Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-09-12T15:09:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Maiana Matos.pdf: 1573589 bytes, checksum: 18d3fa411a57db5da3c97181d134b36f (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2017-10-02T18:34:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Maiana Matos.pdf: 1573589 bytes, checksum: 18d3fa411a57db5da3c97181d134b36f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T18:34:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Maiana Matos.pdf: 1573589 bytes, checksum: 18d3fa411a57db5da3c97181d134b36f (MD5) / Ministério da Educação / Este estudo in vitro e ex vivo buscou avaliar a eficácia antimicrobiana do Extrato bruto de Aroeira a 50% frente a uma cepa de Enterococcus faecalis (ATCC 29212). Para o estudo in vitro, foi realizado teste de difusão em Ágar para verificar o grupo com maior halo de inibição, o que foi observado no extrato bruto a 50% de Aroeira. Em seguida, para o estudo ex vivo, foram utilizados 40 (quarenta) dentes humanos unirradiculares tratados endodonticamente e fixados em placas de 24 poços. Os espécimes foram aleatoriamente divididos em quatro grupos com 10 (dez) dentes cada, de acordo com a medicação intracanal utilizada: CO - grupo controle; PA - grupo com medicação de Hidróxido de Cálcio PA + anestésico; CA - grupo com medicação Calen PMCC e EA - grupo com medicação de Extrato Bruto 50% de Aroeira. Posteriormente, os espécimes foram contaminados com E. faecalis (ATCC 29212) e incubados a 37°C durante 21 dias. A cada dois dias, houve adição do caldo BHI (Brain Heart Infusion) em cada dente, além da troca de água nos poços, fornecendo assim nutrição e umidade para o crescimento bacteriano. As amostras foram coletadas após 7 (sete) e 15 (quinze) dias com o auxílio de cones de papel estéreis e submetidas à cultura de placas de Petri contendo Ágar BHI. Após 24 horas de incubação, o crescimento bacteriano foi verificado através da contagem das unidades formadoras de colônias (UFC/mL). A análise dos dados mostrou que houve significativa redução dos microorganismos nos grupos PA, CA e EA, se comparado ao controle CO com p <0,0001. Observou-se ainda uma diferença estatística entre o PA e CA, com p< 0.0071, porém não houve diferença estatística entre CA e EA. Portanto, pode-se concluir que o Extrato Bruto de Aroeira a 50% (oitenta por cento) possui eficácia antimicrobiana frente ao Enterococcus faecalis. Sugere-se a realização de estudos clínicos com o extrato pesquisado de modo a fundamentar os efeitos antimicrobianos desta terapia fitoterápica.

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-09-13T11:46:21Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Èrcia Xavier.pdf: 2662420 bytes, checksum: fd6d9a9947d26b8d8052875ef6977e70 (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2017-10-02T18:46:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Èrcia Xavier.pdf: 2662420 bytes, checksum: fd6d9a9947d26b8d8052875ef6977e70 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T18:46:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Èrcia Xavier.pdf: 2662420 bytes, checksum: fd6d9a9947d26b8d8052875ef6977e70 (MD5) / Capes / A vitivinicultura no Brasil é concentrada nas regiões Sul, Sudeste e Nordeste, sendo uma atividade consolidada e com significativa importância sócio-econômica. Na Bahia apresenta expressão econômica principalmente na região do Vale do São Francisco. As uvas são consideradas uma das maiores fontes de compostos fenólicos dentre os vegetais e frutas. A fabricação de vinhos e sucos gera grandes quantidades de resíduos sólidos, como o bagaço de uva, os quais são descartados ou subaproveitados. Esse resíduo apresenta uma composição rica e heterogênea de compostos fenólicos, o que é interessante do ponto de vista econômico. O desenvolvimento de sistemas emulsificados envolvendo nanoformulações é uma alternativa para melhorar a disponibilidade biológica de substâncias ativas. Estas vantagens podem ser empregadas na veiculação de bioativos em produtos farmacêuticos ou cosméticos, principalmente para os cuidados com a pele. O objetivo deste trabalho foi encapsular em lipossomas os extratos de uva in natura e residual com o intuito de determinar e comparar os efeitos do processamento e da natureza sobre a composição, estabilidade, propriedades organolépticas e atividade antioxidante entre as amostras obtidas. Os teores dos compostos fenólicos e flavonóides foram determinados por espectroscopia no ultravioleta visível (UV-VIS), bem como através de tratamento quimiométrico de análise de componentes principais (PCA). A atividade antioxidante (AA) foi avaliada pelo método de sequestro de radicais livres DPPH. Os lipossomas obtidos através da técnica de extrusão mostraram-se estáveis quanto às propriedades organolépticas (odor, cor, aspecto), físicas, físico química tanto para as amostras obtidas da uva in natura quanto para dos resíduos. As amostras apresentaram AA comparável ao padrão hidroxitolueno butilado (BHT), o lipossoma de uva in natura demonstrou o maior IC50. Os teores de compostos fenólicos e flavonóides foram maiores nas amostras derivadas do resíduo, tanto no extrato quanto nos lipossomas. Na PCA permitiu prever a similaridade e a preservação das características químicas nos lipossomas obtidos. Os resultados mostraram o potencial de aplicação dos extratos de uva in natura e residual no desenvolvimento de sistemas lipossomados com atividades antioxidantes em promissores produtos bioativos.

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-09-13T12:03:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final- Tatiana Oliveira do Vale.pdf: 4717884 bytes, checksum: ff43b7e5c8ffae42678c802a98705a42 (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2017-10-02T18:50:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Final- Tatiana Oliveira do Vale.pdf: 4717884 bytes, checksum: ff43b7e5c8ffae42678c802a98705a42 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T18:50:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Final- Tatiana Oliveira do Vale.pdf: 4717884 bytes, checksum: ff43b7e5c8ffae42678c802a98705a42 (MD5) / capes / Mesmo após o emprego das técnicas secundárias de recuperação muito petróleo ainda se encontra retido nos reservatórios. Diante disso, métodos terciários (EOR) de recuperação veem sendo empregados, um deles é a inundação do reservatório com surfactantes. Nos reservatórios se encontram um grupo diverso de microrganismos, as bactérias redutoras de sulfato, que como resultado final do seu metabolismo produzem H2S. Esse gás causa corrosão entre outros sérios prejuízos à indústria petrolífera. O objetivo desse trabalho, portanto, é o de avaliar a influencia do lauril glicosídeo em técnicas de EOR e o seu efeito na atividade metabólica das BRS. A cinética do consumo de sulfato foi usada como parâmetro de avaliação da atividade microbiana. A concentração micelar crítica do tensoativo foi aferida como sendo de aproximadamente 82ppm. Testes cinéticos foram realizados com diferentes razões de surfactante e petróleo (fontes de carbono) baseando-se no conceito do modelo de Monod. As variações de atividade de BRS (consumo de sulfato) corresponderam diretamente as concentrações iniciais de fontes de carbono. As respostas fisiológicas tanto de D. vulgaris quanto do consórcio de BRS isoladas de poço de petróleo produziram resultados no período de 12 horas. O maior consumo de sulfato ocorreu no intervalo de concentração do surfactante 0,14% para D. vulgaris e 0,21% para o consorcio de BRS. Altas concentrações do surfactante apresentaram efeito tóxico. D. vulgaris se mostrou mais sensível do que o consórcio de BRS. Testes em coluna de areia empacotada também foram realizados com o propósito duplo de (i) avaliar a taxa de recuperação do petróleo com uso do surfactante e, depois, (ii) estimar o efeito da água produzida contendo o surfactante na atividade de BRS. Os resultados sugerem que a atividade de BRS é significativamente afetada pelo surfactante, sendo que baixas concentrações (≤ 2%) aumentam sua atividade (2 a 3 vezes a partir do controle sem o surfactante) e altas concentrações (≥ 2%) tem efeito tóxico (zero consumo de sulfato). Portanto, para evitar alta produção de sulfeto por BRS durante o uso do surfactante na recuperação terciária de petróleo é necessário ajustar a dose para acima de 2%. Porem, caso ocorra uma diluição do surfactante pela matriz da formação rochosa, esse composto poderá ser utilizado pelas BRS como fonte de carbono e aumentar a produção de sulfeto. Esse fenômeno aconteceria quando as concentrações pontuais do surfactante sejam reduzidas para abaixo de 2%. Dessa forma, essa pesquisa destaca que, embora o uso de surfactante melhore a recuperação de petróleo, este pode aumentar significativamente a produção de sulfeto pelas BRS presentes no poço de petróleo.

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-09-14T14:16:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final - Luciana Lima.pdf: 2423067 bytes, checksum: a4f37f089f064b722852c1a6565ea7de (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2017-10-02T20:39:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação final - Luciana Lima.pdf: 2423067 bytes, checksum: a4f37f089f064b722852c1a6565ea7de (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T20:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação final - Luciana Lima.pdf: 2423067 bytes, checksum: a4f37f089f064b722852c1a6565ea7de (MD5) / Fapesb / A acidificação e a Corrosão Microbiologicamente influenciada (CMI) são os principais problemas associados às Bactérias Redutoras de Sulfato (BRS) dentro da indústria de petróleo. Como forma minimizar os problemas citados, a indústria recorre a métodos de controles diversos, dentre os quais se destaca a utilização de biocidas, que por apresentar baixa eficiência e um custo elevado nem sempre são suficientes para conter a ação corrosiva das BRS. Compreender a dinâmica populacional das BRS em campos de petróleo é fundamental, tendo em vista a possibilidade de esclarecer os processos de acidificação e corrosão que acometem os reservatórios e os sistemas de transporte. Deste modo, métodos de cultivo tradicionais são utilizados e apesar da sua importância por vezes subestimam populações complexas. Por outro lado, métodos independentes de cultivo já promoveram uma compreensão destas comunidades em ambientes extremos, quando empregados em paralelo aos métodos tradicionais. O objetivo deste estudo foi testar e validar técnicas moleculares para monitorar em tempo real BRS em amostras de água produzida (AP), a partir de quatro poços (A, B, C e D) em diferentes pontos na região do Recôncavo Baiano, utilizando os métodos FISH, DAPI e NMP (número mais provável). Os dados obtidos evidenciaram a reunião de baixas populações de BRS nos poços pesquisados, e por meio de análise de variância (ANOVA) utilizando o teste de Scott Knott, foi observada a significância estatística (p≤0,05), entre as médias avaliadas para o poço de petróleo C, quando os três métodos (DAPI, FISH e NMP) foram comparados. Os métodos DAPI e FISH também apresentaram um p≤0,05 para a avaliação do poço D, sugerindo que as limitações encontradas pelo método NMP, para o respectivo poço, foram supridas pelos métodos independentes de cultivo. O qPCR foi empregado no referido estudo para quantificar o número de cópias do gene dsrA, responsável pela redução do sulfato, através da quantificação absoluta. Entanto, foi necessário previamente bioestimular uma amostra de AP em três concentrações diferentes (20%, 40% e 60%). Os resultados evidenciaram que a amostra de AP na concentração de 60% permitiu a amplificação do DNA extraído e a validação da metodologia, uma vez que a análise de qPCR mostrou um slope -3,32, uma eficiência de 100,081% e um R2 de 0,999.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 213690.pdf: 2374034 bytes, checksum: 27fc864377794570554f05971b87a912 (MD5) / Com o grande crescimento da malacocultura em Santa Catarina, tornou-se necessário verificar e assegurar a qualidade sanitária destes moluscos, como também da água onde os mesmos são cultivados. Devido à característica de alimentação filtrante, moluscos bivalves podem bioacumular vírus e outros patógenos presentes em águas contaminadas por efluentes. O vírus da Hepatite A (HAV) tem sido detectado em surtos relacionados ao consumo de água ou alimentos contaminados, em especial de moluscos bivalves. Os métodos moleculares como a reação em cadeia da polimerase, a hibridização molecular e o sequenciamento são hoje os métodos mais recomendados para avaliação da presença de vírus entéricos com genoma RNA em amostras ambientais. O objetivo deste trabalho foi padronizar métodos para a detecção do vírus da Hepatite A a partir de tecidos de ostras. Para isso foram avaliados três protocolos de recuperação das partículas virais a partir de tecido digestivo dissecado das ostras e dois métodos de extração e purificação do RNA viral. Os protocolos selecionados combinam a dissecação do trato gastrointestinal das ostras, a extração orgânica antes da precipitação das partículas virais com PEG, a extração de RNA com Trizol LS® com a RT-PCR seguida pela hibridização molecular utilizando uma sonda marcada com digoxigenina. A sensibilidade do método foi determinada pela inoculação do trato gastrointestinal de ostras com diluições crescentes de HAV (0,001 a 105FFU/mL), seja por inoculação direta ou por semeadura viral em aquários. A RT-PCR foi capaz de detectar 0,1FFU/ml, e a hibridização, até 0,001FFU/ml. O protocolo estabelecido foi utilizado para analisar a possível contaminação por HAV de amostras de ostras, coletadas em três fazendas de cultivo de Florianópolis. Por RT-PCR, os índices de contaminação foram 10,5%, 21,1% e 0% para os sítios 1, 2 e 3, respectivamente. Quando a hibridização molecular foi utilizada, a sensibilidade de detecção viral foi aprimorada, e passou para: 47,4%, 79,0% e 31,8%, respectivamente. Conforme demonstrado, a hibridização molecular mostrou-se 100 vezes mais sensível que a RT-PCR na detecção do HAV no trato gastrointestinal de ostras. Os dados aqui apresentados poderão ser úteis no estabelecimento de um programa de segurança alimentar, visando a comercialização de ostras com qualidade sanitária assegurada para o consumo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:59:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 224208.pdf: 597493 bytes, checksum: f9b8bd6abdd864d3673dad2d2538cd8b (MD5) / Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae) é uma espécie nativa da Floresta Atlântica, que produz madeira de grande valor econômico. Os objetivos deste trabalho foram estudar o crescimento de calos em diferentes condições de cultivo, realizar análises preliminares do teor de óleos essenciais e dos constituintes voláteis produzidos pelos mesmos e desenvolver estudos sobre a criopreservação de sementes e conservação in vitro de propágulos vegetativos. Em todos os experimentos foram utilizados segmentos nodais cotiledonares, exceto para testar o efeito de diferentes tipos de explantes, em que segmentos apicais e foliares também foram utilizados. O meio de cultura Murashige & Skoog foi utilizado em todos os experimentos, suplementado com 2,5 M de 6-benzilaminopurina (BAP) e 5 M de ácido a-naftalenoacético (ANA), 0,2% de Phytagel e com 58,4 mM de sacarose, exceto nos casos em que outras fontes de carbono foram testadas ou em que foram testadas diferentes concentrações de sacarose na ausência ou na presença de glutamina ou em que diferentes concentrações de BAP e ANA foram utilizadas separadamente ou em combinação. As culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura controlada de 25 2ºC, sob fotoperíodo de 16 horas (exceto as submetidas ao escuro), provido por lâmpadas fluorescentes Philips TDL (22.3 µmol.m-².s-¹) e foram avaliadas, após quatro e oito semanas, dependendo do experimento, através da determinação da massa fresca, massa seca e do teor de água. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação de calos crescidos na luz em 2,5 M de BAP e 5 M de ANA . A extração dos constituintes voláteis foi realizada pelo método líquido-sólido e análise através de cromatografia gasosa. As sementes criopreservadas foram descongeladas em temperatura ambiente ou a 45 C, em banho-maria, por três minutos. Os segmentos nodais foliares foram armazenados, por seis semanas em meio de cultura Murashige & Skoog, com metade da concentração salina, desprovido de sacarose, a 25 C e a 5 C e após o período de armazenamento transferidos para o meio de cultura Murashige & Skoog, suplementado com 2,5 M de BAP e 5 M de ANA. Nenhuma diferença foi detectada entre os valores de massa fresca dos calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares e apicais e os maiores valores foram obtidos com 2,5 M de BAP e 5 M de ANA. Não foram detectadas diferenças entre os maiores valores em massa seca de calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares e foliares, obtidos com oito semanas de cultivo. Os calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares cresceram em todas as combinações de ANA e BAP testadas. Os maiores valores de massa seca foram obtidos em 2,5 M de ANA com 2,5 M de BAP, 5 M de ANA e 2,5 M ou 5 M de BAP. A maior massa seca dos calos ocorreu após oito semanas de cultivo em sacarose, sendo os valores observados para glicose e frutose semelhantes. Os maiores valores de massa seca dos calos foram obtidos com 58,4 mM ou 116,8 mM de sacarose e com 87,6 mM de sacarose e 2,73 mM de glutamina. Os calos apresentaram maior massa seca na luz, com oito semanas de cultivo e maior teor de água no escuro. Calos produzidos a partir de plântulas de diferentes idades não diferiram em massa seca, apenas no teor de água, que foi maior para os calos obtidos de explantes de plântulas com cinco semanas de idade. O rendimento de óleos essenciais extraídos por hidrodestilação, produzidos pelos calos foi de 1,17 % da massa seca. O linalol foi o composto majoritário produzido por calos crescidos na luz ou no escuro. Sete compostos voláteis foram identificados em calos crescidos no escuro e doze foram identificados em calos crescidos na luz. O germacreno apareceu em maior proporção nos calos crescidos na luz. A massa seca dos calos produzidos a partir de segmentos nodais foliares armazenados por seis semanas a 5 C foi maior do que a massa seca dos calos produzidos pelos segmentos apicais, não havendo diferença entre as massas secas quando ambos os explantes foram armazenados a 25 C. As sementes toleraram a criopreservação por quinze meses e o descongelamento lento. O estabelecimento de diferentes condições de cultivo de calos, a detecção de compostos de interesse nos mesmos e o estabelecimento de métodos que permitem a criopreservação, por longos períodos de tempo, e a conservação in vitro, por curtos períodos de tempo, de propágulos vegetativos indicam o potencial da aplicação de abordagens biotecnológicas para a produção de metabólitos secundários e conservação de germoplasma desta espécie. Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae) is a native species of the Atlantic Forest, important for timber production. The aim of this work is to study callus growth in different culture conditions, to carry out preliminary analysis on the content of essential oils and its volatile components and to develop studies on seed cryopreservation and in vitro conservation of vegetative propagules. Cotyledonary nodal segments were used in all experiments, except when different type of explants were used. The Murashige & Skoog medium supplemented with 2,5 M 6-benzilaminopurine (BAP) and 5 M a-naphtaleneacetic acid (ANA), 0,2% Phytagel and 58,4 mM sucrose was used in all experiments, except when different carbon sources, different sucrose concentration, in the absence or presence of glutamine or different concentration of BAP and ANA, isolated or combined, were tested. The cultures were maintained under 25 2ºC, 16 hours photoperiod (except those kept in the dark), provided by fluorescent Philips TDL (22.3 µmol.m-².s-¹) tubes and were assessed after either four or eight weeks, depending on the experiment, for fresh mass, dry mass and water content. The essential oils were extracted by hydrodistillation from callus grown under light in 2,5 M BAP and 5 M ANA. The extraction of volatile components was carried out through the liquid-solid method and the analysis by gas chromatography. Seeds cryopreserved in liquid nitrogen and thawed either at room temperature or at 45 C, in a water bath, for three minutes. Leaf nodal segments and apical shoot segments were stored at either 25 C or 5 C, for six weeks in half strength Murashige & Skoog medium, deprived of sucrose, and transferred, after storage, to the Murashige & Skoog medium supplemented with 2,5 M BAP and 5 M ANA. No differences were detected in the fresh mass of calluses initiated either from cotyledonary nodal segments or apical segments and the highest values were obtained in the culture medium with 2,5 M BAP and 5 M ANA. No differences were detected in the highest dry mass values of calluses initiated from either cotyledonary nodal segments or leaf nodal segments, after eight weeks of culture. Growth of calluses initiated from cotyledonary nodal segments was achieved in all combination of ANA and BAP tested. Superior values of dry mass were obtained in 2,5 M ANA with 2,5 M BAP, 5 M ANA and 2,5 M or 5 M BAP. The highest callus dry mass occurred after eight weeks of culture in sucrose, and similar values were obtained for glucose and fructose. Superior values of callus dry mass were obtained on either 58,4 mM or 116,8 mM sucrose and on 87,6 mM sucrose and 2,73 mM glutamine. Calluses showed higher dry mass in the light, when cultivated for eight weeks. Calluses produced from seedlings with different age did not differ in dry mass, only the water content was higher in callus obtained from explants of five week-old seedlings. The content of essential oils produced by the callus was 1,17 % of the dry mass. Linalool was the major compound produced by callus grown either under light or in the dark. Seven volatile compounds were identified in callus grown in the dark and twelve were identified in callus grown in the light. Germacrene appeared in higher proportion in the callus grown in the light. The dry mass of calluses produced from leaf nodal segments stored for six weeks at 5 C was higher than the dry mass of calluses produced from the apical segments, and no difference in the dry mass was detected when both explants were stored at 25 C. Seeds tolerated cryopreservation for fifteen months and the slow thawing. The establishment of different callus culture condition, the detection of important compounds produced by the callus and the establishment of methods which allow long term seed cryopreservation, and short term in vitro conservation of vegetative propagules indicate the potential of application of biotechnological approaches for the production of secondary metabolites and germplasm conservation of this species.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:01:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 223442.pdf: 486908 bytes, checksum: 416277d8611ae8789a29052571a0b516 (MD5) / Os produtos naturais constituem uma fonte inesgotável de compostos com atividades farmacológicas promissoras, incluindo ação antiviral. Os materiais protéicos são encontrados em abundância na natureza e têm atividades biológicas como antibacteriana, antifúngica, antitumoral e antiviral comprovadas. Neste trabalho, a citotoxicidade (CC50) e a atividade antiviral (CE50) de peptídeos antimicrobianos (PAM) e hemolinfa de ostras (Crassostrea gigas e C. rhizophorae), foram avaliadas, em células VERO, HEp-2 e MA104 e contra os vírus herpes simplex tipo 1(HSV-1/KOS), adenovírus sorotipo 5 (AdV-5), rotavírus símio SA-11 (RV-SA11), pelo ensaio colorimétrico do MTT, utilizando diferentes estratégias. Para a hemolinfa das ostras também foi realizado o estudo da ação virucida. Dentre os PAM testados, a peneidina apresentou o maior índice de seletividade (IS= CC50/ CE50) para o HSV-1/KOS (IS = 64). A hemolinfa de ostras apresentou ação virucida contra os três vírus avaliados neste estudo, também apresentando atividade anti-herpértica (IS = 19,76/C. rhizophorae) e antiadenovírus (IS = 5,33/C. gigas), sem, no entanto, exibir ação antiviral contra o rotavírus. Foram observados, em alguns casos, baixos IS, associados a altas porcentagens de inibição da replicação viral, mais evidente no grupo dos PAM. Estudos adicionais devem ser realizados a fim de se confirmar a atividade antiviral e prováveis mecanismos ação.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:24:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 222434.pdf: 1030571 bytes, checksum: 5809d12490dc4a5625a9dec715255ca5 (MD5) / Estudos vêm sendo realizados visando correlacionar a composição química e a atividade biológica de diversos alimentos inseridos na dieta humana, entre eles o café e o cacau. O Brasil é o maior produtor e exportador mundial de café, caracterizando-se também como um grande consumidor (70% da população consomem esta bebida). Com relação ao cacau, o Brasil ocupa o 5º lugar como produtor e consumidor mundial, sendo o estado da Bahia seu maior produtor (95%). São os compostos biologicamente ativos produzidos por estas espécies, usualmente oriundos do metabolismo secundário, que têm despertado o interesse das indústrias alimentícia, química e farmacêutica. Entre estes compostos destacam-se os (poli)fenóis e os alcalóides, sendo que diversos ensaios in vitro e in vivo vêm comprovando uma ampla variedade de efeitos biológicos associados aqueles metabólitos, com destaque para suas atividades antioxidante, antiinflamatória e antitumoral. A busca por compostos biologicamente ativos benéficos à saúde e que estejam inseridos em biomassas presentes na dieta humana como o café e o cacau, por exemplo, é uma estratégia que corrobora na prevenção de certas enfermidades que acometem o homem, notadamente aquelas relacionadas ao sistema cardiovascular e de natureza neoplásica. No presente trabalho, observou-se a capacidade dos extratos de café in natura (cru) e cacau em pó no seqüestro dos íons superóxido e hidroxil, com maior efeito sobre este último radical livre. Também constatou-se a atividade pró-vasculogênica do extrato aquoso de café in natura, enquanto o cacau apresentou ação antivasculogênica em modelos de embriões de galinha. Sugere-se uma continuidade destes estudos para que estas biomassas possam ser utilizadas como alternativas na prevenção de determinados distúrbios da saúde humana.

Dissertação (mestrado) - Univesidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T08:08:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 226335.pdf: 502374 bytes, checksum: 32a6f66613c813a4d2eb00a1aa2abf71 (MD5) / A ostra Crassostrea rhizophorae vem sendo amplamente utilizada como um organismo sentinela em programas de biomonitoramento marinho. Biomarcadores de contaminação são ferramentas importantes para a avaliação dos efeitos provocados por contaminantes em organismos expostos. No entanto, são necessários estudos que visem uma melhor compreensão, caracterização e padronização do uso destas respostas bioquímico-moleculares para que as mesmas possam ser utilizadas em estudos Ecotoxicológicos. A família das GST é comumente utilizada como biomarcador de exposição a xenobióticos. Estas enzimas desempenham importante papel nos processos de detoxificação celular, catalisando algumas das principais reações de conjugação da Fase II de biotransformação. O objetivo do presente estudo foi purificar e caracterizar GSTs de brânquias de ostras do mangue C. rhizophorae. Extratos de brânquias foram submetidos à cromatografia de afinidade em coluna GSH-agarose. A atividade da GST das frações eluídas foi testada utilizando-se os substratos 1-cloro, 2,4-dinitrobenzeno (GST-CDNB) e ácido etacrínico (GST-ETA). As frações que apresentaram atividade foram analisadas através de eletroforese bidimensional e ensaios cinéticos utilizando os substratos CDNB e GSH. A atividade da GST no pico de eluição da coluna de afinidade foi 14,1 e 7,5 U/ mg de proteína para os substratos CDNB e ETA, respectivamente. A massa molecular aparente foi de 26,09 kDa, sendo que foram observados seis spots de pI diferentes (pI 7,6-5,4), sugerindo a presença de diferentes sub-unidades. Os valores de Km determinados foram Km CDNB = 1,37 mM e Km GSH = 0,77 mM. Os resultados obtidos foram similares aos observados previamente em estudos com GSTs de diferentes espécies de organismos aquáticos. A elevada atividade da GST-ETA sugere a presença de isoformas da classe Pi, e que esta é, possivelmente, a mais representativa isoforma de GST em brânquias de ostras C. rhizophorae. No entanto, estudos subseqüentes deverão ser realizados visando identificar outras isoformas de GST presentes nesta espécie. Mangrove oyster Crassostrea rhizophorae has been extensively used as a sentinel organism in marine monitoring programs. Biomarkers of contamination are important tools to understand the effects elicited by contaminants in exposed organisms. However, studies aiming the understanding, characterization and standardization of these biochemical-molecular responses in ecotoxicological studies are still required. The GST family is commonly used as biomarkers of exposure to xenobiotics. These enzymes play an important role in cell detoxification, catalyzing one of the major Phase II biotransformation reactions. The aim of this study was to purify and to characterize the GSTs from gills of C. rhizophorae. Gill extracts were submitted to affinity chromatography using GSH-agarose column. The GST activity was analyzed in the eluted fractions using 1-chlorine,2,4-dinitrobenzene (GST-CDNB) and ethachrinic acid (GST-ETA). The fractions containing the peaks of GST activity were submitted to 2D electrophoresis and kinetics analysis, using CDNB and GSH. The activity detected in the elution peaks was 14,1 and 7,5 U/ mg protein for CDNB and ETA, respectively. The apparent molecular mass was 26,09 kDa and six spots with pI values ranged from 7,6 to 5,4 were observed, suggesting the presence of different GST subunits. The Km values were Km CDNB = 1,37 mM and Km GSH = 0,77 mM. These findings are in agreement with those observed for GSTs in similar studies carried out in different species of aquatic organisms. The elevated GST-ETA suggests the presence of GST Pi class isoform and that is, possibly, the most abundant GST isoform in the gills of C. rhizohorae. Moreover, subsequent studies need to be carried out to identify other GST isoforms in this specie.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2012-10-22T09:21:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 225836.pdf: 1172201 bytes, checksum: 6cef987593cfe31ef17852d62cb933d5 (MD5) / Os efluentes das indústrias papeleiras são constituídos de vários compostos fenólicos tóxicos. Dentre esses compostos, alguns de elevadas massas molares (MM) são biotransformados apenas por alguns organismos como fungos da classe Basidiomycota. Diversos estudos demonstram que a biotransformação da madeira por estes fungos depende principalmente de sua capacidade de produzir enzimas lignolíticas extracelulares como as lacases. As lacases catalisam oxidação de uma série de compostos aromáticos, especialmente compostos fenólicos. Várias aplicações vêm sendo sugeridas para essas enzimas, dentre elas, o seu uso na biorremediação de compostos fenólicos e, conseqüentemente, efluentes que possuam tais compostos. No entanto, a aplicação destas, como de quaisquer enzimas na forma livre, torna-se inviável devido a peculiaridades das mesmas, como o fato de perderem atividade em condições e meios densnaturantes. Dessa forma, para aumentar a estabilidade operacional das enzimas, as mesmas podem ser imobilizadas em suportes sólidos, que lhes conferem maior resistência à perda de atividade. Considerando isso, o presente trabalho teve como principal objetivo imobilizar a enzima lacase em esferas de quitosana e avaliar seu potencial para biotransformação de amostras do efluente de uma indústria de papel e celulose. Inicialmente foi possível observar que, apesar da enzima ter adquirido valores baixos de estabilidade operacional, tornou-se mais resistente a diversas condições e meios desnaturantes tais como: pH e temperatura elevados, presença de inibidores e solventes. Em um segundo momento, foram realizados ensaios de biotransformação das amostras de efluente com a enzima imobilizada. O processo de biotransformação foi acompanhado em diversos períodos de tempo pelos seguintes parâmetros: fenóis totais, fenóis de baixa MM, cor e DQO. Com base nos resultados obtidos foi possível observar que, após 24 horas de incubação da enzima imobilizada com o efluente, houve remoção de aproximadamente 65% de fenóis totais, 65% de fenóis de baixa MM e 60% de cor. Embora não se tenha observado modificações estatisticamente significativas nos níveis de DQO após tratamento enzimático, foi possível concluir que a enzima imobilizada em esferas de quitosana possui grande potencial de biotransformação dos compostos fenólicos que, por sua vez, são os que detêm os agentes químicos responsáveis pela elevada toxicidade desse tipo de efluente.