Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-05T14:03:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JEFFERSON ROSA DE MENEZES.pdf: 2848766 bytes, checksum: e87a7c0a040b93eb5052a1ea902c099e (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-05T14:03:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JEFFERSON ROSA DE MENEZES.pdf: 2848766 bytes, checksum: e87a7c0a040b93eb5052a1ea902c099e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T14:03:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JEFFERSON ROSA DE MENEZES.pdf: 2848766 bytes, checksum: e87a7c0a040b93eb5052a1ea902c099e (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / A deprivação maternal é um potente estressor na fase inicial da vida de mamíferos, ocasionando diversos déficits cognitivos que se mantêm na vida adulta. Dentre os mecanismos envolvidos nestes déficits estão o desiquilíbrio oxidativo e as alterações em determinadas proteínas, como o fator neurotrófico derivado do cérebro (do inglês Brain-Derived Neurotrophic Factor, BDNF). Estes eventos podem ocorrer em diferentes regiões do no cérebro, entre elas o hipocampo, principal região responsável pela formação e consolidação das memórias. Esta dissertação investigou os efeitos de diferentes estratégias neuroprotetoras (exercício físico, suplementação com chá verde, e, enriquecimento ambiental) nos déficits de memória advindos da deprivação maternal. Para avaliar a função mnemônica, foi utilizado um modelo animal de DM (em ratos Wistar) e os testes de reconhecimento de objetos, esquiva inibitória e labirinto aquático de Morris. Para avaliar o balanço redox hipocampal quantificamos espécies reativas de oxigênio (EROs), espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), níveis de glutationa (GSH) e capacidade antioxidante total (FRAP), além disso, determinamos a atividade da enzima acetilcolinesterase e a quantificamos os níveis de BDNF. Nossos resultados demonstram que o exercício físico e o chá verde são estratégias antioxidantes eficazes de neuroproteção em um modelo de DM. Também demonstram que o enriquecimento ambiental é capaz de reverter os efeitos deletérios oriundos da DM por meio do incremento dos níveis de BDNF. Estes resultados revelam a possibilidade da utilização dessas intervenções como estratégia de neuroproteção. / Maternal deprivation is a potent stressor in the early life of mammalian, leading to several cognitive deficits that remain until adulthood. Among the mechanisms involved in these deficits are the oxidative imbalance and the alterations in some proteins, such as Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF), events that can occur in different brain regions, as the hippocampus, the main region responsible for the memory formation and consolidation. This master thesis investigated the effects of different neuroprotective strategies (physical exercise, green tea supplementation, and environmental enrichment) on memory deficits related to maternal deprivation (MD). To evaluate the mnemonic function was used an animal model of MD (using Wistar rats) and the object recognition, inhibitory avoidance and Morris water maze memory tests. To evaluate hippocampal redox balance we quantified the reactive oxygen species (ROS), the thiobarbituric acid reactive species (TBARS), the glutathione levels (GSH) and the total antioxidant capacity (FRAP), as well as determine the acetylcholinesterase activity and the BDNF levels. Our results show that physical exercise and green tea are effective neuroprotective antioxidant strategies in a MD model. They also demonstrate that environmental enrichment is capable to reverse the deleterious effects of MD by increasing BDNF levels. These results reveal the possibility of using these interventions as a neuroprotection strategy.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T20:36:05Z No. of bitstreams: 1 Helen Lidiane Schimidt.pdf: 3440469 bytes, checksum: 7c9bfe481c8ebdde010a046330242d0e (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T20:36:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Helen Lidiane Schimidt.pdf: 3440469 bytes, checksum: 7c9bfe481c8ebdde010a046330242d0e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T20:36:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Helen Lidiane Schimidt.pdf: 3440469 bytes, checksum: 7c9bfe481c8ebdde010a046330242d0e (MD5) Previous issue date: 2018-07-16 / A Doença de Alzheimer (DA) causa déficits cognitivos e de memória, entre outros. O mecanismo de desenvolvimento da DA incluí processos inflamatórios e estresse oxidativo em virtude do acúmulo da proteína β-amilóide no cérebro. Por seu potencial antioxidante, chás provenientes da Camellia sinensis e o exercício físico são estratégias neuroprotetoras eficazes em diversos modelos de déficits cognitivos. No entanto, não está claro se tanto as variedades dos chás da Camellia sinensis quanto os diferentes tipos de exercício possuem o mesmo potencial neuroprotetor na DA. Adicionalmente, poucos estudos investigam estratégias de neuroproteção em modelos de DA associado a fatores de risco da doença, como uma dieta hipercalórica. Considerando esse contexto, determinamos o potencial neuroprotetor de diferentes chás provenientes da Camellia sinensis e de diferentes configurações de exercício físico em um modelo de DA associada ou não a dieta hipercalórica. Após a realização de uma série de experimentos bioquímicos e comportamentais, concluímos que (a) o chá verde tem maior potencial neuroprotetor no modelo de DA, (b) uma dieta hipercalórica associada ao modelo de DA não potencializa déficits cognitivos e dano oxidativo no hipocampo, e (c) o exercício de força possui potencial neuroprotetor no modelo de DA estudado e é a única estratégia que também atua no sistema colinérgico. / Alzheimer's disease (AD) causes cognitive and memory deficits, and other. The mechanism of AD onset includes inflammatory processes and oxidative stress due to the accumulation of β-amyloid protein in the brain. Teas from Camellia sinensis and physical exercise are effective neuroprotective strategies in several models of cognitive deficits. However, it is unclear whether Camellia sinensis tea varieties have the same neuroprotective potential in AD, as well as whether different exercise configurations have the same neuroprotective potential in AD. Additionally, few studies investigated prevention strategies in AD models associated with additional risk factors, such as a hypercaloric diet. Here we determine the neuroprotective potential of different teas from Camellia sinensis and different exercise configurations in a model of AD associated or not to a hypercaloric diet. After completing a serie of biochemical and behavioral experiments, we conclude (a) that green tea has the greater neuroprotective potential in the AD model, (b) a hypercaloric diet associated with the AD model did not potentiate cognitive deficits and oxidative damage in the hippocampus, and (c) strength exercise has neuroprotective potential in the AD model studied, being the only exercise also influencing the cholinergic system.

O chá verde, obtido da Camellia sinensis, é uma das bebidas mais populares em todo o mundo e, recentemente, tem sido foco de pesquisas científicas por apresentar efeitos benéficos na saúde geral. Estudos laboratoriais e epidemiológicos sugerem que, dentre os polifenóis que compõem o chá verde, a Epigalocatequina-3-galato (EGCG) é o mais bioativo e responsável por sua ação antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, inativadora de LPS bacteriano, anticarcinogênica, antitumoral, anti-angiogênica, anti-hipertensiva e reparadora tecidual, podendo atuar na prevenção e tratamento do câncer, doenças cardiovasculares, neurodegenerativas, hepáticas e renais. Em diversas doenças ósseas, a EGCG também desempenha um importante papel protetor, atuando na indução da mineralização e inibição da osteoclastogênese. No entanto, seus possíveis efeitos na inflamação e na reabsorção óssea associadas à lesão periapical ainda não foram avaliados. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver uma formulação para uso endodôntico à base de EGCG com propriedades físico-químicas e biológicas que permitam seu uso como curativo de demora entre sessões. As formulações testadas incluíram: EGCG diluída em água e diferentes concentrações de EGCG (1,25; 5; 10 e 20 mg/mL) veiculadas em polietilenoglicol 400 (PEG). O óxido de zinco foi utilizado como agente radiopacificador. Em função da possível degradação dos produtos fenólicos em função do ambiente e do tempo, uma solução obtida por meio do contato prolongado da EGCG com o dente também foi avaliada (produto da degradação). Inicialmente, foi realizada a caracterização físico-química da formulação de EGCG por meio de espectrofotometria em Ultravioleta/Visível (UV/Vis), em contato com soluções contendo zinco, óxido de zinco e acetato de zinco. Os estudos biológicos foram realizados para avaliar sua compatibilidade tecidual no tecido subcutâneo de camundongos, por meio da avaliação do extravasamento plasmático após 24 horas e da análise de aspectos macroscópicos e microscópicos aos 7, 21 e 63 dias após a inserção de tubos de polietileno contendo as formulações. Neste estudo, uma pasta a base de hidróxido de cálcio (Calen®) foi utilizada como controle. Na análise macroscópica, realizada por meio de fotografias, foram atribuídos escores aos parâmetros de ulceração epitelial, vascularização, necrose e edema. Na análise microscópica, realizada em microscopia de luz convencional e de fluorescência, foram avaliados os parâmetros de infiltrado inflamatório, vascularização, focos de abscessos, cápsula fibrosa, edema e necrose. Os escores dos resultados biológicos foram submetidos à análise estatística utilizando o teste do Qui-quadrado ou Exato de Fisher e para análise dos resultados quantitativos do extravasamento plasmático foi utilizada análise de variância (ANOVA), seguida pelo pós-teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os estudos físico-químicos mostraram que a EGCG manteve seu comprimento de onda original em 274 nm quando associada ao óxido de zinco, tendendo à formação de uma banda de absorção em 325 nm. A associação da EGCG com acetato de zinco ocasionou diminuição da banda de absorção em 274 nm e formação de uma nova banda em 323 nm. Os estudos biológicos mostraram, nos parâmetros macroscópicos que, em todos os períodos avaliados, todas as formulações apresentaram compatibilidade tecidual, com ausência de ulceração epitelial, presença de leve necrose tecidual superficial, edema e vascularização, não havendo diferença significante entre os grupos avaliados (p>0,05). Na análise microscópica, em todos os períodos foi verificada ausência de focos de abscesso, edema e necrose e presença de suave ou moderado infiltrado inflamatório, cápsula fibrosa e neovascularização, semelhante entre todos os grupos (p>0,05). A avaliação dos espécimes corados com HE em microscopia de fluorescência favoreceu a visualização dos vasos sanguíneos e de fibras colágenas, constituindo metodologia adicional para esta finalidade. Na avaliação do extravasamento plasmático, o produto da degradação da ECGG apresentou extravasamento de corante azul de Evans por grama de tecido inferior (0,0514 ±0,0220 mg/mL) às demais formulações testadas (p<0,05). Conclui-se que a formulação tópica à base de EGCG, desenvolvida para uso endodôntico, apresenta propriedades físico-químicas estáveis e compatibilidade tecidual. / The green tea, obtained from the Camellia sinensis, is one of the most popular drinks in the world and has recently been in the focus of scientific research due its beneficial effects on general health. Laboratory and epidemiological studies suggest that, among the polyphenols found on green tea, the epigallocatechin-3-gallate (EGCG) is the most bioactive and responsible for its antioxidant, anti-inflammatory, anti-microbial, bacterial LPS inactivation, anticarcinogenic, anti-tumoral, anti-angiogenic, anti-hypertensive and tissue repair and can act in the prevention and treatment of cancer, cardiovascular disease, neurodegenerative, liver and kidney diseases. In several bone diseases, EGCG also plays a major protective role, acting in inhibition of osteoclastogenesis and induction of mineralization. However, their possible effects on inflammation and bone resorption associated to apical periodontitis have not been evaluated. Therefore, the aim of this study was to develop a EGCG based formulation for endodontic use with physicochemical and biological properties that allow its use as intracanal dressing between sessions. The formulations tested included: EGCG diluted in water and different concentrations of EGCG (1.25, 5, 10 and 20 mg/ml) diluted in polyethylene glycol 400 (PEG). Zinc oxide was used as radiopacifier agent. Due to the possible degradation of phenolic compounds as a function of the environment and time, a solution obtained through prolonged contact with the tooth EGCG was also evaluated (degradation product). Initially, physicochemical characterization of EGCG formulation was performed by ultraviolet spectrophotometry/Visible (UV/Vis) in contact with solutions containing zinc, zinc oxide and zinc acetate. Biological studies were conducted to evaluate its tissue compatibility with subcutaneous tissue of mice by means of the evaluation of plasma leakage after 24 hours and the examination of macroscopic and microscopic features at 7, 21 and 63 days after insertion of polyethylene tubes containing the formulations. In this study, a calcium hydroxide pastebase (Calen®) was used as control. The macroscopic analysis performed by means of photographs, assigned scores to epithelial ulceration, vascularization, necrosis and edema parameters. Microscopic examination performed in conventional and fluorescence microscopy assessed the inflammatory infiltrate, vascularization, abscesses spots, fibrous capsule, edema and necrosis parameters. The scores of biological results were statistically analyzed by the chisquare test or Fisher\'s exact and for the quantitative analysis of the results of plasma extravasation the analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey\'s post-test were used. The significance level was 5%. The physico-chemical studies showed that EGCG maintained its original wavelength at 274 nm when added to zinc oxide, tending to the formation of an absorption band at 325 nm. The combination of EGCG with zinc acetate led to decreased absorption band at 274 nm and formation of a new band at 323 nm. Biological studies showed, in the macroscopic parameters in all periods, that all formulations showed tissue compatibility, with no epithelial ulceration, presence of mild superficial tissue necrosis, edema and vascularization, with no significant difference between the groups (p > 0.05). On microscopic examination, in all periods was verified absence of abscess foci, edema and necrosis and the presence of mild or moderate inflammatory infiltrate, fibrous capsule and neovascularization, similar among all groups (p> 0.05). The evaluation of the specimens stained with HE under fluorescence microscopy enhancve the visualization of the blood vessels and collagen fibers, constituting an additional methodology for this purpose. In the evaluation of plasma extravasation, the product of degradation of ECGG presented values of Evans blue dye extravasation by gram of tissue (0.0514 ± 0.0220 mg / mL) lower to the other tested formulations (p <0.05). It is concluded that the topical formulation based on EGCG developed for endodontic use, presented stable physical and chemical properties and tissue compatibility.

Com o objetivo de avaliar a influência de cultivares, tipos de estacas de Camellia sinensis e doses de ácido indolbutírico no enraizamento de estacas, dois experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, no delineamento experimental em blocos ao acaso com 16 tratamentos, no esquema fatorial 2 x 2 x 4, ou seja, tipos de estaca (herbácea e lenhosa), cultivares (Camellia sinensis IAC 259 e Yabukita) e quatro doses de ácido indolbutírico (AIB) (0, 30, 60 e 90 mg L-1), com quatro repetições. Cada repetição foi composta por 20 estacas da porção mediana dos ramos das plantas matrizes, coletadas em duas épocas do ano (verão e inverno). As estacas foram cortadas em bisel e mantidas com uma gema e uma folha inteira, com 5 a 7 cm de comprimento. A região basal das estacas recebeu ou não tratamento com ácido indolbutírico (AIB), através da imersão de 2,5 cm da base em solução aquosa do produto por 24 horas. Posteriormente, elas foram colocadas em bandejas de isopor de 72 células contendo vermiculita de grânulos médios. As estacas herbáceas apresentaram maior porcentagem de enraizamento com a aplicação de AIB comparada às estacas lenhosas, sendo que as estacas coletadas no período do verão apresentaram maior porcentagem de enraizamento em menor espaço de tempo, quando comparadas com as estacas coletadas no período do inverno. Estacas da cultivar Yabukita apresentaram maior potencial de enraizamento em relação às estacas da cultivar IAC 259. As concentrações recomendadas de AIB para o enraizamento de estacas de Camellia sinensis variaram de 56 a 83 mg L-1 em função da cultivar. / Aiming to evaluate the influence of Camellia sinensis cultivars, types of cuttings and doses of IBA on rooting, two experiments have been conducted in a green house in the experimental design in blocks randomized with 16 treatments, arranged in a 2 x 2 x 4, that is, cutting types (herbaceous and woody), cultivars (Camellia sinensis \'IAC 259\' and \'Yabukita\') and four doses of butyric acid (IBA) (0, 30, 60 and 90 mg L -1) with four replications. Each replication consisted of 20 cuttings from the middle portion of the branches from the mother plants, collected in two seasons (summer and winter). The cuttings were cut in bevel and maintained with a bud and a leaf, with 5-7 cm long. The basal cuttings have received or not treatment with indol butyric acid (IBA) by immersion of 2.5 cm from the base in an aqueous solution of the product for 24 hours. Later, they have been placed in trays with 72 cells containing medium granules of vermiculite. Herbaceous cuttings have presented higher percentages of rooting with IBA application compared to hardwood cuttings, and cuttings collected in summer have showed the highest percentage of rooting in the shortest time compared with the cuttings collected in winter. Yabukita cultivars cuttings had higher rooting potential in relation to the IAC 259 cuttings. IBA level to the rooting of Camellia sinensis varied from 56 to 83 mg L-1 according to cultivars

A biomembrana, que é uma membrana de celulose bacteriana (C6H10O5)n formada na superfície do meio de cultivo durante a fermentação acética, foi obtida através do cultivo associado de Gluconacetobacter xylinus (formalmente Acetobacter xylinum) e Saccharomyces cerevisiae em meio de folhas de chá verde, resíduos de frutas (abacaxi, mamão, laranja), resíduos de vegetais (beterraba), vinho e colágeno em condições estáticas a 28 ± 2°C de 7 a 30 dias de cultivo. Foi incorporado à biomembrana, extrato hidroalcoólico de Calendula officinalis, devido as suas propriedades anti-inflamatórias, antioxidantes e cicatrizantes. A espessura, o diâmetro e o peso da biomembrana foram mensurados e foram calculados a produtividade, bem como o fator de conversão de açúcar em celulose. A caracterização da biomembrana foi realizada por Differential Scanning Calorimetric, espectroscopia infravermelho, Brunauer-Emmett-Teller, resistência à tração e alongamento, microscopia eletrônica (Escola Politécnica - USP) e difração de raio-X. Através destas análises verificou-se que a biomembrana obtida nos diferentes meios de cultivo é composta por celulose, o tamanho médio dos poros variou de 517,9 a 1582,0 nm, a resistência à tração variou de 0,76 a 4,32 kN/m e o índice de cristalinidade entre 75% e 91%, a espessura da biomembranas variou de 0,16 a 6,38 mm. Foram realizados 576 experimentos, a maior produtividade (8,23 g de celulose/dia) foi atingida no meio de mamão com suco de laranja (suco de mamão: 50% v/v e suco de laranja: 19% v/v) em 7 dias de cultivo. O maior fator de conversão (2,36 g celulose/g de açúcar) foi obtido no meio de chá verde em 25 dias de cultivo. A adição de 1,5% p/v de colágeno ao meio de chá verde dobrou a massa da biomembrana. A incorporação do extrato de calêndula aumentou a flexibilidade, a cristalinidade e as propriedades mecânicas da biomembrana de chá verde. / The biomembrane, cellulose membrane (C6H10O5)n formed in medium surface, was obtained from an associate culture Gluconacetobacter xylinus (formally Acetobacter xylinum) and Saccharomyces cerevisiae in green tea leaves, fruit residues (pineapple, papaya, orange), vegetables residues (beet), wine and collagen media in static condition , at 28 ± 2 ºC in 7 - 30 days cultivation. The Calendula officinalis hydroalcoholic extract was incorporated in the Biomembrane, due to its anti-inflammatory, anti-oxidants and cicatrizing proprieties. The biomembrane thickness, diameter and weight were measured. The productivity and conversion factor from cellulose to sugar were calculated. The biomembrane caracterization was performed by Differential Scanning Calorimetric, infrared spectroscopy, Brunauer-Emmett-Teller, resistance to tension, elongation, eletrocnic microscopy and raio-X difraction. In these analyses were verified that biomembrane obtained in different media were composed by cellulose, average porous size varied from 517.9 to 1582.0 nm, the resistance to tension varied from 0.76 to 4.32 kN/m and cristalinity index varied from 75% to 91%. The biomembrane thickness varied from 0,16 to 6,38 mm. It was performed 596 tests, the highest bacterial cellulose yield (8.23 ± 0.58 g cellulose/day) was obtained in papaya with orange (papaya juice: 50% v/v and orange juice: 19% v/v) in 7 cultivation days. The highest conversion factor (2,36 g cellulose/g sugar) was obtained in green tea medium in 25 days. The addition of 1.5% w/v collagen to the green tea media increased 2 times the biomembrane weight. The biomembrane absorption capacity for water and Marigold hydroalcoholic extract (1:1), were from 1.73 to 22 and, from 1.75 to 24 times dry weight, respectively. The Marigold extract improved the green tea biomembrane flexibility, cristalinity, and physical proprieties.

Introdução: A erva mate (Ilex paraguariensis St. Hilaire) é uma espécie nativa do Brasil, Paraguai e Argentina e tem importante apelo social, econômico e cultural. É utilizada na preparação de vários tipos de bebidas, como chimarrão, tererê e chá-mate, consumidas em toda a América Latina. O chá mate, assim como o chimarrão, apresenta potencial protetor à saúde devido à atividade antioxidante, ente outras, conforme demonstrado em diversos estudos. A alta concentração de compostos bioativos, como as saponinas, os compostos fenólicos e as metilxantinas respondem, em conjunto, pela sua atividade biológica. Objetivos: a) validar metodologia para isolar e quantificar as principais classes de compostos bioativos do chá mate (compostos fenólicos, xantinas, sapogeninas e melaninas); b) avaliar se há diferenças nos teores desses compostos nas diferentes marcas deste produto comercializado em São Paulo; c) avaliar a atividade biológica de cada classe por diferentes métodos in vitro. Metodologia: Foram analisados três lotes das três marcas de chá mate 100 por cento presentes em hipermercados no município de São Paulo. A validação da metodologia para quantificação, empregando CLAE, consistiu no cálculo da exatidão (recuperação), repetibilidade e sensibilidade para os compostos: ácido caféico, ácido-5-cafeoilquínico, cafeína, teobromina, acido ursólico e ácido oleanólico. Foram determinados os teores de fenólicos totais por método espectrofotométrico com o reagente Folin-Ciocalteu. As frações de fenólicos e xantinas, sapogeninas e melaninas foram isoladas e testadas quanto à atividade antioxidante pelo: sistema de oxidação -caroteno e ácido linoléico, teste da capacidade de absorbância de oxigênio radical ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity), capacidade de seqüestrar o radical DPPH, e atividade ligante de ácidos biliares (ácidos glicocólico, cólico, deoxicólico e taurocólico). Resultados: Os coeficientes de determinação das curvas de calibração foram maiores que 0,99. A recuperação dos compostos variou de 84,2 a 115,88por cento e o coeficiente de variação médio foi 5 por cento. Uma xícara de chá mate (182 mL) apresentou, em média, 161,96 mg de fenólicos totais; 14,71 mg de ácido clorogênico (5CQA); 3,13 mg de ácido caféico ; 2,74 mg de teobromina e 15,16 mg de cafeína. Os teores de ácido ursólico e ácido oleanólico no chá mate (sachês), foram, em média 82,60 g/g e 54,08 g/g, respectivamente. As concentrações dos compostos variaram significativamente entre as marcas analisadas. A atividade antioxidante do chá mate (69,2 por cento de inibição da oxidação pelo sistema -caroteno e ácido linoléico; DPPH (IC50) = 0,014 mgSS/mL; ORAC = 9997molTrolox/xícara de chá), diferiu significativamente (p<0,05) entre as marcas apenas para o IC50. Para as frações houve diferença estatística apenas para a porcentagem de inibição da oxidação do ácido linoléico para o extrato melânico. Verificou-se correlação linear (p<0.05) positiva ou negativa entre a atividade antioxidante e a concentração de alguns compostos bioativos. A capacidade ligante de ácidos biliares foi semelhante ao controle positivo colestiramina para o chá mate, FS e FFX. O EM demonstrou baixa ou nenhuma capacidade de si ligar aos ácidos biliares. Conclusões: O chá mate é uma excelente fonte de compostos bioativos com atividade biológica. Ocorreu variação da concentração de compostos bioativos em função da marca analisada. Essa variação, no entanto, não influenciou na atividade antioxidante da bebida, conforme avaliada pelos métodos ora utilizados. / Introduction: Yerba maté (Ilex paraguariensis St. Hilaire) is a spontaneous species that grows in Brazil, Argentina and Paraguay and several beverages (chimarrão, terere, maté tea) are produced from its leaves. Maté tea, one of I. paraguariensis beverages present antioxidant activity and other biological effects. Compounds such as aponins, polyphenols and methylxanthines, which are present in considerable amounts, are responsible for the biological effects. Objectives: The aims of this work were: a) to validate analytical methodologies to evaluate the main bioactive compounds from maté tea (phenolic compounds, xanthines, sapogenins and melanins); b) to evaluate if there are differences on these compounds contents among maté tea brands commercialized in São Paulo; c) to evaluate biological activity of each class of compounds by different in vitro methodologies. Methods: Three lots from three commercial brands of maté tea present in 100 per cent of the main supermarkets in São Paulo city were analysed. HPLC methodology validation was assessed by determining accuracy (recovery), repeatability and sensibility (linearity, limits of detection and quantitation) for caffeic acid, 5- caffeoylquinic acid, caffeine, theobromine, ursolic and oleanolic acids. Total phenolic content was assessed with the Folin-Ciolcalteu´s reagent. Maté tea phenolic and methylxanthines (FFX), sapogenins (FS) and melanins (EM) fractions were isolated and tested for theirs in vitro antioxidantactivity by the following methods: -carotene and linoleic acid system, ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity), radical scavenging capacity (DPPH). The ability of binding bile acids (glycocholic, cholic, taurocholic and deoxycholic acids) was also assayed. Results: Calibration curves determination coefficient (r 2) were higher than 0,99 for all compounds. Recovery ranged from 84,2 to 115,88per cent and repeatability average was 5per cent. One maté tea cup (182 mL) contains in average 161,96 mg5CQA of total phenolic compounds, 14,71 mg of chlorogenic acid (5CQA), 3,13 mg of caffeic acid, 2,74 mg of theobromine and 15,16 mg of caffeine. The roasted leaves contains 82,60 and 54,08 g/g of ursolic and oleanolic acids in average, respectively. Compounds contents varied significantly (p<0,05) among brands. The antioxidant activity assays showed no significant difference (p>0,05) among brands to maté tea, except for DPPH (IC50), and the average results for the maté tea are the following: 69,2 per cent in -carotene and linoleic acid system, DPPH (IC50) = 0,014mgSS/mL; ORAC = 9997,7molTrolox/tea cup. Antioxidant activity of the isolated fractions showed significant difference only in -carotene and linoleic acid system to melanic extract. A positive or negative correlations between the antioxidant activity and the bioactive compounds contents was observed (p<0.05). Maté tea, FS and FFX bile acid binding capacity were similar to the positive control cholestyramine. EM showed very little or no bile acid binding capacity. Conclusions: Maté tea is a source of bioactive compounds. Although concentration can vary significantly from brand to brand, this fact did not affect maté tea antioxidant activity evaluated by the methods used in this study.

Com o objetivo de avaliar a influência de cultivares, tipos de estacas de Camellia sinensis e doses de ácido indolbutírico no enraizamento de estacas, dois experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, no delineamento experimental em blocos ao acaso com 16 tratamentos, no esquema fatorial 2 x 2 x 4, ou seja, tipos de estaca (herbácea e lenhosa), cultivares (Camellia sinensis IAC 259 e Yabukita) e quatro doses de ácido indolbutírico (AIB) (0, 30, 60 e 90 mg L-1), com quatro repetições. Cada repetição foi composta por 20 estacas da porção mediana dos ramos das plantas matrizes, coletadas em duas épocas do ano (verão e inverno). As estacas foram cortadas em bisel e mantidas com uma gema e uma folha inteira, com 5 a 7 cm de comprimento. A região basal das estacas recebeu ou não tratamento com ácido indolbutírico (AIB), através da imersão de 2,5 cm da base em solução aquosa do produto por 24 horas. Posteriormente, elas foram colocadas em bandejas de isopor de 72 células contendo vermiculita de grânulos médios. As estacas herbáceas apresentaram maior porcentagem de enraizamento com a aplicação de AIB comparada às estacas lenhosas, sendo que as estacas coletadas no período do verão apresentaram maior porcentagem de enraizamento em menor espaço de tempo, quando comparadas com as estacas coletadas no período do inverno. Estacas da cultivar Yabukita apresentaram maior potencial de enraizamento em relação às estacas da cultivar IAC 259. As concentrações recomendadas de AIB para o enraizamento de estacas de Camellia sinensis variaram de 56 a 83 mg L-1 em função da cultivar. / Aiming to evaluate the influence of Camellia sinensis cultivars, types of cuttings and doses of IBA on rooting, two experiments have been conducted in a green house in the experimental design in blocks randomized with 16 treatments, arranged in a 2 x 2 x 4, that is, cutting types (herbaceous and woody), cultivars (Camellia sinensis \'IAC 259\' and \'Yabukita\') and four doses of butyric acid (IBA) (0, 30, 60 and 90 mg L -1) with four replications. Each replication consisted of 20 cuttings from the middle portion of the branches from the mother plants, collected in two seasons (summer and winter). The cuttings were cut in bevel and maintained with a bud and a leaf, with 5-7 cm long. The basal cuttings have received or not treatment with indol butyric acid (IBA) by immersion of 2.5 cm from the base in an aqueous solution of the product for 24 hours. Later, they have been placed in trays with 72 cells containing medium granules of vermiculite. Herbaceous cuttings have presented higher percentages of rooting with IBA application compared to hardwood cuttings, and cuttings collected in summer have showed the highest percentage of rooting in the shortest time compared with the cuttings collected in winter. Yabukita cultivars cuttings had higher rooting potential in relation to the IAC 259 cuttings. IBA level to the rooting of Camellia sinensis varied from 56 to 83 mg L-1 according to cultivars

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5079293 bytes, checksum: 2dbb49f3d9b34960064355645d3cd092 (MD5) Previous issue date: 2013-09-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Faced with the need to find new natural sources, able to replace partially or totally artificial antioxidants, reducing the phenomenon of oxidation and ensuring increased shelf life of edible oils, we sought to investigate the behavior of natural extracts of garlic, green tea and ginger on linseed oil, for their ability to protect against lipid oxidation. For this, the ethanol and methanol/ acetonic extracts of garlic (EEGL and MAEGL), green tea (EEGT and MAEGT) and ginger (EEGG and MAEGG), respectively, were initially compared for total phenolic content (TPC), by Folin-Ciocalteau method, as the antioxidant capacity, by Radical-Scavenging Activity of the DPPH (RSA-DPPH), by Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) and by &#946;-carotene/ linoleic acid system method, and the thermal stability, by Thermogravimetry/ Differential Thermal Analysis (TG/ DTA). The thermal and oxidative stability of the linseed oil added with ethanolic extracts, singly or with synthetic compounds tert-butylhydroquinone (TBHQ) and butylated hydroxytoluene (BHT), were evaluated, respectively, by Thermogravimetry/ Differential Thermal Analysis (TG/ DTA) and accelerated oxidation tests, such as accelerated storage test in oven, Pressurized Differential Scanning Calorimetry (P-DSC), PetroOxy and Rancimat. The extracts showed the following descending order of TPC: EEGT (483.45 ± 15.23 mg GAE.g-1) ~ MAEGT (469.28 ± 17.84 mg GAE.g -1) > EEGG (235.49 ± 1.34 mg GAE.g-1) > MAEGG (60.36 ± 1.90 mg GAE.g-1) > EEGL (10.55 ± 0.76 mg GAE.g-1) > MAEGL (3.01 ± 0.15 mg GAE.g mg-1 dry matter ). For the tests to determine the antioxidant capacity, green tea extracts showed higher RSA-DPPH and FRAP, compared to other samples. The extracts showed the following decreasing order of thermal stability : EEGT (111 ºC) ~ MAEGT (110 ºC) > EEGL (104 ºC) > EEGG (96 ºC) > MAEGL (68 ºC) > MAEGG (63 ºC). Despite the low response TPC and small compared to RSA-DPPH and FRAP, the ethanol extract of garlic showed considerable ability to inhibit lipid peroxidation, by &#946;-caroteno/ácido linoleic system, and high thermal stability, attributed to organosulfur compounds. Considering the oxidative stability tests of samples of additived oil, it was found that the ethanolic extract of garlic, alone or synergistically associated with the BHT or TBHQ, protected the linseed oil in a manner similar to or even higher than synthetic antioxidants alone, by P-DSC and PetroOxy assays, keeping it in good condition overall until the 8th day accelerated storage in an oven at 60 ºC. Extracts of green tea and ginger offered protection to linseed oil until the 4th day of storage accelerated when combined synergistically to TBHQ, also demonstrating good oxidative stability by P-DSC, PetroOxy and Rancimat techniques. The results suggest the feasibility of using green tea and ginger extracts as partial substitutes (LOGT / TBHQ (50/50) and LOGG / TBHQ (50/50)) and garlic extract as total substitute (LOGL 100) of synthetic antioxidants, being alternative natural sources of antioxidants for application to the edible oil industry. / Diante da necessidade de descobrir novas fontes naturais, capazes de substituir os antioxidantes artificiais parcial ou totalmente, atenuando o fenômeno da oxidação e garantindo o aumento da vida de prateleira de óleos comestíveis, buscou-se investigar o comportamento de extratos naturais de alho, chá verde e gengibre sobre o óleo de linhaça, quanto à capacidade de proteção contra a oxidação lipídica. Para isso, os extratos etanólicos e metanol/ acetônicos de alho (EEGL e MAEGL), chá verde (EEGT e MAEGT) e gengibre (EEGG e MAEGG), respectivamente, foram inicialmente comparados quanto ao conteúdo de fenólicos totais (TPC), pelo método de Folin-Ciocalteau, quanto à capacidade antioxidante, pelos métodos de sequestro do radical DPPH (RSA-DPPH), do poder de redução do ferro (FRAP) e do sistema &#946;-caroteno/ácido linoleico, e quanto à estabilidade térmica, por meio de Termogravimetria/ Análise Térmica Diferencial (TG/ DTA). As estabilidades térmica e oxidativa do óleo de linhaça adicionado dos extratos etanólicos isolados ou associados aos compostos sintéticos terc-butil-hidroquinona (TBHQ) e butil-hidroxitolueno (BHT) foram avaliadas, respectivamente, por meio das técnicas TG/ DTA e de ensaios de oxidação acelerada, como Calorimetria Exploratória Diferencial Pressurizada (P-DSC), PetroOxy, Rancimat e teste de estocagem acelerada em estufa. Os extratos avaliados apresentaram a seguinte ordem decrescente de TPC: EEGT (483.45 ± 15.23 mg GAE.g-1) ~ MAEGT (469.28 ± 17.84 mg GAE.g-1) > EEGG (235.49 ± 1.34 mg GAE.g-1) > MAEGG (60.36 ± 1.90 mg GAE.g-1) > EEGL (10.55 ± 0.76 mg GAE.g-1) > MAEGL (3.01 ± 0.15 mg GAE.g-1 extrato seco). Para os ensaios de determinação da capacidade antioxidante, os extratos de chá verde apresentaram maior RSA-DPPH e FRAP, em relação às demais amostras. Os extratos apresentaram a seguinte ordem decrescente de estabilidade térmica: EEGT (111 ºC) ~ MAEGT (110 ºC) > EEGL (104 ºC) > EEGG (96 ºC) > MAEGL (68 ºC) > MAEGG (63 ºC). Apesar do baixo TPC e da pequena resposta frente a RSA-DPPH e FRAP, o extrato etanólico de alho apresentou considerável capacidade de inibição da peroxidação lipídica, pelo sistema &#946;-caroteno/ácido linoleico, e alta estabilidade térmica, atribuídos aos compostos organossulfurados. Considerando os ensaios de estabilidade oxidativa das amostras de óleo aditivado, verificou-se que o extrato etanólico de alho, isolado ou sinergicamente associado ao TBHQ ou ao BHT, protegeu o óleo de linhaça de forma similar ou até superior aos antioxidantes sintéticos isolados, diante dos ensaios de P-DSC e PetroOxy, mantendo-o em bom estado de conservação geral até o 8º dia de armazenamento acelerado em estufa a 60 ºC. Os extratos de chá verde e gengibre ofereceram proteção ao óleo de linhaça até o 4º dia de estocagem acelerada, quando associados sinergicamente ao TBHQ, demonstrando ainda boa estabilidade oxidativa diante das técnicas P-DSC, PetroOxy e Rancimat. Os resultados sugerem a viabilidade de utilização dos extratos de chá verde e gengibre como substitutos parciais (LOGT/ TBHQ (50/50) e LOGG/ TBHQ (50/50)) e o extrato de alho como substituto total (LOGL 100) de antioxidantes sintéticos, sendo fontes alternativas naturais de antioxidantes para a aplicação na indústria de óleos comestíveis.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2016-05-04T13:53:54Z No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 4473867 bytes, checksum: e3130e71f9f870684d06304ce755007d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-04T13:53:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 4473867 bytes, checksum: e3130e71f9f870684d06304ce755007d (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This paper describes the development of a method for quantification Cd2+, Pb2+ and Cu2+ cations, in teas, performed simultaneously, using Square Wave Anodic Stripping Voltammetry carbon nanotube paste electrode modified with bismuth film. Tea is one of the most beneficial and consumed beverage through the world, being prepared from the infusion parts of the plant Camellia sinensis. Most commonly this kind of tea presents metal ions, such as Cd 2+, Pb 2+ and Cu 2+, which offers health risk, in case of being ingested above the limit. To detect these metals, it is necessary to make use of techniques with high sensitivity. The spectrometric methods are the most widely used, but they have a high cost, are laborious and expensive. The voltammetric techniques are characterized by being inexpensive and having equal sensitivity, and even greater than some spectrometric methods. The parameters of the technique used were obtained after optimization with fractional factorial design. The tea samples were prepared through digestion with heating by microwave radiation in a closed system using diluted nitric acid and hydrogen peroxide. The method was validated based on the sample certified plant tissue (forage Marandu) and applied in green and black tea samples. Recoveries of cations Cd 2+, Pb 2+ and Cu 2+ ranged from 79.3 to 107.6%, the certified sample, and 73.3 to 122.1% in the evaluated samples of teas. The detection limits obtained in the simultaneous analysis of Cd 2+, Pb 2+ and Cu 2+ were 0.16; 0.20; 0.39 ug L-1, respectively. Cu2 + was detected only in samples of tea, but the method was efficient for the simultaneous quantification of all metals in the matrix assessed after the addition and recovery. / Este trabalho descreve o desenvolvimento de um método de quantificação dos cátions Cd2+, Pb2+ e Cu2+, em chás, realizada de forma simultânea, empregando voltametria de onda quadrada por redissolução anódica com eletrodo de pasta de nanotubo de carbono modificado por filme de bismuto. O chá é uma das bebidas mais benéficas e consumidas no mundo, sendo preparado a partir da infusão de partes da planta Camellia sinensis. Normalmente são encontrados cátions metálicos, como o Cd2+, Pb2+ e Cu2+, que se ingeridos acima do limite máximo representam riscos à saúde. Para detectar esses metais é necessário fazer uso de técnicas com alta sensibilidade. Os métodos espectrométricos são os que mais amplamente tem sido utilizado, porém apresentam custo elevado, são laboriosos e dispendiosos. As técnicas voltamétrica caracterizam-se por serem baratas e possuir sensibilidade igual e até maior que alguns métodos espectrométricos. Os parâmetros da técnica utilizada foram obtidos após otimização com planejamento fatorial fracionário. As amostras de chá foram preparadas via digestão com aquecimento por radiação micro-ondas em sistema fechado empregando ácido nítrico e peróxido de hidrogênio diluídos. A validação do método foi realizada com base na amostra certificada de tecido vegetal (forrageira Marandu) e aplicada em amostras de chá verde e preto. As recuperações dos cátions Cd2+, Pb2+ e Cu2+ variaram de 79,3 a 107,6%, na amostra certificada, e de 73,3 a 122,1% nas amostras de chás avaliadas. Os limites de detecção obtidos na análise simultânea de Cd2+, Pb2+ e Cu2+, foram 0,16; 0,20; 0,39 μg L-1, respectivamente. Foi detectado apenas Cu2+ nas amostras de chá, porém o método se mostrou eficiente para quantificação simultânea de todos os metais na matriz avaliada após a adição e recuperação.

The green tea is considered a functional food with antioxidant activity, and this delays the process of old age and helps in the prevention of chronicle and degenerative diseases, such as cancer and heart affections. Of catechins, present in green tea, may is extremely important in the inactivation of free radicals, which provoke damages to the DNA molecules and to the cell membranes prevent the cytotoxicity induced by the oxidative stress in different tissues, by actuating in the process of chemoprevention. In this study two crosses, ST and HB aimed at evaluating the protective effects of green tea in three different concentrations (25, 50 e 75mg/mL), combined with the antitumor agent, doxorrubicin (DXR), of the genotoxic action; by the of wing spot test (SMART) of Drosophila melanogaster. The results obtained demonstrated that in MH descendants there was not a statistically significant increase in the frequencies of spots, in the individuals treated with green tea, in standard cross (ST) as well as in the high bioactivation cross (HB - characterized by a high constitutive level of cytochrome P450) . However we could observe a statistically significant decrease in the sum of mutant spots, in MH descendants of both crossings (ST and HB), in all concentrations of green tea associated to DXR. These results suggest that green tea does not present genotoxic effect, but presents protective affect against the mutagenic and recombinagenic action of DXR in the somatic cells of D. melanogaster, in the experimental concentrations used in this study. / O chá verde (CV) é considerado um alimento funcional com atividade antioxidante, que retarda o processo de envelhecimento e auxilia na prevenção de doenças crônicas e degenerativas, como o câncer e doenças cardiovasculares. As catequinas, presentes neste chá, podem inativar os radicais livres que causam danos na molécula de DNA e dessa maneira, prevenir a citotoxicidade induzida pelo estresse oxidativo, em diferentes tecidos, atuando no processo de quimioprevenção. Neste estudo dois diferentes cruzamentos, ST e HB foram utilizados para avaliar o efeito do CV em três diferentes concentrações (25, 50 e 75mg/mL) combinados com um agente tumoral, doxorrubicina (DXR), de comprovada ação genotóxica; através do teste para detecção de manchas (SMART) na asa de Drosophila melanogaster. Os resultados obtidos demonstram que para os descendentes MH não houve aumento, estatisticamente significativo, nas freqüências de manchas, nos indivíduos tratados apenas com CV, tanto no cruzamento padrão (ST) quanto no cruzamento de alta bioativação (HB - caracterizado pelo alto nível constitutivo de citocromo 450). Contudo, foi observada uma redução, estatisticamente significativa, no total de manchas mutantes, nos descendentes MH, de ambos os cruzamentos (ST e HB), em todas as concentrações do CV quando associadas com a DXR. Estes resultados sugerem que o CV não possui efeito genotóxico, e, apresenta efeito protetor contra a ação mutagênica e recombinogênica induzida pela DXR em células somáticas de D. melanogaster, nas concentrações experimentais utilizadas neste estudo. / Mestre em Genética e Bioquímica