisms. In general, citral exhibited the highest antimicrobial activity, where β-cariophyllene affects a restricted number of organisms. The presence of citral and citronellal at their MICs reduced respiration of Salmonella typhimurium and Staphylococcus aureus. Respiration inhibitory activity of citral, citronellol, citronellal and geraniol was also evidenced on C. albicans and S. cerevisiae. Geraniol was the terpenoid with the highest microcide activity on C. albicans and S. cerevisiae, as determined by the methylene blue staining method. Citronellal and citronellol exhibited low lytic activity on S. cerevisiae, but not on C. albicans. Citral, citronellol, citronellal and geraniol induced the loss of cellular components in both C. albicans and S. cerevisiae. All the compounds showed in vitro antioxidant activity, particularly citral. Conversely, citronellal was the only terpenoid with in vivo antioxidant activity on eukaryotic cells. In general, the present work showed that citral has an important antioxidant and antimicrobial activity, inducing the loss of cellular components and inhibiting cell respiration. These informations are important for the pharmacological application of this compound or essential oils with high concentration of citral.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The farnesol (C15H26O) is a sesquiterpene alcohol found in herbs and essential oils. Research show some beneficial properties of farnesol as: antioxidant, anti-inflammatory and chemopreventive properties. However, the farnesol futher inhibition of activity of L-type calcium channels in smooth muscle. This study sought to analyze the involvement of calcium channels L-type in the cardiodepressant farnesol response in the rat heart. To this, contractile studies were conducted on left atria drawn to rest tension 5mN (0,5gf) and subjected to field stimulation with above-threshold current pulses of the 1 Hz, kept in isolated organ vessel, submerged in Krebs-Henseleit solution (8 mL) and aerated with carbogênica mixture (95% O2 and 5% CO2). The atrial contraction force was capture by an isometric transducer. Electrocardiographic recordings were performe on isolated heart, aortic perfusion under a constant flow (10 ml / min) Langendorff type system. The hearts were keep spontaneously beating, to determine the heart rate, and in heart stimulated were determined PR interval (PRI), QT (QTi) and complex QRS. Left ventricular pressure was determined in the heart stimulated electrically by means of a balloon inflated with water at a pressure of 15 cmHg. In rat left atrium, the farnesol response to the contraction strength showed a negative inotropic effect, reducing the contraction force at 41.63% at the maximum concentration used, with an EC50 of 2.84 ± 0.19 mM. To evaluate the effect of farnesol of the positive inotropic response of CaCl2 and (±)-Bay K8644 was observed that the farnesol shifted to the right CaCl2 concentration-response curve and decreased maximum efficiency (100% to 23%) and abolished curve of (±)-Bay K8644. TEA was use to evaluate the role of K+ channels in the negative inotropic response and the maximum effect by farnesol (41.63 to 63.02%) was increased. In isolated heart, there was an increase of PRI, QTi and QRS complex, and reduced left ventricular pressure (37, 38%) and heart rate (25.22%). Thus, farnesol exerts inotropic and negative chronotropic responses in the heart by reducing current to the L-type Ca2+. / O farnesol (C15H26O) é um álcool sesquiterpênico encontrado em óleos essenciais e ervas aromáticas. Pesquisas evidenciam algumas propriedades benéficas do farnesol como: propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e quimiopreventivas. Entretanto, o farnesol promoveu inibição dos canais de cálcio tipo-L em músculo liso. Neste trabalho procurou-se analisar os efeitos do farnesol sobre os mecanismos contráteis e eletrofisiológicos sobre o coração de rato. Para esse fim, os estudos contráteis foram realizados em átrios esquerdo estirados a para uma tensão de repouso de 5mN (0,5gf) e submetidos a estimulação de campo com pulsos de corrente supralimiares de 1 Hz, mantido em cuba para órgão isolado, submerso em solução de Krebs-Henseleit (8 mL) e aerado com mistura carbogênica (95 % O2 e 5 % CO2). A força de contração atrial foi captada por um transdutor isométrico. Os registros eletrocardiográficos foram obtidos em coração isolado, sob perfusão aórtica de fluxo constante (10 mL/min), em sistema de Langendorff. Os corações foram mantidos com batimento espontâneo, para determinar a frequência cardíaca, e em corações estimulados foram determinados os intervalos PR (PRi), QT (QTi) e complexo QRS. A pressão ventricular esquerda foi determinada, em coração estimulado eletricamente, por meio de um balonete insuflado com água até uma pressão de 15 cmHg. Em átrio esquerdo de rato, a resposta do farnesol sobre a força de contração apresentou efeito inotrópico negativo, diminuindo a força de contração em 41,63% na concentração máxima usada, apresentando uma CE50 de 2,843 ± 0,19 mM. Ao avaliar o efeito do farnesol sobre a resposta inotrópica positiva do CaCl2 e (±)-BAY K8644 foi observado que o farnesol deslocou para direita a curva concentração-resposta do CaCl2 e diminuiu a eficácia máxima (100% para 23%) e aboliu a curva do (±)-BAY K8644. Para avaliar a participação dos canais para potássio na resposta inotrópica negativa foi utilizado TEA tendo aumento da eficácia máxima do farnesol de 41,63 para 63,02%. Em coração isolado, foi observado aumento do PRi, QTi e complexo QRS, e redução da pressão ventricular esquerda (37,38%) e frequência cardíaca (25,22%). Assim sendo, o farnesol exerce respostas inotrópicas e cronotrópicas negativas no coração, por redução das correntes para Ca2+ tipo-L.

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Limonene (LIM) is a monocyclic monoterpene, and one of the main constituents of several essential oils of citric fruits such as orange, tangerine and lemon. Among the essential oils found in citric fruits in general, R-(+)-limonene is the majoritarian component, which can reach concentrations from 90 to 96%. Cyclodextrins (CDs) are cyclic oligosaccharides, most commonly found with six, seven or eight glucose units, known respectively as α-CD, β-CD and γ-CD. They are obtained through the action of the enzyme cyclomaltodextrin glucanotransferase (CGTase) on starch. The CDs are able to form inclusion complexes, altering the physical and chemical properties of the complexed compounds. The objective with this work was to prepare and characterize physical-chemically inclusion complexes of limonene in α-and β-cyclodextrin, studying the properties of the supposed complex formed. Such complex was prepared by means of physical mixture, malaxage and co-evaporation, and was characterized through thermal analysis (differential scanning calorimetry– DSC – and thermogravimetry/derivative thermogravimetry – TG/DTG); gas chromatography coupled to a mass spectrometry -GC/MS; X-ray diffraction – DRX; Fourier infrared transform – FTIR – absorption spectrophotometry; electronic scanning microscopy – ESM;molecular modeling (Docking)and kinetic study of first-phase mass loss. From the results obtained through the analyses, it was possible to point out that both the α-CD and the β-CD formed inclusion complexes with limonene. However, in the DSC curves of the α-CD, which correspond to the methods of MA and CE, it was possible to observe a profile that is different from that observed for pure α-CD and MF. In the DSC curves for β-CD, we observed that the CE presented an endothermic profile that was more significant than were the MF and MA methods. According to the TG/DTGanalyses for α-CD, we can observe that the thermoanalytical profile of the complexes obtained through the MF, MA and CE methods were similar to that of -CD. The TG/DTG curves of limoneneshow mass loss around 100% in the interval of 30-169°C. The TG/DTG curve of α-CD showed two phases of mass loss (between 25 and 120°C) that add up to 10.7% of mass loss followed by decomposition and elimination of carbonaceous material. The TG/DTG curves of β-CD, MF, MA and CE presented a thermoanalytical profile that was similar to the complexes obtained with α-CD. After the evaluation of the mass losses shown on Table 2, we can see figures around 8% for MA and CE in the temperature range between 120 and 270º C, what is an indicator of the higher capacity of limonene complexation. In the results of CG/EM for α-CD, it was possible to observe that MA encapsulated limonene in a ratio of 1:0.49 (limonene: α-CD), but in a ratio that was lower to CE 1:18.11 (limonene: α-CD). Thus, it is shown that CE was the best method, and also that β-CD did not show any complexation in MF and MA. CE showed complexation efficiency of 1:1.44, being considered as the best method for complexation when compared to CE of α-CD. The standard of X-ray diffraction of MF was shown to be quite similar to those found for pure α-CD and β-CD. That is an indicator of low efficiency of complexation. By observing the reflections of MA and CE, we can verify the onset of new peaks and the absence of characteristic peaks of pure α-CD and β-CD. In the analysis of the FTIR spectra corresponding to the inclusion complexes obtained through the methods of MF, MA and CE, it was possible to observe a profile that was quite similar among all the samples. They resemble the spectrum ofpure α-CD and β-CD due to the fact that the complexes have been prepared in a molar ratio of 1:1 (limonene 136.24 g/mol andα-CD 972 g/mol). MEV was performed to evaluate the changes in the crystalline characteristics on the surfaces of pure α-CD and β-CD and after the formation of the inclusion complex, where the results corroborate other findings of the characterization tests. In the molecular modeling (docking), the theoretical results showed more stability in the ligations between α-CD/LIM (-4.49 kcal/mol) than what was observed between β-CD/LIM (-4.04 kcal/mol), once that a lesser expenditure of energy was necessary between α-CD/LIM in relation tothat between β-CD/LIM. The kinetic study of the first phase of decomposition was introduced in this work in order to observe the thermal behavior of the pure α-CD and β-CD, as well as of the complexes obtained in the warming ratios of 2.5-5.0-10 and 15 ºC.min-1, under nitrogen dynamic atmosphere (100 mL. min-1). / O limoneno (LIM) é um monoterpeno monocíclico, sendo um dos principais constituintes de vários óleos essenciais de frutas cítricas, como laranja, tangerina e limão. Dentre os óleos essenciais encontrados nos cítricos em geral, o R-(+)-limoneno é seu componente majoritário, podendo atingir concentrações de 90 a 96%. As ciclodextrinas (CDs) são oligossacarídeos cíclicos, mais comumente encontradas com seis, sete ou oito unidades de glicose, denominadas respectivamente de α-CD, β-CD e γ-CD. São obtidas pela ação da enzima ciclomaltodextrina glucanotransferase (CGTase) sobre o amido. As CDs são capazes de formar complexos de inclusão, alterando as propriedades físicas e químicas dos compostos complexados. O objetivo com este trabalho foi preparar e caracterizar físico-químicamente complexos de inclusão de limoneno em α e β-ciclodextrina, estudando as propriedades do suposto complexo formado. Tal complexo foi preparado por meio das técnicas de mistura física, malaxagem e co-evaporação, e foi caracterizado por análise térmica (calorimetria exploratória diferencial-DSC e termogravimetria/termogravimetria derivada-TG/DTG); cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas-CG/EM; difração de raios X-DRX; espectrofotometria de absorção na região do infravermelho com transformada de Fourier-FTIR; microscopia eletrônica de varredura-MEV, modelagem molecular (Docking) e estudo cinético de primeira etapa de perda de massa. Por meio dos resultados obtidos pelas análises foi possível evidenciar que tanto a α-CD quanto a β-CD formaram complexos de inclusão com o limoneno. No entanto, nas curvas DSC da α-CD que correspondem aos métodos de MA e CE foi possível observar um perfil diferente daquele observado para α-CD pura e MF. Nas curvas DSC para β-CD, observou-se que para o método CE apresentou perfil endotérmico mais significativo do que os métodos de MF e MA. De acordo com as análises TG/DTG para α-CD pode-se observar que o perfil termoanalítico dos complexos obtidos pelo método da MF, MA e CE foram semelhantes a -CD. As curvas TG/DTG do limoneno mostra perda de massa em torno de 100% no intervalo de 30-169°C. A curva TG/DTG da α-CD mostrou duas etapas de perdas de massa (entre 25-120°C) somam 10,7% de perda de massa seguidas de decomposição e eliminação do material carbonáceo. Nas curvas TG/DTG da β-CD, MF, MA e CE que apresentaram um perfil termoanalítico similar aos complexos obtidos com a α-CD. Após a avaliação das perdas de massa mostradas na Tabela 2 pode-se verficar valores em torno de 8% para o MA e CE na faixa de temperatura entre 120 e 270º C, o que é um indicativo da maior capacidade de complexação do limoneno. Nos resultados para o CG/EM para α-CD foi possível observar que o MA encapsulou o limoneno em uma razão de 1:0,49 (limoneno: α-CD), mas em uma razão inferior ao CE 1:18,11 (limoneno: α-CD). Mostrando desta forma que a CE foi o melhor método, e para β-CD pode-se observar que não exibiu nenhuma complexação na MF e MA. Já a CE mostrou uma eficiência de complexação igual a 1:1,44, sendo assim considerado o melhor método de complexação quando comparado com o CE da α-CD. No padrão de difração de raios X da MF mostrou ser bastante similar aos encontrados da para a α-CD e β-CD puras. Esse é um indicativo da baixa eficiência de complexação. Ao observar as reflexões da MA e CE, pode-se verificar o surgimento de novos picos e a ausência de picos característicos da α-CD e β-CD puras. Na análise dos espectros no FTIR correspondentes aos complexos de inclusão obtidos pelos métodos da MF, MA e CE foi possível observar um perfil muito semelhante entre todas as amostras. Elas se assemelham a espectro da α-CD e β-CD puras devido aos complexos terem sido preparados em razão molar 1:1 (limoneno 136,24 g/mol e α-CD 972 g/mol). A MEV foi realizada para avaliar as mudanças nas características cristalinas na superfície das α-CD e β-CD puras e após a formação do complexo de inclusão, onde os resultados corroboram com os outros achados dos testes de caracterização. Na modelagem molecular (docking), os resultados teóricos mostraram estabilidade nas ligações entre α-CD/LIM (-4,49 kcal/mol) do que os observados entre β-CD/LIM (-4,04 kcal/mol), pois foi necessário menor gasto de energia entre α-CD/LIM do que entre β-CD/LIM. O estudo cinético da primeira etapa de decomposição foi introduzido neste trabalho para observar o comportamento térmico das α-CD e β-CD puras e dos complexos obtidos nas razões de aquecimento de 2,5-5,0-10 e 15 ºC.min-1, sob atmosfera dinâmica de nitrogênio (100 mL. min-1).