Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências de Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2013-07-16T00:37:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 221568.pdf: 1304790 bytes, checksum: 9564055aa620285f703ef5b9817c49e9 (MD5) / A infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) resulta em alterações efetivas e complexas no sistema imunológico, caracterizada por uma depleção de linfócitos CD4+, as quais acompanham o aumento progressivo dos níveis plasmáticos da carga viral. Entre os mecanismos envolvidos nesta progressão, está a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), proveniente do estresse oxidativo gerado pela própria ativação crônica do sistema imune. A ação de EROs, assim como por constituintes virais, favorece a replicação viral via ativação de NF-kB e a depleção de linfócitos por apoptose, com conseqüente comprometimento do sistema imune. O objetivo desse estudo, duplo cego, controlado por placebo, foi investigar e comparar o possível efeito dos compostos antioxidantes ascorbato (CewinÒ, 2g/dia) e N-Acetil-Cisteína (NAC)(FluimucilÒ,600mg/dia), quando associados ao efeito inibidor da replicação viral dos antirretrovirais, através de parâmetros virológicos e celulares em pacientes soropositivos para o HIV-1. Foram avaliados: a carga viral do HIV-1, linfócitos CD4+, CD8+, relação CD4/CD8, percentual de células vivas, em apoptose e mortas, globulinas, IgA, IgG, IgM e b-2 microglobulina. Participaram do estudo 38 pacientes; destes, 13 foram suplementados com ascorbato 2g/dia, 10 suplementados com NAC, 800 mg/dia, e 15 fizeram uso de placebo. As análises foram realizadas antes do início do tratamento e após 60, 120 e 180 dias. Os resultados obtidos demonstraram significativa diminuição da carga viral em todos os grupos, em decorrência da terapia antirretroviral, acompanhada de um aumento significativo no número de linfócitos CD4+ e relação CD4/CD8, bem como diminuição significativa dos níveis de globulinas, IgA, IgG, IgM. Os resultados demonstraram ainda, um efeito significativo da suplementação com ascorbato sobre o percentual de linfócitos vivos, em apoptose, e sobre os níveis de b-2 Microglobulina. Neste estudo, conclui-se que a suplementação com ascorbato, 2g/dia, via oral, associada à terapia antirretroviral, propiciou um aumento na viabilidade dos linfócitos circulantes em pacientes HIV+, o que sugere um efeito benéfico na reconstituição do sistema imune nos pacientes que fazem uso do ascorbato. A NAC, entretanto, não apresentou nenhum resultado significante.

Orientador: José Rodrigo Pauli / Banca: André Ricardo Gomes de Proença / Banca: Angelina Zanesco / Banca: Ronaldo Vagner Thomatirli dos Santos / Banca: Fernando Moreira Simabuco / Resumo: Objetivo: Investigar o papel do treinamento físico (TF) em regular os processos inflamatório, de estresse de retículo endoplasmático e principalmente de apoptose em neurônios hipotalâmicos responsáveis pelo controle da fome em camundongos obesos induzidos por dieta rica em gordura. Metodologia: Quarenta e cinco camundongos Swiss foram distribuídos em 3 grupos com 15 animais em cada (n=15): Controle - animais sedentários, alimentados com dieta padrão por 16 semanas; Obeso - animais sedentários, que receberam dieta hiperlipídica (DHL) por 8 semanas (OB); Obeso Treinado (OBT) - animais alimentados com DHL por 8 semanas e, concomitantemente, foram submetidos a um protocolo de TF. No início e ao final do experimento foram realizadas avaliações morfofisiológicas, moleculares e de ingestão alimentar nos animais. O protocolo de TF consistiu em corrida em esteira por 1h, 5 dias/semana, durante 8 semanas, a 60% da Pmáx dos animais. Vinte e quatro horas após a última sessão do TF extraiu-se os hipotálamos dos animais para as análises do conteúdo, fosforilação e/ou associação das proteínas JAK2, STAT3, TNF-α, IL-6, IL-1β, JNK, IKK, TLR4 e MyDD88, Bcl-2, Bax, Casp9, Casp8, FADD, APAF1, PERK, eIF2α, NPY e POMC por imunoblot, imunoprecipitação e/ou PCR-RT. Para avaliar apoptose, aplicou-se a técnica de TUNEL. A ativação de macrófagos foi analisada pela marcação com F4/80. Resultados: A DHL foi capaz de aumentar a massa corporal total, o índice de Lee, a glicemia e os níveis de colesterol total e LDL nos animais obesos se comparado aos animais controles. Ao contrário, o TF foi capaz de atenuar estes parâmetros. O TF aumentou a fosforilação das proteínas da via de sinalização da leptina (p-JAK2/p-STAT3) em neurônios hipotalâmicos dos camundongos obesos quando comparados a seus pares não exercitados. Tais resultados foram acompanhados por menor conteúdo de TNF-α, IL-6, IL-1β e TLR4 e redução da fosforilação... / Abstract: Objective: To investigate the role of physical training (PT) in regulating the inflammatory processes, endoplasmic reticulum stress and especially apoptosis in hypothalamic neurons responsible for controlling hunger in diet induce obese mice. Methods: Forty-five Swiss mice were distributed into 3 groups of 15 animals each (n = 15): Control - sedentary animals fed a standard diet for 16 weeks; Obese - sedentary animals that received high fat diet (HFD) for 8 weeks (OB); Obese trained (OBT) - animals that received HFD for 8 weeks, and concomitantly, were subjected to a PT protocol. At the beginning and end of the experiment, morphophysiological variables, food intake and molecular biology were evaluated. The TF protocol consisted of treadmill running for 1 h, 5 days / week for 8 weeks, at 60% of Pmax of the animals. Twenty-four hours after the last session of the PT, the extraction of hypothalamus was done for analysis of the level, phosphorylation and / or association of, JAK2, STAT3, TNF-α, IL- 6, IL-1β, JNK, IKK, TLR4 and MyDD88, Bcl-2, Bax, Casp9, Casp8, FADD, APAF1, PERK, eIF2α, NPY and POMC by immunoblot, immunoprecipitation and/or RT-PCR. The TUNEL technique was performed to evaluated apoptosis. In addition, the activation of macrophages was analyzed by labeling with F4/80. Results: DHL was able to increase total body weight, Lee's index, blood glucose and total cholesterol levels and LDL in obese animals compared to the control animals. Rather, PT was able to attenuate these aspects. PT increased phosphorylation of the proteins of leptin signaling pathway (p- JAK2/p-STAT3) in hypothalamic neurons of obese mice compared to not exercised mice. These findings were accompanied by lower content of TNF-α, IL-6, IL-1β and TLR4 and reduced phosphorylation of JNK and IKK trained in the obese animals compared to the obese animals which have remained inactive during the same period. In the same way, it can be observed more macrophage... / Doutor

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:18:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 321634.pdf: 2116644 bytes, checksum: cee06a3868398f6bac4784fc7b33b4c1 (MD5) Previous issue date: 2013 / O câncer foi considerado uma das principais causas de morte no mundo, no ano de 2013, sendo responsável por 7,6 milhões de mortes (cerca de 13% de todas as causas de mortes). Para 2030 estima-se 27 milhões de novos casos. Embora a quimioterapia ainda seja a principal terapia utilizada para o tratamento da doença, a morbidade associada aos quimioterápicos ainda é um obstáculo a ser superado. Dessa forma, a busca por compostos antineoplásicos, que tenham maior eficiência em induzir apoptose nas células tumorais e com insignificantes efeitos colaterais, tornou-se alvo de investigação acadêmica e da indústria farmacêutica. Os compostos derivados de imidas cíclicas vêm sendo descritos como promissores agentes antitumorais. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar o efeito dos derivados de imidas cíclicas sobre os mecanismos de resistência tumoral e apoptose sobre células de linhagem de melanoma murino (B16F10), de leucemia mieloide aguda humana (K562) e de leucemia linfoide aguda humana (Jurkat). Inicialmente, foi investigado o efeito citotóxico de nove derivados de imidas cíclicas sobre células de linhagem de melanoma murino (B16F10), e determinado suas CI50. O composto 2 foi o que apresentou melhor atividade citotóxica, com um valor de CI50 de 77,75 ?M (±1,3), por isso, foi selecionado para os demais experimentos. Os resultados mostram que esse composto apresenta atividade citotóxica concentração e tempo dependente, bloqueio das fases S e G2/M do ciclo celular, além do aumento de células na fase sub-G0G1, que sugere morte celular por apoptose. Como esses resultados foram considerados satisfatórios, o composto 2 e sete novos derivados de imidas cíclicas foram selecionados para uma nova triagem em células K562. Nessa nova etapa, o composto 15 demonstrou o melhor efeito citotóxico, por isso foi selecionado para modificações estruturais, que geraram cinco novos derivados (16, 17, 18, 19 e 20). O efeito citotóxico dos compostos (15, 16, 17, 18, 19 e 20) foi avaliado em células de leucemia aguda humana (K562 e Jurkat), e demonstram atividade citotóxica concentração e tempo dependente. Foi avaliado o efeito dos compostos (15, 16, 17, 18, 19 e 20) no ciclo celular, e estes demonstraram um bloqueio do ciclo celular na fase S para células Jurkat e na fase sub-G0/G1, para células K562 e Jurkat. A via de morte também foi avaliada por três diferentes metodologias, e os compostos demonstraram causar morte celular, via apoptose. Com esse conjunto de resultados os compostos 15, 17 e 19 foram selecionados para avaliar o seu efeito sobre o potencialmitocondrial, na expressão das proteínas AIF, Bcl-2, Bax, Fas, caspase-3 ativa, survivina, p53e Ki67. Os resultados demonstraram que os compostos (15, 17 e 19) causaram redução do potencial mitocondrial, aumento da expressão do AIF, diminuição da expressão da proteína antiapoptótica Bcl-2 e aumento da expressão da proteína pró-apoptótica Bax, sugerindo que o mecanismo de indução de apoptose desses compostos envolve a via intrínseca da apoptose. Ainda, nas células Jurkat, os compostos 15 e 17 também ativaram a apoptose pela via extrínseca, evidenciado pelo aumento da expressão do receptor Fas. Além disso, os compostos (15, 17 e 19) causaram aumento da atividade da proteína caspase-3 ativa, diminuição da expressão da proteína antiapoptótica survivina, aumento da expressão da proteína p53 e diminuição na expressão do marcador de proliferação celular Ki67. Também foi avaliado o efeito dos compostos (15, 17 e 19) sobre a expressão do gene abcc1, do fenótipo ABCC1 e do fenótipo LRP nas células K562 e Jurkat, e os resultados mostram que os compostos causaram diminuição da expressão constitutiva do gene abcc1 e da proteína LRP nas células K562 e Jurkat. Em conjunto, os resultados aqui expostos, sugerem que os compostos 15, 16, 17, 18, 19 e 20 causaram bloqueio do ciclo das células K562 e Jurkat, e, consequentemente, diminuição da proliferação celular, o que resulta na indução da apoptose via mecanismo intrínseco e/ou extrínseco, além de inibir os mecanismos de resistência à quimioterapia nessas células através da redução da transcrição do gene abcc1 e pela diminuição da expressão de LRP, Bcl-2 e survivina. <br> / Abstract : In 2008, cancer was considered a major cause of death in the world, accounting for 7.6 million deaths (around 13% of all causes of death). For 2030, 27 million new cases of cancer are estimated. Although chemotherapy is still the main therapy used for the treatment of this disease, the morbidity associated with chemotherapeutic drugs is still an obstacle to be overcome. Thus, the search for new anticancer compounds, with higher efficiency in inducing apoptosis in tumor cells with negligible side effects, has become an important target of the pharmaceutical industry. The compounds derived from cyclic imides have been described as promising with antitumor agents. The aim of this study was to investigate the effects of derivatives of cyclic imides on the mechanisms of tumor resistance and apoptosis in murine melanoma cells (B16F10), human acute myeloid leukemia cells (K562) and human acute lymphoblastic leukemia cells (Jurkat). First we have investigated the cytotoxic effect of nine derivatives of cyclic imides in murine melanoma cells (B16F10), and their IC50 have been calculated. Compound 2 has shown the best cytotoxic activity with an IC50 value of 77.75 ?M (±1.3), therefore, it was selected for further studies. The results have shown that this compound reduced the cell viability in a concentration and time-dependent manner, caused cell cycle arrest in S and G2/M phases and increased the number of cells in the sub-G0G1 phase, suggesting cell death by apoptosis. For these promising results, compound 2 and seven new derivatives of cyclic imides have been selected for a new screening in K562 cells. In this new stage, compound 15 has shown the best cytotoxic effect, so it was selected for structural modifications, which has generated five new compounds (16, 17, 18, 19 and 20). The cytotoxic effects of these compounds (15, 16, 17, 18, 19 and 20) have been evaluated in K562 and Jurkat cells, and they have demonstrated a cytotoxic concentration-and-time-dependent activity. The effects of these compounds (15, 16, 17, 18, 19 and 20) on cell cycle have demonstrated a blockage in S phase for Jurkat cells and in sub-G0/G1 phase in K562 and Jurkat cells. Apoptosis has been evaluated and confirmed by three different methodologies. Based on these results, compounds 15, 17 and 19 have been selected to evaluate their effects on the mitochondrial potential and on the expression of AIF, Bcl-2, Bax, Fas, caspase-3 active, survivin, Ki67 and p53 proteins. These compounds (15, 17, 19) have reduced the mitochondrial potential and have caused increased expression of AIF, decreased expression ofantiapoptotic protein Bcl-2 and increased expression of pro-apoptotic protein Bax, which suggests that the apoptosis caused by the compounds involves the intrinsic pathway. In Jurkat cells, apoptosis caused by compounds 15 and 17 also involves the extrinsic pathway, as it has been evidenced by the increased expression of Fas receptor. Furthermore, the compounds (15, 17, 19) have increased the activity of caspase-3 active and the expression of p53 protein, and they have decreased the expression of antiapoptotic survivin and the cell proliferation marker Ki67 proteins. The effect of these compounds (15, 17, 19) have also been evaluated on abcc1 gene expression, on ABCC1 phenotype and on LRP phenotype in Jurkat and K562 cells. The results have shown that the compounds reduced the constitutive expression of abcc1 gene and the expression of LRP protein in Jurkat and K562 cells. Together, these results suggest that compounds 15, 16, 17, 18, 19 and 20 cause cell cycle blockage in Jurkat and K562 cells and, therefore, decrease cell proliferation, which result in the induction of apoptosis by intrinsic and/or extrinsic pathways and in the inhibition of the resistance mechanisms to chemotherapy in these cells by reducing the transcription of abcc1 gene and by decreasing the expression of LRP, survivin and Bcl-2 proteins.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T00:17:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O presente trabalho teve por objetivo determinar se o carvedilol, um agente antihipertensivo, com propriedades antioxidantes e anti-apoptóticas relatadas na literatura, exerce efeitos citoprotetores contra o estresse oxidativo causado por uma dose excessiva de paracetamol no fígado de ratos. Adicionalmente, avaliou-se a possibilidade do carvedilol proteger contra a apoptose causada por uma associação de lipopolissacarídio (LPS) e galactosamina (GAL) em fígado de camundongos. Para testar a possível proteção do carvedilol contra a injúria causada pelo paracetamol, ratos Wistar machos (250 ± 30 g, n=6) foram divididos em 10 grupos. Quatro grupos foram pré-tratados (10 doses diárias, v.o.) com 4 doses de carvedilol (G1-0,4mg/kg, G2-0,9mg/kg, G3-1,8mg/kg, G4-3,6mg/kg ) e no 11° dia receberam 800 mg/kg v.o. de paracetamol. Cada grupo tinha seu respectivo controle (G1C, G2C, G3C, G4C). Um grupo controle negativo (CN) recebeu salina por 10 dias e veículo no 11° dia e um grupo controle positivo (CP) recebeu salina por 10 dias e 800 mg/kg de paracetamol v.o. no 11°dia. Após 4 h de tratamento com paracetamol, os ratos foram sacrificados e os fígados retirados para as determinações de glutationa reduzida (GSH), substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), carbonilação a proteínas, índice de dano ao DNA, além da determinação da atividade de algumas enzimas antioxidantes: superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx) e glutationa S-transferase (GST). Para avaliar a possível proteção do carvedilol contra a injúria causada pela associação de LPS e GAL, camundongos Swiss machos (30 ± 5 g) foram divididos em 4 grupos (n=6 cada grupo): um grupo que foi pré-tratado com carvedilol, vo (G4C-3,6mg/kg ) por 20 dias e no 21º dia recebeu LPS (0,3 mg/kg) e GAL (1 mg/kg), ip; um grupo controle de tratamento (G4C-3,6mg/kg ); um grupo controle negativo (CN) que recebeu salina vo por 20 dias e no 21º dia recebeu salina, ip e um grupo controle positivo que recebeu salina por 20 dias e no 21º dia recebeu LPS (0,3 mg/kg) e GAL (1 mg/kg), ip. Após 5 h da administração de LPS e GAL, os camundongos foram sacrificados e os fígados retirados para a determinação dos níveis de GSH e TBARS, o índice de dano ao DNA e a atividade da caspase-3. Relativamente ao tratamento com paracetamol, uma dose excessiva deste fármaco causou um aumento significativo no índice de peroxidação lipídica, no dano ao DNA e na atividade da SOD, quando comparado ao CN. O carvedilol foi capaz de prevenir a peroxidação lipídica e o dano ao DNA causados pelo paracetamol, além de normalizar a atividade da SOD, sem, entretanto, evitar a depleção de GSH. Em relação ao tratamento com LPS e GAL, o mesmo não foi efetivo em causar apoptose. Entretanto, quando foi feito um pré-tratamento com carvedilol e posteriormente o tratamento com LPS e GAL, ocorreu um aumento da peroxidação lipídica e da atividade da caspase-3 e depleção de GSH, apesar do pré-tratamento com carvedilol ser capaz de diminuir o dano ao DNA causado por esta associação. Estes resultados demonstram que o carvedilol foi capaz de proteger o fígado de ratos contra a injúria causada por espécies reativas de oxigênio geradas por uma dose excessiva de paracetamol. Possivelmente este efeito se deva a capacidade "scavenger" de O2·- do fármaco. Entretanto, o pré-tratamento com carvedilol demonstrou potencializar os efeitos tóxicos da associação de LPS e GAL no fígado de camundongos, possivelmente por aumentar os efeitos vasodilatores da LPS.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-21T03:10:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 190909.pdf: 332052 bytes, checksum: 891f570ad6e72998d32b1ab815510fd3 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar o tipo de morte celular (apoptose ou necrose) induzida por glutamato em fatias de hipocampo de ratos e o possível papel neuroprotetor do GMP. Para tanto, avaliou-se a viabilidade celular (redução do MTT), a liberação de LDH, a fragmentação de DNA, a liberação do citocromo c e o envolvimento da via das MAPK (ERK 1/2 e p38MAPK). Glutamato 1 e 10 mM promoveram redução da viabilidade celular sem liberação de LDH, induziram liberação do citocromo c, fragmentação de DNA e inibição da via da ERK 2 e p38MAPK, sugerindo morte celular por apoptose. Glutamato 10 mM induziu somente fragmentação de DNA. A redução de viabilidade celular induzida por glutamato 1 e 10 mM foi bloqueada por antagonistas ionotrópicos (MK-801 e GAMS), e antagonistas ionotrópicos e metabotrópicos (MK-801, GAMS e M-CPG), respectivamente. GMP 1 mM não alterou a redução de viabilidade celular e a inibição da ERK 2 e p38MAPK induzidas por glutamato. Contudo, GMP protegeu contra a redução de viabilidade celular induzida por NMDA. GMP per se induziu e também aumentou o grau de fragmentação de DNA promovido por glutamato. O aumento da concentração de GMP de 1 para 5 mM reduziu a viabilidade celular. Estes resultados demonstram que glutamato (1 e 10 mM) induz morte celular por apoptose e apontam o GMP como um potencial agente indutor de apoptose em fatias de hipocampo de ratos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-22T06:58:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma desordem maligna resultante da proliferação clonal de células progenitoras linfóides de linhagem T ou B. Conforme os protocolos de tratamento multicentro Berlin-Frankfurt-Münster (BFM), em torno de 80% das crianças diagnosticadas com LLA entram em remissão completa. No entanto, o tratamento de pacientes adultos com LLA, tem demonstrado modestas melhorias nas últimas duas décadas, devido à resistência apresentada pelos linfoblastos leucêmicos à quimioterapia, o que resulta na persistência à doença ou em recaída e, finalmente, causa a morte do paciente. Apenas 40% de pacientes adultos com leucemia linfoblástica aguda (LLA) entram em remissão completa com a terapia de indução hiper-CVAD (hiperciclofosfamida, vincristina, adriamicina, dexametasona). Vários estudos demonstraram que drogas antimicrotúbulos, que afetam a polimerização e despolimerização da tubulina, têm atividade citotóxica na LLA. Em trabalhos anteriores demonstramos que o taxol é citotóxico para células de linhagem linfoblástica leucêmica de origem humana (CEM) e murina (L-1210). Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi investigar o envolvimento da atividade do NF-kB e dos níveis de glutationa na resistência à apoptose induzida por compostos antimicrotúbulos, taxol e vincristina, e comparar a depleção dos níveis de GSH com a atividade da bomba de efluxo MRP, em células de linhagem de leucemia linfoblástica aguda humana. Os resultados demonstraram que tanto o taxol como a vincristina induziram a apoptose de maneira concentração-dependente em células CEM, porém, o taxol foi mais citotóxico do que a vincristina. Além disso, apenas o taxol depletou os níveis de GSH de maneira significante e inibiu a atividade do NF-kB, mesmo quando em associação com a ciclofosfamida. Esses resultados sugerem que o efeito citotóxico do taxol nas células CEM é mais eficaz do que o da vincristina pois, além de ter diminuído os níveis de glutationa intracelular, inibiu a atividade da MRP e impediu o restabelecimento dos níveis normais de GSH, através da inibição da atividade do NF-kB.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:35Z : No. of bitstreams: 1 000848874.pdf: 475629 bytes, checksum: 8f3083521bd5dbb20833e54b2e295e0b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / It has been recently reported that in canine chronic renal failure (CRF) there occurs oxidative stress, and that neutrophil dysfunction is associated with the increase of apoptosis. Among the many uremic toxins found in higher concentrations due to CRF, there is evidence - in humans - that guanidines inhibit the oxidative metabolism of neutrophils, affecting their bactericidal function. In this study, a systematic review of the relationship between guanidine compounds and neutrophils in dogs was undertaken. It was found that the literature on this subject is scarce and conflicting, which prompted this investigation of the relationship between the plasmatic concentration of guanidine, the production of superoxide, and the apoptosis of neutrophils in dogs with CRF. Morever, the effect of the isolated compound guanidine acetic acid (GAA) on the production of superoxide and on neutrophil apoptosis in healthy dogs was investigated in vitro. It was possible to verify that the large increase of plasmatic guanidine observed in dogs with CRF is not associated with the altered oxidative metabolism and the apoptosis of the neutrophils. The GAA inhibited the oxidative metabolism of the neutrophils in healthy dogs without affecting the viability of these cells

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-28. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:18Z : No. of bitstreams: 1 000852681.pdf: 1224340 bytes, checksum: 7e3993edae8f0d4badfed835114ffa9b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Purpose: The aims of this study were to better understand the mechanism of cell death by apoptosis in a glaucoma model (ischemia / reperfusion) and evaluate the role of apoptosis in this model and if treatment with Sildenafil helps prevent apoptosis. Methods: 36 rats, from 4 to 6 months, males, Lewis and weighing ± 350g were divided in 5 groups: control group (6 animals) and for groups with ischemia / reperfusion (7 and 21 days), two groups consisting of ten animals treated with sildenafil and two groups of Five animals treated with placebo. Paracentesis of the anterior chamber with needle 30G coupled to saline (0.9%) was made and maintained for 60 minutes. Intraocular pressure was measured by rebound tonometer (Tonovet®). There was histological, morphometric by hematoxylin and eosin and, immunohistochemical staining and qRT-PCR analysis by Caspase-7, Caspase-6, Caspase-9, Tnf-r2, Fas-l, Bcl-2 and Bax. For statistic analysis we used ANOVA and t-test for morphometric analysis and, for immunohistochemistry and qRT-PCR, Fisher exact test was employed with a statistical significance level of p <0.05 Results: Histology and morphometric analysis, proved more changes in the untreated group compared to the treatment and control group. Analysis of immunohistochemistry and qRT-PCR observed the more significant expression in untreated eyes. Conclusion: Sildenafil apperead to be protective to ganglion cell apoptosis. Cell survival was evident in histology and morphometry. For immunohistochemistry and RT-PCR was observed protective effect in the apoptosis pathways with similar or below expression compared to the control

Made available in DSpace on 2016-01-13T13:27:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-15. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-13T13:33:26Z : No. of bitstreams: 1 000855970.pdf: 2070850 bytes, checksum: c7dff43f36eab281f23e98b357ba20da (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / No contexto da saúde pública nacional, pouco se conhece sobre as particularidades do tratamento com estatinas e os efeitos musculares da associação de exercícios físicos moderados ao tratamento crônico, bem como seus mecanismos. Assim, os objetivos deste estudo foram avaliar as ações do tratamento medicamentoso com estatinas na saúde pública e os efeitos da terapêutica medicamentosa isolada e em associação a um programa de exercícios físicos moderados no tecido muscular. Para tanto, foram obtidas informações sobre o estado de saúde e o tratamento medicamentoso dos prontuários médicos (n=62) de mulheres atendidas em uma unidade básica de saúde (UBS). Posteriormente, as pacientes foram avaliadas quanto ao nível sócio econômico, presença de comorbidades, medicamentos em uso, nível de atividade física, autorrelato de dor muscular, aderência ao tratamento e composição corporal (n=72). Nas etapas subsequentes, foram incluídas somente as pacientes sedentárias e na menopausa (n=61); destas, uma parcela foi submetida à biópsia muscular (n=21) e aos testes de função muscular (n=17). Para exposição ao sedentarismo (n=12) ou à prática de exercício físico (n=13) aeróbio (50 minutos) e resistido (25 minutos), três vezes por semana, durante vinte semanas, foram incluídas as pacientes que não apresentaram fatores de risco para lesão muscular por estatinas. Ao final da intervenção, todas as avaliações foram reaplicadas. Verificou-se que a conduta médica de modificar dose (48,4%) e/ou o tipo (25,4%) de estatinas objetivou adequação do perfil lipídico sem lesar a musculatura. A não aderência das pacientes à prescrição médica foi de 15,5%, ocorrendo prioritariamente em mulheres jovens (p=0,057), com menor frequência de comorbidades (p=0,011) e baixo consumo de medicamentos (p=0,001). As biópsias musculares indicaram padrões de alterações metabólicas (MET) e neurogênicas (NEU) isoladas ou... / In the Brazilian public health context, little is known about the particularities of statin treatment, and the mechanisms implied in skeletal muscle effects due to the association of long-term treatment and moderate physical activity. Thus, the aims of this study were to evaluate the actions for statin treatment in primary care, so as to assess muscle skeletal effects of statin treatment alone and in association with a moderate physical activity program developed in basic healthcare units. So, information collection in clinical reports was conduct in order to obtain health state and medication treatments of female patients (n=62) assisted in a basic healthcare unit (BHU). Identified patients were evaluated for socioeconomic state, comorbidities, medications in use, physical activity practice, self-reported muscle pain, adherence to medication treatment and body composition (n=72). In the following steps, only sedentary and menopause patients were included (n=61); of them, a sample was submitted to muscle biopsies (n=21) and test of muscle fucntion (n=17). For sedentary state (n=12) or aerobic (50 minutes) and resistance (25 minutes) physical exercise practice (n=13), three times per week, during 20 weeks, only free-statin predisposing muscle injury factors patients were included. In the end of intervention period, all parameters were revaluated. Medical attitude of modifying statin doses (48.4%) and/or types (25.4%) aimed lipid profile adequacy without muscle injuries. The frequency of non-adherent patients were 15.5% and mainly occurred in younger females (p=0.057), with less morbidities (p=0.011) and medication consumption (p=0.001). Muscle biopsies indicated patterns of metabolic (MET) and neurogenic (NEU) injuries, that occurred alone or associated, and had influenced the time to reach peak force (NEU > MET+NEU, p=0.01) and the percentage of force loss (NEU < MET+NEU, p=0.01). Adding moderate physical exercise to regular treatment ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-05-02Bitstream added on 2014-06-13T19:12:07Z : No. of bitstreams: 1 pinto_rfp_me_botib.pdf: 235047 bytes, checksum: f66f9dd3e29764cee35ce259fd850b2c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O fator de crescimento fibroblástico (FGF10) atua de forma parácrina no complexo cumulus-oócito, aumentando a expressão de genes relacionados à expansão das células do cumulus e à competência oócitária. Objetivou-se com o presente estudo testar se a adição do FGF10 ao meio de maturação melhora a maturação, diminui as taxas de oócitos apoptóticos e influencia na produção de embriões in vitro e na expressão de genes relacionados à competência e implantação embrionárias (COX2, CDX2 e PLAC8). Em todos os experimentos, oócitos foram obtidos de abatedouro, coletados de vacas adultas e maturados por 22 h em meio TCM 199 suplementado com: 2.5 ng/mL FGF10, 10 ng/mL FGF10, 50 ng/mL FGF10 ou na ausência de FGF10 (grupo controle). No Experimento 1, depois da maturação, os oócitos foram fixados e corados com TUNEL para determinar a porcentagem de oócitos apoptóticos e posteriormente com Hoechst-33342 para avaliação dos diferentes estágios da meiose (metáfase 1, metáfase 2 ou metáfase 2 com extrusão do primeiro corpúsculo polar). No Experimento 2, os oócitos foram fertilizados e cultivados até o estágio de blastocisto inicial. No experimento 3 avaliou-se o efeito da suplementação do FGF10 ao meio de maturação in vitro sobre a expressão dos genes COX2, CDX2 e PLAC8 em embriões bovinos. No experimento 1, os resultados demonstraram que a dose de 2,5 ng/mL FGF10 aumentou a porcentagem de oócitos com extrusão do primeiro corpúsculo polar (36%) quando comparado as doses de 10 ng/mL FGF10 (13%), 50 ng/mL FGF10 (12%) e grupo controle (19%; p≤0.05). Com relação ao número de oócitos apoptóticos, as maiores doses de FGF10 apresentaram menor quantidade de oócitos TUNEL-positivos (10 ng/mL and 50 ng/mL FGF10, 5% e 6%, respectivamente) quando comparados a menor... / Not available